REPLIKASI DNA DENGAN CARA

SEMIKONSERVATIF, KONSERVATIF, DAN DISPERSIF

OLEH :
NI MADE AYU LARASHATI
P07134013019

DEPARTEMEN KESEHATAN RI
POLITEKNIK KESEHATAN DENPASAR
JURUSAN ANALIS KESEHATAN
2013/2014

PEMBAHASAN
Replikasi DNA
Replikasi DNA adalah proses membuat salinan DNA. DNA bereplikasi dengan replikasi
semi-konservatif, yang berarti bahwa satu helai induk helix ganda adalah kekal dalam setiap
molekul DNA baru. Meselson dan Stahl adalah ilmuwan yang menunjukkan bahwa DNA
mengikuti model semi-konservatif. Mereka mampu menyangkal replikasi konservatif, dimana
semua DNA induk dilestarikan dalam molekul asli, setelah hanya satu putaran replikasi DNA.
Setelah empat ulangan lagi, mereka juga menyangkal replikasi dispersif, yang menunjukkan
bahwa DNA baru terdiri alternating induk dan anak DNA.

a. Model Semi Konservatif

Menurut hipotesa ini, rantai ganda DNA induk langsung membentuk salinan
berupa rantai ganda DNA baru tanpa ada pemisahan rantai ganda DNA induk terlebih
dahulu. Replikasi pertama menghasilkan dua rantai ganda DNA, terdiri dari satu rantai
ganda DNA induk dan satu rantai ganda DNA yang benar benar baru. Pada replikasi
kedua, masing masing rantai ganda DNA tersebut langsung membentuk salinan DNA
yang baru lagi. Akhirnya, menghasilkan empat buah DNA. Satu DNA tetap merupakan
DNA induk yang utuh dan tiga DNA merupakan DNA baru.
b. Model Semi Konservatif

Hipotesa model semi konservatif ini dikemukakan oleh Watson dan Crick,
menyatakan bahwa rantai ganda DNA induk membuka atau memisah terlebih dahulu
sehingga terbentuk dua buah rantai tunggal DNA. MAsing masing rantai tunggal
tersebut berfungsi sebagai cetakana untuk membentuk rantai tunggal DNA baru, melalui
pembentukan pasangan basa yang komplementer dengan basa nitrogen DNA induk.
Dengan demikian, hasil replikasi pertama adalah dua buah DNA.
Masing masing DNA terdiri dari satu rantai tunggal induk dan satu rantai
tunggal yang baru. Pada replikasi kedua, masing masing rantai ganda DNA tersebut
membuka kembali sehingga dihasilkan empat buah DNA. Dua buah DNA mengandung
rantai tunggal induk dan dua buah DNA yang lain merupakan rantai DNA baru.
c. Model Dispersif
Rantai ganda DNA hasil replikasi pertama maupun replikasi ke dua dari DNA
induk mengandung segmen campuran antara rantai DNA induk dan rantai DNA yang
baru. Artinya, rantai ganda DNA salinannya terdiri dari dua rantai tunggal DNA yang
masing masing mengandung segmen (bagian atau potongan) DNA induk dan segmen
DNA baru.
Pada akhir tahun 1950-an, Matthew Meselson dan Franklin Stahl melakukan percobaan
untuk menguji ketiga hipotesa tersebut. Meselson dan Stahl memutuskan cara terbaik untuk
menandai DNA induk akan mengubah salah satu atom dalam molekul DNA induk. Ingat bahwa
nitrogen ditemukan dalam basa nitrogen masing-masing nukleotida. Jadi mereka memutuskan
untuk menggunakan isotop nitrogen untuk membedakan antara induk dan DNA baru disalin.
Isotop nitrogen memiliki neutron tambahan dalam inti, yang membuatnya lebih berat.
Dapat dilihat dari tabel periodik yang sebagian atom nitrogen memiliki berat atom 14.
Kita menyebutnya atom N-14. Tapi sebuah isotop dengan tambahan neutron memiliki berat 15,
jadi kita menyebutnya N-15. Para ilmuwan memutuskan untuk memulai dengan molekul DNA
induk yang hanya berisi N-15. Kalau saja N-14 nukleotida yang tersedia selama replikasi DNA,
mereka akan mampu membedakan mana bagian datang dari untai ganda asli dan bagian mana
telah dibuat selama proses replikasi.
Untuk membuat DNA harus melalui banyak putaran replikasi, Meselson dan Stahl
memanfaatkan kekuatan reproduksi umum bakteri E. coli. Mereka memastikan bahwa batch
pertama dari bakteri yang terdapat hanya DNA N-15. Kemudian, mereka menempatkan bakteri
menjadi media yang hanya mengandung atom N-14. Dengan begitu, setiap kali bakteri

direproduksi, mereka akan dipaksa untuk menggabungkan N-14 ke dalam DNA baru mereka.
Para ilmuwan duduk kembali dan membiarkan bakteri mulai bekerja.
Dengan setiap generasi baru bakteri, Meselson dan Stahl mengambil sampel sehingga
mereka bisa melihat bagaimana DNA N-15 sedang didistribusikan dalam molekul anak.
Sekarang, mungkin kita bertanya-tanya, bagaimana mereka bisa membedakan antara DNA N-15
dan N-14 ? Bagaimana para ilmuwan mengetahui berapa banyak N-15 berada di dalam setiap
molekul?
Jawabannya adalah berat atom. Karena N-15 memiliki satu neutron tambahan, itu akan
sedikit lebih berat dari N-14 dan karena itu membuat molekul DNA lebih padat. Kita dapat
memisahkan molekul DNA berdasarkan perbedaan dalam kepadatan mereka. Untuk melakukan
ini, kita menggunakan sentrifus, sebuah perangkat tabung reaksi yang berputar dengan kecepatan
yang sangat tinggi. Ketika tabung reaksi diputar dalam sentrifugal, semua isi didorong ke arah
bawah. Zat yang tenggelam terberat jauh di bawah tabung, dan zat ringan mengapung. Jadi, jika
kita menerapkan gaya sentrifugal untuk campuran dua jenis DNA, berat DNA N-15 tenggelam
untuk tingkat yang lebih rendah daripada molekul N-14.
Setiap kali Meselson dan Stahl ingin mengambil sampel dari DNA bakteri, mereka harus
memotong organisme kecil dan mengosongkan semua isi ke dalam tabung reaksi. Mereka
dicampur dalam larutan garam dan kemudian memutar tabung reaksi selama berjam-jam untuk
membuat zat memisah. Kemudian mereka menggunakan teknik khusus untuk melihat seberapa
jauh molekul DNA tenggelam di dalam tabung.
Ketika sampel kelompok bakteri pertama mereka, Meselson dan Stahl melihat sebuah
pita gelap dalam tabung tes di mana DNA N-15 telah tenggelam dan berkumpul di satu tempat.
Tapi setelah mereka membiarkan bakteri berkembang biak, mereka mendapat hasil yang jauh
berbeda dalam sampel mereka. DNA masih tenggelam di dalam tabung, tetapi tidak hampir
sejauh generasi pertama. Ini adalah bentuk ringan dari DNA, yang berarti bahwa itu tidak benarbenar dibuat dengan isotop N-15. Setelah satu replikasi, semua DNA telah diubah menjadi
hibrida DNA N-15 dan N-14
Hasil Dari Percobaan
Segera, Meselson dan Stahl tahu bahwa mereka bisa mengesampingkan salah satu dari
tiga model. Model konservatif, yang menunjukkan bahwa molekul DNA asli tetap utuh,harus
palsu. Model konservatif memperkirakan bahwa percobaan sentrifugasi akan menghasilkan dua
pita yang berbeda - satu pita yang mewakili DNA dengan hanya N-15 dan satu pita yang
mewakili DNA dengan hanya N-14. Karena mereka mengamati hanya satu pita dengan DNA

kepadatan menengah, mereka tahu bahwa setiap satu dari molekul DNA baru masing-masing
terkandung campuran dari kedua bentuk nitrogen.
Tapi Meselson dan Stahl masih harus mencari tahu apakah replikasi DNA mengikuti
dispersif atau model semi-konservatif. Karena kedua model akan menghasilkan hibrida induk
dan anak DNA, pita menengah masih konsisten dengan kedua model. Dalam rangka untuk
mencari tahu apa yang sebenarnya terjadi, Meselson dan Stahl harus membiarkan bakteri tetap
bereplikasi dan mempelajari sampel DNA setelah setiap generasi.
Sebelum kita mencari tahu apa yang sebenarnya terjadi, mari kita berpikir tentang
kemungkinan yang tersisa untuk percobaan ini. Bagaimana kita akan tahu apakah replikasi DNA
adalah dispersif atau semi-konservatif? Apa yang kita harapkan untuk melihat apakah salah satu
dari model yang mungkin itu benar?
Pertama, kita akan menganggap model dispersif benar menggambarkan replikasi DNA.
Dalam replikasi dispersif, DNA disalin dalam potongan pendek, dan hasilnya adalah molekul
yang bergantian potongan DNA induk dengan anak DNA. Setelah satu replikasi, molekul baru
akan 50% induk dan 50% anak DNA. Setelah replikasi lain, hasilnya akan menjadi 25% dari
induk asli dan 75% DNA baru disalin.
Jadi dalam setiap generasi, jumlah DNA induk akan dipotong setengah. Dalam kasus
percobaan, generasi kedua ini akan memiliki DNA 25% N-15 dan 75% N-14 . Pada generasi
ketiga, hanya akan 12,5% dari DNA N-15. Jadi kita akan selalu berharap untuk melihat salah
satu pita DNA terus menerus dalam tabung tes. Pita ini akan bergerak sedikit lebih tinggi pada
tabung pada setiap generasi ketika molekul DNA menjadi semakin ringan dan lebih ringan.
Di sisi lain, data apa yang kita harapkan untuk melihat apakah model semi-konservatif
yang benar? Dalam model ini, setiap molekul DNA baru akan berisi satu untai DNA induk penuh
terkait di tengahnya dengan satu untai DNA penuh anak. Setelah satu replikasi, semua DNA baru
akan memiliki kepadatan yang sama. Tapi, setelah putaran kedua replikasi, dua jenis DNA akan
muncul: beberapa hibrida N-15 dan N-14, seperti babak sebelumnya, dan beberapa yang
sepenuhnya terdiri dari DNA N-14.
Hal ini karena untai induk asli, ketika terpecah satu sama lain di awal, dilestarikan dan
disimpan sebagai helai DNA N-15 terus menerus. Mereka helai induk dapat bermitra dengan N14 nukleotida baru, tetapi mereka selalu akan terhubung sepanjang rantai. Oleh karena itu, ketika
jumlah N-14 akan tumbuh dan berkembang atas setiap generasi, akan selalu ada dua molekul
DNA yang mengandung satu untai DNA induk masing-masing . Dalam percobaan, kita akan

mengharapkan untuk melihat dua band terpisah muncul dalam tabung uji: satu dengan
pertumbuhan populasi DNA N-14 dan satu dengan hibrida N-15 awal.
Ternyata, Meselson dan Stahl mengamati pemisahan band yang menjadi lebih jelas pada
setiap generasi baru. Mereka hanya harus mengamati empat putaran replikasi sebelum mereka
tahu pasti bahwa model semi-konservatif itu benar.
Ini adalah terobosan besar dalam bidang biologi karena begitu banyak ilmuwan telah
berdebat tentang masalah replikasi DNA. Meselson dan Stahl mampu membantah dua hipotesis,
dan sangat mendukung hipotesa dari Watson dan Crick yaitu model semi konservatif.

DAFTAR PUSTAKA
Yanto,Budi.2013.Tiga Model Replikasi DNA.http://smabiologi.blogspot.com/2013/06/tigamodel-replikasi-dna.html.Diakses tanggal 20 Oktober 2013.
Rochmah, S.N., Sri Widayati, Mazrikhatul Miah.2009. Biologi : SMA dan MA Kelas XII. Pusat
Perbukuan, Departemen Nasional, Jakarta, p.282.