TUGAS IMUNOLOGI

ENZIM-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) METHODE

Disusun oleh :
Aloysius Ade Pratama 118114150
Gita Mentari 118114160
Yolana Kwartono 118114170
I Ngura !egu Pratama 118114180
AKULTAS ARMASI
UNI!ERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
"#$"
En%i&-Lin'e( I&&unoso)*en+ Ass,- (ELISA)
I. Se/,),h 0ene&u,n (,n 0)insi1 D,s,) Te'ni' ELISA
!e"ni" #$I%A &ertama "ali di&er"enal"an &ada taun 1'71 ole Peter Perlmann dan
#(a #ng(all) Mere"a mengguna"an te"ni" #$I%A dalam *idang imunologi untu"
menganalisis intera"si antara antigen dan anti*odi dalam sam&el+ dimana intera"si terse*ut
ditandai dengan mengguna"an suatu en,im yang *er-ungsi se*agai signal ./roo"s+ 00051)
Prinsi& dasar dari te"ni" #$I%A ini adala &ertama antigen atau anti*odi yang enda"
diu2i ditem&el"an &ada suatu &ermu"aan yang *eru&a mi3rotiter) Penem&elan terse*ut da&at
dila"u"an melalui dua 3ara+ yaitu se3ara &enem&elan se3ara non s&esi-i" dengan adsor*si "e
&ermu"aan mi3rotiter+ dan &enem&elan se3ara s&esi-i" dengan mengguna"an anti*odi atau
antigen lain yang *ersi-at s&esi-i" dengan antigen atau anti*odi yang diu2i .3ara ini
diguna"an &ada te"ni" #$I%A sandwi31) %elan2utnya anti*odi atau antigen s&esi-i" yang
tela ditaut"an dengan suatu en,im signal .disesuai"an dengan sam&el *ila sam&el
*eru&a antigen+ ma"a diguna"an anti*odi s&esi-i"+ sedang"an *ila sam&el *eru&a anti*odi+
ma"a diguna"an antigen s&esi-i"1 di3am&ur"an "e atas &ermu"aan terse*ut+ seingga da&at
ter2adi intera"si antara anti*odi dan antigen yang *ersesuaian) 4i antara tia& taa&+ &late
arus di3u3i dengan larutan deter2en lem*ut untu" mem*uang "ele*ian &rotein atau anti*odi
yang tida" teri"at) %etela taa& &en3u3ian tera"ir+ "emudian "e atas &ermu"aan &late
terse*ut di3am&ur"an suatu su*strat yang da&at *erea"si dengan en,im signal) %u*strat yang
diguna"an adala su*strat "romogeni") Pada saat su*strat terse*ut di3am&ur"an "e
&ermu"aan+ en,im yang *ertaut dengan anti*odi atau antigen s&esi-i" yang *erintera"si
dengan anti*odi atau antigen sam&el a"an *erea"si dengan su*strat dan menim*ul"an
suatu signal yang da&at didete"si) Pada #$I%A -loures3ense misalnya+ en,im yang tertaut
dengan anti*odi atau antigen s&esi-i" a"an *erea"si dengan su*strat dan menim*ul"an
signal yang *eru&a &endadaran -loures3ense) In"u*asi dengan su*strat "romogeni" .semula
ta" *erwarna1 a"an men2adi *erwarna *ila diidrolisis ole en,im) Intensitas warna yang
ter2adi diu"ur dengan s&e"tro-otometer untu" menentu"an "adar antigennya .5antam+ 00061)
4alam &er"em*angan selan2utnya+ selain diguna"an se*agai u2i "ualitati- untu"
mengetaui "e*eradaan suatu anti*odi atau antigen dengan mengguna"an anti*odi atau
antigen s&esi-i"+ te"ni" #$I%A 2uga da&at dia&li"asi"an dalam u2i "uantitati- untu"
mengu"ur "adar anti*odi atau antigen yang diu2i dengan mengguna"an alat *antu *eru&a
s&e"tro-otometer atau dengan 3ara menentu"an 2umla &enam*aan atau "adar anti*odi atau
antigen+ seingga da&at di*uat suatu "ur(a standar dan "adar antigen atau anti*odi yang
tida" di"etaui da&at ditentu"an .5antam+ 00061)
II. Kele*ih,n 2 Ke'u),n3,n Te'ni' ELISA
!e"ni" #$I%A ini memili"i *e*era&a "ele*ian+ antara lain7
!e"ni" &enger2aan relati- sederana)
5elati- e"onomis ."arena 2enis anti*odi yang diguna"an anya satu sa2a+
seingga mengemat *iaya untu" mem*eli *anya" 2enis anti*odi1)
8asil memili"i ting"at sensiti(itas yang 3u"u& tinggi)
4a&at diguna"an untu" mendete"si "e*eradaan antigen walau&un
"adar antigen terse*ut sangat renda .al ini dise*a*"an si-at intera"si antara
anti*odi dan antigen yang *ersi-at sangat s&esi-i"1)
4a&at diguna"an dalam *anya" ma3am &engu2ian .$e9uin+ 00051)
%edang"an "e"urangan dari te"ni" #$I%A+ antara lain7
:enis anti*odi yang da&at diguna"an &ada u2i dengan te"ni" #$I%A ini anya
2enis anti*odi mono"lonal .anti*odi yang anya mengenali satu antigen1)
8arga anti*odi mono"lonal le*i maal dari&ada anti*odi &oli"lonal+ seingg
a &engu2ian te"ni" #$I%A ini mem*utu"an *iaya yang 3u"u& maal)
Pada *e*era&a ma3am te"ni" #$I%A+ da&at ter2adi "esalaan &engu2ian a"i*at
"ontrol negati- yang menun2u""an res&on &ositi- dise*a*"an ine-e"ti(itas dari
larutan *lo3"ing seingga anti*odi se"under atau antigen asing da&at
*erintera"si dengan anti*odi *ertaut en,im signal dan menim*ul"an signal)
5ea"si antara en,im signal dan su*strat *erlangsung 3e&at+ seingga
&em*a3aan arus dila"u"an 3e&at .&ada &er"em*angannya+ al ini diatasi
dengan mem*eri"an larutan untu" mengenti"an rea"si1 .$e9uin+ 00051)
III. Al,+ 2 B,h,n Y,n3 Di3un,',n
Alat &aling utama yang diguna"an dalam te"ni" #$I%A adala mi3rotiter) Mi3rotiter
ini *eru&a suatu &a&an &lasti" dengan 3e"ungan se*anya" '6 *ua .8 3e"ungan "e ara
*awa dan 10 3e"ungan "e sam&ing1) Mi3rotiter ter*uat dari *aan &olistirena) ;e"ungan
mi3rotiter memili"i tinggi se"itar 1 3m dan diameter 0+7 3m) /eri"ut ini adala gam*arnya)
Mi4)o+i+e) (#ntwistle+1''51)
%elain itu+ alat dan *aan lain yang diguna"an dalam te"ni" #$I%A antara lain
Antigen yang dimurni"an .2i"a sam&el yang enda" didete"si atau di"uanti-i"asi
*eru&a anti*odi1)
Antigen yang dimurni"an .2i"a sam&el yang enda" didete"si atau di"uanti-i"asi
*eru&a antigen1)
$arutan standard ."ontrol &ositi- dan negati-1)
%erum am&el yang ingin dites)
;airan &en3u3i .*u--er1)
Anti*odi atau antigen yang tertaut dengan en,im signal)
%u*strat yang *ersi-at s&esi-i" terada& en,im signal)
#$I%A reader .s&e"tro-otometer1 untu" &engu"uran "uantitati-)
Mi3ro&late
Mi3ro&i&ette
;on2ugat .se3ondary A* < en,yme1 .#ntwistle+1''51)
I!. M,4,&-M,4,& Te'ni' ELISA
%e3ara umum+ te"ni" #$I%A di*eda"an men2adi dua 2enis yaitu te"ni" #$I%A
"om&etiti- yang mengguna"an "on2ugat antigen=en,im atau "on2ugat anti*odi=en,im+ dan
te"ni" #$I%A non"om&etiti-+ anti*odi "edua .s"under1 a"an di"on2ugasi"an dengan en,im
yang *er-ungsi se*agai signal) !e"ni" #lisa non"om&etiti- ini sering"ali dise*ut dengan
te"ni" #$I%A >sandwich?) 4ewasa ini+ te"ni" #$I%A tela *er"em*ang men2adi *er*agai
ma3am 2enis te"ni") Per"em*angan ini didasari &ada tu2uan dari dila"u"annya u2i dengan
te"ni" #$I%A terse*ut seingga da&at di&erole asil yang o&timal) /eri"ut ini adala
*e*era&a ma3am te"ni" #$I%A yang relati- sering diguna"an+ antara lain 7
$. ELISA Di)e4+
!e"ni" #$I%A ini meru&a"an te"ni" #$I%A yang &aling sederana) !e"ni" ini
sering"ali diguna"an untu" mendete"si dan mengu"ur "onsentrasi antigen &ada sam&el)
#$I%A 4ire3t mengguna"an suatu anti*odi s&esi-i" .mono"lonal1 untu" mendete"si
"e*eradaan antigen yang diingin"an &ada sam&el yang diu2i .$e9uin+ 00051)
Pada #$I%A 4ire3t+ &ertama mi3rotiter diisi dengan sam&el yang mengandung
antigen yang diingin"an+ seingga antigen terse*ut da&at menem&el &ada *agian dinding
mi"rotiter+ "emudian mi"rotiter di*ilas untu" mem*uang antigen yang tida" menem&el &ada
dinding mi"rotiter) $Alu anti*odi yang tela ditaut"an dengan en,im signal dimasu""an "e
dalam lu*ang=lu*ang mi"rotiter seingga anti*odi da&at *erintera"si dengan antigen yang
diingin"an+ yang dilan2ut"an dengan mem*ilas mi"rotiter untu" mem*uang anti*odi tertaut
en,im signal yang tida" *erintera"si dengan antigen) $alu "e dalam lu*ang=lu*ang mi"rotiter
terse*ut ditam*a"an su*strat yang da&at *erea"si dengan en,im signal+ seingga en,im yang
tertaut dengan anti*odi yang tela *erintera"si dengan antigen yang diingin"an a"an *erea"si
dengan su*strat dan menim*ul"an signal yang da&at didete"si) Pendete"sian intera"si antara
anti*odi dengan antigen terse*ut selan2utnya da&at diitung dengan mengguna"an
"olorimetri+ chemiluminescent+ atau -luores3ent end=&oint .@aysse+ 1''81)

Kelemaan #$I%A 4ire3t 7
Immunorea"ti(itas anti*odi "emung"inan a"an *er"urang a"i*at tertaut dengn
en,im)
Penautan en,im signal "e setia& anti*odi menga*is"an wa"tu dan maal)
!ida" memili"i -le"si*ilitas dalam &emilian tautan en,im .la*el1 dari anti*odi
&ada &er3o*aan yang *er*eda)
Am&li-i"sasi signal anya sedi"it)
$arutan yang mengandung antigen yang diingin"an arus dimurni"an se*elum
diguna"an untu" u2i #$I%A 4ire3t)
Kele*ian #$I%A 4ire3t
;e&at "arena mengguna"an satu anti*ody
Kemung"inan ter2adinya "egagalan dalam A2i #$I%A a"i*at rea"si silang
dengan anti*odi dengan anti*odi lain .anti*odi se"under1 da&at diminimalisasi
.@aysse+ 1''81)
%edang"an "ele*ian dari #$I%A indire3t antara lain7
!erda&at *er*agai ma3am (ariasi anti*odi se"under yang ter2ual se3ara
"omersial di &asar
Imunorea"ti(itas dari anti*odi yang diingin"an .target1 tida" ter&engaru ole
&enautan en,im signal "e anti*odi se"under "arena &enautan dila"u"an &ada
wada *er*eda)
!ing"at sensiti(itas mening"at "arena setia& anti*odi yang diingin"an memili"i
*e*era&a e&ito& yang *isa *erintera"si dengan anti*odi se"under
.$e9uin+ 00051)
". Elis, S,n(5i4h
!e"ni" elisa 2enis ini mengguna"an anti*odi &rimer s&esi-i" untu" menang"a& antigen
yang diingin"an dan anti*odi se"under tertaut en,im signal untu" mendete"si "e*eradaan
antigen yang diingin"an) Pada dasarnya+ &rinsi& "er2a dari #$I%A sandwi3 miri& dengan
#$I%A dire3t+ anya sa2a &ada #$I%A sandwi3+ larutan antigen yang diingin"an tida" &erlu
di&uri-i"asi) Namun+ "arena antigen yang diingin"an arus da&at *erintera"si dengan
anti*odi &rimer s&esi-i" dan anti*odi se"under s&esi-i" tertaut en,im signal+ ma"a te"ni"
#$I%A sandwi3 ini 3enderung di"usus"an &ada antigen yang memili"i minimal 0 sisi
antigen atau antigen yang *ersi-at multi(alent se&erti &olisa"arida atau &rotein) Pada #$I%A
sandwi3+ anti*odi &rimer sering dise*ut se*agai anti*odi &enang"a&+ sedang"an anti*odi
se"under sering"ali dise*ut se*agai anti*odi dete"si .5antam+ 00061)

4alam &enga&li"asiannya+ #$I%A sandwi3 *anya" diman-aat"an untu" mendete"si
"e*eradaan antigen multi(alent yang "adarnya sangat renda &ada suatu larutan dengan
ting"at "ontaminasi tinggi) 8al ini dise*a*"an #$I%A sandwi3 memili"i ting"at sensiti(itas
tinggi terada& antigen yang diingin"an a"i*at "earusan dari antigen terse*ut untu"
*erintera"si dengan "edua anti*odi) Pada #$I%A sandwi3+ &ertama mi3rotiter diisi
dengan larutan yang mengandung anti*odi &enang"a&+ seingga anti*odi &enang"a& da&at
menem&el &ada *agian dinding lu*ang mi3rotiter) %elan2utnya mi3rotiter di*ilas untu"
mem*uang anti*odi &enang"a& yang tida" menem&el &ada dinding lu*ang mi3rotiter)
Kemudian larutan sam&el yang mengandung antigen yang diingin"an dimasu""an "e dalam
lu*ang=lu*ang mi3rotiter+ seingga ada intera"si antara anti*odi &enang"a& dengan antigen
yang diingin"an) %elan2utnya+ mi3rotiter "em*ali di*ilas untu" mem*uang antigen yang tida"
*erintera"si dengan anti*odi &enang"a&) Kemudian+ "e dalam lu*ang mi3rotiter dimasu""an
larutan yang *erisi anti*odi dete"tor+ seingga &ada lu*ang mi3rotiter terse*ut ter2adi
intera"si antara antigen yang diingin"an dengan anti*odi dete"tor) %elan2utnya mi3rotiter
di*ilas lagi untu" mem*uang anti*odi dete"tor yang tida" *erintera"si dengan anti*odi
s&esi-i") Kemudian &ada taa& a"ir #$I%A indire3t+ ditam*a"an su*strat yang
da&at *erea"si dengan en,im signal+ lalu en,im yang tertaut &ada anti*odi dete"tor yang tela
*erintera"si dengan antigen yang diingin"an a"an *erea"si dengan su*strat dan menim*ul"an
signal yang da&at didete"si .5antam+ 00061
4alam #$I%A sandwi3+ ada *e*era&a -a"tor yang mem&engarui ting"at sensiti(itas
dari asil &engu2ian+ antara lain7
/anya" mole"ul anti*odi &enang"a& yang *erasil menem&el &adadinding lu*ang
mi3rotiter)
A-initas dari anti*odi &enang"a& dan anti*odi dete"tor terada& antigen
.%o-ro+ 1''41
%e*enarnya+ te"ni" #$I%A sandwi3 ini meru&a"an &engem*angan dari
te"ni" #$I%A terdaulu+ yaitu #$I%A dire3t) Kele*ian te"ni" #$I%A sandwi3 ini &ada
dasarnya *erada &ada ting"at s&esiti-itasnya yang relati- le*i tinggi "arena antigen yang
diingin"an arus da&at *erintera"si dengan 0 2enis anti*odi+ yaitu anti*odi &enang"a& dan
anti*odi dete"tor) Namun demi"ian+ te"ni" #$I%A sandwi3 ini memili"i "elemaan+ yaitu
te"ni" ini anya da&at dia&li"asi"an untu" mendete"si antigen *ersi-at multi(alent
serta sulitnya men3ari dua 2enis anti*odi yang da&at *erintera"si antigen yang sama &ada
sisi antigeni" yang *er*eda .e&ito&nya arus *er*eda1 .%o-ro+ 1''41)
6. ELISA Bio+in S+)e1+,7i(in (8enis ELISA &o(e)n)
Pada &er"em*angan selan2utnya+ te"ni" #$I%A sandwi3 2uga di"em*ang"an untu"
mendete"si anti*odi dengan ting"at sensiti(itas relati- le*i tinggi) !e"ni" ini di"enal
se*agai te"ni" #$I%A &enang"a& anti*odi+ dimana &rinsi& "er2anya sama dengan #$I%A
sandwi3+ anya sa2a yang diguna"an &ada te"ni" ini adala antigen &enang"a& dan antigen
dete"tor .antigen *ertaut en,im signal+ *ersi-at o&tional a&a*ila anti*odi yang diingin"an
tida" tertaut denganen,im signal1) ;onto dari a&li"asi te"ni" ini adala te"ni" #$I%A untu"
mendete"si (itamin *iotin yang tertaut dengan suatu anti*odi a(idin dengan mengu*a
anti*odi a(idin men2adi anti*odi stre&ta(idin+ yaitu dimana satu mole"ul stre&ta(idin da&at
mengi"at em&at mole"ul *iotin .&engem*angan dari #$I%A indire3t1+ seingga signal yang
teram&li-i"asi men2adi sema"in "uat a"i*at intera"si antara *iotin dengan en,im yang
men2adi sema"in *anya" .#ntwistle+1''51)
9. ELISA Ko&1e+i+i:
!e"ni" #$I%A ini meru&a"an &engem*angan dari te"ni" #$I%A terdaulu) Prinsi&
dasar dari te"ni" ini adala dengan menam*a"an suatu "om&etitor "e dalam lu*ang
mi3rotiter) !e"ni" #$I%A "om&etiti- ini da&at dia&li"asi"an untu" mendete"si "e*eradaan
antigen mau&un anti*odi) Pada &endete"sian antigen+ &ertama mi3rotiter diisi anti*odi
s&esi-i" yang da&at *erintera"si dengan antigen yang diingin"an mau&un antigen s&esi-i"
tertaut en,im signal+ seingga anti*odi s&esi-i" terse*ut da&at menem&el &ada *agian
dinding=dinding lu*ang mi3rotiter+ "emudian mi3rotiter di*ilas untu" mem*uang
anti*odi s&esi-i" yang tida" menem&el &ada dinding lu*ang mi3rotiter) $alu+ larutan yang
mengandung antigen s&esi-i" yang tela ditaut"an dengan en,im signal dan larutan sam&el
yang mengandung antigen yang diingin"an dimasu""an "e dalam lu*ang mi3rotiter
seingga ter2adi "om&etisi antara antigen s&esi-i" tertaut en,im signal dengan antigen yang
diingin"an untu" da&at *erintera"si dengan anti*odi s&esi-i"+ dilan2ut"an dengan mem*ilas
mi3rotiter untu" mem*uang antigen s&esi-i" tertaut en,im signal atau antigen yang tida"
*erintera"si dengan anti*odi s&esi-i") $alu+ "edalam lu*ang=lu*ang mi3rotiter terse*ut
ditam*a"an su*strat yang da&at *erea"si dengan en,im signalyang tertaut &ada antigen
s&esi-i"+ seingga en,im yang tertaut dengan antigen yang tela *erintera"si dengan anti*odi
s&esi-i" a"an *erea"si dengan su*strat dan menim*ul"an signal yang da&at didete"si) Pada
&roses &endete"sian ini+ &endete"sian &ositi- ditandai ole tida" adanya signal yang
ditim*ul"an+ *erarti antigen yang diingin"an tela menang *er"om&etisi dengan antigen
s&esi-i" tertaut en,im signal dan *erintera"si dengan anti*odi s&esi-i" .$e9uin+ 00051)
%edang"an &ada &endete"sian anti*odi+ &ertama mi3rotiter diisi antigen s&esi-i" yang
da&at *erintera"si dengan anti*odi yang diingin"an mau&un anti*odi s&esi-i" tertaut en,im
signal+ seingga antigen s&esi-i" terse*ut da&atmenem&el &ada *agian dinding=dinding
lu*ang mi3rotiter+ "emudian mi3rotiter di*ilas untu" mem*uang antigen s&esi-i" yang
tida" menem&el &ada dinding lu*ang mi3rotiter) $alu larutan yang mengandung anti*odi
s&esi-i" yang tela ditaut"an dengan en,im signal dan larutan sam&el yang mengandung
anti*odi yang diingin"an dimasu""an "e dalam lu*ang=lu*ang mi3rotiter+ seingga ter2adi
"om&etisi antara anti*odi s&esi-i" tertaut en,im signal dengan anti*odi yang diingin"an agar
da&at *erintera"si dengan antigen s&esi-i"+ yang dilan2ut"an dengan mem*ilas mi3rotiter
untu" mem*uang anti*odi s&esi-i" tertaut en,im signal atau anti*odi yang tida" *erintera"si
dengan antigen s&esi-i") $alu+ "e dalam lu*ang mi3rotiter terse*ut ditam*a"an su*strat
yang da&at *erea"si dengan en,im signal yang tertaut &ada anti*odi s&esi-i"+ seingga en,im
yang tertaut dengan anti*odi yang tela *erintera"si dengan antigen s&esi-i" a"an
*erea"si dengan su*strat "emudian menim*ul"an signal yang da&at didete"si) Pada &roses
&endete"sian+ &endete"sian &ositi- ditandai ole tida" adanya signal yang ditim*ul"an+ yang
*erarti *awa anti*odi yang diingin"an tela menang *er"om&etisi dengan anti*odi s&esi-i"
tertaut en,im signal dan *erintera"si dengan antigen s&esi-i" .$e9uin+ 00051)
Kele*ian dari te"ni" #$I%A "om&etiti- ini adala tida" &erlunya dila"u"an &uri-i"asi
terada& larutan sam&el yang mengandung anti*odi atau antigen yang diingin"an+ ta&i asil
yang di&erole teta& memili"i ting"at sensiti(itas tinggi a"i*at si-at s&esi-isitas dari anti*odi
dan antigen)#$I%A Multi&leB te"ni" #$I%A meru&a"an &engem*angan te"ni" #$I%A
yang ditu2u"an untu" &engu2ian se3ara simultan+ sedang"an &rinsi& dasarnya miri& dengan
te"ni" #$I%A terdaulu ./roo"s+ 00051)
!. ;on+oh L,n3',h Ke)/, Te'ni' ELISA
/eri"ut ini adala 3onto lang"a "er2a *e*era&a ma3am te"ni" #$I%A+ yaitu7
Pendete"sian anti*odi dengan #$I%A indire3t7
1) Mela&isi mi"rotiter &late dengan antigen yang suda dimurni"an dengan mem*iar"an
larutan *erisi antigen menem&el &ada dindingC &ermu"aan selama 60=60 menit)
0) Mem*ilas antigen yang tida" teri"at dengan *u--er )
6) Mela&isi sisi tertentu yang tida" s&esi-i" dile"ati ole antigen dengan &rotein yang
tida" *eru*unganC tida" s&esi-i" .se&erti larutan susu *u*u"1)
4) Mem*ilas &rotein yang tida" mele"at)
5) Menam*a sam&el serum yang a"an didete"si anti*odinya lalu mem*iar"an anti*odi
s&esi-i" untu" *eri"atan dengan antigen)
6) Mem*ilas anti*odi yang tida" teri"at)
7) Menam*a"an anti=Ig yang a"an *eri"atan &ada daera D3 &ada anti*odi yang
s&esi-i" .se*agai 3onto+ anti=rantai gamma manusia yang *eri"atan dengan
IgG manusia1) 4aera D3 &ada anti=Ig a"an *eri"atan se3ara "o(alen dengan en,im)
8) Mem*ilas "om&le"s anti*odi=en,im yang tida" teri"at)
') Menam*a"an su*strat 3romogeni37 su*strat yang tida" *erwarna yang teri"at "e
en,im a"an di"on(ersi men2adi &rodu")
10) In"u*asi sam&ai mun3ul warna
11) A"ur dengan s&e"tro-otometer) :i"a sema"in &e"at warna yang terdete"si+ ma"a
ma"in *esar "adar anti*odi s&esi-i" dalam sam&el .#ntwistle+ 1''51)
Pendete"sian antigen dengan #$I%A sandwi37
1) Mela&isi mi"rotiter &late dengan anti*odi yang suda dimurni"an dengan
mem*iar"an larutan *erisi anti*odi menem&el &ada dindingC &ermu"aan selama 60=60
menit)
0) Mem*ilas anti*odi .yang tida" teri"at1 dengan *u--er)
6) Mela&isi sisi=sisi tertentu yang mung"in tida" s&esi-i" dile"ati ole antigen dengan
&rotein yang tida" *eru*unganC tida" s&esi-i" .se&erti larutan susu *u*u"1
4) Mem*ilas &rotein yang tida" mele"at)
5) Menam*a"an sam&el yang a"an didete"si antigennya dan mem*iar"an anti*odi
untu" *eri"atan dengan antigen s&esi-i" dari sam&el)
6) Mem*ilas antigen yang tida" teri"at)
7) Menam*a"an anti*odi yang tela terla*eli dengan en,im dan *ersi-at s&esi-i"
untu" e&ito& yang *er*eda &ada antigen sam&el+ seingga ter*entu" sandwi3)
8) Mem*ilas anti*odi=en,im yang tida" teri"at .$e9uin+ 00051)
IV. A1li',si Te'ni' ELISA
/eri"ut adala *e*era&a 3onto a&li"asi te"ni" #$I%A antara lain7
1) Pemeri"saan donor dara untu" &em*u"tian adanya "ontaminasi (irus 7
8I@=1 4an 8I@=0 ."e*erdaan anti*ody1
8e&atitis ; ."e*eradaan anti*ody1
8e&atitis / .test untu" "e*eradaan anti*ody dan antigen (irus1
8!$@=1 dan =0 ."e*eradaan ani*odi1
0) Pengu"uran le(el ormon 7
8;G .se*agai test "eamilan1
$8 .menentu"an wa"tu o(ulasi1
!%8+ !6+ dan !4 .untu" -ungsi tiroid1
6) Pendete"sian in-e"si 7
Agen &enularan se3ara se"sual+ 8I@+ si-ilis+ dan 3lamidia
8e&atitis / dan ;
!oBo&lasma gondi
4) Pendete"sian *aan alergen &ada ma"anan dan de*u ruma
5) Pendete"sian "e*eradaan ,at o*at=o*at terlarang+ se&erti 7
Ko"ain
E&ium .#ntwistle+ 1''51)
DATAR 0USTAKA
/roo"s+ G)D)+ d"")+ 0005+ Mikrobiologi Kedokteran+ %alem*a Medi"a+ :a"arta+ &&)84+'5=106)
5antam+ D)A)+ 0006+ Metode Imunologi+ Airlangga Ani(ersity Press+ %ura*aya+ &&) '7=100)
%o-ro+ A)%)M)+ 1''4+ Imuno Kimia+ Pener*it Andi E--set+ Yogya"arta+ &&) 56=66
$e9uin+ 5)M)+ 0005+ Enzyme Immunoassay (EIA)/Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
(ELIA)+ ;lini3al ;emistry+ A%A+ &&) 0415F0400)
@aysse+ :)+ 1''8+ Measurements o! "otal and #esialylated e$ %ormonebinding &lobulin in
erum by ELIA+ ;lini3al ;emistry+ A%A+ &&) 880 F 884)
#ntwistle+ K)G)+ 1''5' "eknologi ELIA dalam #iagnosis dan (enelitian ) Asai %ormon
dengan ELIA+ Ga2a Mada Ani(ersity Press+ Yogya"arta+ &&) 64+45+456=456)