Anda di halaman 1dari 2

Pembuatan Larutan Percobaan

Sari 3 g simplisia serbuk simplisia dengan 30 ml campuran 7 bagian volume etanol (95 %) P dan 3
bagian volume air dalam alat pendingin alir balik selama 10 menit, dinginkan, saring.
Pada 20 ml filtrat, tambahkan 25 ml air dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, kocok, diamkan
selama 5 menit, saring.
Sari filtrat 3 kali, tiap kali dengan 20 ml campuran 3 bagian volume kloroform P dan 2 bagian
volume isopropanol P.
Pada kumpulan sari tambahkan natrium sulfat anhidrat P, saring, dan uapkan pada suhu tidak
lebih dari 500 C.
Larutkan sisa dengan 2 ml metanol P.
Identifikasi Umum terhadap Glikosida
a. Uapkan 0,1 ml larutan percobaan di atas tangas air, larutkan sisa dalam 5 ml asam asetat
anhidrat P. Tambahkan 10 tetes asam sulfat P; terjadi warna biru atau hijau, menunjukkan
adanya glikosida (reaksi Liebermann-Burchard)
b. Masukkan 0,1 ml larutan percobaan dalam tabung reaksi, uapkan diatas tangas air. Pada sisa,
tambahkan 2 ml air dan 5 tetes Molish LP. Tambahkan hati-hati 2 ml asam sulfat P; terbentuk
cincin berwarna ungu pada batas cairan, menunjukkan adanya ikatan gula (reaksi Molish).
Identifikasi terhadap Glikosida Jantung
Encerkan 0,1 ml larutan percobaan dengan 2,9 ml metanol P, tambahkan Baljet LP, terjadi warna
jingga setelah beberapa menit, menunjukkan adanya glikosida dan aglikon kardenolida.
Pada 0,1 ml larutan percobaan tambahkan 2 ml Kedde LP dan 2 ml kalium hidroksida 1 N, terjadi
warna merah ungu sampai biru ungu dan dalam beberapa menit, menunjukkan adanya glikosida
aglikon kardenolida.
Masukkan 0,1 ml larutan percobaan dalam tabung reaksi, uapkan diatas tangas air. Pada sisa
tambahkan 3 ml larutan xantidrol P 0,01 % b/v dalam asam asetat P dan 1 tetes asam klorida
pekat, larutan berwarna kuning intensif, kemudian panaskan diatas tangas air selama 3 menit,
warna larutan berubah menjadi merah intensif, menunjukkan adanya glikosida dan glikogen 2-
desoksigula.
Uapkan 0,2 ml larutan percobaan di atas tangas air. Larutkan sisa dengan 3 ml asam asetat P
dengan sedikit pemanasan, dinginkan. Teteakan besi (III) klorida 0,3 M, kemudian tambahkan
hati-hati campuran 3 ini asam sulfat P dan 1 tetes besi (III) klorida 0,3 M, terbentuk cincin
berwarna merah coklat pada batas cairan , setelah beberapa menit di atas cincin berwarna biru
hijau, menunjukkan adanya glikosida dan glikon 2-desoksigula (reaksi Keller-Kiliani).
Dari keempat percobaan di atas, serbuk mengandung gikosida jantung jika paling kurang reaksi
menunjukan adanya aglikon kardenolida dan glikon 2-desoksigula.

Kromatogram Lapisan Tipis
Sari 300 ml serbuk simplisia dengan 5 ml metanol P, saring, pada 2 detik masing-masing 20 l
filtrat pada lempeng KLT silica gel G P setebal 0,25 mm.
Eluasi dengan campuran bunzen P etanol (95%) P (70+30) dengan jarak rambat 15 cm.
Semprot kromatogram pertama dengan anisaldehida-asam sulfat LP, panaskan pada suhu 1100
selama 10 menit, amati dengan sinar biasa dan sinar ultraviolet 366 nm. Pada kromatogram
tampak bercak berwarna biru.
Semprot kromatogram kedua dengan asam perklorat P, panaskan pada suhu 1100 selama 10
menit, amati dengan sinar biasa dan sinar ultraviolet 366 nm, bercak tidak berfluorosensi.
Identifikasi terhadap Glikosida Antrakinon
Campur 200 mg serbuk simplisia dengan 5 ml asam sulfat 2 N, panaskan sebentar, dinginkan.
Tambahkan 10 ml benzene P, kocok diamkan. Pisahkan lapisan benzena, saring, filtrat berwarna
kuning, menunjukkan adanya antrakinon.
Kocok lapisan benzena dengan 1 ml sampai 2 ml natrium hidroksida 2 N, diamkan, lapisan air
berwarna merah intensif dan lapisan benzena tidak berwarna.