Objetivo
Rf-1(1 microlitro):
Introduccin
1.5/3.8=0.394
Rf-1 (1mg/ml):
21.7/3.8=0.447
Rf-2(5mg/ml):
3.8
1.6/3.8=0.421
Rf-3(10
Experimento 4: Efecto de
mg/ml):1.6/3.8=0.421
matriz.
Resultados
3.
3.9
Rf (sudan): 2.7/3.8=0.710
2
3.
8
3.
1
3
1 de etilo:
1. acetato
Rf (R.de M) : 2.3/3.8=0.605
Rf (sudan) : 3.3/3.8=0.868
2. acetato de etilo/hexano (1:1)
Rf (R. de M):1.4/3.9=0.358
Rf (sudan): 3.5/3.9=0.897
3
B
1
3
2
3.
8
Practica No.1: Factores que influyen en las separaciones cromatograficas / fecha de realizacin:
28/agosto/2014--/ 6FV1/ Profesores: Jonathan Fragoso Vzquez, Luis Almazn Snchez, Eleuterio
Burgueo Tapia / Equipo 3: Hernndez Balderas Jos Luis, Lozano Apolinar Martin Alejandro.
A] Efecto de la naturaleza del disolvente de la
muestra.
Rf-1 (metanol): 1.9/3.8=0.5
Rf-2 (agua): 1.7/3.8=0.447
Rf-3 (CH3CN): 2.5/3.8=0.657
B] Presencia de otros analitos
Rf-1(agua):1.6/3.8=0.421
Rf-2 (sacarosa): 1.5/3.8=0.394
Rf-3 (NaCl): 1.2/3.8=0.315
Discusin de resultados
Efecto de la polaridad del disolvente.
Se observ que la afinidad muestra-disolvente se
fue modificando ya que se disminua la polaridad
del disolvente por la adicin de hexano, por lo se
observ que las muestras de rojo de metilo sus Rf
disminuyen considerablemente (de 0.605 a 0.078)
a comparacin del Sudan (de 0.868 a 0.710) , lo
que indica que el Rojo de metilo es ms polar que
el Sudan , ya que en el Rojo existe un grupo
carboxilo que tiene puentes de hidrogeno con el
acetato de etilo y en el Sudan solo hay un
hidroxilo. Existen interacciones muestra-fase mvil
y muestra-fase estacionaria; si la muestra tiene
mayor afinidad por la fase mvil esta avanzara
ms que si se realiza con una fase mvil poco afn
a la muestra.
Efecto del volumen de muestra aplicada.
En este experimento los Rfs tuvieron valores
cercanos (0.394, 0.394 y 0.368) aunque cuando
se coloca un volumen de muestra mayor (4
microlitros) la mancha es un poco ms grande lo
que provoca una resolucin pobre y se tendrn
problemas si este se requiere separar de algn
otro compuesto, adems se consider que al
incrementar el volumen de muestra aplicada se
incrementa la velocidad de migracin, esto se
debe a que los sitios activos de las molculas de
la fase mvil estn saturadas, lo cual ya
interactan con las dems y permiten el paso.
Efecto de concentracin de la muestra.
Conclusiones
La afinidad del analito por la fase
mvil est dada por la polaridad de
ambos, interaccionando con la fase
mvil y/o fase estacionaria.
A mayor volumen de muestra menor
resolucin se obtendr.
A mayor volumen de aplicacin de
muestra, mayor velocidad de
migracin.
A mayor concentracin de la muestra
se presentara el fenmeno de coleo.
La presencia de otros analitos afecta
en la retencin del analito de inters.
Practica No.1: Factores que influyen en las separaciones cromatograficas / fecha de realizacin:
28/agosto/2014--/ 6FV1/ Profesores: Jonathan Fragoso Vzquez, Luis Almazn Snchez, Eleuterio
Burgueo Tapia / Equipo 3: Hernndez Balderas Jos Luis, Lozano Apolinar Martin Alejandro.
B)
Cuestionario
A)
Resolucin:
o Es una funcin del factor de
capacidad K'x y la retencin relativa
y el nmero de platos tericos en
funcin del segundo soluto.
Coeficiente de particin:
o Es un parmetro fisicoqumico que
permite determinar de modo
cuantitativo el grado de lipofilia.
Asimetra de pico:
o Es la porcin de cromatograma
diferencal que registra la respuesta
del detector cuando un nico
compuesto sale de la columna.
Bibliografia
o
o
o
Efecto de matriz:
o Consiste en una disminucin o
aumento de la respuesta
instrumental del analito debido a la
presencia de otros componentes.