ANTIBODI MONOKLONAL

WHITE SPOT SYNDROME VIRUS

(WSSV)

Ujang Satrio Sidik

1110096140339

Antibodi Monoklonal

Pengertian :
adalah antibodi sejenis yang diproduksi oleh sel
plasma klon sel-sel positif sejenis. Antibodi ini
dibuat oleh sel-sel hibridoma (hasil fusi 2 sel
berbeda, penghasil sel positif Limpa dan sel
mieloma) yang dikultur. Bertindak sebagai
antigen yang akan menghasilkan antibodi
adalah limpa.

White Spot Syndrome Virus

(WSSV)
Pengertian :

WSSV merupakan salah satu jenis virus

yang paling banyak menimbulkan kematian
udang di tambak.

Pada udang yang terserang virus ini secara

morfologi terdapat bintik putih.

Cara produksi
1.

2.

Penyediaan antigen
Dengan cara pemurnian sampel yang
terinfeksi WSSV
Imunisasi mencit

3.

Persiapan sel limfosit dari sel limfa mencit

hiperimun
- 5 ekor mencit msing2 yg sdh diimunisasi
100 g dg antigen WSSV/injeksi. Cara :
Limfa dicuci 3X (dg media DMEM 20
ml)
.
Keluarkan Limfositnya ( masukkan
dalam medium DMEM tanpa serum
NBS)

Disentrifugasi ( kecepatan 1000 rpm

selama 7 menit )
Suspensikan kembali limfosit dg 20 ml
DMEM-NBS
Hitungkerapatan sel ( dg
Hemasitometer )

4.

Persiapan sel mieloma

- Pd Hari ke 2 inkubasi : diperkirakan dalam
2 hari sel mieloma tmbuh pd fase log
- Hari 3 :diinkubasi lg , kemudian populasi
sel mieloma diperiksa kembali
- Hari 4 : diinkubasi dan lakukan fusi sel (
fase pertumbuhan)
- kemudian disentrifugasi dg kecepatan
1000 rpm selama 5 mnit,
- Suspensikan kembali dalam 20 ml
medium DMEM-NBS

5.

Fusi Limfosit dengan Mieloma

-

fusi diakukan dengan cara mencampurkan sel mieloma dg

sel limfosit.
-

Dari fusi tersebut akan menghasilkan sel hibridoma

penghasil AbMo.
6.

Perawatan sel Hibridoma hasil Fusi.

7.

Skrining Sel Hibridoma

- Menggunakan teknik Antigen Adsoption Indirect (AAI)ELISA dan Indirect Double Antibody Sandwich (IDAS)-ELISA.
-

Reaksi positif (>0) berarti hibridoma menghasilkan AbMo.

Mekanisme

Mengubah signal transduksi sel tumor atau

menghilangkan sel permukaan antigen,

Antibodi monoklonal WSSV ini menghambat

signal dengan cara menghambat dimerisasi
atau mengganggu ikatan ligand.

Mekanisme