Microscopio de campo claro.

Para formar una imagen a partir de un corte histolgico usa luz visible, por esto la muestra debe ser lo
bastante fina como para que los haces de luz puedan atravesarla. Tambin se usan mtodos de tincin, segn las necesidades, con el
fin
de
aumentar
los
detalles
en
la
imagen
(3).
El campo del microscopio est intensamente iluminado, mientras que los objetos observados aparecen ms oscuros. En general con
este microscopio se pueden alcanzar los 1000 aumentos, pudindose llegar con ciertas modificaciones a 2000 y 3000 aumentos (5).
El ojo humano no logra distinguir objetos de menos de 50 micras de dimetro ni consigue resolver dos lneas separadas por menos
de 100 micras (es decir, las ve como una sola lnea)
Microscopio de contraste de fase Permite observar clulas sin colorear y resulta especialmente til para clulas vivas.
Este aprovecha las pequeas diferencias de los ndices de refraccin en las distintas partes de una clula y en distintas partes de una muestra de tejido.
La luz que pasa por regiones de mayor ndice de refraccin experimenta una deflexin y queda fuera de fase con respecto al haz principal de ondas de
luz que pasaron la muestra. Aparea otras longitudes de onda fuera de fase por medio de una serie de anillos pticos del objetivo y del condensador,
anula la amplitud de la porcin fuera de fase inicial del haz de luz y produce un contraste til sobre la imagen. Las partes oscuras de la imagen
corresponden a las porciones densas del espcimen; las partes claras de la imagen corresponden a porciones menos densas. Por lo tanto estos
microscopios se utilizan para observar clulas vivas, tejidos vivos y cortes semifinos no coloreados.
Microscopio de campo oscuro El objetivo recibe la luz dispersa o refractada por las estructuras del espcimen. Para lograrlo, el microscopio de campo
oscuro est equipado con un condensador especial que ilumina la muestra con luz fuerte indirecta. En consecuencia el campo visual se observa como un
fondo oscuro sobre el cual aparecen pequeas partculas brillantes de la muestra que reflejan parte de la luz hacia el objetivo.
El efecto es similar a las partculas de polvo que se ven en el haz de luz emanado de un proyector de diapositivas en una habitacin oscura. La luz
reflejada
por
las
partculas
de
polvo
llegan
hasta
la
retina
del
ojo
y
las
hacen
visibles.
La resolucin de este microscopio no puede ser mejor que la del microscopio de campo oscuro porque emplea la misma fuente de longitud de onda, sin
embargo puede detectar partculas individuales ms pequeas en las imgenes de campo oscuro, debido al contraste creado.
Es til para observar autorradiografas, cristales en la orina y para detectar espiroquetas en particular el Treponema pallidum microorganismo causante
de la sfilis.
Microscopio de fluorescencia Una molcula que fluorece emite luz de longitud de onda que se encuentra dentro del espectro visible, cuando es
expuesta a una fuente de luz ultravioleta. Se usa para revelar molculas fluorescentes naturales, como la vitamina A y algunos neurotransmisores. Al ser
escasas las molculas autofluorecentes su aplicacin ms difundida es para revelar una fluorescencia agregada, como en la deteccin de antgenos o
anticuerpos en procedimientos de coloracin inmunocitoqumica. Tambin se puede inyectar molculas fluorescentes especficas en un animal o
directamente en clulas y usarlas como marcadores. Estos mtodos sirvieron para estudiar uniones intercelulares, trayectorias de las fibras nerviosas en
neurobiologa y en deteccin de marcadores del crecimiento fluorescentes en tejidos mineralizados.
Se insertan distintos filtros entre la fuente de luz ultravioleta y la muestra para producir luz monocromtica o casi monocromtica, o entre el espcimen
y el objetivo permitiendo que la estrecha banda de longitudes de onda de fluorescencia llegue hasta el ojo o incida en una emulacin fotogrfica u otro
procedimiento analtico
Microscopio de luz ultravioleta La imagen en el microscopio de luz ultravioleta depende de la absorcin de esa luz por las molculas de la muestra. La
fuente de luz ultravioleta tiene una longitud de onda de 200 nm, por lo tanto puede alcanzar una resolucin de 0,1 um. La microscopia ultravioleta no es
muy diferente del funcionamiento de un espectrofotmetro pero sus resultados son registrados en fotografas. La muestra no se puede observar
directamente
a
travs
del
ocular
porque
la
luz
ultravioleta
puede
daar
la
retina.
El mtodo sirve para detectar cidos nucleicos, protenas que contienen determinados aminocidos. Mediante longitudes de ondas especficas para la
iluminacin
se
puede
obtener
mediciones
espectrofotomtricas
para
cuntificar
el
DNA
y
el
RNA
de
cada
clula.
Microscopio de polarizacin Este microscopio es una simple modificacin del microscopio ptico, contiene un filtro polarizante llamado polarizador
entre la fuente de luz y la muestra y se ubica un segundo polarizador, denominado analizador entre el objetivo y el observador.
Se puede rotar el polarizador y el analizador; la diferencia entre sus ngulos de rotacin se usa para determinar el grado en que una estructura afecta el
haz de luz polarizada. La capacidad que tiene un cristal o estructura cristalina de rotar el plano de la luz polarizada se denomina birrefringencia.
xhiben birrefringencia el msculo estriado o esqueltico y las inclusiones cristaloides de las clulas intersticiales testiculares.
2.
Poder de resolucin
Llamamos poder de resolucin

la

capacidad

de

un

sistema

ptico

para

diferenciar

entre

dos

puntos

lneas

muy

prximos.

El poder de resolucin de un objetivo (expresado en lneas por milmetro) se mide con ayuda de una carta de prueba, que no es sino una serie de dibujos
y lneas de diferentes grosores.
Varios factores lo condicionan: el tamao de las clulas de la retina, la longitud de onda de la luz y el dimetro de la pupila.
3. Segn su definicin la apertura numrica est relacionada con el ndice de refraccin
del medio que hay entre la muestra y el objetivo. Debido a que el ndice de
refraccin del aire es menor que el del vidrio, los rayos luminosos se refractan o se
desvan cuando pasan de la lmina portaobjeto al aire. Si la mayora de los rayos
luminosos se refractan en un ngulo muy grande, se pierden para el objetivo. Si
colocamos entre la lmina y el objetivo de 100 X un aceite de inmersin que tenga
un ndice de refraccin aproximadamente igual al del vidrio, disminuye la desviacin
y un porcentaje mayor de rayos luminosos procedentes de la muestra pasarn
directamente al objetivo, consiguindose una mayor resolucin y una imagen
ms clara.
Efecto del aceite de inmersin para aumentar el poder de resolucin
En conclusin para obtener la imagen de mayor aumento, ms ntida y con mayor
poder de resolucin se debe:
_ Disponer de lentes de ptima calidad.
_ Disponer de oculares de gran aumento.
_ Trabajar con el objetivo de inmersin.
_ Utilizar
Efecto del aceite de inmersin para aumentar el poder de resolucin
4. PROCEDIMIENTO

Con las lminas portaobjeto que le suministre el profesor observe la muestra con
el microscopio de luz utilizando el objetivo adecuado. Para ello se procede de la
siguiente manera:
1. Colocar sobre la platina la lmina portaobjeto con la muestra colocada en la
parte superior.
2. Situar cuidadosamente la parte que va a examinar sobre el agujero central de
la platina.
3. Ajustar la fuente de iluminacin hasta que pase la mayor cantidad de luz a travs
de la muestra.
El diafragma y el condensador, se deben ajustar hasta que la luz cubra todo el
campo visual.
4. Seleccionar el objetivo adecuado y con el tornillo macromtrico aproximar a la
lmina el tubo del microscopio hasta que los separe aproximadamente la distancia
focal adecuada.
5. Observar por el ocular, con ambos ojos abiertos, aproximando lentamente el
objetivo, con ayuda del tornillo macromtrico.
6. Enfocar totalmente la muestra con el tornillo micromtrico y ajustar el diafragma
y el condensador hasta lograr una buena iluminacin, es decir, ni demasiado
brillante ni demasiado oscuro.
ENFOQUE CON EL OBJETIVO DE INMERSIN
El enfoque con el objetivo de inmersin se debe realizar con mayor cuidado, pero
el procedimiento es esencialmente el mismo.
1. Enfocar primero con el objetivo de mediano aumento (40 X) un rea conveniente.
2. Levantar el tubo y colocar el objetivo de inmersin girando el revolver hasta
que ste encaje.
3. Colocar una gota de aceite de inmersin sobre la muestra.
4. Bajar cuidadosamente el objetivo de inmersin, observando lateralmente,
hasta que el objetivo quede sumergido en el aceite.
5. Enfocar la imagen con el tornillo micromtrico.
Este enfoque debe lograrse casi inmediatamente, puesto que la distancia de
trabajo del objetivo de inmersin es relativamente corta.
6. Ajustar el condensador y diafragma hasta lograr la iluminacin adecuada.
Una vez realizadas las observaciones:
1.
Anotar lo observado.

6. Un microscopio puede tener una vida media larga, siempre y cuando se tomen
precauciones en el cuidado de lentes y se cumplan normas para su transporte y
almacenamiento.
Cuidado de lentes
Para utilizar efectivamente la mayor cantidad de luz, que entra al microscopio, es
importante que el espejo (si lo tiene), el condensador, y las lentes se mantengan
limpios. Para limpiarlos se deben utilizar papeles y soluciones de limpieza apropiados
para evitar el dao de las lentes.
_ Papeles de limpieza: nicamente se deben utilizar papeles pticamente limpios.
Lo que se utiliza con ms frecuencia en los laboratorios son unas pequeas
libretas que contienen este tipo de papel las cuales se deben proteger del
polvo. Est prohibido utilizar pauelos, servilletas o cualquier otro tipo de
material para limpiar las lentes aunque stos estn limpios.
_ Objetivos: Las lentes objetivos frecuentemente se ensucian con material proveniente
de las lminas y los dedos. Los papeles descritos anteriormente pueLABORATORIO
DE MICROBIOLOGA USO DEL MICROSCOPIO DE LUZ
den la eliminar grasa y otros materiales que se depositan sobre el objetivo, pero
la limpieza final usualmente se lleva a cabo con solventes orgnicos, preferiblemente
con xilol.
Es importante utilizar la cantidad adecuada de solvente, ya que un exceso
puede daar el cemento que mantiene unido el lente a la base. El pequeo
flujo de aire que se obtiene con una jeringa tambin puede ser adecuado para
remover la pelusa remanente.
_ Ocular: Para comprobar la limpieza del ocular, ste se debe rotar entre los dedos
y al mismo tiempo se debe observar a travs del microscopio. Una imagen
que rota constituye una evidencia de la presencia de suciedad. Proceda a limpiar
ambos lentes con el papel adecuado y remueva la pelusa restante con un
pequeo chorro del aire.
Sugerencias adicionales
1. Revisar el aceite de inmersin para asegurarse que no est turbio. Un buen
aceite de inmersin debe ser claro. Un aceite en mal estado daa las lentes.
2. Mantener los oculares limpios.
3. Mantener el condensador en su posicin ms alta.
4. Si el microscopio dispone de espejo, utilizar la superficie plana.
5. Mantener el diafragma completamente abierto.
6. No intercambiar los objetivos o los oculares de microscopios distintos, y, bajo
ninguna circunstancia separar las lentes frontales de los objetivos.
Almacenamiento
El microscopio debe almacenarse en ptimas condiciones. Antes de guardarlo es
necesario:
_ Remover la lmina portaobjeto de la platina.
_ Limpiar el objetivo de inmersin, si ste fue utilizado.
_ Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de uso.
_ Desconectar la lmpara (si el microscopio lo requiere) y guardarla dentro de
la caja del microscopio.
_ Transferir el microscopio del mesn al gabinete, previamente abierto, tomando
con una mano, el brazo del microscopio y la base con la otra.
BIBLIOGRAFA
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Microbiology. Third edition. Wm. C. Brown Company Publishers. Dubuque,

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Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiologa. Manual de Mtodos Generales
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Tortora G.J., B.R. Funke and C.L. Case. 2001. Microbiology an Introduction Seventh
Edition. The Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc.
7.Apertura--numrica
Es un indicador del ngulo mximo con que un haz de luz puede ingresar a la fibra para que se produzca la reflexin total interna.
-La apertura numrica bsicamente es una medida del dimetro de la apertura comparada con la distancia focal.

1virus ..Ninguno de los virus posee orgnulos y, sobre todo, ninguno tiene autonoma metablica, por lo que no son considerados clulas. Su ciclo de
vida tiene dos fases, una extracelular y metablicamente inerte, y otra intracelular que es reproductiva. Se puede agrupar las caractersticas definitorias
de los virus en torno a tres cuestiones: su tamao, el hecho de que sean cristalizables y el hecho de que sean parsitos intracelulares o
microcelulares obligados. Estas tres cuestiones colocan a los virus en la frontera entre lo vivo y lo inerte.
Familia

Gnero

Ejemplos

POXVIRIDAE

Orthopoxvirus

Virus vacuna (vaccinia), Viruela

Parapoxvirus

Orf, Nodulo del lechero

Yatapoxvirus

Virus yaba y tanapox

Moluscipoxvirus

Molusco contagioso

Virus simplex

Herpesvirus tipo1, Herpesvirus tipo2

Varicelavirus

Varicela-Zoster

Citomegalovirus

Citomegalovirus

Roseolovirus

Linfotropico B, Herpesvirus tipo 7

Linfocryptovirus

Eipstein-Barr

HEPADNAVIRIDAE

Orthohepadnavirus

Hepatitis B

ADENOVIRIDAE

Mastadenovirus

Adenovirus

PAPOVAVIRIDAE

Papillomavirus

papilomavirus

HERPESVIRIDAE

PARVOVIRIDAE

Poliomavirus

BK,JC

Parvovirus

B19,RA-1

Las bacterias

Son seres generalmente unicelulares que pertenecen al grupo de los protistos inferiores. Son clulas de tamao variable cuyo lmite inferior est en las
0,2m y el superior en las 50m ; sus dimensiones medias oscilan entre 0,5 y 1m . Las bacterias tienen una estructura menos compleja que la de las
clulas de los organismos superiores: son clulas procariotas (su ncleo est formado por un nico cromosoma y carecen de membrana nuclear).
Igualmente son muy diferentes a los virus, que no pueden desarrollarse ms dentro de las clulas y que slo contienen un cido nucleico
Acetobacter, Brucella, Pseudomonas, Enterobacter, Escherichia, Salmonella, Shigella, Staphylococcus, Streptococcus, Clostridium, Lactobacillus.
Los hongos
Son varios los hongos que pueden pudrir las races, por ejemplo:
-Fusarium--oxysporium
-Rhizoctonia--solani
-Phythium--spp.
- Phytophthora spp.
3. CARACTERSTICAS DE LOS VIRUS
Los virus, son un tipo especial de materia que no posee una membrana celular, por lo que no pueden ser considerados como clulas; no tienen un
metabolismo propio, por lo que no pueden producir la materia prima necesaria para generar nuevos virus; no se pueden reproducir a s mismos, para
ello, requieren de una clula husped que le proporcione la materia prima y la maquinaria enzimtica necesaria para la reproduccin; pueden cristalizar,
lo cual es una caracterstica asociada a cierto tipo de materia no viva. De acuerdo con lo anterior, los virus no encajan dentro de la materia
viviente ya que:

No cumplen los postulados de la teora celular, la cual establece que la clula es la unidad de estructura, origen y funcin.
No poseen funciones metablicas y de autoperpetuacin propias, las cuales se consideran caractersticas fundamentales de la materia viva.
La materia viva no cristaliza, esto es una propiedad asociada a la materia no viva.

4. Prin
Los priones o o protenas prinicas son partculas acelulares, patgenas y transmisibles. Se caracterizan por producir enfermedades que afectan el
sistema nervioso central (SNC) denominadas encefalopatas espongiformes transmisibles (EET). Los priones no son seres vivos, son protenas con la
propiedad de desnaturalizar otras protenas.
Su accin patgena deriva de que son una forma modificada de una protena natural existente en el organismo que al entrar en contacto con las
protenas originales las induce a adoptar la forma del prin, que suele ser una forma anormal y disfuncional, todo ello en una accin en cadena que
acaba por destruir la operatividad de todas las protenas sensibles al prin.
Teoras ms recientes apuntan a que los priones son protenas modificadas bajo ciertas circunstancias que favorecieron su cada a un nivel energtico
muy estable, lo que las hace insolubles, inmunes a las proteasas y les cambia su conformacin tridimensional. Esta estabilidad provoca que dichas
protenas se acumulen en el sistema nervioso provocando enfermedades por acumulacin.
De hecho la infeccin con protenas prinicas se debe a que al consumirse, empiezan a actuar en el tejido nervioso como ncleos en torno a los cuales
ms protenas se desnaturalizan bajo su accin y se acumulan formando generalmente fibrillas insolubles
5.
Protozoarios
Generalidades
Organismos eucariotas unicelulares (algunos viven en colonias)
Agrupamiento no formal
No descienden de ancestro comn (polifilticos)
Reproduccin sexuada o asexuada
Elementos de locomocin
Hetertrofos (algunos auttrofos por adquisicin de clorplastos)
Presencia de organelos
Gran diversidad: 215K especies descritas
Caractersticas generales de las algas

Son primariamente fotoautotrofas.

La mayora poseen pared celular, que contiene carbonato silico o slice; es una protena.
La mayora viven en el agua, otras en rocas, plantas y en animales.
Su color varia, las hay verdes (carofitas, clorofilas), rojas, amarillas, cafs. Las tres ltimas, su color se debe a los pigmentos accesorios, que le
dan esa caracterstica a las algas para poder atrapar la luz solar a distintas profundidades.

Se clasifican en:
Unicelulares:

o
o
o

unicelulares mviles por flagelos.

Unicelulares inmviles.
Ameboides (no tienen pared celular).

Algunas unicelulares se agrupan unidas por muclagos formando el cenobio.

6. La taxonomia es un tipo de nomenclatura que comenz a utilizarse gracias al naturalista Carl Von Linn all por mediados de 1700. Cada taxn o
grupo taxonmico recibe un nombre (cientfico) en latn . Esto es lo que lo vuelve un mtodo universal de clasificacin de los animales.
Los taxones supraespecficos (clase, orden, familia, gnero) tienen un solo nombre, pero los taxones de la categora especie se designan con dos
nombres y por eso se denomina a este sistema de clasificacion "nomenclatura binominal".
En su sentido ms general, la Taxonoma (del griego , taxis, "ordenamiento", y , nomos, "norma" o "regla") es la ciencia de la clasificacin.
Por lo general, se emplea el trmino para designar la Taxonoma biolgica, la ciencia de ordenar a los organismos en un sistema de clasificacin
compuesto por una jerarqua de taxones anidados
Clasificacin Niveles taxonmicos

Clase (biologa)
Especies y especiacin
Familia (biologa)
Filo
Gnero (biologa)
Orden
Reino (biologa)

7. Nomenclatura binominal
En biologa, la nomenclatura binominal (tambin llamada nomenclatura binaria) es un convenio estndar utilizado para denominar las diferentes
especies de organismos (vivos o ya extintos). A veces se hace referencia a la nomenclatura binominal como Sistema de Clasificacin binominal.
Como sugiere la palabra binominal, el nombre cientfico asignado a una especie es formado por la combinacin de dos palabras (nombres en latn o
de raz grecolatina): el nombre del gnero y el epteto o nombre especfico. El conjunto de ambos es el nombre cientfico que permite identificar a cada
especie como si tuviera "nombre y apellido".
La nomenclatura binominal es la norma puntual que se aplica a la denominacin de los taxones especficos, pero representa slo uno de los estndares
de la nomenclatura biolgica, que se ocupa tambin de la denominacin formal (cientfica) de taxones de otras categoras.
8. Fentica
En biologa sistemtica la fentica, tambin conocida como taxonoma numrica, es una tcnica cuya finalidad es la clasificacin de los organismos
basndose en su similitud, generalmente en su morfologa, o en cualidades observables, sin tomar en cuenta su filogenia o relacin evolutiva.
La fentica ha sido ampliamente sustituida por la cladstica. Sin embargo, algunos bilogos continan utilizando mtodos fenticos, como una
aproximacin razonable de la filogenia cuando los mtodos cladsticos son computacionalmente demasiado complejos.
9. CLASIFICACION: En virus que contienen ADN ARN, Ej: los virus del herpes tienen ADN, el polio tiene ARN. Ningn virus tiene ADN y ARN
simultneamente, en contraste con otros microorganismos.
familia viral: Viridae: Ej:. herpesviridae para los herpesvirus, y
picornviridae para los poliovirus.
subfamilia: : alphaherpesvirus - como: herpes simplex I y II
genus:
simplexvirus - herpes simplex I and II
Clasificacin actual de los virus de importancia mdica.
PROPIEDADES FISICO - QUIMICAS
Genoma - ADN o ARN.
Nucleocpside - son las protenas que recubren al genoma.
Cpside - es la cubierta proteica externa del virus.
Membrana - es la cubierta lipdica externa, formada de la clula en la cual se replica el virus. No est presente en todos los virus. Mientras la
membrana lipdica la codifica la clula , las protenas virales (usualmente glicoprotenas) son insertadas en la membrana. Ej: hemaglutinina (HA) del
virus influenza-A.
Los virus que tienen membranas son menos estables que aquellos que no las tienen Ej: los virusherpes las tienen y los virus del polio y
papilomavirus (virus de los condilomas) que no las tienen.
10..El parsito de la enfermedad de Chagas es un protozoario microscpico -animal de una sola clula, de aspecto muy simple visto en el microscopio
ptico comn-. Su nombre cientfico es Trypanosoma cruzi y est emparentado con otro microorganismo que, en Africa, provoca la "enfermedad del
sueo" , transmitida por la mosca "Tse-tse".
La Candida albicans es un hongo diploide asexual (forma de levadura).2 3, saprfito de la familia de los Sacaromicetos