Anda di halaman 1dari 17

OLEH :

NURSIDAH, SKM, M.Ked

Elisa

dpt mevaluasi kehadiran Ag & Ab


dlm suatu serum

Merupakan

metode yg sgt bguna:

Utk menentukan konsetrasi Ab dlm serum


Utk medeteksi adanya Ag

Metode

ini jg dpt diaplikasikan dlm industri


makanan utk mdeteksi allergen potensial
dlm makanana, spt: susu, kacang, walnut,
almond & telur

Elisa

jg dpt digunakan dlm bidg toksikologi


utk uji pdugaan cepat pd berbagai kls obat

A. ELISA utk deteksi virus


Aplikasi ELISA utk mdeteksi infeksi virus
dpt dilakukn dgn 2 cara :

Pertama adlh mdeteksi reaksi imun


(interferon, sitokin, antibodi)
Kedua adlh mdeteksi antigennya

Model

ELISA yg digunakan :
Indirect
Sistem peroksidase &
Direct
alkali phospatase
Sandwich ELISA

Sampel

yg dpt digunakan : jaringan,


sekresi & ekskresi
Jika kadar Ag tdk cukup byk maka hrs
dilakukan pbiakan pd sel kultur, TAB at
hewan coba
Jika Ag dlm sampel cukup maka dpt lgs
dilakukn ELISA

Mis

: sampel dr lesi pock ayam yg tinfeksi


virus pox, lesi pd lidah sapi yg tinfeksi AE
dll
Jika sampel rusak & tdk mungkin
dilakukan multiplikasi pd media
ptumbuhan virus mgunakan Ab
monoklonal
Krn lbh spesifik pd epitop ttentu dibanding
Ab poliklonal

Sampel

yg sering digunakan : serum &


plasma, dpt pula digunakan sekresi &
ekskresi, CLS, air susu

Teknik

pengumpulan Ab:

Sentrifugasi : deteksi virus, kultivasi virus &

deteksi Ab (IgM)
Pembekuan : deteksi Ab & Ag
Penyerapan pd kertas saring: utk sampel jarak
jauh & utk deteksi Ab
Swab : utk sampel jarak jauh
Air susu : sumber Ab yg potensial, tp kadar Ab
rendah

ELISA

utk deteksi Ab dri bakteri digunakan


sec luas
Selain utk deteksi dini jg dpt memonitor
hasil vaksinasi
Bbrp ptimbangan pgunaan ELISA :
Sensitif, walau kadar Ag & Ab rendah
Secara serologis dpt mdeteksi di mana sulit

ditemukan bakteri
Mdptkan sampel ckup mudah
Bbrp spesies bakteri sulit dibiakkan

Kelemahan

uji serologis utk bakteri :

Hasil titer Ab tinggi tdk mcerminkan hewan

tinfeksi
Bbrp penyakit ada yg tdk menimbulkan respon
Ab
Dpt bereaksi silang dgn Ab akibat respon imun
olh penyakit lain

Keuntungan

metode ELISA utk infeksi

bakteri :
Dpt menentukan infeksi dini (IgM

dibandingkan dgn IgG spesifik)


Dpt digunakan subtyping misalnya IgG2
spesifik akibat infeksi brucellosis
Punya kepekaan 10-10.000 kali dibanding
dgn uji serologis lainnya

ELISA

utk parasit sedikit lbh rumit


dibandingkan dgn MO lainnya
Krna punya sifat yg sgt bbeda & kompleks
satu dgn yg lainnya
Stp parasit punya siklus hidup yg bbeda
model pekspresian Ag jg bbeda
Yg hrs dipersiapkan ELISA pd
imunioparasitologi adlh perangkat Ag, Ab
Antiglobin yg dilabel dgn enzim sdh byk
dikomersilkan & mudah didpt

Ag

parasit utk ELISA dpt dikoleksi dr bbrp


bagian dr parasit : protein
Protein pd parasit punya imunogenik & bsifat
unik dpt mbedakan thdp infeksi parasit
lainnya
Ag parasit intraseluler dijumpai pd saat invasi
Byk ditemukan pd permukaan sel yg tinfeksi

Ag

ekstraseluler biasanya ditemukan pd


permukaan dri parasit
Ag parsit dpt ditemukan pd bbrp bagian spt;

pd permukaan,
Ag internal yg dilepas pd saat pemangsaan,
ekspresi &
ganti kulit &

Ditemukan

pula Ag somatik

Dgn

kompleksnya Ag parsit, bbrp masalah


dlm mengembangkan ELISA adlh:
1. Sulitnya produksi Ag
2. Keterbatasan kemampuan utk kultur parsit
3. Adanya keterbatasan pd hewan coba

Utk

menyediakan Ab dpt dikoleksi dr:

serum hewan yg punya titer tinggi


Produksi serum dgn cara mbuat infeksi

buatan mis menyuntikkan Ag dr sel parasit


utuh yg diinaktifkan
Protein yg sdh dikarakterisasi
Protein hasil rekombinan mll intraperitonial pd
mencit
Protein hsil hibridoma yg hasilkan Ab
monoklonal yg spesifik thdp Ag msg2 parait