LOGIKA, Vol. 9, No.

10, Maret 2003 ISSN: 1410-2315

21
ANALISIS FENOL DALAM SAMPEL AIR MENGGUNAKAN
SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF
Is Fatimah
5)
Abstract
Researchofphenolanalysisusingderivatifspectrophotometryhavebeen
investigated. Researchwasdonebycomparespectraand 1
st
derivatif
spectraof phenol dilutedinwater withspectraof phenol dilutedin
deionizedwater. Analysismethodtestedusingphenol solutioninwater
whichconcentrationknown.RecoverydatatestedusingANOVA2way.
Resultshowthatfisrtderivatifspectrophotometryhavehigheracuration
andprecissionthanregular spectrophotometry. Test of methodusing
standardcurveandaditionstandardshowedinsignificantdifference.
Keyword: fenol, analysis, spectropotometry
PENDAHULUAN
Fenol dansenyawaturunannyaadalahsenyawayangdigunakansecaraluas
sebagai bahanbakudalamduniaindustri kimiaseperti dalamindustri farmasi,
industri perminyakandanpetrokimia, industri kulit danindustri cat. Pengolahan
fenol dalambeberapaindustritersebuttentunyasangatmemungkinkansisabahan
fenoldalamlimbahterutamalimbahcair. Disisilain,fenoldansenyawaturunannya
merupakanzatberbahayadanberacun. Dalamkonsentrasitertentumasuknyafenol
danturunannyadapatmenyebabkanefekkarsinogenikpadabinatangdanmanusia.
Padakonsentrasitertentufenoldanuapfenolyangterkondensasidapatmengganggu
danmembahayakancytokhromP-450melaluikonversi menjadicytokhromP-420,
sedangkan pada konsentrasi sangat rendah dapat mengganggu aktivitas
monooksigenase. Paraklorofenolmisalnya, merupakansalahsatusenyawaturunan
fenolyangjugabanyakdigunakandalamduniaindustrisertasebagaibahanpestisida.
Efekyangditimbulkanolehsenyawaturunanfenol ini jugatakkalahberbahayanya
dibandingkanfenol, apalagimelihatpenggunaannyasebagai pestisidadalamdunia
pertanian.
Dalampengelolaanlingkungan, berbagaiupayadilakukanuntukmengurangi
pencemaranfenoldansenyawaturunannyaantaralaindenganmetodeelektrolisis,
5)
Is Fatimah, S.Si., M.Si. adalah Dosen Fakultas MIPAUniversitas IslamIndonesia
Is Fatimah, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan ...
LOGIKA, Vol. 9, No. 10, Maret 2003 ISSN: 1410-2315
22
oksidasi, ekstraksi, filtrasi melalui membrancair danmetodeadsorpsi. Upaya
pengelolaanlingkungantersebuttaklepasdari masalahdanmetodeanalisis fenol
yangdapat dilakukan. Perhatianyangcukupbesar diberikanpadakajiananalisis
fenol dalamsampel air mengingat ambangbatassenyawafenol yangsangat kecil
untukkeperluanair bersih. Metodeyangdapat digunakanuntukanalisisfenol ini
meliputi metodepemisahan, penentuandanidentifikasi fenol danturunanfenol,
sertametodekuantitatif untukmenentukankadar fenol. Dalammetodeterakhir
yang disebutkan, beberapa instrumentasi dapat digunakanseperti misalnya
kroamtografi gas/ GasChromatography (GC), Kromatografi Cair KinerjaTinggi
(HighPerformanceLiquidChromatography(HPLC),danmetodeSpektrofotometri.
Setiapmetodetersebut memiliki kelemahan. MetodeGCmisalnya, memerlukan
konsentrasiyangcukupbesardalamanalisisfenol.Dalamanalsisair, halinikadang-
kadangmemerlukanprosespendahuluanberupapenjenuhanfenoldenganadsorben
tertentu(Rhee,dkk,1998).SepertihalnyadalamGC,metodeHPLCjugamemerlukan
penjenuhanfenolapabilakonsentrasianalitterlalukecil. Dibandingkanduametode
tersebut,metodespektrofotometrimerupakansalahsatumetodeyangcukupsensitif
untukmendeteksi analitfenol dalamkonsentrasi yangrendah. Akantetapi, metode
spektrofotometriinimemilikikelemahanpadapendeteksiananalitjikaanalitberada
padasampel air yangmengandungbanyakionpengganggu. Interferensi iondan
senyawapengganggudalamsampeldapatmenyebabkankesalahandeteksi,sehingga
serapanradiasi dapat berasal dari pengganggu. Hal ini tentuakanmenyebabkan
kesalahananalisis, terutamauntukanalisiskuantitatif. Terlebihlagi dalamanalisis
fenol,sampelterlarutdalamakuadesbiasanyaakanmemberikanresponyangkurang
baguskarenaadanyapengaruhmatrikslarutan.
Untukmeminimalkankesalahananalisis dalamspektrofotometri, telah
dilakukanbeberapapengembanganmetode, antara laindenganpenggunaan
spektrofotometri derivatif. Spektrofotometri derivatif didasarkanpadapenurunan
fungsispektrayangdiperolehdarisatuanalit dengantujuanmeminimalkangangguan
penyerapspektra. Derivatisasi (penurunan) spektrum ini dapt digunakanuntuk
meminimalisasiefekmatrikdalamanalit.
Metodeinitelahditelitiuntukbeberapakepentingananalisissenyawadalam
campurandansampel alamseperti padapenentuanvitaminCatauasamaskorbat
dalamsampel sayuran(Aydogmus,dkk, 2002) danuntukanalisiscampuranvita-
min(Aberasturi,dkk,2001).Dalamanalisismenggunakanspektrofotometeriderivatif
dicarikesesuaianspektrasampeldenganspektrastandardpadaspektraasli,turunan
pertamaspektra(1
st
derivatif) danturunankeduaspektra(2
nd
derivatif). Penelitian
tersebutmenunjukkanbahwametodederivatifmenunjukkankepekaanyanglebih
tinggidariuntukanalisisvitaminCdalamsampelsayuran.Sementara Aberasturi,dkk
jugamelaporkanbahwalimitdeteksidankepekaananalisiscampuranvitamindengan
spektrofotometri derivatif lebihmenggunakanturunanpertamaspektra. Penelitian
tersebutjugamenunjukkanbahwaspektrofotometriderivatiflebihtepatdibandingkan
spektrofotometribiasa.
Karena fenol juga merupakan senyawa kromofor pada daerah UV
kemungkinanbesarmetodespektrofotometriderivatifdapatmemberikanketepatan
danketelitianyangbesarseperti yangterjadi padaanalisisvitaminC.
Is Fatimah, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan ...
LOGIKA, Vol. 9, No. 10, Maret 2003 ISSN: 1410-2315
23
LANDASANTEORI
Spektrofotometri UV-Visibel merupakanmetodespektrofotometri yang
didasarkanpadaadanyaserapansinarpadadaerahultraviolet(UV)dansinartampak
(Visibel)darisuatusenyawa.Senyawadapatdianalisisdenganmetodeinijikamemiliki
kemampuanmenyerappadadaerahUVataudaerahtampak. Senyawayangdapat
menyerapintensitaspadadaerahUVdisebut dengankromofor, sedangkanuntuk
melakukananalisissenyawadalamdaerahsinartampak, senyawaharusmemiliki
warna.Fenolmerupakansalahsatusenyawakromoforkarenamemilikiikatanrangkap
terkonjugasidalamstrukturnya.
OH
Gambar 1. Struktur fenol
Identifikasi kualitatif dari suatusenyawaserapankromofor adalahberupa
spektrayangditunjukkandari panjanggelombang( )versusabsorbansi. Setiap
kromoforakanmemberikansuatutitikspesifikyangdisebutdenganpanjanggelombang
maksimum(

maks
). Selanjutnya, untukanalisissampel murni, identifikasi pada
panjanggelombangmaksimumdapatdigunakanuntukanalisiskuantitatif, karena
absorbansisampelakanberbandinglurusdengankonsentrasisampel,sesuaidengan
hukumLambert-Beer.
A=

b.c
denganAadalahabsorbansi,badalahtebalsampeldancadalahkonsentrasisampel.
Secarateoritissenyawafenoltersebutakanmemberikanserapanmaksimum
padapanjanggelombang270nmdisebabkanikatanrangkapterkonjugasi pada
cincinbenzenayang dimilikinya. Serapantersebut terjadi olehadanyatransisi
elektronikdariorbital molekulikatan

menujuorbital molekulanti ikatan

*.
Untukspektratunggal, derivatifpertamadarispektraadalahplotdari gradien
dA
d
dariabsorpsidanmenunjukkanpanjanggelombangdanpenampilanmaksimum
danminimum. Jarakvertikal dari keduabatasdisebut denganamplitudo, yang
nilainyaberbandinglurusdengankonsentrasianalit.Spektraderivatifdapatdiperoleh
denganmemproses sinyal output dari spektrofotometer atau menggunakan
spektrofotometriyangmemilikidesainoptikkhusus. Deferensiasiterhadapspektra
akanmembedakanserapankasardarisuatusampel,sehinggadenganspektraderivatif
Is Fatimah, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan ...
LOGIKA, Vol. 9, No. 10, Maret 2003 ISSN: 1410-2315
24
sensitifitasakanlebihtinggi. Berdasarkanpersamaan(1), gradien spektramemiliki
fungsisebagaiberikut:
d A
d
d
d
bc
n
n
n
n

Secarateoritis,nilaidari
dA
d
adalahnolpadapanjanggelombangmaksimum

maks
. Untuksuatucampuran(M) yangterdiri dari spesiestakberinteraksi (non-
interactingspecies) mislnyaAdanB, serapanatauabsorbansi dapat dinyatakan
sebagai:
A
M
=A
A
+A
B
sehingga,
d A
d
d
d
bc
d
d
bc
n
M
n
n
A
n
A
n
B
n
B

Halinimemungkinkanuntukmengukurnilaisesungguhnyadariderivatif untuk
mengintrepetasisatuspesies.
Dalamanalisisspektrofotometri secaraumum, dapat digunakanmetode
analisiskuantitatifmenggunakankurvabakumaupunstandardadisi.Analisissampel
menggunakankurvabakudidasarkanpadakesesuaianresponabsorbansi yang
dihasilkanolehlarutanbaku(standard) dansampel. Sedangkandalammetode
adisi, konsentrasi sampel diperolehdari intrapolasi kurva yangdiperolehmelalui
responabsorbansidari sederetanlarutanyangmengandungsampel. Dalamanalisis
sampelsecarakuantitatif,pemilihanmetodeanalisistersebutperludiperhatikan.
Gambar 2. MetodeKurvaBakudanMetodeStandardAdisi
MetodePenelitian
Is Fatimah, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan ...
LOGIKA, Vol. 9, No. 10, Maret 2003 ISSN: 1410-2315
25
Alat
SpektrofotometerUV-VisMerkHitachivar. U-2010
Seperangkatalatgelas
Bahan
Air bebasion(deionizedwater)
Akuades
Fenol GR. BuatanMerk
CARA PENELITIAN
Dibuatlarutanfenol5ppmdenganpelarutairbebasion,kemudianditentukan
panjanggelombangmaksimumnyamenggunakanspektrofotometerHitachiU2010.
Spektrayangdiperolehditurunkansehinggadihasilkanturunanpertama(1
st
derivatif).
Spektrayangdihasilkandigunakansebagaistandardfenolmurni. Selanjutnyadibuat
larutanfenol dalampelarut akuades denganvariasi konsentrasi 1, 2, 3, 5dan7
ppm. Spektrayangdihasilkandanturunanpertamaspektradibandingkandengan
spektrastandardfenol murni. Dilakukanpengukuranabsorbansi fenolpadavariasi
konsentrasi menggunakanmetodespektroforometri biasa(Reg.) danamplitudo
maksimumdari spektradasar turunanpertama(1
st
derivatif)(d
1
). Dataabsorbansi
dan ampliotudo diambil sebagai respon dependen dalamregresi linear dan
merupakanfungsidarikonsentrasi sampel.
Ketepatandankeakuratanmetodediuji denganpenentuanfenol yangsudah
diketahui denganketigametodemenggunakancarakurvabakudankurvaadisi.
Pemilihanmetodeyangtepat dilakukandenganuji ANAVA2arahmenggunakan
programSPSS11.0forWindowsberdasar temubalikkonsentrasi sampel.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Secarateoritis, fenolmemiliki serapanmaksimumpadapanjanggelombang
220nmdan270nm. Keduapanjanggelombangtersebutdisebabkanolehadanya
elektronpdari senyawaaromatik. Untukmenguji fenol standardyangdigunakan
dilakukanpenentuanpanjanggelombangmaksimumlarutanfenol dalampelarut
air bebasion. Spektrayangdihasilkandianggapsebagai spektrastandardkarena
interferensi dalamlarutandianggap relatif kecil dibandingkaninterferensi yang
dihasilkanolehpelarutakuades.Spektrayangdiperolehdisajikan dalamgambar3.
(A) (B)
Gambar 3(A) Spektra fenol standard(B) Turunanpertamaspektra(d
1
)
Is Fatimah, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan ...
LOGIKA, Vol. 9, No. 10, Maret 2003 ISSN: 1410-2315
26
Spektrapadagambar 3menunjukkanbahwasetiapsampel memberikan
serapanpadaduapanjang maksimum, yaitupada220nmdan 270nmsesuai
denganpanjanggelombangmaskimumteoritis. Turunanpertamaspektrayang
diperolehtersebut menunjukkanpanjanggelombangmasimumpada260nm.
Berdasarkandata standardini, dilakukanpengukuranterhadaplarutanfenol
denganvariasi konsentrasi . Datadisajikanpadagambar4dantabel 1.
Gambar 4. (A) Spektralarutanfenol (Reg.) dan(B) TurunanPertama
Spektra(d
!
)
Tabel 1 Dataspektrafenol standard(Reg.)
danturunanpertamaspektra(d
1
)
Konsentrasi
(ppm)
Reg.

maks (nm) d
1
1 220,0 269,5 260,0
2 219,0 270,0 260,0
3 219,5 269,0 260,0
5 220,1 270,0 260,0
7 220,5 269,6 260,0
Secaraumumterlihat bahwasemakintinggi konsentrasi sampel, semakin
tinggi absorbansi padapanjanggelombangmaksimum. Namundemikianspektra
yangdiperolehmenunjukkan terjadinyapergeseranpanjanggelombangmaksimum
dari fenol padaberbagai konsentrasi. Halini dapatterjadi karenaadanyapengaruh
matrikslarutansehingaterjadipenyerapanintensitassinar datang. Apabilahal ini
Is Fatimah, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan ...
LOGIKA, Vol. 9, No. 10, Maret 2003 ISSN: 1410-2315
27
digunakandalamanalisiskuantitatif dapatmenyebabkanturunnyalinearitasfungsi
dandapatmenyebabkankesalahandeteksi sampel. Turunanpertamadari spektra
yangdiperolehmemperlihatkanpuncakseragampadavariasikonsentrasiyaitupada
panjanggelombang260nmsesuai denganturunanpertama(d
1
)spektrafenolstan-
dard.Keseragamanpuncakdarisetiapkonsentrasiinisecarateoritisakanmemberikan
ketelitianyanglebihtinggi.
Selanjutnya kedua metode dianalisis dengan membuat kurva baku
berdasarkanpersamaanLambert-Beer dimanaabsorbansi (A) berbandinglurus
dengankonsentrasi. Dataanalisisdengankeduametodedisajikandalamtabel 2
danhasil analisisregresi padatabel 3.
Tabel 2.DataAbsorbansi diperolehpadavariasi konsentrasi
Spektra Dasar Konsentrasi
fenol (ppm)
(Reg) Turunan Pertama (d
1
)
1 0,347

0,001 0,00365

0,00
2 0,493

0,001 0,00437

0,00
3 0,574

0,001 0,00554

0,001
5 0,863

0,002 0,00746

0,00
7 0,987

0,001 0,00921

0,00
Tabel 3. Hasil AnalisisRegresi KurvaBakuBerdasar
SpektraReg. Dand
1
No. Metode Kemiringan Titik potong Koef.
Korelasi ( r )
Limit Deteksi
(LD)
1 Reg. 0,106

0,004 0,260

0,180 0,986 0,006

2 d
1
9,480.10
-4

0,00 2,6460

0,00 0,999

0
Berdasarkanlinearitasyangdiperolehditunjukkanbahwametoded
1
lebih
baikdibandingkanmetodeReg. Hal ini menunjukkanbahwaresponabsorbansi
yangdiberikanpadametoded
1
menunjukkankesesuaianyanglebihbesar dengan
HukumLambert-Beer.
Untukmenentukanketepatanmetodedalamanalisis fenol dilakukanuji
penentuanfenol standarddalamsampel air dengan konsentrasi fenol diketahui.
Analisisdataditerapkanpadatemubalikkonsentrasi yangdiperolehdari kedua
metode. Dalamuji ini sekaligusdiamati pengaruhpenggunaanmetodestandard
adisi danmetodekurvabakuterhadaptemubalik.
Is Fatimah, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan ...
LOGIKA, Vol. 9, No. 10, Maret 2003 ISSN: 1410-2315
28
Tabel 4. DataTemubalikkonsentrasi fenol denganmetodeKurvaBakudan
StandardAdisi denganSpektraDasar Reg. Dand
1
Temubalik (%)
Pada Spektra Dasar
Metode
Analisis
Konsentrasi Lar. Penguji
(ppm)
Reg. d
1
2 98.97 99.87
2,1 99.67 99.87
2,2 98.88 98.67
3 99.67 99.09
S
T
A
N
D
A
R
D
A
D
I
S
I
3,1 99.87 99.87
2 98.99 99.87
2,1 98.78 99.87
2,2 99.88 99.70
3 98.78 98.87
K
U
R
V
A
B
A
K
U
3,1 98.67 99.87
Analisis terhadapdatapadatabel 4 menggunakanstatistikuji ANAVA2
arahpadaselangkepercayaan95%denganfaktor Metodeanalisisdanspektra
dasar (Reg. dand
1
) danvariabledependennyaadalahdatatemubalikdisajikan
dalamtabel 5.
Tabel 5. Hasil Uji ANAVA2ArahPengaruhMetodeAnalisisdanSpektraDasar
TerhadapDataTemubalikKonsentrasiFenol
Faktor F Signifikansi Kesimpulan
Metode Analisis
1: Kurva Baku
2:Standard Adisi
2,407 0,140 BT
Spektra dasar
1: Reguler (Reg.)
2: Spekt.Derivatif (d
1
)
413833,5 0,00 BB
Ket: BB=BerbedaBermakna BT=BerbedaTakBermakna
SIMPULAN
Penggunaanspektrofotometri derivatifmemberikanketepatandanketelitian
lebihtinggi secarabermaknadibandingkanmetodebiasadanpenggunaanmetode
kurvabakudanstandardadisi tidakmempengaruhi ketepatandanketelitian.
Is Fatimah, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan ...
LOGIKA, Vol. 9, No. 10, Maret 2003 ISSN: 1410-2315
29
DAFTAR PUSTAKA
Aydogmus, A,. Cetin, S.M., Ozgur, M.U., 2002, Determinationof AscorbicAcidin
vegetablesbyDerivatif Spectrophotometry, TurkJChem, Vo. 26, 697-704.
Berasturi, F, Jimenes, A.I., Arias, J.J, 2001, UV-VisibleFirst Derivatif Spectropho-
tometryAppliedtoAnalysisof aVitaminMixture, J.Chem.Ed., Vol78., 793-
795.
Rhee, J.S., Jung, M.W., danPaeng,K.J, 1998, Evaluationof ChitinandChitosanas
aSorbent for the Preoncentrationof Phenol andChlorophenol inWater,
Anal.Sci, Vol.14, 1089-1092.
Silverstein,R.M., Bassler,G.C., Morril, T.C., 1991, SpectrometricIdentificationof
OrganicCompound, 5
th
Edition, JohnWiley&Sons.
Is Fatimah, Analisis Fenol Dalam Sampel Air Menggunakan ...