Anda di halaman 1dari 11

ISOLASI BAKTERI ENDOFIT DARI DAUN

SIRIH (Piper betle L.)


SEBAGAI ANTIMIKROBA TERHADAP
Escherichia coli
DAN Staphylococcus aureus
NUR AZIZAH
1010096140
Pembimbing I :
Dr.Netty Suharti,MS
Pembimbing II :
Desi Sagita, S.farm,M.Si, Apt

LATAR
BELAKANG
Sirih (Piper betle L.) adalah jenis tanaman merambat yang telah lama diketahui dan
digunakan secara turun temurun untuk pengobatan obat batuk, sakit gigi, penyegar dan
sebagainya. Pemanfaatan sirih sebagai pengobatan tradisional ini disebabkan adanya
sejumlah zat kimia yang mempunyai aktivitas sebagai senyawa antimikroba (Haniah, 2008).
Penelitian tentang khasiat ekstrak daun sirih (Piper battle L.) sebagai antimikroba juga telah
dilakukan (Pangarungan, 2003) yang menyatakan bahwa senyawa aktif dari daun sirih
memiliki aktivitas antimikroba terhadap E. coli dan S.aureus.
Untuk mengambil senyawa bioaktif secara langsung dari tanamannya dibutuhkan sangat
banyak biomassa atau bagian dari tanamannya. Untuk mengefisienkan cara memperoleh
bioaktif tersebut, maka digunakan mikroba endofit spesifik yang diperoleh dari bagian
dalam tanaman yang diharapkan mampu menghasilkan sejumlah senyawa bioaktif yang
dibutuhkan tanpa harus mengekstrak dari tanamannya (Haniah, 2008).
Mikroba endofit adalah organisme hidup yang berukuran mikroskopis yang hidup di
dalam jaringan tanaman (xylem dan phloem), daun, akar, buah, dan batang.
Menurut Susilowati (Tanpa Tahun) bahwa pemanfaatan mikroba endofit dalam
memproduksi senyawa aktif memiliki beberapa kelebihan, antara lain (1)
lebih cepat menghasilkan dengan mutu yang seragam, (2) dapat diproduksi
dalam skala besar dan (3) kemungkinan diperoleh komponen bioaktif baru
dengan memberikan kondisi yang berbeda.

RUMUSAN
MASALAH
Berdasarkan latar belakang yang diuraikan di atas, maka
dibuat rumusan masalah yang perlu diteliti sebagai
berikut:

Apakah senyawa aktif yang dihasilkan bakteri


endofit mempunyai kemampuan sebagai antibakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus ?

TUJUAN PENELITIAN
Berdasarkan rumusan masalah di atas, maka penelitian ini
bertujuan:

Untuk mendapatkan (isolasi) bakteri endofit dari


jaringan daun sirih (Piper betle L.).
Untuk mengetahui kemampuan senyawa aktif yang
dihasilkan bakteri endofit sebagai antibakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

T
A
A
NF IAN
A
M
T
I
L
E
N
PE
Memberikan informasi tentang
adanya bakteri endofit pada
jaringan daun sirih (Piper betle
L.).
Memperbanyak pengetahuan di bidang
mikrobiologi atau bidang lainnya,
khususnya bakteri endofit yang
mempunyai potensi sebagai penghasil
senyawa antibakteri.
Senyawa antibakteri yang didapat, diharapkan
nantinya dikembangkan lebih lanjut sehingga
bermanfaat untuk menanggulangi penyakit yang
disebabkan oleh Escherichia coli dan
Staphylococcus aureus.

Bakteri endofit dari daun sirih (Piper betle


L.) memiliki aktifitas antibakteri terhadap
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
Bakteri endofit dari daun sirih (Piper betle
L.) tidak memiliki aktifitas terhadap
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

HIPOTESA

Penelitian ini akan dilaksanakan


dari bulan April-Juli 2014 di
Laboratorium Mikrobiologi
Farmasi STIKES HI Jambi.

WAKTU DAN
TEMPAT PENELITIAN

ALAT
Alat-alat yang digunakan dalam
penelitian ini adalah
laminar

air flow cabinet


Autoclave
cawan petri
jarum ose
Bunsen
kompor listrik
pengaduk kaca
Pinset
kertas saring
Inkubator
alumunium foil
Mikroskop

cover

glass
gelas objekgelas ukur
tabung reaksi
botol media
Erlenmayer
shaker incubator
Sentrifugasi
jangka sorong
timbangan analitik dan
silet.

BAHAN
Bahan-bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah
media

NA (nutrient agar)
media NB (Nutrien Brothi)
media MHA (Mueller Hinton
Agar)
media MHB (Mueller Hinton
Broth)
larutan NaOCl 1 %
larutan KOH 3 %
daun sirih (Piper betle L.)

aqua

steril
Spirtus
Kapas
biakan bakteri E. coli dan S.
aureus
alcohol 70 %
Kloramfenikol
kertas saring Whatman dan
tisu.

SKEMA KERJA
Isolasi bakteri endofit
Dicuci air mengalir (5 menit)
Direndam alcohol 70% (2 menit)
Diredam dengan NaOCl 1% (2 menit)
Dibilas dengan akuades steril (1 menit) 2 kali

Sterilisasi permukaan
Daun sirih ditempelkan pada media NA (sebagai kontrol)
Daun sirih dipitong dan ditumbuhkan pada media NA

Pemurnian dan identifikasi


Bakteri dimurnikan pada media NA
Bakteri diidentifikasi berdasarkan
penamatan morfologi koloni, uji
pewarnaan gram dan uji gram KOH 3%.

Fermentasi
Isolate bakteri endofit ditumbuhkan dan dilarutkan
pada media MHB hingga homogen
Di shaker selama 48 jam
Disentrifugasi dengan kecepatan 3800 rpm
selama 20 menit pada suhu 4 OC

Uji antibakteri
Merendam paper disk pada
metabolit
bakteri
endofit,
kloramfenikol dan akuades
Meletakkan paper diskpada cawan
petri yang sudah diberi bakteri
Escherichia
coli
dan
Staphylococcus aureus.

Pengamatan zona
bening/hambat

SEKIAN
&
TERIMA KASIH