Disusun oleh : Aloysius Ade Pratama 118114150 Gita Mentari 118114160 Yolana Kwartono 118114170 I Ngura !egu Pratama 118114180 AKULTAS ARMASI UNI!ERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA "#$" En%i&-Lin'e( I&&unoso)*en+ Ass,- (ELISA) I. Se/,),h 0ene&u,n (,n 0)insi1 D,s,) Te'ni' ELISA !e"ni" #$I%A &ertama "ali di&er"enal"an &ada taun 1'71 ole Peter Perlmann dan #(a #ng(all) Mere"a mengguna"an te"ni" #$I%A dalam *idang imunologi untu" menganalisis intera"si antara antigen dan anti*odi dalam sam&el+ dimana intera"si terse*ut ditandai dengan mengguna"an suatu en,im yang *er-ungsi se*agai signal ./roo"s+ 00051) Prinsi& dasar dari te"ni" #$I%A ini adala &ertama antigen atau anti*odi yang enda" diu2i ditem&el"an &ada suatu &ermu"aan yang *eru&a mi3rotiter) Penem&elan terse*ut da&at dila"u"an melalui dua 3ara+ yaitu se3ara &enem&elan se3ara non s&esi-i" dengan adsor*si "e &ermu"aan mi3rotiter+ dan &enem&elan se3ara s&esi-i" dengan mengguna"an anti*odi atau antigen lain yang *ersi-at s&esi-i" dengan antigen atau anti*odi yang diu2i .3ara ini diguna"an &ada te"ni" #$I%A sandwi31) %elan2utnya anti*odi atau antigen s&esi-i" yang tela ditaut"an dengan suatu en,im signal .disesuai"an dengan sam&el *ila sam&el *eru&a antigen+ ma"a diguna"an anti*odi s&esi-i"+ sedang"an *ila sam&el *eru&a anti*odi+ ma"a diguna"an antigen s&esi-i"1 di3am&ur"an "e atas &ermu"aan terse*ut+ seingga da&at ter2adi intera"si antara anti*odi dan antigen yang *ersesuaian) 4i antara tia& taa&+ &late arus di3u3i dengan larutan deter2en lem*ut untu" mem*uang "ele*ian &rotein atau anti*odi yang tida" teri"at) %etela taa& &en3u3ian tera"ir+ "emudian "e atas &ermu"aan &late terse*ut di3am&ur"an suatu su*strat yang da&at *erea"si dengan en,im signal) %u*strat yang diguna"an adala su*strat "romogeni") Pada saat su*strat terse*ut di3am&ur"an "e &ermu"aan+ en,im yang *ertaut dengan anti*odi atau antigen s&esi-i" yang *erintera"si dengan anti*odi atau antigen sam&el a"an *erea"si dengan su*strat dan menim*ul"an suatu signal yang da&at didete"si) Pada #$I%A -loures3ense misalnya+ en,im yang tertaut dengan anti*odi atau antigen s&esi-i" a"an *erea"si dengan su*strat dan menim*ul"an signal yang *eru&a &endadaran -loures3ense) In"u*asi dengan su*strat "romogeni" .semula ta" *erwarna1 a"an men2adi *erwarna *ila diidrolisis ole en,im) Intensitas warna yang ter2adi diu"ur dengan s&e"tro-otometer untu" menentu"an "adar antigennya .5antam+ 00061) 4alam &er"em*angan selan2utnya+ selain diguna"an se*agai u2i "ualitati- untu" mengetaui "e*eradaan suatu anti*odi atau antigen dengan mengguna"an anti*odi atau antigen s&esi-i"+ te"ni" #$I%A 2uga da&at dia&li"asi"an dalam u2i "uantitati- untu" mengu"ur "adar anti*odi atau antigen yang diu2i dengan mengguna"an alat *antu *eru&a s&e"tro-otometer atau dengan 3ara menentu"an 2umla &enam*aan atau "adar anti*odi atau antigen+ seingga da&at di*uat suatu "ur(a standar dan "adar antigen atau anti*odi yang tida" di"etaui da&at ditentu"an .5antam+ 00061) II. Kele*ih,n 2 Ke'u),n3,n Te'ni' ELISA !e"ni" #$I%A ini memili"i *e*era&a "ele*ian+ antara lain7 !e"ni" &enger2aan relati- sederana) 5elati- e"onomis ."arena 2enis anti*odi yang diguna"an anya satu sa2a+ seingga mengemat *iaya untu" mem*eli *anya" 2enis anti*odi1) 8asil memili"i ting"at sensiti(itas yang 3u"u& tinggi) 4a&at diguna"an untu" mendete"si "e*eradaan antigen walau&un "adar antigen terse*ut sangat renda .al ini dise*a*"an si-at intera"si antara anti*odi dan antigen yang *ersi-at sangat s&esi-i"1) 4a&at diguna"an dalam *anya" ma3am &engu2ian .$e9uin+ 00051) %edang"an "e"urangan dari te"ni" #$I%A+ antara lain7 :enis anti*odi yang da&at diguna"an &ada u2i dengan te"ni" #$I%A ini anya 2enis anti*odi mono"lonal .anti*odi yang anya mengenali satu antigen1) 8arga anti*odi mono"lonal le*i maal dari&ada anti*odi &oli"lonal+ seingg a &engu2ian te"ni" #$I%A ini mem*utu"an *iaya yang 3u"u& maal) Pada *e*era&a ma3am te"ni" #$I%A+ da&at ter2adi "esalaan &engu2ian a"i*at "ontrol negati- yang menun2u""an res&on &ositi- dise*a*"an ine-e"ti(itas dari larutan *lo3"ing seingga anti*odi se"under atau antigen asing da&at *erintera"si dengan anti*odi *ertaut en,im signal dan menim*ul"an signal) 5ea"si antara en,im signal dan su*strat *erlangsung 3e&at+ seingga &em*a3aan arus dila"u"an 3e&at .&ada &er"em*angannya+ al ini diatasi dengan mem*eri"an larutan untu" mengenti"an rea"si1 .$e9uin+ 00051) III. Al,+ 2 B,h,n Y,n3 Di3un,',n Alat &aling utama yang diguna"an dalam te"ni" #$I%A adala mi3rotiter) Mi3rotiter ini *eru&a suatu &a&an &lasti" dengan 3e"ungan se*anya" '6 *ua .8 3e"ungan "e ara *awa dan 10 3e"ungan "e sam&ing1) Mi3rotiter ter*uat dari *aan &olistirena) ;e"ungan mi3rotiter memili"i tinggi se"itar 1 3m dan diameter 0+7 3m) /eri"ut ini adala gam*arnya) Mi4)o+i+e) (#ntwistle+1''51) %elain itu+ alat dan *aan lain yang diguna"an dalam te"ni" #$I%A antara lain Antigen yang dimurni"an .2i"a sam&el yang enda" didete"si atau di"uanti-i"asi *eru&a anti*odi1) Antigen yang dimurni"an .2i"a sam&el yang enda" didete"si atau di"uanti-i"asi *eru&a antigen1) $arutan standard ."ontrol &ositi- dan negati-1) %erum am&el yang ingin dites) ;airan &en3u3i .*u--er1) Anti*odi atau antigen yang tertaut dengan en,im signal) %u*strat yang *ersi-at s&esi-i" terada& en,im signal) #$I%A reader .s&e"tro-otometer1 untu" &engu"uran "uantitati-) Mi3ro&late Mi3ro&i&ette ;on2ugat .se3ondary A* < en,yme1 .#ntwistle+1''51) I!. M,4,&-M,4,& Te'ni' ELISA %e3ara umum+ te"ni" #$I%A di*eda"an men2adi dua 2enis yaitu te"ni" #$I%A "om&etiti- yang mengguna"an "on2ugat antigen=en,im atau "on2ugat anti*odi=en,im+ dan te"ni" #$I%A non"om&etiti-+ anti*odi "edua .s"under1 a"an di"on2ugasi"an dengan en,im yang *er-ungsi se*agai signal) !e"ni" #lisa non"om&etiti- ini sering"ali dise*ut dengan te"ni" #$I%A >sandwich?) 4ewasa ini+ te"ni" #$I%A tela *er"em*ang men2adi *er*agai ma3am 2enis te"ni") Per"em*angan ini didasari &ada tu2uan dari dila"u"annya u2i dengan te"ni" #$I%A terse*ut seingga da&at di&erole asil yang o&timal) /eri"ut ini adala *e*era&a ma3am te"ni" #$I%A yang relati- sering diguna"an+ antara lain 7 $. ELISA Di)e4+ !e"ni" #$I%A ini meru&a"an te"ni" #$I%A yang &aling sederana) !e"ni" ini sering"ali diguna"an untu" mendete"si dan mengu"ur "onsentrasi antigen &ada sam&el) #$I%A 4ire3t mengguna"an suatu anti*odi s&esi-i" .mono"lonal1 untu" mendete"si "e*eradaan antigen yang diingin"an &ada sam&el yang diu2i .$e9uin+ 00051) Pada #$I%A 4ire3t+ &ertama mi3rotiter diisi dengan sam&el yang mengandung antigen yang diingin"an+ seingga antigen terse*ut da&at menem&el &ada *agian dinding mi"rotiter+ "emudian mi"rotiter di*ilas untu" mem*uang antigen yang tida" menem&el &ada dinding mi"rotiter) $Alu anti*odi yang tela ditaut"an dengan en,im signal dimasu""an "e dalam lu*ang=lu*ang mi"rotiter seingga anti*odi da&at *erintera"si dengan antigen yang diingin"an+ yang dilan2ut"an dengan mem*ilas mi"rotiter untu" mem*uang anti*odi tertaut en,im signal yang tida" *erintera"si dengan antigen) $alu "e dalam lu*ang=lu*ang mi"rotiter terse*ut ditam*a"an su*strat yang da&at *erea"si dengan en,im signal+ seingga en,im yang tertaut dengan anti*odi yang tela *erintera"si dengan antigen yang diingin"an a"an *erea"si dengan su*strat dan menim*ul"an signal yang da&at didete"si) Pendete"sian intera"si antara anti*odi dengan antigen terse*ut selan2utnya da&at diitung dengan mengguna"an "olorimetri+ chemiluminescent+ atau -luores3ent end=&oint .@aysse+ 1''81)
Kelemaan #$I%A 4ire3t 7 Immunorea"ti(itas anti*odi "emung"inan a"an *er"urang a"i*at tertaut dengn en,im) Penautan en,im signal "e setia& anti*odi menga*is"an wa"tu dan maal) !ida" memili"i -le"si*ilitas dalam &emilian tautan en,im .la*el1 dari anti*odi &ada &er3o*aan yang *er*eda) Am&li-i"sasi signal anya sedi"it) $arutan yang mengandung antigen yang diingin"an arus dimurni"an se*elum diguna"an untu" u2i #$I%A 4ire3t) Kele*ian #$I%A 4ire3t ;e&at "arena mengguna"an satu anti*ody Kemung"inan ter2adinya "egagalan dalam A2i #$I%A a"i*at rea"si silang dengan anti*odi dengan anti*odi lain .anti*odi se"under1 da&at diminimalisasi .@aysse+ 1''81) %edang"an "ele*ian dari #$I%A indire3t antara lain7 !erda&at *er*agai ma3am (ariasi anti*odi se"under yang ter2ual se3ara "omersial di &asar Imunorea"ti(itas dari anti*odi yang diingin"an .target1 tida" ter&engaru ole &enautan en,im signal "e anti*odi se"under "arena &enautan dila"u"an &ada wada *er*eda) !ing"at sensiti(itas mening"at "arena setia& anti*odi yang diingin"an memili"i *e*era&a e&ito& yang *isa *erintera"si dengan anti*odi se"under .$e9uin+ 00051) ". Elis, S,n(5i4h !e"ni" elisa 2enis ini mengguna"an anti*odi &rimer s&esi-i" untu" menang"a& antigen yang diingin"an dan anti*odi se"under tertaut en,im signal untu" mendete"si "e*eradaan antigen yang diingin"an) Pada dasarnya+ &rinsi& "er2a dari #$I%A sandwi3 miri& dengan #$I%A dire3t+ anya sa2a &ada #$I%A sandwi3+ larutan antigen yang diingin"an tida" &erlu di&uri-i"asi) Namun+ "arena antigen yang diingin"an arus da&at *erintera"si dengan anti*odi &rimer s&esi-i" dan anti*odi se"under s&esi-i" tertaut en,im signal+ ma"a te"ni" #$I%A sandwi3 ini 3enderung di"usus"an &ada antigen yang memili"i minimal 0 sisi antigen atau antigen yang *ersi-at multi(alent se&erti &olisa"arida atau &rotein) Pada #$I%A sandwi3+ anti*odi &rimer sering dise*ut se*agai anti*odi &enang"a&+ sedang"an anti*odi se"under sering"ali dise*ut se*agai anti*odi dete"si .5antam+ 00061)
4alam &enga&li"asiannya+ #$I%A sandwi3 *anya" diman-aat"an untu" mendete"si "e*eradaan antigen multi(alent yang "adarnya sangat renda &ada suatu larutan dengan ting"at "ontaminasi tinggi) 8al ini dise*a*"an #$I%A sandwi3 memili"i ting"at sensiti(itas tinggi terada& antigen yang diingin"an a"i*at "earusan dari antigen terse*ut untu" *erintera"si dengan "edua anti*odi) Pada #$I%A sandwi3+ &ertama mi3rotiter diisi dengan larutan yang mengandung anti*odi &enang"a&+ seingga anti*odi &enang"a& da&at menem&el &ada *agian dinding lu*ang mi3rotiter) %elan2utnya mi3rotiter di*ilas untu" mem*uang anti*odi &enang"a& yang tida" menem&el &ada dinding lu*ang mi3rotiter) Kemudian larutan sam&el yang mengandung antigen yang diingin"an dimasu""an "e dalam lu*ang=lu*ang mi3rotiter+ seingga ada intera"si antara anti*odi &enang"a& dengan antigen yang diingin"an) %elan2utnya+ mi3rotiter "em*ali di*ilas untu" mem*uang antigen yang tida" *erintera"si dengan anti*odi &enang"a&) Kemudian+ "e dalam lu*ang mi3rotiter dimasu""an larutan yang *erisi anti*odi dete"tor+ seingga &ada lu*ang mi3rotiter terse*ut ter2adi intera"si antara antigen yang diingin"an dengan anti*odi dete"tor) %elan2utnya mi3rotiter di*ilas lagi untu" mem*uang anti*odi dete"tor yang tida" *erintera"si dengan anti*odi s&esi-i") Kemudian &ada taa& a"ir #$I%A indire3t+ ditam*a"an su*strat yang da&at *erea"si dengan en,im signal+ lalu en,im yang tertaut &ada anti*odi dete"tor yang tela *erintera"si dengan antigen yang diingin"an a"an *erea"si dengan su*strat dan menim*ul"an signal yang da&at didete"si .5antam+ 00061 4alam #$I%A sandwi3+ ada *e*era&a -a"tor yang mem&engarui ting"at sensiti(itas dari asil &engu2ian+ antara lain7 /anya" mole"ul anti*odi &enang"a& yang *erasil menem&el &adadinding lu*ang mi3rotiter) A-initas dari anti*odi &enang"a& dan anti*odi dete"tor terada& antigen .%o-ro+ 1''41 %e*enarnya+ te"ni" #$I%A sandwi3 ini meru&a"an &engem*angan dari te"ni" #$I%A terdaulu+ yaitu #$I%A dire3t) Kele*ian te"ni" #$I%A sandwi3 ini &ada dasarnya *erada &ada ting"at s&esiti-itasnya yang relati- le*i tinggi "arena antigen yang diingin"an arus da&at *erintera"si dengan 0 2enis anti*odi+ yaitu anti*odi &enang"a& dan anti*odi dete"tor) Namun demi"ian+ te"ni" #$I%A sandwi3 ini memili"i "elemaan+ yaitu te"ni" ini anya da&at dia&li"asi"an untu" mendete"si antigen *ersi-at multi(alent serta sulitnya men3ari dua 2enis anti*odi yang da&at *erintera"si antigen yang sama &ada sisi antigeni" yang *er*eda .e&ito&nya arus *er*eda1 .%o-ro+ 1''41) 6. ELISA Bio+in S+)e1+,7i(in (8enis ELISA &o(e)n) Pada &er"em*angan selan2utnya+ te"ni" #$I%A sandwi3 2uga di"em*ang"an untu" mendete"si anti*odi dengan ting"at sensiti(itas relati- le*i tinggi) !e"ni" ini di"enal se*agai te"ni" #$I%A &enang"a& anti*odi+ dimana &rinsi& "er2anya sama dengan #$I%A sandwi3+ anya sa2a yang diguna"an &ada te"ni" ini adala antigen &enang"a& dan antigen dete"tor .antigen *ertaut en,im signal+ *ersi-at o&tional a&a*ila anti*odi yang diingin"an tida" tertaut denganen,im signal1) ;onto dari a&li"asi te"ni" ini adala te"ni" #$I%A untu" mendete"si (itamin *iotin yang tertaut dengan suatu anti*odi a(idin dengan mengu*a anti*odi a(idin men2adi anti*odi stre&ta(idin+ yaitu dimana satu mole"ul stre&ta(idin da&at mengi"at em&at mole"ul *iotin .&engem*angan dari #$I%A indire3t1+ seingga signal yang teram&li-i"asi men2adi sema"in "uat a"i*at intera"si antara *iotin dengan en,im yang men2adi sema"in *anya" .#ntwistle+1''51) 9. ELISA Ko&1e+i+i: !e"ni" #$I%A ini meru&a"an &engem*angan dari te"ni" #$I%A terdaulu) Prinsi& dasar dari te"ni" ini adala dengan menam*a"an suatu "om&etitor "e dalam lu*ang mi3rotiter) !e"ni" #$I%A "om&etiti- ini da&at dia&li"asi"an untu" mendete"si "e*eradaan antigen mau&un anti*odi) Pada &endete"sian antigen+ &ertama mi3rotiter diisi anti*odi s&esi-i" yang da&at *erintera"si dengan antigen yang diingin"an mau&un antigen s&esi-i" tertaut en,im signal+ seingga anti*odi s&esi-i" terse*ut da&at menem&el &ada *agian dinding=dinding lu*ang mi3rotiter+ "emudian mi3rotiter di*ilas untu" mem*uang anti*odi s&esi-i" yang tida" menem&el &ada dinding lu*ang mi3rotiter) $alu+ larutan yang mengandung antigen s&esi-i" yang tela ditaut"an dengan en,im signal dan larutan sam&el yang mengandung antigen yang diingin"an dimasu""an "e dalam lu*ang mi3rotiter seingga ter2adi "om&etisi antara antigen s&esi-i" tertaut en,im signal dengan antigen yang diingin"an untu" da&at *erintera"si dengan anti*odi s&esi-i"+ dilan2ut"an dengan mem*ilas mi3rotiter untu" mem*uang antigen s&esi-i" tertaut en,im signal atau antigen yang tida" *erintera"si dengan anti*odi s&esi-i") $alu+ "edalam lu*ang=lu*ang mi3rotiter terse*ut ditam*a"an su*strat yang da&at *erea"si dengan en,im signalyang tertaut &ada antigen s&esi-i"+ seingga en,im yang tertaut dengan antigen yang tela *erintera"si dengan anti*odi s&esi-i" a"an *erea"si dengan su*strat dan menim*ul"an signal yang da&at didete"si) Pada &roses &endete"sian ini+ &endete"sian &ositi- ditandai ole tida" adanya signal yang ditim*ul"an+ *erarti antigen yang diingin"an tela menang *er"om&etisi dengan antigen s&esi-i" tertaut en,im signal dan *erintera"si dengan anti*odi s&esi-i" .$e9uin+ 00051) %edang"an &ada &endete"sian anti*odi+ &ertama mi3rotiter diisi antigen s&esi-i" yang da&at *erintera"si dengan anti*odi yang diingin"an mau&un anti*odi s&esi-i" tertaut en,im signal+ seingga antigen s&esi-i" terse*ut da&atmenem&el &ada *agian dinding=dinding lu*ang mi3rotiter+ "emudian mi3rotiter di*ilas untu" mem*uang antigen s&esi-i" yang tida" menem&el &ada dinding lu*ang mi3rotiter) $alu larutan yang mengandung anti*odi s&esi-i" yang tela ditaut"an dengan en,im signal dan larutan sam&el yang mengandung anti*odi yang diingin"an dimasu""an "e dalam lu*ang=lu*ang mi3rotiter+ seingga ter2adi "om&etisi antara anti*odi s&esi-i" tertaut en,im signal dengan anti*odi yang diingin"an agar da&at *erintera"si dengan antigen s&esi-i"+ yang dilan2ut"an dengan mem*ilas mi3rotiter untu" mem*uang anti*odi s&esi-i" tertaut en,im signal atau anti*odi yang tida" *erintera"si dengan antigen s&esi-i") $alu+ "e dalam lu*ang mi3rotiter terse*ut ditam*a"an su*strat yang da&at *erea"si dengan en,im signal yang tertaut &ada anti*odi s&esi-i"+ seingga en,im yang tertaut dengan anti*odi yang tela *erintera"si dengan antigen s&esi-i" a"an *erea"si dengan su*strat "emudian menim*ul"an signal yang da&at didete"si) Pada &roses &endete"sian+ &endete"sian &ositi- ditandai ole tida" adanya signal yang ditim*ul"an+ yang *erarti *awa anti*odi yang diingin"an tela menang *er"om&etisi dengan anti*odi s&esi-i" tertaut en,im signal dan *erintera"si dengan antigen s&esi-i" .$e9uin+ 00051) Kele*ian dari te"ni" #$I%A "om&etiti- ini adala tida" &erlunya dila"u"an &uri-i"asi terada& larutan sam&el yang mengandung anti*odi atau antigen yang diingin"an+ ta&i asil yang di&erole teta& memili"i ting"at sensiti(itas tinggi a"i*at si-at s&esi-isitas dari anti*odi dan antigen)#$I%A Multi&leB te"ni" #$I%A meru&a"an &engem*angan te"ni" #$I%A yang ditu2u"an untu" &engu2ian se3ara simultan+ sedang"an &rinsi& dasarnya miri& dengan te"ni" #$I%A terdaulu ./roo"s+ 00051) !. ;on+oh L,n3',h Ke)/, Te'ni' ELISA /eri"ut ini adala 3onto lang"a "er2a *e*era&a ma3am te"ni" #$I%A+ yaitu7 Pendete"sian anti*odi dengan #$I%A indire3t7 1) Mela&isi mi"rotiter &late dengan antigen yang suda dimurni"an dengan mem*iar"an larutan *erisi antigen menem&el &ada dindingC &ermu"aan selama 60=60 menit) 0) Mem*ilas antigen yang tida" teri"at dengan *u--er ) 6) Mela&isi sisi tertentu yang tida" s&esi-i" dile"ati ole antigen dengan &rotein yang tida" *eru*unganC tida" s&esi-i" .se&erti larutan susu *u*u"1) 4) Mem*ilas &rotein yang tida" mele"at) 5) Menam*a sam&el serum yang a"an didete"si anti*odinya lalu mem*iar"an anti*odi s&esi-i" untu" *eri"atan dengan antigen) 6) Mem*ilas anti*odi yang tida" teri"at) 7) Menam*a"an anti=Ig yang a"an *eri"atan &ada daera D3 &ada anti*odi yang s&esi-i" .se*agai 3onto+ anti=rantai gamma manusia yang *eri"atan dengan IgG manusia1) 4aera D3 &ada anti=Ig a"an *eri"atan se3ara "o(alen dengan en,im) 8) Mem*ilas "om&le"s anti*odi=en,im yang tida" teri"at) ') Menam*a"an su*strat 3romogeni37 su*strat yang tida" *erwarna yang teri"at "e en,im a"an di"on(ersi men2adi &rodu") 10) In"u*asi sam&ai mun3ul warna 11) A"ur dengan s&e"tro-otometer) :i"a sema"in &e"at warna yang terdete"si+ ma"a ma"in *esar "adar anti*odi s&esi-i" dalam sam&el .#ntwistle+ 1''51) Pendete"sian antigen dengan #$I%A sandwi37 1) Mela&isi mi"rotiter &late dengan anti*odi yang suda dimurni"an dengan mem*iar"an larutan *erisi anti*odi menem&el &ada dindingC &ermu"aan selama 60=60 menit) 0) Mem*ilas anti*odi .yang tida" teri"at1 dengan *u--er) 6) Mela&isi sisi=sisi tertentu yang mung"in tida" s&esi-i" dile"ati ole antigen dengan &rotein yang tida" *eru*unganC tida" s&esi-i" .se&erti larutan susu *u*u"1 4) Mem*ilas &rotein yang tida" mele"at) 5) Menam*a"an sam&el yang a"an didete"si antigennya dan mem*iar"an anti*odi untu" *eri"atan dengan antigen s&esi-i" dari sam&el) 6) Mem*ilas antigen yang tida" teri"at) 7) Menam*a"an anti*odi yang tela terla*eli dengan en,im dan *ersi-at s&esi-i" untu" e&ito& yang *er*eda &ada antigen sam&el+ seingga ter*entu" sandwi3) 8) Mem*ilas anti*odi=en,im yang tida" teri"at .$e9uin+ 00051) IV. A1li',si Te'ni' ELISA /eri"ut adala *e*era&a 3onto a&li"asi te"ni" #$I%A antara lain7 1) Pemeri"saan donor dara untu" &em*u"tian adanya "ontaminasi (irus 7 8I@=1 4an 8I@=0 ."e*erdaan anti*ody1 8e&atitis ; ."e*eradaan anti*ody1 8e&atitis / .test untu" "e*eradaan anti*ody dan antigen (irus1 8!$@=1 dan =0 ."e*eradaan ani*odi1 0) Pengu"uran le(el ormon 7 8;G .se*agai test "eamilan1 $8 .menentu"an wa"tu o(ulasi1 !%8+ !6+ dan !4 .untu" -ungsi tiroid1 6) Pendete"sian in-e"si 7 Agen &enularan se3ara se"sual+ 8I@+ si-ilis+ dan 3lamidia 8e&atitis / dan ; !oBo&lasma gondi 4) Pendete"sian *aan alergen &ada ma"anan dan de*u ruma 5) Pendete"sian "e*eradaan ,at o*at=o*at terlarang+ se&erti 7 Ko"ain E&ium .#ntwistle+ 1''51) DATAR 0USTAKA /roo"s+ G)D)+ d"")+ 0005+ Mikrobiologi Kedokteran+ %alem*a Medi"a+ :a"arta+ &&)84+'5=106) 5antam+ D)A)+ 0006+ Metode Imunologi+ Airlangga Ani(ersity Press+ %ura*aya+ &&) '7=100) %o-ro+ A)%)M)+ 1''4+ Imuno Kimia+ Pener*it Andi E--set+ Yogya"arta+ &&) 56=66 $e9uin+ 5)M)+ 0005+ Enzyme Immunoassay (EIA)/Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELIA)+ ;lini3al ;emistry+ A%A+ &&) 0415F0400) @aysse+ :)+ 1''8+ Measurements o! "otal and #esialylated e$ %ormonebinding &lobulin in erum by ELIA+ ;lini3al ;emistry+ A%A+ &&) 880 F 884) #ntwistle+ K)G)+ 1''5' "eknologi ELIA dalam #iagnosis dan (enelitian ) Asai %ormon dengan ELIA+ Ga2a Mada Ani(ersity Press+ Yogya"arta+ &&) 64+45+456=456)