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INTRODUCCIN

Los linfocitos realizan funciones esenciales en el reconocimiento de antgenos


propios o extraos a travs de su TCR, el antgeno es digerido y convertido en
pptidos para ser expuestos al surco de molculas MHC del propio haplotipo.
En la inmunidad celular, las clulas T CD4+ activan a los macrfagos para que
destruyan el agente extrao fagocitados, mientras que las clulas T CD8+
destruyen a las clulas infectadas por microorganismos intranucleares.
En la inmunidad humoral las clulas T colaboradoras CD$+ interaccionan con
los linfocitos B y estimulan la proliferacin y la diferenciacin de estas clulas
B.
Tanto la Fase efectora de las respuestas de las clulas T estn
desencadenadas por el reconocimiento especifico del antgeno.
La presentacin del antgeno procesado es la asociacin de algunos de esos
pptidos con molculas codificadas por genes del complejo principal de
histocompatibilidad (MHC)
Las molculas MHC de clase I, en una situacin normal se unen a pptidos
derivados de molculas propias, y en el caso de infeccin por un parsito
intracelular (virus, ciertas bacterias, protozoos) se unen a pptidos derivados
de protenas del patgeno. En ambos casos los pptidos derivan de
procesamiento citoslico del antgeno endgeno.
Las molculas MHC de clase II se unen a pptidos derivados de antgenos
exgenos que previamente han sido introducidos en la clula presentadora por
endocitosis o fagocitosis, y que son sometidos a procesamiento endoctico.
Las clulas que presentan pptidos asociados a molculas del MHC reciben el
nombre de clulas presentadoras de antgeno. Las APC presentan antgenos a
clulas T no estimuladas o vrgenes durante la fase de reconocimiento de las
respuestas inmunitarias para iniciar estas respuestas durante la fase efectora
tambin presentan antgenos a clulas T efectoras diferenciadas para iniciar los
mecanismos de eliminacin de los antgenos.

CAPITULO I:
CLULAS PRESENTADORAS DE ANTGENOS
Todas las funciones de los linfocitos T depende de sus interacciones con otras clulas.
Por esta razn, se han dedicado a muchos esfuerzos a definir como los antgenos
asociados a las clulas son presentados a los linfocitos T.
Los linfocitos T que estn presentes en la sangre, el bazo o los ganglios linfticos de
individuos inmunizados con un antgeno protenico se pueden activar mediante la
exposicin a ese antgeno en cultivos tisulares. Si se retiran de los cultivos las clulas
dendrticas, los macrfagos y los linfocitos B contaminantes, los linfocitos T purificados
no responden al antgeno y se puede restaurar la reactividad aadiendo de nuevo
clulas dendrticas, macrfagos o linfocitos B (figura 6-2). Estos mtodos
experimentales se utilizan habitualmente para determinar que clulas pueden actuar
como CPA para la activacin de los linfocitos T.
Si los macrfagos u otras CPA captan in vitro un antgeno y se inyectan a ratones
posteriormente, la cantidad de antgeno asociado a clulas que es necesario para
inducir una respuesta es 1000 veces menor que la cantidad del mismo antgeno que
se precisa cuando se administra solo, sin clulas. En otras palabras, las protenas
asociadas a clulas son mucho ms inmungenas que las protenas solubles en una
base molar. La explicacin de este hallazgo es que la forma inmungena del antgeno
es la forma asociada a la CPA, y solo una pequea parte del antgeno inyectado libre
acaba asociada a las CPA in vivo. En este momento se est explotando

este

concepto para inmunizar a pacientes con cncer contra sus propios tumores cultivando
las CPA (especficamente, clulas dendrticas) de estos pacientes, incubando las CPA
con antgenos humorales y volviendo a inyectarlas en los pacientes como vacunas
basadas en clulas.

Las CPA tienen dos funciones importantes en la activacin de los linfocitos T CD4+. En
primer lugar, las CPA convierten los antgenos protenicos en pptidos y muestran
complejos pptido-CPH para que sean reconocidos por los linfocitos T. La conversin
de protenas originales en fragmentos peptdicos asociados al CPH que realizan las
CPA se denomina procesamiento del antgeno. En segundo lugar, algunas CPA
suministran a los linfocitos T estmulos que van mas alla de los que ponen en marcha
mediante el reconocimiento de los complejos pptido-CPH por el receptor del antgeno
de los linfocitos T. Estos estmulos, denominados coestimuladores, son necesarios
para que se produzcan las respuestas completas de linfocitos T.
La funcin de presentacin del antgeno de las CPA se potencia por la exposicin a
productos microbianos. Las clulas dendrticas y los macrfagos expresan receptores
de tipo toll que responden a los microbios aumentando la expresin de las molculas
del CPH y los coestimuladores, mejorando la eficiencia de la presentacin del antgeno
y activando a las CPA para que produzcan citocinas, que estimulan las respuestas de
los linfocitos T. Adems, las clulas dendrticas y los macrfagos que son activados
por los microbios expresan receptores de quimiocinas que estimulan su migracin a
los puntos de infeccin, lo que amplifica aun ms la presentacin del antgeno y la
activacin de los linfocitos T. Para inducir una respuesta mediada por linfocitos T. Para
inducir una respuesta mediada por linfocitos T frente a un antgeno protenico en una
vacuna o de manera experimental, se debe administrar el antgeno con sustancias
denominadas coadyuvantes. Los coadyuvantes son productos de los microbios, como
micobacterias muertas (que se utilizan experimentalmente), o simulan que son
microbios y estimula las respuestas de los linfocitos T por los mismos mecanismos de
los productos microbianos. No es posible emplear la mayora de estos coadyuvantes
microbianos en los seres humanos debido a la inflamacin patolgica que provocan
los productos microbianos.
Diferentes tipos celulares actan como CPA para activar a los linfocitos T efectores
vrgenes y diferenciados previamente (figura 6-3 y tabla 6-2). Las clulas dendrticas
son las CPA ms eficaces para activar a los linfocitos T CD4+ y CD8+ vrgenes y, por
tanto, para iniciar las respuestas de los linfocitos T. Los macrfagos presentan
antgenos a los linfocitos T CD4+ diferenciados (efectores) en la fase efectora de la
inmunidad mediada por clulas y los linfocitos B presentan los antgenos a los
linfocitos T cooperadores durante las respuestas inmunitarias humorales.

Las clulas dendrticas, los macrfagos y los linfocitos B expresan molculas del CPH
de la clase II y coestimuladores y, por tanto, son capaces de activar a los linfocitos T
CD4+. Por este motivo se ha denominado a estos tres tipos celulares CPA
profesionales; sin embargo, a veces este trmino se utiliza para referirse solo a las
clulas dendrticas, porque este es el nico tipo celular cuya funcin principal es captar
y presentar antgenos, y son las nicas CPA capaces de iniciar las respuestas de los
linfocitos T.

PROPIEDADES DE LOS APC


Las CPA deben tener la capacidad de procesar antgenos captados por endocitosis y
expresar molculas de los genes Clase II de MHC. Lo que significa que las CPA son
clulas capaces de procesar antgenos por endocitosis con el fin de internalizar y
subsecuentemente procesar los antgenos extraos, no propios del hospedador. Una
vez procesado el material forneo, debe ser presentado en la superficie, sobre la
membrana celular

de la CPA unido a una

molcula

del complejo mayor de

histocompatibilidad. Adicional a los estmulos generados por la interaccin creada por


el reconocimiento de una clula T, las CPA proveen al linfocito estmulos a travs de
coestimuladores de membrana necesarios para la activacin del linfocito T.

FUNCIONES DE LOS APC


Como consecuencia de la presentacin de antgenos a las clulas T, las CPA causan:
Activacin de linfocitos T vrgenes con expansin clonal y diferenciacin en clulas
efectoras, representadas por lo general por clulas dendrticas;

Activacin de la

inmunidad celular: macrfagos y linfocitos T efectores, por ejemplo; Activacin de la


respuesta humoral por estimulacin de linfocitos B y la produccin de anticuerpos.

TIPOS DE CLULAS PRESENTADORAS DE ANTGENOS (CPA)


Clulas diana (enfermas por parsitos tumorales): presentan pptidos junto con
molculas MHC-I propias para que reconozcan los linfocitos TC (CD8+). Las clulas
presentadoras de antgeno (APC): despliegan pptidos asociados con el MHC II,
para su reconocimiento por linfocitos TH (CD4+), exhiben molculas de clase II,
internalizan antgenos exgenos va endoctica.
Los tres tipos celulares que cumplen con estos requisitos son las llamadas clulas
presentadoras de

antgenos

profesionales, son las

clulas dendrticas, los

macrfagos y los linfocitos B. Existen otras estirpes celulares que, aun no siendo
APCs profesionales, son capaces de expresar molculas de
determinadas condiciones.

MHC-II bajo

Clulas presentadoras de antgeno profesionales

Las clulas presentadoras de

antgeno

profesionales estn especializadas en la

captacin de antgenos, su procesamiento y presentacin a los linfocitos T. Estas


clulas se concentran en los rganos linfoides perifricos y, por tanto, es en ellos
donde se produce la interaccin inicial entre los linfocitos novatos y el antgeno. Los
tres tipos principales de APCs profesionales son los macrfagos, las clulas
dendrticas y las clulas B.

A. Clulas dendrticas

Las clulas dendrticas se generan en la mdula sea desde donde migran en


estado inmaduro a los tejidos perifricos. Mientras estn en estado inmaduro,
las clulas dendrticas tienen gran capacidad de captacin de antgeno del
medio y una maquinaria proteoltica eficiente, expresan bajos niveles de MHC
y de molculas coestimuladoras; expresan receptores Fc (CD32), de manosa y
de complemento, implicados en captacin de antgeno por endocitosis,
fagocitosis y, sobre todo, macropinocitosis.

Al activarse su maduracin en presencia de citocinas inflamatorias, aumenta


considerablemente su capacidad de macropinocitosis y la expresin de
receptores que permiten la captacin de antgeno; tambin se activa la sntesis
de molculas de MHC-I y II que unirn con gran eficiencia tanto pptidos
originados en la propia clula dendrtica como pptidos externos que se hallan
en el lugar de inflamacin.

Mientras estn en estado inmaduro, las clulas dendrticas tienen gran capacidad de
captacin de antgeno del medio y una maquinaria proteoltica eficiente, expresan
bajos niveles de MHC y de molculas coestimulatorias; expresan receptores Fc
(CD32), de manosa y de complemento, implicados en captacin de antgeno por
endocitosis, fagocitosis y, sobre todo, macropinocitosis. Al activarse su maduracin en
presencia de citocinas inflamatorias, aumenta considerablemente su capacidad de
macropinocitosis y la expresin de receptores que permiten la captacin de antgeno;
tambin se activa la sntesis de molculas de MHC-I y II que unirn con gran eficiencia
tanto pptidos originados en la propia clula dendrtica como pptidos externos que se
hallan en el lugar de inflamacin. Desde el sitio de la herida, las clulas dendrticas
maduras expresan un alto nmero de complejos MHC/pptido de alta estabilidad en su
membrana, paran la sntesis de novo de MHC, pierden la capacidad de captacin de
antgeno y la expresin de algunos receptores iniciando su migracin los rganos
linfoides secundarios (ganglios linfticos, bazo o mucosas).

Durante el transporte de los tejidos perifricos a los rganos linfoides por los vasos
linfticos, las clulas cambian de morfologa y reciben el nombre de clulas veladas
(veiled cells). A su llegada a los rganos linfoides secundarios, las clulas dendrticas
maduras se emplazan en las zonas ricas en clulas T (recibiendo el nombre de clulas
dendrticas interdigitantes) donde realizan su funcin de presentar pptidos a clulas T
especficas que all se encuentren, inicindose as la respuesta inmune contra el
agente agresor. Las clulas dendrticas son especialmente eficientes en la activacin y
estimulacin de clulas T pre-inmunes, tanto CD8 como CD4. Mediante la unin de
pptidos exgenos o endgenos a sus molculas de MHC-I, altamente expresadas,
pueden iniciar una respuesta de clulas T CD8+, incluso simultnea a la activacin de
clulas T CD4+. Por otra parte, se las ha propuesto como responsables en gran parte
del mantenimiento de la memoria T ya que los complejos MHC-II/pptido formados
permanecen expuestos en su membrana durante un perodo de tiempo largo
proporcionando a las clulas T de memoria un contacto continuado con el antgeno
que las ha estimulado en la respuesta primaria.

Funcin de las Clulas Dendrticas

Derivadas de epitelio (Langerhans y Dendrticas intersticiales):


Fagocitos en los epitelios y CPA en los rganos linfoides secundarios
Inmunidad: Langerhans
Tolerancia: CDs latentes Derivadas de sangre (Plasmocitoides): En los rganos linfoides
secundarios estas clulas reciben antgenos de CDs migratorias
Inmunidad: Eliminacin de agentes patgenos provenientes de sangre.
Tolerancia Perifrica: Eliminacin de linfocitos T autoreactivos no seleccionados en el timo.

B. Monocitos - macrfagos
Los macrfagos son clulas fagociticas mononucleares de linaje mieloide y con gran
capacidad de procesamiento de antgenos tanto solubles como particulados. Los
macrfagos inmaduros de sangre perifrica se denominan monocitos.
Los macrfagos diferenciados localizados en tejidos se encargan de eliminar
restos celulares in situ. Estos macrfagos diferenciados son residentes
esenciales de los tejidos linfoides, pero tambin se encuentran en otras
localizaciones, en suspensin o integrados en tejidos slidos; all reciben
distintos nombres y, aunque mantienen sus propiedades principales, adquieren
caractersticas especficas al diferenciarse en los diferentes tejidos. Los
macrfagos en suspensin son clulas muy activas en la eliminacin de
partculas extraas y restos celulares, entre ellos se encuentran principalmente
los peritoneales y los alveolares. Los macrfagos de tejido slido son ms
especializados, por ejemplo las clulas de Kupffer del hgado son responsables
de la eliminacin de productos particulados y bacterias de la circulacin
sangunea. Entre este grupo se agrupan las clulas de la microgla del sistema
nervioso central, los osteoclastos del tejido seo o las clulas mesangiales del
glomrulo renal, entre otros.
Los macrfagos activados en el lugar de infeccin inician un proceso de
fagocitosis muy activo mediante receptores especficos, receptores tipo toll
(TLR) y receptores scavenger, capaces de reconocer patrones moleculares
(PAMPS) expresados en los patgenos. Los macrfagos tambin pueden
endocitar

antgenos

opsonizados

con

molculas

del

complemento

anticuerpos, va receptores del complemento o receptores Fc (CD64, CD32,


CD23).

Los monocitos y macrfagos no activados expresan niveles bajos de MHC-II,


en cambio en los macrfagos activados se induce la expresin de molculas de
clase II y las molculas accesorias en su superfcie que aumentan su
capacidad de presentacin de antgeno. Consecuencia de la activacin, los
macrfagos secretan quimiocinas que reclutan clulas inflamatorias y citocinas
implicadas en la activacin de las clulas T como IL-12 dirigiendo la respuesta
adaptativa en las fases iniciales.

C. Linfocitos B

Reconocen antgenos por medio de su principal receptor, la inmunoglobulina de


membrana BCR. Fagocitan el complejo antgeno: BCR y presentan el antgeno
a Linfocitos T cooperadores por medio del MHC-II. Son sensibles a la
estimulacin de citocinas, como la IL-4.
Los linfocitos B pueden actuar como clulas presentadoras de antgeno ya que
expresan MHC-II constitutivamente, expresin que aumenta cuando se activan,
aunque su capacidad de captacin de antgeno es muy baja. Sin embargo, los
linfocitos B son clulas presentadoras muy eficientes si expresan una
inmunoglobulina de superficie (BCR) especfica del antgeno.
La eficiencia de la presentacin de un antgeno por clulas B aumenta 1001000 veces cuando el antgeno se internaliza tras su unin con el BCR,
permitiendo que un antgeno se presente con gran eficiencia incluso en bajas
concentraciones.
La presentacin de antgeno a linfocitos T especficos es parte esencial de la
completa activacin y diferenciacin de la clula B en clula plasmtica
productora de anticuerpos, ya que para este proceso, los linfocitos B requieren
de la colaboracin de los linfocitos T.

La interaccin entre clulas T y B especficas del mismo antgeno requiere


segundas seales producidas a partir de la interaccin entre CD40 en la clula
B y CD40L en la clula T

y por la interaccin entre la IL-4 producida por los

linfocitos T y su receptor en la clula B. El papel de las clulas B como APC se


refuerza en la respuesta secundaria contra el antgeno, ya que existen un
mayor nmero de clulas B especficas expandidas durante la respuesta
primaria.

CAPITULO II
PROCESAMIENTO DEL ANTIGENO
Se entiende por procesamiento del antgeno la degradacin del mismo dando lugar a
fragmentos peptdicos, los cuales se unirn a molculas del complejo principal de
histocompatibilidad (MHC) de la clase I o II. Son fragmentos decisivos para activar a
los linfocitos T. Los TCR son ms sensibles a la secuencia de aminocidos presentes
en el surco de unin a pptidos de la molcula del MHC que a los determinantes
conformacionales reconocidos por los anticuerpos. Los linfocitos, las nicas clulas
con receptores especficos de antgeno, son responsables de iniciar y llevar a cabo la
respuesta inmune adaptativa. Los linfocitos B interaccionan con el antgeno mediante
su receptor (BCR), una inmunoglobulina de membrana (mIg) que reconoce
determinantes

antignicos

tridimensionales

en

protenas

otras

molculas

antignicas, solubles o particuladas, en estado nativo. En cambio, el receptor


clonotpico de los linfocitos T (TCR) reconoce complejos moleculares en la membrana
de las clulas presentadoras de antgeno (APC), formados por molculas del Complejo
Principal de Histocompatibilidad (MHC) de clase I (MHC-I) o de clase II (MHC-II) (ver
ms adelante) y pptidos antignicos resultantes de la degradacin intracelular del
antgeno. Las clulas T, por tanto, a diferencia de los linfocitos B, necesitan de clulas
presentadoras de antgeno (APC) accesorias que captan el antgeno, lo procesan y lo
presentan en la membrana. El TCR interacciona molecularmente con el pptido
contenido en la cavidad de las molculas del MHC y con las propias molculas
presentadoras, de forma que el reconocimiento del antgeno por el linfocito T, tal como
se ha visto en captulos anteriores, queda restringido por el MHC. El fenmeno de la
restriccin por el MHC del reconocimiento de antgeno fue originalmente descrito por
Zinkernagel y Doherty (1974) en la respuesta de los linfocitos T al virus de la
linfocoriomeningitis (LCV). Estos investigadores demostraron que las clulas T
citotxicas especficas de virus slo reconocen las clulas infectadas si stas expresan
determinadas molculas de histocompatibilidad en su superficie. Este trabajo mereci
el Premio Nobel de Medicina en 1996.

BIOLOGIA DEL PROCESAMIENTO DEL ANTIGENO

Existen dos rutas de procesamiento de antgenos proteicos derivados del espacio


extracelular o del citosol en pptidos y cargan estos pptidos en molculas del MHC
para presentarlos a los linfocitos T. Las vas de procesamiento y presentacin de
antgenos asociadas al MHC de clase I y II utilizan organelassubcelulares y enzimas
que poseen funciones generales de degradacin y reciclado de protenas, pero estas
funciones no se utilizan exclusivamente para la presentacin de antgenos al sistema
inmunitario. Las rutas celulares de procesamiento de antgeno tienen como objetivo
generar pptidos con caractersticas necesarias para la unin con las molculas del
MHC. El antgeno proteico presente en los compartimentos vesiculares cido de los
APC generan pptidos asociados a molculas de la clase II, mientras que los
antgenos presentes en el citosol generan pptidos asociados a molculas de la clase
I. Las dos rutas diferentes de procesamiento, actan segn sea la amenaza de un
antgeno endgeno (intracelular) o exgeno (extracelular). En cada caso existe una
respuesta inmune diferente: actuacin de clulas T citolticas (CTL) para el antgeno
endgeno, y produccin de anticuerpos para el antgeno exgeno.
Los antgenos exgenos se procesan por la ruta endoctica, tras lo cual los pptidos
resultantes se unirn a molculas MHC de clase II, lo cual dar la seal a los linfocitos
T coadyuvantes (TH).
Los antgenos endgenos se procesan por la ruta citoslica, tras lo cual sus pptidos
se unirn a molculas de MHC de clase I de la clula enferma, que as se convierte en
diana para la actuacin de linfocitos T matadores (TC, que en su forma "ejecutora" se
denominan linfocitos T citolticos, CTL).
Las vas de procesamiento de los antgenos convierten a protenas extracelulares o
citoplasmticas en pptidos, que luego son unidos a las molculas del MHC y
presentados en la membrana celular.
La va celular de procesamiento de antgenos ha sido diseada para generar pptidos
que posean las caractersticas estructurales para unirse a las molculas del MHC.
Cabe sealar que la unin del pptido a las molculas del MHC se realiza antes de
que estas se expresen en membrana, debido que es esta la conformacin estable de
la molcula.

A.- Procesamiento de antgenos citoplasmticos y asociacin a molculas de


clase I

Las vas de procesamiento y presentacin de antgenos por molculas de clase I es


til para la defensa frente a virus, bacterias intracelulares y clulas tumorales. Estos
pptidos asociados a molculas de clase I son producidos por degradacin citoslica,
luego transportadas al retculo endoplsmico donde se unen a las molculas de clase I
en formacin y finalmente se expresan en la membrana. A continuacin se describen
con detalles estos pasos.
Fig. Procesamiento y representacin de antgenos asociados a molculas de clase I. Una parte
de las protenas para sintetizar por una clula son degradadas en el citoplasma.

Degradacin proteoltica en el citoplasma:


El mecanismo por el cual se generan la mayor cantidad de pptidos antignicos
citoplasmticos es a travs del proteasoma. Este un complejo multienzimtico, que
reconoce a protenas intracelulares, que hayan sido marcadas por un pequeo
polipptido denominado Ubiquitina. Luego de la Ubiquitinizacin, las protenas se
despliegan e ingresan al proteasoma, quien las degrada a pequeos pptidos capaces
de interactuar con las molculas del MHC I.

Existe amplia evidencia que demuestran la importancia de la degradacin proteosomal


de las protenas para ingresar en la va del MHC I. Inhibidores especficos de la
funcin del proteasoma, bloquean la presentacin de protenas citoplasmticas por el
MHC I a Linfocitos T CD8+ especficos para el eptope del pptido de una protena en
particular, sin embargo tambin se ha demostrado, que si el pptido es sintetizado en
el citoplasma y no obtenido por protelisis, la inhibicin del proteasoma no obstaculiza
y el pptido puede ser presentado igual. Estos estudios resaltan la importancia del
proteasoma para la fragmentacin de protenas en pequeos pptidos que luego se
incorporan a las molculas del MHC I, pero, en casos donde el pptido ya existes
como tal, el rol del proteasoma no es vital para la va.

Transporte de los pptidos del citoplasma al retculo endoplsmico


Debido a que las molculas de clase I son sintetizadas en retculo endoplsmico (ER)
y los pptidos se encuentran en el citoplasma, debe existir un mecanismo que
transporte estos pptidos al interior de ER. Esta funcin es suplida por las protenas
TAP (transportador asociado al procesamiento de antgeno).
Estas protenas son un heterodmero, cuyos genes, TAP 1 y TAP2, se ubican en la
regin II de los genes del MHC. Las protenas TAP se ubican en la membrana del ER,
donde median un transporte activo-ATP-dependiente, de los pptidos desde el citosol
a la luz de ER. En su extremo luminal, las protenas TAP se encuentran unidas de
modo no covalente a las molculas del MHCI nacientes, por una protena denominada
tapasina, de esta manera se mantienen espacialmente cerca, de modo que, cuando
las TAP internalizan al pptido, automticamente este se encuentre con las molculas
de clase I y puedan unirse.

Ensamblaje del pptido a las molculas de clase I


La sntesis y el ensamblaje de las molculas de clase I, es un proceso de mltiples
etapas, en donde la unin del pptido juega un papel crucial. En el interior del ER se
sintetizan la cadena y la 2-microglobulina. Tambin encontramos en el sector
luminal del ER a protenas chaperonas como la calnexina y la calreticulina, que se
encargan del correcto plegamiento de las cadenas .

Una vez que el pptido ha ingresado va TAP se une a la molcula del MHC I naciente,
ahora este complejo pptido-MHC I se encuentra en una conformacin estable que se
libera de las tapasina y se encuentra disponible para expresarse en la membrana.
Cabe plantearse la cuestin de: Cmo es posible que el pptido que ingresa al ER no
se una a las molculas de clase II, que tambin estn siendo sintetizadas en el ER? en
caso de que estemos hablando de una APC. Esto no es posible por dos motivos: uno
de ellos es que las molculas de clase I se encuentran unidas a las TAP por las
tapasinas, y de esta manera cuando el pptido ingrese ya toma contacto con el MHC I.
Otro mecanismo, como se ver ms adelante, es que las molculas de clase II
mantienen cubierto susitio de unin al pptido en el ER por una protena denominada
cadena invariante (Ii).
Expresin del complejo pptido-MHC I en la superficie celular.
Como se ha mencionado, la conformacin estable del MHC I, se logra cuando este se
encuentra unido al pptido. Este complejo se vehiculiza a travs del ER y el Golgi
hasta llegar a la membrana celular por vesculas exocticas. Una vez ubicados en la
membrana la molcula del MHC I puede ser reconocida por los Linfocitos T CD8+.

Fig. Procesamiento de antgenos


citoplasmticos y asociacin a
molculas de clase I
1.- Produccin de protenas en el
citosol
2.- Degradacin proteoltica de las
protenas citoslicas
3.- Transporte de peptidos desde el
citosol al reticuloendoplasmatico
4.- Ensamblaje de complejos peptidomolcula de la clase I en el retculo
endoplasmtico
5.- Expresin de complejos peptidomolcula de la clase I en la superficie
celular

B.- Procesamiento de antgenos extracelulares y asociacin a molculas de


clase II
El origen de los pptidos unidos a las molculas de clase II incluye, la degradacin de
las protenas internalizadas en vesculas y la unin de los pptidos a las molculas de
clase II dentro de estas (fig 9). Este mecanismo difiere en varios aspectos en
referencia al procesamiento de los pptidos unidos a las molculas de clase I, no solo
por su mecanismo vesicular o vacuolar, sino adems en la manera en que el
pptido logra unirse a las molculas de clase II
Captura de protenas extracelulares en compartimientos vesiculares por las
APC.
Las clulas dendrticas y los macrfagos poseen una variedad de receptores que,
permiten reconocer estructuras compartidas por muchos tipos de microorganismos, e
inducen la fagocitosis. Los macrfagos expresan receptores de manosa, quienes
reconocen los residuos de manosa y fructosa de las glucoproteinas y glucolipidos
bacterianos. Asimismo los receptores de las porcin Fc de los anticuerpos, a travs
de los cuales pueden reconocer y fagocitar a los microorganismos o protenas
recubiertas de anticuerpos. Como tambin los receptores para opsoninas, por
ejemplo, los receptores para el fragmento C3b del complemento. Los Linfocitos B
pueden reconocer y fagocitar antgenos proteicos a travs del receptor de las clulas
B (IgM junto con las cadenas Ig e Ig). Una vez que el antgeno fue reconocido, es
internalizado en vesculas denominadas endosomas. Estos compartimientos
intracelulares contienen un pH cido y es rico en enzimas proteolticas. La va
endosomal contina con la posterior unin del endosoma a un lisosoma, quien posee
un contenido enzimtico an mayor.
Procesamiento de las protenas en las vesculas endosmicas y lisosmicas.
Las protenas son degradadas enzimticamente generando pptidos, muchos de los
cuales poseen las caractersticas estructurales para poder interactuar con las
molculas de clase II. Esta lisis proteica es llevada a cabo por proteasas que actan a
pH cido. La catepsina, es una proteasa de amplia especificidad de sustrato, y es la
enzima endosomal y lisosomal ms abundante.

Biosntesis y transporte de las molculas del MHC II al endosoma.


Las cadenas y las cadenas , son sintetizadas por separadas y se asocian unas con
otras en el ER, este proceso es facilitado por protenas chaperonas residentes de esta
organela, tales como la calnexina (al igual que en la va del MHC I).
La molcula de clase II ensamblada, an contina siendo inestable, por lo que se une
al sitio de unin al pptido, una protena denominada cadena invariable (Ii).
La Ii es una protena no polimrfica compuesta por tres subunidades. Esta protena se
une a un heterodmero formado por las cadenas y , en su sitio de unin al pptido.
De esta manera interfiere en la carga del pptido. Gracias a la Ii las molculas de
clase II se estabilizan por completo en el ER y mantiene ocupado el sitio de unin al
pptido dentro de esta organela impidiendo que los pptidos propios del ER se unan a
las molculas nacientes. Las Ii tambin favorecen el correcto plegamiento y su
posterior transporte a las vesculas endosmicas.
Los segmentos de membrana del ER que contienen a las molculas de MHC II, se
separan del ER formando vesculas que son transportadas a la membrana celular.
Pero durante este camino, las vesculas exocticas se unen con los endosomas que
contiene a los pptidos recin internalizados. El significado la esta va vacuolar,
consiste en que las molculas de clase II se encuentren con los pptidos generados
por protelisis de las protenas previamente fagocitadas.
Se han identificado endosomas ricos en molculas de clase II, a los que se los llamo
compartimiento de clase II del MHC o MIIC (MHC class II compartment). Se debe
destacar que estas vesculas contienen todos los componentes para la asociacin
pptido-molculas de clase II, incluyendo lasenzimas que degradan las protenas, la Ii
y una molcula denominada HLA-DM.
Asociacin del pptido a las molculas del MHC II en el MIIC
Debido que la Ii se encuentra bloqueando el sitio de unin al pptido, debe ser
removido para que el pptido se una a las molculas de clase II. Este evento se realiza
en dos pasos. Primero, las mismas catepsinas que degradaron las protenas, clivan al
Ii, dejando como resultado una molcula de 24 aminocidos en el sitio de unin al
pptido llamada CLIP (pptido de cadena invariable asociado a clase II).

El segundo paso consiste en quitar al CLIP de la hendidura, esto es llevado a cabo por
la molcula HLA-DM. Quien adems facilita la entrada del pptido antignico en su
lugar. El gen que codifica la protena HLA-DM se encuentra ubicado en la regin II del
MHC.
Expresin del complejo pptido-MHC II en la superficie celular.
Una vez que el pptido se ha unido a la molcula de clase II esta se estabiliza y puede
ser presentada en la membrana celular. Finalmente en la membrana los complejos
pptido-MHC II pueden interactuar con los Linfocitos T CD4+.
Fig. Procesamiento de antgenos extracelulares y asociacin a molculas de clase II

C.- Va alterna de procesamiento de antgenos exgenos y asociacin a


molculas de clase I.
Tal y como hemos descrito con anterioridad, el clsico rol de las molculas de clase I
es, unir los pptidos endgenos durante su maduracin biosinttica y luego
transportarlos a la superficie celular para activar a los Linfocitos CD8+. En general los
pptidos de origen exgeno se encuentran excluidos de esta va.
Sin embargo, acumulada evidencia nos ha demostrado que esta dicotoma en la
presentacin del antgeno de origen endgeno y exgeno no es absoluta. Se ha
demostrado que la respuesta de los Linfocitos citotxicos (CD8+) puede ser iniciada
por antgenos exgenos, tanto in vitro como in vivo . Existen al menos dos vas
diferentes en este procesamiento alterno de las molculas del MHC I: una TAP
dependiente o procesamiento alterno citoplasmtico del MHC I y la otra TAP
independiente o procesamiento alterno vacuolar del MHC I.

La primera de ellas involucra al acceso de pptidos exgenos a la va normal del MHC


I. Es decir, se ha observado que de alguna manera no descripta aun, los pptidos
exgenos ubicados en los endosomas, pueden escaparse de estos e ingresar al
citosol. Una vez en este, las protenas TAP internalizan al pptido exgeno al ER y lo
unen al MHC I.
La segunda va involucra un mecanismo de procesamiento del antgeno exgeno en
compartimientos vacuolares, sin que el pptido ingrese al citosol. Este mecanismo
sugiere la unin del pptido a las molculas del MHC I luego de que estas hayan
abandonada el complejo de Golgi. En esta va el pptido exgeno presumiblemente
proviene de un endosoma o un lisosoma.
El espacio intracelular donde el pptido se une a las molculas del MHC I en la va
vacuolar, an se desconoce. Se cree que pudiera ser en algn compartimiento
intracelular donde el procesamiento del MHC I se lleva a cabo, o luego del reciclaje de
las molculas del MHC I de membrana y su posterior exposicin extracelular.
Inicialmente se haba pensado que las molculas de clase I que participaban en esta
va se encontraban vacas, es decir que no se asociaban a ningn pptido, y por lo
tanto un pptido exgeno poda ocupar la hendidura. Actualmente se sabe que esto no
es as, y que la va vacuolar incluye una disociacin del pptido endgeno y luego un
cambio por el pptido exgeno, proceso conocido como disociacin/cambio del
pptido (peptidedissociation/exchange).
Se ha observado que la disociacin/cambio del pptido ocurre solo en medios cidos
tales como las vesculas post-Golgi de procesamiento de antgenos o los fago
lisosomas.
Pero Cmo las molculas de clase I, que contienen pptidos endgenos en su
hendidura, puedan disociarse de esto e intercambiarlos por pptidos exgenos? Una
de las explicaciones de este fenmeno es que durante algn momento del trafico
vesicular que contenga molculas de clase I, un grupo de estas se desvi de la ruta
normal y se mezcle en la ruta del MHC II. De esta manera, al ingresar en las vesculas
de procesamiento de antgenos post-Golgi, que poseen pH cido y adems a los
antgenos exgenos, los pptidos endgenos unidos a las molculas del MHC I, se
disocian y este queda con su hendidura vaca en un medio donde abundan pptidos
exgenos. Esto trae como consecuencia que algunos de los pptidos exgenos que
cumpla con los requisitos previamente mencionados se una al MHC I vaco.

La otra posible explicacin nos habla del reciclaje, donde molculas de clase I de
superficie, son endocitadas, y estas vesculas endociticas son destinadas asu
degradacin. Pero existe un pequeo grupo, que intercepta la va de procesamiento de
molculas de clase II. De esta forma las molculas de clase I se disocian de los
pptidos endgenos debido al pH cido del endosoma y sigue una ruta similar a la
previamente descripta.
Se pretende dejar en claro que adems de las clsicas vas de procesamiento de las
molculas de clase I y II, existe una va alterna para el MHC I: una TAP dependiente, y
otra donde las molculas de clase I, ya sea que provengan de la superficie celular o
del ER, interceptan a la va del MHC II y experimentan un proceso conocido como
disociacin/cambio de pptidos, donde pierden al pptido endgeno y se unen a uno
exgeno (TAP independiente). Este cambio solo se da en medios cidos. As tambin
queremos que el lector sea consciente que es una va en etapa de investigacin y en
permanentes cambios.

CAPITULO III:
PRESENTACION DEL ANTIGENO
Una de las funciones ms avanzadas de los organismos multicelulares lo
constituye el sistema inmune, el cual ha evolucionado a la par de estos
organismos. Esta respuesta tiene dos componentes fundamentales, uno innato,
con una respuesta rpida y general, y otro especfico, donde se requiere de un
proceso ms elaborado para montar una respuesta muy sensible y especialmente
dirigida para cada agresin en forma muy peculiar. La presentacin de antgenos
representa el punto intermedio entre ambas respuestas, captando antgenos en
sitios estratgicos de forma muy temprana y colaborando con la respuesta inmune
especfica para hacer as un bloqueo muy completo.
A continuacin se hace un anlisis muy didctico para explicar estas interacciones.
La presentacin de antgeno hace referencia al fenmeno por el cual los antgenos
proteicos son procesados, generando pptidos que bajo la forma de complejos con
el MHC se expresan en la superficie celular, lo que promueve la interaccin con el
linfocito T.
El proceso que sufre el antgeno para ser presentado a las clulas inmunes. Se
considera la presentacin de pptidos, tanto extracelulares, como intracelulares y
antgenos lipdicos.

Los linfocitos T son capaces de reconocer pptidos y no otras molculas y que


estos pptidos son capaces de unirse al MHC. A diferencia de la respuesta
humoral, loslinfocitos slo son capaces de reconocer determinantes antignicos
consistentes en secuencias peptdicas en forma lineal, ya que no reconocen a los
antgenos conformacionales. La sola presencia del antgeno no es suficiente para
la activacin del linfocito, sino que depende de que el antgeno est unido a un
MHC, as como la presencia de molculas coestimuladoras para formar la sinapsis
inmunolgica.

Dentro de este proceso tenemos dos vas principales para la presentacin de


pptidos que se han nombrado de acuerdo al producto del MHC, como vas del
MHC I y va del MHC II, asocindose de forma comn a antgenos intracelulares y
extracelulares respectivamente, por lo que es importante recordar las diferencias
entre estos dos productos:

VA DEL MHC I
En esta va se inicia con protenas intracelulares presentes en el citoplasma, tanto
protenas procesadas por la misma clula en su metabolismo habitual, protenas
producto de oncogenes, o productos de la sntesis viral en clulas infectadas o de
bacterias intracelulares. Dentro de la clula se encuentra un sistema de marcaje y
sealizacin, similar a la fosforilacin, en base a una protena llamada ubiquitina;
en este caso la ubiquitina se une a secuencias especficas de pptidos y servir
como marca para el siguiente paso.

Una estructura importante en el siguiente paso es un complejo enzimtico


multiproteico de aproximadamente 700 kD, de forma cilndrica llamado
proteasoma. El proteasoma se compone por dos anillos internos y dos externos
con 7 subunidades cada uno, tres de ellas son sitios crticos para la protelisis,
algunas de estas subunidades son codificadas en la regin del MHC. Cuando
alguna de las protenas marcadas por ubiquitina ingresa al proteasoma, se
degrada a la protena en los sitios marcados por la ubiquitina, dejando slo
residuos peptdicos, estos residuos son bombeados de forma activa por unas
protenas asociadas al retculo endoplsmico, las protenas asociadas a transporte
(TAP 1 y TAP 2).

Dentro del retculo endoplsmico se sintetizan la cadena del MHC I y la 2


microglobulina, una vez ensamblado es posible la unin con el antgeno y la
formacin del complejo MHC I/antgeno. Este complejo es transportado mediante
trfico de vescula desde el retculo endoplsmico, pasando al aparato de Golgi y
luego a la superficie de la membrana, donde se fusionar y quedar a disposicin
para su reconocimiento por los linfocitos CD8. En algunas ocasiones es posible
que antgenos extracelulares escapen inicialmente de los fagosomas hacia el
citoplasma, una vez ah son susceptibles del sistema de ubiquitinas y del
proteasoma, pasando al sistema de presentacin del MHC I, a este proceso se
denomina presentacin cruzada. Tambin se ha postulado que los antgenos
polisacridos son presentados por la va del MHC II.
En cuanto a la presentacin de cidos grasos, glicolpidos, lipopptidos, se
presentan en molculas CD1, esta protena est formada por una cadena alfa con
3 dominios y asociada de una 2 microglobulina, esta molcula tambin se forma en
el retculo endoplsmico, junto a molculas chaperonas. Los CD1son una familia
teniendo variantes denominadas CD1a, CD1b, CD1c y CD1d. Se clasifican en dos
grupos, el grupo 1 est formado por CD1a, CD1b y CD1c y el grupo 2 slo incluye
a CD1d. CD1 del grupo 1 son partculas que pueden presentar a linfocitos T CD4+,
CD8+, y CD4-CD8-, TCR. Mientras que el grupo 2 presenta a clulas NKT.
A diferencia del MHC I y II, la unin del antgeno puede ocurrir tanto intra como
extracelular. En el caso de la presentacin intracelular, se requiere el transporte
del antgeno, en este caso dadas las caractersticas qumicas del lpido se propone
un transportador al interior de la clula, los cuales an se desconocen. En el caso
de bacterias completas, como seran micobacterias, pueden participar el CD 209,
receptores tipo basurero, receptores de manosa o receptores de complemento
(CR3).
Otro mecanismo propuesto es mediante la recoleccin de antgenos provenientes
de clulas apoptticas, vctimas de la infeccin por micobacterias, ya que pueden
contener en su interior lpidos de la bacteria que son fagocitados por macrfagos o
clulas dendrticas. Una ruta ms est representada por la formacin de exosomas
a partir de clulas vivas afectadas y que pueden ser internalizadas por clulas
dendrticas.

Una vez dentro, el antgeno se propone que hay una degradacin parcial en
endosomas tardos, probablemente esto sea por asociacin a un pH especfico
necesario para la activacin enzimtica, aunque no se conocen las enzimas que
participaran en el proceso. Al igual que con el MHC, de forma paralela se forma el
complejo de CD1 acompaado de sus chaperonas en el retculo endoplsmico
rugoso, a partir de aqu puede seguir diferentes vas, una parte ser protegida por
una cadena invariable y se transportar hasta los endosomas tardos, donde se
unir con el lpido. Otra parte de CD1 an no es claro si puede unirse dentro del
mismo retculo endoplsmico al lpido.
Tambin se han descrito en los endosomas tempranos la presencia de protenas
transportadoras de lpidos (LTPS). Una parte importante del transporte de lpidos
ha sido la comprobacin del trfico de vesculas que permite la recirculacin de las
molculas CD1 de acuerdo a cargas y al apoyo para su movimiento de LTPs.
Finalmente, por cualquiera de sus vas logran presentarse los lpidos en la
superficie de las clulas presentadoras y ser reconocidos por linfocitos como ya
hemos mencionado.
En conclusin, podemos mencionar que el proceso de presentacin del antgeno
es muy complejo y que asegura el reconocimiento de lo propio y no propio
mediante la prueba de antgenos externos como de los propios componentes
celulares, siendo esto indispensable para el correcto funcionamiento del sistema
inmune y de la inmunidad especfica, de pendiendo del bagaje gentico, la
respuesta inmune montada puede ser de tolerancia, o bien de activacin de la
respuesta inmune especfica si la molcula presentada es reconocida por linfocitos
y de esta manera conferir proteccin contra infecciones, tumores, y en otros casos
de respuestas que llevan a alergia o autoinmunidad.

Presentacin cruzada

Antgenos exgenos son presentados en un contexto MHC-I

Por qu ocurre?

Clulas que la ejercen:

Antgenos:

Qu dispara la captura de antgenos?

VA DEL MHC II El primer paso es la captacin del antgeno y su internalizacin a


la clula. Durante este proceso se reconoce a la protena extraa a travs de
diversos receptores, en el caso de microorganismos extracelulares se realizar a

travs del reconocimiento de PAMs, la unin de estas molculas a su receptor


activan el proceso intracelular que da modificaciones en el citoesqueleto y
promueven la formacin de una vescula a partir de la membrana citoplasmtica
llamada fagosomas, hay algunos estudios que afirman que la misma sealizacin
distingue a la vescula recin formada para un trfico vesicular predeterminado, a
la activacin de bombas de protones que acidifican el contenido de la vescula y
que lleva posteriormente a la fusin con el lisosoma.
Los cimgenos al encontrarse en medio cido se convierten en enzimas activas,
de las ms importantes que podemos mencionar en este proceso se encuentran
las catepsinas, que son enzimas proteolticas (tiol-aspatil proteasas). Al mismo
tiempo la clula produce las cadenas proteicas y polimrficas necesarias para
formar el MHC II, adems de unas molculas nodrizas, las calnexinas, que asisten
a las enzimas y la cadena invariable (I) que es una protena compuesta por 3
unidades, la cual funciona como un protector para el sitio de unin al antgeno
mientras es transportado por el retculo endoplsmico, el aparato de Golgi y la
formacin de una vescula.

El fagosoma se une a la vescula que contiene al MHC II, la catepsina afecta


tambin a la cadena invariable, degradndola, y dejando slo un residuo de 24
aminocidos en el sitio de unin del antgeno llamado pptido invariable ligado a

CPH (CLIP); este pptido ser desplazado gracias a la ayuda del HLADM o por
HLA-DO en el caso de linfocitos B, permitiendo finalmente la unin del pptido al
sitio de unin, una vez unido el complejo antgeno y MHC, se desplaza la vescula
hacia la superficie de la membrana, con la cual se fusiona, dando as lugar a la
presentacin del antgeno, el cual podr ser reconocido por linfocitos CD4.

REFERENCIA BIBLIOGRFICA

Procesamiento y presentacin de antgeno UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE


BADRE GROHMANN FACULTAD DE CIENCIAS ESCUELA ACADMICO
PROFESIONAL DE BIOLOGIA Y MICROBIOLOGIA POR: ENRIQUE JOSE CHIPANA
TELLERIA
Abul K. Abbas INMUNOLOGA CELULAR Y MOLECULAR. 6 Edicion.
http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_presentadora_de_ant%C3%ADgeno
http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/inmunologia/tema06/etexto06.htm
http://www.med.unne.edu.ar/catedras/bioquimica/hla.htm
http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/inmunologia/tema06/etexto06.htm

ANEXOS

Tabla de diferencias entre las APC

http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_presentadora_de_ant%C3%ADgeno
http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/inmunologia/tema06/etexto06.htm
http://www.slideshare.net/enrichiptell/procesamiento-y-presentacion-del-antigeno-2111760
http://www.ugr.es/~eianez/inmuno/cap_09.htm

Fig. Las molculas MHC de la clase I presentan pptidos endgenos (A) mientras que las de
clase II presentan pptidos que proceden del exterior

Fig. Funciones del HLA-DM y de las cadenas invariables asociadas a molculas de la


clase II del MHC. Las molculas de clase II unidas a una cadena invariable, o CLIP,
son transportadas al interior de vesculas, donde el CLIP es eliminado por la accin de
molculas DM. A continuacin, los pptidos antignicos generados en las vesculas
pueden unirse a las molculas de clase II. Otra protena de tipo clase II, denominada
HLA-DO, podra regular la eliminacin del CLIP catalizada por la molcula DM. CIIV,
vescula de clase II; CLIP, pptido de cadena invariable asociado a clase II; RE, retculo
endoplsmico; Li, cadena invariable; MHC, complejo principal de histocompatibilidad;
MIIC, compartimento de clase II del MHC.

Fig. Vas de procesamiento y presentacin de antgeno. En la va del CPH de la clase II


(recuadro superior), los antgenos protenicos extracelulares se endocitan en vesculas
en las que se procesan los antgeno y los pptidos se unen a las molculas del CPH de
la clase II. En la va del CPH de la clase I (recuadro inferior), los antgenos de las
protenas citoslicas son procesados mediante proteasomas y los pptidos se
transportan hacia el reticulo endoplasmtico, donde se unen a molculas del CPH de la
clase I.

Fig. Va del CPH de la clase I de presentacin del antgeno

Fig. Tabla de las caractersticas comparativas de las vas del CPH de las clases I y II de
procesamiento y presentacin de los antgenos

Presentacin de antgenos