Tugas Biokimia Lanjut

PAPER

STRUKTUR, AKTIVITAS KATALITIK DAN INHIBISI

PADA DEKARBOKSILASE MAMALIA DOPA
Mariarita Bertoldi*

Oleh :
HERIC NOVRIAN JE
1420412006
KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

PASCASARJANA

UNIVERSITAS ANDALAS
2014

Abstrak

Mamalia Dopa dekarboksilase berfungsi untuk mengkatalisis L -Dopa

dan L -5-hydroxytryptophan sebagai dopa-tambang dan serotonin. Keduanya
secara biologis merupakan neurotransmitter yang aktif. Bahkan perubahan
konsentrasi dopamin merupakan penyebab penyakit neurodegenerative seperti
Parkinson. Sifat kimia enzim ini berdasarkan pada fitur-fitur koenzim piridoksal
5 0 -phosphate (PLP). Selain dekarboksilasi Kofaktor ini sangat reaktif dan
mampu melakukan multi-tions reaksi, seperti deaminasi oksidatif, setengah
transaminasi

dan

Pictet-Spengler

siklisasi. Resolusi

dari

strukturnya

menunjukkan bahwa enzim memiliki pengaturan dimer dan memberikan dasar

molekuler untuk mengidentifikasi residu yang terlibat dalam setiap aktivitas
katalitik. Informasi ini telah digabungkan dengan studi kinetik dalam kondisi
mapan dan pra-kondisi mapan sebagai fungsi pH untuk menjelaskan residu
untuk katalisis. Sebuah upaya dalam penelitian DDC dikhususkan untuk
merancang efi-sien dan inhibitor spesifik selain yang telah digunakan dalam
terapi yang tidak sangat spesifik dan bertanggung jawab atas efek samping yang
diberikan oleh pendekatan klinis baik penyakit Parkinson atau amino
kekurangan asam dekarboksilase aromatik

PENDAHULUAN

Dopa dekarboksilase (DDC) pertama kali diidentifikasi pada tahun 1938 pada
jaringan ginjal mamalia. DDC katalisis yang penting dalam biosintesis epinefrin. Enzim DDC
selain mengalami dekarboksilasi L -Dopa dopamin, strukturnya dapat berupa trans-L -5hydroxytryptophan serotonin, meskipun kurang efisien, asam amino aromatik lainnya seperti
p-tirosin, tryp-Tophan dan fenilalanin ke amina yang sesuai (jejak aro-matic amina). Untuk
alasan

ini,

DDC

(AADC). Perannya

juga

dijelaska

adalah

untuk

sebagai

aromatik

menyediakan

dekarboksilase

organisme

dengan

asam

amino

neurotransmitter

penting. Meskipun spesifisitas substrat rendah terhadap asam amino aromatik yang berbeda,
DDC memainkan peran dalam mengendalikan tingkat amina aromatik. Dopamin dan
serotonin bertindak sebagai neuro-modulator dan dapat mempengaruhi suasana hati
(regmodulasi), homeostasis kognitif,fisiologis serta koordinasi motorik. Tidak hanya sintesis,
tetapi juga metabolisme dan penyerapan terhubung sangat kuat. Deplesi serotonin baik untuk
beberapa bentuk depresi berat, kecemasan dan aggres-sion. Deplesi dopamin baik juga untuk
kurangnya motivasi dan anhedonia. Jika

ada ketidakseimbangan dengan salah satu,

merupakan sebagai akibat dari sifat saling tergantung mereka. Menyeimbangkan serotonin,
dopamin, dan amina biogenik lain seperti norepinephrine adalah untuk mengobati berbagai
gangguan mood.
Kekurangan DDC sintesis, karena non-sense atau mutasi frameshift, atau perubahan
dalam aktivitasnya. Karena substitusi asam amino tunggal menghasilkan produk gen yang
menyimpang, menyebabkan kondisi pato-logis terkait dengan gangguan kognitif dan
homeostasis fisiologis serta koordinasi motorik dan gangguan neuropsy-chiatric . Kekurangan
DDC adalah gangguan resesif langka karena mutasi pada gen DDC dan ketidakmampuan
untuk

mensintesis

dopamine

dan

serotonin. Hal

ini

menyebabkan

parah

delay

mengembangkannya. Sebuah tinjauan komprehensif varian dikenal dan struktur mereka

mungkin berfungsi hubungan yang diberikan.
Selain itu, DDC tidak dianggap membatasi laju di fisio-logis katekolamin atau
indoleamines sintesis, tetapi menjadi tingkat di beberapa tempat patologis yang berhubungan
dengan produksi dopamin menyimpang, seperti penyakit Parkinson (PD). Sindrom bipolar
Secara khusus, PD adalah gangguan neurologis progresif kronis yang ditandai dengan tremor,
bradikinesia, kekakuan dan ketidakstabilan postural. Simptons ini disebabkan oleh rendahnya

tingkat dopamin yang dihasilkan dari degenerasi sel-sel yang memproduksi dopamin di
substansia nigra otak. DDC tersebar luas pada mamalia, serangga dan tanaman. Dalam
mamalia, enzim ditemukan dalam jaringan saraf dan non-saraf. Sementara kehadirannya di
sel-sel saraf ini sejalan dengan aktivitas dalam neuro-modulator sintesis, lebih sulit untuk
menjelaskan pada jaringan lain, misalnya ginjal, di mana enzim sangat diperlukan. Pada
serangga, selain tyramine dan octopa-tambang, hormon serangga besar, juga dopamin dan
serotonin disintesis oleh DDC memainkan peran penting dalam perilaku dan devel-ngunan
serangga dan merupakan prekursor senyawa contrib-uting untuk sclerotization kutikula.
Akhirnya, pada tanaman terdapat dua bentuk-substrat spesifik DDC dekarboksilase tirosin
dan triptofan dekarboksilase yang berperan terkait dengan sintesis hormon tanaman dan
pematangan tanaman . Selain itu sayuran DDC juga mampu menghasilkan alkaloid aromatik
berguna sebagai pra-kursor molekul aktif farmasi.
Mamalia

DDC

telah

dimurnikan

dari

sumber

yang

berbeda

babi, tikus,dan manusia, meskipun yang terbaik adalah dipelajari enzim babi ginjal. Ketiga
DDC dikloning dan diekspresikan dalam Escherichia coli dan kinetik, studi mekanistik dan
inhibisi lanjut dilakukan. Manusia versus babi DDC saham 90% identitas urutan dengan 95%
positif (persentase ini merupakan fraksi residu yang baik identik atau serupa), manusia
dibandingkan saham enzim tikus 89% identitas urutan dengan 96% positif. Dengan demikian,
tiga enzim sangat erat terkait dan residu asam amino esensial dilestarikan.
DDC milik sebuah-keluarga dari aminotransferase (Lipat-Tipe I), khususnya untuk
subkelompok II dari -decarboxylases yang juga dekarboksilase glutamat dan histidin
dekarboksilase menjadi panjang. Kimia dan mekanisme reaksi basis mereka pada fitur kimia
koenzim: piridoksal 5 0 -phosphate (PLP). Selain itu, mereka berbagi fitur umum, seperti
arsitektur situs aktif sim-ILAR dan dilestarikan amino esensial residu asam. Resolusi struktur
histidin decarboxyl-ase dengan adanya inhibitor histidin metil ester mengungkapkan situs
konformasi aktif mirip dengan DDC di kompleks dengan carbidopa kecuali satu residu, yaitu
Ser-354, histidin dekarboksilase digantikan oleh glisin di posisi yang sama di
DDC. Menariknya, para S354G varian histi-dine dekarboksilase menyajikan penurunan
aktivitas terhadap histi-dine dan peningkatan aktivitas ke arah L -Dopa . Selain itu, kedua
decarboxylases memiliki loop ponsel dianggap penting untuk katalisis mengandung residu
tirosin (Tyr-332 di DDC dan Tyr-334 di histidin dekarboksilase) memainkan peran penting
dalam aktivitas kucing-alytic.
Sampai saat ini, banyak pekerjaan yang telah dilaporkan pada DDC, meskipunpandangan kembali ditemukan dalam literatur terutama difokuskan pada perannya dalam PD

atau keadaan patologis lain yang berkaitan dengan enzim kekurangan. Beberapa makalah,
pada kenyataannya, menghadapi kehadiran atau kelimpahan DDC dalam berbagai bidang
sistem saraf pusat dan jenis sel saraf lainnya. Baris lain penelitian difokuskan pada pencarian
inhibi-tor dengan tujuan melambat, setidaknya, perkembangan PD.Akhirnya, beberapa ulasan
yang terlibat dalam struktur berfungsi rela-tionship DDC, sementara banyak artikel penelitian
tentang katalisis dan mekanisme yang ada dan tersebar luas dalam literatur. Studi tentang
biokimia DDC menunjuk ke pendekatan molekuler layak karena bisa membantu mengisi
kesenjangan antara enzimatik fea-membangun struktur dan menyebabkan-to-efek hubungan
penyakit.
Dalam ulasan ini, update pada DDC kinetik dan mekanistik pejantan-ies akan
diberikan serta korelasi kemungkinan fitur DDCs mamalia dengan fungsi mereka.
Penentu struktural mamalia DDC. Sampai saat ini, struktur asli holo babi ginjal DDC, ligan
terikat holo DDC babi ginjal dan apo DDC manusia telah dipecahkan. Secara keseluruhan
struktur ini berkontribusi untuk memberikan gambaran organisasi situs aktif. Dalam ketiga
kasus, enzim adalah dimer struc-tanian dan fungsional dengan susunan khas Lipat-Tipe I
PLP-enzim. Studi struktural sebelumnya superimposisi urutan keseluruhan dan struktur DDC
dengan aspartat amino-transferase, bakteri dan manusia glutamat dekarboksilase,dan histidin
dekarboksilase mengungkapkan yang residu diperlukan untuk menjamin kegiatan katalitik
fundamental dan mana yang spesifik untuk setiap spesies enzimatik. Pengetahuan tentang
dasar molekul ini merupakan hal yang fundamental dalam bertujuan farmakologi berorientasi
pada enzim tertentu.
Informasi yang diperoleh menunjukkan bahwa: (i) organisasi celah mengikat PLP
( Gambar 1) dimediasi oleh beberapa residu con-dilayani penting: Lys-303 adalah Schiff
dasar lisin residu yang kovalen melekat kelompok formil dari PLP, Asp-271 membuat
interaksi jembatan garam dengan piridin nitrogen terprotonasi dari PLP, his 192 adalah piridin
susun residu yang sandwich cincin aro-matic PLP, jaringan yang luas dari residu, yaitu Ser147, Ser-149, Asn-300, His-302 dan Phe-309, memberikan kontribusi untuk hidrogen
interaksi dengan mengikat PLP dan terus di tempat kelompok fosfat dari kofaktor
tersebut; (ii) lokalisasi cincin katekol ligan (carbidopa) terikat DDC mengungkapkan bahwa
residu Ile-101 0 dan Phe-103 0 (dari subunit tetangga), dan Trp-71, Tyr-79, Phe-80, Thr-82
terlibat dalam substrat mengikat dan kofaktor stabilisasi, akhirnya Thr-246, yang menghadap
wajah yang berlawanan dari cincin PLP, disarankan untuk berperan dalam mekanisme
katalitik(iii) hamparan terdiri residu 327-354 dan 328-339 yang hilang di kedua apo dan babi
struktur holo manusia, masing-masing, menyoroti kehadiran loop fleksibel yang mengandung

residu dilestarikan penting, Tyr-332, kemungkinan berhubungan dengan cata-litik protonasi

quinonoid langkah ( skema1, lihat gambar di bawah) dan konsensus sensitif protease.
Relevansi sebagian besar residu yang disebutkan di atas muncul juga dari analisis
varian mutasi yang mengarah ke AADC defi-siensi (OMIM # 608643), sebuah warisan
langka neuro-metabolik dis-kemudahan. Mutasi titik dalam residu berinteraksi secara
langsung atau tidak langsung dengan PLP atau mikro nya (G102S, S147R, S250F, A275T
F309L) menyebabkan dimodifikasi PLP mengikat seperti yang diharapkan dengan inspeksi
3D. Selain itu, banyak laporan studi mutagenesis situs-diarahkan menguatkan proposal maju
pada peran berbagai residu PLP. Menariknya, dapat diamati bahwa organisasi situs active
berbeda dalam apo dibandingkan dengan bentuk holo, untuk berada dalam konformasi
terbuka sehubungan dengan

tertutup. Ketika PLP ditambahkan, sebuah apo untuk Holo

transisi terjadi, menentukan penataan daerah yang mengandung residu 66-84, yang penting
untuk lokasi rantai substrat sisi aromatik, dan mengarah ke gerakan PLP-mengikat Lys-303
dengan 6 .
Subunit dimer mendekati satu sama lain dengan memindahkan 20 dan menutup
situs aktif. Gerakan ini di-volves seluruh struktur membuat Trp-304, Phe-80 dan Tyr-274
distabilkan oleh interaksi susun aromatik di antara mereka. Khususnya, Tyr-274 dalam bentuk
holo adalah hidrogen terikat pada-Nya-302 yang, pada gilirannya, berinteraksi dengan Tyr-79
(lihat di atas). Jaringan ini hadir dalam bentuk holo rentan terhadap substrat mengikat,
sementara itu tidak ada dalam bentuk apo. Konsekuensi biologis terbuka-tertutup perubahan
konformasi ini luar biasa bisa ada beberapa: di satu sisi, akses selektif PLP ke apoDDC bisa
didorong di-tidak langsung oleh kinase piridoksal sejak melaporkan bahwa con-kendala sterik
yang saling melengkapi dengan celah yang terbuka apo DDC, di sisi lain, konformasi enzim
terbuka mudah terdegradasi oleh protease, menunjukkan bahwa tingkat konsentrasi
apoenzyme

Fig. 1. Active site of carbiDopa-complexed DDC [26]. The cofactor-ligand complex is ball-and-stick in CPK color, the two chains of DDC are green and yellow. Labels
refer to position of a-carbon of each residue. The image was rendered with PyMol. (For interpretation of the references to colour in this figure legend, the reader is referred to
the web version of this article.)

Mekanisme reaksi
Hal ini diketahui bahwa enzim PLP dapat mengkatalisis, selain reaksi
utama mereka, beberapa reaksi samping yang terjadi sebagai '' kesalahan ''
karena reaktivitas kimia kofaktor. Struktural memerlukan-legal dari bagian
protein yang diselenggarakan untuk mengarahkan reaksi yang-tion hanya
melalui salah satu jalur yang mungkin tetapi tidak kontrol yang tepat di atasnya,
karena PLP sangat reaktif. Oleh karena itu reaksi samping adalah karakter
umum dari enzim PLP dan ini kadang-kadang bisa menjadi fisiologis

signifikan. DDC tidak terkecuali, karena selain reaksi dekarboksilasi, ia mampu

mengkatalisis beberapa reaksi samping.

Dekarboksilasi L -aromatic asam amino

Reaksi utama dikatalisasi oleh DDC adalah dekarboksilasi dari aromatik
asam amino L -Dopa dan L -5-hydroxytryptophan.

Yang berhubungan dengan reaktivitas PLP (Skema 1). Bentuk asli dari enzim yang ada
sebagai aldimine internal PLP dengan Lys-303 (I). Setelah substrat mengikat, aldimine
internal yang mengkonversi menjadi aldimine eksternal (II) itu, menurut Dunathan
hypopthesis. Menempatkan kelompok karboksi dalam posisi penuh semangat menguntungkan
untuk dekarboksilasi. Berikutnya quinonoid menengah (III) kemudian terprotonasi pada akarbon untuk memberikan amina yang sesuai (IV) yang meninggalkan situs aktif dan siklus
katalitik lain bisa mulai lagi.
Kinetik analisis tentang mekanisme ini dilaksanakan dengan babi, tikus dan enzim
manusia . Tujuan dari penyelidikan ini adalah untuk mengidentifikasi residu (s) bertanggung
jawab untuk katalisis atau mengikat. Sebuah penelitian mekanistik diterbitkan pada tahun
1983 pada enzim babi ginjal menggunakan L dan D-asam amino sebagai ligan berguna untuk
membedah sifat-sifat aldimine exter-nal (harus diingat bahwa menurut Dunathan hipotesis Dasam -amino menempatkan atom hidrogen perpendic ke sistem koenzim-imin, bukannya
karboksilat sebagai L-isomer, sehingga aldimines eksternal dengan D-analog yang Theoret-

turun tajam '' aktif '', yang dapat menjadi diproses lebih lanjut, dan Repre-mengirim model
yang berguna untuk membedah eksternal Schiff sifat dasar) dan untuk mengukur parameter
katalitik (Tabel 1 dan 2).
Secara keseluruhan, penelitian ini mengusulkan adanya dua bentuk aldimines
eksternal, salah satu menyerap pada 420 nm dan yang lainnya di 390 nm. Ini dikaitkan dengan
bentuk 40N-terprotonasi dan 40N-tidak terprotonasi dari basis Schiff antara substrat dan PLP.
Sebuah analisis spektrofotometri-scopic dan kinetik sama enzim tikus memungkinkan
measurements tikus enzim parameter kinetik dan menyarankan bahwa aldimine internal yang
ada sebagai campuran ketoenamine dan enolimine Tautomer. Kemudian pada tahun 1999
Hayashi melakukan analisis pH kinetik rinci reaksi enzim tikus dengan L-Dopa [39] dan
menyarankan bahwa: (i) 430 dan 380 nm band, ditampilkan dalam spektrum pada berbagai
nilai pH, harus dikaitkan dengan Michaelis kompleks dan untuk aldimine eksternal 4N0terprotonasi, masing-masing, dan (ii) substrat L-Dopa istimewa mengikat tidak terprotonasi
ke dasar Schiff internal yang 40N-terprotonasi. Parameter ki-netic tikus DDC dilaporkan
dalam Tabel 1. baru-baru ini inves-tigation [20] pada spektroskopi dan studi kinetik dari
enzim manusia sebagai fungsi pH menyebabkan hasil sebagai berikut. Setelah sub-strategic
mengikat 420 nm pergeseran band untuk 390 nm meningkatkan pH val-UES. Transisi ini
ditandai dengan nilai pKa 6,4.

Yang serupa dengan yang diamati di kedua kcat dan kcat / profil Km. Ini ionisasi yang
berkaitan dengan katalitik. Kedua spesies menyerap demikian dapat dikaitkan dengan Schiff
basis 40N-terprotonasi dan 40N-tidak terprotonasi, masing-masing . Nilai pKa lain diperoleh
di sisi dasar profil kcat dan pada Kd (PLP) profil bisa menyarankan keterlibatan beberapa
kelompok kofaktor, misalnya ester 50-fosfat, seperti yang dilaporkan di tempat lain. Tugas
ini, bagaimanapun, adalah tentatif, karena tidak dapat dikesampingkan bahwa residu yang
terlibat dalam katalisis bertanggung jawab atas pKa ini mengingat bahwa ini ditemukan juga
pada profil kcat. Sebuah calon yang baik diusulkan untuk menjadi Tyr-332. Bahkan,
informasi yang berguna untuk mengidentifikasi beberapa residu katalis penting dalam
dekarboksilasi datang dari sebuah penelitian tentang mutasi Tyr-332 . Dalam tulisan itu, itu
pro-berpose bahwa residu ini bertanggung jawab untuk reprotonation dari qui-nonoid
menengah yang dihasilkan pada CO2 rilis dari kompleks enzim-substrat. Khususnya, varian
Y332F switch spesifisitas reaksinya dari generasi amina ke aldehida genera-tion melakukan
sebuah deaminasi oksidatif L-Dopa (lihat di bawah).

Anehnya, dalam kondisi anaerobik DDC mengkatalisis setengah transaminasi

substrat nya deaminasi oksidatif. Penyelidikan tentang topik ini menyebabkan usulan model
situs aktif untuk DDC fleksibel untuk berbagai substrat ditampung, termasuk dioksigen.
Tyr-332 ke Phe varian ditemukan mengkatalisis deaminasi oksidatif L-Dopa, mengubah
spesifisitas reaksi DDC dari dekarboksilasi untuk deaminasi oksidatif. Atas dasar ini residu
ini diangkat sebagai melakukan quinonoid langkah proton-asi selama reaksi dekarboksilasi
(langkah 3 dalam Skema 1). Ketika Tyr-332 tidak ada, quinonoid bereaksi dengan dioksigen
timbal-ing ke Dopa oksidasi.
Penyelidikan pH deaminasi oksidatif reaksi re-vealed kehadiran nilai pKa 7,8 pada
profil kcat , nilai yang sama ditemukan dalam L-Dopa profil dekarboksilasi, sehingga
mengekang-memaksa atribusi terhadap koenzim fosfat kelompok ester atau residu penting
untuk kedua kegiatan. Sebuah pKa sekitar 6,4 ditemukan untuk konversi dari 420-384 nm
band yang timbul setelah penambahan serotonin ke DDC meningkatkan nilai pH. Nilai ini
mirip dengan yang ditemukan dalam transisi yang sama dengan L-Dopa (lihat di atas) dan ini
menguatkan atribusi dari pKa untuk ionisasi 40N-pro-tonated untuk aldimine eksternal 40Ntidak terprotonasi.
Reaktivitas terhadap dioksigen tidak terbatas DDC sejak decarboxylases lain seperti
glutamat dan dekarboksilase ornithine mampu melakukan deaminasi oksidatif reaksi mereka
substrat a-metil [36]. Pada tumbuhan, telah dilaporkan adanya PLP-enzim yang mampu
decarboxylating fenilalanin [47,48] untuk phenylacetaldehyde melalui reaksi deaminasi
oksidatif. Aldehida aromatik ini kemudian dikurangi menjadi phenylethylalcohol; kedua
senyawa adalah molekul yang mudah menguap dengan bau mawar seperti / bunga khas yang
digunakan dalam industri kosmetik dan aroma [49]. Dalam Drosophila jalur langsung dari LDopa ke phenylacetaldehyde telah kembali cently dilaporkan dan enzim yang bertanggung
jawab untuk kegiatan ini ditandai [14]. Ini saham identitas urutan tinggi dengan DDC manusia
dan mampu melakukan deaminasi oksidatif L-Dopa. Produk aldehydic disarankan untuk
membentuk silang jembatan antara kelompok amino bebas protein untuk membentuk kutikula
serangga fleksibel [14]. Dengan demikian, reaksi yang dijelaskan dalam mamalia DDC bisa
menjadi kegiatan yang lebih umum di antara PLP-enzim. Terutama, decarboxylases oksidatif
tanaman memiliki Tyr-332 (menurut DDC penomoran) untuk substitusi Phe yang mencegah
reprotonation setelah dekarboksilasi.

Half-transaminasi
Akhirnya, DDC mampu melakukan setengah transaminasi asam D-aro-matic amino [
serta amina aromatik, kondisi anaerob un-der terakhir. Reaksi ini baik ditinjau dalam dan
tidak ada kemajuan lebih lanjut dibuat dalam beberapa tahun terakhir. Mekanis (Skema 3a),
substrat setengah transaminasi membentuk aldimine eksternal (I) yang kemudian
terdeprotonasinya untuk memberikan quinonoid menengah (II). Hal ini reprotonated pada 40karbon untuk memberikan ketimine sesuai yang menghidrolisis menjadi-keto asam dan
kofaktor PLP mengkonversi ke bentuk PMP yang memisahkan dari enzim, meninggalkannya
tidak aktif dalam bentuk apo. Diukur konstan Tingkat reaksi ini adalah 0,124 min_1 dan
0.019 min_1 untuk D-5-hydroxytryptophan dan D-Dopa, masing-masing. The fisio-logis
peran reaksi ini tidak diketahui.
Seiring dengan setengah-transaminasi, sebuah Pictet-Spengler reaksi yang-tion
terjadi yang mengarah ke aduk substrat-koenzim siklik yang ireversibel menginaktivasi enzim
[34]. Hal ini muncul, mungkin, dengan kontrol yang tidak efisien PLP reaktivitas (Skema 3b)
atau penutupan unproduc-tive dari situs aktif. Dalam banyak varian residu milik-ing ke PLPmengikat sumbing, pada kenyataannya, kegiatan siklisasi ini tinggi, karena lingkungan mikro
koenzim diubah dan tidak kontrol reaksi tidak-yakin lengkap.

Studi Inhibisi
Pencarian inhibitor DDC mulai lama. DDC adalah terlibat dalam penyakit Parkinson
karena tingkat dopamin rendah penyakit akibat degenerasi neuron memproduksinya. Dengan
demikian, terapi yang umum diadopsi didasarkan pada administrasi L-Dopa dan menyiratkan
juga penghambat perifer DDC yang seharusnya menguras obat yang diberikan. Inhibitor ini
tidak harus menyeberangi penghalang darah-otak. Carbidopa atau benserazide (dan referensi
ada-in) adalah molekul yang berhubungan dengan pengobatan dengan L-Dopa. Kimia mereka
didasarkan pada kelompok hidrazin yang membentuk turunan hydra-zona dengan PLP,
sehingga menghalangi dan menonaktifkan en-zyme. Dengan demikian, jumlah yang lebih
besar dari L-Dopa bisa mencapai otak di mana itu bisa berubah menjadi dopamin ameliorating
gejala penyakit. Struktur kompleks DDC-carbidopa diselesaikan mengungkapkan bahwa Thr82 yang terlibat dalam 40-hidroksil cincin katekol mengikat

Banyak senyawa lain dilaporkan menghambat DDC: (i) yang bertindak melalui
mekanisme bunuh diri dengan alkylating enzim: a-klorometil dan-fluoromethyl turunan Dopa
(ditinjau dalam ), a-vinylDopa dan-acetylenic Dopa ; (ii) phospho-pyridoxyl asam amino
aromatik Schiff dasar analog [51] dan (iii) analog substrat, seperti polifenol teh hija . Nilai Kd
mereka di kisaran 10_2 untuk 10_6 M. Selain itu, 3,4 dihydroxypheny-lacetone, produk dari
deaminasi oksidatif dari-metildopa, berperilaku sebagai situs diarahkan label afinitas,
sementara serotonin (dan / atau yang aldehida) sebagai berbasis mekanisme inhibitor. Lat-ter
adalah senyawa karbonil yang dihasilkan oleh oksidatif deam-ination dikatalisis oleh DDC,
sehingga menunjukkan peran modulator reaksi sisi ini.
Fitur negatif umum dari semua senyawa ini adalah bahwa mereka menargetkan
kofaktor PLP dan dengan demikian tidak selektif untuk DDC. Sebaliknya, mereka ireversibel
mengikat PLP gratis dan PLP-enzim lain.

Baru-baru ini, sebuah pendekatan baru untuk desain obat yang efisien diterapkan: a
skrining virtual inhibitor DDC diduga dilakukan. Analisis ini didukung oleh analisis in vitro .
Senyawa yang paling aktif digunakan sebagai inti untuk mengembangkan modifica-tions
kimia lainnya untuk meningkatkan sifat penghambatan. Dengan gabungan inves-tigation,
inhibitor kompetitif reversibel yang menarik, Amb2470350, ditemukan dengan Ki 500 nM
(Gbr. 3). Ini bisa merupakan molekul baru untuk pengembangan DDC inhibitor tertentu.
Senyawa diperkirakan tidak melewati sawar darah otak

dan menyajikan beberapa fitur

menarik yang bisa menjadi titik awal untuk pengembangan hit-to-lead obat effec-tive.
Bahkan, tidak mengandung kelompok hydrazinic, tidak mengikat PLP gratis dan merupakan
inhibitor reversibel DDC.
Secara keseluruhan, DDC memberikan contoh yang sangat baik dari PLP tinggi
reactiv-ity hanya sebagian dikendalikan atau diarahkan oleh bagian protein enzim. Namun,
lebar substrat dan reaksi spesifisitas dapat mewakili kesempatan untuk mengerahkan
semacam regulasi sub-strates / produk tingkat. Banyak pekerjaan yang masih harus dilakukan
pada ini '' pleiotropic '' menarik protein.

DAFTAR PUSTAKA

[1]

K.M. Crisp, K.A. Mesce, J. Exp. Biol. 207 (2004) 45354542.

[2]

O. Kiehn, O. Kjaerulff, J. Neurophysiol. 75 (1996) 14721482.

[3]

E. Marder, J.S. Eisen, J. Neurophysiol. 51 (1984) 13621374.

[4]

J. Schotland, O. Shupliakov, M. Wikstrom, L. Brodin, M. Srinivasan, Z.B. You, M.

Herrera-Marschitz, W. Zhang, T. Hokfelt, S. Grillner, Nature 374 (1995) 266 268.

[5] J. Reith, C. Benkelfat, A. Sherwin, Y. Yasuhara, H. Kuwabara, F. Andermann, S.
Bachneff, P. Cumming, M. Diksic, S.E. Dyve, P. Etienne, A.C. Evans, S. Lal, M.
Shevell, G. Savard, D.F. Wong, G. Chouinard, A. Gjedde, Proc. Natl. Acad. Sci.
USA 91 (1994) 1165111654.
[6] A.D. Borglum, T.G. Bruun, T.E. Kjeldsen, H. Ewald, O. Mors, G. Kirov, C. Russ, B.
Freeman, D.A. Collier, T.A. Kruse, Mol. Psychiatry 4 (1999) 545551.
[7] D.F. Shih, C.D. Hsiao, M.Y. Min, W.S. Lai, C.W. Yang, W.T. Lee, S.J. Lee, PLoS One 8
(2013) e71741.
[8] R. Montioli, B. Cellini, C. Borri Voltattorni, J. Inherit. Metab. Dis. 34 (2011)
12131224.
[9] M.B. Feany, W.W. Bender, Nature 404 (2000) 394398.
[10] E. Masliah, E. Rockenstein, I. Veinbergs, M. Mallory, M. Hashimoto, A. Takeda,
Y. Sagara, A. Sisk, L. Mucke, Science 287 (2000) 12651269.
[11] M.J. Aminoff, West J. Med. 161 (1994) 303308.
[12] R.A. Hauser, Eur. Neurol. 62 (2009) 18.
[13] R.B. Hodgetts, S.L. OKeefe, Annu. Rev. Entomol. 51 (2006) 259284.
[14] C. Vavricka, Q. Han, Y. Huang, S.M. Erickson, K. Harich, B.M. Christensen, J. Li,
PLoS One 6 (2011) e16124.
[15] P.J. Facchini, K.L. Huber-Allanach, L.W. Tari, Phytochemistry 54 (2000) 121
138.
[16] C.B. Voltattorni, A. Minelli, C. Turano, FEBS Lett. 17 (1971) 231235.
[17] P. Dominici, B. Tancini, D. Barra, C.B. Voltattorni, Eur. J. Biochem. 169 (1987)
209213.
[18] M. Ando-Yamamoto, H. Hayashi, T. Sugiyama, H. Fukui, T. Watanabe, H. Wada,
J. Biochem. 101 (1987) 405414.

[19] C.S. Hoefig, K. Renko, S. Piehl, T.S. Scanlan, M. Bertoldi, T. Opladen, G.F.
Hoffmann, J. Klein, O. Blankenstein, U. Schweizer, J. Kohrle, Mol. Cell.
Endocrinol. 349 (2012) 195201.
[20] R. Montioli, B. Cellini, M. Dindo, E. Oppici, C.B. Voltattorni, Biomed. Res. Int.
2013 (2013) 161456.
[21] R. Montioli, E. Oppici, B. Cellini, A. Roncador, M. Dindo, C.B. Voltattorni, Hum.
Mol. Genet. 22 (2013) 16151624.
[22] P.S. Moore, P. Dominici, C. Borri, Biochem. J. 315 (Pt. 1) (1996) 249256.
[23] H. Hayashi, H. Mizuguchi, H. Kagamiyama, Biochemistry 32 (1993) 812818.
[24] R.A. John, Biochim. Biophys. Acta 1248 (1995) 8196.
[25] H. Komori, Y. Nitta, H. Ueno, Y. Higuchi, J. Biol. Chem. 287 (2012) 29175
29183.
[26] P. Burkhard, P. Dominici, C. Borri-Voltattorni, J.N. Jansonius, V.N.
Malashkevich, Nat. Struct. Biol. 8 (2001) 963967.
[27] M. Bertoldi, M. Gonsalvi, R. Contestabile, C.B. Voltattorni, J. Biol. Chem. 277
(2002) 3635736362.
[28] G. Giardina, R. Montioli, S. Gianni, B. Cellini, A. Paiardini, C.B. Voltattorni, F.
Cutruzzola, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 108 (2011) 2051420519.
[29] C. Momany, R. Ghosh, M.L. Hackert, Protein Sci. 4 (1995) 849854.
[30] G. Capitani, D. De Biase, C. Aurizi, H. Gut, F. Bossa, M.G. Grutter, EMBO J. 22
(2003) 40274037.
[31] G. Fenalti, R.H. Law, A.M. Buckle, C. Langendorf, K. Tuck, C.J. Rosado, N.G. Faux,
K. Mahmood, C.S. Hampe, J.P. Banga, M. Wilce, J. Schmidberger, J. Rossjohn, O.
El-Kabbani, R.N. Pike, A.I. Smith, I.R. Mackay, M.J. Rowley, J.C. Whisstock, Nat.
Struct. Mol. Biol. 14 (2007) 280286.
[32] M. Bertoldi, C.B. Voltattorni, Arch. Biochem. Biophys. 488 (2009) 130139.
[33] B. Tancini, P. Dominici, M. Simmaco, M.E. Schinina, D. Barra, C.B. Voltattorni,
Arch. Biochem. Biophys. 260 (1988) 569576.
[34] M. Bertoldi, P. Frigeri, M. Paci, C.B. Voltattorni, J. Biol. Chem. 274 (1999) 5514
5521.
[35] B. Cellini, R. Montioli, E. Oppici, C.B. Voltattorni, Open Biochem. J. 6 (2012)
131138.
[36] M. Bertoldi, S. Castellani, C. Bori Voltattorni, Eur. J. Biochem. 268 (2001) 2975

2981.
[37] H.C. Dunathan, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 55 (1966) 712716.
[38] C.B. Voltattorni, A. Minelli, P. Dominici, Biochemistry 22 (1983) 22492254.
[39] H. Hayashi, F. Tsukiyama, S. Ishii, H. Mizuguchi, H. Kagamiyama, Biochemistry
38 (1999) 1561515622.
[40] B. Cellini, M. Bertoldi, R. Montioli, C. Borri Voltattorni, Biochemistry 44 (2005)
1397013980.
[41] M. Bertoldi, P.S. Moore, B. Maras, P. Dominici, C.B. Voltattorni, J. Biol. Chem.
271 (1996) 2395423959.
[42] M. Bertoldi, P. Dominici, P.S. Moore, B. Maras, C.B. Voltattorni, Biochemistry 37
(1998) 65526561.
[43] M. Bertoldi, B. Cellini, R. Montioli, C. Borri Voltattorni, Biochemistry 47 (2008)
71877195.
[44] M. Bertoldi, B. Cellini, B. Maras, C.B. Voltattorni, FEBS Lett. 579 (2005) 51755180.
[45] M. Bertoldi, C. Borri Voltattorni, Biochim. Biophys. Acta 1647 (2003) 4247.
[46] M. Bertoldi, C.B. Voltattorni, Protein Sci. 10 (2001) 11781186.
[47] X.M. Chen, H. Kobayashi, M. Sakai, H. Hirata, T. Asai, T. Ohnishi, S. Baldermann,
N. Watanabe, J. Plant Physiol. 168 (2011) 8895.
[48] Y. Kaminaga, J. Schnepp, G. Peel, C.M. Kish, G. Ben-Nissan, D. Weiss, I. Orlova,
O. Lavie, D. Rhodes, K. Wood, D.M. Porterfield, A.J. Cooper, J.V. Schloss, E.
Pichersky, A. Vainstein, N. Dudareva, J. Biol. Chem. 281 (2006) 2335723366.
[49] E. Pichersky, J.P. Noel, N. Dudareva, Science 311 (2006) 808811.
[50] C. Borri Voltattorni, M. Bertoldi, Dopa decarboxylase, in: T. Creighton (Ed.),
Encyclopedia of Molecular Medicine, John Wiley and Sons, New York, 2001.
[51] A. Orlacchio, C. Borri-Voltattorni, C. Turano, Biochem. J. 185 (1980) 4146.
[52] M. Bertoldi, M. Gonsalvi, C.B. Voltattorni, Biochem. Biophys. Res. Commun. 284
(2001) 9093.
[53] F. Daidone, R. Montioli, A. Paiardini, B. Cellini, A. Macchiarulo, G. Giardina, F.
Bossa, C. Borri, PLoS One 7 (2012) e31610.
[54] M. Bertoldi, C. Borri, Biochem. J. 352 (Pt 2) (2000) 533538.