Anda di halaman 1dari 14

Babi merupakan hewan omnivora yang tergolong dalam famili

Suidae dan genus Sus. Kandungan lemak dalam babi bisa mencapai 60%
pada babi berukuran sedang atau 3 kali lemak pada sapi.
Lemak hewan pada umumnya berupa zat padat pada suhu
ruangan, sedangkan lemak yang berasal dari tumbuhan berupa zat cair
dan biasanya disebut minyak. Setiap minyak mempunyai komposisi asam
lemak yang berbeda-beda dan mempunyai struktur yang spesifik.
Minyak kelapa sawit diperoleh dari buah kelapa sawit (Elaeis
quineensis Jacq). Untuk mendapatkan mutu yang dapat diterima
konsumen, minyak sawit mentah diolah melalui beberapa proses yaitu
rafinasi

(penyulingan),

bleaching

(pemucatan),

dan

deodorisasi

(penghilangan bau).
Lemak babi salah satu jenis lemak hewan, sering digunakan
dengan minyak tumbuhan lain seperti zaitun dan minyak sawit untuk
menghasilkan shortening, margarin dan minyak makanan khusus lainnya.
Lemak babi dapat diperhitungkan dari 2 sudut pandang, ekonomis dan
agama. Di negara-negara tertentu, produsen produk makanan lebih
memilih untuk mencampur minyak nabati dengan lemak babi dalam
rangka mengurangi biaya produksi. Setiap produk makanan yang
mengandung lemak babi tidak diperbolehkan karena alasan agama.
Beberapa agama seperti Islam, Yahudi dan Hindu tidak diperbolehkan
pengikut mereka untuk mengkonsumsi makanan yang mengandung lemak

babi sehingga metode analisis untuk mendeteksi lemak babi sangat


diperlukan .
Indonesia dan Malaysia adalah negara pengekspor terbesar
minyak kelapa sawit. Minyak kelapa sawit adalah salah satu minyak
utama yang dikonsumsi tidak hanya di daerah Asia, tetapi juga di seluruh
dunia. Minyak sawit terdiri lebih dari 90 % trigliserida, 2-7 %
diacylglycerols, 0,1 % monoacylglycerols, 3-5 % asam lemak bebas dan
1% komponen minor. Komponen minor adalah campuran kompleks
karotenoid, tocols ( tokoferol dan tokotrienol ), squalene, sterol , dan
fosfolipid. Untuk mengurangi biaya produksi, lemak babi kadang-kadang
ditambahkan untuk kelapa sawit untuk menghasilkan minyak makanan
khusus seperti mentega dan margarin. Oleh karena itu, deteksi lemak babi
dalam minyak sawit diperlukan untuk menjamin kehalalan makanan yang
mengandung lemak babi .
Analisis lemak yang dapat dimakan dan minyak biasanya dilakukan
dengan menentukan komponen tertentu seperti asam lemak, trigliserida ,
dan tocols ketimbang analisis lemak babi sebagai bagian dari keseluruhan
sistem pangan. Spektroskopi Fourier Transform Inframerah (FTIR)
menawarkan analisis sampel sebagai masalah secara keseluruhan. Teknik
ini mampu menentukan analit ( s ) yang menarik , terutama dalam
kombinasi dengan kemometrika teknik kalibrasi multivariat (parsial least
square, PLS). Selain itu, spektroskopi FTIR dalam kombinasi total
reflektansi dilemahkan tidak melibatkan persiapan sampel yang berlebihan

dan tidak mengeksploitasi penggunaan bahan kimia dan reagen. Oleh


karena itu, spektroskopi FTIR untuk analisis lemak yang dapat dimakan
dan minyak dapat dianggap sebagai "green analitical method "
Spektroskopi FTIR dalam kombinasi dengan parsial least square
telah digunakan untuk penentuan lemak babi dalam minyak nabati yang
dipilih, lemak babi dalam campuran dengan lemak hewan lain yaitu ayam,
daging sapi dan lemak kambing dan lemak babi dalam minyak ikan cod.
Saat ini juga dapat dibedakan lemak babi dari lemak hewan lain dan
minyak nabati lainnya menggunakan spektroskopi FTIR dalam kombinasi
dengan analisis komponen utama (PCA). Namun, tidak ada data yang
dilaporkan mengenai penerapan spektroskopi FTIR untuk penentuan
lemak babi dalam minyak sawit. Dalam penelitian ini , spektroskopi FTIR
dengan aksesori horisontal Total pantulan dilemahkan ( HATR ) dalam
hubungannya dengan kemometrika teknik parsial least square (PLS)
digunakan untuk kuantifikasi lemak babi dalam minyak sawit .

Bahan dan Metode


Persiapan lemak babi
Lemak babi dibuat dengan render jaringan adiposa babi menurut
previoulyy dilaporkan prosedur oleh Rohman dan Che Man ( 2009).
Jaringan adiposa babi yang dibeli dari berbagai rumah disembelih di
sekitar Yogyakarta, Indonesia. Dalam proses ini, jaringan yang dipotong
kecil-kecil, dicampur, dan meleleh di 90-100 0C selama 2 jam dalam oven.
Lemak mencair itu piperas melalui kain muslin triple lalu dilipat,
dikeringkan dengan penambahan Na 2SO4 anhidrat dan kemudian
disentrifugasi pada 3000 rpm selama 20 menit. Lapisan lemak
didekantasi, terguncang dengan baik dan disentrifugasi lagi sebelum
disaring melalui kertas saring Whatman mengandung natrium sulfat
anhidrat untuk menghilangkan sisa air . Sampel disaring secara langsung
untuk analisis atau disimpan dalam wadah tertutup rapat di bawah selimut
nitrogen di -20 0C.
Analisis kromatografi gas
Analisis asam lemak terdiri dari lemak babi dan kelapa sawit
dilakukan dengan menggunakan kromatografi gas dengan detektor
ionisasi nyala ( GC - FID ), menurut AOCS metode resmi Ce 1c - 89
(1996) dengan sedikit modifikasi. Sekitar 100 mg sampel (lemak babi atau
minyak sawit) dilarutkan dalam 1,0 ml heksana dan ditambahkan dengan
0,2 ml 1 M NaOCH3 dalam metanol. Campuran diaduk kuat selama 1

menit dengan mixer vortex, ditambah dengan 5 tetes jenuh NaCl dan
dicampur lagi dengan menggunakan vortex selama 15 detik . Selanjutnya,
1 uL supernatan diambil dan disuntikkan ke dalam kromatografi. Kolom
yang digunakan adalah RTX - 5 kolom kapiler (0,25 mm diameter, panjang
30 m, dan ketebalan 0,2 mm film), oven ditetapkan pada 50 0C ( tunggu
selama 1 menit), kemudian meningkat menjadi 180 0C (8 0C / menit), 180
ke 240 0C (8 0C / min), dan akhirnya diadakan di 240 0C selama 5 menit,
gas pembawa N2, 6,8 mL/menit, FID ditetapkan 240 0C, dan suhu injektor
yang digunakan adalah 240 0C ; rasio split (1 : 20). James Standar 37
senyawa ( C4 ke C24 ) digunakan untuk mengidentifikasi waktu retensi.
Analisis kuantifikasi FA dilakukan dengan menggunakan teknik internal
yang normalisasi.
Analisis kuantitatif lemak babi dalam minyak sawit
Untuk model kalibrasi, satu set standar yang terdiri dari lemak babi
dalam minyak sawit dibuat dengan memadukan kedua pada rentang
konsentrasi 1-60 % ( v/v ) dari lemak babi dalam minyak sawit. Untuk
validasi / prediksi, serangkaian sampel independen, yang berbeda dari
sampel kalibrasi, dibangun. Lemak babi, minyak sawit serta campuran
keduanya dianalisis menggunakan spektrofotometer FTIR.
Pengukuran Spektrum FTIR
Spektra FTIR -scan dengan menggunakan spektrometer FTIR ABB
MB3000 spektrometer FTIR ( Clairet keilmuan, Northampton, Inggris )

equiooed dengan DTGS detektor dengan resolusi 4 cm - 1, jumlah


pemindaian 32 co - menambahkan dalam 400-4000 cm - 1 wilayah.
Spectra diperoleh dengan menggunakan Horizon MB FTIR versi software
3.0.13.1 (ABB , Kanada) . Sampel ditempatkan dalam kontak dengan
horisontal jumlah pantulan dilemahkan ( HATR ) elemen ( ZnSe kristal )
pada suhu kamar dikendalikan ( 20 0C ). Semua spektrum dijatah dengan
latar belakang spektrum udara. Setelah setiap scan, spektrum background
referensi udara baru diambil. Spektrum ini dicatat sebagai nilai absorbansi
pada setiap titik data dalam rangkap tiga .
Analisis statistik
PLS telah dicapai dengan menggunakan Horizon MB FTIR versi
software 3.0.13.1 ( ABB , Kanada ) . Cuti - satu -out prosedur lintas
validasi digunakan untuk memverifikasi model kalibrasi . Nilai-nilai root
mean square error kalibrasi ( RMSEC ) dan koefisien determinasi ( R2 )
digunakan sebagai kriteria validitas untuk kalibrasi . Kemampuan prediksi
model kalibrasi PLS selanjutnya digunakan untuk menghitung validasi
atau prediksi sampel .
Hasil dan Diskusi
Analisis spektra FTIR
Spektrum FTIR dapat digunakan sebagai alat potensial yang
memungkinkan seseorang untuk membuat diferensiasi pertama di antara
lemak dan minyak karena kemampuan sebagai teknik sidik jari . Gambar 2

menunjukkan spektrum FTIR dari lemak babi dan kelapa sawit


menunjukkan puncak karakteristik dimakan lemak dan minyak spektrum
seperti yang dijelaskan oleh Guillen dan Cabo (1997 ) karena komponen
utama lemak dan minyak adalah trigliserida . Lemak babi dapat dibedakan
dari minyak sawit dengan menyelidiki posisi asam lemak , tingkat
kejenuhan rantai dan komponen minor tertentu hadir dalam lemak dan
minyak . Tabel 1 terdaftar komposisi asam lemak dari lemak babi dan
minyak sawit .
Gambar 1 menunjukkan spektrum FTIR dari lemak babi dan minyak
sawit dipindai di wilayah inframerah pertengahan 4000-650 cm - 1 .
Analisis gugus fungsi yang bertanggung jawab untuk penyerapan IR
lemak dan minyak sampel dapat ditemukan di tempat lain ( Lerma - Garcia
et al , 2010; . . Vlachos et al , 2006; Guillen dan Cabo , 1997) . Kedua
spektrum tampak sangat mirip , namun, mereka mengungkapkan sedikit
perbedaan dalam hal intensitas band dan frekuensi yang tepat di mana
serapan maksimum yang dihasilkan di setiap lemak dan minyak , karena
sifat yang berbeda dan komposisi lemak dievaluasi dan minyak ( Guillen
dan Cabo 1997 ) , terutama pada bilangan gelombang daerah 3006 ( a) ,
1117 ( b ) dan 1098 cm - 1 ( c ).

Gambar 1. Spektrum FTIR dari lemak babi dan minyak sawit di wilayah inframerah
pertengahan (4.000 - 650 cm-1)

Gambar 2. Hubungan antara nilai aktual (x-axis) dan FTIR diprediksi nilai lemak babi (yaxis) dalam minyak sawit di wilayah frekuensi

Wilayah frekuensi 3006 cm - 1 disebabkan dari cis - olefin CH,


sedangkan frekuensi 1117 dan 1098 - cm 1 berasal dari vibrasi
peregangan linkage eter di triasilgliserol ( Guillen dan Cabo , 1997) .
Penentuan komposisi asam lemak dari sampel yang diteliti ( minyak sawit
dan lemak babi ) mengungkapkan bahwa kedua minyak memiliki jumlah
yang cukup tinggi asam oleat ( Tabel 1 ) . Namun, dibandingkan dengan
kelapa sawit , lemak babi mengandung gugus asil linolenat yang dua kali
kelapa sawit . Hal ini tercermin dalam spektrum lemak babi , di mana band
tajam diamati pada frekuensi 3006 cm - 1 dibandingkan dengan kelapa
sawit spektrum . Lemak dengan proporsi yang tinggi dari kelompok asil

linolenat dan linoleat menunjukkan frekuensi yang lebih tinggi untuk band
ini dibandingkan dengan proporsi yang tinggi dari kelompok asil oleat
( Che Man et al . , 2012) .
Tabel 1. komposisi asam lemak dari babi dan kelapa sawit

dua puncak yang memiliki serapan maksimum pada 1119 dan 1100 cm - 1
, tepatnya di wilayah frekuensi 1117 dan 1098 cm - 1 . Ini ketinggian
puncak yang terbukti berbanding terbalik dengan proporsi kelompok jenuh
asil dan kelompok asil oleat , masing-masing ( Jaswir et al . , 2003) . Lard
memiliki proporsi kira-kira sama kelompok jenuh asil dan gugus asil oleat
yang tercermin dalam spektrum lemak babi , di mana puncak dari 1119
dan 1100 cm - 1 muncul sebagai memiliki ketinggian yang sama . Minyak
sawit sebaliknya , memiliki konsentrasi lebih dari gugus asil jenuh dari
gugus asil oleat , menunjukkan ketinggian yang tidak sama dari puncak
1119 dan 1100 cm - 1 dalam spektrum kelapa sawit . Wavenumbers ini di

mana intensitas puncak ( absorbancies ) lemak babi dan minyak sawit


sedikit berbeda jauh dipilih untuk dioptimalkan untuk analisis lemak babi
dalam minyak sawit .
Analisis kuantitatif lemak babi dalam minyak sawit
Analisis kuantitatif lemak babi dalam minyak sawit dilakukan dengan
bantuan parsial least square ( PLS ) regresi . Dalam model kalibrasi PLS ,
para absorbancies lemak babi dengan tingkat konsentrasi 0,0-60,0 % ( v /
v ) dalam minyak sawit yang dipindai di wilayah inframerah pertengahan
4.000 - 650 cm - 1 . PLS kalibrasi dipekerjakan untuk membuat hubungan
antara nilai aktual lemak babi ( x - axis ) dan FTIR diprediksi nilai lemak
babi ( y - axis ) dalam minyak sawit . Lemak babi dalam minyak sawit
ditentukan pada wavenumbers dari 1.480 - 1.085 cm - 1 . Pemilihan
daerah frekuensi dilakukan sedemikian rupa sehingga memberikan nilai
tinggi R2 dan rendahnya nilai RMSEC dengan memperhatikan over- pas ,
yang mungkin berlangsung selama kalibrasi PLS . Menggunakan PLS
Model kalibrasi , hubungan antara nilai aktual dan FTIR diprediksi nilai
lemak babi dalam minyak sawit dapat dilihat pada Gambar 2. Analisis
residu menunjukkan bahwa kesalahan yang terjadi selama analisis
kesalahan random , dan tidak ada kesalahan sistematis yang diamati
( Gambar 3 ) .

Gambar 3. Analisis residual menggambarkan perbedaan antara nilai aktual dan nilai
prediksi lemak babi dalam minyak sawit

Gambar 4. Hubungan antara nilai PRESS dan sejumlah faktor

Kinerja model kalibrasi PLS selanjutnya dinilai dengan lintas validasi


menggunakan " meninggalkan satu -out " teknik . Validasi silang
menggunakan

"

meninggalkan

satu

"

teknik

dieksploitasi

untuk

mengevaluasi kinerja model PLS . Jumlah faktor atau komponen utama


( PC ) yang digunakan untuk mengembangkan model yang PLS
didasarkan pada prediksi kesalahan residual sum square ( PRESS ) nilai (
Sedman et al . , 1997) . Nilai PRESS adalah ukuran langsung pada
seberapa baik kalibrasi memprediksi konsentrasi ditinggalkan selama
silang validasi ( Smith , 2002) . Selama silang validasi nilai minimum nilai
PRESS diperoleh adalah 99,04 , dicapai dengan menggunakan 6 faktor
atau komponen prinsip ( Gambar 4 ) . Root mean square error cross
validasi ( RMSECV ) nilai yang diperoleh dari salib validasi model kalibrasi

PLS adalah 2,87% ( v / v ) . Hal ini menunjukkan bahwa spektroskopi


FTIR cukup handal untuk analisis lemak babi dalam minyak sawit.
Kesimpulan
Spektroskopi FTIR dalam kombinasi dengan kalibrasi multivariat
kalibrasi persegi parsial paling telah berhasil digunakan untuk penentuan
lemak babi dalam minyak sawit . Daerah frekuensi yang dioptimalkan
digunakan adalah 1480 - 1085 cm - 1. Koefisien determinasi diperoleh
untuk hubungan antara nilai prediksi aktual dan FTIR adalah 0,998 .
Kesalahan yang dihasilkan selama kalibrasi dan validasi silang yang relatif
rendah , yaitu 1,69 % dan 2,87% ( v / v ), masing-masing . Metode yang
dikembangkan adalah yang cepat, tidak ada persiapan sampel yang
berlebihan , dan tidak melibatkan pelarut dan reagen yang berbahaya.