PRAKTKUM III

UJI LIPID DAN KOLESTROL

Tujuan Percobaan
Mahasiswa mampu memahami prinsip uji lipid dan kolesterol yang merupakan
keterampilan dasar dalam bidang keahlian biokimia klinik.

Alat dan bahan
Alat yang digunakan dalam praktikum
1. Beaker glass
2. Erlenmeyer
3. Kaca objek dan penutup kaca objek
4. Mikroskop
5. Sentrifugasi
6. Tabung reaksi 10 ml
7. Waterbath
8. Rak tabung reaksi
9. Pipet tetes
Bahan yang digunakan dalam praktikum
- pereaksi untuk lipid
- kertas saring
- pelarut organik
- minyak goreng
- kuning telur
- aquadest
-empedu ayam


Prosedur Kerja
Uji kelarutan lipid





















1ml alkohol 96% 1 ml heksan 1ml kloroform 1ml air suling 1ml NaCO
3
0,5%
Ditambahkan 10 tetes minyak goreng
Kocok homogen, amati yang terjadi
Siapkan 5 tabung reaksi




Uji pembentukan emulsi




















Siapkan 3 tabung reaksi
Tabung 1 : diisi 2 mL aquadest dan 2 tetes minyak goreng
Tabung 2 : diisi 2 mL akuades, 2 tetes minyak goreng, dan 2 tetes larutan natrium karbonat
0,5 %
Tabung 3 : diisi 2 mL larutan empedu yang encer (empedu yang dihaluskan ) dan 2 tetes
minyak goreng

Kocok homogen, amati yang terjasi



Uji penyabunan lipid





















Tetesi minyak goreng pada kaca porselin dan tes pH nya dengan kertas pH stick

Masukan 5 mL minyak goreng dalam tabung reaksi
Tambahkan 1,5 NaOH dan 10 mL alkohol 96%
panaskan hingga mendidih selama 15 menit
ambil 3 tetes larutan dan ditambahkan akuades
dinginkan, dan tambahkan 75 mL akuades
dipanaskan kembali hingga semua sabun larut


Uji kolesterol






















3 mL kuning telur + 3 mL kloroform + 3 mL heksan
Dikocok dan dibiarkan larutan membentuk dua lapisan
Ambil larutan yang berwarna kekuningan, dan endapan dibuang

Uapkan heksan dan kloroform
tabung pertama diisi dengan minyak goreng
tabung kedua diisi dengan larutan heksan kuning telur yang telah disiapkan tadi

Siapkan dua tabung reaksi
tambahkan kloroform sebanyak 1 M, 10 tetesan asam asetat anhidrat, 3 tetes
H
2
SO
4
pekat
Kocok bebebrapa detikamati perubahan yang terjadi



Uji Kristal kolesterol





















larutkan sedikit kolesterol dengan air panas diatas kaca objek
ambil 1 tetes larutan tersebut dan dipersiapkan pada kaca preparat
tambahkan alkohol lalu dibiarkan hingga terjadi kristal dan alkohol menguap

amati kristal yang terbentuk di bawah mikroskop




Uji Hasil
Uji kelarutan lipid

+NaCO


Putih Susu, Koloid
+Kloroform Lapisan atas minyak, Lapisan bawah kloroform
+Heksan larut
+Air 2 lapisan, atas minyak, bawah air
+Alkohol 2 lapisan , atas alkohol, bawah minyak
Uji Emulsi

Aquadest + minyak


2 Lapisan, atas minyak, bawah air
Aquadest + minyak + NaSO Bawah sedikit minyak bawah air keruh

Empedu + minyak Minyak terdispersi merata, larutan jadi keruh
Uji Kolesterol

Kuning telur
3 Lapisan = atas: kuning
tengah: putih
bawah: bening
Minyak 2 lapisan = atas: agak kekuningan
Bawah: keruh
Uji penyabunan

3 tetes larutan + aquadest



Larut

-dipanaskan kembali + 75 mL
aquadest
Larutan keruh, bagian atas berbusa
Uji Kristal

Kolesterol + air panas


Encer + alkoholterbentuk kristal





Hasil uji kelarutan lipid
Dari kiri kekanan
+alkohol
+air suling
+heksan
+kloroform
+NaCO
3




+ 10 tetes minyak pada uji lipid

Uii emulsi
Dari kiri kekanan
Aqudest+ minyak goreng,
Aquadest+minyakgoreng+NaCO
3
0,5%,
Empedu+ minyak goreng


Tes ph

Uji penyabunan

Uji kolesterol

Uji kolestrol setelah penambahan Klorofrom

+ klorofrom
Reaksi terakhir uji kolestrol

Uji Kristal + alkohol

Hasil kristal