Anda di halaman 1dari 13

PERCOBAAN 1

PENENTUAN PANJANG GELOMBANG MAKSIMUM SENYAWA BAHAN


PEWARNA

A. TUJUAN
1. Mempersiapkan larutan blanko dan sampel untuk digunakan pengukuran panjang
gelombang maksimum larutan sampel.
2. Menggunakan kuvet sebagai tempat sampel dan blanko
3. Mengoperasikan alat spektroskopi UV-Vis cary 50 untuk menentukan panjang
gelombang maksimum suatu senyawa.

B. PRINSIP PERCOBAAN
Penentuan panjang gelombang maksimum senyawa bahan pewarna (fenol)
berdasarkan daya serapan dilihat dari absorbansi maksimal zat yang menyerap cahaya
pada panjang gelombang tertentu terhadap radiasi elektromagnetik sinar tampak.

C. DASAR TEORI
Spektrofotometri adalah studi mengenai antaraksi cahaya dengan atom dan molekul.
Radiasi cahaya atau elektromagnet dapat dianggap menyerupai gelombang sedangkan
Spektrofotometer alat yang digunakan untuk mengukur energi secara relatif jika energi
tersebut ditransmisikan, direfleksikan, atau diemisikan sebagai fungsi panjang gelombang
(Khopkar,2008:225)
Spektrofotometer Uv-Vis
Merupakan salah satu teknik analisis spektroskopik yang menggunakan radiasi
elektromagnetik. Sinar ultraviolet mempunyai panjang gelombang antara 200-400 nm,
sementara sinar tampak mempunyai panjang gelombang 400-750 nm.
(Rohman,2008:222)

Konfigurasi dasar spektro.UV-Vis:






1. Sumber radiasi
Lampu deuterium
Digunakan pd =190-380 nm (UV dekat)
Umur =500 jam pemakaian
Lampu tungsten
Campuran dari filamen tungstan & gas iodine
Digunakan pada = 380-900 (daerah Vis)
Umur =1000 jam pemakaian
Lampu merkuri
Mengandung uap merkuri bertekanan rendah
Dipakai u/ mengecek sekitar 365 nm (365,0; 365,5; 366,3 nm)
1. Monokromator
Fungsi : mendapatkan radiasi monokromatis dari sumber yg memancarkan radiasi
polikromatis yang terdiri dari:
Celah
Filter
Prisma dan Kisi (grating)
2. Sel atau kuvet
Kuvet atau sel merupakan wadah zat yang akan dianalisis. Kuvet terdiri dari 2 yaitu:
a. Ditinjau dari pemakaiannya terdiri dari:
Kuvet permanen dari bahan gelas atau leburan silika
Kuvet disposible terbuat dari teflon atau plastic
b. Ditinjau dr bahan dasar pembuatannya:
Kuvet dari leburan silika (kuarsa), dapat digunakan untuk analisis kualitatif-
kuantitatif pd = 190-1100 nm
Kuvet dari gelas, dapat dipakai untuk pengukuran pada = 380-1100 nm
3. Detektor : mengubah sinyal radiasi yang diterima menjadi sinyal elektronik
Sistem optik spektrofotometer:
1. Sistem optik radiasi berkas tunggal (single beam)
2. Sistem optik radiasi berkas ganda (double beam)


(Riyadi,2009)
Analisis Kuantitatif
1. Dengan menggunakan kurva baku dari larutan standar
a. Penyiapan larutan baku dengan berbagai konsentrasi
b. Pengukuran absorbansi larutan baku pada max.
c. Membuat kurva hubungan antara konsentrasi dan absorbansi (kurva baku)
d. Mengukur absorbansi larutan sampel
Pelarut
Syarat:
1. Sampel harus larut dalam pelarut yang digunakan
2. Pelarut harus transparan terhadap radiasi pada panjang gelombang yang digunakan
Penentuan bahan yang tidak mengabsorbsi
Syarat pereaksi yang digunakan:
1. Dapat bereaksi dengan analit dalam larutan pada konsentrasi rendah (umumnya 10
-5

atau 10
-6
M)
2. Relatif selektif.
Suatu larutan berwarna dapat menyerap sinar pada panjang gelombang tampak.
Intensitas yang diserap mempunyai hubungan tertentu dengan konsentrasi. Jika intensitas
sinar pada cuplikan yang tidak diketahui konsentrasinya dibandingkan dengan suatu
larutan standar, maka konsentrasi larutan cuplikan itu dapat diketahui. Larutan yang akan
di tentukan konsentrasinya harus diperlakukan sama dengan larutan standar. Hubungan
antara intensitas yang diserap dengan konsentrasi ditunjukkan oleh hukum lambert-beer.
(Rohman ,2008:232)
Spektrum Cahaya Tampak dan Warna-warna Komplementer
Panjang Gelombang
(nm)
Warna Warna Komplementer
400-435
435-480
480-490
490-500
500-560
560-580
580-595
595-610
610-750
Violet
Biru
Hijau-biru
Biru-hijau
Hijau
Kuning-hijau
Kuning
Oranye
Merah
Kuning-hijau
Kuning
Oranye
Merah
Ungu
Violet
Biru
Hijau-biru
Biru-hijau

(Underwood,2002: 384)

Hukum Lambert-Beer.
Bila cahaya (monokromatik maupun campuran) jatuh pada suatu medium homogen,
sebagian dari sinar masuk akan dipantulkan, sebagian diserap dalam medium itu, dan
sisanya diteruskan. Jika intensitas sinar masuk dinyatakan oleh I
0
= I
a
+ I
t
+ I
r.
Dimana :
I
0
: Intensitas sinar masuk
I
t
: Intensitas sinar terserap
I
r
: Intensitas sinar terpantulkan
Hukum yang mendasari metode spektrofotometri adalah :



Hukum Lambert
Hukum ini menyatakan bahwa : Bila cahaya monokromatik melewati medium tembus
cahaya, laju berkurangnya intensitas oleh bertambahnya ketebalan, berbanding lurus
dengan intesitas cahaya.
Hukum Beer
Hukum ini menyatakan intensitas berkas cahaya monokromatik berkurang secara
eksponensial dengan bertambahnya konsentrasi zat penyerap secara linier.
Rumus Lambert atau rumus Beer menghasilkan hasil yang sama :
Log

= f(c)b = Kbc
Log

= f(c)b = Kbc
Dimana :
Log (Po/P) = absorbans
b = panjang jalan menembus medium penyerap.
C = konsentrasi zat pelarut yang menyerap
Jadi dalam sistem yang direkombinasikan, hukum lambert beer dapat mempunyai
bentuk:
A = abc
g/liter

Dimana:
A = absorbans
a = absorptivitas
(Underwood,2002: 392)
Panjang Gelombang Maksimum
Baik sinar polikromatis maupun monokromatis bila dilewatkan ke suatu larutan maka
intensitasnya akan berkurang. Berkurangnya intensitas sinar terjadi akibat serapan larutan
tersebut, sebagian dipantulkan dan dihamburkan. Untuk mendapatkan selektifitas dan
sensivitas yang baik umumnya dipakai sinar monokromatis dan dipilih panjang
gelombang yang memberikan serapan maksimum (panjang gelombang maksimum).
Terkadang sebuah larutan memiliki lebih dari satu panjang gelombang maksimum, untuk
itu diperlukan pemilihan panjang gelombang yang sesuai baik berdasarkan sensivitasnya
maupun berdasarkan daerah serapan senyawa pangganggu uang ada di larutan
tersebut.(Riyadi,2009)
D. ALAT DAN BAHAN
Alat:
Spektrofotometer UV-Vis Cary 50
Kuvet
2 tabung reaksi
Rak tabung reaksi
Beaker glass 50 ml

Bahan:
Larutan fenol
Metanol
Tissue
E. PROSEDUR
1. Bahan kimia yang dijadikan sampel (fenol) masing-masing dilarutkan dengan
pelarutnya di dalam tabung reaksi pertama. Sehingga diperoleh larutan sampel.
2. Bahan kimia sebagai pelarut dimasukkan ke dalam tabung reaksi kedua, sehingga
diperoleh larutan blanko.
3. Kuvet blanko sebagai pelarut dimasukkan ke dalam tabung reaksi kedua, sehingga
diperoleh larutan blanko.
4. Hidupkan instrumentasi spektroskopi UV-Vis dan biarkan selama 5-10 menit.
5. Pegang kuvet dibagian buram dan masukkan larutan blanko ke dalam kuvet
blanko hingga 2/3 tinggi kuvet. Hindari terbentuknya gelembung udara yang
menempel di kuvet karena akan mengganggu absorbansi. Bersihkan kaca
transparan kuvet dengan tissue.
6. Pegang kuvet dibagian buram dan masukkan larutan sampel ke dalam kuvet
sampel hingga 2/3 tinggi kuvet. Hindari terbentuknya gelembung udara yang
menempel di kuvet karena akan mengganggu absorbansi. Bersihkan kaca
transparan kuvet dengan tissue.
7. Pilih program SCAN yang tertera di layar komputer.
8. Lakukan prosedur pengoperasian SCAN sebagaimana tetulis manual spektroskopi
UV-Vis cary 50 yang telah diberikan oleh laboraturium.
9. Hasil scanning dicetak dan ditentukan panjang gelombang maksimum.


Spektrofotometer terkaliberasi

F. SKEMA KERJA
Pembuatan Larutan sampel

Fenol
Dilarutkan dengan metanol
Diencerkan hingga 50 mL dengan
manggunakan gelas beaker
Larutan fenol (orange)
Dimasukkan ke dalam tabung reaksi 1
Larutan sampel 1


Pembuatan Larutan Blanko
Metanol
Dimasukkan ke dalam tabung reaksi 2
Larutan sampel 2 (blanko)




Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Kuvet balnko dan sampel
Disiapkan
Dibersihkan dari pengotor
Dihidupkan spektroskopi UV-vis
Dibiarkan selama 5-10 menit
Instrumen siap digunakan
Dipegang kuvet bagian buram
Dimasukkan larutan blanko ke dalam
kuvet blanko 2/3 tinggi kuvet
Dibersihkan kaca transparan kuvet
dengan tissue
dikalibrasi
Dimasukkan larutan sampel pada kuvet
sampel sampel blanko 2/3 tinggi kuvet
Dibersihkan kaca transparan kuvet
dengan tissue
Dipilih program SCAN pada komputer
Dilakukan pengoperasian SCAN
Hasil Scanning
Dicetak
Ditentukan panjang gelombang
maksimum
panjang gelombang maksimum



G. HASIL PENGAMATAN
No. Perlakuan Hasil Pengamatan
1 Pembuatan larutan Fenol
Diambil beberapa ml fenol
Dilarutkan dengan metanol
Diencerkan hingga 50 mL

Larutan Orange Tua
Larutan Orange
Larutan berwarna orange
muda
2 Larutan sampel dan blanko dimasukkan ke dalam
spektrofotometer UV-Vis cary 50
Larutan tetap tak berubah
3. Ditentukan Panjang gelombang maksimum
berdasarkan kurva hubungan absorbansi dengan
panjang gelombang
maks = 480 - 550 nm
Abs = 0 - 0,2

Kurva hubungan aborbansi dan Panjang
gelombang





Panjang gelombang dan absorbansi














H. PEMBAHASAN
Pada percobaan kali ini analisis spektroskopi UV-Vis yaitu penentuan panjang gelombang
maksimum senyawa bahan pewarna dengan tujuan untuk menentukan panjang gelombang
maksimum dengan mempersiapkan larutan blanko dan sampel, kuvet, alat spektroskopi Uv-
Vis cary 50, adapun cara kerja spektrofotometer dimulai dengan dihasilkannya cahaya
monokromatik dari sumber sinar. Cahaya tersebut kemudian menuju ke kuvet (tempat
sampel/sel). Banyaknya cahaya yang diteruskan maupun yang diserap oleh larutan akan
dibaca oleh detektor yang kemudian menyampaikan ke layar pembaca.
Pada saat praktikum pertama-tama, membuat larutan sampel dengan konsentrasi yang
tidak diketahui, larutan sampel yang dibuat adalah fenol yang menggunakan pelarut metanol,
larutan tidak perlu diketahui konsentrasinya karena pada praktikum ini hanya menentukan
panjang gelombang maksimum suatu larutan berwarna (fenol) yang diukur berdasarkan
serapan/absorpsi sinar secara maksimum oleh suatu larutan . Larutan yang akan diamati
melalui spektrofotometer harus memiliki warna tertentu agar zat di dalam larutan lebih
mudah menyerap energi cahaya yang diberikan dimana secara kuantitatif, besarnya energi
yang diserap oleh zat akan identik dengan jumlah zat di dalam larutan dan secara kualitatif,
panjang gelombang dimana energi dapat diserap dapat menunjukkan jenis zatnya.
Pelarut metanol digunakan karena dapat melarutkan fenol dengan baik, selain itu alkohol
juga bersifat transparan terhadap radiasi pada panjang gelombang yang digunakan. Selain
larutan sampel dibuat juga larutan blanko , Adapun tujuan dari pengguanaan larutan blanko
adalah untuk mengatasi kesalahan sistematik yang sering terjadi dalam analisis yaitu serapan
oleh pelarut menggunakan spektrofotometer. Blangko, yaitu larutan yang berisi matrik selain
komponen yang akan dianalisis. Selain itu Blanko yang digunakan adalah metanol, metanol
tersebut dimasukkan ke dalam kuvet yang berfungsi membantu kalibrasi alat spektroskopi
UV-Vis Cary 50. Selain itu untuk memilih panjang gelombang maksimal, dilakukan dengan
membuat kurva hubungan antara absorbansi dengan panjang gelombang dari suatu larutan
baku/sampel. Suatu pengukuran absorbansi pada panjang gelombang maksimum akan
memberikan garis linier sesuai dengan hukum lambert-beer.





Pada praktikum kali ini, dihasilkan kurva standar kalibrasi dengan absorbansi 0 - 0,2
dengan panjang gelombang 480 - 550 nm. Hasil yang diperoleh tidak jauh berbeda dengan
literatur yaitu untuk fenol panjang gelombang maksimum adalah 508 nm dan juga bila dilihat
dari spektrum cahaya tampak warna koplementer, warna oranye terletak pada panjang
gelombang 480-490, jadi dapat dikatakan bahwa praktikum berhasil. Gambar kurva yang
dihasilkan pada panjang gelombang maksimal akan diperoleh bentuk kurva absorbansi yang
datar dimana pada kondisi tersebut hukum Lambert-Beer terpenuhi. Pada praktikum kali ini
dihasilkan sebagai berikut:








Kurva hubungan aborbansi dan Panjang gelombang

Panjang gelombang maksimum spesifik tidak dapat ditentukan karena hasil anlysis
report tidak menampakkan panjang gelombang >314,1 nm tetapi hanya menentukan panjang
gelombang 314-212 nm dimana rentang panjang gelombang ini adalah panjang gelombang
yang tidak dapat terbaca apabila dilihat dari kurva.









Panjang gelombang dan absorbansi


I. KESIMPULAN
1) Panjang gelombnag maksimum yang dihasilkan adalah 480-550 nm.Hasil yang
diperoleh menunjukkan hal yang sama dengan literatur yaitu panjang gelombang 508
nm adalah panjang gelombang maksimum untuk larutan fenol.
2) Panjang gelombang maksimum adalah panjang gelombang dengan absorbansi
maksimum (terbesar).
3) Tujuan dari pengguanaan larutan blanko adalah untuk mengatasi kesalahan sistematik
yang sering terjadi dalam analisis yaitu serapan oleh pelarut
menggunakan spektrofotometer.
4) UV-Vis cary 50 merupakan salah satu spektrofotometer yang dapat mengukur
panjang gelombang suatu larutan.
5) Panjang gelombang maksimum suatu senyawa ditunjukkan oleh kurva kalibrasi yang
berbentuk linier.


J. DAFTAR PUSTAKA
Day, JR. R. A. dan Underwood. A. L. 2002. Analisis Kimia Kuantitatif Edisi Keenam.
Jakarta: Erlangga
Gandjar, Ibnu Gholib dan Rohman, Abdul. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta:
PUSTAKA PELAJAR
Khopkar, S.M. 2008. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: UI-PRESS
Riyadi, Wahyu. 2008. . Perbedaan Spektrometri dan Spektrofotometri. Online
(http://wahyuriyadi.blogspot.com/), diunduh 4 mei 2011.