Anda di halaman 1dari 64

I.

PENDAHULUAN
Perhatian internasional lebih dan lebih fokus pada isu yang berkembang dari
ATS (ATS). Khususnya selama 10 sampai 15 tahun,
penyalahgunaan ATS, melibatkan amfetamin (amfetamin dan metamfetamin) dan
zat dari "ekstasi" kelompok (MDMA, MDA, MDEA, dll), telah menjadi
masalah global. Ada perbedaan regional, tapi hari ini tidak ada negara yang terhindar satu
dari banyak aspek ATS manufaktur, perdagangan atau pelecehan.
Ini situasi baru, yang melibatkan sering baru dan asing ATS, atau kombinasi,
dan tren perdagangan, menyajikan sebuah tantangan baik untuk penegakan hukum nasional
pemerintah dan staf ilmiah laboratorium forensik.
Hari ini, analis harus mampu menganalisis berbagai bahan dan persiapan,
dan menggunakan lebih cepat, metode yang lebih akurat dan lebih spesifik untuk identifikasi
dan analisis dalam rangka mengatasi dengan omset analisis meningkat dan
persyaratan hukum obat nasional kaku. Selain itu, karakter internasional
perdagangan narkoba membutuhkan pertukaran tepat waktu data analitis antara
laboratorium
dan penegak hukum di tingkat nasional, regional dan internasional
tingkat. Untuk alasan ini, Laboratorium dan Ilmiah Bagian UNODC memiliki
sejak awal 1980-an mengejar program harmonisasi dan pembentukan
metode pengujian dianjurkan untuk laboratorium pengujian obat nasional.
Pertemuan konsultatif yang terdiri dari 13 ahli diselenggarakan pada bulan September
1998 di London oleh Laboratorium dan Ilmiah Bagian UNODC bekerja sama
dengan Ilmu Forensik Layanan dari Inggris untuk meninjau metode untuk
identifikasi dan analisis ATS (ATS) dan mereka
analog cincin tersubstitusi dalam materi disita. Panduan ini mencerminkan kesimpulan
dari pertemuan itu, ditinjau dan up-tanggal kembali di tahun 2004/05. Ini menyediakan
praktis
bantuan kepada otoritas nasional dengan menggambarkan metode yang direkomendasikan
untuk digunakan
dalam pengujian obat laboratorium untuk identifikasi dan analisis amphetaminetype
stimulan (ATS) dan analog cincin tersubstitusi mereka.
Panduan ini adalah salah satu dalam serangkaian publikasi yang sama berurusan dengan
identifikasi
dan analisis berbagai kelompok obat di bawah pengawasan internasional. Itu
menggabungkan dan menggantikan manual sebelumnya diterbitkan pada Metode
Direkomendasikan
Pengujian Amphetamine dan Methamphetamine (ST/NAR/9, 1987) dan
Metode yang direkomendasikan untuk Pengujian Gelap Ring-tersubstitusi Amphetamine
Derivatif (ST/NAR/12, 1988).
Manual sekarang dan sebelumnya menyarankan pendekatan yang dapat membantu obat
analis dalam pemilihan metode yang sesuai dengan sampel di bawah pemeriksaan,
meninggalkan ruang juga untuk adaptasi dengan tingkat kecanggihan laboratorium yang
berbeda.
Untuk pertama kalinya dalam seri ini publikasi, manual ini mempunyai
1
2 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
juga dianeksasi dipilih metode divalidasi. Sebagian besar metode yang dijelaskan diterbitkan
dalam literatur ilmiah, dan telah digunakan selama beberapa tahun di reputasi
laboratorium. Dalam mengidentifikasi metode tersebut, pertemuan konsultatif sadar bahwa
sejumlah metode yang diterbitkan lainnya dalam literatur ilmu forensik juga memproduksi
hasil yang dapat diterima.
Manual ini terbatas pada metode analisis untuk ATS. A terpisah
manual tentang teknik analisis lebih umum, dan karakteristik mereka dan praktis
digunakan untuk analisis obat, melengkapi seri ini manual pada direkomendasikan
metode.
II. PENGGUNAAN MANUAL THE
Tidak semua metode yang dijelaskan dalam manual ini perlu diterapkan pada semua sampel
yang dicurigai
terdiri dari atau mengandung amfetamin, metamfetamin atau lainnya ATS.
Pilihan metodologi dan pendekatan analisis mereka tetap dalam
kebijaksanaan analis dan tergantung pada jenis obat yang terlibat, ketersediaan
instrumentasi yang tepat dan bahan referensi serta pada
Tingkat pembuktian secara hukum diterima dalam yurisdiksi di mana analis bekerja.
Meskipun demikian diakui bahwa persyaratan unik dalam yurisdiksi yang berbeda
dapat menentukan praktek yang sebenarnya diikuti oleh laboratorium tertentu, baik
praktek laboratorium (GLP) mensyaratkan bahwa pendekatan analitis untuk membangun
identitas
obat dikendalikan dalam dugaan materi harus, minimal, memerlukan tekad
setidaknya dua parameter berkorelasi. Pemilihan parameter ini
dalam kasus tertentu harus memperhitungkan obat yang terlibat dan
sumber daya laboratorium yang tersedia untuk analis. Bila mungkin, tiga sama sekali
berbeda
teknik analisis harus digunakan, misalnya: tes warna, kromatografi
(Misalnya, TLC, GC atau HPLC) dan spektroskopi (misalnya, IR atau UV). Yg ditulis dgn tanda
penghubung
teknik, seperti GC-MS, dihitung sebagai dua parameter, memberikan informasi yang
dari kedua teknik yang digunakan (yaitu waktu retensi dan karakteristik spektral massa).
Perhatian juga tertarik pada betapa pentingnya ketersediaan obat
analis buku referensi tentang penyalahgunaan obat dan teknik analisis. Selain itu,
must analis kebutuhan terus mengikuti tren saat ini dalam analisis obat, secara konsisten
berikut analitis dan forensik literatur ilmu saat ini. UNODC
membantu laboratorium dalam hal ini dengan menyediakan, atas permintaan, artikel yang
dipilih dari
literatur ilmiah.
Laboratorium dan Ilmiah Bagian UNODC akan menyambut pengamatan pada
isi dan kegunaan dari manual ini. Komentar dan saran
dapat ditujukan kepada:
Laboratorium dan Bagian Ilmiah
Kantor PBB untuk Narkoba dan Kejahatan
Vienna International Centre
P.O. Kotak 500
1400 Wina, Austria
Fax: (43-1) 26060-5967
E-mail: lab@unodc.org
Semua manual, serta pedoman dan publikasi ilmiah-teknis lainnya mungkin
diminta dengan menghubungi alamat di atas.
3

III. KLASIFIKASI / DEFINISI
ATS (ATS) adalah kelompok zat, sebagian besar sintetis
asal, yang secara struktural berasal dari _-phenethylamine (_-PEA, angka I).
ATS umumnya merangsang sistem saraf pusat (SSP). Oleh karena itu, untuk berbagai
derajat, mereka dianggap sebagai prototipe stimulan sistem saraf pusat
dengan potensi toksisitas psikotik bila overdosis atau
disalahgunakan untuk jangka waktu yang lama. ATS dapat menghasilkan satu
atau gejala yang berhubungan dengan dosis lebih, termasuk peningkatan
kewaspadaan dan euforia, peningkatan denyut jantung, tekanan darah,
respirasi dan suhu tubuh. Agitasi,
tremor, hipertensi, kehilangan memori, halusinasi,
episode psikotik, delusi paranoid, dan perilaku kekerasan dapat hasil dari
penyalahgunaan kronis. Penarikan dari dosis tinggi ATS bisa mengakibatkan depresi berat.
ATS secara ilegal diproduksi dalam berbagai persiapan (bubuk, tablet, atau
kapsul), dan mereka dapat disuntikkan, tertelan secara lisan, mendengus, atau merokok.
Modifikasi kimia pada posisi
R1 ke R9 * (gambar II) menghasilkan praktis
jumlah yang tidak terbatas aktif secara farmakologi
senyawa, beberapa di antaranya lebih kuat
stimulan daripada yang lain. Meskipun ada beberapa
kemungkinan modifikasi rantai sisi,
substitusi pada cincin aromatik berkontribusi
paling perbedaan kualitatif substansial
efek farmakologis.
Dalam hal karakteristik struktural, ATS
dapat dibagi menjadi tiga sub-kelompok besar, yang sebagian besar sesuai dengan berikut
pola substitusi pada cincin aromatik:
(A) Tidak ada substitusi pada cincin aromatik (misalnya amfetamin, metamfetamin,
Fenetilin).
(B) methylenedioxy-substitusi pada cincin aromatik (misalnya MDA, MDMA,
MBDB).
(C) pola substitusi lain, biasanya termasuk satu atau lebih alkiloksi
kelompok (mis. 2C-B, STP / DOM).
5
NH2
_
_
R3
R5
R9
R8
R7
R6
N
R2
R1 R4
Gambar I
Gambar II
* Semua substituen lain yang diperlukan untuk menjenuhkan valensi tidak ditampilkan,
karena mereka biasanya
hidrogen (H).
Untuk alasan praktis, panduan ini memberikan data spesifik hanya untuk seleksi
yang paling umum ATS. Secara khusus, itu termasuk ATS di bawah kontrol internasional
dan dipilih ATS di bawah kendali nasional. Analis harus menyadari bahwa
analog lainnya yang terkait erat mungkin ditemui. Dalam kebanyakan kasus, metodologi
disajikan akan berlaku bagi mereka analog juga.
Struktur kimia yang dipilih ATS, bersama dengan nama-nama umum dan
IUPAC nomenklatur, diberikan dalam lampiran I.
6 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
IV. URAIAN SENYAWA MURNI
Disita ATS yang biasa ditemui dalam bentuk garam, khususnya sebagai
hidroklorida, sulfat, fosfat, atau garam bromida. Namun, tidak jarang
di klandestin penyelidikan laboratorium untuk menemukan senyawa-senyawa dalam bentuk
dasar
serta (biasanya cairan berminyak kecoklatan). Garam adalah zat kristal atau bubuk,
yang bervariasi dalam warna dari putih (mirip dengan produk kelas farmasi)
menjadi merah muda, kuning atau coklat. Mereka sering basah dengan bau khas,
karena adanya pelarut dan / atau residu prekursor.
ATS dapat juga ditemukan dalam bentuk tablet. Selain aktif ATS,
tablet sering mengandung adulterants berbeda, agen memotong, warna makanan umum
dan / atau eksipien yang berbeda dan agen mengikat.
Amphetamine: amphetamine terlarang sering ditemui sebagai sulfat
garam dalam bentuk bubuk, dan jarang sebagai tablet. Dasar Amphetamine dapat disita
dalam
laboratorium klandestin, biasanya sebagai cairan berminyak berwarna coklat gelap dengan
karakteristik
bau yang tidak menyenangkan dari 1-fenil-2-propanon (P-2-P) dan / atau residu pelarut.
Metamfetamin: metamfetamin sah diproduksi tersedia dalam berbagai
bentuk, tergantung pada wilayah geografis. Bentuk meliputi bubuk, kristal
(Umumnya dikenal sebagai "Cristal", "Ice" atau "Shabu") dan tablet (umumnya dikenal
sebagai
"Yaba"). Bentuk garam yang paling sering ditemui adalah hidroklorida.
Metilendioksi cincin tersubstitusi ATS: MDMA, MDA, dan MDEA biasanya
ditemukan sebagai tablet yang mungkin atau tidak mungkin salah satu dari logo. Bubuk
hanya
kadang-kadang ditemukan, tetapi biasanya mengandung konsentrasi tinggi zat aktif.
Tablet sering berwarna cerah; mereka sering bervariasi dalam ukuran. Isi obat
biasanya berkisar 40-140 mg. Perbedaan regional dalam isi obat, dan
perubahan dari waktu ke waktu, yang dikenal. Di Eropa, misalnya, isi MDMA rata
dalam ekstasi tablet telah turun menjadi sekitar 60-70 mg (dibandingkan dengan sekitar 100
mg
pada pertengahan 1990-an).
Yang paling sering ditemui bentuk garam dari methylenedioxy-jenis ATS
adalah hidroklorida, tetapi garam fosfat dan bromida juga terlihat
A. stereokimia
Kebanyakan ATS memiliki setidaknya satu pusat kiral dan oleh karena itu dapat ditemukan
sebagai sebuah rasemat
campuran atau enantiomer sebagai individu. * Di pasar gelap, sebagian ATS ditemui
7
* Istilah (d) atau (+), (l) atau (-) dan (d, l) atau () biasanya digunakan untuk menunjuk rotasi
optik
zat kiral. (R) dan (S) sebutan menggambarkan konfigurasi sterik mutlak substituen
di pusat-pusat kiral individu, dan lebih disukai, terutama dalam kasus diastereomer.
8 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
dalam khas stereokimia make-up. Amfetamin, misalnya, dan yang paling ringsubstituted
ATS, biasanya ditemui sebagai rasemat, sementara methamphetamine
sering dianggap sebagai S-, atau dextro, enantiomer (juga dikenal sebagai "es", atau
"Shabu"), di samping rasemat. Analisis isomer optik digambarkan
dalam bab VI.G. di bawah ini.
B. KARAKTERISTIK FISIK
Titik leleh / didih: The mencair dan / atau titik didih yang tersedia untuk
yang paling sering ditemui ATS. Analis harus menyadari, bagaimanapun, bahwa
Data tersebut merujuk pada substansi murni. * Kecuali untuk kemurnian tinggi ATS, seperti
kristal
methamphetamine ("es"), titik leleh karenanya hanya digunakan sebagai
tes dugaan (untuk penggunaan titik leleh untuk diferensiasi isomer,
lihat bab VI.G.1, di bawah).
Kelarutan: The kelarutan yang dipilih ATS dan garamnya disediakan dalam
bagian pada tes anion (lihat hal. 21 di bawah). Selektif re-kristalisasi berdasarkan
perbedaan kelarutan dapat digunakan untuk pemisahan beberapa garam ATS (lihat
Bab VI.F. pada FTIR, di bawah).
Data spektroskopi: spektral Massa (MS), infra merah (IR) dan nuklir magnetik
resonance (NMR) data yang paling umum ATS tersedia di awal
edisi dua manual PBB terkait dengan analisis ATS, yaitu,
"Metode yang disarankan untuk pengujian amphetamine dan methamphetamine"
Metode (ST/NAR/9), dan "Direkomendasikan untuk pengujian terlarang cincin tersubstitusi
derivatif amphetamine "(ST/NAR/12). Data juga dapat diakses di
Laboratorium dan halaman web Seksi Ilmiah.
* Analis juga harus menyadari bahwa titik leleh untuk beberapa ATS juga dapat bervariasi,
tergantung
pada pelarut yang digunakan untuk kristalisasi.
9
V. Gelap ATS INDUSTRI
Pengetahuan tentang rute manufaktur gelap penyalahgunaan obat dapat memainkan penting
peran dalam interpretasi hasil analisis, terutama dalam kasus-kasus di mana
lebih mendalam analisis kotoran dan manufaktur oleh-produk, yang disebut
pengotor profiling studi, dilakukan.
Penggunaan metode sah diperoleh atau diterbitkan ("sastra underground" atau
internet) untuk sintesis, klandestin berpengalaman "kimia", laboratorium yang tidak pantas
peralatan dan kurangnya kontrol kualitas laboratorium sering mengakibatkan tidak murni dan
produk inferior, dan variabilitas dalam kualitas dan potensi. Akibatnya, sah
obat yang diproduksi sering mengandung by-produk dan intermediet berasal
dari bahan yang tidak murni awal, reaksi yang tidak lengkap, dan pemurnian yang tidak
memadai
intermediet dan produk sintetis akhir. Jenis dan jumlah pengotor
hadir dalam sampel ATS terlarang ("profil kenajisan") sangat tergantung pada
metode sintesis, proporsi, sumber dan kemurnian bahan awal,
kondisi reaksi, dan prosedur pemurnian, jika ada.
Ada atau tidak adanya kotoran tertentu (penanda) dapat berguna dalam
menentukan rute sintetis yang digunakan, dan bahan awal (prekursor)
digunakan. Analisis pelarut dapat lebih menambah tubuh informasi, dan dengan demikian dapat
menjadi alat yang berguna untuk ATS perbandingan sampel dan karakterisasi.
Sementara studi pengotor profil bukan subjek ini manual, beberapa
metode yang dijelaskan dapat disesuaikan untuk tujuan tersebut. *
Beberapa rute sintesis untuk ATS dijelaskan dalam literatur dan digunakan oleh
ilegal / produsen klandestin. Paling sering digunakan metode sintetis untuk
pembuatan gelap amphetamine dapat juga diubah untuk menghasilkan metamfetamin
atau cincin tersubstitusi amfetamin. Hal ini paling sering dilakukan dengan mengganti
sumber amina atau sumber cincin aromatik, masing-masing, selama
proses reaksi. Secara umum, ketersediaan prekursor sangat menentukan
pilihan sintesis rute yang digunakan dalam operasi terlarang.
Deskripsi singkat tentang rute sintetis yang paling umum digunakan untuk
amfetamin, metamfetamin dan MDMA disajikan di bawah ini. **
Rute sintesis diklasifikasikan berdasarkan jenis pengurangan yang digunakan dalam
reaksi dan mekanisme pengurangan. Dalam prakteknya, banyak dari reaksi-reaksi tersebut
* Untuk pengenalan umum ke subjek, pembaca disebut manual PBB
"Karakterisasi Obat / kenajisan profil: Latar Belakang dan konsep" (ST/NAR/32/Rev.1, 2001);
untuk
metode yang lebih spesifik dan pendekatan untuk profiling pengotor metamfetamin lihat juga
UNODC
Publikasi Ilmiah dan Teknis No.17 (SCITEC/17), 2000.
** Untuk rincian tambahan, pembaca disebut PBB manual "memproduksi Clandestine
zat di bawah kontrol internasional "(ST/NAR/10/Rev.2, 1998)
10 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
dikenal dengan nama populer seperti "Leuckart" metode, hydriodic asam / fosfor merah,
oxime, Nitrostyrene, Birch atau metode "Emde". Nama-nama populer adalah
berdasarkan kimia yang pertama kali dijelaskan metode, atau reagen karakteristik
atau intermediet penting. Nama-nama populer termasuk bila memungkinkan.
A. Amphetamine Sintesis
Reaksi sentral dari semua metode yang digunakan untuk sintesis amphetamine didasarkan
pada
pengurangan katalitik dari 1-fenil-2-propanon (P-2-P, benzil metil keton, BMK,
phenylacetone) di hadapan amonia atau methylamine. Yang paling populer reduksi
Metode saat ini adalah metode Leuckart (non-logam pengurangan) dan katalitik
reduksi logam (aminasi reduktif, hidrogenasi katalitik atau hidrogenolisis).
Reaksi Leuckart (reduksi non-logam)
Karena kesederhanaannya, yang "Leuckart" reaksi terus menjadi salah satu yang paling
rute sintetis populer digunakan untuk pembuatan gelap amfetamin.
The Leuckart sintesis adalah pengurangan non-logam biasanya dilakukan dalam tiga langkah.
Untuk sintesis amphetamine, campuran P-2-P dan formamida (kadang-kadang
dengan adanya asam format), atau amonium format, dipanaskan sampai kondensasi
hasil reaksi dalam produk setengah jadi N-formylamphetamine. Dalam
Langkah kedua, N-formylamphetamine dihidrolisis biasanya menggunakan asam klorida
(Lihat gambar III). Campuran reaksi kemudian dibasakan, terisolasi, dan (steam) suling.
Pada langkah terakhir, produk diendapkan dari solusi, biasanya
sebagai garam sulfat. Dasar amfetamin adalah cairan berminyak dengan karakteristik
"Amis-amine" bau.
O HN
O
+
H N 2 O
P-2-P formamida N-formylamphetamine
HCOOH
HN
O
N-formylamphetamine
HCl
NH2
amphetamine
Gambar III. Reaksi Leuckart digunakan dalam pembuatan amphetamine terlarang
Gelap ATS memproduksi 11
Metode Leuckart adalah salah satu metode yang paling banyak dipelajari. Beberapa
routespecific
kotoran diidentifikasi dan dijelaskan dalam literatur. Yang paling menonjol
kotoran adalah antara N-formylamphetamine (biasanya dibawa
menjadi produk akhir) dan 4-metil-5-fenil pirimidin. Rute sintetis lainnya
tidak memberikan banyak kotoran tertentu-rute sebagai metode Leuckart.
Aminasi reduktif (pengurangan logam katalitik)
Aminasi reduktif adalah proses reduksi katalitik atau kimia aldehida
dan keton dengan adanya amonia, atau amina primer atau sekunder, sehingga
dalam amina terkait tatanan yang lebih tinggi. Mekanisme reaksi berlangsung melalui
pembentukan imin atau iminium menengah atas reaksi karbonil a
senyawa dengan senyawa amino yang tepat, diikuti dengan reduksi. Perpaduan
amphetamine menggunakan metode aminasi reduktif menggunakan P-2-P dan katalis
pilihan. Metode yang paling sering digunakan dapat dibagi menjadi tiga berbeda
jenis berdasarkan spesies mengurangi:
(A) reduksi katalitik heterogen menggunakan platinum oksida, paladium atau
Nikel Raney
(B) Pembubaran pengurangan logam dengan menggunakan aluminium, seng atau magnesium
amalgam
(C) pengurangan logam hidrida menggunakan lithium aluminium hydride (LiAlH4),
natrium borohidrida (NaBH4) atau, lebih jarang, natrium cyanoborohydride
(NaCNBH3).
Katalitik pengurangan heterogen biasanya dicapai dengan menggunakan campuran
P-2-P dan amonia gas diisi dengan hidrogen dengan adanya katalis yang dipilih.
Paladium pada arang (Pd / C) atau platinum oksida yang paling sering digunakan
katalis, diikuti oleh Raney nikel. Penurunan biasanya dicapai pada tekanan rendah
dan suhu rendah. Pada kesempatan langka, aminations tekanan tinggi dalam tekanan Parr
peralatan reaksi ("tekanan" atau "bom pipa") juga telah ditemukan.
Pembubaran pengurangan logam dengan menggunakan aluminium, seng atau magnesium
amalgam adalah
salah satu yang paling umum digunakan metode aminasi reduktif. Yang paling populer
Prosedur menggunakan amalgam aluminium-merkuri (Al-Hg). Mekanisme amalgam
pengurangan hasil melalui pengurangan basis adisi Schiff dari P-2-P dan
amina yang sesuai. Dalam kondisi klandestin mentah, metode ini menggunakan
aluminium foil atau grit, dan klorida merkuri (HgCl2).
Kotoran yang paling khas dari aminations reduktif adalah Schiff basa,
didalilkan sebagai yang dibentuk oleh kondensasi dari P-2-P dan amfetamin, namun
mereka tidak spesifik kotoran-rute dan mungkin ada dalam setiap sintetis
Prosedur yang melibatkan P-2-P. P-2-P dan senyawa jenis imina dapat juga ditemukan
sebagai kotoran. Kotoran anorganik yang timbul dari penggunaan katalis tertentu
dapat berfungsi sebagai penanda.
12 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Lainnya, lebih sering digunakan metode aminasi reduktif termasuk logam
pengurangan hidrida, seperti "nitropropane" rute dan "oxime" rute, bernama
setelah intermediet karakteristik (fenil-nitropropene dan oxime, masing-masing),
yang terbentuk selama reaksi.
The oxime rute adalah reaksi dari P-2-P dengan hidroksilamin. The oxime menengah
selanjutnya dihidrogenasi untuk menghasilkan amfetamin. Sebuah oxime menengah
biasanya dihidrolisis oleh pengurangan logam dengan menggunakan Pd/H2, atau dengan hidrida
logam
reduksi menggunakan LiAlH4.
The nitropropene rute melibatkan kondensasi benzaldehida dengan
nitroethane, yang menghasilkan 1-fenil-2-nitropropene. Hidrogenasi selanjutnya dari
ikatan ganda dan pengurangan nitro-kelompok menghasilkan amfetamin. Itu
fase reduksi biasanya diselesaikan dengan menggunakan Pd/H2 atau LiAlH4.
B. Metamfetamin SINTESIS
Methamphetamine dapat juga disintesis menggunakan metode di atas dengan mengganti
ammonia dengan metil.
Namun, rute sintetik methamphetamine paling populer mempekerjakan
ephedrine atau pseudoephedrine sebagai prekursor bukannya P-2-P. Reaksi yang
biasanya dilakukan oleh salah satu reaksi berikut (lihat gambar IV):
(A) pengurangan non-logam seperti "hydriodic asam-red fosfor"
metode,
(B) melarutkan pengurangan logam seperti "Birch" pengurangan, atau
(C) reduksi katalitik heterogen menggunakan thionylchloride dan paladium atau
platinum oksida sebagai katalis (metode "Emde").
efedrin atau
pseudoephedrine
NH3
methamphetamine
Li atau logam Na
efedrin atau
pseudoephedrine
HI
methamphetamine
P (red)
Hydriodic fosfor rute asam-merah (Nagai rute)
Pembubaran pengurangan logam (pengurangan Birch)
NH
OH
NH
NH
OH
NH
Gambar IV. Rute umum untuk pembuatan metamfetamin ilegal
Gelap ATS memproduksi 13
Reaksi lain, seperti "nitropropene" atau "oxime" rute, jarang
ditemui.
Efedrin dan pseudoefedrin yang banyak tersedia di batuk farmasi
persiapan, banyak yang tersedia over-the-counter. Ramuan Cina
Ma-huang, yang ditemui di sejumlah suplemen makanan dan gaya hidup
produk merupakan salah satu sumber tersebut prekursor.
Tidak seperti P-2-P, efedrin dan pseudoefedrin adalah zat kiral. Mereka adalah
diastereomer, dan ada dalam dua bentuk enansiomer, masing-masing (d-dan l-efedrin, dan
d-dan l-pseudoephedrine), di samping dua rasemat. Analisis kiral
efedrin atau pseudoefedrin isomer juga dapat membantu dalam penentuan
proses pembuatan metamfetamin terlarang.
Semua metode manufaktur mulai dari l-efedrin atau d-pseudoefedrin
menghasilkan (+) - (S)-methamphetamine sebagai isomer optik tunggal, yang setidaknya
dua kali lebih kuat sebagai campuran rasemat dihasilkan oleh reaksi mulai dari P-2-P.
Hydriodic fosfor rute asam-red: ini biasanya dilakukan dengan pemanasan
ephedrine atau pseudoephedrine dengan fosfor merah dan asam hydriodic. Itu
Campuran reaksi kemudian disaring, dibasakan dan diekstraksi ke dalam pelarut. Hasil dari paket
tersebut
dasar metamfetamin adalah cairan berminyak, sering disebut sebagai "meth minyak".
Garam hidroklorida dikristalisasi dari ini cair menggunakan eter / aseton dan
asam klorida. Atau, gas hidrogen klorida (dari silinder, sebuah
larutan berair, atau dihasilkan dengan menggunakan asam sulfat dan natrium klorida) adalah
digelembungkan melalui minyak meth menyebabkan garam hidroklorida untuk mengendap dari
solusi.
Hl dan merah fosfor dapat digantikan oleh yodium dan asam hypophosphoric
(Sodium hypophosphate), atau dengan air dan yodium. Pada kesempatan langka, reaksi
campuran, kadang-kadang dikenal sebagai "sapi-darah", yang digunakan tanpa pemurnian lebih
lanjut,
kebanyakan oleh injeksi. Campuran berwarna merah, disebabkan oleh kelebihan yodium,
berisi "meth minyak" dan kotoran yang berbeda terkait dengan Hl / red P rute.
Kotoran khas ditemukan dalam sampel yang dihasilkan oleh pengurangan melibatkan Hl / red
P atau yodium / asam hypophosphoric adalah efedrin atau pseudoefedrin, Aziridine
dan dimethylnaphthalenes. Aziridine tidak dapat dianggap sebagai rute-spesifik
kotoran karena mereka dapat juga diproduksi dari chloroephedrine oleh halogen
eliminasi dan penutupan cincin (metode Emde), atau dari oksim menengah dan
N-hydroxymethamphetamine.
efedrin atau
pseudoephedrine
SOCl2, atau
chloroephedrine
POCl3
Katalitik pengurangan heterogen (Emde rute)
methamphetamine
NH Pd/H2
OH
NH NH
Cl
Gambar IV. (Lanjutan)
14 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Pengurangan Birch: ini hasil melalui pengurangan logam melarutkan efedrin
atau pseudoefedrin dengan adanya amonia. Reaksi ini melibatkan pencampuran
ephedrine atau pseudoephedrine dengan gas amonia anhidrat dan natrium atau
logam lithium. Campuran itu kemudian dibiarkan sampai amonia memiliki
menguap. Isolasi minyak meth dilakukan dengan ekstraksi pelarut langsung
dan filtrasi. Produk reaksi selanjutnya dimurnikan dengan pembentukan hidroklorida
garam dan re-kristalisasi. Dalam praktek terlarang, pengurangan Birch biasanya
diselesaikan dalam reaksi satu langkah menggunakan banyak tersedia amonia, dan lithium
strip dari baterai. Meskipun demikian, pengurangan Birch biasanya menghasilkan sangat
"bersih"
produk akhir. Beberapa kotoran tertentu-rute seperti N-metil-1-(1 - (1,4-cyclohexadienyl)) -
2-propanamine dilaporkan dalam literatur. Reaksi yang melibatkan
amonia anhidrat berbahaya dan ledakan di laboratorium klandestin yang
tidak biasa.
Metode Emde: efedrin atau pseudoefedrin biasanya bereaksi dengan tionil
klorida untuk memberikan chloroephedrine menengah, yang kemudian dihidrogenasi lebih
platinum atau paladium katalis untuk menghasilkan metamfetamin. Dalam GC berbasis analitis
skema, yang chloroephedrine menengah jarang ditemukan sebagai pengotor,
karena terurai selama analisis untuk membentuk Aziridine. Chloroephedrine juga
terurai cepat selama ekstraksi dasar methamphetamine

SINTESIS RING-digantikan ATS
Yang paling sering ditemui methylenedioxy-jenis ATS adalah MDMA, dan
kadang-kadang MDEA dan MDA. Secara umum, rute sintesis yang digunakan untuk MDMA
berlaku, dengan sedikit modifikasi, dengan lain methylenedioxy-tersubstitusi
analog.
Prekursor utama yang digunakan untuk sintesis tersebut adalah 3,4-methylenedioxyphenyl-2-
propanon (juga dikenal sebagai 3,4-MDP-2-P, 3,4-metilendioksi-phenylacetone,
piperonil methyl ketone, atau PMK). 3,4-MDP-2P adalah tersedia secara komersial,
prekursor dikontrol secara internasional.
MDMA juga dapat synthetised dari safrole (3,4-methylenedioxyallylbenzene),
baik secara langsung, atau melalui isosafrol diperoleh dengan isomerisasi safrol. Safrol
sendiri tersedia secara komersial, atau dapat diekstraksi dari minyak sassafras dan lainnya
-safrole kaya minyak esensial atau bagian tanaman. Piperonal (heliotropin, 3,4-
methylenedioxybenzaldehyde),
bahan kimia industri yang digunakan secara luas, adalah alternatif lain
prekursor untuk sintesis 3,4-MDP-2-P.
Metode yang paling langsung untuk sintesis MDMA adalah melalui aminasi reduktif
3,4-MDP-2-P dengan metilamina dan gas hidrogen melalui katalis platinum (catalytic
pengurangan logam). Penurunan ini juga dapat dicapai dengan melarutkan logam
pengurangan menggunakan aluminium amalgam (aluminium foil dan merkuri klorida), atau
dengan reduksi hidrida logam dengan menggunakan natrium cyanoborohydride (lihat gambar V).
Mengganti ethylamine untuk metilamina menghasilkan MDE; gas amonia
menghasilkan MDA, sementara dimetilamin menghasilkan MDDMA.
Gelap ATS memproduksi 15
Analog dengan pembuatan amfetamin terlarang, metode yang umum digunakan dalam
pembuatan gelap MDMA adalah metode Leuckart. 3,4-MDP-2-P dan N-methylformamide
dikurangi dengan menggunakan asam format. Yang dihasilkan antara N-formil-
MDMA yang dihidrolisis oleh refluks dengan asam kuat atau basa untuk menghasilkan MDMA.
Metode nitropropene telah menjadi populer sejak awal 1990-an. Itu
melibatkan reaksi piperonal dengan nitroethane dengan adanya katalis dasar,
biasanya n-butylamine. Berbagai prosedur untuk produksi intermediate
fenil-nitropropene dilaporkan dalam literatur, tetapi biasanya campuran
dari piperonal dan nitroethane hanya didiamkan selama beberapa hari dalam gelap.
Atau, piperonal dan nitroethane yang direfluks dalam asam asetat dan ammonium
asetat.
The intermediet yang terbentuk dalam reaksi ini sangat khas dalam penampilan
dan biasanya mengendap dari larutan reaksi sebagai kristal kuning cerah.
Untuk menghasilkan MDA, intermediate biasanya berkurang dengan aluminium lithium
hidrida. Untuk sintesis MDMA, MDEA atau lainnya ATS, nitropropene yang
menengah diubah menjadi 3,4-MDP-2-P, yang kemudian dikurangi dengan salah satu
metode aminasi reduktif dijelaskan sebelumnya. The nitropropene / Nitrostyrene
intermediet adalah zat kristal oranye kuning cerah atau terang.
MDMA juga biasa diproduksi dengan menggunakan apa yang disebut "bromosafrole"
rute. Reaksi berlangsung melalui brominasi dari safrole dengan asam bromida di
suhu rendah, diikuti dengan pengobatan dengan metilamina untuk membentuk produk akhir.
Hasil akan tergantung pada kadar air dari campuran reaksi.
Pergantian metilamina dengan amina lainnya menghasilkan berbeda MDMA-jenis
produk (misalnya, MDA, MDEA, atau MDDMA).
Methoxyamphetamine-jenis obat biasanya disintesis menggunakan sesuai
aldehida dan nitroethane cincin tersubstitusi, sedangkan untuk mescaline, 2C-B, dan
phenethylamines cincin tersubstitusi lainnya, nitromethane digunakan.
+
H2/Pt,
Al / Hg, atau
NaCNBH
3,4-MDP-2-P methylamine imina
MDMA
O
O
O
O
O
N
CH3
H N 2
O
O
N
3
Gambar V. aminasi reduktif digunakan dalam pembuatan MDMA terlarang
16 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
2C-B diproduksi dengan mereaksikan 2,5-dimethoxybenzaldehyde dan nitromethane,
diikuti dengan pengurangan LiAlH4 untuk membentuk 2,5-dimethoxyphenethylamine.
2,5-dimethoxyphenethylamine kemudian brominated untuk membentuk produk akhir.
VI. Kualitatif dan Kuantitatif
ANALISIS ATS
Secara umum, dalam upaya untuk menentukan identitas obat dikendalikan dalam dugaan
material, pendekatan analitis harus memerlukan penentuan di
setidaknya dua parameter berkorelasi. Hal ini diakui bahwa pemilihan ini
parameter dalam kasus tertentu akan mempertimbangkan obat yang terlibat
dan sumber daya laboratorium yang tersedia untuk analis. Hal ini juga menerima bahwa
persyaratan unik dalam yurisdiksi yang berbeda dapat menentukan praktek-praktek yang
sebenarnya
diikuti oleh laboratorium tertentu.
A. TES dugaan
Tes presumtif yang cepat prosedur penyaringan yang biasanya terdiri dari dua atau tiga
tes independen. Mereka dirancang untuk memberikan indikasi kehadiran atau
tidak adanya kelas obat dalam sampel uji dan cepat menghilangkan sampel negatif.
Teknik uji dugaan yang baik, karena semua teknik analisis, memaksimalkan
probabilitas dari "benar" hasil, dan meminimalkan kemungkinan positif palsu.
Namun, tes presumtif tidak dianggap cukup untuk identifikasi obat
dan hasil harus dikonfirmasi dengan tes laboratorium tambahan.
Dalam beberapa kali, tes presumtif lebih sering digunakan sebagai uji lapangan, meskipun
mereka juga dilakukan di laboratorium sebagai prosedur penyaringan pertama. Untuk ATS
skrining, tes warna, atau tes spot, biasanya digunakan, meskipun immunoassay
tes dan sejumlah teknik instrumental cepat dan portabel juga tersedia.
Metode skrining Instrumental seperti spektrofotometer mobilitas ion (ion-scan),
spektrometer massa portabel, FTIR atau Raman spektrometer, baru-baru ini telah mendapatkan
popularitas. Banyak alat tes komersial untuk skrining ATS yang tersedia, bagaimanapun,
mereka harus dievaluasi "di rumah" untuk spesifisitas dan sensitivitas.
1. TES WARNA
Tes Warna biasanya tes kimia sederhana dan tercepat yang seorang analis
dapat diterapkan pada sampel. Kebanyakan tes warna sangat sensitif; dengan demikian, hanya
menit
jumlah sampel yang diperlukan untuk menyelesaikan tes yang sukses, dan sering
17
18 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Hasil terbaik diperoleh dengan terkecil dari jumlah sampel, sering kurang
dari satu mg.
Karena sampel dapat bervariasi dalam kemurnian (konsentrasi ATS), dan zat-zat yang tidak terkait
mungkin ada, warna yang ditunjukkan oleh tes ini harus ditafsirkan
dengan hati-hati. Selain itu, aspek subjektif dari evaluasi warna harus selalu
diingat.
Teknik uji Warna
Beberapa reagen yang berbeda biasanya digunakan untuk pengujian warna amphetamine
ketik zat dan cincin tersubstitusi analog mereka. Yang paling penting
tes warna untuk zat ini Marquis, Simon dan uji Chen. Itu
Uji Marquis memungkinkan perbedaan antara amphetamine dan cincin tersubstitusi nya
analog. Tes Simon umumnya digunakan sebagai tes untuk amina sekunder, seperti
methamphetamine dan amfetamin cincin tersubstitusi sekunder, termasuk
MDMA dan MDE. Namun, amina sekunder lainnya, misalnya, dietilamina
dan piperidin, dapat memberikan warna yang sama. Secara umum, warna yang intens namun
mungkin
cepat memudar di hadapan beberapa kotoran. Untuk alasan ini, adalah penting
untuk analis untuk mengkonfirmasi hasil tes Simon dengan melakukan tes tambahan,
misalnya, tes Marquis. Tes Chen digunakan untuk membedakan efedrin, pseudoefedrin,
norephedrine, fenilpropanolamin dan methcathinone dari
amphetamine dan methamphetamine, yang tidak bereaksi dengan Chen tes reagen.
Tes keempat, uji asam galat, menyediakan cara sederhana untuk perbedaan
MDMA, MDA dan MDEA dari amfetamin atau metamfetamin,
karena bereaksi secara khusus dengan senyawa aromatik methylenedioxy-diganti.
Prekursor berisi methylenedioxy-substruktur, seperti safrole
dan isosafrol juga bereaksi.
Metode
Persiapan reagen dijelaskan dalam lampiran II. Reagen harus disiapkan
baru.
Uji Marquis
_ Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari
bahan yang dicurigai dalam depresi di piring spot.
_ Tambahkan satu tetes Marquis Reagent 1, maka satu tetes reagen 2, dan
aduk.
_ Amati warna campuran.
Tes Simon
_ Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari
bahan yang dicurigai dalam depresi di piring spot.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 19
_ Tambahkan satu tetes Simon Reagen 1 dan aduk.
_ Tambahkan satu tetes Simon Reagen 2, dan kemudian satu tetes reagen 3.
_ Amati warna campuran.
Tes Chen
_ Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari
bahan yang dicurigai dalam depresi di piring spot.
_ Tambahkan 2 tetes Chen Reagen 1.
_ Tambahkan 2 tetes Chen Reagen 2, kemudian tambahkan 2 tetes Reagen 3 dan aduk.
_ Amati warna campuran.
Tes asam galat
_ Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari
bahan yang dicurigai dalam tabung reaksi kecil.
_ Tambahkan satu tetes Gallic acid Reagent.
_ Amati warna campuran.
Hasil
Tabel 1 memberikan hasil tiga tes warna utama yang paling umum
ditemui ATS dan analog cincin tersubstitusi mereka.
Karena tes asam galat terutama digunakan untuk mengidentifikasi, secara umum,
metilen-dioxy substituen cincin dan tidak ATS individu dengan sub-struktur,
hasilnya tidak disertakan secara terpisah, untuk zat individu, dalam tabel. Cerah
warna hijau tua menunjukkan adanya MDA, MDMA, MDE, N-hidroksi-
MDA atau MMDA. Dalam beberapa kasus, misalnya, MDE dan N-hidroksi-MDA, hijau
warna dapat berubah menjadi coklat selama tes.
Tabel hasil uji 1. Warna
Senyawa Marquis reagent Simon reagen Chen reagen
Amphetamine Orange, perlahan NR * NR *
menjadi coklat
Cathinone NR NR * Secara bertahap berubah menjadi
kuning atau oranye
Dimethylamphetamine Jeruk NR * NR *
Ephedrine Pseudoephedrine NR NR * Purple
N-Ethylamphetamine Kuning, menjadi coklat
Metamfetamin Orange, perlahan Jauh NR biru *
menjadi coklat
Methcathinone NR sedikit biru, spot-atau bertahap berubah menjadi
cincin seperti endapan oranye kuning atau
Norephedrine NR NR Purple
2C-B Kuning -> NR green * NR *
2C-T-2 Cahaya pink, orange NR *
2C-T-7 NR NR *
20 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Tabel 1. (Lanjutan)
Senyawa Marquis reagent Simon reagen Chen reagen
DMA green -> NR hijau tua *
DOB Yellow -> NR green * NR *
DOET kuning coklat NR *
KUTU Dark blue / black
MBDB Dark blue / biru hitam NR Jauh *
MDA Dark blue / NR hitam * NR *
MDDM Dark blue / black
MDEA Dark blue / black (Jauh) biru -> NR *
coklat
MDMA Dark blue / biru hitam NR Jauh *
MDOH Dark blue / black
MMDA Purple NR * NR *
4-MTA NR NR *
PMA NR -> NR hijau muda *
STP / DOM Yellow NR * NR *
TMA Jeruk NR *
Catatan: NR = tidak ada reaksi
* Warna reagen harus dianggap sebagai negatif.
Catatan analitis
(A) ATS spesifik
Karena ATS, analog terutama cincin tersubstitusi dan methamphetamine di Tenggara
Asia, yang sering ditemui dalam bentuk tablet berwarna cerah, hasil
tes warna dapat bertopeng, atau perubahan hasil tes warna dapat terjadi.
Meskipun berbagai macam warna yang digunakan untuk produksi tablet ATS, sebagian
warna yang larut dalam air, dan kelarutan mereka dapat dimanipulasi dengan mengubah
pH larutan. Dalam kasus tersebut, oleh karena itu, analis harus menyesuaikan ekstraksi
prosedur dan menghilangkan warna sama sekali sebelum melanjutkan ke tes warna itu sendiri.
Dalam kasus, ketika tes warna tidak dapat ditafsirkan dengan jelas karena kehadiran tablet
pewarna, prosedur berikut akan sering menghasilkan hasil yang diterima:
Tempatkan sejumlah kecil (sekitar 10 mg) dari sampel ke dalam tabung reaksi kecil.
Menambahkan sekitar 1 ml metanol (atau 1 ml 4:1 campuran metanol: metilen
klorida). Setelah penyaringan melalui glass wool, menguap sampai kering. Menyusun kembali
itu
sampel dalam jumlah minimum air, dan kemudian dilanjutkan dengan uji warna dengan hati-hati
menyetorkan larutan sampel air di piring spot dan menambahkan warna reagen.
Karena sampel yang sudah diencerkan, 3 tetes reagen per satu tetes larutan sampel
akan cukup.
Kehadiran pengencer dan adulterants juga dapat mengganggu reaksi warna dan menghasilkan
dalam hasil tes negatif palsu. Sedangkan uji Simon dapat menyebabkan hasil negatif palsu ketika
adulterants atau pengencer yang hadir dalam sampel ATS, tes Marquis kurang sensitif
sampel tercemar dan, oleh karena itu, lebih baik ketika konsentrasi ATS di
sampel sangat rendah.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 21
(B) Umum
Warna-warna yang dijelaskan adalah penilaian subjektif karena persepsi individu
warna. Karena itu, aspek subjektif dari evaluasi warna, untuk itu diperlukan
setiap analis untuk menguji standar referensi yang tepat untuk memastikan bahwa ia
dapat mengenali setiap hasil uji warna. Demikian pula, disarankan untuk melakukan kosong
menguji tanpa substansi sasaran untuk memastikan keakraban dengan warna reagen.
Ketika preformed dengan benar, tes warna negatif umumnya cukup dapat diandalkan dalam
membangun
tidak adanya senyawa target; Namun, hasil positif hanya dugaan
indikasi kemungkinan adanya suatu senyawa. Banyak lainnya
senyawa, sering tidak berbahaya dan tidak terkendali oleh undang-undang nasional atau
internasional
perjanjian, dapat memberikan warna yang sama dengan tes reagen warna yang diberikan.
Oleh karena itu, wajib bagi analis untuk mengkonfirmasi tes warna positif untuk setiap
dikendalikan senyawa secara hukum dengan menggunakan tes laboratorium tambahan.
Untuk menghilangkan kemungkinan hasil positif palsu karena tempat yang terkontaminasi
piring, mungkin menguntungkan untuk menempatkan reagen ke piring spot, dan kemudian
menambahkan
sejumlah kecil sampel untuk reagen.
Bacaan lebih lanjut
PBB (1995). Metode pengujian cepat penyalahgunaan obat, Manual untuk digunakan oleh nasional
aparat penegak hukum dan narkotika laboratorium (ST/NAR/13/Rev.1)
S. A. Johns, A. A. Tidakkah dan A. R. Najam (1979). Tes Spot: referensi bagan warna untuk
ahli kimia forensik, J. Forensik Sci., vol. 24, hlm 631-649.
E. Jungreis (1985), analisis uji Spot, Klinik, lingkungan, forensik dan geokimia
aplikasi, John Wiley & Sons, New York-Chichester-Brisbane-Toronto-Singapura.
AC Moffat, MD Osselton dan B. Widdop (eds.) (2004), Analisis Clarke Obat
dan Racun, 3rd ed., Pharmaceutical Press, London-Chicago.
C.L. O'Neil et al. (2000), Validasi dua belas tes tempat bahan kimia untuk mendeteksi
penyalahgunaan obat, Forensik Sci. Int., Vol. 109, hlm 189-201.
RAVelapoldi dan SA Wicks (1974), Penggunaan alat tes tempat kimia untuk dugaan tersebut
identifikasi narkotika dan penyalahgunaan obat, J. Forensik Sci., vol. 19, hlm 636-654.
2. TES ANION
Pengujian anion untuk tujuan forensik biasanya memanfaatkan kelarutan gabungan
dengan reaksi yang dipilih di mana hasil ditentukan oleh ada atau tidak adanya,
dan kelarutan, dari endapan.
Kelarutan ATS berbeda dan garamnya dalam air dan beberapa umum
sistem pelarut dijelaskan di bawah ini.
22 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Amphetamine dan garamnya
Basis Hidroklorida Phosphate Sulphate
Air terlarut larut larut larut
Metanol atau etanol larut larut terlarut terlarut
Dietil eter larut larut larut larut
Kloroform Larut larut larut larut
Methamphetamine dan garamnya
Basis Hidroklorida
Air terlarut larut
Metanol atau etanol larut larut
Dietil eter larut larut
Kloroform larut larut
Ring-tersubstitusi ATS dan garamnya
Basis bebas dari cincin tersubstitusi ATS umumnya tidak larut dalam air dan larut dalam etanol,
dietil
eter, kloroform dan pelarut organik lainnya. Garam hidroklorida mereka larut dalam air dan
etanol,
sedikit larut dalam kloroform, dan tidak larut dalam dietil eter. Kelarutan zat individu
kelompok ini tergantung pada ATS cincin tersubstitusi tertentu yang dimaksud.
Metode
Semua reagen harus disiapkan sesuai dengan prosedur yang ditetapkan. Rincian
persiapan reagen dijelaskan dalam lampiran II.
Uji perak nitrat
Sampel ATS diketahui dilarutkan dalam beberapa tetes air deionisasi dan
diobati dengan 1-2 tetes larutan AgNO3. Hasil untuk anion umum adalah
tercantum di bawah ini. Karena anion lain juga dapat memberikan hasil yang sama, tes
tambahan
atau sosialisasi keterbatasan pengujian harus dilakukan.
Chloride: Bentuknya yang dadih endapan putih yang tidak larut dalam nitrat pekat
asam. Setelah mencuci dengan air, endapan larut dalam larutan amonia encer,
dari mana dapat kembali dipicu oleh penambahan asam nitrat.
Bromida: Bentuk kuning pucat krim berwarna endapan yang tidak larut dalam
asam nitrat. Setelah mencuci dengan air, endapan sangat lambat larut dalam encer
solusi amonia dan larut dalam larutan amonia pekat. Hal ini dapat reprecipitated
dari kedua solusi dengan penambahan asam nitrat.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 23
Iodida: Bentuk endapan kuning cerah yang sedikit larut dalam terkonsentrasi
larutan amonia tetapi larut dalam larutan tiosulfat.
Sulfat: Bentuk lampu berwarna kristal endapan yang dapat dengan mudah diidentifikasi
dengan menempatkan solusi pengujian pada slide mikroskop dan mencari
karakteristik "diamond" berbentuk kristal perak sulfat.
Fosfat: Bentuk endapan kuning muda, yang larut dalam amonia encer
solusi, atau asam nitrat dingin.
Untuk sulfat dan fosfat garam, tes khusus tambahan dapat dilakukan:
Uji garam sulfat
Yang tidak diketahui sampel ATS (sekitar 100 mg) dilarutkan dalam air dan diperlakukan
dengan
larutan barium klorida. Sebuah endapan putih, yang tidak larut dalam asam klorida
acid, menunjukkan adanya garam sulfat.
Uji garam fosfat
Yang tidak diketahui sampel ATS (sekitar 100 mg) dilarutkan dalam larutan yang terbuat
dari
volume yang sama (misalnya, 1ml masing-masing) larutan asam nitrat (10% v / v) dan
larutan amonium molibdat (10% b / v). Dengan pemanasan lembut, pembentukan
terang kenari kuning endapan, yang larut dalam larutan amonia, menunjukkan
kehadiran garam fosfat.
Catatan analitis
Karena semua tes anion dilakukan dalam larutan air, air-kelarutan
Garam ATS merupakan pra-kondisi untuk hasil yang berarti.
Mencuci endapan dengan air sebelum melakukan tes untuk pembubaran
endapan sangat penting untuk menghilangkan larut (non-diendapkan) anion.
Bacaan lebih lanjut
McKibben, T., Chappell, JS, Evans, H., Mausolf, N., Analisis Komponen Anorganik
Ditemukan di Clandestine Laboratory Obat Bukti, J. Cland. Lab. Berinvestasi. Chem. Ass., 5 (4),
1995, 19-33.
3. TES mikrokristal
Tes Microcrystal tes cepat, sederhana, dan sangat sensitif untuk identifikasi
zat dan isomer optik mereka. Mereka melibatkan pembentukan kristal
dari reaksi senyawa target dengan pereaksi kimia, diikuti
24 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
dengan analisis kristal yang dihasilkan dengan menggunakan mikroskop polarisasi dan
dibandingkan dengan bahan referensi, biasanya foto kristal dikenal.
Metode
Bentuk paling sederhana dari tes terdiri dari penambahan setetes pereaksi sesuai dengan
tes substansi, diikuti dengan mengamati dan menganalisis kristal yang terbentuk di bawah
mikroskop polarisasi.
Dalam rangka mempertahankan catatan yang akurat, fitur karakteristik kristal
harus dijelaskan. Rekor paling akurat dari hasil tes adalah dengan foto.
Jika foto tidak tersedia sketsa bentuk kristal sangat membantu.
Metode dan rincian prosedur untuk tes microcystal dari ATS dijelaskan
dalam bab VI.G.2. Istilah deskriptif untuk bentuk kristal dan foto kristal
ATS besar serta instrumen dan peralatan persyaratan dasar diberikan
dalam lampiran III.
Bacaan lebih lanjut
Cunningham, M. D. (1973). Teknik cepat dan sensitif untuk diferensiasi optik
bentuk isomer metamfetamin dan amfetamin, mikrogram, vol. 6, No 6, hal 87-95.
Fulton, C. C. (1969). Tes Microcrystal Modern Obat. Wiley-Interscience, Divisi A
John Wiley & Sons, New York-London-Sydney-Toronto.
Ono, M., Microcrystal Test, Jepang, 1996. (Memberikan pengenalan yang komprehensif untuk
Teknik tes mikrokristal, dan termasuk foto-foto hasil uji mikrokristal dari 39
ATS dan prekursor mereka).
B. KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (TLC) *
TLC telah menjadi salah satu teknik yang paling umum digunakan untuk pemisahan
dan identifikasi obat sah diproduksi. Hal ini cepat (analisis jarang
lebih lama dari tiga puluh menit), sensitif (sub-miligram kuantitas analit
diperlukan), sangat fleksibel dalam fase gerak baik stasioner dan, dan
sehingga bisa menerima berbagai macam zat, di dasar dan garam bentuk, mulai dari
paling polar dengan bahan non-polar yang paling. Hal ini juga setuju untuk varietas
teknik visualisasi, dan itu adalah murah.
Meskipun keuntungan nyata dari TLC, di banyak negara, tidak diterima
sebagai suatu teknik untuk identifikasi obat.
* Untuk lebih sistem TLC standar, lihat: Thin-layer nilai Rf kromatografi toksikologi
zat yang relevan pada sistem standar, kedua, direvisi dan diperbesar edisi, Laporan XVII
Komisi DFG untuk analisis klinis-toksikologi, edisi khusus dari TIAFT Bulletin, VCH
Verlagsgesellschaft mbH, 1992.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 25
Pelat TLC (fase stasioner)
Coating: gel G Silica dengan ketebalan lapisan 0,25 mm, dan mengandung lembam
indikator, yang berfluoresensi di bawah sinar UV panjang gelombang 254 nm
Catatan: Pelat disiapkan oleh analis harus diaktifkan sebelum digunakan dengan menempatkan
mereka ke dalam oven untuk
setidaknya 10 sampai 30 menit pada suhu 120 C. Pelat kemudian disimpan dalam desikator
lemak bebas silika biru
gel. Aktivasi panas biasanya tidak diperlukan untuk lapisan ikatan kimia (piring komersial).
Ukuran piring yang khas: 20x20 cm, 20x10 cm, 10x5 cm (pelat 10x5 cm harus
digunakan dengan sisi 10 cm vertikal di tangki TLC)
Sistem pelarut (fase gerak)
Sistem A: Methanol 100
Konsentrat amonia 1.5
Sistem B: Ethyl acetate 85
Methanol 10
Konsentrat amonia 5
Sistem C: Cyclohexane 75
Toluene 15
Diethylamine 10
Metode
Metode yang direkomendasikan dan hasil yang dipilih yang disediakan di bawah, tapi
tetap
tanggung jawab analis untuk membiasakan dia / dirinya sendiri dengan hasil yang spesifik
individu ATS.
Sistem pelarut
Siapkan mengembangkan sistem pelarut seakurat mungkin dengan menggunakan pipet
dan mengukur silinder. Biarkan sistem pelarut dalam tangki TLC untuk sementara waktu
cukup untuk memungkinkan saturasi fasa uap yang akan dicapai sebelum analisis
(Dengan tangki kertas berlapis adsorben, ini memakan waktu sekitar 5 menit).
Persiapan standar ATS dan solusi sampel
Bentuk standar dan sampel, garam atau dasar, tidak penting. Entah bentuk akan
memuaskan. Karena sifat dasar pelarut berkembang,
senyawa bermigrasi dasar sebagaimana gratis.
ATS solusi standar: solusi Standar ATS harus disiapkan pada konsentrasi
sekitar 2 mg / ml dalam metanol. Mereka harus disimpan dalam gelap
dan tempat yang dingin.
26 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Solusi sampel ATS (ATS sampel tidak diketahui): solusi Sampel harus disiapkan
pada konsentrasi sekitar 5mg/ml dalam metanol. Dalam kasus-kasus, di mana
kemurnian ATS diduga menjadi sangat rendah karena pemalsuan, mungkin diperlukan
untuk mempersiapkan solusi sampel lebih terkonsentrasi (sepuluh kali lebih terkonsentrasi
solusi yang disarankan sebagai titik awal).
Untuk sampel ATS dalam bentuk selain bubuk, solusi sampel harus
disiapkan sebagai berikut:
Tablet: Grind sejumlah perwakilan dari tablet (setelah pengambilan sampel umum
rencana) sampai menjadi bubuk halus dan menyiapkan solusi untuk sebagai bubuk.
Kapsul: Keluarkan isi dari sampel yang representatif dari kapsul (berikut
rencana pengambilan sampel umum) dan mempersiapkan solusi seperti untuk bubuk.
Larutan encer: Spot langsung, atau setara 5mg/ml, jika konsentrasi
dari ATS dikenal.
Bercak dan mengembangkan
Tempatkan kedua 1 _L dan tempat 5 _L larutan sampel, bersama-sama dengan 2 _L dari
larutan standar (s) ke pelat TLC (lebih disukai, juga tempat pelarut sebagai negatif
Kontrol harus diterapkan ke piring). Spotting harus dilakukan dengan hati-hati,
tanpa merusak permukaan piring itu.
Titik awal yang dijalankan, yaitu, "garis bercak," harus 2 cm dari
bagian bawah piring. Jarak antara aplikasi sampel (bercak
poin) harus minimal 1 cm, dan bintik-bintik tidak harus ditempatkan lebih dekat dari 1,5
cm
ke tepi sisi piring. Untuk menghindari noda menyebar selama pengembangan, ukuran
dari sampel tempat harus sekecil mungkin (_ 2 mm).
Biarkan tempat kering, dan tempat piring ke pelarut jenuh TLC tank (saturasi
dari fasa uap dicapai dengan menggunakan bantalan pelarut jenuh atau kertas saring
sebagai lapisan tangki). Lepaskan piring dari tangki pembangunan segera setelah
pelarut mencapai garis pembangunan ditandai sebelumnya; jika tidak, bintik-bintik
menyebar
akan terjadi.
Visualisasi / deteksi
Pelat harus dikeringkan sebelum visualisasi: Pelarut dapat dibiarkan menguap
pada suhu kamar, atau dihapus dengan blower udara panas. Jika udara panas yang
digunakan,
perawatan harus dilakukan karena volatilitas dasar gratis ATS. Hal ini penting
untuk pengembangan warna yang tepat bahwa semua jejak amonia dihapus dari
piring.
Berikut ini adalah pemilihan metode visualisasi. Berdasarkan hasil
tes dugaan, diantisipasi ATS harus ditargetkan menggunakan salah satu atau kombinasi
metode dan reagen berikut:
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 27
Metode / Visualisasi reagen analit Target dan hasil
A. sinar UV pada 254 nm metode Universal. Banyak zat, termasuk ATS, memberikan
bintik-bintik ungu di piring dinyatakan hijau neon

B. Ninhydrin reagen Banyak amina primer dan sekunder dilampirkan ke
atom karbon alifatik, seperti amphetamine dan
methamphetamine, mengakibatkan violet atau bintik-bintik merah muda.
C. diasamkan kalium Sensitif reagen umum. Kebanyakan primer dan sekunder
amina reagen iodoplatinate memberikan tempat biru muda.
D. Fast Black K primer dan amina sekunder memberikan tempat yang berbeda-beda di
warna dari violet (amina primer) ke oranye atau
oranye-merah (amina sekunder).
E. Marquis Perbedaan antara reagen tersubstitusi dan cincin tersubstitusi
ATS
F. Fluorescamine reagen (Fluram) reagen Sensitif untuk amina primer. Direkomendasikan
untuk
deteksi konsentrasi rendah amina primer.
G. Simon reagen reagen umum untuk amina sekunder (efedrin dan
pseudoephedrine tidak bereaksi)
H. Dragendorff ragent reagen umum untuk alkaloid dan basa nitrogen
Key:
Metode / Visualisasi reagen
A. sinar UV
Amati pelat dikeringkan di bawah sinar UV pada 254nm dan 366nm.
B. Ninhydrin reagen
Siapkan larutan 10% dalam etanol.
Semprot piring dengan reagen ninhidrin dan panas dalam oven pada suhu 120 C selama
minimal 15 menit.
Violet atau pink spot diberikan oleh amina primer seperti amphetamine dan amina sekunder
seperti methamphetamine. Efedrin juga menghasilkan tempat violet.
C. diasamkan kalium iodoplatinate reagen
Larutkan 0.25g platinic klorida dan 5g kalium iodida dalam air dan membuat hingga 100 ml.
Tambahkan 2 ml asam klorida pekat.
Semprot piring dengan larutan kalium iodoplatinate diasamkan dan mengamati bintik-bintik
berwarna
Amphetamine dan methamphetamine memberikan kotor abu-abu ungu-coklat-bintik pada
latar belakang merah muda.
Solusi ini juga dapat digunakan untuk pelat overspray yang sebelumnya telah disemprot
dengan
ninhidrin.
D. Fast Black K
Solusi: Siapkan larutan 1% dari Cepat garam Hitam K dalam air [2,5-Dimethoxy-4-((4-
nitrophenyl)
azo) benzena diazonium tetrachlorozincate (2:1)]
Solusi B: 1N NaOH
Semprot piring dengan larutan A dan mengamati bintik-bintik berwarna. Amina sekunder
seperti
methamphetamine dan MDMA menghasilkan bintik-bintik segera. Tercecer dengan larutan B
menghasilkan
bintik-bintik berwarna untuk amphetamine dan lainnya cincin tersubstitusi ATS. Air kering
piring dan
semprot sekali lagi dengan larutan A. ini memproduksi lebih intens bintik-bintik berwarna.
Warna
bervariasi dari ungu untuk amina primer ke oranye atau oranye-merah untuk amina sekunder
seperti
methamphetamine dan MDMA.
E. Marquis reagent
Tambahkan 8-10 tetes larutan formaldehida 40% sampai 10 ml asam sulfat pekat.
Mempersiapkan
segar sebelum setiap penggunaan.
28 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Penyemprotan dengan Marquis reagent tidak dianjurkan karena asam sulfat pekat
terlibat. Namun, memberikan informasi tambahan yang berguna untuk membedakan antara
ATS,
misalnya, setelah deteksi dengan ninhidrin. Untuk itu, drop reagen Marquis dengan
Pasteur pipet pada tempat yang sudah terdeteksi.
F. Fluorescamine reagen (Fluram)
Larutkan 10 mg fluorescamine dalam 50 ml aseton. Siapkan harian
Semprot piring dengan reagen fluorescamine. Air keringkan dengan blower udara panas.
Amati
piring di bawah sinar UV pada 366 nm. Amphetamine memberikan kuning neon titik terang.
Methamphetamine tidak terdeteksi. (Untuk stabilisasi pada 366 nm, semprot dengan larutan
10% v / v
dari trietylamine dalam diklorometana).
G. Simon reagen
Larutkan 100 mg sodium nitroprusside dan 2 g natrium karbonat dalam 10 ml air (yaitu,
larutan air yang mengandung natrium nitroprusside pada konsentrasi 1%, dan natrium
karbonat
pada 20%). Siapkan reagen baru sebelum digunakan.
Semprot piring dengan reagen Simon. Tempatkan piring dalam tangki kosong berkembang
bersama
dengan gelas yang berisi asetaldehida. Tutup tangki. Uap asetaldehida akan menyebabkan
methamphetamine tempat untuk menjadi warna biru intens. (Metode ini dimodifikasi
meningkatkan
sensitivitas untuk methamphetamine 0,1 _G (LOD). Amina primer tidak dapat dideteksi,
karena
sensitivitas rendah sistem untuk kelompok zat, dan gangguan pada latar belakang
warna ketika amonia digunakan dalam pelarut berkembang.)
H. Dragendorff reagen
Larutan stok: Larutkan 0,85 g bismut subnitrate (dasar) dalam 10 ml asam asetat. Encerkan
dengan 50 ml
dengan air dan tambahkan 8 g kalium iodida dalam 20 ml air
Semprot piring dengan larutan yang dibuat dari 1 ml larutan stok Dragendorff, 2 ml asetat
asam dan 10 ml air. Warna bervariasi dari oranye ke ungu.
Interpretasi
Setelah visualisasi, menandai tempat (misalnya, dengan pensil), dan menghitung faktor
retardasi (Rf) nilai-nilai:
Jarak migrasi: dari asal ke pusat zona analit (spot)
Rf =
Pengembangan jarak: dari asal pelarut depan
Hal ini sangat umum untuk mengekspresikan faktor retensi sebagai Rf x 100, disebut sebagai
HRF.
Hasil
Bandingkan warna dan nilai-nilai Rf sampel ATS diketahui dengan orang-orang dari
standar acuan ATS otentik yang dijalankan secara bersamaan di piring yang sama.
Nilai Rf untuk beberapa yang paling umum ATS diberikan dalam Tabel 2.
Tabel 2. Nilai Rf sering ditemui ATS dan adulterants
TLC sistem *
Nama ATS A B C
Amphetamine 0.48 (0.43) ** 0.37 (0.43) (0.20)
Cathinone 0.66 0.56
DOB 0.37 0.32 (0.13)
DOET 0.36 0.32 (0.24)
DMA 0.37 0.33 (0.19)
N-Ethylamphetamine 0,47 0,37 (0,47)
Methamphetamine 0.35 (0.31) 0.22 (0.42) (0.28)
MDA 0,36 (0,39) 0,33 (0.42) (0.18)
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 29
TLC sistem *
Nama ATS A B C
MDMA 0.31 (0.33) 0.21 (0.39) (0.24)
MMDA 0.40 0.31
PMA 0.41 (0.73) 0.33 (0.43) (0.23)
STP / DOM 0.35 (0.51) 0.31 (0.41) (0.15)
TMA 0.35 0.20
Ephedrine (0.30) (0.25) (0.05)
Kafein (0.52) (0.52) (0.03)
* Sistem Solvent: A, B atau C; Pelat TLC: gel G Silica dengan ketebalan lapisan 0,25 mm
Sebuah sistem: Methanol: terkonsentrasi amonia (100:1.5)
Sistem B: asetat Etil: Methanol: amonia terkonsentrasi (85:10:5)
Sistem C: Cyclohexane: Toluena: Diethylamine (75:15:10)
** Nilai Rf dalam kurung telah diperoleh dengan menggunakan pelat silika diresapi dengan
metanol KOH (0,1 mol / l).
Catatan analitis
Karena perubahan kecil dalam komposisi pelat TLC dan aktivasi, dalam sistem pelarut, tangki
saturasi atau pengembangan jarak dapat mengakibatkan perubahan signifikan dalam nilai-nilai
Rf, yang
nilai yang diberikan hanya harus dipertimbangkan sebagai indikasi kromatografi yang
perilaku ATS dan adulterants terdaftar. Adalah penting bahwa standar referensi ATS
dijalankan secara bersamaan di piring yang sama. Atau, reproducibility dapat secara signifikan
ditingkatkan dengan menggunakan senyawa referensi dan dikoreksi nilai Rf (Rf
c).
Untuk tujuan identifikasi, baik nilai Rf dan warna bercak setelah penyemprotan
dengan reagen visualisasi yang berbeda harus selalu dipertimbangkan.
Bacaan lebih lanjut
Fried dan J. Sherma (Eds.), Praktis Kromatografi Thin-Layer, A Multidisiplin
Pendekatan, Boca Raton Press, 1995.
Jork et al., Thin-Layer Chromatography, Reagen dan Deteksi Metode, Weinheim,
VCH, vol. 1 (1990), vol. 2 (1992).
Neumann, H. (1987). Nachweis und Identifizierung von Phenylethylaminen (Stimulantien
und Halluzinogene), Sci. Pharm., Vol. 55, 1-11.
Ojanpera, I., Wahala, K., dan Hase, TA (1990). Cepat garam Hitam K: a lapis tipis serbaguna
kromatografi visualisasi reagen untuk diferensiasi amina alifatik, Analis,
vol. 115, hlm 263-267.
Stead, AH, Gill, R., Wright, T., Gibbs, JP, Moffat, AC (1982), thinlayer Standar
sistem kromatografi untuk identifikasi obat dan racun, Analis, vol. 107,
hlm 1106-1168.
30 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
C. KROMATOGRAFI GAS (GC)-ionisasi nyala
DETECTOR (FID)
Untuk analisis GC dari ATS, prinsip-prinsip umum dari teknik berlaku. Hari ini,
instrumen GC pilihan untuk pekerjaan analitis rutin adalah lubang sempit
gas chromatograph kapiler, menggunakan kolom kapiler dengan diameter internal
antara 0,2 dan 0,32 mm.
Hal ini diakui bahwa ada laboratorium, yang untuk berbagai alasan,
mungkin ingin mempertahankan sistem dikemas kolom. Bagi laboratorium, metode
menggunakan kolom dikemas digambarkan dalam edisi awal dari manual ini. GC
prosedur memanfaatkan kolom megabore kapiler (0,53 mm diameter internal)
merupakan sarana untuk memperbaiki menyelesaikan daya dibandingkan dengan kolom
dikemas,
dan lebih kuat daripada bore kapiler sistem kolom sempit. Lama GC
sistem yang dirancang untuk kolom dikemas dapat dikonversi untuk digunakan dengan
kolom megabore.
Metode
1. ANALISIS KUALITATIF
Persiapan standar ATS dan solusi sampel
Larutan standar ATS: beratnya sekitar 25 mg garam ATS standar (s) * dari
bunga ke dalam labu volumetrik 25 ml dan membuat sampai tanda dengan air. Pipet
sebuah aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam 10 ml gelas tutup tabung.
Tambahkan drop-bijaksana larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Kemudian tambahkan
5 ml
penggalian pelarut **.
Stopper dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan
biarkan
berdiri sampai lapisan terpisah. *** Dengan menggunakan pipet tetes, mentransfer lapisan
pelarut
(Misalnya, kloroform) melalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.
Inject 1-2 _L lapisan pelarut ke dalam GC.
Solusi sampel ATS (unknown sample ATS): berat 25-150 mg sampel,
tergantung pada kemurnian diantisipasi, untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar
* Kadang-kadang, standar ATS dapat diperoleh dalam bentuk dasar. Dalam kasus tersebut,
ekstraksi tidak
diperlukan. Secara umum, bagaimanapun, adalah penting bahwa bentuk standar dan sampel
akan selalu
sama.
** Semua analit harus benar-benar larut dalam pelarut ekstraksi. Ekstraksi pelarut harus
akan bercampur dengan lapisan berair. Pelarut yang sesuai meliputi n-heksana, kloroform,
metilen klorida
atau butil asetat.
Ketika *** kloroform digunakan sebagai pelarut pengekstrak, emulsi dapat membentuk. Dalam
kasus tersebut, selain
NaCl meningkatkan tingkat ekstraksi dengan melanggar emulsi. Jika shaker modern digunakan
dan
Campuran kemudian disentrifugasi untuk pemisahan dari dua lapisan, pembentukan emulsi
biasanya tidak
tidak terjadi.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 31
1 mg / ml garam analit, ke dalam labu ukur 25 ml dan make up ke
menandai dengan air. Kemurnian sampel diantisipasi ditentukan secara empiris. *
Pipet suatu aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam gelas 10 ml tutup
tabung reaksi. Tambahkan drop-bijaksana larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Lalu
tambahkan 5 ml pelarut ekstraksi (misalnya, kloroform).
Stopper dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan
biarkan
berdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, mentransfer lapisan pelarut
melalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.
Inject 1-2 _L lapisan pelarut ke dalam GC.
Jika sampel throughput cepat diperlukan, sampel dapat diambil secara langsung
dalam etanol / amonia berair (99:1), dan disuntikkan ke kromatografi gas.
Dengan menggunakan metode ini, kondisi injektor dan kolom dapat memburuk
lebih cepat dibandingkan dengan sampel diekstraksi (Catatan: Metode ini tidak cocok untuk
analisis kuantitatif karena sulit untuk menghasilkan kromatografi baik di
keberadaan amonia).
Kondisi operasi GC
Detector: FID (atau NPD, jika tersedia / diinginkan)
Kolom: DB-5 (5% fenil 95% dimetil),
DB-1 (100% dimetil-polisiloksan), atau setara
Panjang: 10-30 m, ID 0,20-0,53 mm
Ketebalan Film: 0,10-0,50 _m
Gas pembawa: ** Nitrogen, helium atau hidrogen, pada kira-kira.
0.8ml/min. (N2) atau 1-1,2 ml / menit. (Dia atau H2)
Rasio Split: 20:1 hingga 50:1
Suhu kolom: suhu awal harus cukup rendah
(Misalnya, 60-90 C) untuk memperhitungkan volatilitas tinggi
ATS basa, misalnya:. 60 C, tahan selama 0,5 menit,
sampai 280 C, dengan laju 12 C / menit., tahan akhir
suhu selama 30 menit.
Suhu Injector: 210-250 C
Detektor suhu: 310 C
Hasil
Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi analit
dengan standar referensi. Urutan elusi adalah sebagai berikut:
* Penentuan kemurnian sampel dapat dilakukan berdasarkan pengalaman apotek, atau
menggunakan berikut
Metode kasar: Ambil 100 mg sampel dan larut dalam 2-3 ml kloroform. Filter solusi,
mengumpulkan Insolubles, kering dan berat. Jumlah larut (misalnya, berat aslinya dikurangi
kering
Insolubles) adalah kemurnian sampel diantisipasi. Namun, perlu diketahui bahwa metode ini
dapat mengakibatkan lebih rendah
dari sampel kemurnian diantisipasi sebenarnya untuk garam yang tidak larut dalam kloroform
(lihat bab VI.A.2,
pada "tes anion", di atas).
** Aliran gas tergantung pada kolom ID; pemrograman gradien tekanan dapat digunakan jika
tersedia.
32 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
amphetamine <methamphetamine <pseudoephedrine <efedrin <PMA <
PMMA <MDA <MDMA <4-MTA <MDEA <MBDB <2C-B.
Di bawah kondisi yang dijelaskan, kafein dan ketamin, yang sering
ditemukan dalam sampel ATS di beberapa daerah, terelusi setelah 2C-B.
2. ANALISIS KUANTITATIF
Tiga metode untuk analisis GC-FID kuantitatif ATS disediakan di bawah ini:
Sebuah metode standar tunggal (A) dan dua beberapa metode standar (B dan C).
Metode A dan B tidak memerlukan derivatisasi, sedangkan metode C membutuhkan sililasi.
Semua tiga metode yang dijelaskan di sini untuk penggunaan umum. Lampiran IV
memberikan
contoh metode GC divalidasi untuk kuantisasi dipilih ATS.
Metode A: metode standar Tunggal
Metode A cocok untuk kuantisasi paling ATS. Ini melibatkan persiapan
hanya satu ATS larutan standar dengan konsentrasi yang sama dengan yang diantisipasi
konsentrasi analit.
Pembuatan larutan baku internal (IS): timbang akurat sekitar
25 mg standar yang dipilih intern (misalnya, n-tetradecane atau lainnya
n-alkana dengan bahkan jumlah atom karbon, atau difenilamin) dan melarutkan
dalam 25 ml pelarut pengekstrak (misalnya, kloroform). Jika standar internal
solusi digunakan untuk ekstraksi, konsentrasi sasaran harus disiapkan dalam
rentang instrumen linear (tidak lebih dari 0,5 mg / ml).
Persiapan standar ATS dan solusi sampel *: penyusunan ATS
standar dan solusi sampel harus mengikuti prosedur yang diuraikan di atas untuk
analisis kualitatif, dengan menggunakan larutan standar internal untuk ekstraksi dari kedua
ATS standar dan sampel, sebagai berikut:
(A) ATS solusi standar
Timbang akurat sekitar 25 mg garam ATS standar (s) ** dari bunga menjadi
25 ml volumetrik labu dan membuat sampai tanda dengan air. Akurat pipet
sebuah aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam 10 ml gelas tutup tabung.
Tambahkan drop-bijaksana larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Kemudian
tambahkan 5 ml
larutan baku internal, akurat ditiadakan.
* Standar ATS dan sampel solusi dan konsentrasi mereka dirancang untuk digunakan dengan
kapiler
kolom dan prosedur yang dijelaskan di bawah ini. Penggunaan kolom alternatif dan sistem GC
mungkin memerlukan perubahan baik dari segi komposisi relatif dan konsentrasi masing-
masing komponen.
** Jika standar ATS dalam bentuk dasar yang digunakan, ekstraksi tidak diperlukan. Dalam
kasus tersebut, menimbang
tidak kurang dari sekitar 10 mg standar ATS dan melarutkan langsung dalam 10 ml akurat
dibagikan
larutan standar internal. Untuk kuantisasi akurat, penting bahwa bentuk analit
(Garam atau basa) menjadi sama dengan standar ATS.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 33
Stopper dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan
biarkan
berdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, mentransfer lapisan
pelarut
melalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.
Inject 1-2 _L lapisan pelarut ke dalam GC. Menganalisis larutan standar di
rangkap tiga atau lebih.
(B) ATS solusi sampel (sample diketahui ATS)
Timbang akurat 25-150 mg sampel, tergantung pada kemurnian diantisipasi,
untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar 1 mg / ml garam analit, menjadi 25 ml
volumetrik flask dan membuat sampai tanda dengan air. Sampel diantisipasi
kemurnian ditentukan secara empiris.
Akurat pipet suatu aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam gelas 10 ml
tutup tabung reaksi. Tambahkan drop-bijaksana larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10.
Kemudian tambahkan 5 ml larutan baku internal, akurat ditiadakan.
Stopper dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan
biarkan
berdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, mentransfer lapisan
pelarut
melalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.
Inject 1-2 _L lapisan pelarut ke dalam GC. Menganalisis diketahui ATS
larutan sampel sebaiknya dua kali atau lebih.
Kondisi operasi GC
Sama seperti untuk analisis GC kualitatif (lihat hal. 30).
Perhitungan
Dari beberapa suntikan, menghitung rasio luas puncak rata-rata: (a) relevan
ATS standar standar internal (AST / IS), dan (b) ATS diketahui
standar internal (AATS / IS).
Isi obat persentase sampel dapat dihitung dengan menggunakan umum
rumus:
CST
*
AATS / IS
ATS (%) = 100 *
CATS ast / IS
dimana
ATS (%) = Isi ATS diketahui (sebagai dasar atau garam, lihat catatan kaki **
pada hal. 32) dalam bahan sampel asli (= kemurnian sampel)
CST = Konsentrasi ATS larutan standar (mg / ml), yang telah dipersiapkan
bawah (a), di atas (= berat standar murni ATS per mililiter
pelarut)
CATS = Konsentrasi ATS larutan sampel yang tidak diketahui (mg / ml),
yang telah dipersiapkan di bawah (b), di atas (= berat diketahui ATS
sampel per mililiter pelarut)
34 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
AATS / IS = jumlah kawasan Puncak yang tidak diketahui ATS dibagi dengan luas puncak
tuduhan standar internal (sebaiknya, rata-rata duplikat
penentuan)
Ast / IS jumlah = Luas puncak standar ATS dibagi dengan jumlah luas puncak
dari standar internal (rata-rata penentuan rangkap tiga)
Metode A dapat dimodifikasi dari satu ke metode standar ganda dengan berurutan
menipiskan aliquot dari larutan standar ATS dengan standar internal
solusi dengan menggunakan 10 botol volumetrik ml. Dengan cara itu, ATS konsentrasi standar
dapat disiapkan, menargetkan konsentrasi yang tepat dalam rentang linier
instrumen, dan mencapai beberapa titik kalibrasi.
Metode B: metode Multiple-standar tanpa derivatisasi
Metode di bawah ini adalah metode kalibrasi multi-titik yang direkomendasikan, divalidasi
Metode GC untuk analisis kuantitatif dari ATS, dengan dan tanpa derivatisasi,
diberikan dalam lampiran IV.
Pembuatan larutan baku internal (IS)
Timbang akurat 0,3-0,4 g standar internal yang dipilih (n-tetradecane,
n-alkana lain, difenilamin, atau ATS struktural terkait dalam bentuk dasar) * ke
500 ml labu ukur dan encerkan dengan volume suara dengan kloroform untuk memberikan
internal
larutan standar 0,6-0,8 mg / ml.
Pembuatan larutan standar ATS (solusi kalibrasi GC)
Larutan stok standar harus mengandung semua senyawa yang menarik dalam konsentrasi
sekitar 1000 mg / l. Mereka dapat disimpan dalam botol tertutup di lemari es
sampai satu tahun. Untuk persiapan larutan stok:
(A) akurat beratnya sekitar 1000 mg garam ATS (s) dari bunga
menjadi 1000 ml volumetrik labu dan membuat ke tanda dengan air.
(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam gelas tutup uji 20 ml
tabung. Basify untuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes amonia terkonsentrasi
solusi. Akurat tambahkan 5 ml kloroform.
(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah.
Menggunakan
pipet Pasteur, mentransfer sekitar 1 ml lapisan kloroform
melalui natrium sulfat anhidrat ke dalam gelas kecil. Standar ini
solusi tidak boleh dibiarkan lebih dari setengah jam sebelum digunakan
untuk kalibrasi.
(D) Untuk penyusunan standar kalibrasi untuk 5-titik kalibrasi, siapkan
tingkat yang berbeda seperti yang ditunjukkan dalam tabel berikut:
* Jika standar internal dalam bentuk garam (misalnya garam dari ATS struktural terkait)
digunakan, ekstraksi
diperlukan. Dalam kasus tersebut, berat tidak kurang dari sekitar 10 mg standar ATS dan
melarutkan langsung dalam 10 ml akurat dibagikan larutan standar internal.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 35
Persiapan beberapa standar kalibrasi titik
Kalibrasi ATS standar IS solusi Approx. konsentrasi
solusi tingkat (_L) (_L) CHCl3 (_L) dari ATS-garam (mg / l)
Level 1 20 100 880 20
Level 2 40 100 860 40
Level 3 60 100 840 60
Level 4 80 100 820 80
Tingkat 5 100 100 800 100
Inject, setidaknya dalam rangkap tiga, 1-2 _L dari setiap tingkat ke GC dan menggunakan nilai
rata-rata
untuk pembentukan kurva kalibrasi.
Pembuatan larutan sampel ATS (tidak diketahui sampel ATS)
Secara umum, tetapi khusus untuk analisis kuantitatif, menghomogenkan sampel sebelum
mulai tes atau sub-sampling.
(A) Timbang dengan akurat jumlah sampel yang cukup menjadi volumetrik 25 ml
labu untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar 0,2-1 mg / ml
analit. Buat tanda dengan air. (Jumlah sampel yang akan
ditimbang akan tergantung pada kemurnian diantisipasi, seperti yang ditunjukkan oleh awal
Metode skrining. Sebagai contoh, jika kemurnian diantisipasi adalah
sekitar 40%, jumlah sampel yang digunakan harus approx. 60 mg.)
(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam gelas tutup uji 20 ml
tabung. Basify untuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes amonia terkonsentrasi
solusi. Akurat tambahkan 5 ml kloroform.
(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah.
Menggunakan
pipet Pasteur, mentransfer sekitar 1 ml larutan sampel ini
melalui natrium sulfat anhidrat ke dalam gelas kecil. Ukur 100 _L
larutan sampel, 100 _L larutan standar internal dan 800 _L dari
kloroform ke dalam GC sampel vial.
(D) Inject 1-2 _L ke dalam kromatografi gas. Menganalisis diketahui ATS
larutan sampel sebaiknya dua kali atau lebih.
Kondisi operasi GC
Untuk analisis kuantitatif, GC dilengkapi dengan autosampler adalah lebih baik.
Kondisi pengoperasian mungkin sama seperti untuk analisis kualitatif (lihat hal. 30).
Perhitungan
Isi obat persentase sampel dihitung dari konsentrasi
dari ATS larutan sampel yang tidak diketahui dan nilai-nilai yang sesuai dari kalibrasi
kurva. Dengan GC instrumentasi dan perangkat lunak modern, dan setelah input dengan
operator konsentrasi standar kalibrasi yang berbeda dan
larutan sampel tidak diketahui, kurva kalibrasi akan dibentuk dan perhitungan
akan dilakukan secara otomatis untuk setiap titik sepanjang kurva pada
36 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
penyelesaian jangka analitis. Biasanya, hasilnya kemudian akan dinyatakan sebagai
isi persentase obat yang tidak diketahui dalam bahan sampel asli, yaitu,
sebagai sampel kemurnian (berat analit relatif terhadap berat sampel).
Metode C: metode Multiple-standar dengan derivatisasi
Siapkan diderivatisasi ATS standar dan sampel solusi dengan mengukur sebuah aliquot
(Misalnya, 100 _L) dibebaskan dari basis kering (yaitu, setelah ditransfer sampel atau
solusi standar melalui natrium sulfat anhidrat ke dalam gelas kecil; Langkah (c)
di atas) bersama-sama dengan aliquot dari 100 _L larutan standar internal 750 _L dari
kloroform dan 50 _L dari BSTFA (atau BSTFA + 1% TMCS) menjadi sampel GC botol.
Untuk kalibrasi beberapa titik, mengikuti metode B (lihat tabel di atas berjudul
"Persiapan beberapa standar kalibrasi titik"), menggunakan 50 _L BSTFA di setiap
langkah untuk persiapan larutan standar dan sampel, dan menambahkan kloroform
untuk membuat sampai 1 ml.
D. GAS spektrometri massa kromatografi (GC-MS)
GC-MS adalah salah satu teknik yang paling umum digunakan untuk identifikasi, dan
baru-baru ini juga kuantisasi, sampel obat forensik. Sebagai teknik ditulis dgn tanda
penghubung,
itu menyatukan kekuatan pemisahan dan sensitivitas dari GC-FID dengan analit
spesifisitas teknik spektroskopi, menyediakan spektrum yang sangat spesifik
data senyawa individu dalam campuran kompleks dari senyawa tanpa izin
pemisahan.
Persiapan standar ATS dan solusi sampel
Sampel disiapkan seperti yang dijelaskan dalam metode GC yang diberikan sebelumnya.
Sensitivitas analisis dan kekhususan spektrum massa ATS
ditingkatkan dengan derivatisasi (lihat lampiran VII). Persiapan derivatif sangat
diinginkan ketika spektrum massa molekul underivatized adalah
nilai diagnostik rendah. Kebanyakan underivatized ATS memiliki ion fragmen m rendah / z
rasio, intensitas rendah, dan hanya satu ion fragmen kelimpahan yang lebih tinggi (puncak
dasar).
Derivatisasi dari ATS biasanya menghasilkan ion fragmen rasio m / z lebih tinggi dan
kelimpahan yang lebih tinggi. Ion massa yang tinggi lebih spesifik dan mereka memiliki lebih
besar diagnostik
nilai, karena mereka tidak terpengaruh oleh campur ion latar belakang seperti
kolom berdarah atau kontaminan lainnya.
Serupa dengan analisis GC dijelaskan sebelumnya, jika sampel throughput cepat
diperlukan, sampel dapat diambil langsung dalam etanol / amonia berair (99:1)
dan disuntikkan ke dalam GC-MS. Namun, dalam kasus ini, kondisi injektor
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 37
dan kolom dapat memburuk lebih cepat daripada dengan sampel diekstraksi. Untuk
penggunaan
di GC-MS, sampel amina primer juga dapat diambil langsung dalam karbon
disulfida (CS2), yang menghasilkan pembentukan isothiocyanate, derivatif
yang memberikan spektrum massa lebih karakteristik dari senyawa induk.
Kondisi operasi GC-MS
Kondisi GC oven: sama seperti untuk analisis GC (Kondisi dari
Metode A, B atau C dapat digunakan)
Kolom: sama seperti untuk analisis GC, misalnya:
DB-5 (5% fenil 95% dimetil),
DB-1 (100% dimetil),
0,25 mm x 30 m x 0,25 _m, atau setara
Masuk
Mode: Split / Splitless
Temp: 250 C
Gas pembawa: Helium, 1 ml / menit
Mode: Aliran konstan (atau tekanan konstan)
Detektor
Modus ionisasi: modus EI, 70 eV (mode CI jika diinginkan)
C. Transfer line temp: 280 C
Ion sumber temp: 230 C
Parameter Scan: TIC (SIM jika diperlukan), kisaran scan: 35-450 (untuk
zat seperti 2C-B yang mungkin mulai pada m / z 29)
Hasil
Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi dan spektrum massa
analit dengan standar referensi.
Semua senyawa diidentifikasi oleh GC-MS dan dilaporkan oleh analis harus
dibandingkan dengan spektrum massa saat standar acuan yang tepat, sebaiknya
diperoleh dari instrumen yang sama, dioperasikan di bawah kondisi yang sama.
Ada beberapa referensi perpustakaan spektrum massa komersial yang tersedia.
Dengan sebagian besar
Instrumen GC-MS, banyak dari mereka perpustakaan juga tersedia sebagai pilihan
on-line.
Secara umum, itu adalah, bagaimanapun, penting untuk menggunakan perpustakaan
spektral massa, baik dari
sumber komersial atau user generated, untuk tujuan referensi saja.
Bacaan lebih lanjut
Sebuah sumber literatur tunggal untuk interpretasi spektral massa ATS tidak tersedia tapi
ada
beberapa sumber literatur umum yang baik, yang bersama-sama hadir cukup
komprehensif
data, misalnya:
38 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Karl Pfleger, Hans H. Maurer, Armin Weber (2000), Mass spektral dan GC Data Obat,
Racun, Pestisida, Polutan dan Metabolit mereka: Bagian I-IV, Wiley.
UNODC juga memiliki koleksi terbatas spektrum massa terkait dengan ATS utama.
Koleksi
dapat diakses dari internet atau, atas permintaan, juga dapat dibuat tersedia pada
CD-ROM.
E. KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (HPLC)
Selain GC, HPLC adalah teknik lain pemisahan utama yang biasa digunakan
dalam analisis obat forensik.
Untuk memudahkan persiapan sampel, reproduktifitas terbaik dan pendeteksian,
terbalik
kromatografi fase direkomendasikan untuk analisis ATS dan cincin mereka
tersubstitusi analog. Kolom paling universal dan serbaguna adalah terikat
oktadesil silika kolom (C18). Panjang kolom, diameter, ukuran partikel, ukuran
pori-pori
dan beban karbon harus dipertimbangkan sebelum pemilihan akhir kolom.
Karena ada berbagai macam fase stasioner dan mobile yang tersedia untuk
analis, hanya pedoman disajikan di bawah ini.
Metode
Persiapan standar ATS dan solusi sampel
Larutkan jumlah yang tepat dari standar atau sampel dalam fase gerak, penargetan
konsentrasi komponen aktif antara 0,05-0,50 mg / ml. Contoh
solusi harus disaring sebelum analisis.
Saham dan standar solusi harus disiapkan dari standar referensi.
Standar kerja harus berada dalam rentang linear detektor dan
sekitar 80-120% dari konsentrasi sasaran. Beberapa titik kalibrasi
diinginkan tetapi metode standar tunggal juga diterima.
Kondisi pengoperasian
Detector: detektor Diode array, scanning cepat atau
detektor panjang gelombang variabel, UV 200 -
210 nm (juga menggunakan 280-290 nm untuk methylenedioxy-
phenethylamines diganti)
Fase stasioner: C8 atau C18 dengan 5 ukuran partikel atau _m
lebih kecil
Panjang kolom: _ 30 cm
Diameter Kolom: _ 5,0 mm
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 39
Pre-kolom: Diameter: 2-4 mm, panjang: 25 mm,
fase terbalik C8 atau C18
Suhu kolom: 15-35 C (kontrol suhu
sangat dianjurkan dalam nonthermostated
lingkungan)
Fase gerak penyangga: dapar fosfat pH 2,0-3,2
(Mis. natrium 50 mM monobasa
fosfat disesuaikan dengan fosfat
acid). Untuk tailing puncak, ponsel
fase aditif seperti alkil sulfat
atau alkil sulfonat atau amina mungkin
diperlukan.
Fase gerak modifier organik: metanol atau asetonitril antara 2%
dan 20% (dengan gugus alkil yang lebih tinggi, pada
alkil sulfat atau alkil sulfonat,
konsentrasi organik lebih tinggi mungkin
diperlukan).
Laju alir: 0,1-2,0 ml / menit.
Volume injeksi: 1-100 _L
Pemisahan: Analisis isokratik atau gradien harus
dilakukan, menargetkan waktu retensi dari
kurang dari 30 menit.
Hasil
Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi analit dengan
bahwa standar referensi dan, jika tersedia, dengan menggunakan beberapa panjang
gelombang UV
atau diode array atau deteksi pemindaian UV cepat. Untuk cincin tersubstitusi
analog seperti
sebagai MDA, MDMA, dan MDEA, scan fluoresensi juga bisa digunakan.
Kekhususan
metode ini penting, karena selalu ada kemungkinan bahwa senyawa serupa
mengelusi pada waktu retensi yang sama.
Perintah elusi khas adalah sebagai berikut: norephedrine, efedrin, amfetamin,
methamphetamine, MDA, MDMA dan MDEA. Pemisahan efedrin /
pseudoefedrin dan norephedrine / norpseudoephedrine pasangan bisa sulit, dan
mungkin memerlukan sedikit penyesuaian kondisi HPLC.
Penghitungan:
Kalibrasi standar eksternal atau internal dapat digunakan (standard kalibrasi
eksternal
dianjurkan terutama jika injektor-valve berbasis digunakan dalam pengisian
berlebih yang
mode). Penggunaan luas puncak untuk HPLC kuantitasi dianjurkan, karena
memperluas puncak (penurunan tinggi puncak) dapat terjadi sebagai akibat dari
kerusakan
dari fase diam, rendering tinggi puncak tidak cocok untuk kuantisasi.
40 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Kekhususan deteksi dapat ditingkatkan dengan menggunakan beberapa panjang
gelombang UV
atau deteksi fluoresensi. Sebuah metode HPLC divalidasi untuk kuantisasi ATS adalah
dijelaskan dalam lampiran V.
Bacaan lebih lanjut
Aalberg, L., DeRuiter, J., Noggle, FT, Sippola, E. dan Clark, CR (2000). Kromatografi
dan Mass spektral Metode Identifikasi untuk Side-Rantai dan Ring
Regioisomers dari Methylenedioxymethamphetamine, J. Chromatogr. Sci., Vol. 38, hlm
329 -
337.
Clark, CR, DeRuiter, J., Valer, A. dan Noggle, FT (1995). Gas kromatografi-Mass
Spektrometri dan Analisis kromatografi cair dari Butanamines Designer Terkait
MDMA, J. Chromatogr. Sci., Vol. 33 hlm 328-337.
Lurie, I.S. (1995). Terbalik-Phase High Performance Liquid kromatografi Analisis
Obat Tujuan Forensik, Chap. 4 dalam Analisis Addictive dan disalahgunakan Narkoba,
Adamovics, JA, (Ed.), Marcel Dekker, New York, NY, USA hlm 51-132.
Malone, J. V. (1998). Campuran HPLC Quantication dari sembunyi-sembunyi
Diproduksi dari
Amphetamine dan Methamphetamine, mikrogram, vol. 31, hlm 304-307.
Sadeghipour, F., Giroud, C., Rivier, L., dan Veuthey, J.-L (1997). Penentuan Cepat
Amfetamin oleh High-Performance Liquid Chromatography dengan Deteksi UV,
J. Chromatogr., Vol. 761, hlm 71-78.
Sadeghipour, F., dan Veuthey, J.-L (1997). Penentuan Sensitif dan Selektif
Methylenedioxylated Amfetamin oleh High-Performance Liquid Chromatography
dengan
Fluorimetric Detection, J. Chromatogr., Vol. 787, pp.137-143.
Schneider, R. C, dan Kovar, K. A. (2003). Analisis Ecstasy dengan Monolithic Terbalik-
Tahap Kolom, Chromatographia, vol. 57 hlm 287-291.
F. FOURIER TRANSFORM INFRARED (FTIR) SPEKTROSKOPI
Spektroskopi inframerah secara luas digunakan sebagai kualitatif dan, dalam
beberapa kali,
juga metode kuantitatif untuk penentuan dan analisis struktur ATS.
Analisis FTIR dapat menjadi alat yang sangat berguna untuk penyaringan cepat
ATS
tablet dan bubuk, memberikan indikasi mengenai homogenitas tablet atau
kehadiran batch campuran.
Preparasi sampel
Metode yang disukai untuk persiapan sampel adalah pembubaran sampel dalam
pelarut yang sesuai, atau suspensi dalam mull minyak. Sebuah teknik kurang
diinginkan adalah
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 41
metode halida disc, di mana sampel tersebar ke ditumbuk halus kalium
halida (KBr atau KCl) dan ditekan menjadi disc tipis.
Namun, sebagian besar laboratorium forensik mendukung metode halida disc
untuk dua
alasan: (a) halida kalium adalah IR transparan dalam apa yang disebut daerah
sidik jari
(2000-400 cm-1); dan (b) kalium halida disc umumnya dapat dianalisis ulang
berkali-kali, jika disimpan lebih dari pengering a.
Metode halida disk yang * terdiri dari penggilingan sampel kering dengan sangat
halus
bubuk, kemudian pencampuran sekitar 1 mg bubuk sampel dihomogenisasi dengan
200 mg
hati-hati dikeringkan dan digiling halida alkali. Setelah penggilingan, campuran
ditekan
menjadi tipis, transparan disk.
Kedua KCl dan KBr bekerja sama dengan baik. Namun, KCl sedikit kurang
higroskopis,
dan umumnya direkomendasikan atas KBr, terutama ketika analit adalah
garam hidroklorida (untuk menghilangkan masalah pertukaran halida). Apakah
KBr
atau KCl digunakan, itu harus "IR grade" dan dikeringkan pada 110 C selama
minimal
satu jam. Hal ini dapat disimpan di atas sebuah pengering yang kuat (misalnya,
fosfor pentoksida)
dalam desikator, atau kiri dalam oven dan dihapus pada "sesuai kebutuhan" dasar.
Ini
mungkin penting dalam setiap proses hukum selanjutnya. Selain itu, bahan di
bawah
investigasi dapat dipulihkan dari disk halida untuk pengujian lebih lanjut.
The Nujol Metode mull membutuhkan pencampuran sampel serbuk halus
(2-3 mg) dengan satu tetes Nujol (parafin cair atau perfluorinated rantai panjang
alkana), dan kemudian menggiling campuran dalam mortar batu akik. Jumlah
Nujol
tambah disesuaikan sehingga mull akhir adalah konsistensi krim tipis. Itu
mull dihasilkan tersebar pada halida disc alkali (biasanya KBr) dan disk yang sama
ditempatkan di atas. Film antara cakram halida harus tidak mengandung
gelembung udara.
Kerugian yang jelas dari metode ini adalah gangguan dari Nujol di
spektrum. Pendekatan yang serupa, teknik film tipis, juga digunakan untuk
langsung
analisis ATS dasar gratis, yang biasanya cairan berminyak.
Metode refleksi berlian ATR tunggal (misalnya "Golden Gate" device) adalah
metode yang relatif baru untuk kedua cairan dan padatan, yang tidak memerlukan
persiapan sampel.
Namun, spektrum yang diperoleh dengan metode ini tidak dapat langsung
dibandingkan
dengan yang diperoleh dari salah satu metode yang dijelaskan di atas. Akhirnya,
gas
Metode sel adalah alat praktis untuk analisis cepat pelarut dan beberapa prekursor
dari laboratorium klandestin.
Isolasi obat murni dari sampel
Isolasi basa bebas ATS
Larutkan 25-50 mg sampel dalam 1 ml 0,1 N asam tartaric. Tambahkan 4-5 tetes
amonium hidroksida dan ekstrak dengan kloroform. Melewati lapisan kloroform
melalui kolom kecil berisi plug kapas untuk menghilangkan partikel tersuspensi.
* Untuk padatan penting (a) untuk mengurangi ukuran partikel dengan menggiling
ke dimensi
kurang dari panjang gelombang analitis terpendek (untuk menghindari hamburan),
dan (b) untuk mencairkan sampel dalam rangka
untuk meminimalkan penyerapan dalam disk disiapkan.
42 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Biarkan sebagian dari solusi kloroform menguap langsung ke cakram KBr
dan merekam spektrum inframerah dari basa bebas, misalnya, dengan film tipis
Teknik pada cakram KBr.
Isolasi garam ATS
Menggiling menjadi serbuk porsi 20-50 mg sampel dengan 1-2 ml kloroform.
Saring,
mengumpulkan ekstrak dan berkonsentrasi dengan menggunakan aliran lembut
dari nitrogen. Menyebabkan
kristalisasi, filter, kristal kering, dan menjalankan spektrum inframerah Hasil dari
paket yang
ATS garam oleh salah satu metode yang dijelaskan di bawah ini.
Metode
Spectra garam ATS dicatat dengan sampel disusun sebagai berikut
metode:
_ KBr halida disc (1-1,5%)
_ Nujol memikirkan metode
_ Metode Langsung, misalnya pemantulan difusi ATR
_ Metode membaur reflektansi
Spectra ATS basa dicatat dengan sampel disusun sebagai berikut
metode:
_ Metode film tipis
_ IR kartu
_ Metode Langsung, misalnya pemantulan difusi ATR
Metode persiapan sampel IR alternatif untuk methamphetamine
Metode ekstraksi kering Serial
Tempatkan 200 mg sampel bubuk methamphetamine ke Pasteur sekali pakai
pipet dengan plug glass wool di akhir. Cuci sampel dengan dua 1 ml-bagian
aseton dan mengumpulkan fraksi aseton. Setelah udara pengeringan mencuci
kolom dengan dua 1 ml-bagian kloroform dan mengumpulkan fraksi kloroform.
Biarkan kolom kering lagi dan kemudian bilas dengan dua 1 ml aliquot-metanol
dan mengumpulkan fraksi metanol. Bahan larut kemudian dapat dihapus
dari pipet. Semua fraksi diperiksa oleh spektroskopi inframerah untuk
identifikasi.
Pemisahan fisik / selektif re-kristalisasi
Prosedur di bawah ini juga bekerja untuk jenis campuran ditunjukkan; mereka
tidak
bekerja dengan baik dengan amphetamine hydrochloride.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 43
Campuran diketahui mengandung metamfetamin: Tambahkan dalam gelas 25 mg
sampel
20 ml dari 2:1 campuran kloroform dan heksana, dan berkonsentrasi solusi
kira-kira setengah volume aslinya. Tambahkan dietil eter untuk mengendapkan
metamfetamin. Filter, kering dan memperoleh spektrum IR (methamphetamine
hidroklorida).
Campuran diketahui mengandung metamfetamin, pseudoefedrin, dan efedrin:
Tempatkan 100 mg sampel dalam secarik kertas saring dan cuci dengan 40 ml 03:01
campuran kloroform dan heksana. Cuci bagian larut dengan kloroform,
dan kering dan sembuh untuk pemeriksaan (efedrin hidroklorida). Menguapkan
terlarut asli menjadi kekeringan dan membagi menjadi dua bagian yang sama.
Larutkan satu setengah
sampel ini dalam 20 ml 2:1 campuran kloroform dan heksana, berkonsentrasi
sekitar setengah volume awal, dan menambahkan dietil eter untuk mengendapkan
methamphetamine. Filter, kering dan memperoleh spektrum IR (methamphetamine
hidroklorida). Larutkan setengah lainnya dari sampel dalam 2 ml kloroform dan
tambahkan 1,6 ml heksana untuk mengendapkan pseudoefedrin tersebut. Filter,
kering dan memperoleh
IR spektrum (pseudoefedrin hidroklorida).
Hasil
Identifikasi dilakukan dengan membandingkan spektrum analit dengan
standar referensi, atau dari perpustakaan spektral.
Bacaan lebih lanjut
Metode persiapan sampel IR alternatif untuk methamphetamine
Ely, RA (1993), kering Serial Ekstraksi Gelap Metamfetamin Bubuk Untuk
Identifikasi adulterants dan Pengencer By Infrared Spectroscopy, Jurnal
Clandestine Laboratory Asosiasi Investigasi Kimiawan (JCLIC), vol. 3 (1), hlm 21-25.
Oulton, SR (1997), Pemisahan dan Identifikasi Efedrin, Pseudoefedrin dan
Campuran Methamphetamine, mikrogram, vol. 30 (12), hlm 289-296.
Stinson, S.B. dan Berry, MR (1974), Pemisahan dan identifikasi amfetamin atau
methamphetamine dalam kombinasi dengan efedrin atau kafein, vol. 7 (4), p. 51.
General FTIR
Metode Laboratory di Vibrational Spektroskopi (ed ketiga.) Diedit oleh Willis, HA, van
der Maas JH dan Miller, RGJ, John Wiley & anak, Chichester, 1987
G. ANALISIS ISOMERS OPTIK
Kebanyakan ATS memiliki satu atom karbon asimetrik mengakibatkan sepasang
enantiomer
untuk setiap ATS. Tergantung pada sumber, oleh karena itu, bentuk enansiomer
yang berbeda
44 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
amfetamin, metamfetamin atau lainnya ATS mungkin ditemui di disita
sampel diajukan untuk analisis.
Di bawah tahun 1971 Konvensi PBB tentang Psikotropika, masing-masing optik
isomer (d-dan l-) serta campuran rasemat (dl) dari amphetamine dan
methamphetamine
dijadwalkan. Dengan sebagian besar cincin tersubstitusi ATS, hanya rasemat
adalah
terdaftar, dan enansiomer individual termasuk melalui frase generik.
Isomer optik berbeda sampai batas tertentu dalam aktivitas farmakologi dan
tunduk pada langkah-langkah pengaturan yang berbeda di negara-negara tertentu.
Di negara-negara di mana
perundang-undangan nasional mensyaratkan bahwa spesifik isomer optik ini
diidentifikasi,
prosedur analitis berikut dapat digunakan.
1. MELTING POINT
Perbandingan titik leleh sampel dicampur dengan yang dari enatiomerically
standar acuan murni adalah tes cepat dan sederhana untuk membedakan optik
isomer.
Sebagai contoh, d-dan-l methamphetamine hydrochloride memiliki lebur yang sama
Titik (170-175 C), tetapi campuran dari jumlah yang sama dari kedua isomer
optik
(Campuran rasemat) memiliki titik lebur yang lebih rendah (130-135 C).
Metode ini membutuhkan sampel yang cukup murni. Umumnya, titik leleh harus
ditentukan dengan menggunakan sampel kering.
2. TES mikrokristal
(Lihat juga bagian pada tes mikrokristal sebagai uji dugaan, di atas)
Untuk ATS, yang "menggantung penurunan" teknik, atau tes volatilitas, biasanya
digunakan.
Teknik ini membutuhkan slide rongga, penutup kaca, reagen pengujian dan
volatilizing reagen. Persiapan pengujian dan volatilisasi reagen dijelaskan
dalam lampiran III.
Tes mikrokristal untuk isomer optik amfetamin:
Uji klorida emas [5% HAuCl4 di H3PO4]
Mentransfer sejumlah kecil sampel bubuk ke dalam depresi rongga
geser, dan tambahkan satu atau dua tetes reagen volatilizing (larutan NaOH 5%).
Ini membebaskan amina bebas dalam bentuk basa bebas yang mudah menguap,
yang naik dari
solusi sebagai uap. Segera mentransfer setetes pereaksi pengujian (5%
HAuCl4 di H3PO4) ke slide kaca dan membalikkan slide melintang atas sampel
rongga. Reagen kemudian bereaksi dengan uap amina hadir dalam rongga.
Setelah selang waktu yang tepat, membalikkan kembali slide reagen dan memeriksa
untuk kristal
dalam reagen atau di tepi drop reagen.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 45
Hasil
Baik d-dan l-amphetamine memberikan mikrokristal identik, menyerupai panjang
kuning
batang atau jarum kasar dan pisau panjang dan sempit. Cara untuk membedakan
mereka adalah untuk
membentuk rasemat, yang tidak memberikan kristal yang berbeda. The dl-
amphetamine
rasemat memberikan pada awalnya "berminyak" turun maka kristal platy
berwarna. Kristal ini
sebagian besar terbentuk setelah inversi.
Perbedaan dari d-dan l-amphetamine
Jika pengujian di atas menunjukkan bahwa sampel d atau l-amphetamine,
perbedaan harus
dilakukan untuk yang hadir. Untuk tujuan ini, menambahkan beberapa yang tidak
diketahui
bubuk sampel untuk sejumlah kecil dikenal garam d-amphetamine dalam satu
rongga dan
untuk sejumlah kecil-l amphetamine garam di negara lain. Ulangi tes di atas.
Campuran

yaitu (d + d) atau (l + l) akan memberikan batang kuning panjang dll Campuran yang membuktikan
menjadi (d + l) akan memberikan kristal platy dari rasemat seperti yang dijelaskan sebelumnya.
Metamfetamin
d-Methamphetamine diuji dengan 5% HAuCl4 di H3PO4 memberikan "V" pisau dengan satu
sisi yang lebih pendek dari sisi lain. Ini berkembang sangat pesat jika tes dilakukan
langsung pada sampel kering, atau lebih lambat jika sampel diencerkan atau dilakukan
menggunakan teknik penurunan gantung.
l-Methamphetamine memberikan tunggal, pisau menyeberang, dan "v" pisau, yang bentuk
karakteristik ujung berbentuk cerutu (mereka lancip di kedua sisi ujung pisau).
d, l-Metamfetamin bentuk tunggal dan "X" pisau yang kadang-kadang
"Pisau" berbentuk. Pisau berakhir hanya lancip di satu sisi mirip dengan pisau.
MDMA
MDMA diuji dengan 5% HAuCl4 di H3PO4 memberikan kristal berbentuk X putih birefringed tinggi
dengan gugus bintang seperti di bawah cahaya terpolarisasi. Kristal ini mirip dengan d,
lmethamphetamine
dengan emas klorida, namun dapat dibedakan dengan praktek.
Catatan: Karena MDMA sangat sensitif dalam bereaksi dengan reagen emas klorida,
hanya sebagian kecil sudah cukup untuk hasil yang baik.
Tes emas klorida juga berguna untuk prekursor efedrin dan pseudoefedrin,
dan dapat berguna untuk nikotinamida dan kafein. Sampel Referensi
zat ini harus digunakan untuk mendapatkan kristal referensi.
Tes mikrokristal untuk isomer optik metamfetamin: [H3BiI6 dalam H2SO4]
Gunakan menggantung prosedur penurunan seperti dijelaskan di atas untuk amphetamine tetapi
menggunakan H3BiI6
dalam pengujian H2SO4 reagen (lihat lampiran III untuk persiapan reagen).
Hasil
d-Methamphetamine memberikan jarum orange panjang. dl-Methamphetamine memberikan
batang oranye-merah dengan karakteristik miring berakhir.
46 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Bacaan lebih lanjut
Fulton, C. C. (1969). Tes Microcrystal Modern Obat, Wiley-Interscience, New York.
Ono, M., Microcrystal Test, Jepang, 1996 (memberikan pengenalan yang komprehensif untuk
Teknik tes mikrokristal, dan termasuk foto-foto hasil uji mikrokristal dari
39 ATS dan prekursor mereka).
Ruybal, R. (1986). Uji mikrokristalin untuk MDMA, mikrogram, vol. 19 (6), hlm 79-80.
American Society of Analytical Chemistry: AOAC Official Metode Analisis (1984),
hlm 704-714.
Stall, W. J. (1981). Pemisahan methamphetamine dan prokain memanfaatkan volatilitas
test / menggantung metode drop untuk amfetamin, mikrogram, vol. 14 (10), hal.148.
3. TEKNIK INSTRUMENTAL
Ada beberapa metode instrumental langsung (GC kiral, HPLC atau CE) dan
metode derivatisasi tidak langsung tersedia untuk analisis isomer optik
ATS. Pemilihan metode tergantung pada ruang lingkup analisis, ketersediaan
peralatan dan persyaratan laboratorium lainnya. Keduanya langsung dan tidak langsung
metode harus dianggap sebagai pelengkap karena baik menawarkan universal
solusi untuk pemisahan kiral. Kekuatan dan kelemahan dari kedua pendekatan
harus dipertimbangkan dengan hati-hati.
Metode instrumental Direct memungkinkan analisis isomer optik tanpa
derivatisasi, menggunakan fasa diam kiral dan / atau aditif kiral untuk menjalankan
penyangga (CE).
Metode tidak langsung didasarkan pada derivatisasi analit dengan kirai a
reagen untuk menghasilkan dua diastereoisomer yang berbeda dengan yang berbeda fisiko-kimia
sifat yang dapat dipisahkan pada fase diam akiral. Pilihan
reagen kiral tergantung pada sejumlah faktor seperti daya pemisahan, sensitivitas,
efisiensi derivatisasi, dan kompatibilitas dengan teknik instrumental.
Metode menggunakan derivatisasi kiral dasarnya lebih murah dan melakukan
tidak memerlukan peralatan khusus atau kolom. Penggunaan normal, kolom akiral
memungkinkan integrasi yang mudah dari pemisahan kiral dalam skema analisis rutin.
Teknik GC
Kromatografi gas (GC) adalah teknik mapan untuk pemisahan kiral. Itu
dapat dilakukan dengan menggunakan metode langsung, menggunakan kolom kapiler kiral, atau
metode tidak langsung, di mana pemisahan ini dicapai dengan menggunakan reagen kirai dan
akiral
fasa diam.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 47
Kromatografi gas kiral (metode GC langsung)
Fasa diam yang tersedia secara komersial untuk pemisahan GC isomer optik
biasanya diproduksi dengan penambahan siklodekstrin makromolekul diderivatisasi untuk
fase diam umum. Yang paling umum digunakan fase diam kiral untuk
ATS adalah beta-siklodekstrin berbasis.
Metode
Preparasi sampel (ekstraksi) untuk analisis GC kiral adalah sama seperti untuk normal
GC (lihat di atas).
Kondisi operasi GC
Kolom: Dexcst, 0,25 mm x 30 mx 0,25 mikron Film, atau
setara
Gas pembawa: Helium di sekitar. 1,2 ml / menit
Suhu oven:. 120 C selama 1 menit, kemudian 1,5 C / menit sampai 175 C, tahan selama
1.5 min.
Volume Injeksi: 1 _L
Suhu injektor: 190 C
Detektor suhu: 280 C
Catatan: kondisi operasi GC lainnya dapat digunakan, tetapi perlu diuji untuk pemisahan optimal
kiral
senyawa. Penggunaan nitrogen sebagai gas pembawa memerlukan tingkat yang lebih rendah
aliran (sekitar 0,8 ml / menit.) Untuk optimal
kecepatan, sehingga puncak yang lebih luas.
Derivatisasi kiral (metode GC tidak langsung)
Diastereoisomer dari ATS dapat disusun dengan menggunakan reagen yang berbeda seperti
acylchlorides, alkylsulphonates, isothiocyanates, chloroformates. Asam Mosher
[R (+) - atau S (-)-_-metoksi-_-(trifluoromethyl)-asam fenilasetat], asam Mosher
klorida, dan N-trifluoroasetil-1-prolyl klorida (TPC, juga dikenal sebagai TFAP-Cl)
paling populer.
Asam dan asam klorida hasil Mosher dalam derivatisasi kuantitatif yang paling
amina, dengan pengecualian efedrin dan pseudoefedrin. Hal ini dapat digunakan sebagai
reagen untuk kedua GC dan analisis HPLC.
TPC dikenal untuk menghasilkan turunan stabil hampir semua ATS termasuk
Kelompok efedrin. Hal ini lebih setuju untuk analisis GC.
Rincian ATS persiapan sampel menggunakan asam Mosher dan TPC untuk kirai
derivatizations dijelaskan dalam lampiran VII.
Kondisi operasi GC untuk analisis GC kualitatif (lihat di atas) juga dapat
digunakan untuk analisis derivatif kiral.
48 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Bacaan lebih lanjut
Beckett, A. H. dan Testa, B. (1972). Pemisahan stereokimia dan penugasan configural
dengan kromatografi gas-cair amida N-trifluoroasetil-l-prolyl asimetris
l-phenylisopropyl-amina, J. Chromatogr., vol. 69, hlm 285.
Cody, J. T., (1992). Penentuan rasio methamphetamine enantiomer dalam urin oleh gas
spektrometri massa kromatografi, J. Chromatogr., vol. 580, hlm 77-95.
Jirovsk, D., et al. (1998). Methamphetamine-sifat dan metode analitis
penentuan enantiomer, Forensik Sci. Int., Vol. 96, hlm 61-70.
Liu, J. H. dan Ku, W. W. (1981). Penentuan enansiomer N-trifluoroasetil-l-prolyl
derivatif amphetamine klorida oleh kapiler gas kromatografi / spektrometer massa dengan
fasa diam kiral dan akiral, Anal. Chem., Vol. 53, hlm 2180.
Liu, JH, Ku, WW, Tsay, JT, Fitzgerald, MP, dan Kim, S. (1982). Pendekatan
diferensiasi sampel obat. III: Sebuah studi perbandingan penggunaan kiral dan akiral
spektrometri kromatografi gas kolom kapiler / massa untuk penentuan methamphetamine
enantiomer dan kemungkinan kotoran, J. Forensik Sci., vol. 27 (1), hlm 39-48.
Liu, JH, Ku, WW dan Fitzgerald, MP (1983). Pemisahan dan karakterisasi
amina obat-obatan dan enantiomer mereka dengan kapiler kolom kromatografi gas-spektrometri
massa,
J. Assoc. dari Anal. Chem., Vol. 66, hlm 1443.
McKibben, T. (1992). Pemisahan dan Identifikasi Obat enansiomer via N TFA (S)
Prolyl Chloride Derivatisasi, Jurnal Laboratorium Clandestine Investigasi
Asosiasi Kimiawan, vol. 2 (1), hlm 21 20. (Referensi ini termasuk derivatisasi kedua
enansiomer dari amfetamin, metamfetamin, efedrin, pseudoefedrin, MDA,
MDMA, DOB, DOM, 2,4,6 TMA, 3,4,5 TMA, propylhexedrine, dan PMA.)
R. Kaslauskas, G. Trouth dan A. Lissi (AGAL), 16 Cologne lokakarya tentang doping
Analisis: Moshers acid,
Pastor-Navarro, MD, Porras-Serrano, R., Herraez-Hernandez, R., Campins-Falco, P.
(1998). Penentuan otomatis enansiomer amphetamine menggunakan dua dimensi
Kolom-switching sistem kromatografi untuk derivatisasi dan pemisahan, Analis,
vol. 123, hlm 319.
Shin, H. S. dan Donike, M. (1996). Derivatisasi stereospesifik amfetamin, fenol
alkylamines, dan hydroxyamines dan kuantifikasi enansiomer oleh kapiler
GLC / MS, Anal. Chem., Vol. 68, hlm 3015.
Wells, C. E. (1970). Penentuan GLC dari isomer optik dari amphetamine, J. Assoc.
dari Anal. Chem., Vol. 53, hlm 113.
Teknik HPLC
Untuk HPLC, berbagai pendekatan telah digunakan, termasuk derivatisasi dengan kirai
reagen, penggabungan aditif kiral dalam fase gerak, dan penggunaan
fasa diam kiral. Berbagai kolom HPLC kiral tersedia secara komersial.
Kinerja fasa diam kiral dalam HPLC telah secara dramatis
meningkat dalam beberapa tahun terakhir, meskipun analisis tersebut masih mahal.
Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 49
Bacaan lebih lanjut
Lemr, K., Jirovsky, D. dan Seveik, D. (1996). Pengaruh Beberapa Parameter pada enansiomer
Pemisahan Efedrin, Methamphetamine dan Selegiline menggunakan HPLC dengan _-siklodekstrin
Tahap Stationary, J. Liq. Chrom. & Rel. Technol., Vol. 19, hlm 3173-3191.
Makino, Y., Suzuki, A., Shirota, T. Ogawa, Shirota, O. (1999). Analisis langsung metamfetamin
enantiomer dalam urin dengan pertukaran kation kuat pra-kolom dan _-siklodekstrin-
terikat kolom semi-mikro, J. Chromatography B, vol. 729, hlm 97-101.
Noggle, FT, DeRuiter, J. dan Clark, CR (1986). Liquid kromatografi Penentuan
Komposisi dari enansiomer dari Methamphetamine Diolah dari Efedrin dan
Pseudoefedrin, Anal. Chem., Vol. 58, pp 1643-1648
Pihlainen, K. dan Kostiainen, R. (2004). Pengaruh Eluen pada enansiomer Pemisahan
Dikendalikan Obat oleh kromatografi cair-Ultraviolet Absorbance Detection-elektrospray
Ionisasi Tandem Mass Spectrometry menggunakan Vancomycin dan Asli _-siklodekstrin
Fasa Diam kiral, J. Chromatogr. A., vol. 1033, hlm 91-99.
Rizzi, AM, Hirz, R., Cladrowa-Runge, S. dan Jonsson, H. (1994). Pemisahan enansiomer
dari Amphetamine, Methamphetamine dan Ring disubtitusi Amfetamin oleh Sarana dari _-
Siklodekstrin-kiral Stationary Phase, Chromatographia, vol. 39, hlm 131-137.
Sadeghipour, F. dan Veuthey, J. L. (1998). Pemisahan enansiomer dari Empat Methylenedioxylated
Amfetamin pada _-siklodekstrin kiral Stationary Phases, Chromatographia,
vol. 47, hlm 285-290.
Penjual, JK, Duffitt, GL, Gaines, ML dan Liu, RH (1996). High Performance Liquid
Kromatografi Analisis enansiomer Komposisi Obat Disalahgunakan, Forensik Sci.
Wahyu, vol. 8, hlm 92-108.
Teknik CE
Zona elektroforesis kapiler sangat menguntungkan untuk analisis kiral karena
memungkinkan untuk pemisahan yang sangat efisien enansiomer tanpa derivatisasi
dan kolom khusus (kapiler). Untuk pemisahan ATS, aditif kiral untuk
buffer run seperti hidroksil-propil beta-siklodekstrin yang umum digunakan.
Bacaan lebih lanjut
Iwata, YT, Garcia, A, Kanamori, T., Inoue, H., Kishi. T. dan Lurie, I.S. (2002). Penggunaan
Sangat sulfat dari Cyclodextrin untuk Pemisahan kiral Simultan Amphetaminetype
Stimulan oleh kapiler Electrophoreis, Electrophoreis., Vol. 23, hlm 1328-1334.
Lurie, IS, Hays, PA dan Parker, KP (2004). Kapiler Electrophoreis Analisa terhadap
Luas Ragam Obat sitaan Menggunakan kapiler Sama dengan Dynamic Coatings,
Elektroforesis., Vol. 25, hlm 1580-1591.
Lurie, IS, Klein, RFK, Dal Cason, T., LeBelle, M., Brenneisen dan R., Weinberger, R.
(1994). Resolusi kiral dari Kationik Obat Menarik Forensik oleh kapiler Elektroforesis
dengan Campuran dari Netral dan Anionik Siklodekstrin, Anal. Chem., Vol. 66, hlm
4019-4026.
50 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Varesio, E., Gauvrit, JY, Longeray, R., Lanteri, P., Veuthey, JL (1997). Pusat
Desain komposit dalam Analisis kiral dari amfetamin oleh kapiler Elektroforesis,
Elektroforesis., Vol. 18, hlm 931-937.
Infrared (IR) teknik
Meskipun enantiomer memiliki spektrum inframerah yang sama, inframerah (IR) spektroskopi
dapat digunakan untuk membedakan antara enantiomer dari senyawa yang diberikan setelah
mengkonversi
mereka ke dalam diastereomer yang sesuai.
ATS, karena semua basa organik dapat dengan mudah bereaksi dengan asam organik kiral
untuk membentuk diastereomer. D-dan l-amphetamine, misalnya, dapat digabungkan dengan
d-mandelic acid untuk membentuk dua diastereomer, d-amphetamine-d-mandelate dan
l-amphetamine-d-mandelate, yang memiliki spektrum IR yang berbeda.
Metode
Larutan garam ATS (10-50 mg) dibuat basa, dan ATS
diekstraksi ke dalam metilen klorida. The methylene chloride dikeringkan anhidrat
natrium sulfat dan terkonsentrasi sekitar 2 ml. Sebuah larutan jenuh
d-mandelic acid dalam metilen klorida ditambahkan, beberapa tetes pada satu waktu, sampai
Solusi ATS dinetralkan (pH kertas). D-mandelate-ATS garam diperbolehkan untuk
mengkristal, solusi disaring melalui hisap, dan kristal dicuci dengan
sebagian kecil dari metilen klorida. Setelah kering, disc KBr dari kristal adalah
disiapkan, dan spektrum inframerah yang diperoleh. Prosedur ini diulang dengan menggunakan
dikenal optik isomer murni sesuai ATS.
Hasil
Identifikasi isomer optik dilakukan dengan membandingkan spektra yang dihasilkan
dengan yang diperoleh dari standar referensi murni sesuai. Band IR di
800-1600cm-1 daerah memberikan informasi yang paling analitis khas.
Spektra IR dari garam-garam isomer optik amfetamin dengan asam mandelic
diberikan dalam edisi awal dari manual "metode yang direkomendasikan PBB untuk
pengujian amphetamine dan methamphetamine "(ST/NAR/9). Data juga dapat
diakses pada halaman web Laboratorium dan Ilmiah Bagian ini.
Bacaan lebih lanjut
Chappell, J. S. (1997). Diskriminasi inframerah dari enansiomer diperkaya dan rasemat
sampel garam methamphetamine, Analis, vol. 122, hlm 755-760.
Chappell, J. S. (1998). Sebuah metode inframerah baru untuk penentuan enansiomer tersebut
komposisi garam methamphetamine, Proceedings of the American Academy of Forensic
Ilmu, vol. 4, hal. 32.
Heagy, J. (1970). Metode inframerah untuk membedakan isomer optik dari amphetamine,
Analytical Chemistry, vol. 42, hlm 1459.
51
VII. TAMBAHAN ANALITIS
TEKNIK UNTUK
ANALISIS ATS
Ada beberapa teknik analisis tambahan cocok untuk forensik
identifikasi dan / atau kuantisasi ATS, seperti:
_ Kapiler elektroforesis (CE)
_ Gas kromatografi-Fourier berubah spektroskopi inframerah (GC-FTIR)
_ LC-MS dan CE-MS
_ Near Infrared (NIR) Spektroskopi
_ Resonansi magnetik nuklir (NMR) spektroskopi (kualitatif dan
kuantitatif)
_ Kuantitatif FTIR
_ Kuantitatif TLC
_ Raman spektroskopi FTIR
Kromatografi ekstraksi gas fase-mikro padat (SPME-GC)
Penjelasan sebagian besar teknik ini adalah di luar lingkup ini "Manual
pada direkomendasikan metode analisis untuk ATS ", dan analis yang dirujuk ke
pelengkap "Manual pada teknik analisis secara umum, karakteristik mereka
dan penggunaan praktis untuk analisis obat ". Empat teknik, NMR kualitatif, CE,
SPME-GC, dan GC-FTIR secara singkat dijelaskan di bawah ini, karena mereka menawarkan
spesifik,
pilihan menarik untuk analisis ATS.
RESONANSI MAGNETIK A. 1H-NUKLIR (NMR) TEKNIK
Ketersediaan sejumlah besar isomer posisi dari struktural terkait
ATS, terutama cincin tersubstitusi ATS, membutuhkan alat yang efektif yang menyediakan
diperlukan
informasi struktural untuk diferensiasi mereka. NMR memungkinkan analis untuk
tegas membedakan antara derivatif amphetamine cincin tersubstitusi yang berbeda,
bahkan di hadapan Pengencer dan adulterants lainnya. Meskipun substitusi tertentu
pola mirip satu sama lain di daerah sesuai dengan proton
dari rantai alkil samping, spektrum terpadu dan pola aromatik
sinyal proton memungkinkan perbedaan mereka dari satu sama lain. Sementara menjadi kuat
alat untuk identifikasi analog, biaya spektroskopi NMR dan
keahlian teknis yang diperlukan mencegah aplikasi luas dalam analisis rutin.
52 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Metode
Larutkan sekitar 20 mg sampel obat dalam 1 ml D2O. Jika bahan tidak larut
yang hadir, centrifuge, mengalihkan langsung supernatan ke dalam NMR
tabung. Catat spektrum solusi ini mengandung bentuk garam dari ATS.
Membebaskan basa bebas dari ATS in situ dengan penambahan 20-30 mg
K2CO3 padat dan 0,5 ml CDCl3 dan merekam spektrum basa bebas.
Bandingkan spektrum yang tidak diketahui dengan spektrum referensi, yang
direkam pada transformasi Fourier instrumen pada 90 MHz menggunakan sudut lain dari 18
(1 _sec) tanpa penundaan setelah akuisisi data.
Referensi NMR spektrum dipilih ATS diberikan dalam edisi sebelumnya
dua manual PBB terkait dengan analisis ATS, yaitu, "Direkomendasikan
metode untuk pengujian amphetamine dan methamphetamine "(ST/NAR/9) dan
"Metode yang disarankan untuk menguji terlarang derivatif amphetamine cincin tersubstitusi"
(ST/NAR/12). Data juga dapat diakses di Laboratorium dan Ilmiah
Halaman web seksi.
Bacaan lebih lanjut
Dawson, B. A. (1991). Penggunaan Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy untuk deteksi
dan kuantisasi obat disalahgunakan, dalam: Analisis penyalahgunaan obat, TA Gough
(Ed.), Wiley & Sons Ltd, hlm 284-296.
Lee GS H, Craig DC, Kannangar GSK, Dawson, M., Conn C., J. Robertson,
Wilson M. A. (1999). Analisis 3,4-metilendioksi-N-methylamphetamine (MDMA) di
"Ekstasi" tablet dengan 13C solid state resonansi magnetik nuklir (NMR) spektroskopi,
J. Forensik Sci., Vol. 44 (4), hlm 761-771.
Chew, S. L., dan Meyers, J. A. (2003). Identifikasi dan kuantisasi gamma-hidroksibutirat
(NaGHB) dengan spektroskopi resonansi magnetik nuklir, J. Forensik Sci., Vol. 48
(2), p. 292.
Rothchild, R. (2003). Identifikasi heroin pengencer: proton satu dan dua dimensi dan
studi karbon-13 NMR prokain hidroklorida: studi komputasi prokain dan
asamnya konjugasi, Spektroskopi Letters, vol. 36 (1 & 2), hlm 35-42.
B. Kapiler ELEKTROFORESIS (CE)
CE, mirip dengan HPLC, tidak memerlukan derivatisasi atau ekstraksi langkah-langkah,
dan karena itu
menguntungkan atas GC untuk analisis senyawa ATS. Berbeda dengan HPLC,
CE menawarkan kekuatan menyelesaikan lebih tinggi untuk analisis zat terlarut tersebut,
yang diterjemahkan
ke dalam analisis yang lebih cepat. Penggunaan kapiler dilapisi secara dinamis
memberikan
peningkatan yang signifikan dalam presisi, efisiensi puncak dan / atau waktu pemisahan
untuk
ATS senyawa lebih dari metode sebanding menggunakan kapiler uncoated. Tambahan
pendekatan kapiler dilapisi secara dinamis dapat memungkinkan untuk analisis kiral
cepat
Teknik analisis tambahan untuk analisis ATS 53
sampel menggunakan kapiler yang sama dan sampel botol tapi lari penyangga yang
berbeda.
Lihat lampiran VI untuk metode CE divalidasi untuk kuantisasi dipilih ATS dan untuk
metodologi untuk membedakan isomer optik.
Bacaan lebih lanjut
Lurie, IS, Hays, PA dan Parker, KP (2004). Kapiler Electrophoreis Analisa terhadap
Luas Ragam Obat sitaan Menggunakan kapiler Sama dengan Dynamic Coatings,
Elektroforesis., Vol. 25, hlm 1580-1591.
Lurie, IS, Bethea, M. J., McKibben, TD, Hays, PA, Pellegrini, P., Sahai, R.,
Garcia, A. G. dan Weinberger R. (2001). Penggunaan Kapiler dinamis Coated untuk
Analisis Rutin Methamphetamine, Amphetamine, MDA, MDMA, MDEA dan Kokain
menggunakan kapiler Elektroforesis, J. Forensik Sci., vol. 46, hlm 1025-1032.
Piette, V. dan Parmentier, F. (2002). Analisis Gelap Amphetamine Kejang oleh kapiler
Zona Electrophoreis, J. Chromatogr. A., vol. 979, hlm 345-352.
C. SOLID PHASE-MICRO EKSTRAKSI-GAS KROMATOGRAFI
(SPME-GC)
SPME (ekstraksi fase padat mikro) adalah teknik persiapan sampel bebas pelarut,
yang dapat digunakan untuk analisis headspace atas solusi, atau langsung di atas
ATS bubuk, atau dapat digunakan untuk (trace) analisis larutan air yang mengandung
ATS. SPME biasanya dilakukan dengan jarum suntik khusus dilengkapi dengan silika
serat ditempatkan di atas piston jarum suntik. Serat dilapisi dengan polimer yang
fase seperti yang digunakan dalam kolom kapiler. Selama pengambilan sampel, serat
lapisan
menyerap senyawa dari fase gas di headspace, atau langsung dari
fase cair. Banyak lapisan serat yang berbeda yang tersedia untuk analisis ATS
dan zat lainnya. Salah satu yang paling digunakan, misalnya, sebuah polydimethylsiloxane
(PDMS) serat dilapisi.
Metode headspace
Sebuah sampel ATS berair dibuat basa untuk mengubah amina ke dalam basis bebas,
sehingga meningkatkan volatilitas mereka. Sampel dapat tambahan dipanaskan untuk
meningkatkan jumlah amina dalam fase gas di atas larutan sampel. Itu
jarum suntik dengan serat terkena ditempatkan di ruang atas di atas solusi dan
dasar gratis ATS diserap pada bahan tersebut. Pada kesetimbangan, yang diekstraksi
jumlah setiap senyawa diserap pada bahan tersebut sebanding dengan konsentrasi mereka
dalam larutan, meskipun dengan koefisien distribusi yang berbeda. Setelah ekstraksi
selesai, jarum suntik tersebut dipindahkan ke instrumen analitis yang dipilih.
54 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Ketika serat dimasukkan ke dalam dipanaskan pelabuhan GC injector, amina diekstrak
termal desorbed. Dalam HPLC, KTK dan CE, campuran pelarut yang terelusi
amina membentuk serat.
(Jejak) analisis dari sampel air
Serat dicelupkan langsung ke dalam larutan sampel air, yang dibuat
basa untuk melepaskan dasar gratis ATS. Sampel larutan diaduk untuk
meningkatkan pertukaran senyawa antara solusi dan serat untuk
ekstraksi cepat. Analisis sampel dilakukan dengan cara yang sama seperti yang dijelaskan
dalam metode headspace.
Bacaan lebih lanjut
Battu, C., Marquet, P., Fauconnet, AL, Lacassie, E. dan Lachtre, G. (1998). Penyaringan
Prosedur untuk 21 senyawa-amphetamine yang terkait dalam urin menggunakan fase padat
microextraction
dan gas kromatografi-spektrometri massa, J. Chromatogr. Sci., Vol. 36, hlm 1-7.
Centini, F., Masti, A. dan Barni Comparini, I. (1996). Analisis kuantitatif dan kualitatif
MDMA, MDEA, MA dan amfetamin dalam urin oleh fase head-space/solid microextraction
(SPME) dan GC-MS, Forensic Science International, vol. 83, hlm 161-166.
Pawliszyn, J., Solid Phase microextraction, Wiley-VCH, New York, 1997.
Yashiki, M., Kojima, T., Miyazaki, T., Nagasawa, N., Iwasaki, Y. dan Hara, K. (1995).
Deteksi amfetamin dalam urin menggunakan kepala ruang-fase padat microextraction dan
ionisasi kimia yang dipilih pemantauan ion, Forensic Science International, vol. 76,
hlm 169-177.
Zhang, Z., Yang, M. J. dan Pawliszyn, J. (1994). Solid-Phase microextraction, Analytical
Chemistry, vol. 66, No 17, hlm 844A-855A.
D. GAS KROMATOGRAFI-FOURIER TRANSFORM
SPEKTROSKOPI INFRAMERAH (GC-FTIR)
GC-FTIR, sebagai teknik ditulis dgn tanda penghubung lain, menyatukan keuntungan
dari GC
teknik pemisahan dengan kekhususan analit tinggi IR. GC-FTIR dengan cahaya
sel aliran pipa tidak memiliki keterbatasan untuk aliran gas pembawa, yang membuatnya
ideal
untuk digunakan dengan kolom bore lebar pendek, sehingga mengakibatkan analisis
efisien dan cepat.
Misalnya, ATS yang paling umum dapat dianalisis dalam waktu kurang dari lima menit.
Namun, karena teknik ini agak sensitif, sejumlah besar zat
harus disuntikkan, dan ketebalan film fase diam sangat penting dalam
Agar tidak membebani kolom.
Teknik analisis tambahan untuk analisis ATS 55
Metode
ATS persiapan sampel
Persiapan sampel adalah sama seperti untuk analisis GC kualitatif di atas, tetapi target
konsentrasi analit harus 1-10 mg / ml.
Kondisi operasi GC
Kondisi GC Umum ditunjukkan di atas (misalnya, GC-FID atau metode GC-MS) dapat
digunakan, dengan modifikasi berikut:
GC kolom: kolom bore lebar 0,32-0,53 mm ID
Panjang kolom: 3-10 m
Ketebalan Film: _ 1,0 _m
Suhu transfer line: 300 C
Resolusi spektral: 8 cm-1
Hasil
Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi dan spektrum FTIR
analit dengan standar referensi.
Bacaan lebih lanjut
Bergkvist, H., Eyem. J. dan Lundberg, L. in: Sandra, P. (Ed), Proceedings of the Thirteenth
Simposium Internasional kapiler Kromatografi, Riva del Garda, 13-16 Mei 1991,
Huertig, Heidelberg, hlm 1160-1170.
Duncan, W. dan Soine, WH, Identifikasi Amphetamine Isomer oleh GC / IR / MS, J.
Chromatogr. Sci., Vol. 26, 1988, hlm 521-526.
Griffiths, PR dan de Haseth, JA, Fourier Transform Infrared Spectrometry, John Wiley
& Sons, New York, 1986.

57
Lampiran I. struktur kimia yang dipilih ATS
Tabel A1. Amfetamin Non-cincin tersubstitusi
Catatan: Kecuali ditunjukkan secara khusus, nama tidak mengacu pada enansiomer individual
Nama umum Nama IUPAC R1 R2 R3 R4
Amphetamine 1-metil-2-Phenylethylamine H H CH3 H
Metamfetamin N-metil-N-
(1-metil-2-phenylethyl) amine CH3 H CH3 H
N-Ethylamphetamine N-etil-N-
(1-metil-2-phenylethyl) amine C2H5 H CH3 H
Dimethylamphetamine N, N-dimetil-N-
(1-metil-2-phenylethyl) amine CH3 CH3 CH3 H
N-Hydroxyamphetamine N-(1-metil-2-phenylethyl)
hidroksilamin H OH CH3 H
N-Hydroxymethamphetamine N-metil-N-
(1-metil-2-phenylethyl)
hidroksilamin CH3 OH CH3 H
Katin (1S, 2S)-2-amino-1-phenylpropan-
1-ol H H CH3 OH
Cathinone 2-amino-1-phenylpropan-1-one H H CH3 = O
Methcathinone 2 - (methylamino)-1-phenylpropan-
1-one CH3 H CH3 = O
Fenetilin 1,3-dimetil-7-{2 -
[(1-metil-2-phenylethyl) amino]
etil} -3,7-dihidro-1H-purin-
2,6-dion H theo-CH3 H
phylline
Phenylpropylmethylamine N-metil-N-(2-fenilpropil) amine CH3 H CH3 CH3
(PPMA)
R3
N
R2
R1
R4
58 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Tabel A2. Metilendioksi diganti amfetamin
Catatan: Kecuali ditunjukkan secara khusus, nama tidak mengacu pada enansiomer individual
Nama umum Nama IUPAC R1 R2 R3 R4
3,4-methylenedioxyamphetamine
1 - (1,3-benzodioxol-5-il)
(MDA, tenamfetamine) propan-2-amina H H CH3 H
3,4-metilendioksi-N-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -
methamphetamine (MDMA) 1-metiletil]-N-CH3 H CH3 methylamine H
3,4-methylenedioxyethylamphetamine
N-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -1 -
(MDE, MDEA) metiletil]-N-etilamin C2H5 H CH3 H
3,4-metilendioksi-N, Ndimethylamphetamine
N-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -1 -
(MDDM) metiletil]-N, N-CH3 CH3 CH3 dimetilamin H
N-hydroxy-3 ,4-methylenedioxyamphetamine
(N-hidroksi-MDA, N-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -1 -
N-hydroxytenamfetamine) metiletil] hidroksilamin H OH CH3 H
N-hidroksi-N-methyl-3, 4 - N-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -1 -
methylenedioxyamphetamine metiletil]-N-
(N-hidroksi-MDMA, KUTU) methylhydroxylamine CH3 OH CH3 H
N-metil-1-
(3,4-methylenedioxyphenyl) - N-[1 - (1,3-benzodioxol-5-ylmethyl)
2-butanamine (MBDB) propil]-N-CH3 methylamine H C2H5 H
1 - (3,4-methylenedioxyphenyl) - 1 - (1,3-benzodioxol-5-il)
2-butanamine (BDB) butan-2-amina H H C2H5 H
5-metoksi-3, 4 -
methylenedioxyamphetamine 1 - (7-metoksi-1 ,3-benzodioxol-5-il)
(MMDA) propan-2-amina H H CH3 OCH3
N
R3
R2
R1
R6
O
O
Lampiran I. Struktur Kimia dipilih ATS 59
Tabel A3. Cincin lainnya diganti amfetamin
Catatan: Kecuali ditunjukkan secara khusus, nama tidak mengacu pada enansiomer individual
Nama umum Nama IUPAC R1 R3 R5 R6 R7 R8
2,4,5-Cincin diganti phenethylamines
4-Bromo-2 ,5-dimetoksi-2 - (4-bromo-2 ,5-dimethoxyphenetylamine
(2C-B, Nexus) fenil) ethanamine HH OCH3 H Br OCH3
4-methylthio-2 ,5-dimetoksi-2 - [2,5-dimetoksi-4-(methylphenethylamine
(2C-T) thio) fenil] ethanamine HH OCH3 H SCH3 OCH3
4-Ethylthio-2 ,5-dimetoksi-2 - [4 - (ethylthio) -2,5-diphenethylamine
(2C-T-2) methoxyphenyl] ethanamine H H OCH3 H SC2
H5 OCH3
4-Propylthio-2 ,5-dimetoksi-2 - [2,5-dimetoksi-4-(propylphenethylamine
(2C-T-7) thio) fenil] ethanamine H H OCH3 H SC3
H7 OCH3
4-Chloro-2 ,5-dimetoksi-2 - (4-kloro-2 ,5-dimethoxyphenethylamine
(2C-C) fenil) ethanamine H H H Cl OCH3 OCH3
4-Iodo-2 ,5-dimetoksi-2 - (4-iodo-2 ,5-dimethoxyphenethylamine
(2C-I) fenil) ethanamine H H OCH3 H I OCH3
2,4,5-Cincin diganti amfetamin
2,4,5-Trimethoxyamphetamine 1 - (2,4,5-trimethoxyphenyl)
(TMA-2) propan-2-amina H CH3 OCH3 H OCH3 OCH3
4-Methyl-2 ,5-dimetoksi-1 - (2,5-dimetoksi-4-
amfetamin (DOM, STP) metilfenil) propan-2-amina H CH3 OCH3 H CH3 OCH3
4-Bromo-2 ,5-dimetoksi-1 - (4-bromo-2 ,5-dimethoxyamphetamine
fenil) propan-2-amina
(DOB, Bromo-STP, BDMA) H CH3 OCH3 H Br OCH3
4-Chloro-2 ,5-dimetoksi-1 - (4-kloro-2 ,5-dimethoxyamphetamine
(DOC) fenil) propan-2-amina H CH3 OCH3 H Cl OCH3
4-Iodo-2 ,5-dimetoksi-1 - (4-iodo-2 ,5-dimethoxyamphetamine
(DOI) fenil) propan-2-amina H CH3 OCH3 H I OCH3
4-Ethyl-2 ,5-dimetoksi-1 - (4-etil-2 ,5-dimethoxyamphetamine
(DOET) fenil) propan-2-amina H CH3 OCH3 H C2H5 OCH3
Pola substitusi cincin lainnya (phenethylamines dan amfetamin)
3,4,5-Trimethoxyphenethyl-2 - (3,4,5-trimethoxyphenyl)
amina (mescaline) ethanamine H H H OCH3 OCH3 OCH3
para-Methoxyamphetamine 3 - (4-metoksifenil) -
(PMA) 1-methylpropylamine H CH3 H H OCH3 H
para-metoksi-N-[2 - (4-metoksifenil) -1 -
methamphetamine (PMMA) metiletil]-N-CH3 CH3 methylamine HH OCH3 H
2,5-Dimethoxyamphetamine 1 - (2,5-dimethoxyphenyl)
(DMA) propan-2-amina H CH3 OCH3 H H OCH3
3,4,5-Trimethoxyamphetamine 1 - (3,4,5-trimethoxyphenyl)
(TMA) propan-2-amina H CH3 H OCH3 OCH3 OCH3
4-Methylthioamphetamine 1 - [4 - (methylthio) fenil]
(4-MTA) propan-2-amina H CH3 H H H SCH3
R3
NH
R1
R6
R5 R7
R8

61
Lampiran II. Persiapan warna dan
reagen uji anion
Semua reagen harus disiapkan sesuai dengan prosedur yang ditetapkan.
Tes Chen
Reagen 1: Tambahkan 1 ml asam asetat glasial sampai 100 ml air (= 1% (v / v) air
larutan asam asetat)
Reagen 2: Larutkan 1 g tembaga (II) sulfat dalam 100 ml air (= 1% (b / v)
larutan CuSO4)
Reagen 3: Larutkan 8 g natrium hidroksida dalam 100 ml air (= 2N berair
larutan natrium hidroksida).
Tes asam galat
Reagen: Larutkan 0,1 g asam gallic dalam 20 ml asam sulfat pekat
(= 0,5% (b /) solusi v)
Uji Marquis
Reagen 1: Tambahkan 8-10 tetes (sekitar 0,25 ml) larutan formaldehida 37% sampai 10
ml asam asetat glasial
Reagen 2: Asam sulfat pekat
Uji Fosfat
Amonium molibdat: Larutkan 10 g amonium molibdat [(NH4) 6Mo7O24 x
4H2O] dalam 100 ml air (= 10% (b / v) amonium berair
solusi molybdate)
Asam nitrat: Hati-hati tambahkan 10 ml asam nitrat 90 ml air (= 10% (v / v) nitrat
larutan asam)
Uji Perak nitrat (juga dikenal sebagai tes Chloride)
Larutkan 1,7 g perak nitrat dalam 100ml air (= 1,7% berair perak nitrat
solusi).
Tes Simon
Reagen 1: Larutkan 2 g natrium karbonat dalam 100 ml air (= 2% berair
larutan natrium karbonat)
Reagen 2: Larutkan 0,9 g natrium nitroprusside dalam 90 ml air (= 1% aqueous
larutan natrium nitroprusside)
Reagen 3: Campurkan 10 ml larutan asetaldehida dan 10 ml etanol (= 50% (v / v)
solusi asetaldehida etanol)
62 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Uji sulfat
Larutkan 5 g barium chloride dihydrate dalam 100 ml air (= approx. 5% berair
barium klorida).
Ada prosedur yang ditetapkan lain untuk persiapan reagen uji warna, untuk
Misalnya, Clarke, yang menunjukkan sedikit variasi dalam resep.
63
Lampiran III. Tes Microcrystal
Diklasifikasikan mikrokristal khas
Bentuk khas dari mikrokristal dapat diklasifikasikan ke dalam sembilan kelompok,
menggunakan istilah deskriptif
di bawah ini. Dalam rangka untuk memungkinkan keterangan tentang semua jenis
mikrokristal, kata sifat seperti
tidak teratur, halus, atau persegi dipotong harus ditambahkan dengan persyaratan dasar.
Reagen
Pengujian reagen-5% HAuCl4 di H3PO4
Larutkan 1 g asam komersial triklorida emas (HAuCl4 x 4H2O) dalam 20 ml larutan
mengandung satu volume H3PO4 pekat dan dua volume air.
Sumber: Ono, M., Microcrystal Test, Jepang 1996
64 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Pengujian reagen-H3BiI6 di H2SO4
Larutkan 1,25 g kalium iodida dalam 2,0 ml air. Tambahkan 2,5 ml larutan H2SO4
diencerkan 1:07 dengan air, 0,5 ml terkonsentrasi Bi (NO3) 3 solusi dan 0,1 g natrium
hypophosphite. Bi pekat (NO3) 3 larutan stok dibuat dengan melarutkan 50 g
subnitrate bismut dalam 70 ml larutan HNO3 (diencerkan 1:1 dengan air) dan membuat
hingga 100 ml dengan air. Pengujian reagen dapat disimpan selama beberapa bulan.
Volatilising reagen
Siapkan larutan NaOH 5%.
65
Lampiran IV. Metode GC divalidasi untuk
kuantisasi yang dipilih ATS
Contoh metode GC divalidasi untuk analisis kuantitatif dipilih ATS disediakan
di bawah ini. Metode B tidak memerlukan derivatisasi, sedangkan metode C
membutuhkan sililasi.
Standar ATS dijelaskan dan solusi sampel dan konsentrasi mereka dirancang
untuk digunakan dengan kolom kapiler dan prosedur yang diuraikan di bawah ini.
Penggunaan alternatif
kolom dan sistem GC mungkin memerlukan perubahan baik dari segi komposisi relatif
dan konsentrasi masing-masing komponen.
Peralatan dan reagen
_ Kelas B volumetrik gelas atau lebih baik.
_ Gas Chromatograph dilengkapi dengan detektor ionisasi nyala
_ Keseimbangan Analytical mampu menimbang dengan akurasi 0,0001 g.
_ Semua reagen harus dari kelas reagen analitis.
Metode B: metode kalibrasi Multiple-titik tanpa derivatisasi
Metode B adalah metode divalidasi untuk analisis GC kuantitatif underivatized ATS,
khususnya berikut: amfetamin, metamfetamin, MDA, MDMA, MDEA dan
MBDB.
Pembuatan larutan baku internal (IS): Phenylbenzylamine (PBA)
Timbang dengan akurat 0,3-0,4 g PBA ke dalam labu volumetrik 500 ml dan encerkan
sampai
Volume dengan kloroform untuk memberikan larutan standar internal 0,6-0,8 mg / ml.
Pembuatan larutan standar ATS (solusi kalibrasi GC)
Larutan stok standar harus mengandung semua senyawa kepentingan dalam konsentrasi
sekitar 1000 mg / l. Mereka dapat disimpan dalam botol tertutup di lemari es sampai
satu tahun. Untuk persiapan larutan stok:
(A) akurat beratnya sekitar 1000 mg dari senyawa (s) dari bunga menjadi
1000 ml volumetrik labu dan membuat ke tanda dengan air.
(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam 20 ml gelas tutup tabung. Basify
untuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes larutan amonia pekat. Akurat
menambahkan
5 ml kloroform.
(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah. Dengan
menggunakan pipet tetes,
mentransfer sekitar 1 ml lapisan kloroform melalui natrium sulfat anhidrat
66 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
ke dalam gelas kecil. Larutan standar ini tidak boleh dibiarkan lebih dari setengah
satu jam sebelum digunakan untuk kalibrasi.
(D) Untuk penyusunan standar kalibrasi untuk 5-titik kalibrasi, mempersiapkan
tingkat yang berbeda sebagai berikut:
Penyusunan standar kalibrasi 5-point
Kalibrasi ATS standar IS solusi Approx. konsentrasi
solusi tingkat (_L) (_L) CHCl3 (_L) dari ATS-garam (mg / l)
Level 1 20 100 880 20
Level 2 40 100 860 40
Level 3 60 100 840 60
Level 4 80 100 820 80
Tingkat 5 100 100 800 100
Pembuatan larutan sampel ATS (tidak diketahui sampel ATS)
Secara umum, tetapi khusus untuk analisis kuantitatif, menghomogenkan sampel sebelum
memulai
tes atau sub-sampling.
(A) Timbang dengan akurat jumlah sampel yang cukup ke dalam labu 25 ml volumetrik
untuk mendapatkan
konsentrasi akhir sekitar 0,2-1 mg / ml analit. Membuat untuk menandai dengan
air. (Catatan: Jumlah sampel untuk ditimbang akan tergantung pada diantisipasi
kemurnian seperti yang ditunjukkan oleh metode skrining awal. Sebagai contoh, jika
kemurnian diantisipasi adalah sekitar 40%, jumlah sampel yang digunakan harus approx.
60 mg.)
(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam 20 ml gelas tutup tabung. Basify
untuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes larutan amonia pekat. Akurat
menambahkan
5 ml kloroform.
(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah. Dengan
menggunakan pipet tetes,
mentransfer sekitar 1 ml larutan sampel ini melalui anhidrat natrium
sulfat ke dalam gelas kecil. Ukur 100 _L larutan sampel, 100 _L internal
larutan standar dan 800 _L kloroform ke dalam sampel GC vial.
(D) Inject ke dalam kromatografi gas.
Kondisi operasi GC
Untuk analisis kuantitatif, GC dilengkapi dengan autosampler adalah lebih baik. Sekarang
mengakui bahwa penggunaan instrumen yang berbeda mungkin memerlukan penyesuaian
dalam operasi
kondisi.
Kolom: HP-5, 0,32 mm x 30 m x 0,5 _m
Gas pembawa: Helium di sekitar. 1,2 ml / menit (tekanan kepala 12 psi)
Suhu oven: 100 C selama 4 menit, kemudian 10 C / menit sampai 270 C, dan tahan
selama
1 menit
Volume Injeksi: 1 _L
Suhu injektor: 190 C
Detector: Api detektor ionisasi pada 270 C
Lampiran IV. Metode GC divalidasi untuk kuantisasi dipilih ATS 67
Waktu retensi perkiraan
Amphetamine 7.18 min.
Methamphetamine 8.25 min.
MDA 13.16 min.
MDMA 13.93 min.
MDEA 14.58 min.
MBDB 15.17 min.
Phenylbenzylamine (IS) 16.33 min.
Kafein 17.92 min.
Ketamine 18.33 min.
Perhitungan
Untuk analisis rutin, perangkat lunak komputer akan melakukan perhitungan setelah
selesai
dari jangka analitis. Hasilnya akan otomatis dicetak pada laporan dan dinyatakan sebagai
% B / b dari suatu analit sebagai dasar (yaitu, berat analit, relatif terhadap sampel berat).
Metode C: Metode Kalibrasi menggunakan BSTFA sebagai reagen derivatisasi
(Satu atau beberapa titik kalibrasi)
Metode C adalah metode divalidasi untuk analisis GC kuantitatif diderivatisasi ATS,
khususnya
berikut: efedrin, pseudoefedrin, BDMA (4-bromo-2 ,5-dimethoxyamphetamine)
dan 2C-B
Penggunaan metode C secara khusus direkomendasikan untuk ATS sampel yang
mengandung efedrin
dan / atau pseudoefedrin, yang sering tidak diselesaikan dari analit lain dan menghasilkan
puncak luas. Untuk rincian lebih lanjut tentang derivatisasi lihat lampiran VII.
Pembuatan larutan baku internal (IS): Phenylbenzylamine (PBA)
Sama seperti untuk metode B, di atas.
Pembuatan larutan standar ATS (solusi kalibrasi GC)
Untuk titik kalibrasi beberapa menggunakan BSTFA, mempersiapkan berbagai tingkat
analog dengan
Metode B, di atas, sebagai berikut: mengambil 20, 40, 60, 80 dan 100 _L dari ATS larutan
stok standar,
untuk setiap tingkat kalibrasi, tambahkan 100 _L larutan baku internal, dan 50 _L dari
BSTFA. Tambahkan kloroform untuk membuat sampai 1ml.
Pembuatan larutan sampel (sample diketahui ATS)
(A) Timbang dengan akurat sampel ke dalam labu 25 ml volumetrik untuk mendapatkan
konsentrasi akhir
sekitar 0,2-1 mg / ml analit. Buat tanda dengan air. (Catatan:
Jumlah sampel yang akan ditimbang akan tergantung pada kemurnian diantisipasi seperti
yang ditunjukkan)
dengan metode skrining awal. Sebagai contoh, jika kemurnian diantisipasi adalah tentang
40%, jumlah sampel yang digunakan harus approx. 60 mg.)
(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam 20 ml gelas tutup tabung. Basify
untuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes larutan amonia pekat. Akurat menambahkan
5 ml kloroform.
68 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah. Dengan
menggunakan pipet tetes,
mentransfer sekitar 1 ml larutan sampel ini melalui natrium sulfat anhidrat
ke dalam gelas kecil. Ukur 100 _L larutan sampel, 100 _L internal
larutan standar, 750 _L kloroform dan 50 _L dari BSTFA menjadi sampel GC botol.
(D) Inject ke dalam kromatografi gas.
Kondisi operasi GC
Kolom: HP-5, 0,32 mm x 30m x 0,5 _m
Gas pembawa: Helium di sekitar. 1,2 ml / menit (tekanan kepala 12 psi)
Suhu oven:. 100 C selama 4 menit, kemudian 5 C / menit sampai 200 C, kemudian 10 C / menit
untuk
270 C, dan tahan selama 1 menit
Volume Injeksi: 1 _L
Suhu injektor: 190 C
Detector (FID): 270 C
Waktu retensi perkiraan
Pseudoefedrin-TMS 14.99 min.
Ephedrine-TMS 15.16 min.
Phenylbenzylamine-TMS (lS) 23.49 min.
Kafein 26.22 min.
Ketamine-TMS 26,75 min.
2C-B-TMS 27.91 min.
Perhitungan
Untuk analisis rutin, perangkat lunak komputer akan melakukan perhitungan setelah selesai
dari jangka analitis. Hasilnya akan otomatis dicetak pada laporan dan dinyatakan sebagai
% B / b dari suatu analit sebagai dasar (yaitu, berat analit, relatif terhadap sampel berat).
69
Lampiran V. metode HPLC untuk divalidasi
kuantisasi yang dipilih ATS
Di bawah ini adalah metode divalidasi untuk kuantisasi HPLC yang dipilih zat terlarut ATS termasuk
amfetamin, metamfetamin, phentermine dan MDMA.
Metode HPLC untuk kuantisasi ATS
Persiapan standar ATS dan solusi sampel
ATS larutan standar
Timbang jumlah yang tepat dari standar ATS (s) ke dalam labu volumetrik untuk mendapatkan akhir
konsentrasi sekitar 0,50 mg / ml. Encerkan dengan volume dengan metanol.
ATS larutan sampel
Timbang jumlah yang tepat dari sampel ke dalam labu volumetrik sehingga phenethlamine akhir
Konsentrasi adalah sekitar bahwa larutan standar. Encerkan dengan volume
metanol.
Kondisi operasi HPLC
Kolom: 5 _m Luna C18 (Phenomenex, Torrance, CA, USA) 150 x
3,0 mm
Suhu kolom: 35 C
Injeksi: 5 _L
Fase gerak: 10% asetonitril, 90% (50 mM fosfat + 50 mM trietanolamin,
pH 2.2), laju alir 1,0 ml / menit
Panjang gelombang UV: 210 nm
penyangga aThe dibuat dengan melarutkan 22,5 ml asam fosfat terkonsentrasi menjadi 4 liter HPLC
air kelas. Sekitar 25 ml trietanolamin ditambahkan perlahan untuk menyesuaikan solusi untuk pH
2.2.
Kali migrasi relatif perkiraan
Nicotinimide 0,28
Phenethylamine 0.55
Fenilpropanolamin 0.56
Doksilamin 0.56
Prokain 0.62
Ephedrine 0.64
Pseudoefedrin 0.65
Amphetamine 0.82
Acetominiphen 0.93
70 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Kali migrasi relatif perkiraan (lanjutan)
Methamphetamine 1.00 (2,7 min)
MDA 1.00
Kina 1.04
Chloroquine 1.09
Dimethylamphetamine 1.12
MDMA 1.18
Kafein 1.48
Lidocaine 1.50
MDEA 1.55
Ketamine 1.95
Klorfeniramin 1.99
P2P 3.17
Safrol 3.50
Quaifenesin 3.61
Aspirin 5.09
Perhitungan
Persentase konten ATS sampel dihitung dari luas puncak ATS, dan
daerah puncak dan konsentrasi standar ATS relevan.
Bacaan lebih lanjut
Malone, J.V. (1998). Campuran HPLC Kuantifikasi secara sembunyi-sembunyi Diproduksi dari
Amphetamine dan Methamphetamine, mikrogram, vol. 31, hlm 304-307
71
Lampiran VI. Metode CE divalidasi untuk kuantisasi
terpilih ATS
Di bawah ini adalah metode divalidasi untuk kuantisasi CE yang dipilih zat terlarut ATS termasuk
amfetamin, metamfetamin, MDA, MDMA dan MDEA pada instrumen Agilent HP3D CE.
Perhatikan bahwa kondisi seperti panjang kapiler, suhu kapiler, tegangan, siram
kali dan tekanan dan parameter injeksi bisa berubah dengan instrumen lain
produsen.
Metode kapiler Dinamis dilapisi untuk kuantisasi ATS
Persiapan standar ATS dan solusi sampel
Pelarut Injection
Timbang 1.034 mg natrium fosfat monobasa menjadi 100 ml labu ukur. Encerkan dengan
Volume air kelas HPLC (menyesuaikan pH sekitar 2,6 menggunakan asam fosfat
dan menambahkan setetes demi setetes). Mentransfer isinya ke dalam labu 2000 ml volumetrik
dengan bantuan HPLC
air kelas. Encerkan dengan volume air HPLC grade. Solusi akhir ini mengandung 3,75 mM
fosfat, pH 3,2. Atau, mentransfer seluruh isi (dengan bantuan air HPLC grade)
botol ml 250 injeksi konsentrat pelarut (MicroSolv, Eatontown, NJ, USA) menjadi 5
liter labu. Encerkan dengan volume air HPLC grade.
ATS larutan standar internal yang
Timbang jumlah yang tepat dari N-butylamphetamine HCl (atau internal yang sesuai
standar) ke dalam labu volumetrik untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar 1,0 mg / ml.
Encerkan dengan volume pelarut injeksi.
ATS larutan standar
Timbang jumlah yang tepat dari standar ATS (s) ke dalam labu volumetrik untuk mendapatkan akhir
konsentrasi sekitar 0,08 mg / ml. Pipet jumlah yang tepat dari standar internal yang
solusi untuk mendapatkan konsentrasi akhir 0,1 mg / ml. Encerkan dengan volume injeksi
pelarut.
ATS larutan sampel
Timbang jumlah yang tepat dari sampel ke dalam labu volumetrik sehingga phenethylamine akhir
Konsentrasi adalah sekitar bahwa larutan standar. Pipet jumlah yang tepat
larutan standar internal untuk mendapatkan konsentrasi akhir 0,1 mg / ml. Encerkan dengan
Volume dengan pelarut injeksi.
72 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
Kondisi operasi CE (akiral)
Kapiler: silika Bare 32 cm (23,5 cm untuk detektor window) sebesar 50 _m id
Suhu kapiler: 15 C
Conditioning: 1 menit 0,1 N natrium hidroksida; Air 1 menit; 1 menit
CElixir A (MicroSolv); 2 menit CElixir B, pH 2.5
(MicroSolv).
Injeksi: 50 milibar x 2 kedua sampel diikuti oleh 35 milibar x
1 detik air
Jalankan penyangga: CElixir B, pH 2.5
Voltage: 10 kV
Panjang gelombang UV: 195 nm
Kali migrasi relatif perkiraan
Doksilamin 0.76
Klorfeniramin 0.78
Kina 0.80
Beta-phenethylamine 0.81
Chloroquine 0.81
Nicotinimide 0.84
Amphetamine 0.87
Metamfetamin 0.88
Prokain 0.88
MDA 0.90
Norpseudoephedrine 0.91
MDMA 0.91
Norephedrine 0.92
Pseudoefedrin 0.92
Tetracaine 0.93
Ephedrine 0.93
Fenilefrin 0.95
MDEA 0.96
Ketamine 0.96
Phenyltoxylamine 0.97
N-Butylamphetamine (IS) 1,00 (4,6 min)
Methorphan 1.00
Lidocaine 1.03
Benzokain 1.25
Acetominophen 2.11
Kafein 2.14
Quaifenesin 2.14
P2P 2.24
DMSO (penanda netral) 2.40
Aspirin 2.71
Perhitungan
Isi (%) yang tidak diketahui ATS dihitung dari luas puncak nya, dan daerah puncak
dan konsentrasi standar ATS, relatif luas puncak standar internal
(Standar dan sampel).
Lampiran VI. Metode CE divalidasi untuk kuantisasi dipilih ATS 73
Kondisi operasi CE (kiral)
Kapiler: silika Bare 32 cm (23,5 cm untuk detektor window) sebesar 50 _m id
Suhu kapiler: 15 C
Conditioning: 1 menit 0,1 N natrium hidroksida; Air 1 menit; 1 menit
CElixir A (MicroSolv); 2 menit CElixir B, pH 2.5 + 50 mM
2-hidroksipropil-_-Cyclodextrin (MicroSolv).
Injeksi: 50 milibar x 2 kedua sampel diikuti oleh 35 milibar x
1 detik air
Voltage: 20kV
Panjang gelombang UV: 195 nm (bandwidth 10 nm)
Kali migrasi relatif perkiraan
l-Norpseudoephedrine 0.81
d-Norephedrine 0.83
l-Norephedrine 0.83
l-Pseudoephedrine 0.83
l-Amphetamine 0.85
d-Ephedrine 0.86
d-Amphetamine 0.86
l-Ephedrine 0.87
l-Metamfetamin 0.87
d-Norpseudoepherine 0.88
d-Metamfetamin 0.89
d-Pseudoephedrine 0,90
N-Butylamphetaminea 1.00 (3.75 min)
N-Butylamphetaminea 1.02
MDAa 1.03
MDAa 1.04
MDMAa 1.05
MDMAa 1.07
MDEAa 1.10
MDEAa 1.12
iklan atau l-enansiomer
Bacaan lebih lanjut
Lurie, IS, Hays, PA dan Parker, KP (2004). Kapiler Elektroforesis Analisa terhadap
Luas Ragam Obat sitaan Menggunakan kapiler Sama dengan Dynamic Coatings,
Elektroforesis., Vol. 25, hlm 1580-1591.
Lurie, IS, Bethea, MJ, McKibben, TD, Hays, PA, Pellegrini, P., Sahai, R., Garcia,
A. G. dan Weinberger R. (2001). Penggunaan dinamis Kapiler Coated untuk Rutin yang
Analisis Methamphetamine, Amphetamine, MDA, MDMA, MDEA dan Kokain menggunakan
Kapiler Elektroforesis, J. Forensik Sci., Vol. 46, hlm 1025-1032.

75
Lampiran VII. Derivatizations
Derivatisasi dari ATS tidak wajib, karena mayoritas ATS adalah setuju untuk GC
analisis dan termal stabil. Namun, derivatisasi dari ATS (primer atau sekunder
amina) meningkatkan sifat kromatografi mereka dengan mengurangi yang tidak diinginkan dan tidak
spesifik
adsorpsi kolom serta gangguan matriks.
Metode derivatisasi direkomendasikan di bawah ini bekerja berhasil untuk sebagian besar
sering ditemui ATS, namun, dalam kesempatan langka, kondisi reaksi seperti
waktu reaksi atau suhu harus disesuaikan.
Catatan analitis
Jika derivatisasi dipilih sebagai metode persiapan sampel, ekstraksi sampel
harus dilakukan seperti yang dijelaskan dalam bagian yang relevan di atas. Setelah
ekstraksi, pelarut harus diuapkan sampai kering di bawah aliran lembut
nitrogen pada suhu kamar, atau alternatif pada 30 C. Untuk menghindari hilangnya analit
oleh penguapan, langkah ini harus dilakukan sangat hati-hati, terutama untuk kuantitatif
ATS analisis. Cara yang paling efisien untuk mencegah penguapan analit
adalah untuk menguapkan pelarut sekitar 1 ml dan kemudian menambahkan beberapa tetes (50 _L)
pelarut dengan titik didih tinggi (kiper pelarut), misalnya, dimetilformamida.
Setelah penambahan penjaga pelarut, penguapan lebih lanjut harus melanjutkan
hati-hati sampai hanya film tipis pelarut tetap. Sampel sekarang siap untuk
derivatisasi menggunakan salah satu metode yang dianjurkan.
Prosedur derivatisasi
Acetylations
Anhydride Heptafluorobutyric (HFBA)
Prosedur A (asetilasi dengan anhidrida)
Tambahkan 50 _L dari HFBA dengan residu kering diekstraksi ATS dalam reacti-botol. * Cap botol,
kocok
selama 30 detik dan menetaskan selama 20 menit pada 75 C. Menguap kelebihan reagen. Menyusun
kembali
residu kering dalam 50 _L etil asetat, dan menyuntikkan 1-2 _L ke dalam kolom GC.
Prosedur B (asetilasi dengan anhidrida dalam adanya katalis dasar)
Tambahkan 50 _L dari 0,5 M kalium hidroksida dengan residu kering diekstraksi ATS diikuti oleh
500 _L toluena. Setelah pencampuran dan sentrifugasi, mentransfer lapisan organik menjadi bersih
* Reacti-botol adalah botol sekrup-topi terbuat dari tebal, tahan suhu kaca, biasanya dengan sebuah
conically
berbentuk bagian bawah di dalam botol. Dengan tidak adanya botol khusus, derivatisasi dapat
dilakukan
dalam Teflon berlapis tabung sekrup-topi.
76 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin
tabung reaksi, dan menambahkan 50 _L dari HFBA. Aduk dan segera menambah 500 _L dari 10%
w / v natrium bikarbonat dengan pencampuran kontinu. Centrifuge tabung reaksi sampai atas
lapisan toluena dipisahkan. Inject 1-2 _L lapisan toluena ke dalam kolom GC.
Anhydride Pentafluoroacetic (PFAA)
Tambahkan 50 _L dari PFAA dengan residu kering diekstraksi ATS dalam reacti-botol. Cap botol, kocok
selama 30 detik dan menetaskan selama 20 menit pada 75 C. Menguap kelebihan reagen. Menyusun
kembali
residu kering dalam 50 _L etil asetat, dan menyuntikkan 1-2 _L ke dalam kolom GC
Trifluoroacetic anhydride (TFAA)
Tambahkan 100 _L etil asetat dan 50 _L dari TFAA dengan residu kering diekstraksi ATS di
a reacti-botol. Cap botol, kocok selama 30 detik dan menetaskan selama 20 menit pada 60 C.
Menguap
kelebihan reagen. Menyusun kembali residu kering dalam 50 _L etil asetat, dan menyuntikkan 1-2 _L
ke dalam kolom GC.
N-Methylbis-trifluoroacetamide (MBTFA)
Tambahkan 500 _L MBTFA dengan residu kering diekstraksi ATS dalam reacti-botol. Cap botol, kocok
selama 30 detik dan menetaskan selama 30 menit pada suhu kamar. Menguap kelebihan reagen.
Menyusun kembali residu kering dalam 50 _L etil asetat, dan menyuntikkan 1-2 _L ke GC
kolom.
Sejak MBTFA elutes awal dalam analisis GC, penguapan kelebihan reagen mungkin tidak
diperlukan jika konsentrasi analit diantisipasi akan cukup besar untuk injeksi langsung
dari campuran derivatizaion.
Bacaan lebih lanjut
M. Doneke, J. Chromatography, vol. 78, p. 273, (1973)
Sililasi
N-Methyl-N-ters-butil-dimetilsilil trifluoroacetamide (MTBSTFA)
Tambahkan 100 _L asetonitril dan 150 _L dari MTBSTFA dengan residu kering diekstraksi ATS.
Tutup botol dan panas selama 15 menit pada 90 C. Tinggalkan sampel pada suhu ambien untuk
lain 2 jam, atau lebih, terutama jika gugus amino sekunder terhalang harus silylized.
Tambahkan 500 _L asetonitril, aduk, dan menyuntikkan 1-2 _L ke dalam kolom GC (jika analit rendah
konsentrasi diantisipasi, sampel dapat disuntikkan langsung tanpa pengenceran
dengan asetonitril).
Atau, untuk menghindari puncak MTBSTFA awal kromatogram GC, menggabungkan kering
residu diekstraksi ATS dengan 100 _L asetonitril dan 100 _L MTBSTFA dalam 3 ml
vial. Seal vial dan memungkinkan campuran untuk berdiri selama 2 jam. Tambahkan 100 _L air untuk
menghidrolisis setiap
tidak bereaksi MTBSTFA. Tambahkan 250 _L dari n-heksana, campuran dengan penuh semangat dan
centrifuge. Menuangkan
lapisan heksana atas dan menyuntikkan 1-2 _L ke dalam kolom GC.
Lampiran VII. Derivatizations 77
Bacaan lebih lanjut
R. Melgar, R. Kelly C., J. Anal. Toxicol., Vol. 17 (November / Desember, 1993), p. 399.
N, O-bis-[(trimethylsilyl) trifluoroacetamide] (BSTFA)
Tambahkan 50 _L dari BSTFA dan 100 _L asetonitril dengan residu kering diekstraksi ATS di
a reacti-botol. Cap botol, kocok dan menetaskan selama 15 menit pada 70 C. Inject 1-2 _L ke GC
kolom.
Derivatisasi kiral
ATS substrat diastereoisomer dapat dibuat dengan menggunakan berbagai reagen yang berbeda
seperti
acylchlorides, alkylsulphonates, isothiocyanates, chloroformates, tetapi dua tercantum di bawah ini
paling populer.
R (+) / S (-)-_-metoksi-_-(trifluoromethyl)-asam fenilasetat (Mosher acid), atau
R (+) / S (-)-_-metoksi-_-(trifluoromethyl)-asam fenilasetat klorida (asam klorida Mosher)
Larutkan sampel residu kering diekstraksi ATS dalam 1 ml THF dan campuran dengan 0,5 ml
0,2 M larutan asam Mosher dalam THF dalam reacti-botol dengan tutup sekrup Teflon berlapis.
Tambahkan 0,5 ml dari 10% b / v larutan natrium bikarbonat, tutup botol dan panas pada 65 C
selama 1 jam. Ekstrak fase air dengan kloroform, kering dengan magnesium sulfat, dan
menguap sampai kering. Menyusun kembali residu dalam pelarut yang cocok untuk analisis GC
(Misalnya, kloroform, lihat bagian analisis GC kualitatif, di atas).
Alih-alih asam Mosher, para klorida yang sesuai dapat digunakan. Ini tersedia secara komersial,
atau dapat dibuat dengan refluks asam dengan tionil klorida. Asam klorida adalah
biasanya lebih reaktif, meskipun asam Mosher itu sendiri menghasilkan derivatisasi kuantitatif
sebagian besar amina, dengan pengecualian efedrin dan pseudoefedrin. Mosher yang asam atau
turunannya dapat digunakan sebagai reagen untuk kedua GC dan analisis HPLC.
N-trifluoroasetil-L-prolyl klorida (TPC, atau TFAP-Cl)
Larutkan sampel residu kering diekstraksi ATS dalam 2 ml kloroform kering. Tambahkan 4 ml
TPC reagen. Aduk atau kocok campuran, dan kemudian menambahkan 40 mg trietilamina kering.
Terus aduk selama 15 menit. Cuci dengan 3 ml dari 6 N HCl dan kemudian dengan air. Menambahkan
MgSO4 dan memungkinkan campuran untuk berdiri selama 15 menit. Inject 1-2 _L ke dalam kolom GC.
TPC dikenal untuk menghasilkan turunan stabil hampir semua ATS termasuk Kelompok efedrin.
Sekarang
lebih setuju untuk analisis GC