ENSAYO PILOTO PARA LA BÚSQUEDA DE LA CAPACIDAD

DEGRADATIVA DE BACTERIAS AEROBIAS AISLADAS EN PISCINAS DE

RECOLECCIÓN DE LIXIVIADOS DE UN RELLENO SANITARIO  
Autores: Echeverri, Gustavo1, Perez, Rosa M1., Contreras, Adriana1, Fandiño, Jolanys1, Pión, Alvaro2.
 
1
Grupo de Investigación Microbiología y Ambiente, GIMA. Programa de Bacteriología. Universidad de San Buenaventura,
Cartagena, Colombia. gustavo.echeverri@gmail.com.
2
Ingeambiente S.A, ESP, Relleno sanitario La Paz, Director Ambiental.

INTRODUCCION
 
El Relleno Sanitario Regional LA PAZ, en Turbana, operado por la empresa INGEAMBIENTE S.A.-
ESP, utiliza el sistema de operación mediante terrazas, que provee mayor estabilidad y tiene un
manejo de lixiviados mediante filtros-canales, que los conducen a dos piscinas de tratamiento. El
lixiviado puede contaminar suelo y aguas superficiales o subterráneas, impactando por
microorganismos, sustancias tóxicas y nutrientes.
 
Buscar bacterias aerobias en lixiviados y su caracterización bioquímica, como el montaje de
experimentos piloto para ver el comportamiento de la demanda bioquímica de oxígeno (DQO) en el
tiempo, ha sido el objetivo de este trabajo, con el fin de ver la disminución de materia orgánica y a
futuro poder usar estas bacterias In Situ como una alternativa de control.
 
Se aislaron e identificaron las bacterias aerobias Cryseobacterium indologenes, Corynebacterium
aquaticum, Burkholderia cepacia, Stenotrophomona maltophilia, Streptococcus porcinus,
Lactococcus garviae, Leuconostoc pseudomesenteroides, Streptococcus intermedium,
Cryseobacterium meningoseptium. Se hicieron curvas de crecimiento a cada una de las bacterias,
mostrando fase logarítmica y estacionaria. Se Determinaron parámetros iniciales en una prueba
piloto para concretar protocolos para el ensayo de degradabilidad definitivo. Se hicieron 5 grupos
testigo, 9 cepas puras encontradas y un consorcio de 3 bacterias, para someterlos a tiempos desde
0 a 168 horas.

OBJETIVO GENERAL

Buscar bacterias aerobias con capacidad de degradar materia organica en aguas de piscinas de
recolección de lixiviados en un relleno sanitario.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

•Aislar bacterias aerobias de los lixiviados de piscinas en un relleno sanitario

•Caracterizar bioquimicamente las bacterias aisladas de estos lixiviados
•Hacer un ensayo piloto para ver el comportamiento de degradabilidad de estas bacterias,
midiendo la demanda química de oxígeno (DQO).

RESULTADOS Y CONCLUSIONES MATERIALES Y METODOS

La metodología utilizada para realizar esta investigación fue la siguiente:
       Aislamiento de Bacterias Aerobias: utilizando técnicas sencillas de aislamiento sobre medios
      Se demostró la diversidad en la microflora de bacterias en las dos piscinas de recolección de cultivo enriquecidos incubadas a 37ºC, donde posteriormente de purificaron sobre agar
de lixiviados, entre las cuales se encontraron en el mes de Noviembre, Estafilococcus capitis, nutritivo para conservarlas y seguir procedimientos de caracterización fenotípica por pruebas
Shiguella sp., Acinetobacter iwoffi, Pseudomona stucery, Flavomona oryzihabieans, bioquímicasa.
Estafilococcus saprofiticus, Enterobacter cloacae, Stenotrophomona maltophilia, y en el mes de       Identificación Bioquímica: mediante el sistema de identificación BBL Crystal
Enero Burkholderia cepacia, Enterobacter cloacae, Stenotrophomona maltophilia,      Prueba de degradabilidad en bioreactores, midiendo DQO, segun el metodo de reflujo abierto
Corynebacterium aquaticum, Leuconostoc pseudomesenteroides, Lactococcus garviae, frente a los tiempos de contacto, frente a controles y graficando para ver % degradabilidad.
Cryseobacterium indologenes, Estreptococcus intermedium, Proteus vulgaris, Estafilococcus
aureus, Cryseobacterium meningoseptium, Estreptococcus porcinus. Debido a que muchas Porcentajes de degradación de cada una de los ensayos. Horas. Curva de degradación de la materia orgánica presente en
bacterias no toleraron las condiciones adversas en las que se encontraron, se puede ver que en el lixiviado, por las bacterias no patógenas aisladas en el mes
de Enero de 2006
la época de lluvia las bacterias que crecieron fueron diferentes a las que crecieron en la época de  Ensayos 4-8 8-24 24-4 48-7 72-96 96-16 % final
10000
8 2 8
sequía. 9000
   En la fase final del ensayo entre las 96 y las 168 horas, se presenta el valor más bajo de 95.8 95.2 92.8 91.9 87.1 80.9 19.1
8000
(T1) LE + CN
materia orgánica 15.4%, por el ensayo que contiene la cepa de Burkholderia cepacia 68.8 66 59.6 58.3 48.3 40.5 59.5
7000

  La bacteria que mostró mayor capacidad de degradación de la materia orgánica fue la (T2) LNE + CN 6000
DQO

Burkholderia cepacia en un 84.6% seguida de la Stenotrophomona maltophilia que presentó un (T3) LNE 78.9 72.4 65.5 63 49.2 38.3 61.7 5000

porcentaje de 82%. 4000

(T4) LNE+ CN +1 CEPA 76.4 67.9 60.7 52.6 41.5 35.9 64.1 3000
  La bacteria Cryseobacterium indologenes presentó un porcentaje de 21.2%, de degradación de
2000
la materia orgánica presente en el lixiviado, siendo este valor el más bajo de todos los ensayos (T5)LNE+ CN + 3 CEPAS 78.7 70.8 52.7 36.2 20.9 15.7 84.3
1000
realizados. 0
(6) C. indologenes +CN 97.0 94.4 94.4 94.3 83.7 78.8 21.2
  Teniendo en cuenta el comportamiento de los testigos, se nota que el que presentó el menor 0 4 8 24
Horas
48 72 96 168

porcentaje de degradación fue el lixiviado esteril más caldo nutritivo, con un valor de 19.1%, esto (7) C. aquaticum + CN 90.8 89.7 77.3 76.9 65.4 53.9 46.1
LE+CN
LNE+3Cepa
LNE+CN
C.indologenes
LNE
C. aquaticum
LNE+1Cepa
B. cepacia
corrobora la capacidad degradativa que tuvieron las bacterias aisladas e identificadas en cada S. maltophilia
S. intermed
S. porcinus
Mezcla
L. garvariae
C. meningosept
L. pseudom

81.8 65.8 56.6 42.7 25.1 15.4 84.6

uno de los ensayos realizados. (8) B. Cepacia +CN
Porcentaje total de degradación de la
  Existen otras bacterias que también poseen capacidad de degradación de la materia orgánica (9) S. maltophilia + CN 93.8 83.5 68 50.2 30.5 18 82
materia orgánica alcanzado en cada uno de los ensayos
realizados.
presente en los lixiviados, ya que el lixiviado no esteril en el ensayo final realizado, presentó un
100
porcentaje de degradación de 61.7%. (10) S. porcinus + CN 86.7 86.7 82.6 82.4 72.7 68.4 31.6
90

 Las bacterias que se aislaron en este trabajo investigativo fueron de gran ayuda para acelerar 97.8 95.1 89.6 86.8 81.3 67.8 33.2
80

(11) L. garviae + CN 70
el proceso de degradación de la materia orgánica presente en los lixiviados. (12) L.
degradacion %
Porcentajes de

60
pseudomensenteroides
 Tomando este trabajo como un primer ensayo experimental a nivel exploratorio, se demostró +CN 82.2 67 63.4 61.8 53.1 46.7 53.3 50
40

que las bacterias presentaron la capacidad necesaria para poder degradar la materia orgánica 97.5 77.7 68 53.1 46.7 41.8 58.2
30
(13) S. intermedium +CN 20
presente en el lixiviado de las piscinas de recolección en el Relleno Sanitario Regional LA PAZ. 10
(14) C. meningoseptium +
 Con base en los datos obtenidos en esta investigación se recomienda realizar el diseño de CN 99.1 97.6 97.6 89.5 86.5 74.3 25.7 0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
una planta a pequeña escala para hacer ensayos de degradación de materia orgánica IN SITU. Bioensayos
(15) LE + CN + 3 Cepas 94 69.7 59.2 46.3 39.4 25.7 74.3
BIBLIOGRAFIA
COLLAZOS, Héctor P. Diseño y Operación De Rellenos
Sanitarios. ED. Carrera Séptima Ltda. Segunda Edición.
Capitulo 2.
KONEMAN, M.D Elmer, Diagnóstico microbiológico. ED.
Medica Panamericana. 5 ed. Capítulo 1, 4.
Manual de bacteriología II. IV semestre.
METCALF & EDDY, INC. Ingeniería de aguas residuales.
Tratamiento, vertido y reutilización. ED. Mc Graw Hill.3 ed.
Volumen I. Capítulo 3.
ORDOÑEZ, Consuelo. Evaluación Y Manejo de La
Contaminación Urbana. ICFES. 1 ed. Pág. 158.
TCHBANOGLOUS, George. THEISEN. HILL. Gestión Integral
De Residuos Sólidos. ED. Mc Graw Hill. Tomo I. Capitulo 9.
ACHA, American Public Halt Asociation. WPCA, American
wored Word asociation. WPCF, wored pollution control
federation. Standard methods for the examination of water
and waste waters. 20 ed. 1998. Capitulo 5.
E. Merck. Manual de medios de cultivo. 1994, Danmstadt,
Alemania. Págs. 138, 195,197.
Manual de bacteriología DIFCO. Medios de cultivo
deshidratado y reactivo para procedimientos de laboratorio
microbiológico y clínico. 9 ed. Pág. 24, 25, 26, 34,35.
HOLGUIN, Marta. HIGUERA, Mariana. RUBIO, Blanca.
VARGAS, Mercedes. MUÑOZ, Ana. DIAZ, Graciela. Manual De
Técnicas De Análisis Para Control De Calidad Microbiológico
Para Alimentos De Consumo Humano. 1998, Santa Fe de
Bogota. INVIMA. Págs. 15,16 17,18, 19, 36, 37,38.
ATLAS, Ronald. BARTHA, Richard. Ecología Microbiana y
Microbiología Ambiental. ED. Pearson Educación S.A. Madrid
2002. 4 ed.