Anda di halaman 1dari 11

BAB III

METODE PERCOBAAN
3.1 Tempat Pengujian
Pengujian penentuan kadar asam benzoat dalam sediaan obat batuk
tradisional bentuk tablet secara kromatografi lapis tipis dan spektrofotometri
ultraviolet dilakukan di Laboratorium Obat Tradisional, Balai Besar Pengawas
Obat dan Makanan di Medan yang berada di Jalan Willem Iskandar Pasar V Barat
I No. 2 Medan.
3.2 Alat
Alat yang digunakan adalah erlenmeyer, gelas ukur, vial, pipet tetes,
corong pisah, corong, chamber, kertas saring, hair drier, batang pengaduk, statif
dan klem, pipet penotol dan spektrofotometer Shimadzu UV Prose-1800.
3.3 Bahan
Bahan yang digunakan adalah Metanol, Natrium Hidroksida 0,1 N,
Pentana, Asam Asetat Glasial, Etanol dan Aquadest.
3.4 Sampel
- Nama sediaan

: Shi Re Qing

Kode produksi

:-

No. Reg

: POM TI 014 401 521

No. Bets

: 201803

Tgl daluarsa

: 25 November 2015

Universitas Sumatera Utara

Pabrik

: PT. Saras Subur Ayoe

Komposisi

: Herba andrographis 200 g (20%), Radix paeoniae


alba 200 g (20%), Radix isatidis 140 g (14%),
Radix scutellariae 100 g (10%), Radix platycodonis 100 g
(10%),

Fructus

gardeniae

100

(10%),

Radix

glycyrrhizae 70 g (7%), Folium mori 70 g (7%), Calculus


bovis 10 g (1%), Borneolum syntheicum 10 g (1%).
Khasiat

: Membantu meredakan radang dan demam, sakit


tenggorokan,

sakit gigi, sakit kepala, batuk berdahak,

serta melancarkan buang air besar.

Nama sediaan

: Qing Fei Yi Huo Pian

Kode produksi

:-

No. Reg

: POM TI 044 509 711

No. Bets

:-

Tgl Daluarsa

:-

Pabrik

: PT. Saras Subur Ayoe, Jakarta - Indonesia

Komposisi

Scutellaria

baikalensis

georgi

21%,

Gardenia,

jasminoides ellis 12%, Rheum officinale baill 18%,


Peucedaunm decursivum maxim 7%, Sophora flavescens
art 9%, Trichosanthes kirilowii maxim 12%, Platycodon
glaucus nakai 12%, Anemarrhena asphodeloides bge 9%.

Universitas Sumatera Utara

Khasiat

: Mengatasi batuk dan menurunkan panas ( antipiretik),


digunakan pada radang tenggorokan, batuk, nyeri gigi, gusi
berdarah dan sembelit.

Nama sediaan

: Ching Fei Yi Huo Pien

Kode produksi

:-

No. Reg

: POM TI 044 509 711

No. Bets

: TSF-15

Tgl daluarsa

:-

Pabrik

: PT. Perdana Sakti Indonesia

Komposisi

: Radix scutellariae 21%, Fructus gardenia 12%, Rhei


rhizome 18%, Radix peucedani 7%, Radix sophorae
flavescentis 9%, dan bahan lain sampai 100%.

Khasiat

: Membantu mengobati batuk disertai sesak nafas dan sakit


tenggorokan.

Nama sediaan

: Yin Qiao Jie Du Pian

Kode produksi

:-

No. Reg

: POM TI 034 506 101

No. Bets

:-

Tgl Daluarsa

:-

Pabrik

: PT. Saras Subur Ayoe, Jakarta - Indonesia

Universitas Sumatera Utara

Komposisi

: Lonicera japonica thunb 17,85%, Forsythia suspensa vahl


17,85%, Platycodon glaucus bge 10,72%, Mentha arvensis
L 10,72%, Lophatherum elatum zoll 7,14%, Schizonepeta
multifida briq 7,14%, Glycine Max merril 8,93%, Arctium
lappa L 10,72%, Glycryrrhiza uralensis fisch 8,93%.

Khasiat

: Membantu mengobati batuk, demam, sakit kepala.

3.5 Prosedur
3.5.1 Pembuatan Pereaksi
3.5.1.1 Pembuatan Natrium Hidroksida 0,1N
Ditimbang seksama 4 gr kristal Natrium Hidroksida dilarutkan dalam 1000
ml aquadest sampai garis tanda.
3.5.1.2 Cara Penetapan
a. Persiapan larutan Uji
Timbang seksama sejumlah satu dosis cuplikan, masukkan kedalam labu
erlenmeyer, tambahkan aquadest 30 ml, basakan dengan larutan natrium
hidroksida 0,1 N hingga pH 10, kocok selama 30 menit dan saring. Filtrat
masukkan kedalam corong pisah 125 ml. Tambahkan dengan larutan dapar
sitrat pH 4 dan diekstraksi 3 kali, setiap kali dengan 30 ml eter. Ekstrak eter
dikumpulkan dan diuapkan sampai kering menggunakan penguapan rotasi
vakum. Sisa penguapan dilarutkan dalam 5 ml etanol (A). Dengan cara yang
sama ekstraksi cuplikan yang telah ditambahkan 5,0 mg larutan baku asam
benzoat BPFI 0,2 % b/v dalam etanol (B).

Universitas Sumatera Utara

b. Persiapan Larutan Baku


Buat larutan baku asam benzoat 0,2 % b/v dalam etanol (C)
c. Identifikasi
1. Cara Kromatografi Lapis Tipis
Totolkan secara terpisah Larutan A, B, dan C dan lakukan kromatografi lapis
tipis sebagai berikut:
Fase diam

: silika gel GF 254

Fase gerak

: pentana asam asetat glasial ( 88 : 12 )

Penjenuhan

: dengan kertas saring

Volume penotolan : larutan A, B, dan C masing-masing 50l


Jarak rambat

: 15 cm

Penampak bercak : cahaya ultraviolet 254 nm, terjadi peradaran fluoresensi

2. Cara Spektrofotometri Ultraviolet


- Larutkan A, B, dan C dikromatografi lapis tipis seperti tersebut diatas dengan
volume penotolan disesuaikan hingga diperoleh bercak setara denga 50g asam
benzoat.
- Bercak baku dan bercak senyawa yang mempunyai harga Rf sama ditandai dan
dikerok.
- Hasil kerokan diekstraksi secara terpisah dengan metanol dan disaring.
- Ukur serapan filtrat pada panjang gelombang antara 254 nm dan 366 nm.
- Asam benzoat akan menunjukkan serapan maksimum pada panjang gelombang
lebih kurang 225 nm.

Universitas Sumatera Utara

3. Penetapan kadar
Serapan larutan A, B, dan C diukur pada panjang gelombang lebih kurang
225 nm. Kadar asam benzoat dihitung dengan rumus sebagai berikut:

Keterangan:
Au
Ab
Kb
Vtb
Vtu
Veu
B
F

: serapan larutan uji


: serapan larutan baku
: konsentrasi larutan baku
: volume penotolan larutan baku ( mikroliter )
: volume penotolan larutan uji ( mikroliter )
: volume awal ekstrak ( mililiter )
: bobot cuplikan ( miligram )
: faktor pengenceran

3.6 Interpretasi Hasil


Data dan hasil terlampir

Universitas Sumatera Utara

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil
4.1.1 Uji Kualitatif
Uji kualitatif dilakukan dengan kromatografi lapis tipis. Data hasil yang
diperoleh dapat dilihat pada Tabel 4.1
Tabel 4.1 Data Uji Kualitatif Sampel yang Mengandung Asam Benzoat
No

Sampel

1.

Jamu Shi Re Qing

Mengandung Asam Benzoat/


Tidak Mengandung Asam Benzoat
Mengandung Asam Benzoat

Harga Rf
Rf 1 = 0,53
Rf 2 = 0,52

2.

3.

4.

Jamu Qing Fei Yi Tidak Mengandung Asam Benzoat


Hoo Pian

Rf 1 = 0,51

Jamu Ching Fei Yi Tidak Mengandung Asam Benzoat


Huo Pien

Rf 1 = 0,51

Jamu Yin Qioo Jie Tidak Mengandung Asam Benzoat


Du Pian

Rf 1 = 0,50

Rf 2 = 0,50

Rf 2 = 0,50

Rf 2 = 0,51

Perhitungan harga Rf
Harga Rf :

jarak titik pusat bercak


jarak rambat eluen

Universitas Sumatera Utara

1. Baku Asam Benzoat

8,1
= 0,54
15

2. Harga Rf Jamu Shi Re Qing (1)

7,8
= 0,52
15

Harga Rf Jamu Shi Re Qing (2)

7,9
= 0,53
15

3. Harga Rf Jamu Qing Fei Yi Hoo Pian (1)

7,6
= 0,51
15

Harga Rf Jamu Qing Fei Yi Hoo Pian (2)

7,5
= 0,50
15

4. Harga Rf Jamu Ching Fei Yi Huo Pien (1)

7,6
= 0,51
15

Harga Rf Jamu Ching Fei Yi Huo Pien (2)

7,5
= 0,50
15

5. Harga Rf Jamu Yin Qioo Jie Du Pian (1)

7,5
= 0,50
15

Harga Rf Jamu Yin Qioo Jie Du Pian (2)

7,6
= 0,51
15

4.1.2 Uji Kuantitatif


Uji kuantitatif dilakukan untuk sampel yang positif mengandung asam
benzoat. Dimana uji kuantitatif dilakukan dengan Spektrofotometer UV. Data
hasil yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 4.2

Universitas Sumatera Utara

Tabel 4.2 Data Pengukuran Absorbansi Sampel yang Mengandung Asam Benzoat
No
1.

2.

Sampel

Panjang Gelombang

Absorbansi

Baku Asam Benzoat (1)

225.9

0.4748

Baku Asam Benzoat (2)

225.9

0.4753

Jamu Shi Re Qing (1)

225

0.4940

Jamu Shi Re Qing (2)

225

0.4945

Perhitungan:
Baku Pembanding :
1.

x2x

x 99,94% = 0,012 %

2.

x2x

x 99,94% = 0,012 %

4.2 Pembahasan
Dari hasil pengujian kromatografi lapis tipis, pada jamu Shi Re Qing
diperoleh harga Rf 0,52 dan 0,53. Pada jamu Qing Fei Yi Hoo Pian diperoleh
harga Rf 0,50 dan 0,51. Pada jamu Ching Fei Yi Huo Pien diperoleh harga Rf
0,50 dan 0,51. Dan pada jamu Yin Qioo Jie Du Pian diperoleh harga Rf 0,50 dan
0,51.
Dari hasil pengujian di atas sampel yang positif mengandung asam
benzoat adalah jamu Shi Re Qing, karena harga Rf baku asam benzoat hampir
sama dengan harga Rf sampel jamu Shi Re Qing dengan menggunakan eluen
pentana : asam asetat glasial (88 : 12) dimana didapat harga Rf baku asam benzoat
ialah 0,54 dan harga Rf untuk sampel jamu ialah 0,52 dan 0,53. Untuk

Universitas Sumatera Utara

memperjelas atau membuktikan hasil KLT maka dilanjutkan pengujian dengan


spektrofotometri UV.
Dari hasil pengujian dengan spektrofotometer UV diperoleh kadar jamu
Shi Re Qing adalah 0,012%.
Persyaratan Metode Analisa Pusat Pengujian Obat dan Makanan 35/Obat
Tradisional/1993 (MA.PPOM 35/OT/93) bahan pengawet asam benzoat yang
boleh digunakan dalam obat tradisional tidak boleh lebih dari 0,1%. Dan menurut
Wasito (2011), secara umum bahan pengawet seperti asam benzoat yang biasa
ditambahkan dalam obat tradisional tidak boleh lebih dari 0,1%. Dengan demikian
kadar asam benzoat dalam jamu Shi Re Qing memenuhi standar, dan baik untuk
dikonsumsi.

Universitas Sumatera Utara

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Dari hasil penetapan kadar asam benzoat dalam obat tradisional bentuk
tablet secara kromatografi lapis tipis dan spektrofotometri UV, dapat disimpulkan
bahwa sampel yang mengandung asam benzoat adalah jamu Shi Re Qing dan
kadar asam benzoat 0,012%. Dengan demikian kadar asam benzoat jamu Shi Re
Qing memenuhi persyaratan MA.PPOM 35/OT/93 yaitu kadar asam benzoat tidak
boleh lebih dari 0,1% dalam obat tradisional.
5.2 Saran
1. Perlunya pengawasan yang baik pada saat proses pengerjaan baik mulai dari
penimbangan sampel sampai hasil diperoleh.
2. Sebaiknya instansi terkait melakukan sampling secara berkala pada produk
sejenis untuk mengawasi kadar asam benzoat yang terkandung didalamnya.

Universitas Sumatera Utara