1.

PEMERIKSAAN HEMOGLOBIN
A.METODE SAHLI
Prinsip: Hb asam hematin (oleh HCl) warna as hematin
dibandingkan dengan standar
Tujuan: menetapkan kadar Hb dlm darah
Alat dan Bahan
1. Gelas berwarna sbg standart
2. Tabung hemometer
3. Pengaduk dari gelas
4. Pipet Sahli, pipet Pasteur
5. Kertas saring
eagen: lar HCl !,"#, a$uadest
Prs!dur "
Tab hemometer diisi lar HCl !,"# sampai tanda %
Hisap darah kapiler dng pipet Sahli smpi tanda %! &l
Hapus kelebihan darah dng kertas tisu
'asukan darah kedalam tabung hemometer
(ilas darah dengan larutan HCl didlm tabung
#ara p!$!ri%saan"
Tunggu ) menit pembentukan as* Hematin
Tambah a$uadest sampai warna sama dengan standart ba+a
dalam gr,d
Nilai Nr$al "
-aki.laki: "/ 0 "1 gr,dl
2anita : "% 0 "3 gr,dl
B.METODE #&ANMETH
Tujuan "4ntuk mengetahui kadar haemoglobin
Prinsip "5arah dlm lart mengand KC# dan 6K78e(C#)39 mengubah Hb
methemoglobin :ang akan berikatan dg KC# pigmen stabil
sianmethemoglobin*
Alat dan Bahan "
. Tabung reaksi
. 'ikropipet %! ul
. 5arah ;5T< "!=
. eagen 5rabkin
. Spektro>otometer
Prs!dur "
. Siapkan dua buah tabung reaksi
. Tabung reaksi pertama isi dengan reagen drabkin seban:ak ) ml
((lanko)* Tabung kedua isi dengan reagen drabkin ) ml ditambah sampel
darah ;5T< %! ul (Sampel homogenkan (+ampur)*
. 5iamkan "! menit pada suhu kamar*
. (a+a pada spektro>otometer dengan Pan?ang gelombang )/3, 8aktor
73,@@, program C,>* (a+a absorban sampel terhadap blangko*
Nilai nr$al "
. -aki . laki : "% g,dl . "@ g,dl
. Perempuan : "" g,dl . ") g,dl
'.P!$!ri%saan LED ( Laju Endap Darah )
A.M!td! *!st!r+r!n
PRINSIP " darah dg anti+oagulan, bl didiamkan dlm sh kamar mk eritrosit
akan mengendap pd dasar tabung bag atas tertinggal plasma
Alat " Tabung westergren, Pipet ukur, ak -;5 dan Timer
Bahan " darah dan #a Sitrat 7,1 =
Prs!dur "
(uat pengen+eran :
5arah Aena ",3 ml ( % ml ) B #a Citrat 7,1= !,/ ml ( !,) ml ),Campur
rata
Csap +ampuran darah dg #a Citrat dg pipet westergren sampai garis
!
-etakkan dlm rak -;5 posisi tegak lurus, diamkan " ?am
Periksa tinggi plasma dan bu>>: +oat pd ?am " dan ke %
Ran+! nr$al "
-aki 0 laki : D "! mm,?am
2anita : D %! mm,?am
B.M!td! *intr,!
Prinsip " darah dg anti+oagulan, bl didiamkan dlm sh kamar mk eritrosit
akan mengendap pd dasar tabung bag atas tertinggal plasma
Alat " Tabung westergren, Pipet ukur, ak -;5 dan Timer
Bahan " darah dan #a Sitrat 7,1 =
Prs!dur! "
Sampel :ang digunakan berupa darah ;5T< atau darah <monium.
kalium oksalat* Homogenisasi sampel sebelum diperiksa*
Sampel dimasukkan ke dalam tabung 2introbe menggunakan pipet
Pasteur sampai tanda !* Eagalah sampai ada gelembung atau busa*
-etakkan tabung dengan posisi tegak lurus*
(iarkan tepat " ?am dan +atatlah berapa mm menurunn:a eritrosit*
Har+a Nr$al "
Pria : ! . "! mm,?am
2anita: ! . ") mm,?am
-.P!$!ri%saan h!$at%rit
Prinsip"
5arah dengan antikogulan isotoni+ dalam tabung dipusing selama 7! menit
dengan ke+epatan 7!!! rpm sehingga eritrosit dipadatkan ke+epatan 7!!!
rpm sehingga eritrosit dipadatkan membuat kolom dibagian bawah dan
tabung tinggin:a kolom men+erminkan nilai hematokrit* Cntin:a 5arah
di+entri>uge supa:a eritrosit mengendap*
Alat dan Bahan"
Tabung wintrobe
Tabung mikrokapiler
Senti>uge
5arah
#ara %!rja
A.Ma%r$!td! $!nurut *intr,!
Csilah tabung wintrobe dengan darah oFalat, heparin atau ;5T<
sampai garis tanda "!! diatas*
'asukkan tabung itu kedalam sentri>uge :ang +ukup besar,
pusingkan selama 7! menit pada ke+epatan 7!! rpm*
(a+alah hasil penetapan itu dengan memperhatikan :
2arna plasma diatas : warna kuning, itu dapat dibandingkan dengan
larutan kaliumbi+hkromat dan intensitasn:a disebut dengan satuan*
Satuan 0 satuan sesuai dengan warna kaliumbi+hkromat " : "!*!!!
Tebaln:a lapisan putih diatas sel 0 sel merah :ang tersusun dari
lekosit dan trombosit*
B. Mi%r$!td!
Csilah tabung mikrokapiler :ang khusus dibuat untuk penetapan
mikrohematokrit dengan darah (7,/ tabung)*
Tutuplah u?ung satu dengan n:ala api atau dengan bahan penutup
khusus*
'asukkan tabung kapiler itu kedalam +entri>uge khusus :ang
men+apai ke+epatan besar, :aitu ""*!!!.")*!!! rpm (+entri>uge
mikrohematokrit)*
Pusingkan selama ) menit*
(a+alah nilai hematokrit dengan menggunakan gra>ik atau alat
khusus*
Nilai Nr$al "
-aki 0 laki : /! 0 /1 Aol =
2anita : 7@ 0 /7 Aol =
..HIT/NG 0/MLAH SEL
A.Hitun+ ju$lah l!u%sit
Sa$p!l " darah Aena atau darah kapiler Plus ;5T<
Prinsip " 5arah dien+erkan dengan asam lemak, sel.sel selain lekosit akan
dilisiskan dan darah akan men?adi lebih en+er sehingga lekosit akan lebuh
mudah dihitung* Eumlah lekosit dihitung dibawah mikoroskop*
P!rhitun+an "
Keterangan : # G Eumlah sel :ang ditemukan
H G Holume bilik hitung
P G Pengen+eran
Nilai Nr$al
dewasa pria : / . "" ribu,mmk
dewasa wanita : / . "" ribu,mmk
ba:i : "! .%) ribu,mmk
" tahun: 3 . "1 ribu,mmk
"% tahun : /,) . "7 ribu,mmk
2aktu :ang diperlukan untuk pemeriksaan adalah %! menit
Alat dan Bahan "
"*haemo+:tometer :
bilik hitung
pipet leukosit
pipet eritrosit (untuk menghitung eritrosit)
. pipet leukosit didalamn:a terdapat bola berwarna putih, mempun:ai garis
!,) . ".""
%* 'ikroskop
7*Cell Counter
/*5e+k glass
)*larutan T4K berisi :
I <sam <+etat gla+ial %,)= ") ml
I Gentian Hiolet " ml
I <$uades /@) ml
#ara K!rja "
(ilik hitung di+ari dengan menggunakan mikroskop, +ari kotak
sedang di tempat u?ung bilik hitung
hisap darah dengan pipet leukosit sampai angka " (pengen+eran G
"!F) atau sampai angka ) (pengen+eran G %!F)
hapus darah :ang melekat pada u?ung pipet
kenudian dengan pipet :ang sama hisap larutan truk sampai angka
""
+ampur (ko+ok) se+ara horisontal
buang tetesan pertama
tuangkan dalam bilik hitung :ang telah ditutup dengan ka+a penutup
dan diletakkan di mikroskop
lakukan perhitungan sel leukosit dengan perbesaran ob:ekti> "! atau
/! F*dihitung pada / kotak besar
B.Hitun+ ju$lah !ritrsit
Prinsip " darah dien+erkan dalam larutan :ang isotonis untuk
memudahkan menghitung eritrosit dan men+egah hemolisis*
Alat dan Bahan"
-arutan Ha:em : #atrium sul>at %*) g, #atrium klorid !*) g, 'erkuri
klorid !*%) g, a$uadest "!! ml*
(ahan pemeriksaan :ang dipergunakan adalah darah kapiler, darah
;5T<, darah heparin, atau darah amonium.kalium oksalat*
Pipet eritrosit
Haemo+:tometer
Counter
5e+k glass
#ara K!rja "
5arah dien+erkan dengan laruran pengen+er "!! F atau %!! F
menggunakan pipet eritrosit atau tabung,
ko+ok selama 7 menit supa:a homogen*
-arutan sampel kemudian dimasukkan,diteteskan ke dalam bilik hitung*
Sel.sel eritrosit dihitung di bawah mikroskop dengan perbesaran sedang
(/!F)*
Cara menghitung sel eritrosit adalah :
-etakkan bilik hitung di bawah mikroskop dengan perbesaran lemah ("!F)*
Cari kotak penghitungan :ang berada di tengah* Kotak tersebut terbagi
dalam %) kotak ke+il dan setiap kotak ke+il terbagi men?adi men?adi "3
kotak ke+il.ke+il* Sel eritrosit dihitung dalam ) kotak ke+il, :aitu / kotak di
sudut dan " kotak lagi di tengah* Eumlah eritrosit dihitung dengan rumus :
Hitung eritrosit
G (# , H ) F Pengen+eran
G (# , J) F !*% F !*% F !*" K ) F %!!
G ( # , !*!% ) F %!!
G # F "!*!!!
dimana : #G?umlah sel eritrosit :ang dihitung, HGAolume bilik hitung
Nilai Ruju%an
5ewasa pria : /*)! . 3*)! (F"!L3,mmk)
5ewasa wanita : 7*1! . /*1! (F"!L3,mmk)
(a:i baru lahir : /*7! . 3*7! (F"!L3,mmk)
<nak usia ".7 tahun : 7*3! . )*%! (F"!L3,mmkl)
<nak usia /.) tahun : 7*@! . )*@! (F"!L3,mmk)
<nak usia 3."! tahun : 7*1! . )*1! (F"!L3,mmk)
#.Hitun+ ju$lah tr$,sit 1ara lan+sun+
ALAT DAN BAHAN "
-arutan ;;S ;CK; : natrium sitrat 7,1gM >ormaldehid /!= % mlM
brillian +res:lblue 7! mgM a$uadest ad "!! ml* Harus disaring
sebelum dipakai*
5arah ;5T<
Pipet eritrosit
Haemo+:tometer
Counter
5e+k glas
Prs!dur"
1. Csaplah larutan ;;S ;CK; ke dalam pipet eritrosit samapi
garis tanda N"O dan buanglah lagi +airan itu*
2. Csaplah darah sampai garis tanda N!,)O dan +airan ;;S
;CK; sampai garis tanda N"!"O* Segeralah ko+ok selama 7 menit*
3. Teruskan tindakan seperti menghitung eritrosit dalam kamar
hitung*
4. (iarkan kamar hitung :ang telah terisi dalam sikap datar dalam
+awan petri tertutup selama "! menit agar trombosit mengendap
5. Hitunglah semua trombosit dalam seluruh bidang besar di
tengah.tengah (" mm kuadrat) memakai lensa ob?ekti> besar*
6. Eumlah itu dikalikan %*!!! menghasilkan ?umlah trombosit per
ul darah*
P!rhitun+an
#,"%,)(!,% F !,% F","!) F pengen+eran
Nilai Nr$al "
%!!*!!! 0 )!!*!!! per ml darah
D.Hitun+ 0u$lah Esin2il
Prinsip " larutan eosin akan memberikan warna merah pada granula
eosino>il
ALAT DAN BAHAN "
-arutan ;osin
Pipet leukosit
Haemo+:tometer
Counter
5e+k glas
Prs!dur"
Csaplah larutan eosin ke dalam pipet leukosit sampai garis tanda N"O
dan buanglah lagi +airan itu*
Csaplah darah sampai garis tanda N"O dan +airan eosin sampai garis
tanda N""O* Segeralah ko+ok selama 7 menit*
Teruskan tindakan seperti menghitung eritrosit dalam kamar hitung*
Hitunglah semua sel eosino>il pada semua kotak :ang ada pada bilik
hitung
memakai lensa ob?ekti> perbesaran /!F
P!rhitun+an "
?umlah eosino>il G #,P(" F " F","!) F "!
Nilai Nr$al "
/!."/! sel,mm
7