Anda di halaman 1dari 4

Lampiran 1. Prosedur pembuatan Preparat Histopatologi Hepar.

Pembuatan preparat histopatologi dilakukan di Laboratorium Patologi


Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya, dengan
cara sebagai berikut. Proses pembuatan preparat dimodifikasi dari (Prasetiawan,
2011) :
1. Fiksasi
Jaringan yang akan dibuat sediaan histopatologi difiksasi dalam
larutan Buffer Neutral Formalin (BNF) 10% minimal 48 jam hingga
mengeras (matang). Sampel organ yang terfiksasi dengan sempurna
ditrimming setebal 0,5 cm. Potongan kemudian dimasukan dalam tissue
cassette untuk dimasukan dalam tissue processor automatis.
2. Dehidrasi dan Clearing
Organ hepar yang telah dicuci dengan air kran selama 30 menit lalu
dimasukkan ke dalam reagen dengan larutan alkohol 70%, 80%, 95%, 96%,
Alkohol absolute I, II, III, Xylol I dan II masing-masing selama 30 menit.
3. Infiltrasi
Jaringan dimasukkan kedalam paraffin I yang mencair, kemudian
dimasukkan ke dalam oven selama 30 menit, lalu dimasukkan ke dalam
parafin II dan dimasukkkan ke dalam oven selama 30 menit pada suhu 60
0

C.

4. Pembuatan Blok Parafin

40

41

Disediakan beberapa cetakan besi yang diisi parafin cair yang


sebelumnya telah diolesi gliserin dengan tujuan untuk mencegah letaknya
parafin pada cetakan kemudian organ hepar yang telah dipotong-potong tadi
dimasukkan kedalam dengan pinset dan ditunggu sampai parafin membeku.
5. Pengirisan Tipis
Pemotongan dilakukan secara random, yaitu tiap 15 kali pemotongan
yang dilakukan seri, diambil satu dengan ketebalan empat sampai enam
mikron, kemudian dicelupkan air hangat dengan suhu 200C-300C sampai
jaringan.

42

Lampiran 2. Perhitungan dosis Endosulfan.


Dosis yang diberikan pada mencit (Mus musculus) jantan adalah 3.2
mg/kgBB/hari (WHO, 1975).
Kebutuhan :
-

Dosis per mencit = 3,2 mg/kgBB

Pemberian larutan per mencit per 1x pemberian (cekokan) = 1 ml

Tersedia :
-

Sediaan Endosulfan INDODAN dengan kandungan 353,59 gram/liter

Perhitungan :
1.

Kandungan dosis pada INDODAN = 353,59 g/l


= 353,59 mg/ml

2.

Pemberian Endosulfan per 25g mencit

=
= 0,08 mg/mencit

3.

Pengenceran :
Menggunakan rumus
V1.M1 = V2.M2

Keterangan :
V1 : volume awal
M1 : konsentrasi awal
V2 : volume setelah pengenceran
M2 : konsentrasi setelah pengenceran

353,59 mg. 1ml = V2 . 0,08 mg


353,59 = 0,08V2

43

V2 = 353,59 : 0,008
V2 = 4.419,875 ml
V2 = 4,419875 liter
Ini artinya harus mencampur 1ml larutan INDODAN dengan aquadest
hingga volume 4.419,875 ml air untuk mendapatkan larutan Endosulfan
1ml mengandung 0,08 mg.