Anda di halaman 1dari 2

METODE

Persiapan Transfersome
Transfersome dibuat dengan cara dikocok, Teknik hidrasi film lemak. Obat,
lesitin (PC) dan tepi aktivator dilarutkan dalam campuran etanol: kloroform (1: 1).
Pelarut organik dapat dihilangkan dengan cara penguapan sementara suhu
pengocokan di atas suhu transisi lemak (43 C). Lapisan tipis lipid terbentuk di
dalam dinding tabung dengan rotasi. Lapisan tersebut disimpan semalam untuk
menyelesaikan penguapan pelarut. Film kemudian terhidrasi dengan dapar fosfat
(pH 7,4) dengan pengocokan pelan selama 15 menit pada suhu yang sesuai.
Suspensi transfersome akan terhidrasi hingga 1 jam pada suhu 2-8o C.
Optimasi formulasi
Ada berbagai variabel yang bisa mempengaruhi persiapan tersebut dan sifat dari
transfersome. Prosedur persiapan yang sesuai dioptimalkan dan divalidasi.
Penyusunan transfersomes yang mengandung kurkumin melibatkan berbagai
variabel seperti pengaruh lesitin: rasio surfaktan (95:05, 85:15), pengaruh
berbagai pelarut (etanol, isopropil alkohol) dan pengaruh berbagai surfaktan
(Span80, Tween80), optimasi dilakukan dengan memilih efisiensi penjeratan obat.
Selama persiapan, variabel lainnya dijaga tetap konstan.
Persiapan hidrogel topikal
Transfersome terdispersi dioptimalkan setara dengan 200 mg obat murni. Polimer
hidrogel seperti karbopol 971P dimanfaatkan untuk mengendalikan pelepasan
hidrogel topikal. Jumlah karbopol 971P bubuk (0,5, 1, 1.5, 2 g) tersebar dengan
diaduk kuat (diaduk dengan magnetic stirer), air suling (hindari terjadinya
gumpalan atau agregat pada sediaan) dan dibiarkan selama 4 sampai 5 jam.

EVALUASI
Penentuan pH:
Nilai pH hidrogel topikal diukur dengan menggunakan pH meter digital (ELICO.LI 610 pH
meter) di suhu ruang.

In vitro
Studi permeasi Kulit:
Franz modifikasi difusi sel dengan menerima volume kompartemen 50ml dan daerah
difusi efektif pada 2.50 cm2 digunakan dalam penelitian ini. Studi obat in vitro dilakukan
dengan menggunakan kulit kambing di dalam larutan buffer fosfat (pH 7,4). Rambut
pada kulit perut dihilangkan dan kulit terhidrasi di dalam larutan saline. Lapisan jaringan
adiposa kulit dihilangkan dengan cara digosok oleh kapas. Kulit disimpan dalam alkohol
isopropil pada suhu 0-40C. Kompartemen reseptor ditambahkan dengan 50ml buffer
fosfat (pH 7,4) dan dipertahankan pada 37 0.5oC, diaduk dengan magnetic bar pada
100rpm. Formulasi hidrogel (setara dengan obat 10mg) ditempatkan pada kulit dan
bagian atas difusi sel tertutup. Setiap interval waktu 1 ml aliquot reseptor medium
ditarik dan digantikan oleh volume buffer fosfat (pH 7,4) baru yang sama untuk
mempertahankan kondisi. Sampel dianalisis secara spektrofotometri pada maks
427.2nm.
Formulasi studi deposisi kulit dioptimalkan:
Setelah 24 jam, permukaan kulit dicuci lima kali dengan etanol: PBS pH 7,4 (1: 1),
kemudian untuk menghilangkan kelebihan obat dari permukaan dicuci dengan air. Kulit
kemudian dipotong menjadi potongan-potongan kecil. Kemudian dihomogenisasi
dengan etanol: larutan buffer pH 7.4 (1: 1) dan dibiarkan selama 6 jam di suhu kamar.
Setelah diaduk selama 5 menit dan disentrifugasi selama 5 menit pada 5000rpm, isi
kurkumin dianalisis dengan metode spektrofotometri UV pada 427.2nm. Hasil
dibandingkan dengan kontrol menggunakan student t-test.