Pendahuluan

Teknik genetik tumbuhan modern melibatkan

transfer gen yg diinginkan ke dlm genom tanaman
lalu regenerasi pada seluruh bagian tanaman dari
jaringan yang berubah bentuk.
Umumnya, metode yg paling luas digunakan untuk
mentransfer gen ke dalam tanaman dengan
perubahan bentuk melalui media (tak langsung)-
Agrobacterium.
Apa yg dimaksud tanaman Transgenic
Hasil Tanaman transgenik mengandung sebuah gen atau
banyak gen yg telah diaktifkan saat disisipkan
Tanaman memperolehnya selama polinasi
(Instead of the plant acquiring them through pollination)
Gen sekuen yang disisipkan (dikenal sbg transgen)
dpt berasal dari tanaman yg tdk ada hubungannya,
atau dari yg spesiesnya berbeda
Jagung Transgenik Bt mengandung sebuah gen dari
bakteri yg menghasilkan insektisidanya sendiri
Tanaman yg mengandung transgen sering disebut modifikasi
genetik atau GM crops (tanaman modifikasi genetik)
Kenyataanya semua tanaman yg telah dimodifikasi genetik
dari organisme liar/ umum (wild) dengan domestikasi,
seleksi dan pembiakkan yg diatur dlm periode yg lama.
Kenapa membuat hasil tanaman transgenik?
Pembiakkan tanaman mencoba
untuk mengumpulkan kombinasi
gen pada panen tanaman
Membuatnya berguna
dan dapat berproduktif
Hasil panen tinggi atau
Mengubah kualitas,
resisten hama atau penyakit,
atau toleran thd panas, dingin
dan kering.
Tergantung
di mana
Dan untuk
tujuan apa
Tanaman
dikembangkan
Mengkombinasi gen terbaik pada satu tanaman merupakan
proses yang sulit dan lama
Pembiakkan tanaman tradisional terbatas pada penyilangan buatan
tanaman dengan spesies yg sama atau spesies yg hubungannya
dekat untuk membawa gen berbeda bersama.
Memungkinkan membiakkan tanaman utk membawa bersama gen yg
berguna pada satu tanaman dari sumber kehidupan yg luas,tidak hanya
dari hasil dari satu spesies atau tanaman yg hubungannya dekat.
Menyediakan berarti utk identifikasi dan isolasi kontrol gen
karakteristik spesifik
pada satu jenis organisme
Utk memindahkan gen-gen kopian ke organisme lain yg sama skali beda,
yg kemudian jg akan memiliki karakter2 itu.
Teknik Transgenik
Meluaskan kemungkinan di luar timbulnya keterbatasan
oleh persilangan-polinasi tradisional dan teknik seleksi.
Bagaimana Membuat Tanaman Transgenik?
Pengenalan DNA
Merancang Gen utk Disisipkan
Lokasi Gen Sifat Tanaman
Menyimpan informasi genetik organisme dan
orchestrates proses metabolisme kehidupan
Langkah palig terbatas pada proses transgenik
Bagaimana gen diregulasi,
Apakah efek lain dpt dimiliki tanaman itu,
Bagaimana gen itu berinteraksi dengan gen aktif lain
di jalur biokimia yg sama.
Pertama gen yg sudah diisolasi dan diklon
(meluas pada vector bakteri),
itu harus mengalami beberapa modifikasi
sebelum disisipkan scr efektif ke dalam tanaman.
Komponen untuk menyukseskan integration (keseluruhan)
dan ekspresi
Promoter
sequence
Gen klon
modifikasi
termination
sequence
selectable
marker gene
(tanda gen terpilih)
Harus ditambahkan pada gen agar terekspresikan tepat
Tombol on/off yg mengontrol saat dan di mana
dalam tanaman, gen akan diekspresikan the gene
will be expressed
Biasanya digunakan promoter pembentuk yaitu
CaMV35S
Untuk menghasilkan ekspresi ygbagus pada tanaman
Sinyal pada mesin sel yg pd akhir
gen sekuen dapat dicapai
Ditambahkan pada gen "construct (pembangun) utk
mengidentifikasi sel tanaman atau jaringan yg telah sukses
integrasi transgen.
Metode pemindahan sel dan jaringan tanaman:
Metode "Gene Gun"
microprojectile bombardment (membom) atau biolistics
Khususnya digunakan dlm pemindahan spesies
monocot (monokotil)
Metode Agrobacterium
Sukses dipraktekkan pada dikotil
Dipertimbangkan memilih meode gene gun
Karena frekuensi yg besar dari sisipan
single-site dari DNA asing,
Membuatnya lebih mudah untuk diamati.
Metode Agrobacterium dari Pemindahan Tanaman
Agrobacterium tumefaciens terjadi secara alami bakteri patogen di dalam tanah yg
memiliki kemampuan untuk mentransfer DNAnya ke genom tanaman
Itu disebabkan penyakit crown gall (bintik) pada banyak bagian ornamental
(perhiasan) dan buah tanaman
Sebuah tumefaciens hanya dapat menjangkit pada luka tanaman
Saat akar tanaman atau batang pohon terluka akan menimbulkan tanda kimia
Dalam merespon sinyal2 itu, gen vir dari A. tumefaciens menjadi aktif dan langsung
Terjadi rangkaian kejadian yg diperlukan untuk transfer T-DNA dari
Ti plasmid ke kromosom tanaman
DNA dalam sebuah sel A. tumefaciens terkandung
di dalam kromosom bakteri
Pada struktur lain diketahui sebagai sebuah Ti (tumor-inducing, menyebabkan) plasmid.
Ti plasmid mengandung
luasan DNA terbatas T-DNA (panjang ~20 kb) yg ditransfer
ke sel tanaman dalam proses penjangkitan (infeksi).
rangkaian gen vir (kejahatan/kebisaan) yg langsung pada proses infeksi.

Peneliti telah mengubah penyebab tumor potongan T-DNA,
Sambil menerima batas wilayah T-DNA dan gen vir
transgen disisipkan di antara batas wilayah T-DNA,
di mana itu ditransfer ke sel tanaman
Dan menjadi bersatu dalam kromosom tanaman
Seleksi dan Regenerasi
Jaringan tanaman ditransfer ke medium yg dipilih yg mengandung antibiotik atau
herbisida
Hanya tanaman mengekspresikan marker gene(gen yg ditandai)
yg dipilih akan bertahan (survive)
Itu mengasumsikan kalo tanaman2 ini juga akan memiliki transgene of interest
(kebutuhan transgen)
Regenerasi seluruh bagian tanaman
Embrio yg belum masak/dewasa ditumbuhkan di bawah kontrol kondisi lingkungan
dalam serangkaian media yg mengandung nutrisi dan hormon
Pertama seluruh bagian tanaman dihasilkan dan memproduksi benih,
evaluasi dari permulaan keturunan