TK 3003

LABORATORIUM TEKNOLOGI BIOPROSES

LAPORAN PRAKTIKUM

Oleh:
Nama : Muhammad Nadif
NIM : 13012100

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI DAN TEKNOLOGI BIOPROSES

PROGRAM STUDI TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNOLOGI INDUSTRI
INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG

Ditulis Tahunnya Ya

DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR...................................................................................................iii
DAFTAR GAMBAR .................................................................................................... iv
DAFTAR TABEL .......................................................................................................... v
1

BAB I ....................................................................................................................... 1
1.1

Tujuan Percobaan ................................................................................................................................1

1.2

Tinjauan Pustaka .................................................................................................................................1

1.3

Hasil dan Pembahasan .........................................................................................................................5

1.4

KESIMPULAN ...................................................................................................................................8

1.5

REFERENSI........................................................................................................................................8

BAB II ...................................................................................................................... 9
2.1

Tujuan Percobaan ................................................................................................................................9

2.2

Tinjauan Pustaka .................................................................................................................................9

2.3

Hasil dan Pembahasan ...................................................................................................................... 10

2.4

Kesimpulan....................................................................................................................................... 11

2.5

Referensi........................................................................................................................................... 12

BAB III................................................................................................................... 13
3.1

Tujuan Percobaan ............................................................................................................................. 13

3.2

Tinjauan Pustaka .............................................................................................................................. 13

3.3

Hasil dan Pembahasan ...................................................................................................................... 15

3.4

Kesimpulan....................................................................................................................................... 17

3.5

Referensi........................................................................................................................................... 17

BAB IV .................................................................................................................. 18
4.1

Tujuan Percobaan ............................................................................................................................. 18

4.2

Tinjauan Pustaka .............................................................................................................................. 18

4.3

Hasil dan Pembahasan ...................................................................................................................... 20

i

4.4

Kesimpulan....................................................................................................................................... 23

4.5

Referensi........................................................................................................................................... 24

BAB V.................................................................................................................... 25
5.1

Tujuan Percobaan ............................................................................................................................. 25

5.2

Tinjauan Pustaka .............................................................................................................................. 25

5.3

Hasil dan Pembahasan ...................................................................................................................... 26

5.4

Kesimpulan....................................................................................................................................... 28

5.5

Referensi........................................................................................................................................... 28

BAB VI .................................................................................................................. 29
6.1

Tujuan Percobaan ............................................................................................................................. 29

6.2

Tinjauan Pustaka .............................................................................................................................. 29

6.3

Hasil dan Pembahasan ...................................................................................................................... 30

6.4

Kesimpulan....................................................................................................................................... 35

6.5

Referensi........................................................................................................................................... 35

ii

KATA PENGANTAR

Segala puji bagi Allah yang telah memberikan kami kemudahan sehingga dapat
menyelesaikan laporan praktikum dasar-dasar bioproses. Meskipun banyak rintangan dan hambatan
yang dialami dalam pengerjaannya tetapi saya berhasil menyelesaikannya dengan baik.
Laporan disusun agar pembaca dapat memperluas ilmu tentang Mikrobiologi dan Dasardasar Teknologi Bioproses, yang disajikan berdasarkan hasil percobaan di laboratorium dan
pengumpulan data dari studi literatur.
Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada dosen Dasar-Dasar Teknologi Bioproses,
analis laboratorium mikrobiologi dan dasar-dasar teknologi bioproses, dan asisten praktikum
mikrobiologi dan dasar-dasar teknologi bioproses.
Semoga laporan ini dapat memberikan pengetahuan yang lebih luas kepada pembaca.
Laporan ini masih banyak kekurangan karena pengalaman yang saya miliki masih terbatas. Oleh
karena itu, penulis membutuhkan kritik dan saran dari pembaca yang membangun.

Penulis

iii

DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.1 Bagian bagian utama mikroskop cahaya ....................................................................... 1
Gambar 1.2 Saccharomyces cerevisiae ................................................................................................ 5
Gambar 3.1 Perbandingan Struktur Sel Bakteri Gram Positif dan Negatif ........................................ 14
Gambar 3.2 Gambar E.coli dan S.aureus dibawah mikroskop........................................................... 16
Gambar 5.1 Bidang pengamatan Counting Chamber atau ruang hitung............................................ 26
Gambar 6.1 Gambar 6.1. Gambar kurva kinetika kematian N vs t .................................................... 30
Gambar 6.2 Grafik hubungan antara ln (Xt/Xo) dan t (s ................................................................... 33
Gambar 6.3 Gambar 6.3 Grafik hubungan antara ln Xt/Xo dan t dengan intercept 0,0 ..................... 34

iv

DAFTAR TABEL
Tabel 1.1 Pengamatan Saccharomyces cereviseae pada Mikroskop dengan Perbesaran 100x dan
1000x .................................................................................................................................................... 6
Tabel 1.2 Pengamatan Bacillus mycoides pada Mikroskop dengan Perbesaran 100x dan 1000x ....... 7
Tabel 2.1 Pengamatan Saccharomyces cereviseae ............................................................................. 10
Tabel 3.1 Hasil Pengamatan E.Coli dan S.aureus .............................................................................. 15
Tabel 5.1 Hasil Pengamatan Sel Ragi dengan Menggunakan Counting Chamber ............................ 26
Tabel 6.1 Hasil Pengamatan Jumlah Sel Mati dan Sel Hidup ............................................................ 31
Tabel 6.2 Nilai ln (Nt/No) dan waktu (s) ........................................................................................... 32

BAB I
I-1 CARA MEMPERGUNAKAN MIKROSKOP
I-2 PEMAKAIAN MIKROSKOP

1.1 Tujuan Percobaan

Menggunakan mikroskop dengan perbesaran 10x dan 40x

Menggunakan mikroskop dengan perbesaran 100x beserta cairan imersi

Mengamati bentuk sel biakan ragi pada agar miring

Mengamati bentuk sel biakan bakteri pada agar miring

1.2 Tinjauan Pustaka

Mikroskop berasal dari bahasa Yunani, yaitu micron yang berarti kecil dan scopos yang
artinya tujuan. Jadi, pengertian umum dari mikroskop adalah sebuah alat yang digunakan untuk
melihat obyek yang terlalu kecil untuk dilihat dengan mata telanjang.
Gambar dari salah jenis mikroskop yakni mikroskop cahaya adalah sebagai berikut:

Muhammad Nadif
13012100

I-1 CARA MEMPERGUNAKAN MIKROSKO

I-2 PEMAKAIAN MIKROSKOP

Gambar 1.1 Bagian bagian utama mikroskop cahaya

(Sumber : http://farmasi07itb.files.wordpress.com/2010/03/mikroskop.jpg

Muhammad Nadif
13012100

I-1 CARA MEMPERGUNAKAN MIKROSKOP

I-2 PEMAKAIAN MIKROSKOP

Komponen utama dari mikroskop di atas dan fungsinya adalah sebagai berikut:
Tabung mikroskop
Merupakan penghubung lensa okuler dan lensa objektif. Tabung terpasang pada bagian bergerigi
yang melekat pada pegangan mikroskop sebelah atas. Melalui bagian yang bergerigi, tabung
dapat digerakkan vertical ke atas dan ke bawah.
Makrometer (sekrup pengarah kasar)
Merupakan komponen untuk menggerakkan tabung mikroskop ke atas dank e bawah dengan
pergeseran besar.
Mikrometer (sekrup pengarah halus)
Merupakan komponen untuk menggerakkan tabung ke atas dan ke bawah dengan pergeseran
halus.
Revolver
Merupakan pemutar lensa untuk menempatkan lensa objektif yang dikehendaki.
Panggung mikroskop
Merupakan meja preparat atau tempat sediaan obek/specimen. Pada bagian tengah panggung
mikroskop terdapat lubang untuk jalan masuk cahaya ke mata pengamat.
Panggung digunakan untuk meletakkan sediaan objek atau spesimen. Pada panggung terdapat
dua penjepit untuk menjepitkan kaca objek.
Diafragma
Merupakan komponen untuk mengatur banyak sedikitnya cahaya yang masuk melalui lubang
kecil pada panggung mikroskop. Diafragma ini terpasang pada bagian bawah panggung
mikroskop.
Kondensor
Merupakan alat untuk memfokuskan cahaya pada objek atau spesimen. Alat ini terdapat di
bawah panggung.

Lengan mikroskop
Muhammad Nadif
13012100

I-1 CARA MEMPERGUNAKAN MIKROSKOP

I-2 PEMAKAIAN MIKROSKOP

Merupakan bagian yang dipegang waktu mengangkat atau menggeser mikroskop.

Cermin reflektor
Digunakan untuk menangkap cahaya yang masuk melalui lubang pada panggung mikroskop,
yakni dengan cara mengubah ubah letak dan arahnya. Cermin ini memiliki permukaan datar
dan permukaan cekung. Permukaan datar digunakan jika sumber cahaya cukup terang dan
permukaan cekung digunakan jika cahaya kurang terang.
Kaki mikroskop
Merupakan tempat mikroskop bertumpu sehingga tidak mudah bergoyang dan bergeser ketika
digunakan. Kebanyakan kaki mikroskop berbentuk seperti tapal kuda.
Lensa objektif akan meneruskan cahaya dari kondensor dan membentuk bayangan pertama.
Lensa ini menentukan struktur dan bagian renik yang akan menentukan daya pisah spesimen
sehingga mampu menunjukkan struktur renik yang berdekatan sebagai dua benda yang terpisah.
Lensa okuler merupakan lensa mikroskop yang terdapat dibagian ujung atas tabung, berdekatan
dengan mata pengamat. Lensa ini berfugsi untuk memperbesar bayangan yang dihasilkan oleh
Semakin kecil nilai daya pisah, akan semakin kuat kemampuan lensa untuk memisahkan dua
titik yang berdekatan pada preparat sehingga struktur benda terlihat lebih jelas. Daya pisah dapat
diperkuat dengan memperbesar indeks bias atau menggunakan cahaya yang memiliki panjang
gelombang () pendek. Biasanya, untuk meningkatkan indeks bias pada perbesaran 10 x 100
digunakan minyak imersi. Teknik menggunakan mikroskop dengan minyak imersi disebut
teknik imersi samarata yakni mengoleskan minyak di lensa objektif 100x dan preparat yang akan
diamati.
Saccharomyces cerevisiae merupakan fungi mikroskopis, bersel tunggal dan tidak memiliki
badan buah. Reproduksi vegetatifnya adalah dengan membentuk kuncup atau tunas (budding).
Berikut adalah bentuk Saccharomyces cerevisiae dibawah mikroskop:

Muhammad Nadif
13012100

I-1 CARA MEMPERGUNAKAN MIKROSKOP

I-2 PEMAKAIAN MIKROSKOP

Gambar1.2
2. Saccharomyces
Gambar
Saccharomycescerevisiae
cerevisiae
(Sumber: http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/Y/Yeast.html)
(Sumber: http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/Y/Yeast.html)
Bacillus mycoides merupakan bakteri yang membentuk rantai sel dan amotil. Bakteri ini merupakan
bakteri gram positif dan biasa ditemukan dalam tanah. Bacillus mycoides pada medium pertumbuhan
yang solid membentuk koloni-koloni yang menyebar dan spiral.

1.3 Hasil dan Pembahasan

Dalam menggunakan mikroskop terdapat hal-hal yang harus diperhatikan oleh pengguna
supaya mendapatkan gambar yang jelas. Hal-hal yang harus diperhatikan yaitu mengatur sekrup
pengarah kasar dan sekrup pengarah halus, mengatur kondensor, mengatur intensitas cahaya,
dan mengatur perbesaran lensa objektif.
Pengamatan Saccharomyces cerviseae dan Bacillus mycoides dilakukan dengan perbesaran
100 x dan 1000x. Pada pengamatan Saccharomyces cereviseae dan Bacillus mycoides dengan
perbesaran 100 x terlebih dahulu. Hal ini dilakukan untuk mendapatkan resolusi mikroskop yang
cukup jelas. Ini dilakukan dengan cara mengatur pergeseran kasar hingga mendapatkan gambar
yang jelas. Jika kurang jelas dapat menggunakan pergeseran halus secara pelan-pelan hingga
mendapatkan gambar yang lebih jelas. Jika kurang terang maka mengatur intensitas cahaya dan
mengatur kondensor. Dan setelah mendapatkan gambar yang jelas, terang, dan stabil, maka ubah
lensa objektif 10x menjadi lensa objektif 40x.
Memutar lensa objektif harus dilakukan secara pelan-pelan karena ketinggian tiap perbesaran
pada lensa objektif berbeda-beda. Saat perbesaran 400x tidak terdapat gambar apapun yang
Muhammad Nadif
13012100

I-1 CARA MEMPERGUNAKAN MIKROSKOP

I-2 PEMAKAIAN MIKROSKOP

terlihat meskipun sudah berusaha dalam mengatur mikroskop sedemikian rupa sehingga
mendapatkan gambar yang baik. Hal ini disebabkan karena lensa objektif 40x pada mikroskop
yang digunakan sudah tidak berfungsi dengan baik.
Setelah itu, menggunakan lensa objektif 100x sehingga perbesaran yang digunakan untuk
melihat objek yaitu 1000x. Saat perbesaran 1000x, digunakan minyak emersi untuk memperjelas
objek dan melindungi mikroskop itu sendiri karena saat menggunakan lensa objektif 100x, lensa
objektif menempel pada kaca preparat. Minyak emersi ini diteteskan pada kaca penutup preparat
dan dioleskan pada lensa objektif 100x. Setelah selesai menggunakan mikroskop dengan teknik
imersi maka bersihkan dengan setetes xylol dengan kertas pembersih lensa. Tujuan dari
pembersihan ini supaya lensa mikroskop tetap berfungsi dnegan baik dan kekuatan fokusnya
masih terjaga. Pada pengamatan objek dengan menggunakan perbesaran 1000 x, gambar
pertama kali yang muncul kurang jelas sehingga putar pengarah kasar halus dan mengatur
kondensor saja. Dan diperoleh gambar yang lebih besar dan jelas karena menggunakan cairan
imersi.
Hasil pengamatan Saccharomyces cereviseae dengan perbesaran 100 x dan 1000x dapat
dilihat sebagai berikut:

Tabel 1.1 Pengamatan Saccharomyces cereviseae pada Mikroskop dengan Perbesaran 100x dan 1000x

Mikroorganisme Perbesaran

Pengamatan
Warna bidang pengamatan bening polos
Berbentuk bulat

Saccharomyces
cereviseae

100x

Ukuran kecil-kecil
Bentuk tiap selnya kelihatan polos dan struktur lebih
rincinya tidak kelihatan
Alat gerak tidak terlihat dan membentuk koloni

Muhammad Nadif
13012100

I-1 CARA MEMPERGUNAKAN MIKROSKOP

I-2 PEMAKAIAN MIKROSKOP

Berbentuk bulat atau cenderung lonjong

Terdapat Saccharomyces yang sedang bertunas
Saccharomyces
cereviseae

1000x

Ukurannya lebih besar dan lebih jelas

Berkoloni

Dari hasil pengamatan, bahwa dengan

perbesaran
1000x,
Struktur
sel Saccharomyces terlihat lebih jelas
Alat gerak
tidak terlihat
atau
tak tampak
1000 x, Saccharomyces cerviseae tampak bulat-bulat dan adapun yang cenderung lonjong. Pada
mikroskop pun terdapat Saccharomyces cerviseae yang bertunas. Selain itu ada yang berkoloni
dan adapun yang soliter. Hasil pengamatan yang diperoleh sesuai dnegan literature yang
menyatakan bahwa Saccharomyces cerviseae merupakan ragi yang memiliki bentuk bulat atau
lonjong, hidup berkoloni, dan tidak memiliki alat gerak.
Hasil pengamatan Bacillus mycoides dengan perbesaran 100 x dan 1000x dapat dilihat
sebagai berikut:

Tabel 1.2 Pengamatan Bacillus mycoides pada Mikroskop dengan Perbesaran 100x dan 1000x

Mikroorganisme Perbesaran

Pengamatan
Warna bidang pengamatan bening
Berbentuk lonjong kecil-kecil
Jumlah koloni yang terlihat sedikit

Bacilllus
mycoides

100x

Bentuk tiap selnya kelihatan polos dan struktur lebih

rincinya tidak kelihatan
Alat gerak tidak terlihat dan membentuk koloni
berantai
Berbentuk batang

Bacilluss
mycoides

1000x

Ukurannya lebih besar dan lebih jelas

Soliter dan koloni menyebar
Alat gerak tidak terlihat

Muhammad Nadif
13012100

I-1 CARA MEMPERGUNAKAN MIKROSKOP

I-2 PEMAKAIAN MIKROSKOP

Warna bidang pengamatan bening

Dari hasil pengamatan bahwa dengan perbesaran 100x dengan 1000x terdapat perbedaan
bentuk. Hal ini disebabkan karena dengan perbesaran 100 x, gambar yang diperoleh oleh
mikroskop belum begitu jelas dan masih berukuran kecil sehingga masih ada kemungkinan
bentuk yang sebenarnya. Oleh karena itu, digunakan perbesaran 1000x dengan cairan imersi
supaya mendapatkan gambar yang lebih jelas dan resolusi yang cukup untuk meyakinkan bentuk
sel dari Bacillus mycoides. Saat menggunakan perbesaran 1000x. Bentuk sel yang teramati yaitu
batang/basillus, membentuk koloni yang menyebar dan adapun yang soliter, serta tidak terlihat
alat gerak. Sedangkan saat menggunakan perbesaran 100x, bentuk sel yang teramati lonjong
kecil-kecil dan membentuk rantai.

1.4 KESIMPULAN

Hasil pengamatan mikroorganisme yang baik diperoleh melalui mikroskop dengan

perbesaran 1000x dan cairan imersi.

Saccharomyces cereviseae memiliki bentuk bulat dan cenderung lonjong, hidup

berkoloni atau soliter, dan tidak memiliki alat gerak.

Bacillus mycoides hidup berkoloni atau soliter, berbentuk batang atau basil, dan tidak
memiliki alat gerak.

1.5 REFERENSI
Michael T.Madigan, et al.2012.Brock Biology of Microorganism,13th edition. Pearson
http://farmasi07itb.files.wordpress.com/2010/03/mikroskop.jpg
http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/Y/Yeast.html
Muhammad Nadif
13012100

BAB II
I-9 CARA MENGUKUR BENDA-BENDA KECIL DENGAN
MIKROSKOP

2.1 Tujuan Percobaan

Mengkalibrasi mikroskop dengan mikrometer mikroskop

Mengukur Saccharomyces cereviseae dengan menggunakan micrometer mikroskop

2.2 Tinjauan Pustaka

Objek mikroorganisme yang diukur menggunakan mikroskop berukuran sangat kecil
sehingga membutuhkan pengukuran dengan alat yang disebut micrometer. Mikrometer dibagi
menjadi 2 jenis yaitu micrometer objektif dan micrometer okuler.
Pengukuran panjang dan lebar objek yang akan diamati diperlukan kalibrasi antara
micrometer objektif dan micrometer okuler dengan 1 skala = 0,01 mm. Cara mengkalibrasi dapat
dilakukan dengan cara menempatkan mikrometer objek diatas meja preparat, kemudian
masukkan mikrometer okuler ke dalam lensa okuler, lalu aturlah posisi skala mikrometer okuler
dengan skala mikrometer objektif dan himpitkan kedua mikrometer dan hitung jumlah garis
skala mikrometer dan hitung jumlah garis skala pada kedua mikrometer tersebut.
Satuan ukuran yang digunakan untuk menyatakan ukuran benda-benda kecil yang dilihat
dibawah mikroskop adalah micron. 1 mikron = 0,0001 mm.
Cara mengukur kalibrasi antara mikrometer okuler dan mikrometer objektif adalah
menentukan skala yang tepat berhimpitan kemudian hitung jumlah garis pada mikrometer okuler
dan mikrometer objektif. Dan kemudian hitung hasil konversi skala okuler terhadap skala
Muhammad Nadif
13012100

10
I-9 CARA MENGUKUR BENDA-BENDA KECIL DENGAN MIKROSKOP
objektif. Saccharomyces cerevisiae adalah mikroorganisme bersel tunggal dengan ukuran antara
5 sampai 20 mikron dan berbentuk bola atau telur. Saccharomyces cervisiae tidak bergerak
karena tidak memilii struktur tambahan dibagian luarnya seperti flagella (Prescott,1959)

2.3

Hasil dan Pembahasan

Cara mengukur benda kecil dapat dilakukan dengan cara mengkalibrasi mikrometer objektif
dan mikrometer okuler terlebih dahulu. Kalibrasi dilakukan pada perbesaran 100x karena lensa
objektif 40x yang terdapat mikroskop sudah tidak berfungsi dengan baik sehingga memakai
perbesaran 100x. Sedangkan jika menggunakan 1000x gambar yang akan diperoleh terlalu besar.
Oleh karena itu, seharusnya menggunakan perbesaran 400x.
Hasil kalibrasi mikrometer okuler dan mikrometer objektif pada perbesaran 100x yaitu 25
bagian skala mikrometer okuler panjanganya sama dengan 40 bagian skala mikrometer objektif.
Ini berarti bahwa 1 bagian skala mikrometer okuler dapat dihitung sebagai berikut:
1 skala mikrometer okuler = (skala objektif x 10 mikron)/ skala okuler
= (40 x 10 mikron)/ 25
= 16 mikron
Ini menunjukkan 1 bagian skala mikrometer okuler menunjukkan jarak yang sama dengan 16
mikron pada benda yang diukur. Namun, hasil ini kurang akurat karena perbesaran yang
digunakan terlalu kecil yakni 100x sehingga terdapat ketidaktepatan dalam melihat skala yang
berhimpitan.
Dalam pengamatan Saccharomyces cereviseae dilakukan sebanyak 20 buah dari bidang
pengamatan pada mikroskop. Hasil pengamatan Saccharomyces cereviseae dapat dilihat pada
tabel sebagai berikut:
Tabel 2.1 Pengamatan Saccharomyces cereviseae

Muhammad Nadif
13012100

Sel

Panjang (m)

Lebar (m)

16

11
I-9 CARA MENGUKUR BENDA-BENDA KECIL DENGAN MIKROSKOP
3

16

3,2

1,6

6,4

6,4

4,8

2,4

2,4

2,4

10

6,4

6,4

11

4,8

2,4

12

3,2

2,4

13

3,2

1,2

14

4,8

2,4

15

2,4

1,2

16

6,4

2,4

17

4,8

1,2

18

2,4

2,4

19

2,4

1,2

20

2,4

1,2

5,8

3,83

Berdasarkan dari hasil pengamatan menunjukkan bahwa Saccharomyces cereviseae memiliki

panjang rata-rata yaitu 5,8 m dan lebar rata-rata yaitu 3,83 m. Hal ini sesuai dengan literatur yang
menunjukkan bahwa ukuran Saccharomyces cereviseae antara 5-20 m.

2.4 Kesimpulan

Hasil kalibrasi mikrometer okuler dan mikrometer objektif yaitu 1 skala mikrometer okuler
sama dengan 16 m.

Panjang rata-rata Saccharomyces cereviseae yaitu 5,8 m dan lebar rata-rata Saccharomyces
cereviseae yaitu 3,83 m.

Muhammad Nadif
13012100

12
I-9 CARA MENGUKUR BENDA-BENDA KECIL DENGAN MIKROSKOP

2.5 Referensi
https://id.scribd.com/doc/187118375/Laporan-Biologi-Penggunaan-Mikroskop-dan-KalibrasiMikrometer
https://id.scribd.com/doc/71751153/SACCHAROMYCES-CERIVISIAE

Muhammad Nadif
13012100

BAB III
I-5 PEMBUATAN PREPARAT PEWARNA MENURUT GRAM

3.1 Tujuan Percobaan

Mengidentifikasi dan memeriksa Escherchia coli dan Staphylococcus aureus bersifat

gram positif atau negatif

Mengidentifikasi struktur sel Escherchia coli dan Staphylococcus aureus

3.2 Tinjauan Pustaka

Perbedaan dasar antara bakteri gram positif dan negatif adalah pada komponen dinding
selnya. Bakteri gram positif memiliki membrane tunggal yang dilapisi peptidoglikan yang tebal
sedangkan bakteri negatif lapisan peptidoglikannya tipis. Selain itu, bakteri gram positif hanya
mempunyai membrane plasma tunggal yang dikelilingi dinding sel tebal berupa peptidoglikan
dan sekitar 90 persen dari dinding sel tersebut tersusun atas peptidoglikan sedangkan sisanya
berupa molekul lain bernama asam teikhoat. Sedangkan bakteri gram negative memiliki system
mebran ganda dimana membrane plasmanya diselimuti oleh membrane luar permeable dan
mempunyai dinding sel tebal berupa peptidoglikan yang terletak diantara membrane dalam dan
membrane luarnya. Untuk lebih jelasnya, perbedaan tersebut dapat dilihat pada gambar berikut:

13

Muhammad Nadif
13012100

I-5 PEMBUATAN PREPARAT PEWARNA MENURUT GRAM

14

Gambar 3.1 Perbandingan Struktur Sel Bakteri Gram Positif dan Negatif
(Sumber: http://wikieducator.org/File:Gramstain.jpg)

Genus bakteri yang termasuk gram negatif adalah Enterobactericeae, Salmonella sp.,
Shigella sp., E.Coli, dan Yersinia enterolitica. Sedangkan bakteri gram positif adalah
Staphylococci, Streptococci, Enterocci, Clostridium,dan Bacillus.
Pewarnaan gram atau metode gram adalah salah satu teknik pewarnaan yang paling penting
dalam mengidentifikasi bakteri. Dalam proses ini, olesan bakteri yang sudah terfiksasi dikenai
larutan-larutan berikut: zat pewarna kristal violet, larutan yodium, larutan alcohol dan zat
pewarna tandingannya berupa zat warna safranin atau air fuchsin. Bakteri gram positif akan
mempertahankan zat pewarna Kristal violet dan gram negative akan kehilangan zat pewarna

Muhammad Nadif
13012100

15

I-5 PEMBUATAN PREPARAT PEWARNA MENURUT GRAM

Kristal setelah dicuci dengan alkohol dan akan tampak berwarna merah saat diberi air fuchsin
basa atau zat pewarna safranin.

3.3 Hasil dan Pembahasan

Pewarnaan gram yang dilakukan percobaan kali ini adalah pewarnaan gram bakteri E.Coli
dan S.aureus dari biakan agar miring. Dari hasil pembuatan suatu preparat yang berwarna
didapatkan hasil sebagai berikut:
Tabel 3.1 Hasil Pengamatan E.Coli dan S.aureus

Hal yang diamati

Warna Bakteri

Bentuk Sel

Bentuk Koloni

Jumlah

Nama Bakteri

Hasil Pengamatan

Escherichia Coli

Berwarna merah

Staphylococcus aureus

Berwarna ungu

Escherichia Coli

Memiliki bentuk basil/batang

Staphylococcus aureus

Memiliki bentuk bulat agak

lonjong

Escherichia Coli

Berkoloni

Staphylococcus aureus

Tidak terlihat berkoloni

Escherichia Coli

Sangat banyak

Staphylococcus aureus

Sangat sedikit

Berdasarkan hasil pengamatan diatas terlihat bahwa Escherichia coli memiliki warna merah,
memiliki bentuk sel yang batang/ basil dan hidupnya berkoloni. Sedangkan Staphylococcus
aureus memiliki warna ungu, memiliki bentuk sel yang bulat agak lonjong dan tampak tidak
terlihat berkoloni. Selain itu dari hasil pengamatan juga ternyata Staphylococcus aureus sangat
sedikit.

Muhammad Nadif
13012100

I-5 PEMBUATAN PREPARAT PEWARNA MENURUT GRAM

16

Hasil pengamatan Escherichia coli sesuai dengan literatur yang ada. Gambar Escherichia
coli dibawah mikroskop dapat dilihat sebagai berikut:

Gambar
3.2 Gambar
E.coliE.coli
dan S.aureus
dibawah
mikroskop
Gambar
3.1 Gambar
dan S.aureus
dibawah
mikroskop
(Sumber:
http://imgarcade.com/1/e-coli-under-microscope/)
(Sumber:
http://imgarcade.com/1/e-coli-under-microscope/)

Sedangkan hasil pengamatan Staphylococcus aureus diperoleh hasil yang kurang baik dan
kurang sesuai dengan gambar 3.1. Hal ini terjadi karena bisa terjadi ketidaktepatan atau terjadi
sedikit kesalahan dalam membuat preparat pewarnaan gram. Bakteri Staphylococcus aureus
pada pengamatan tampak hidup soliter dan sangat sedikit jumlahnya sedangkan seharusnya
bakteri Staphylococcus aureus ini berkoloni dan membentuk anggur serta berwarna merah
kebiru-biruan. Hal ini bisa terjadi karena pada saat pemberian larutan karbol-kristal violet terjadi
kesalahan yakni larutan yang diteteskan terlalu sedikit serta didiamkan terlalu sebentar atau
kurang dari 2 menit sehingga terlalu sedikit ikatan yang terjadi antara larutan dengan kaca
preparat. Selain itu, saat pencucian dengan alcohol 96 %, preparat dicuci terlalu sebentar dan
pencucian dilakukan secara tidak merata sehingga warna ungu yang diikat oleh bakteri gram

Muhammad Nadif
13012100

I-5 PEMBUATAN PREPARAT PEWARNA MENURUT GRAM

17

negatif tidak luntur secara merata. Dan pemberian larutan fuchsin terlalu banyak dan terlalu
lama dibiarkan sehingga bakteri gram positif tidak terlihat dan hanya sedikit yang teramati.
Hal tersebutlah yang menyebabkan bakteri S.aureus tidak terwarnai dengan benar sehingga
struktur sel S.aureus tidak dapat terlihat dengan jelas dan pada bidang pengamatan didominasi
oleh bakteri gram negatif karena pada bidang pengamatan terisi dengan bakteri berwarna merah.
Sehingga bakteri E.coli lebih dominan dibandingkan dengan bakteri S.aureus.

3.4 Kesimpulan

Bakteri E.coli merupakan bakteri gram negative karena berwarna merah, memiliki bentuk
batang/basil dan berbentuk koloni.

Bakteri Staphylococcus aureus merupakan bakteri gram positif karena berwarna ungu,
memiliki bentuk bulat atau lonjong dan tidak terlihat berkoloni

3.5 Referensi
Michael T.Madigan, et al.2012.Brock Biology of Microorganism,13th edition. Pearson
http://imgarcade.com/1/e-coli-under-microscope/
http://www.slideshare.net/titissari/7-perbedaan-gram-positif-dan-gram-negatif
http://wikieducator.org/File:Gramstain.jpg

Muhammad Nadif
13012100

BAB IV

II-2 CARA MENGGORESKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN

SUDIP DRIPGALSKI
II-3 CARA MENGGESERKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN
JARUM LENGKUNG
II-4 CARA PENGENCERAN DENGAN AGAR-AGAR

4.1 Tujuan Percobaan

Mengidentifikasi dan mengamati hasil persiapan medium pertumbuhan dengan sudip

drigalski, jarum lengkung dan pengenceran dengan agar-agar

Menganalisa perbedaan hasil penyiapan berbagai media dengan sudip dripgalski, jarum
lengkung dan pengenceran dengan agar-agar

4.2 Tinjauan Pustaka

Isolasi

mikroba

adalah

mengambil

mikroorganisme

yang

terdapat

dialam

menumbuhkannya dalam suatu medium buatan. Sedangkan inokulasi adalah pekerjaan

Muhammad Nadif
13012100

18

dan

II-2 CARA MENGGORESKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN SUDIP DRIPGALSKI

II-3 CARA MENGGESERKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN JARUM LENGKUNG
II-4 CARA PENGENCERAN DENGAN AGAR-AGAR
memindahkan bakteri dari medium yang lama ke medium yang baru dengan tingkat ketelitian
yang sangat tinggi.
Pengembangan dalam cawan petri ada beberapa metode, yaitu:

Metode Cawan Gores (Streak Plate)

Prinsip metode ini yaitu mendapatkan koloni yang benar-benar terpisah dari koloni yang

lain, sehingga mempermudah proses isolasi. Cara ini dilakukan dengan membagi 3-4 cawan
petri. Ose steril yang telah disiapkan diletakkan pada sumber isolat , kemudian
menggoreskan ose tersebut pada cawan petri berisi media steril. Goresan dapat dilakukan 3-4
kali membentuk garis horisontal disatu cawan. Ose disterilkan lagi dengan api bunsen. Setelah
kering, ose tersebut digunakan untuk menggores goresan sebelumnya pada sisi cawan ke dua.
Langkah ini dilanjutkan hingga keempat sisi cawan tergores.

Metode Cawan Sebar (Spread Plate)

Teknik spread plate (cawan sebar) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan

mikroorganisme di dalam media agar dengan cara menuangkan stok kultur bakteri atau
menghapuskannya di atas media agar yang telah memadat, sedangkan pour plate kultur
dicampurkan ketika media masih cair (belom memadat). Kelebihan teknik ini adalah
mikroorganisme yang tumbuh dapat tersebar merata pada bagian permukaan agar.

Teknik Dilusi (Pengenceran)

Tujuan dari teknik ini adalah melarutkan atau melepaskan mikroba dari substratnya ke dalam

air sehingga lebih mudah penanganannya. Sampel yang telah diambil kemudian disuspensikan
dalam aquades steril. Teknik dilusi sangat penting dalam analisa mikrobiologi karena hampir
semua metode penelitian dan perhitungan jumlah sel mikroba menggunakan teknik ini, seperti
TPC (Total Plate Counter). Ada beberapa tahap yang harus dilakukan sebelum melakukan
teknik penanaman bakteri (inokulasi), yaitu:
1. Menyiapkan ruangan
2. Pemindahan dengan pipet
Muhammad Nadif
13012100

19

II-2 CARA MENGGORESKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN SUDIP DRIPGALSKI

II-3 CARA MENGGESERKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN JARUM LENGKUNG
II-4 CARA PENGENCERAN DENGAN AGAR-AGAR
3. Pemindahan dengan kawat inokulasi
Adapun perbedaan alat-alat yang digunakan antara sudip dripgalski, jarum ose dan jarum
lengkung. Jarum ose adalah alat untuk memindahkan kultur dari satu media ke media lain.
Jarum inokulum biasanya terbuat dari kawat nichrome atau platinum sehingga dapat berpijar
jika terkena panas. Jarum lengkung adalah alat yang ujungnya sedikit dielngkungkan sehingga
luas permukaan yang kecil dan biasanya berfungsi untuk isolasi mikroba. Sudip drigalski
memiliki bentuk seperti huruf L dan biasanya digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme
dengan metode sebar (spread plate).

4.3 Hasil dan Pembahasan

Dari percobaan yang telah dilakukan, diperoleh hasil sebagai berikut:

Pengamatan pengeseran bakteri dengan sudip drigalski

Sumber biakan

: suspensi bakteri

Waktu inkubasi

: 48 jam

Karakteristik koloni

:
warna

Kuning

form

Circular

elevation

Convex

margin

Entire

Berdasarkan hasil percobaan, penggeseran bakteri dengan sudip drigalski menunjukkan

bahwa mikroba membetuk luasan seperti persegi panjang dengan gradasi dari sisi-sisi terluar ke
arah dalam. Selain itu, mikroba ini memiliki warna kuning berbentuk circular dan memiliki
elevation convex serta bermargin entire.

Muhammad Nadif
13012100

20

II-2 CARA MENGGORESKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN SUDIP DRIPGALSKI

II-3 CARA MENGGESERKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN JARUM LENGKUNG
II-4 CARA PENGENCERAN DENGAN AGAR-AGAR

Pengamatan penggeseran bakteri dengan jarum lengkung

Sumber biakan

: suspensi bakteri

Waktu inkubasi

: 48 jam

Karakteristik koloni bakteri:

warna

Kuning

form
elevation
margin

Koloni yang tumbuh pada medium dengan menggunakan jarum lengkung hanya satu
jenis karena hanya terdapat satu jenis warna dalam cawan petri yang diamati.

Pengenceran dengan agar agar

Pengenceran ke-0
Media biakan

: agar kaldu

Waktu inkubasi

: 48 jam

Karakteristik

Muhammad Nadif
13012100

Pengenceran ke

warna

Kuning

form

Sirkuer

elevation

Flat

margin

entire

21

II-2 CARA MENGGORESKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN SUDIP DRIPGALSKI

II-3 CARA MENGGESERKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN JARUM LENGKUNG
II-4 CARA PENGENCERAN DENGAN AGAR-AGAR
Pada pengenceran ke-0, mikroba yang terdapat dalam cawan petri sangat banyak dan padat
sekali. Pada pengenceran mikroba yang terdapat dalam cawan petri berwarna kuning,
membentuk circular, elevationnya flat dan bermargin entire.
Pengenceran ke - 1
Media biakan

: agar kaldu

Waktu inkubasi

: 48 jam

Karakteristik

:
Pengenceran ke-

warna

kuning

form

sirkuer

elevation

flat

margin

entire

Pada pengenceran pertama, mikroba yang terdapat dalam cawan petri tidak terlalu padat
seperti pada pengenceran ke 0. Namun tetap masih terlihat banyak. Pengenceran pertama ini
diambil dari cairan atau larutan pada pengenceran ke 0.
Pengenceran kedua
Medium

: agar kaldu

Waktu inkubasi

: 48 jam

Karakteristik

:
Pengenceran ke

warna

Kuning

form

Sirkuer

elevation
margin

Muhammad Nadif
13012100

22

II-2 CARA MENGGORESKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN SUDIP DRIPGALSKI

II-3 CARA MENGGESERKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN JARUM LENGKUNG
II-4 CARA PENGENCERAN DENGAN AGAR-AGAR
Pada pengenceran kedua, mikroba yang terdapat pada cawan petri lebih sedikit dan
menyebar sehingga terlihat soliter soliter dan tidak berkoloni. Pengenceran kedua ini dilakukan
dengan cara mengambil larutan dari pengenceran pertama.
Pengenceran ketiga
Medium

: agar kaldu

Waktu inkubasi

: 48 jam

Karakteristik

:
Pengenceran ke

warna

Kuning

form

Sirkuer

elevation
margin

Pada pengenceran ketiga ini diambil dari hasil pengenceran sebelumnya, dalam hal ini
kedua, sehingga benar tidaknya hasil yang didapatkan bergantung dari hasil sebelumnya. Pada
pengenceran ketiga, jumlah mikroba yang terdapat pada cawan peti semakin sedikit. Dari tiga
kali pengenceran ternyata semakin besar pengenceran semakin sedikit jumlah mikroba yang
tumbuh dan hidupnya pun menyebar. Hal ini terjadi karena terjadi pelarutan atau pelepasan
mikroba dari substratnya kedalam air akibat pengencaran, sehingga dapat mengurangi kepadatan
kepada bakteri yang ditanam.

4.4 Kesimpulan

Hasil isolasi dengan cara menggoreskan suspense bakteri dengan sudip dripgalski masih
banyak koloni yang terbentuk meskipun terbentuk gradasi.

Muhammad Nadif
13012100

23

II-2 CARA MENGGORESKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN SUDIP DRIPGALSKI

II-3 CARA MENGGESERKAN SUSPENSI BAKTERI DENGAN JARUM LENGKUNG
II-4 CARA PENGENCERAN DENGAN AGAR-AGAR

Hasil isolasi dengan cara menggoreskan suspense bakteri dengan jarum lengkung semakin
menjauh dari titik awal penggoresan semakin terlihat terpisah meskipun masih terlihat
seperti mengumpul

Hasil isolasi dengan cara pengenceran dengan agar-agar menunjukkan bahwa semakin besar
pengenceran semakin dikit jumlah mikroba yang diperoleh dan hidup secara soliter terpisah
menyebar.

Dari ketiga metode diatas, cara yang paling baik untuk melakukan isolasi mikroba yaitu
menggunakan metode menggeserkan suspense bakteri dengan jarum lengkung

4.5 Referensi
Michael T.Madigan, et al.2012. Brock Biology of Microorganism, 13th edition. Pearson
Stanburry, F.Peter et al.2003. Principle of Fermentation Technology, 2nd edition. Butterworth,
Hannaman.
http://inst.bact.wisc.edu/inst/index.php?module=book&type=user&func=displayarticle&aid=11

Muhammad Nadif
13012100

24

BAB V
I-8 PENETAPAN JUMLAH SEL DALAM CAIRAN DENGAN
MENGGUNAKAN RUANG HITUNG (COUNTING CHAMBER)

5.1 Tujuan Percobaan

Menghitung jumlah sel dalam cairan dengan menggunakan counting chamber atau ruang
hitung

5.2

Tinjauan Pustaka
Counting chamber adalah suatu kaca objek tebal, diatasnya diasahkan suatu dataran yang

dalamnya 0,1 mm. Pada dataran ini di buat garis-garis berbentuk 16 persegi besar, pada setiap
persegi besar dibagi lagi menjadi 16 persegi kecil. Panjang sisi persegi kecil 0,5 mm. Jika diatas
bagian yang diasah ini diletakkan sebuah kaca tutup, maka terbentuk syaty ruangan yang tingginya
adalah 0,1 mm.
Tiap-tiap persegi kecil dibawah kaca tutup tersebut merupakan suatu ruang dnegan isi 0,05 x
0,05 x 0,1 mm3 = 25 x 10

-5

mm3. Jika di bawah kaca tutup tersebut dimasukkan setetes suspensi,

maka dnegan mikroskop dapat dihitung jumlah sel dalam tiap-tiap persegi tersebut sehingga dapat
dihitung pula jumlah sel per ml dari suspense tersebut.
Untuk menghitung konsentrasi sel dilakukan pengamatan terhadap 5 persegi besar atau 80
persegi kecil. Jumlah sel dalam setiap persegi kecil dihitung kemudian jumlahkan seluruh hasil

Muhammad Nadif
13012100

25

I-8 PENETAPAN JUMLAH SEL DALAM CAIRAN DENGAN MENGGUNAKAN RUANG

HITUNG (COUNTING CHAMBER)
26
perhitungan untuk ke-80 persegi kecil. Berikut adalah bidang pengamatan ruang hitung atau
counting chamber yang akan teramati pada mikroskop:

Gambar 5.1 Bidang pengamatan Counting Chamber atau ruang hitung

(Sumber: http://www.microbehunter.com/wp/wpcontent/uploads/2010/06/counting_chamber5.jpg)

5.3 Hasil dan Pembahasan

Jumlah sel yang dihitung dalam cairan dengan menggunakan ruang hitung (counting
chamber) adalah jumlah sel ragi dalam suspense cairan. Hasil perhitungan sel dengan
menggunakan counting chamber dapat dilihat pada tabel berikut:

Tabel 5.1 Hasil Pengamatan Sel Ragi dengan Menggunakan Counting Chamber

Muhammad Nadif
13012100

Kotak Besar

Jumlah

32

27

I-8 PENETAPAN JUMLAH SEL DALAM CAIRAN DENGAN MENGGUNAKAN RUANG

HITUNG (COUNTING CHAMBER)
27
3

26

17

31

Dari hasil pengamatan diatas terlihat bahwa jumlah sel pada tiap-tiap kotak yang diamati
terdapat perbedaan. Hasil yang diperoleh tersebut pun belum tentu akurat karena pada bidang
pengamatan terdapat banyak sel yang sedang menumpuk sehingga sulit untuk dihitung maka sel
yang menumpuk tidak dihitung. Selain itu hal yang harus diperhatikan dalam penetepan jumlah
sel dengan menggunakan counting chamber adalah konsistensi dalam penentuan sel yang
terhitung yang terletak tepat pada garis. Pada percobaan kali ini, ditetapkan jumlah sel yang
dihitung adalah sel yang berada tepat pada garis sebelah kiri dan bawah sedangkan sel yang
berada tepat pada garis kanan dan atas tidak terhitung. Hal ini untuk menghindari penghitungan
sel yang terulang saat menghitung kotak besar sebelah kanannya dan atasnya.
Dari hasil percobaan dapat dihitung jumlah sel keseluruhan dengan cara menjumlahkan
jumlah sel yang berada dikelima kotak besar tersebut. Jumlah keseluruhan sel yang diperoleh
adalah 133 sel. Volume 5 kotak besar tersebut adalah 2 x 10-5 ml. Volume kotak besar tersebut
dihitung dari volume kotak kecil x jumlah kotak kecil yakni 80. Oleh karena itu,dapat dihitung
jumlah sel suspense dengan cara sebagai berikut:
Jumlah sel dalam suspense = jumlah keseluruhan sel/volume 5 kotak besar
Jumlah sel dalam suspense = 133 sel/ (2 x 10-5 ml)
Jumlah sel dalam suspense = 6650000 sel/ml
Ini dapat menyatakan bahwa terdapat 6650000 sel ragi dalam tiap 1 ml suspense. Seperti
yang sudah disebutkan pada sebelumnya bahwa pada bidang pengamatan masih terdapat banyak
sel ragi yang menumpuk maka sebaiknya untuk mendapatkan hasil yang lebih akurat, cairan
tersebut diencerkan terlebih dahulu. Penghitungan dnegan menggunakan counting chamber ini
dibantu dengan mikroskop pada perbesaran 400x.
Muhammad Nadif
13012100

I-8 PENETAPAN JUMLAH SEL DALAM CAIRAN DENGAN MENGGUNAKAN RUANG

HITUNG (COUNTING CHAMBER)
28

5.4 Kesimpulan
Jadi, jumlah sel ragi yang terdapat dalam suspensi dengan menggunakan counting chamber
adalah 6650000 sel/ml.

5.5 Referensi
http://www.microbehunter.com/the-hemocytometer-counting-chamber/
http://www.ruf.rice.edu/~bioslabs/methods/microscopy/cellcounting.html

Muhammad Nadif
13012100

BAB VI
XIII-6 MENENTUKAN JUMLAH SEL HIDUP DAN SEL MATI

DALAM SUSPENSI BIBIT RAGI YANG TELAH DIPANASKAN

6.1 Tujuan Percobaan

Menentukan jumlah sel hidup dalam suspense bibit ragi yang telah dipanaskan

Menentukan jumlah sel mati dalam suspense bibit ragi yang telah dipanaskan

Menentukan konstanta kematian dari sel ragi yang terdapat pada suspensi

6.2 Tinjauan Pustaka

Kinetika kematian merupakan laju kematian dari mikroorganisme dari suatu medium yang
sedang disterilisasikan sehingga kinetika kematian dapat menyatakan parameter keberhasilan
dari sterilisasi.
Konstanta kematian meruakan adalah konstanta yang menentukan laju dari suatu kematian
mikroba. Nilai konstanta ini tergantung dari jumlah sel hidup dan sel mati pada suspense
mikroorganisme.
Laju kematian logaritmik secara matematik dapat dinyatakan sebagai berikut:

( )
Keterangan:
N = konsentrasi mikroba (jumlah sel)
kd = konstanta laju kematian spesifik (menit-1)
29
Muhammad Nadif
13012100

XIII-6 MENENTUKAN JUMLAH SEL HIDUP DAN SEL MATI DALAM SUSPENSI BIBIT
RAGI YANG TELAH DIPANASKAN
30

t = waktu ( menit)
Nilai konstanta laju kematian merupakan fungsi temperature, mengikuti persamaan
Arrhenius sebagai berikut:
kd =

Dan dapat dibuat kurva kinetika kematian sebagai berikut:

Gambar 6.1 Gambar 6.1. Gambar kurva kinetika kematian N vs t

Gambar 6.1. Gambar kurva kinetika kematian N vs t

(Sumber:
Stanburry,
F.Peter.et
al.2003.Principle
of Fermentation
Technology,
2nd edition.
Butterworth)
(Sumber:
Stanburry,
F.Peter.et
al.2003.Principle
of Fermentation
Technology,
2nd edition.

Butterworth)

6.3 Hasil dan Pembahasan

Menentukan jumlah sel hidup dan sel mati bibit ragi dalam suspense dapat dilakukan dengan
cara menambahkan sedikit larutan metilen biru pada setetes suspense diatas kaca objek hingga
cairan berwarna biru muda. Sel yang mati akan berwarna biru sedangkan sel yang hidup akan

Muhammad Nadif
13012100

XIII-6 MENENTUKAN JUMLAH SEL HIDUP DAN SEL MATI DALAM SUSPENSI BIBIT
RAGI YANG TELAH DIPANASKAN
31
tetap tidak berwarna karena zat warnanya tidak dapat tembus dinding sel yang hidup. Maka sel
yang mati dan sel yang hidup dapat dihitung dengan menggunakan mikroskop.
Percobaan dilakukan dengan selang waktu pemanasan 3 menit, Hasil yang diperoleh dapat
dilihat pada table berikut:

Tabel 6.1 Hasil Pengamatan Jumlah Sel Mati dan Sel Hidup

T = 60 oC
NO

0'

3'

H M

13

12

14 10

10

15

12

13.3 11.3 3.7 4.7 19 3.3 14.0 15.0

%
Hidup

26.55

54.1

6'

44

9'

12'
H

11 4

11

10

34 1

29

17

12 5

18

85.1

48.3

Berdasarkan hasil percobaan diatas, menunjukkan bahwa jumlah sel yang hidup tanpa
pemanasan berjumlah 26,55 % kemudian jumlah sel yang hidup setelah pemanasan selama 3
menit yaitu 54,1 % kemudian jumlah sel yang hidup setelah pemanasan selama 6 menit yaitu 44
%, jumlah sel yang hidup setelah pemanasan selama 9 menit yaitu 85,1 % dan jumlah sel yang
hidup setelah pemanasan selama 12 menit yaitu 48,3 %. Hasil yang diperoleh berdasarkan
percobaan tidak menunjukkan bahwa semakin lama proses pemanasan semakin sedikit jumlah
sel yang hidup. Ini terlihat dari naik-turunnya jumlah sel yang hidup antara perbedaan lama
Muhammad Nadif
13012100

XIII-6 MENENTUKAN JUMLAH SEL HIDUP DAN SEL MATI DALAM SUSPENSI BIBIT
RAGI YANG TELAH DIPANASKAN
32
pemanasan. Hal ini disebabkan oleh beberapa factor diantaranya pengamatan untuk tiap waktu
diamati oleh orang yang berbeda-beda sehingga parameter yang diamati pun berbeda-beda serta
waktu yang dibutuhkan dalam pemanasan tidak tepat sama dengan yang diinstruksikan.
Seharusnya jika ingin mendapatkan hasil pengamatan yang baik, dilakukan oleh orang yang
sama sehingga parameter yang diamati pun tetap sama dan bisa menghasilkan data pengamatan
yang cukup baik menurut parameter pengamat tersebut.
Kemudian dari hasil percobaan ini diperolah hubungan antara ln (Nt/No) dalam satuan
persen sel hidup daan waktu dalam satuan sekon. Nilai Nt/No merupakan nilai jumlah sel yang
masih hidup sehingga diperoleh nilai ln (Nt/No) pada tabel 6.2 berikut ini:

Tabel 6.2 Nilai ln (Nt/No) dan waktu (s)

t (x)

ln (Xt/Xo)
(y)

0'

-1.326

3'

-0.615

6'

-0.821

9'

-0.162

12'

-0.728

Berdasarkan nilai yang diperoleh diatas, maka dapat dilaurkan grafik antara ln (Nt/No)
sebagai sumbu y dan waktu sebagai sumbu x. Grafik hubungan antara ln (Nt/No) terhadap waktu
dapat dilihat pada grafik dibawah ini:

Muhammad Nadif
13012100

XIII-6 MENENTUKAN JUMLAH SEL HIDUP DAN SEL MATI DALAM SUSPENSI BIBIT
RAGI YANG TELAH DIPANASKAN
33

0.000
0

-0.200

ln Xt/Xo

-0.400

y = 0.1649x - 1.2252
R = 0.3886

-0.600
konstanta
kematian

-0.800
-1.000
-1.200
-1.400

t (s)

Gambar 6.2 Grafik hubungan antara ln (Xt/Xo) dan t (s)

Gambar 6.2 Grafik hubungan antara ln (Xt/Xo) dan t (s)

Dari plot grafik diatas diperoleh nilai kontanta kematian dari sel ragi yang diamati oleh
pengamat yang berbeda-beda pada tiap waktu yang berbeda pula melalui persamaan garis yang
telah diperoleh dari grafik tersebut:
y = 0,1649x-1,2252
Dari grafik tersebut ternyata memperoleh nilai konstanta kematian yang bernilai positif. Ini
menandakan bahwa mikroorganisme yang dilakukan pemanasan malah berkembang bukan turun
sehingga dapat diperoleh alternative lain yakni dibuat intersep dari grafik tersebut 0,0. Apabila
intersep grafik tersebut diubah menjadi 0,0 makan grafik yang diperoleh adalah sebagai berikut:
Muhammad Nadif
13012100

XIII-6 MENENTUKAN JUMLAH SEL HIDUP DAN SEL MATI DALAM SUSPENSI BIBIT
RAGI YANG TELAH DIPANASKAN
34

0.000
0

-0.200

ln Xt/Xo

-0.400
-0.600
-0.800

y = -0.1692x
R = -1.561

konstanta
kematian

-1.000
-1.200
-1.400

t (s)

Gambar 6.3 Gambar 6.3 Grafik hubungan antara ln Xt/Xo dan t dengan intercept 0,0

Dari grafik diatas diperoleh hubungan garis yitu y = -0,1692x. Seperti yang diketahui bahwa
persamaan laju kematian sel mikroorganime adalah sebagai berikut:
ln Xt/Xo = -kd t
Maka persamaan garis yang diperoleh dari grafik pada gambar 6.3 memiliki arti sebagai
berikut:
y = ln Xt/Xo
m= -kd
x=t
Muhammad Nadif
13012100

XIII-6 MENENTUKAN JUMLAH SEL HIDUP DAN SEL MATI DALAM SUSPENSI BIBIT
RAGI YANG TELAH DIPANASKAN
35
Sehingga dapat diperoleh informasi bahwa nilai konstanta kematian sama dengan nilai
gradient dari grafik tersebut. Maka nilai konstanta kematian dari sel ragi dalam suspensi yang
diamati adalah sebagai berikut:
m = -kd
m = -0,1692
kd = 0,1692
Konstanta kematian dari sel ragi dalam suspense yang diamati pada mikroskop adalah
0,1692 menit-1

6.4 Kesimpulan

Jumlah sel yang hidup dan sel yang mati dari biakan ragi pada tiap 3 menit yang berbeda
mengalami perubahan yang drastic karena dilakukan oleh pengamat yang berbeda

Persamaan regresi yang diperoleh dari percobaan ini yaitu y = -0,1692 x.

Konstanta kematian sel ragi dalam suspense yang diamati pada mikroskop adalah 0,1692
menit-1

6.5 Referensi
Stanburry, F.Peter.et al.2003.Principle of Fermentation Technology, 2nd edition. Butterworth

Muhammad Nadif
13012100