LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA

SALIVA
Oleh :
Afifi Rahmadetiassani 083112620150008
LABORATORIUM KIMIA FAKULTAS BIOLOGI
UNIVERSITAS NASIONAL JAKARTA
2010
0
Pendahuluan
Dalam laporan ini akan membahas kegiatan praktikum tentang salia! "aat
melakukan praktikum dilakukan beberapa u#i antra lain u#i karbohidrat$ u#i protein$ u#i
en%im amilase$ uii sulfat dan u#i fosfat! &u#uan praktikum ini adalah mengerti dan
memahami bah'a kandungan salia terdiri dari karbohidrat$ protein$ en%im amilase$
sulfat dan fosfat!
Tinjauan Pu!a"a
Dalam a'al proses pen(ernaan makanan ter#adi proses penghan(uran )ang
terdapat di dalam mulut! *akanan dipotong ke(il+ke(il agar mudah ditelan dan selama
pemotongan atau penghan(uran se(ara mekanis ini berlangsung$ kelen#ar )ang ada di
sekitar mulut mengeluarkan (airan )ang disebut salia atau ludah! Ada tiga kelen#ar )ang
mengeluarkan salia )aitu kelen#ar paratoid$ kelen#ar submandibular dan kelen#ar
sublingual! ,elen#ar sublingual adalah kelen#ar salia )ang paling ke(il dan terletak di
ba'ah lidah bagian depan! ,elen#ar submandibular atau )ang disebut #uga kelen#ar
submaksilar terletak dibelakang kelen#ar sublingual dan lebih dalam! ,elen#ar paratoid
ialah kelen#ar salia paling besar dan terletak dibagian atas mulut di depan telinga!
"alia adalah (airan )ang lebih kental daipada air biasa dan memiliki p- antara
5$.5+.$05! /ungsi salia adalah sebagai bahan pelin(ir )ang men)ebabkan makanan
mudah dikun)ah dan ditelan$ karena terdapat musin! *usin merupakan sen)a'a
kompleks protein+karbohidrat atau glikoprotein! "elain itu fungsi salia dapat digunakan
sebagai pelembab mulut$ menetralkan asam dari makanan$ dan lain sebagain)a!
"aat melakukan u#i karbohidrat penambahan asam sulfat pekat pada salia akan
akan men)ebabkan karbohidrat mengalami dehuidaratasi sehingga membentuk furfural
atau turunann)a! ,emudian bereaksi dengan 0+naftol membentuk sen)a'a ber'arna
ungu kemerah+merahan! "alia mengandung protein dan merupakan komponen utama
dalam sel hidup! 1rotein berfungsi sebagai unsur pembentuk struktur sel$ sebagai protein
aktif seperti en%im$ hormon$ pemba'a O2$ dan lain+lain! 1embuktian adan)a protein di
dalam salia dengan pemberian pereaksi 2iuret dan akan menghasilkan 'arna ungu! -al
ini dikarenakan gugus 3 4O dan 3 5- dari ikatan peptida dalam molekul protein bereaksi
dengan ion 4u
26
dalam suasana alkali membentuk sen)a'a kompleks 4u 3 5a 3 2iuret!
1
4iri sel hidup adalah terdapat proses metabolisme )ang diperantai oleh suatu
protein )ang disebut en%im! 7n%im merupakan katalisator protein )ang memper(epat
reaksi kimia dalam makhluk hidup atau dalam sistem biologik! "alah satu en%im )ang
terdapat pada makhluk hidup adalah en%im amilase! 7n%im tersebut di dalam salia
berfungsi untuk men(erna amilum men#adi amilase! "aat iodium ditambahkan pada
amilum )ang diberi en%im amilase )ang berasal dari salia tidak akan menghasilkan
'arna biru dan reaksi kimian)a adalah :
7n%im amilase
Amilum *altosa
8biru dengan iodium9 8tidak ber'arna dengan iodium9
"aat u#i sulfat$ ion sulfat dalam suasana asam akan mengendap pada penambahan
ion barium dan reaksi kimian)a adalah :
2a
26
6 "O:
2+
; 2a"O: <
endapan putih
"edangkan saat u#i fosfat$ion fosfat akan bereaksi dengan ion molibdat dalam
suasana asam sehingga membentuk sen)a'a ber'arna biru!
Ala!# $ahan dan %a&a "e&ja
=#i ,arbohidrat
Alat :
a! &abung reaksi 1)re>
b! Rak tabung reaksi
(! 1ipet tetes
2ahan :
a! "alia
b! ?arutan glukosa
(! 1ereaksi *olis(h
d! -2"O: pekat
4ara ker#a :
1! 1ipet 1 m? liur ke dalam tabung reaksi )ang bersih dan kering$ tambahkan 2 tetes
pereaksi *olis(h$ lalu (ampur hingga merata!
2
2! &ambahkan perlahan+lahan 1 m? -2"O: pekat melalui dinding tabung )ang
dimiringkan!
3! 1erhatikan dan (atat terbentukn)a cincin berwarna ungu )ang ter#adi pada batas
kedua (airan!
:! ?akukan pada per(obaan terhadap larutan glukosa sebagai kontrol positif!
=#i 1rotein
Alat :
a! &abung reaksi 1)re>
b! Rak tabung reaksi
(! 1ipet tetes
2ahan :
a! "alia
b! ?arutan albumin
(! ?arutan 4u"O: 0$1@
d! ?arutan 5aO- 10@
4ara ker#a :
1! 1ipet 1 m? liur ke dalam tabung reaksi )ang bersih dan kering
2! &ambahkan 2 m? larutan 5aO- 10 @ dan 5 3 10 tetes larutan 4u"O: 0$1 @
3! 4ampur baik+baik dan amati 'arna larutan )ang terbentuk dan (atat
:! ?akukan pula per(obaan terhadap larutan albumin sebagai kontrol positif
=#i 7n%im Amilase
Alat :
a! &abung reaksi 1)re>
b! Rak tabung reaksi
(! 1ipet tetes
2ahan :
a! "alia
b! ?arutan amilum 1@
(! ?arutan ?ugol 8Aodium dalam ,alium Aodida9
3
4ara ker#a :
1! 1ipet masing+masing 1m? ?arutan Amilum 1@ ke dalam dua tabung reaksi )ang
bersih dan kering
2! 1ipet 1m? liur pada tabung A dan 1 m? akuadestilata pada tabung 2
3! 4ampur baik+baik dan setelah beberapa saat teteskan 1 tetes larutan ?ugol ke
dalam tiap+tiap tabung dan perhatikan serta (atat perubahan )ang ter#adi
=#i "ulfat
Alat :
a! &abung reaksi 1)re>
b! Rak tabung reaksi
(! 1ipet tetes
2ahan :
a! "alia
b! ?arutan -4l 1@
(! ?arutan 2a4l2 2@
d! Baram sulfat en(er
4ara ker#a :
1! 1ipet 1 m? liur )ang sudah dien(erkan 5 kali ke dalam dua tabung reaksi )ang
bersih dan kering
2! &eteskan beberapa tetes -4l 1 @ sampai larutan bereaksi asam 8gunakan lakmus9
3! &ambahkan beberapa tetes larutan 2a4l2 2@ dan perhatikan adan)a endapan!
:! 7ndapan ber'arna putih dari 2a"O: menun#ukkan adan)a sulfat di dalam liur!
?akukan pengamatan terhadap garam sulfat sebagai (ontrol positif
=#i /osfat
Alat :
a! &abung reaksi 1)re>
b! Rak tabung reaksi
(! 1ipet tetes
2ahan :
a! "alia
b! ?arutan =rea 10@
(! ?arutan ammonium molibdat 2@ dalam asam sulfat 10@
:
d! ?arutan /e"O: 5@ asam
e! Baram fosfat en(er
4ara ker#a :
a! 1ipet masing+masing 1 m? liur ke dalam dua tabung reaksi )ang bersih dan
kering!
b! &ambahkan 1 m? urea 10 @ dan 5 m? larutan amonium molibdat!
(! 4ampur baik+baik dan tambahkan /e"O: asam$ perhatikan dan (atat adan)a 'arna
biru )ang menun#ukkan adan)a fosfat! Antensitas 'arna akan bertambah bila
dibiarkan beberapa 'aktu!
'ail dan (e)$ahaan
=#i ,arbohidrat
Bahan dan Pe&ea"i Ta$un* 1 Ta$un* 2
?iur 1 m? +
?arutan Blukosa + 1 m?
1ereaksi *olis(h 2 tetes 2 tetes
-2"O: pekat 1 m? 1 m?
-asil &erbentuk (in(in
ber'arna ungu
&erbentuk (in(in
ber'arna ungu
Dilihat dari hasil per(obaan di atas$ menin#ukkan bah'a karbohidrat positif
terdapat pada salia! -al ini dikarenakan terbebtuk (in(in ber'arna ungu di kedua
tabung! 1ada tabung pertama sampel liur ditambahkan dengan pereaksi *olis(h dan
-2"O: akan membentuk (in(in ungu$ hal ini disebabkan karena penambahan asam pekat
)ang bereaksi dengan sen)a'a glukosa pada sampel liur akan men)ebabkan glukosa
pada sampel mengalami dehuidaratasi dengan asam tersebut sehingga men#adi furfural
sementara golongan heksosa men#adi hidroksi+metilfutfural! 1ereaksi Molisch )ang
terdiri atas 0+naftol dalam alkohol akan bereaksi dengan furfural tersebut membentuk
sen)a'a kompleks ber'arna ungu! Reaksi pembentukan (in(in ber'arna ungu dengan
pereaksi molish adalah :
5
=#i 1rotein
Bahan dan Pe&ea"i Ta$un* 1 Ta$un* 2
?iur 1 m? +
?arutan Albumin + 1 m?
?arutan 5aO- 10 @ 2 m? 2 m?
?arutan 4u"O: 0$1 @ 5 3 10 tetes 5 3 10 tetes
-asil &erbentuk larutan
ber'arna ungu
&erbentuk larutan ber'arna
ungu
1embahasan :
1ada albumin ter#adi perubahan 'arna dari #ernih men#adi ungu karena ion 4u
26
pada pereaksi 2iuret bereaksi dengan polipeptida )ang ada pada %at+%at tersebut sehingga
membentuk sen)a'a kompleks ber'arna ungu! -alitu #uga ter#adi pada sampel liur )ang
mengandung protein!
/ungsi larutan albumin pada per(obaan ini )aitu sebagai kontrol positif adan)a
protein sehingga dapat dibandingkan dengan tabung lain! 2iuret adalah sen)a'a dengan
dua ikatan peptida )ang terbentuk pada pemanasan dua molekul urea! Aon 4u
26
dari
pereaksi biuret dalam suasana basa akan bereaksi dengan polipeptida atau ikatan+ikatan
peptida )ang men)usun protein membentuk sen)a'a kompleks ber'arna ungu atau
iolet!
Reaksi ini positif terhadap dua ikatan peptida atau lebih$ tetapi negatif untuk asam
amino bebas atau dipeptida!
=#i Amilase
Bahan dan Pe&ea"i Ta$un* 1 Ta$un* 2
?arutan Amilum 1 @ 1 m? 1 m?
?iur 1 m? +
Akuadestilata + 1 m?
?arutan ?ugol 1 tetes 1 tetes
-asil Carna laurutan kuning Carna larutan men#adi biru
6
8+9
-al ini terlihat bah'a di dalam salia terdapat en%im amilase!! -al itu dapat
dilihat dari terbentukn)a larutan ber'arna kuning dan bukan biru pada reaksi tersebut!
/ungsi dari en%im amilase adalah mengubah amilum men#adi amilase! Amilum )ang
diberi amilase pada saat diberi iodium tidak ber'arna karena reaksi tersebut
menghasilkan sen)a'a lain )aitu maltosa! /ungsi dari larutan amilum 1@ pada
per(obaan ini adalah untuk membuktikan aktiitas en%im amilase )ang berada pada liur
sampel )ang diu#i dapat mengubah amilum men#adi amilase atau tidak! 1ada reaksi ini
kita menggunakan larutan lugol$ )ang dimaksudkan dari larutan lugol )aitu iodium )ang
dilarutkan dalam kalium iodida!
=#i "ulfat
Bahan dan Pe&ea"i Ta$un* 1 Ta$un* 2
?iur en(er 1 m? +
Baram sulfat en(er + 1 m?
-4l 1 @ 2eberapa tetes 2eberapa tetes
2a4l2 2 @ 5 3 10 tetes 5 3 10 tetes
-asil &erbentuk endapan putih &erbentuk endapan putih
1embahasan :
=#i sulfat membuktikan bah'a salia positif mengandung sulfat! -al itu dapat
dilihat dari pembentukan endapan putih 82a"O:9 akibat dari reaksi antara sulfat dalam
liur sampel dengan larutan 2a4?2! 1ada reaksi ini digunakan larutan -4l$ larutan
tersebut digunakan untuk mengasamkan liur sampel karena u#i ini dapat berlangsung
dengan baik dalam kondisi asam! Dalam melakukan u#i sulfat larutan )ang digunakan
tidak han)a -4l$ bisa sa#a dengan -2"O: atau apapun )ang #elas harus bersifat asam!
Dalam praktikum kali ini menggunakan garam sulfat en(er )ang dimana garam
tersebut sebagai kontrol positif dan dapat dibandingkan dengan tabung )ang tidak diberi
garam sulfat en(er!
=#i /osfat
Bahan dan Pe&ea"i Ta$un* 1 Ta$un* 2
?iur 1 m? +
Baram fosfat en(er + 1 m?
=rea 10 @ 1 m? 1 m?
Ammonium molibdat 5 m? 5 m?
/e"O: 5 @ asam 2eberapa tetes 2eberapa tetes
-asil ?arutan ber'arna biru ?arutan ber'arna biru
.
Pe)$ahaan +
2erdasarkan hasil data di atas$ menun#ukkan bah'a salia positif terdapat
kandungan fosfat! -al ini terlihat larutan ber'arna biru )ang men#adi tolak ukur
positifn)a suatu %at )ang terdapat di salia! ,eberadaan ion fosfat dalan salia
dilepaskan oleh larutan urea kemudian larutan tersebut ditambahkan dengan /e"O: agar
suasanan)a men#adi asam sehingga dapat bereaksi dengan larutan ammonium molibdat!
Asam tersebut digunakan untuk membuktikan adan)a ion+ion fosfat )ang terdapat pada
salia dengan membentuk sen)a'a )ang ber'arna biru!
Kei)(ulan
"aat melakukan praktikum ini$ tern)ata benar bah'a di dalam salia terdapat
kandungan karbohidrat$ protein$ en%im am)lase$ sulfat dan #uga fosfat!
,a-!a& Pu!a"a
Dalip$ Akna "u)atna! 200E! Penuntun Praktikum Biokimia! /akultas 2iologi! =niersitas
5asional! Dakarta!
1oed#iadi$ Anna dan &itin "upri)atin! 2005! Dasar-dasar Biokimia!
=niersitas Andonesia 1ress! Dakarta
*artoharsono$ "oeharsono! 1E.5! Biokimia! Bad#ah *ada =niersit) 1ress! Fog)akarta
8