(PTPL)
SOP
ISI KANDUNGAN
TOPIK
MUKA SURAT
1.Pengenalan Hospital
9 -14
15 -32
33 61
62 67
68 72
73 - 102
SOP
SOP
Pengarah Hospital
Penyelaras
Makmal
Klinikal
Makmal
Makmal
Makmal
Mikrobiologi
Hematologi
Transfusi Darah
Makmal
Makmal
Patologi Kimia
Satelit
SOP
Kaunter
Kosong
JTMP U32
Pegawai Sains UD48
En Sifu
Ainon Fauziah Shamsudin
JTMP U38
Yee Khee Wai
JTMP U32
JTMP U29
Noorazian
Abd latif
8. Mohamad qusyaira
Rabiah
Sollehah
9. Nooraziah
Rosnani
Muhammad fadzly
10. Syed
Rohana
Munirah
Liza
13. Azwani
Nurul amalina
Hematologi
Transfusi
5
SOP
Pakar
Patologi
UD54
Dr.Azura
Dr. Azlina
Pegawai
Dr.AzlinaUD54
Perubatan
Dr.Ahmad Puaat
Pegawai Sains C44
Pn Siti Hajjar
JTMP U32
JTMP U 23
Emi Sabrin
Pn. Thalamiah
Raihana
JTMP U29
JTMP U29
Rohana
Rozita
Muhamad fadly
Mastura
Ezatul
Norazwanisaiful
Abd latif
Azlinda
Nur hafiza
Sitologi
6
SOP
Pakar Patologi UD54
Dr. Fadli
Pegawai Perubatan
UD 54
Dr.Ahmad Puaat
SITOLOGI
JTMP U36
Pn Norhayati
Pn Mayuree
SOP
Pegawai Sains C44
1.
En Deen
2.
Pn Suhaila
JTMP U36
1.
En Harris
JTMP U32
1.
Pn Normah
2.
En Zulki
JTMP 29
PENGENALAN HOSPITAL
HOSPITAL SULTAN HAJI AHMAD SHAH,TEMERLOH,PAHANG
SOP
Kedudukan
Temerloh
Hospital
adalah
pertengahan
di
Lebuhraya
taman
yang
menjadikan
menarik
ianya
dipandang
dan
tersergam indah.
Pembinaannya dimulakan pada Jun 2002 dan tamat pada 15 Jan 2005 dalam tempoh
34 bulan. Kos pembinaan adalah sebanyak RM 480 juta. Hospital ini dibina bagi
menggantikan Hospital Mentakab yang telah beroperasi hampir satu abad lamanya.
Peranannya bukan sahaja kepada penduduk di daerah Temerloh malahan menjadi
Hospital Rujukan bagi daerah Kuala Lipis ,Raub , Maran ,Bentong ,Jerantut dan Bera.
Perkhidmatan Hospital Temerloh beroperasi secara berperingkat dari Mac 2005 dan
sepenuhnya pada 16 April 2005.
Pada Isnin 27hb. Mac 2006 bersamaan 26 Safar 1427H perasmian Hospital Temerloh
disempurnakan oleh Kebawah Duli Yang Maha Mulia Sultan Pahang Sultan Haji
Ahmad Shah Al-Mustain Billah Ibni Al-Marhum Sultan Abu Bakar Riayatuddin AlMuadzam Shah.
Pada
Majlis
Perasmian
ini
Hospital
Temerloh
diberi
penamaan
semula
SEJARAH HOSPITAL
HOSPITAL SULTAN HAJI AHMAD SHAH,TEMERLOH,PAHANG
SOP
Hospital Mentakab mula beroperasi pada tahun 1920-an iaitu sejak zaman
pemerintahan British yang kemudiannya di naik taraf sebagai Hospital Daerah. Pada
tahun 1970-an ia dikenali sebgai Hospital Berpakar sebelum di kembangkan menjadi
Hospital Mentakab pada tahun 1990-an.
Dengan keluasan tapak 6.4 hektar (16 ekar), Hospital Mentakab mempunyai 15 blok
juga merupakan hospital rujuk kepada 6 daerah. Hospital Mentakab berdiri megah di
atas bukit sederhana rendah di pinggir jalan dalam menghubungkan Mentakab dan
Temerloh yang sejak penubuhannya sekitar tahun 1920-an telah menjadi kebanggaan
kira-kira sejuta penduduk sekitar Temerloh dan Mentakab kini mulai sepi dan suram,
malah ia terpahat menjadi nostalgia mengasyikkan yang tidak mungkin pupus ditelan
zaman.
Pada Isnin 27hb. Mac 2006 bersamaan 26 Safar 1427H perasmian Hospital Temerloh
disempurnakan oleh Kebawah Duli Yang Maha Mulia Sultan Pahang Sultan Haji
Ahmad Shah Al-Mustain Billah Ibni Al-Marhum Sultan Abu Bakar Riayatuddin AlMuadzam Shah. Hospital ini dibina bagi menggantikan Hospital Mentakab yang telah
beroperasi hampir satu abad lamanya. Pada Majlis Perasmian ini juga Hospital
Temerloh telah diberi penamaan semula sebagai Hospital Sultan Haji Ahmad Shah,
(HOSHAS).
Hospital Sultan Haji Ahmad Shah terletak di bandar Temerloh, Pahang. Ia terletak
di pertengahan Lebuhraya Kuala Lumpur - Kuantan.
Hospital ini dibina bagi menggantikan Hospital Mentakab yang telah lama.
Pembinaannya dimulakan pada Jun 2002 dan tamat pada 15 Jan 2005. Ia mula
beroperasi secara berperingkat pada Mac 2006, dan kemudian dirasmikan Sultan
Pahang pada 27 Mac 2006 bersamaan 26 Safar 1427H.
Pada peringkat awal, setelah Hospital Temerloh dibuka, Hospital Mentakab telah
ditutup. Tetapi setelah mendapat rayuan dan bantahan penduduk Mentakab, Hospital
10
SOP
Mentakab dibuka semula dengan nama Klinik Kesihatan Mentakab pada 13 Oktober
2005.
Hospital ini dibina bagi memenuhi tanggungjawab kerajaan memastikan setiap
anggota
masyarakat
membendung penyakit
mendapat perkhidmatan
berjangkit
kesihatan
percuma dan
dapat
denggi, penyakit
SOP
ii.
iii.
Adil
Cekap
Berinovatif
Melalui nilai-nilai :
Saling menghormati
Penglibatan masyarakat
SOP
pelanggan dan etika perkhidmatan yang bercirikan kecekapan, kualiti, inovasi dan
berteraskan Budaya Penyayang, kerja berpasukan dan profesionalisma agar dapat
mencapai wawasan untuk mewujudkan sebuah negara yang mempunyai individu,
keluarga dan masyarakat yang sihat.
13
SOP
B). Kewajipan Pelanggan kepada pihak pengurusan HoSHAS adalah seperti berikut;
Mematuhi semua peraturan, prosedur dan khidmat nasihat yang berkaitan pada
bila-bila masa
mengelakkan kerosakan
SOP
pesakit atau pesakit.Contohnya ujian pengumpulan darah ABO dan Rhesus
menggunakan dua teknik iaitu teknik langsung dan tidak langsung.Ujian ini telah
dilakukan bagi mengenalpasti jenis kumpulan darah dan rhesus pesakit atau
penderma.Ujian penyaringan antibodi untuk mengenalpasti antibodi asing yang
dijumpai pada darah.Jika terdapat antibodi asing akan melakukan ujian identifikasi
antibodi telah dilaksanakan.Akhirnya adalah ujian pengesanan rhesus menggunakan
teknik gel kad dan tiub.Selain daripada itu,ujian antihuman globulin langsung
menggunakan sampel serum dan ujian antihuman globulin tidak langsung
menggunakan sampel darah.Melakukan ujian kerasisan darah diantara darah pesakit
dengan darah penderma.Ujian keserasian darah merupakan salah satu ujian serologi
yang tergolong dalam kumpulan coombs direct. Dimana penggunaan serum pesakit
keutamaan dengan sasaran pengesanan antibodi luar biasa yang mungkin terkandung
di dalam serum pesakit. Ianya terbahagi kepada tiga fasa ujian iaitu fasa salina, fasa
albumin dan fasa AHG.Seterusnya,Packed Cell digunakan untuk pesakit yang
darahnya kurang hemoglobin seperti kes anemia, untuk bayi atau kanak-kanak dalam
meningkatkan paras PCV, digunakan untuk pesakit thalasemia yang sering
memerlukan pemindahan penerimaan darah baru.Fresh Frozen Plasma digunakan
untuk pesakit hemofilia dan kes pendarahan yang teruk yang hilang faktor pembekuan
darah.Cryopersipitate digunakan digunakan untuk pesakit yang hilang dalam
kegagalan fungsi hati dan dalam kes denggi serta kebakaran.Leucocyte Poor Plasma
digunakan untuk pesakit yang ada klinikal tentang hemocytic febrile. Juga digunakan
untuk pesakit renal dialysis untuk mengurangkan risiko alloimunization kepada
leucocyte kepada leucocyte dan antigen platelet.Ujian penyiasatan reaksi trasfusi
darah dan juga ujian emergency o darah.
SOP
ALAT /RADAS : Mesin pengempar
Pipet pasteur
Tabung uji
SOP
ALAT/RADAS : Kayu aplikator
Tiub
Pipet
Mesin pengempar
REAGEN : Antisera - Anti A,Anti B,Anti AB dan Anti D
BIOMATERIAL : Darah known cells
PRINSIP UIJAN :
Prosedur ini telah dicadangkan bagi kegunaan reagen tersebut yang bertujuan untuk
mengesan agglutinasi langsung yang terhasil daripada sel darah merah dimana sel ini
membawa antigen yang spesifik dan juga kehadiran antibodi yang spesifik.
KAEDAH UJIAN :
1.Sediakan darah(known cells) yang telah dikenalpasti kumpulan darahnya.
2.Sediakan 3 tiub yang berlabel darah A,B,AB dan anti-D.
3.Titiskan 1 titik darah ke dalam tiub yang berlabel dengan menggunakan pipet.
4.Keluarkan antisera A, B AB dan Antigen D.
5.Titiskan 1 titik antisera kedalam tiub tersebut dengan menggunakan pipet.
6.Empar pada 3000rpm dalam masa 15 saat.
7.Perhatikan angglutinasi yang terhasil.
8.Catatkan pemerhatian.
SOP
ALAT/RADAS : Tabung uji
Tile/jubin
Pasteur pipet/mikropipet
Kayu aplikator
REAGEN : Normal salin
Antisera - Anti A,Anti B,Anti AB dan Anti D
BIOMATERIAL : Darah SDM
PRINSIP UIJAN :
Kumpulan darah dapat ditentukan dengan memerhatikan agglutinasi yang
terbentuk antara sel darah merah yang diuji dengan antisera.Teknik ini dilakukan
untuk mengesan antigen yang hadir pada permukaan sel darah merah.Kaedah ini
dikenali sebagai forward groupingmenggunakan sampel sel darah merah (SDM)
pesakit atau penderma dengan antisera yang diketahui adalah Anti A,Anti B dan
Anti AB.Ujian pengumpulan ABO dan rhesus langsung terbahagi kepada teknik
tiub dan teknik tile.Selain itu, rhesus bagi setiap jenis kumpulan darah juga
dapat ditentukan melalui kaedah yang sama tetapi menggunakan Anti D untuk
menentukan rhesus negatif atau positif darah pesakit atau penderma.
KAEDAH UJIAN :
i. Teknik Tiub
1.Labelkan empat tabung uji Anti A,Anti B,Anti AB dan Anti D.
18
SOP
2.Masukkan satu titik Anti A,Anti B,Anti AB dan Anti D ke dalam tiub yang telah
dilabel.
3.Masukkan satu titik 5% ampaian sel darah merah ke dalam tiub di atas tadi.
4.Sebatikan dan empar selama 15 saat pada kelajuan 3400 rpm.
5.Resuspend sel dengan perlahan dan periksa agglutinasi.
6.Rekod keputusan yang diperhatikan.
INTERPRESTASI UIJAN :
II. Agglutinasi antara antisera komersial dengan sel darah merah (SDM)
Anti A
Anti B
Anti AB
Anti D
Kumpulan
19
SOP
Darah
+
A+ve
B+ve
AB+ve
O+ve
SOP
Tabung uji
Pasteur pipet/mikropipet
Kayu aplikator
REAGEN : Known cells Sel A,Sel B dan Sel O
Normal saline
BIOMATERIAL : Darah - serum
PRINSIP UIJAN :
Kumpulan darah juga dapat ditentukan dengan memerhatikan pembentukan
agglutinasi antara serum pesakit atau penderma yang diuji dengan known cells
ialah Sel A,Sel B dan Sel O untuk mengesan antibodi yang terdapat dalam
serum.Teknik ini dikenali sebagai reverse groupingmenggunakan serum
penderma atau pesakit dengan melakukan teknik tuib dan teknik tile atau jubin.
KAEDAH UJIAN :
i. Teknik Tile/Jubin
1.Sediakan tile atau jubin yang bersih dan kering.
2.Titiskan satu serum pesakit atau penderma titik Anti A,Anti B,Anti AB dan Anti D
pada tile yang telah dilabel.
3.Tambahakn satu titik Sel A,B dan O yang diketahui ke atas serum pesakit.
4.Sebatikan campuran serum dan sel tadi menggunakan kayu aplikator.
5.Goncangkan tile selama beberapa minit.
6.Baca dalam masa dua minit selepas disebatikan.
7.Rekod keputusan yang diperhatikan.
SOP
1.Labelkan tiga tabung uji Sel A,Sel B dan Sel O.
2.Titiskan satu titik serum pesakit atau pendrema ke dalam tiub yang berlabel.
3.Tambahkan satu titik Sel A,Sel B dan Sel O ke dalam tiub masing-masing yang
mengandungi satu titik serum.
4.Sebatikan campuran dan empar selama 15 saat pada kelajuan 3400 rpm.
5.Goncangkan tiub secara perlahan-lahan sambil memerhatikan agglutinasi
6.Rekod keputusan yang diperhatikan.
INTERPRESTASI UIJAN :
II. Agglutinasi antara known cellsdengan serum pesakit atau penderma
Sel A
Sel B
Sel O
Kumpulan Darah
AB
SOP
REAGEN /BAHAN : Saline
LISS
Sel darah merah (SDM)
PRINSIP UIJAN :
Mengesan antibodi yang tidak lengkap terutamanya dari kelas IgG.Ini adalah
kerana IgG merupakan antibodi berbentuk monomer,hanya mempunyai 2 tapak
perlekatan antigen dan jarak antara dua tapak ini adalah kecil.Akibatnya IgG hanya
dapat berikat dengan satu sel darah merah sahaja pada satu-satu masa.Keadaan ini
menyebabkan agglutinasi sukar untuk dihasilkan.
KAEDAH UJIAN :
i.Teknik Kad Gel
1.Buat ampaian 0.8% sel darah merah dengan menggunakan ID Diluent 2.
2.Masukkan 50 l ampaian sel tadi ke dalam mikrotiub yang telah dilabel.
3.Empar dengan menggunakan ID Centrifuge 12 S II selama 10 minit.
4.Baca keputusan ujian.
INTERPRETASI UJIAN :
Negatif tiada agglutinasi
Positif agglutinasi
TAJUK UJIAN : UJIAN KESERASIAN DARAH (TIUB)
OBJEKTIF :
Menguji keserasian darah antara antibodi dalam serum pesakit dengan antigen pada
darah penderma dan mendapat darah yang sesuai dan serasi bagi pesakit.
ALAT / RADAS :Tabung uji
Pipet pasteur / penitis kaca
Mesin serofuge (pengempar)
Waterbath
23
SOP
Mikroskop Olympus
REAGEN : Isotonik saline
LISS (Low ionic strength saline)
Coombs Control Cell (CCC)
Antihuman globulin (AHG)
BIOMATERIAL : Darah serum pesakit
Darah SDM penderma
PRINSIP UJIAN :
Antibodi pesakit yang spesifik akan bertindakbalas dengan antigen penderma yang
spesifik dan tindakbalas antibodi pesakit yang spesifik dengan antigen penderma
yang spesifik menghasilkan agglutinasi atau hemolisis. Ujian keserasian darah
dilakukan berdasarkan prinsip aglutinasi. Serum pesakit ditambah kepada sel darah
penderma. LISS (low ionic strength solution) ditambah untuk mempercepat tindak
balas antigen-antibodi. Selepas pengeraman antibodi yang tidak terikat akan
disingkirkan melalui proses pencucian sel dan reagen AHG (anti human globulin)
ditambah. Kehadiran hemolisis atau aglutinasi menunjukkan kehadiran antibodi
terhadap antigen tertentu pada sel darah merah penderma.
KAEDAH UJIAN :
1.Terima sampel darah dan borang permintaan jika mengikut spesifikasi.
2.Lakukan ujian pengumpulan darah penuh pesakit mengikut arahan kerja.
3.Tentukan darah penderma yang ingin buat ujian keserasian darah dengan darah
pesakit.
4.Empar sampel pesakit dengan menggunakan mesin pengempar untuk mengasingkan
serum daripada sel darah.
5.Buat 3% - 5% ampaian sel darah penderma dalam isotonik saline.
6.Masukkan 2 titik serum pesakit ke dalam tabung uji yang telah dilabelkan.
7.Masukkan 2 titik ampaian sel darah penderma ke dalam tabung uji tadi.
24
SOP
8.Sebatikan dan empar tabung uji pada kelajuan 3400 rpm selama 15 saat.
9.Masukkan 2 titik LISS ke dalam tabung uji tadi.
10.Sebatikan dan empar dalam watetbathpada suhu 37c selama 10 minit.
11.Empar pada kelajuan 3400 rpm selama 15 saat.
12.Resuspend dan periksa secara mikroskopoik untuk melihat agglutinasi.
13.Basuh sel sebanyak 3 kali dengan larutan normal saline.
14.Buang supernatan dengan sempurna pada cucian yang terakhir.
15.Masukkan 2 titik reagen AHG ke dalam tiub tadi.
16.Resuspend sel darah merah dan periksa secara makroskopik dan mikroskopik.
17.Jika keputusan negatif,titiskan 1 titik CCC.
18.Rekod semua keputusan ke dalam buku rekod,PPDK 5 dan buff kad.
INTERPRETASI UJIAN :
Positif terdapat agglutinasi maka tidak serasi
Negatif tiada agglutinasi maka serasi
SOP
REAGEN : ID Diluent 2 (LISS)
BIOMATERIAL : Darah - SDM penderma
Darah - Serum pesakit
PRINSIP UJIAN :
Teknologi gel ini ialah kawalan pengemparan serum atau sel darah melalui gel
dextran akrilamida.Pada bahagian atas mikrotiub terdapat reaction chamber yang
direka bentuk untuk membenarkan pengeraman dijalankan dahulu di atas gel
sekiranya perlu bahagian kolum pula memberikan masa yang sesuai bagi pemisahan
sel berlaku.Partikel gel bersifat poros bertindak sebagai medium tindak balas dan
penapis,yang mana agglutinasi sel yang besar akan terperangakp di atas gel kerana
tidak boleh melalui liang yang terdapat pada gel semasa pengemparan.Sementara sel
yang tidak beragglutinasi akan termendak di dasar kolum.Campuran gel yang
mengandungi anti human globulin (AHG) sebagai agen spesifik.Mikrotiub yang
mengandungi polispesifik AHG yang digunakan penyaringan antibodi,ujian
keserasian darah dan identifikasi antibodi.
KAEDAH UJIAN :
1.Terima sampel darah dan borang permintaan jika mengikut spesifikasi.
2.Lakukan ujian pengumpulan darah penuh pesakit mengikut arahan kerja.
3.Tentukan darah pendrema yang ingin buat ujian keserasian darah dengan darah
pesakit.
4.Empar sampel darah pesakit dengan menggunakan mesin pengempar untuk
mengasingkan serum daripada sel darah pesakit.
5.Buat 0.8% ampaian sel darah penderma di dalam tabung uji dengan mencampurkan
10 mikroliter sel darah merah padat ke dalam 1.0 ml ID Diluent 2 (LISS).
6.Buka kepingan aluminium yang menutupi miktiub yang diperlukan.
26
SOP
7.Masukkan 50 mikroliter suspensi sel darah penderma ke dalam mikrotiub gel kad
yang telah ditandakan untuk pesakit berkaitan.
8.Masukkan 25 mikroliter serum pesakit ke dalam mikrotiub gel kad yang telah
dimasukkan suspensi sel darah penderma.
9.Untuk kawalan (Auto Control) tambahkan 50 mikroliter suspensi darah pesakit .
10.Tambahkan 25 mikroliter serum pesakit pada kawalan (auto control).
11.Eram mikrotiub gel kad di dalam ID INCUBATOR 37 S I selama 15 minit pada
37c.
12.Empar mikrotiub gel kad ke dalam ID CENTRIFUGE 12 S II (pengempar) selama
10 minit.
INTERPRETASI UJIAN :
Positif : agglutinasi akan terbentuk di atas permukaan gel atau di sepanjang kolum
gel.Keputusan adalah tidak serasi.
Negatif : Sel darah merah akan termendap di dasar mikrotiub.Keputusan adalah serasi.
TAJUK UJIAN : UJIAN TITRE 1/50
OBJEKTIF :
Mengkelaskan kumpulan darah O penderma sama ada ia adalah darah O kecemasan
atau darah O titer tinggi.
ALAT/RADAS : Tiub,pasteur pipet,pengempar dan waterbath
REAGEN : Saline
BIOMATERIAL : Sel kumpulan A,sel B dan serum penderma O
PRNSIP UJIAN :
Titer merupakan kepekatan atau kekuatan antibodi yang terdapat pada kumpulan
darah O.Ujian ini dilakukan untuk mengkelaskan kumpulan darah O samada ia
merupakan darah O kecemasan atau darah O titer tinggi.
27
SOP
KAEDAH UJIAN :
1.Sediakan pencairan bagi 1/50 untuk serum penderma menggunakan normal saline.
2.Masukkan 0.1 ml pencairan serum 1/50 ke dalam 2 tiub masing yang berlabel A dan
B.
3.Sediakan suspensi bagi 2% bagi sel A dan sel B dalam saline.
4.Tambahkan 0.1 ml suspensi sel A tadi ke dalam tiub berlabel A dan 0.1 ml suspensi
sel B ke dalam tiub berlabel B.
5.Empar pada 3000 rpm selama 15 saat.
6.Periksa sekiranya terdapat agglutinasi atau hemolysis secara makroskopik.
SOP
2.Massukkan 0.1 ml suspense sel A ke dalam tiub yang berlabel A dan 0.1 ml
suspensi sel B ke dalam tiub berlabel B.
3.Tambahkan 0.1 ml serum ke dalam setiap tiub.
4.Sebatikan dan eram tiub pada 37c selama 60 minit.
5.Empar pada 3000 rpm selama 1 minit.
6.Periksa supernatan sekiranya terdapat hemolisis yang mana menunjukkan kehadiran
hemolisin dalam serum.
INTERPRETASI UJIAN :
Positif supernatan berwarna kemerahan
Negatif tiada perubahan pada supernatan
SOP
1.Cuci sel sebanyak 3 kali dengan saline dan sediakan 5% suspensi.
2.Tambah 2 titik Anti-D dan 1 titik suspensi 5% ke dalam tabung uji yang dilabelkan.
3.Emparkan tiub tersebut dan perhatikan agglutinasi.
4.Eram pada suhu 37C selama 15 minit.
5.Keluarkan tabung uji dan cuci sel sebanyak 3 kali.
6.Tambahkan 2 titik AHG.
7.Empar pada 3000 rpm selama 15 saat.
8.Periksa sekiranya terdapat agglutinasi secara makroskopik dan mikroskopik.
INTERPRETASI UJIAN :
Terdapat agglutinasi Darah adalah rhesus positif, terdapat kehadiran antigen D yang
kuat.
Tiada agglutinasi Darah adalah rhesus negatif, tidak terdapat kehadiran antigen D
yang lemah.
OBJEKTIF :
Menentukan kumpulan darah dan mengesan antibodi untuk penyediaan darah bagi
pesakit yang memerlukan darah untuk pembedahan.
PRNSIP UJIAN :
30
SOP
Prosedur Group,Screen dan Hold dilakukan intuk menyediakan darah bagi
pembedahan yang melibatkan 2 beg darah atau kurang.Penetuan ABO dan Rhesus
serta ujian penyaringan akan dilakukan untuk menetukan beg darah yang bakal
diberikan kepada pesakit.
KAEDAH UJIAN :
1.Empar darah pesakit untuk mengasingkan serum dari sel darah.
2.Jalankan ujian penentuan ABO dan Rhesus
3.Pisahkan serum daripada sel darah merah padat pesakit.
4.Masukkan 2 titik serum ke dalam tiub yang dilabelkan 1 dan 2.
5.Masukkan 1 titik sel antibody screening 1 ke dalam tiub 1, 1 titik sel antibodi
screening 2 ke dalam tiub 2.
6.Sebatikan, empar, dan periksa secara makroskopik untuk agglutinasi (Room
Temperature).
7.Masukkan 2 titik LISS.
8.Sebatikan dan eram dalam waterbath pada suhu 37C selama 10 minit.
9.Empar selama 15 saat pada kelajuan 3400 rpm.
10.Periksa hemolisis, resuspend, dan periksa secara makroskopik dan mikroskopik
untuk aglutinasi.
11.Basuh sel 3 kali dengan saline dan buang saline sekering-keringnya pada basuhan
terakhir.
31
SOP
12.Masukkan 2 titik AHG ke dalam tiub.
13.Sebatikan dan empar selama 15 saat pada kelajuan 3400 rpm.
14.Resuspend sel perlahan-lahan dan periksa secara makroskopik dan mikroskopik
untuk aglutinasi.
INTERPRETASI UJIAN :
Positif Tidak serasi ( tidak boleh ditransfusikan darah)
Negatif Serasi ( dibenarkan transfusi darah)
SOP
Ujian HbA1C juga dijalankan dalam makmal ini dan menggunakan mesin yang sama
tetapi hanya kaki tangan makmal saja yang melakukan ujian HbA1C kerana ia
memerlukan proses kerja yang lama dan berhati hati. Selain ujian di atas, terdapat
juga ujian Blood Gases (ABG) terdiri daripada Vena Blood Gases dan Arterial Blood
Gases yang dilakukan dalam makmal biokimia menggunakan mesin Cobas b221 yang
dilakukan oleh kaki tangan makmal sahaja.Ujian urine FEME,ujian blood
osmolality,ujian urine osmolality,ujian urine pregnancy test,ujian urine microalbumin
serta ujian urine paraquat dilakukan di bahagian urin serta sampel yang tidak
dijalankan di makmal biokimia akan dihantar ke HTAA (Kuantan).
SOP
mengukur jumlah enzim di dalam darah. ALT banyak terdapat terutamanya di dalam
hati,dan jumlah kecil juga boleh di dapati dalam buah pinggang,jantung,otot serta
pankreas.
ALAT/RADAS : Mesin pengempar
Mikropipet.
Mesin HITACHI
Rak sampel
Cup HITACHI
REAGEN : B NADH.
Laktat Dehidrogenase.
L Alanin.
a Ketoglutarik Asid
BIOMATERIAL : Serum pesakit
PRINSIP UJIAN :
34
SOP
ALT merupakan enzim yang dijumpai terutamanya pada sel hati dan dalam kuantiti
yang sedikit dalam buah pinggang, jantung dan otot rangka. Ia selalunya digunakan
bersama sama AST bagi mengukur fungsi hati dan mendiagnos penyakit yang
berkaitan dengan hati.
KAEDAH :
1.
Tiub yang berlabel dengan bar kod dimasuk ke dalam mesin Modular.
up to 41 U/L
Perempuan
up to 33 U/L
SOP
2. Persampelan,pemindahan reagen,pencampuran dan pemprosesan dilakukan
oleh mesin Modular secara automasi.
3. Bacaan direkod dalam sistem maklumat hospital (LIS).
INTERPRETASI UJIAN :
Julat normal : Lelaki 40-108 U/L
Perempuan 35-104 U/L
SOP
INTERPRETASI UJIAN :
Lelaki
Up to 40 U/L
Perempuan
Up to 32 U/L
28-100 U/L
Urin 24 jam
<410 U/24 h
37
SOP
phosphate
bertindak
dengan
ADP
menghasilkan
creatine
dan
39-308 U/L
Perempuan
26-192 U/L
SOP
Mikropipet
Mesin HITACHI
Rak sampel
Cup HITACHI
REAGEN/BAHAN : Diethanolamin
L - Litium Laktat
B NAD
BIOMATERIAL : Serum pesakit
PRINSIP UJIAN :
L-lactate diubah kepada piruvat yang dimangkin oleh lactate dehdrogenase dimana
proses penurunan NAD+ kepada NADH dan H+ berlaku dalam tindakbalas
ini.Seterusnya,NADH diukur pada absorban 340nm.
KAEDAH UJIAN :
1. Tiub yang berlabel dengan bar kod dimasuk ke dalam mesin Modular.
2. Persampelan,pemindahan reagen,pencampuran dan pemprosesan dilakukan
oleh mesin Modular secara automasi.
3. Bacaan direkod dalam sistem maklumat hospital (LIS).
INTERPRETASI UJIAN :
Lelaki
135-225 U/L
Perempuan
135-214 U/L
Kanak-kanak
120-300 U/L
Bayi
225-600 U/L
Mikropipet
Mesin HITACHI
Rak sampel
Cup HITACHI
REAGEN/BAHAN : Sodium Potassium Tartrat
Sodium Hidrosida
Potassium Iodid
Copper Sulfate
39
SOP
Bromcresol Purple
BIOMATERIAL : Serum pesakit
PRINSIP UJIAN :
Divalent copper bertindak dengan protein total dalam larutan alkali membentuk
kompleks berwarna ungu.
KAEDAH UJIAN :
1. Tiub yang berlabel dengan bar kod dimasuk ke dalam mesin Modular.
2. Persampelan,pemindahan reagen,pencampuran dan pemprosesan dilakukan
oleh mesin Modular secara automasi.
3. Bacaan direkod dalam sistem maklumat hospital (LIS).
INTERPRETASI UJIAN :
Premature
30-60 g/L
Newborn
46-70 g/L
1 weak
44-76 g/L
7 month-12 month
51-73 g/L
1 year-2 year
56-75 g/L
>3 years
60-80 g/L
Mikropipet
Mesin HITACHI
Rak sampel
Cup HITACHI
REAGEN/BAHAN : Sampel serum
PRINSIP UJIAN :
1.Sampel (plan tube) yang diterima di kaunter penerimaan sampel akan diempar pada
4000rpm selama 5 minit.
2.SCAN BARKOD
INTERNAL REGISTRATION
3.Serum pesakit letak ke dalam rak sampel HITACHI
UNIT RECEIVE
40
SOP
4.Apabila serum pesakit tidak mencukupi akan dipindahkan ke dalam cup HITACHI.
5.Printkan barkod yang baru dan tampal pada cup HITACHI.
6.Masukkan serum pesakit ke dalam mesin HITACHI.
7.Tekan skrin komputer START akan menunjukkan data sampel pesakit.
8.Skrin komputer paparkan OPERATING SYSTEM .
9.Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan ke dalam EFISIEN LIS.
10.Keputusan akan diperiksa dan disahkan.
INTERPRETASI UJIAN :
Adults
35-52 g/L
28-44 g/L
38-54 g/L
32-45 g/L
Mikropipet
Mesin HITACHI
Rak sampel
Cup HITACHI
REAGEN/BAHAN : Surfaktan
HCI
2, 4 dikloroanilin
Sodium Nitrit
BIOMATERIAL : Serum pesakit
PRINSIP UJIAN :
Bilirubin tak langsung dibebaskan oleh detergen dan bilirubin total digabung dengan
2,5-dichlorophenyl diazonium tetrafluoroborate dalam keadaan asid kuat untuk
membentuk azobilirubin yang berwarna red azo-dye.
KAEDAH UJIAN :
1. Tiub yang berlabel dengan bar kod dimasuk ke dalam mesin Modular.
2. Persampelan,pemindahan reagen,pencampuran dan pemprosesan dilakukan oleh
mesin Modular secara automasi.
3. Bacaan direkod dalam sistem maklumat hospital (LIS).
INTERPRETASI UJIAN :
41
SOP
Premature
1 day
17.1-103 mol/L
2 day
103-137 mol/L
3-5 day
171-257 mol/L
34.2-103 mol/L
2.19-2.54 mmol/L
> 90 tahun
2.04-2.39 mmol/L
Children
42
SOP
0-10 days
1.89-2.59 mmol/L
10 days-2 years
2.24-2.74 mmol/L
2-12 years
2.19-2.69 mmol/L
12-60 years
2.09-2.54 mmol/L
43
SOP
SOP
G 6 PDH
Heksokinase
ATP 2Na
BIOMATERRIAL : Serum pesakit
PRINSIP UJIAN :
Glukosa bertindak dengan adenosine triphosphate(ATP) menghasilkan glucose 6
phosphate
dan
adenosine
diphosphate
(ADP)
yang
dimangkin
oleh
<6.1 mmol/L
Diabetes mellitus
7.0 mmol/L
SOP
1.Sampel (plan tube) yang diterima di kaunter penerimaan sampel akan diempar pada
4000rpm selama 5 minit.
2.SCAN BARKOD
INTERNAL REGISTRATION
UNIT RECEIVE
3.Serum pesakit letak ke dalam rak sampel HITACHI
4.Apabila serum pesakit tidak mencukupi akan dipindahkan ke dalam cup HITACHI.
5.Printkan barkod yang baru dan tampal pada cup HITACHI.
6.Masukkan serum pesakit ke dalam mesin HITACHI.
7.Tekan skrin komputer START akan menunjukkan data sampel pesakit.
8.Skrin komputer paparkan OPERATING SYSTEM .
9.Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan ke dalam EFISIEN LIS.
10.Keputusan akan diperiksa dan disahkan.
bertindak
dengan
asid
sulfurik
membentuk
komplek
ammonium
SOP
1.Sampel (plan tube) yang diterima di kaunter penerimaan sampel akan diempar pada
4000rpm selama 5 minit.
2.SCAN BARKOD
INTERNAL REGISTRATION
UNIT RECEIVE
3.Serum pesakit letak ke dalam rak sampel HITACHI
4.Apabila serum pesakit tidak mencukupi akan dipindahkan ke dalam cup HITACHI.
5.Printkan barkod yang baru dan tampal pada cup HITACHI.
6.Masukkan serum pesakit ke dalam mesin HITACHI.
7.Tekan skrin komputer START akan menunjukkan data sampel pesakit.
8.Skrin komputer paparkan OPERATING SYSTEM .
9.Bacaan diambil dan keputusan dimasukkan ke dalam EFISIEN LIS.
10.Keputusan akan diperiksa dan disahkan.
INTERPRETASI UJIAN :
Serum
0.87-1.45 mmol/L
SOP
2. Persampelan,pemindahan reagen,pencampuran dan pemprosesan dilakukan
oleh mesin Modular secara automasi.
3. Bacaan direkod dalam sistem maklumat hospital (LIS).
INTERPRETASI UJIAN :
Remaja
1.7-8.3 mmol/L
Premature
Neonates
6 bulan
SOP
Lelaki
202-417
mol/L
Perempuan
143-339
mol/L
signal
keupayaan
elektrikal
dihasilkan
melalui
oleh
mekanisme
transducer.Potentiometry
sensor.Amperomtery
terlibat
dalam
INTERPRETASI UJIAN :
Arterial
Venous
pH
7.35-7.45
7.31-7.41
pCO2
35-45mmHG
41-51mmHG
pO2
>80mmHG
30-40mmHG
21-28mmol/L
49
SOP
Base Excess (ecf),BEecf
-3 hingga +3 mmol/L
Kanabis
Positif : >100
Negatif : <100
50
SOP
UJIAN PENGESANAN ( THIN LAYER CHROMATOGRAPHY)
MORFIN
BAHAN / RADAS :
1. Sampel urin
2. 50% HCl
3. Extraction solvent (isopropanol, chloroform)
4. K2Co3 70%
5. Borate buffer
6. Methanol
7. Ethyl Acetate
8. Amonia
9. Iodoplatinade
10. Dragonderoff Reagent
11. Shaker
12. Waterbath
13. Centrifuge
14. Tabung uji
15. Kertas turas
16. Pengering rambut
17. TLC plate
PRINSIP UJIAN :
Untuk mengesan morfin menggunakan kaedah tindak balas komplek antigen antibodi
immunoassay.
KAEDAH :
HYDROLYSIS
EXTRACTION
SOP
CONCENTRATION
DETECTION
INTERPRETASI UJIAN :
Negatif : tiada deep blue spot
Positif : deep blue spot
KANABIS
BAHAN / RADAS :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Sampel urin
10ml KOH
1M KH2PO4
3M HCl
Extraction solvent (Cyclohexane, Ethyl Acetate)
Kertas turas Whatman No.1
Cyclohexane
52
SOP
8. TLC plate
9. Chromatography solvent (Ethyl Acetate, Methanol, Amonia, Air)
10. Fast Blue BB
11. Waterbath
12. Shaker
13. Tabung uji
PRINSIP UJIAN :
Untuk mengesan kanabis menggunakan kaedah tindak balas antigen antibodi
immunoassay.
KAEDAH :
HYDROLYSIS
EXTRACTION
CONCENTRATION
dikeringkan
Spot pada TLC plate
TLC plate diletakkan ke dalam balang kaca yang mengandungi
Chromatography solvent
[Ethyl Acetate (24) : Methanol (10) : Amonia (2) : Air (1)]
DETECTION
53
SOP
INTERPRETASI UJIAN :
Negatif : tiada pink spot
Positif : pink spot
PRINSIP UJIAN :
Ujian ini berdasarkan prinsip double antibody sandwich dimana strip mengandungi
monoclonal anti-HCG antibody bertindak dengan hormon human chorionic
gonadotropin
(HCG)
yang
terdapat
pada
sampel
urin
membentuk
SOP
BIOMATERRIAL : urine pesakit perempuan
KAEDAH UJIAN :
1. Strip dicelup ke dalam sampel sehingga paras yang ditetapkan.
2. Strip diangkat dan dibiar selama 5 minit.
3. Pemerhatian dilakukan.
INTERPRETASI UJIAN :
SOP
Protein
Apabila pH ditetapkan oleh buffer,indicator dye menghasilkan ion H+ akibat
kehadiran protein yang menyebabkan perubahan warna dari kuning ke hijau.
Nitrite
Nitrite
bertindak
dengan
aromatic
amine
menghasilkan
garam
pH
Ujian berdasarkan prinsip double indicator yang memberi julat pada warna yang
merangkumi semua julat pH bagi urin.
Spesifik gravity
Ujian ini menunjukkan kepekatan ion dalam urin yang berkaitan dengan kaedah
refractometric.Dengan kehadiran kation,proton dibebaskan oleh agen complexing
yang akan menghasilkan warna.
Leukosit
Pyrrole amino acid ester dihidrolisis menghasilkan 3-hydroxy-5-phenyl pyrrole yang
dimangkin oleh esterase yang terdapat leukosit bergranul.
Darah
Ujian
berdasarkan
peroksidase
dimana
ia
memangkinkan
reaksi
organik
SOP
KAEDAH UJIAN :
1. Sampel urin disebatikan
2. Strip diambil dan dimasukkan dalam urin kontainer yang mengandungi urin.
3. Strip diletak pada tisu selama 1-2 second supaya urin berlebihan dapat
disingkirkan.
4. Hasil dibaca pada mesin urometer.
INTERPRETASI UJIAN :
Ujian
Protein
Blood
Leukosit
Nitrite
Glukosa
Keton
Ph
Specific graviti
Bilirubin
TAJUK UJIAN : URINE PARAQUAT
Nilai normal
15-30mg/dL
0.015-0.062mg/dL
5-15/hpf
0.06-0.1g/dL
75-125mg/dL
5-10mg/dL
4.6-8.0
1.001-1.035
0.4-0.8mg/dL
KAEDAH UJIAN :
1.
SOP
INTERPRETASI UJIAN :
Ada perubahan warna (biru atau hijau) positif
Tiada perubahan warna negatif
SOP
kaunter dalam penerimaan spesimen dari semua wad yang berada dalam Hospital ini
dan penerimaan spesimen dari OPD (Out Patent Department).
SOP
8.Setelah pengiraan selesai keputusan akan keluar di skrin dan direkod dalam borang
permintaan ujian.
9.Keputusan akan dikaji, sekiranya memuaskan laporan akan direkod dan
dikeluarkan. Tetapi jika keputusan tidak memuaskan, ujian akan diulangi.
INTERPRETASI UJIAN :
Ujian
Unit
Julat normal
109/L
4.0-11.0
Lelaki:13.0-18.0
Hemoglobin
g/dL
fL
7.4-10.4
Retikulosit
0.2-2.0
Hematokrit
35-47
fL
76.0-96.0
Mean Cell
Haemoglobin(MCH)
pg
27.0-32.0
g/dL
30.0-35.0
13.0-14.4
1012/L
4.5-6.5
Platelets
109/L
150-400
Neutrofil
40-75
Perempuan:11.5-16.0
60
SOP
Limfosit
20-45
Monosit
2-10
Eosinofil
1-6
Basofil
0-1
3. Keputusan dibaca
INTERPRETASI UJIAN :
PT
13 saat
PTT
35 - 45 Saat
INR
13 saat
61
SOP
PRINSIP UJIAN :
Untuk mengetahui kadar pemendapan sel darah merah
PROSEDUR UJIAN :
1.
2.
3.
4.
Sampel disebatikan
Bar kod sampel direkod.
Tiub westergen dimasukkan dalam mesin
Keputusan dibaca.
INTERPRETASI UJIAN :
-
Lelaki
1-7mm/jam
Perempuan
1-9mm/jam
Kanak-kanak
1-15mm/jam
62
SOP
BAHAN/RADAS :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
PROSEDUR UJIAN :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
INTERPRETASI UJIAN :
Positif:tiada cahaya flouresen
Negatif:ada cahaya flouresen
63
SOP
64
SOP
ALAT/RADAS : Slaid
Pipet plastik
Coplin jar
Pengering rambut
Pengempar
Tiub emparan
Pensil
REAGEN : 95% alcohol
Etanol mutlak
BIOMATERIAL : Non-cytology Cecair badan
KAEDAH UJIAN :
1.Tuang semua spesimen ke dalam tiub emparan.
2.Masuk ke dalam pengempar dan emparkan pada kelajuan 1500 rpm selama 5 minit.
3.Labelkan 2 keping slaid dengsn nama dan nombor kad pengenalan pesakit.
4.Gunakan pipet plastik dan buang supernatan.
5.Titiskan sedikit mendepan ke atas slaid yang telah dilabel.
6.Lakukan apusan di atas slaid tadi.
7.Masukkan satu slaid ke dalam coplin jar yang mengandungi 95% alkohol.
8.Biarkan selama slaid dalam coplin jar selama 30 minit.
9.Satu lagi slaid dibiarkan kering pada suhu bilik atau menggunakan pengering
rambut.
10.Kedua-dua slaid dimasukkan ke dalam jaket slaid.
11.Kepilkan bersama-sama dengan borang permintaan pesakit.
65
SOP
12.Masukkan maklumat spesimen ke dalam sistem LIS sebelum di bungkus rapi
untuk dihantar ke Hospital Tengku Ampuan Azfan (HTAA).
PRINSIP UJIAN :
Pencelupan ini sangat baik untuk pewarnaan nucleus dan sitoplasma. Hematoxylin
merupakan pencelupan regresif, iaitu pewarna asas. Bila dioksidakan oleh merkuri
oksida ia akan membentuk hematin. Basic Dye dari hematin bertindak dengan acid
dye dari nucleus memberi perbezaan warna antara nucleus dan sitoplasma dengan
baik. Lebihan pencelupan dibezakan dengan acid alcohol manakala proses pembiruan
dilakukan dengan litium carbonat atau air. OG6 dan eosin azure memberi celup balas
yang baik pada sitoplasma, sel-sel muda, keratin dan latar belakang.
PROSEDUR UJIAN :
Pre stain
Stain
Alkohol 80%
Alkohol 70%
Alkohol 50%
Air suling
Harris Haematoxylin
Air paip
Asid alkohol
Air paip
Alkohol 50%
Alkohol 70%
Alkohol 80%
Alkohol 95%
10 saat
10 saat
10 saat
20 saat
3 minit
6 minit
1 saat
6 minit
10 saat
10 saat
66
SOP
Alkohol 100%
OG-6
Alkohol 100%
10 saat
10 saat
10 saat
3 minit
Post
stain
10 saat
3 minit
EA 50
Alkohol 100%
Alkohol 100%
Clearite
Clearite
20 saat
20 saat
20 saat
20 saat
INTERPRETASI UJIAN :
Komponen-komponen
Hasil
Nukleus
Biru
biru kehijauan
sitoplasma berkeratin
oren/merah jambu
oren kemerahan
Mukus
biru kemerahan
SOP
PROSEDUR UJIAN :
1. Kanta objektif 10x digunakan untuk penyaringan keseluruhan slaid. Boleh
dilakukan dengan 2 cara :
Vertical position
Horizontal position
2. Kanta objektif 40x digunakan untuk mengenalpasti sel-sel abnormal dan
normal. Kehadiran monilia spores dan hypae, Tricomonas Vaginalis,
Chlamydia spp, Herpes Simplex dan lain-lain juga diambil kira.
3. Kes-kes yang meragukan untuk membuat pendiagnosan akan dihantar ke
kuantan untuk dirujuk oleh pakar patologi.
4. Semua pendiagnosan yang dibuat direkod dalam buku rekod dan keputusan
dihantar melalui pejabat.
INTERPRETASI UJIAN :
1.Satisfactory for evaluation dimana
2. Satisfactory for evaluation but limited by.... dimana satu atau lebih ciriciri dibawah ada iaitu :
Kekurangan klinikal data
Kehadiran darah atau inflammatory exudate < 75%
Palitan yang terlalu tebal atau proses fiksasi yang tidak berapa memuaskan
( suboptimal fixation )
Tiada komponen TZ atau sel endocervical memelukan pengulangan
pengambilan contoh pap smears.
Unit mikrobiologi di Hospital Sultan Haji Ahmad Shah mengandungi 4 bahagian iaitu
mikrobiologi, imunologi, serologi dan parasitologi. Makmal mikrobiologi mempunyai
68
SOP
beberapa section dan setiap section mengendalikan spesimen yang berbeza, antara
jenis spesimen yang dilakukan di makmal mikrobiologi adalah spesimen urin,
pus,feses,sputum,darah, cecair badan (csf,fluid,air mata, air telingga, air hidung).
Selain itu, penyediaan agar juga dilakukan di makmal mikrobiologi. Semua agar yang
digunakan di makmal ini adalah disediakan secara sendiri dan 12 biochemical set
yang digunakanpun disediakan secara sendiri. Selain daripada itu, terdapat juga Ujian
sensitiviti antibiotik juga dilakukan di makmal mikrobiologi untuk mengetahui
sensitiviti bakteria terhadap antibiotik samada resistan atau sensitivity. Ujian Germ
Tiub juga dilakukan bagi mengesan sp Candida. Bagi penentuan mikroorganisma
dalam darah, mesin bactec telah digunakan bagi melihat pertumbuhan bakteria dalam
botol bactec. Makmal serologi pula berfungsi bagi mengdiagnos sampel pesakit yang
berdasarkan tindakbalas antara antigen dan antibodi. Makmal ini, melakukan beberapa
ujian iaitu veneral disease reference laboratory, seminal analysis, anti-streptolysin O,
ujian pengesanan Chlamydia, dan ujian pengesanan denggi.
Selain daripada itu, pewarnaan asid fast basili bagi sampel sputum untuk pesakit
Tuberkulosis juga telah dilakukan, bagi makmal parasitologi antara ujian ujian yang
dilakukan adalah pencelupan malaria parasit.Antara jenis perwarnaan yang dilakukan
di dalam makmal parasitologi adalah perwarnaan trikrom, perwarnaan Gram dan
perwarnaan Giemsa.
PRINSIP :
Ujian pengesanan organisma yang patogen dalam urin.
69
SOP
BAHAN/RADAS :
1. Dawai loop
2. penunu Bunsen
3. incubator
4. mikroskop
5. slaid kaca
6. Mid stream urine
7. Blood Agar
8. Mac Conkey Agar
9. Mueller Hinton Agar
10. CLED Agar
11. Urin strip
PROSEDUR:
HARI PERTAMA
1.
2.
3.
4.
5.
HARI KEDUA
Blood Agar dan Chocolate Agar
Pemerhatian :
1. - haemolytic Streptococcus
2. Haemolytic Streptococcus
3. Staphylococcus aureus
4. Lihat - haemolysis bagi Streptococcus. Jalankan ujian Streptex
70
SOP
5. Lihat - lysis bagi pneumoniae. Jalankan ujian Optochin
6. Bagi Staphylococcus aureus lakukan ujian Dnase
HARI KETIGA
1. Baca ujian biokimia dan sensitiviti
2. Keluarkan laporan
GRAM NEGATIF
Streptococcus group B
E.coli
71
SOP
haemolytic streptococcus
Klebsiella sp
Staphylococcus saphropyticus
Proteus sp
Staphylococcus aureus
Pseudomonas sp
Enterobacter sp
PRINSIP :
pernafasan.
Gram stain perlu untuk membezakan kahak dan air liur
72
SOP
BAHAN/RADAS :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Dawai loop
penunu bunsen
Sputum
Blood Agar
Mac Conkey Agar
Chocolate Agar
Muller Hinton Agar
PROSEDUR :
1. Buat smear dari purulent diatas slaid
2. Perwarnaan gram dilakukan
3. Periksa smear pada kanta mikroskop x 100 untuk lihat sel pus dan sel
epithelial
4. Letakkan Bacitracin 10 unit ke atas suntikan pertama di atas BA dan CHOC
5. Semua plat agar dieram pada suhu 37C dalam inkubator selam 18 24 jam
HARI KEDUA
BLOOD AGAR
1. Periksa organisma di sekeliling Batcitracin 10 unit. Jika tidak pasti , buat
Gram stain
[ gram negatif pleomorphic organism ]. Haemophilus influenza disyaki ada
jika
2. terdapat koloni yang tumbuh di sekitar Bacitracin 10. Lakukan ujian
Satelitisme dan XV faktor
3. Lihat - haemolysis bagi Streptococcus pneumonaie. Jalankan ujian Optochin.
4. Staphylococcus aureus lakukan ujian Dnase
5. Brahamella catarhhalis [ koloni kelabu kekuningan dan apabila ditolak
dengan wayar loop ia tidak pecah ] , lakukan ujian Dnase dan ujian biokimia.
73
SOP
MAC CONKEY AGAR
1. Lactose fermenter [ merah ]. Lakukan ujian biokimia
2. Non lactose fermenter [ tanpa warna ]. Lakukan ujian Oksidase , uian biokimia
dan
ujian sensitiviti.
CHOCOLATE AGAR
1. Lihat - lysis bagi Streptococcus pneumonaie
2. Lihat Haemophilus influenza [ koloni halus yang tumbuh sekeliling Bacitracin
10 ].
Lakukan ujian Satelitism dan ujian sensitiviti
HARI KETIGA
1. Baca ujian biokimia dan ujian sensitiviti
2. Baca ujian XY faktor dan buat ujian sensitivity
3. Keluarkan laporan
GRAM POSITIF
GRAM NEGATIF
Staphylococcus epidermidis
Neisseria sp
Streptococcus viridans
Fusobacteria
Enterococci
Diptheroides
GRAM POSITIF
GRAM NEGATIF
Streptococcus pneumoniae
Haemophilus influenza
74
SOP
Staphylococcus aureus
Brahamella catarrhalis
Beta haemolytic
Klebsiella pnuemoniae
Streptococcus
Bulkholdria pseudomallei
Aspergillus sp [ fungus ]
Pseudomonas aeroginosa
Coliform sp
Dawai loop
penunu Bunsen
incubator
mikroskop
slaid kaca
Blood Agar
Mac Conkey Agar
Chocolate Agar
Mueller Hinton Agar
PROSEDUR :
HARI PERTAMA
1.
2.
3.
4.
SOP
Haemolytic Streptococcus
3. Staphylococcus aureus
4. Lihat - haemolysis bagi Streptococcus. Jalankan ujian Streptex
5. Lihat - lysis bagi pneumoniae. Jalankan ujian Optochin
6. Bagi Staphylococcus aureus lakukan ujian Dnase
7. Lakukan ujian biokimia dan sensitiviti.
MacConkey Agar
1. Lactose fermenter merah. Lakukan ujian biokimia dan sensitiviti
2. Non lactose fermenter tanpa warna. Lakukan ujian biokimia dan sensitiviti.
HARI KEENAM
1. Baca ujian biokimia dan ujian sensitiviti
2. Keluarkan report.
ORGANISMA YANG PATOGEN DALAM PUS ATAU TISU
GRAM POSITIF
GRAM NEGATIF
76
SOP
Staphylococcus aureus
Klebsiella sp
haemolytic streptococcus
Enterobacter sp
Steptococcus pneumoniae
E.coli
Corynebacteria sp
Acinobacter sp.
Pseudomonas sp.
Dawai loop
penunu Bunsen
incubator
mikroskop
slaid kaca
Blood Agar
Mac Conkey Agar ,
Mueller Hinton Agar
Chocolate Agar
PROSEDUR :
HARI PERTAMA
1. Semak borang dan spesimen dan masukkan data dalam komputer
2. Sapukan di atas BA , MAC , SAB dan CHOC serta lakukan streaking
3. Eram semua plat pada suhu 37C di dalam inkubator
4. CHOC di eram dalam CO2
HARI KEDUA
Perhatikan pertumbuhan organisma : Blood Agar dan Chocolate Agar
77
SOP
1. Lihat sekiranya terdapat pertumbuhan - haemolytic Streptococcus dan
Staphylococcus aureus
Tiada laktosa fermenter tanpa warna. Lakukan ujian biokimia dan sensitiviti
HARI KETIGA
1. Baca ujian biokimia dan sensitiviti
2. Keluarkan laporan
SAMPEL FESES
PRINSIP :
Untuk mengesan organisma yang menyebabkan enteric infection Salmonella ,
Shigella , E.coli , Vibrio cholera , Yersinia dan Campylobacter
BAHAN/RADAS :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Dawai loop
penunu Bunsen
inkubator,mikroskop
slaid kaca
Blood Agar
Mac Conkey Agar
Mueller Hinton
78
SOP
8. Agar,XLD
9. agar,TCBS,
10. alkaline peptone water
PROSEDUR :
HARI PERTAMA
Fresh stool dan Carry blair
1. Sapukan spesimen ke atas MAC , XLD , TCBS Agar , Selenite Broth dan
Alkaline peptone water
SOP
4. Eramkan ke dalam inkubator pada suhu 37C selam 18 24 jam
HARI KETIGA
1. Baca ujian biokimia dan sensitiviti
2. Keluarkan laporan
UJIAN BIOKIMIA
UJIAN TRIPLE SUGAR IRON
TUJUAN:
PRINSIP :
menjadi hitam ).
Pemecahan atau penapaian karbohidrat dikesan melalui penghasilan
gas dan perubahan warna penunjuk pH daripada nerah ke kuning.
Apabila glukosa atau laktosa digunakan, seluruh media menjadi asid
( kuning ). Walaubagaimanapun, media TSI boleh menjadi alkali
( merah ), akibat daripada oksidasi proses penapaian pada keadaan
aerobik.
Kehadiran gelembung udara atau media yang pecah adalah disebabkan
oleh pembentukaan karbon hidroksida
PROSEDUR :
1. Dengan menggunakan dawi loop lurus steril, ambil koloni tunggal
dan inokulasi pada media condong TSI.
2. Eramkan pada suhu 37C selama 24 jam.
80
SOP
3. Perhatikan perubahan pada media TSI, dan rekod keputusan yang
diperolehi.
UJIAN MOTILITI
TUJUAN :
Untuk
membezakan
spesies
Enterobacteriaceace
berdasarkan
PRINSIP :
PROSEDUR :
1. Dengan menggunakan wayar steril, inokulasi mikroorganisma yang di uji dan
inkiubat selama 24 jam pada suhu 35 C atau 37C.
2. Perhatikan sebarang pertumbuhan yang merebak daripada garis lurus inokulasi
atau tidak.
81
SOP
UJIAN UREASE
TUJUAN :
PRINSIP :
PROSEDUR :
1. Kultur permukaan slope agar urea dengan organisma ujian.
2. Eramkan selama 24 jam pada 37C.
3. Periksa penghasilan urease dengan melihat warna merah jambu
dalam medium.
82
SOP
UJIAN MALONATE
TUJUAN :
PRINSIP :
dan
bromo-thymol
biru
sebagia
penunjuk.
organism
PROSEDUR :
1. Dengan menggunakan wayar loop lurus steril, inokulasi medium
malonet dengan organism ujian.
2. Eramkan 37C selama 24 jam.
3. Pada hari ke 2, perhatikan perubahan yang terhasil.
83
SOP
UJIAN ORNITHINE
TUJUAN :
PRINSIP :
PROSEDUR :
1. Dengan menggunakan wayar inokulasi steril, ambil koloni
tunggal dan inokulasikan pada media ornitin.
2. Eram pada suhu 37C selama 24 jam.
3. Perhatikan hasil tindak balas, dan redok keputusan yang
diperolehi.
84
SOP
UJIAN ARABINOSE DAN ADONITOL
TUJUAN :
Untuk
menetukan
kemampuan
mikroorganisma
menfermentasi
PRINSIP :
Kemapuan
mikroorganisma
menfermentasi
karbohidrat
dengan
kumpulan
Enterobacteriaceace
yang
berguna
dalam
pengenalpastiannya
PROSEDUR :
1. Dengan menggunakan dawai loop lurus steril, ambil kolonu tunggal,
dan inokulasikan pada media arabinos dan adonitol.
2. Eramkan 24 jam pada suhu 37c.
3. Perhatikan perubahan warna pada media, dan rekod keputusan yang
diperolehi.
85
SOP
UJIAN INDOL
TUJUAN :
PRINSIP :
triptofanase
Triptofan
PROSEDUR :
1. Dengan mengguunakan dawai lurus steri, inokulasi organism ujian
ke dalam medium triptofan.
2. Eram selama 24 jam pada suhu 37C.
3. Tambahkan reagen kovacs.
4. Perhatikan penghasilan indol berbentuk cincin dengan kehadiran
warna merah jambu pada permukaan medium.
86
SOP
UJIAN SITRAT
TUJUAN :
PRINSIP:
PROSEDUR :
i.
ii.
iii.
87
SOP
TAJUK : PENYEDIAAN AGAR DARAH
BAHAN / RADAS :
1.
2.
3.
4.
5.
Penunu bunsen
Piring petri
20 g (oxoid) blood agar base No.2
475ml deionised water dan
25 ml defrinated ox blood atau human expired blood
PRINSIP UJIAN :
Penambahan darah pada media asas menyebabkan kebanyakkan mikroorganisma
kultur pada media tersebut.
PROSEDUR UJIAN :
1. 20 g (oxoid) blood agar base No.2 dicampur dengan 475ml deionised water
dan dipanaskan.
2. Sebatian tersebut dimasukkan ke dalam autoclave pada suhu 121C selama 15
minit.
3. Sebatian disejukkan pada suhu 50C dan darah ditambah pada sebatian
tersebut.
4. Sebatian tersebut dituangkan pada piring petri dan tiada kehadiran air bubble
dapat dipastikan.
5. Piring petri tersebut diinkubasi semalaman.
INTERPRETASI :
SOP
BAHAN / RADAS :
1.
2.
3.
4.
5.
Penunu Bunsen
Piring petri
20 g (oxoid) blood agar base No.2
475ml deionised water
25 ml defrinated ox blood atau human expired blood
PRINSIP UJIAN :
Media tersebut mengandungi faktor pertumbuhan seperti heme dan NADP yang
dibebaskan dari sel darah merah untuk menggalakkan pertumbuhan patogen
PROSEDUR :
1. 20 g (oxoid) blood agar base No.2 dicampur dengan 475ml deionised water
dan dipanaskan.
2. Sebatian tersebut dimasukkan ke dalam autoclave pada suhu 121C selama 15
minit.
3. Sebatian disejukkan pada suhu 80C dan darah ditambah pada sebatian
tersebut dalam masa 10 minit selepas sebatian dikeluarkan dari autoclave.
4. Sebatian tersebut dituangkan pada piring petri dan tiada kehadiran air bubble
dapat dipastikan.
5. Piring petri tersebut diinkubasi semalaman.
INTERPRETASI :
89
SOP
BAHAN / RADAS :
1. Penunu Bunsen
2. Piring petri
3. 50 g MacConkey Agar No II
4. 1 liter deionised water
PRINSIP :
Media mengandungi kristal violet dan garam bile untuk mengalakkan pertumbuhan
bakteria.Selain itu,media mengandungi lactose dan indicator untuk membezakan
laktosa dari non-lactose fermenters
PROSEDUR :
1. 50 g MacConkey agar No II dicampur dengan 1 liter deionised water dan
dipanaskan selama 1 minit.
2.
3. Sebatian tersebut disejukkan dan dituangkan pada piring petri serta tiada
kehadiran air bubble dapat dipastikan.
4. Piring petri tersebut diinkubasi semalaman.
INTERPRETASI :
BAHAN / RADAS :
90
SOP
1.
2.
3.
4.
5.
6.
PRINSIP UJIAN :
Prinsip bergantung pada kehadiran komponen dinding sel bakteria iaitu
berdasarkan bakteria yang tahan luntur dengan aseton atau alkohol selepas
diwarnakan dengan para-rosanitive dye atau pewarna Kristal violet.Bagi bakteria
gram positif,warna yang digunakan tidak luntur kerana pewarna terperangkap pada
komponen peptidoglikan yang tebal dan bergabung dengan asid teichoic menjadikan
hasil
bewarna
biru-ungu.Manakala
bakteria
gram
negatif
terdapat
lapisan
PROSEDUR :
1. Apusan kering dilakukan pada slaid dan disejukkan sebelum melakukan
pewarnaan gram.
2. Kristal violet dititiskan pada slaid tersebut dan dibiarkan selama 1 minit
3. Slaid tersebut dibasuh dan iodine dititiskan pada slaid tersebut serta dibiarkan
selama 1 minit.
4. Slaid tersebut dicuci dan aseton dititiskan pada slaid tersebut serta dibiarkan
selama 3-5 saat.
5. Slaid dicuci dan safranin dititiskan pada slaid tersebut serta dibiarkan selama
15 saat.
6. Slaid tersebut dicuci dan dikeringkan.
7. Hasil diperhatikan dibawah mikroskop pada kanta kuasa X100
91
SOP
INTERPRETASI :
Gram positif-berbentuk kokus atau rod dan berwarna ungu yang hadir secara
kelompok atau berantai
Gram negatif- berbentuk kokus atau rod dan berwarna merah yang hadir secara
kelompok atau berantai
BAHAN / RADAS :
1. Slaid
92
SOP
2.
3.
4.
5.
6.
Kayu aplikator
Carbol fuchsin
3%Asid alkohol
Metilena biru
Sampel sputum, cecair badan
PRINSIP UJIAN :
Pewarna Carbol Fuchsin melekat pada asid mikolik yang terdapat pada dinding sel
bakteria.Pewarna Carbol fuchsin mengandungi bewarna merah mengandungi fenol
yang bertindak sebagai mordan bagi menguatkan afiniti perlekatan antara pewarna
dan asid mikolik.Pewarna Carbol fuchsin dipanaskan bertujuan membenarkan
pewarna memasuki dinding sel bakteria berlilin.Peluntur yang kuat iaitu asid alkohol
melunturkan latar belakang kecuali organisma asid fast basilli.
PROSEDUR :
1. Apusan dilakukan pada slaid berukuran 3cmX2cm seperti rajah dibawah.
SOP
5. Slaid tersebut dicuci dan metilena biru dititiskan pada slaid serta dibiarkan
selama 1 minit.
6. Slaid tersebut dicuci dan dikeringkan.
7. Hasil diperhatikan pada kanta kuasa X100.
INTERPRETASI :
SOP
BIOMATERIAL : Serum pesakit
PRINSIP :
Antibodi serum bertindakbalas dengan antigen
KAEDAH :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
ASOT
8. Sebatikan dan rotate selama 3 minit dan pemerhatikan agglutinasi.berdasarkan
pencairan.
9. Rekodkan maklumat dan keputusan pesakit dalam sistem komputer.
KEPUTUSAN :
Positif : terdapat agglutinasi
Negative : tiada agglutinasi
KAEDAH :
95
SOP
1.
2.
3.
4.
KEPUTUSAN :
Positif : terdapat agglutinasi
Negative : tiada agglutinasi
SOP
menghasil fluorescence epal-hijau pada sel nukleus. Sampel yang negetif
menunjukkan hijau yang biasa sahaja dan tiada fluorescen.
KAEDAH :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
KEPUTUSAN :
Positif : terdapat fluorescence
Negatif : Tiada fluorescence
97