PRAKTIKUM
MIROBIOLOGI
INDUSTRI
MATERI
ALKOHOL
Disusun Oleh:
Fatikhatul K. Ika S.
Oei Stefanny Yuliana
Satria Arief W.B.
NIM : 21030111120001
NIM : 21030111130062
NIM : 21030111130066
ALKOHOL
HALAMAN PENGESAHAN
Kelompok
Nama
Materi
: 13 / selasa
: Fatikhatul K. Ika S.
Oei Stefanny Yuliana
Satria Arief W. B.
: Alkohol
21030111120001
21030111130062
21030111130066
Laboran
Puspita Firsty L.
NIM. L2C009126
Jufriyah, S.T
NIP. 19700109 199703 2 001
Dosen Pembimbing
RINGKASAN
Alkohol sangat diperlukan oleh manusia untuk obat-obatan, kosmetik, dan
sebagainya. Alkohol dibuat dari bahan yang mengandung gula. Alkohol adalah
senyawa yang memiliki gugus R-OH dan dapat dibut dalam berbagai macam cara,
salah satunya dengan fermentasi. Karena pentingnya alkohol maka industry yang
membuat alkohol semaikn banyak dijumpai, khususnya di negara maju.
Fermentasi berasal dari kata fermence yang berarti mendidih. Hal ini terjadi
pada gejala fermentasi yang terlihat gelembung udara yang merupakan akibat
katabolisme aerobik menghasilkan CO2. Mulanya fermentasi digunakan untuk
menunjukan proses perubahan gula menjadi alkohol yang berlangsung anaerob.
Kemudian berkembang menjadi seluruh perombakan senyawa organik yang
dilakukan mikroorganisme yang melibatkan enzim yang dihasilkan.
Laboratorium Mikrobiologi Industri
ALKOHOL
Dalam percobaan kami menggunakan sari mangga untuk fermentasi
menghasilkan alkohol. Langkah pertama yang dilakukan adalah pembuatan starter
dengan sari buah mangga yang dicampur fermipan; 0,02 gr MgSO 4; 0,2 gr KH2PO4;
0,1 gr urea. Aerasi starter dilakukan selama 3 hari. Setelah itu fermentasi dengan
penambahkan starter 25%v, 30%v, 35%v. fermentasi dilakukan 5 hari dengan
mencatat kadar glukosa sisa dan densitas hasil.
Dari data yang diperoleh, densitas, jumlah koloni mengalami kenaikan pada
proses pembuatan starter. Kadar glukosa sisa selama proses fermentasi mengalami
penurunan karena aktivitas Saccharomyces cereviceae yang mengkonversi sebagian
gula mnejadi etanol. Semakin banyak volume starter yang ditambahkan juga
menyebabkan semakin berkurangnya kadar glukosa sisa. Karena semakin banyak
Saccharomyces cereviceae yang mengkonsumsi dan mengubah gula mnejaid etanol.
Dapat disimpulkan semakin besar volume starter yang ditambahkan dan
semakin lama waktu fermentasi menyebabkan penurunan kadar glukosa sisa. Saran
dalam percobaan ini adalah pada pembuatan starter, yeast dimasukkan saat media
sudah dingin, waktu optimum fermentasi sebaiknya 4 hari, dan harus teliti pada
analisa kadar glukosa sisa.
SUMMARY
Alcohol is needed by humans for medicines, cosmetics, and so forth. Alcohol
is made from materials that contain sugar. Alcohol is a substance that has the R-OH
group and can dibut in a variety of ways, one with fermentation. Because of the
importance of the alcohol industry, which makes alcohol semaikn prevalent,
particularly in developed countries.
Fermentation fermence derived from the word which means to boil. This
occurs in the visible symptoms of fermentation air bubbles are a result of aerobic
catabolism produces CO2. Originally used to refer to the process of fermentation of
sugar into alcohol changes that lasted anaerobe. Later developed into entire
overhaul of organic compounds that do microorganisms involving enzymes
produced.
In our experiments using mango juice for fermentation produces alcohol. The
first step is the creation starter with mango juice mixed fermipan; 0.02 g MgSO4;
0.2 g KH2PO4; 0.1 g of urea. Aeration starter made for 3 days. After that
fermentation with the addition of starter 25% v 30% v 35% v. fermentation carried
out 5 days with record levels of residual glucose and density results.
From the data obtained, the density, the number of colonies has increased in
the process of making a starter. Residual glucose levels decreased during the
Laboratorium Mikrobiologi Industri
ALKOHOL
fermentation process because cereviceae Saccharomyces activity that converts the
sugar mnejadi ethanol. The more volume the added starter also leads to the
reduction in residual glucose. As more and more consuming and Saccharomyces
cereviceae mnejaid convert sugar ethanol.
It can be concluded that the greater the volume of starter added and the
longer fermentation causes a decrease in blood glucose residue. Suggestions in this
experiment is the manufacture of starter, yeast is added when the medium has cooled,
the optimum fermentation time should be 4 days, and to be thorough in the analysis
of residual glucose.
PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala limpahan
rahmat, karunia dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Laporan
Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri dengan materi Alkohol.
Dalam laporan ini penulis meyakini sepenuhnya bahwa tidaklah mungkin
menyelesaikan makalah ini tanpa doa, bantuan dan dukungan baik secara langsung
maupun tidak langsung. Pada kesempatan ini penulis ingin memberikan rasa terima
kasih kepada :
1. Asisten Laboratorium Mikrobiologi Industri Universitas Diponegoro.
2. Kedua orang tua atas doa, kesabaran, limpahan kasih sayang, dukungan, dan
pengorbanan yang telah diberikan.
3. Teman-teman angkatan 2011 Teknik Kimia Universitas Diponegoro.
Penulis menyakini bahwa laporan ini jauh dari kesempurnaan. Mohon maaf
apabila terdapat kekurangan bahkan kesalahan. Penulis mengharapkan kritik dan
saran yang membangun dari semua pihak berkaitan dengan laporan ini. Akhir kata,
semoga laporan ini dapat bermanfaat bagi semua pihak dan dapat berguna sebagai
bahan penambah ilmu pengetahuan.
ALKOHOL
ALKOHOL
DAFTAR ISI
HALAMAN PENGESAHAN.......................................................................... ii
RINGKASAN...................................................................................................iii
SUMMARY.......................................................................................................iv
PRAKATA........................................................................................................v
DAFTAR ISI.....................................................................................................vi
DAFTAR TABEL.............................................................................................viii
DAFTAR GAMBAR........................................................................................ix
BAB I PENDAHULUAN.................................................................................1
1.1 Latar Belakang ..................................................................................1
1.2 Tujuan Percobaan...............................................................................1
1.3 Manfaat Percobaan.............................................................................2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.......................................................................3
2.1. Landasan Teori yang Mendukung.....................................................3
1. Pengertian Umum Alkohol.......................................................3
2. Pembuatan Starter.....................................................................3
3. Teori Fermentasi.......................................................................4
4. Penyiapan Bersih..........................................................................4
5. Mekanisme Fermentasi Alkohol...................................................5
6. Langkah Fermentasi Alkohol.......................................................6
7. Komposisi Utama Proses Fermentasi...........................................6
8. Fungsi Aerasi pada Pertumbuhan Bakteri....................................6
9. Hal-hal yang Mempengaruhi Fermentasi.....................................7
10. Fungsi Reagen............................................................................7
11. Manfaat Alkohol.........................................................................8
2.2. Penelitian Terdahulu.........................................................................8
BAB III METODOLOGI PERCOBAAN........................................................10
3.1 Bahan dan Alat yang Digunakan........................................................10
3.2 Gambar Alat dan Keterangan.............................................................10
3.3 Variabel Percobaan.............................................................................11
3.4 Cara Kerja..........................................................................................12
Laboratorium Mikrobiologi Industri
ALKOHOL
BAB IV HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN.................................15
4.1 Hasil Percobaan.................................................................................15
4.2 Pembahasan........................................................................................15
1. Fenomena Fermentasi Ethanol dari Sari Mangga........................15
2. Pengaruh Waktu Fermentasi Terhadap %SB...............................18
3. Pengaruh %Volume Starter Terhadap %SB.................................19
BAB V PENUTUP...........................................................................................21
5.1 Kesimpulan........................................................................................21
5.2 Saran..................................................................................................21
DAFTAR PUSTAKA........................................................................................22
LEMBAR PERHITUNGAN............................................................................A-1
LAPORAN SEMENTARA..............................................................................B-1
LEMBAR KUANTITAS REAGEN.................................................................C-1
REFERENSI
LEMBAR ASISTENSI
DAFTAR TABEL
Tabel IV.1 Tabel %SB variabel 1 sampai 6 dari hari ke 1 sampai ke 6.............15
Tabel IV.2 Tabel Densitas Starter I dan II..........................................................15
Tabel IV.3 Tabel Jumlah Koloni Pada Hari Pertama Pembuatan Starter...........16
Tabel IV.4 Tabel Jumlah Koloni Pada Hari Ketiga Pembuatan Starter..............16
ALKOHOL
DAFTAR GAMBAR
Gambar III.1 Rangkaian Alat............................................................................10
Gambar IV.1 Grafik Waktu vs % SB Pada Fermentasi Sari Buah Mangga......18
Gambar IV.2 Grafik Perbandingan %V Starter vs %SB dari hari 1 s.d. 2........19
ALKOHOL
BAB I
PENDAHULUAN
I.1.
Latar Belakang
Seiring dengan berkembangnya teknologi dan bertambahnya penduduk,
energi sebagai kebutuhan manusia cenderung meningkat. Bahan bakar fosil
yang saat ini digunakan tidak akan bertahan dalam jangka waktu lama. Apabila
tidak ditemukan cadangan energi terbaharui, minyak bumi diperkirakan akan
habis dalam waktu kurang dari 10 tahun, gas bumi 30 tahun dan batubara akan
habis sekitar 50 tahun. Oleh sebab itu diperlukan sumber energi alternatif baru
yang mampu mencukupi atau menghemat penggunaan enrgi dari bahan bakar
fosil.
Bioethanol merupakan salah satu sumber energi alternatif yang terbaharui.
Bioethanol mudah terbakar dan memiliki kalor bakar yang besar, yaitu kira kira
2/3 dari reaktor bakar netto bensin.bioethanol dapat dibuat dari zat pati/
amilum (C6H10O5)n yang dihidrolisa menjadi glukosa kemudian difermentasi
dengan mikroorganisme Saccharomyces cereviceae pada suhu kamar (2730oC). Hasil fermentasi kemudian didestilasi sehingga dihasilkan ethanol
dengan Kadar 95, 6%.
Pada percobaan kali ini digunakan bahan baku sari mangga sebagai media
fermentasi alkohol. Sari mangga dipilih karena karbohidratnya yang lumayan
tinggi, yaitu sekitar 15 gram dalam 100 gram sari buah (USA Nat. Nutrient
Database, 2010) Tingginya kadar glukosa meningkatkan konversi ethanol.
I.2.
Tujuan Percobaan
1. Mengetahui % glukosa sisa pada proses fermentasi ethanol dengan bahan
baku sari mangga pada berbagai konsentrasi substrat dan presentase %
volume starter yang bervariasi.
2. Mengetahui konversi volume ethanol yang dihasilkan pada berbagai
konsentrasi substrat dan penambahan % volume starter yang berbeda.
I.3.
Manfaat Percobaan
1. Mampu membuat starter untuk pembuatan alkohol.
2. Mampu mengetahui proses pembuatan alkohol dengan fermentasi.
ALKOHOL
3. Dapat melakukan percobaan sesuai prosedur.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
II.1. Landasan Teori yang Mendukung
1. Pengertian Umum Alkohol
Alkohol adalah senyawa yang memiliki rumus molkul R-OH gugus
alkil tersubstitusi. Gugus ini bisa alkohol primer, sekunder, tersier bisa
juga rantai terbuka. Ikatan rangkap ataupun rantai tertutup atau siklis yang
berikatan dengan gugus aromatis. (Organic Chemistry 3th hal 492-493).
Alkohol dapat dibuat dari bahan yang mengandung gula atau dari bahan
yang dapat dijadikan gula. Bagi bahan bergula pembuatan alkohol lebih
sederhana. Untuk bahan yang dapat dijadikan gula diperlukan proses
pendahuluan
yang
disebut
sacharifikasi,
macam-macam
proses
sacharifikasi :
Laboratorium Mikrobiologi Industri
ALKOHOL
1. Sacharifikasi secara kimia
Contohnya hidrolisa secar kimia dengan katalisator asam, misalnya
hidrolisa pati dengan katalisator HCl ataupun H2SO4.
2. Sacharifikasi secara biokimia
Yaitu dengan aktivitas enzim misalnya amilase dan selulosa, misalnya
sacharifikasi pati secara biochemist dengan amilase.
2. Pembuatan Starter
Tujuan pembuatan starter untuk memperbanyak yeast dan untuk
melatih yeast tersebut pada kondisi yang akan difermentasi. Syarat yeast
a.
b.
c.
d.
maltosa.
Tahan terhadap mikroba lain.
3. Teori Fermentasi
Fermentasi berasal dari kata fervere yang berarti mendidih. Hal ini
tejadi pada gejala fermentasi yang terlihat gelembung udara yang
merupakan akibat katabolisme anaerob yang menghasilkan CO2. Mulanya
fermentasi digunakan untuk menunjukan proses perubahan glukosa
menjadi alkohol yang berlangsung anaerob, kemudian berkembang
menjadi
seluruh
perombakan
senyawa
organik
yang
dilakukan
ALKOHOL
Hasil dari tabung yeast dimasukan ke dalam ruang fermentasi. Pada
mulanya yeast memerlukan O2 untuk pertumbuhannya maka pada larutan
anaerob diberikan O2. Setelah terjadi CO2 dan reaksi menjadi anaerob,
pemberian O2 dihentikan dan diusahakan tidak ada O2 yang masuk pada
ruang fermentasi. Suhu selama fermentasi harus dijaga pada kondisi
optimum antara 20-30oC,
waktu fermentasi biasanya 30-70 jam. Tergantung pada suhu fermentasi,
konsentrasi gula dan faktor lain.
( Buku Petunjuk Praktikum Mikrobiologi Industri )
etanol
jalurHDP
2 piruvat
2NAD,2NaOH
2 Asetaldehi d
CH CHO KOA
3
CH COCOH
3
CH NADH
3
2
CH 3 CO KOA NADH
Piruvat, dekarboksilase
CH CH OH NAD
3
Heksokinase
Glukosa 6 phospat
NAD,NADH
6 Phospat glukonat
H2O
Phospoglukonat dehidrase
2 Keto 3 deoksiglukonat 6 phospat
(KDOP)
Acetaldehid
NAD
NADH 2 piruvat
2 ADP, 2 ATP
Gliseraldehid 3 phospat + CO2
ALKOHOL
NADH, NAD
Ethanol
Proses fermentasi diatas termasuk fermentasi heterolaktat. Fermentasi
1 mol glukosa menghasilkan masing-masing 1 mol asam laktat, ethanol
dan karbondioksida melalui jalur fosfoketolase (thean dan lues, 2011).
Glukosa 1 mol dikonversi menjadi glukosa 6 phospat dengan bantuan
molekul ATP dan enzim heksokinase. Glukosa 6 phospat yang tinggi akan
mengkonversi sendiri fruktosa 6 phospat menjadi 6 phospat glukonat.
Phospat 6 glukonat bereaksi dengan air dan dengan bantuan enzim
phospoglukonat dehidrase menghasilkan 2 keto 3 deoksiglukonat 6
phospat. Kemudian dipecah menjadi acetaldehide dan gliseraldehide 3
phospat. Acetaldehide dengan bantuan NADH dan NAD akan dikonversi
menjaid etanol, sedangkan gliseraldehide 3 phospat akan dikonversi lebih
lanjut menjadi asam laktat.
(jurnal sciencedirect Factors Affecting Ethanol Fermentation Using
Saccharomyces cereviceae BY4742, www.sciencedirect.com )
6. Langkah Fermentasi Alkohol
1.
2.
3.
4.
5.
Persiapan Inokulum
Persiapan Media
Fermentasi
Analisa Ethanol
Analisa Glukosa
Fermentasi media.
Sterilisasi media, fermentasi dan peralatan.
Produk starter yang aktif, murni untuk inokulasi skala tangki industri.
Pemeliharaan, pertumbuhan mikroorganisme pada aktivitas yang
ALKOHOL
9. Hal-hal yang Mempengaruhi Fermentasi
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Kadar gula
pH
Waktu
Suhu
Nutrien
Volume Starter
Pemilihan Yeast
O2
: 10-18%
: 4-4,5
: 7 hari
: 80oF
: mengandung unsur makro dan mikro nutrient
: 5%V
: sesuai dengan syarat yang sudah ditentukan
: tidak diperlukan
ALKOHOL
biomassa lain. Secara umum, produksi bioetanol ini mencakup 5 rangkaian
proses yaitu :
1. Persiapan Bahan Baku
Bahan baku untuk produksi bioetanol bisa didapatkan dari berbagai
tanaman baik secara langsung yang menghasilkan gula sederhana ataupun
dari tepung jagung, singkong, dan lainnya. Tebu dan gandum digiling
untuk mengekstrak gula, tepung, dan material selulosa dihancurkan.
Tepung dikonversi menjadi gula dan sacharifikasi dengan penambahan air,
enzim, dan panas.
2. Tahapan Liquifaction
Pencampuran dengan air secara merata hingga menjadi bubur, lalu pH
diatur dan enzim dipanaskan. Pemanasan bubur 800C-900C, dimana tepung
yang bebas akan mengalami gelatinasi.
3. Tahap Sacharifikasi (Pemecahan Gula Kompleks Menjadi Gula Sederhana)
- Pendinginan bubur sampai suhu optimum,
- Pengaturan pH,
- Penambahan enzim,
- Mempertahankan pH dan suhu 500C-600C.
4. Fermentasi
Melibatkan penambahan enzim yang diletakkan pada ragi agar dapat
bekerja pada suhu optimum. Proses ini menghasilkan etanol dan CO2.
Bubur lalu dialirkan kedalam tangki fermentasi dan didinginkan pada suhu
optimum 270C-320C. dilakukan pada kondisi bebas kontaminasi.
Selanjutnya, ragi menghasilkan etanol 8%-12%.
5. Destilasi
Destilasi dilakukan untuk memisahkan etanol dari etanol cair tersebut
dengan memanaskan larutan tersebut pada suhu 780C-1100C akan
mengakibatkan sebagian besar etanol menguap dan akan dihasilkan 95%V.
( Hidayat, N. Achmad, 2006 )
ALKOHOL
BAB III
METODOLOGI PERCOBAAN
III.1 Alat dan Bahan yang Digunakan
A. Bahan
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Glukosa
KH2PO4
MgSO4
NaOH secukupnya
H2SO4 encer secukupnya
Indikator MB secukupnya
Aquadest secukupnya
B. Alat
1.
2.
3.
4.
:
8.
9.
10.
11.
12.
Ragi roti
Fehling A+B secukupnya
Sari buah mangga
Urea
Sukrosa
5.
6.
7.
8.
Beaker glass
Pengaduk
Autoclave
Kompor listrik
:
Erlenmeyer
Buret, Statif, Klem
Gelas ukur
Pippet tetes
3.
4.
.
2
6.
5.
7.
Keterangan :
1. Buret, Statif, Klem, Erlenmeyer 5. Pengaduk
Laboratorium
Mikrobiologi Industri
2. Gelas Ukur
6. Autoclave
3. Pippet Tetes
7. Kompor Listrik
4. Beaker Glass
ALKOHOL
Volume : 100 ml
MgSO4 : 0,02 gr
Urea
: 0,1 gr
KH2PO4 : 0,2 gr
Fermipan: 0,4 gr
pH : 4
waktu
: 3 hari
2.Fermentasi
variabel berubah
starter1 : 75ml sari mangga + 25ml lar gula
starter2 : 25ml sari mannga +75ml lar gula
fermentasi
%v starter = 25%v, 30%v, 35%v
var1 : 60ml starter 1
var2 : 60ml starter 2
var3 : 70ml starter 1
var4 : 70ml starter 2
Volume : 200 ml
MgSO4 : 0,02 gr
Urea
: 0,1 gr
KH2PO4 : 0,2 gr
Fermipan : 0,4 gr
waktu
: 7 hari
glukosa.
6. Menghitung jumlah koloni dengan alat Hemositometer
- Ambil 1 ml starter kemudian diencerkan sampai 10 ml.
- Ambil 1 ml larutan tersebut diencerkan lagi menjadi 10 ml.
- Letakan beberapa tetes larutan tersebut pada kaca preparat
-
ALKOHOL
7. Larutan lalu diaerasi selama 3 hari.
B. Fermentasi Media
1. Analisa Glukosa Standar
a. Pembuatan glukosa standar.
b. Larutkan 1,25 gram glukosa anhidrit sampai 500 ml.
c. Standarisasi kadar glukosa :
- Ambil 5 ml glukosa standar, encerkan sampai 100 ml, ambil
2.
3.
4.
5.
C. Analisa Hasil
1. Ukur volume total dan densitas setelah fermentasi.
2. Cari F dan M.
3. Analisa kadar glukosa hasil fermentasi dengan rumus :
10
ALKOHOL
V total V pengenceran
100 0.0025
V titrasi V yang diambil
%h=
V total
4. Menghitung volume alkohol
a. Kadar alkohol terfermentasikan (%gf)
gF=14 %h
b. Mol glukosa terfermentasi
%gF hasil fermentasi V hasil fermentasi
X mol=
BM glukosa
c. Volume alkohol
2 X mol BM etanol
V=
etanol
( FM )
BAB IV
HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN
IV.1 Hasil Percobaan
11
ALKOHOL
Berikut adalah hasil fermentasi ethanol dari sari buah mangga yang kami
lakukan.
Analisis
kadar
glukosa
dilakukan
dengan
metode
titrasi
Var 1
%SB
10.02
8.36
8.99
5.1
3.45
Var 4
Hari
%SB
1
5.6
2
6.511
3
4.746
4
7.84
5
0.02
Hari
1
2
3
4
5
Var 2
%SB
11.66
11.11
8.276
2.77
2.65
Var 5
Hari
%SB
1
11.21
2
7.425
3
7.706
4
2.39
5
1.86
Hari
1
2
3
4
5
Var 3
%SB
11.66
9.31
8.643
8.387
1.56
Var 6
Hari
%SB
1
10.472
2
3.7
3
3.25
4
1.86
5
2.94
Variabel/Hari
I
II
2
3
1,0592
1,095
1,0588
1,076
Tabel IV.2. Densitas Starter I dan II dalam Satuan g/ml
12
ALKOHOL
Dengan menggunakan hemocytometer dengan pengenceran 100ml,
didapatkan koloni yang ada pada hari pertama pembutan starter adalah
sebagai berikut:
Starter
Jumlah Koloni
I
1,65 x 1029
II
1,65 x 1031
Tabel IV.3. Jumlah Koloni Pada Hari Pertama Pembuatan Starter
dalam Satuan (yeast sample-1)
Sedangkan dengan metode dan volume pengenceran yang sama,
didapatkan koloni yang ada pada hari ketiga pembuata starter adalah sebagai
berikut:
Starter
Jumlah Koloni
I
1.12 x 1040
II
1.23 x 1044
Tabel IV.4. Jumlah Koloni Pada Hari Ketiga Pembuatan Starter
dalam Satuan (yeast sample-1)
b. Dari Tabel 2 dan Tabel 3 terlihat jelas bahwa terjadi kenaikan jumlah
koloni
yang
Saccharomyces
sangat
signifikan.
cereviceae
Hal
berkembang
ini
menunjukkan
dengan
sangat
bahwa
pesat,
pertumbuhan dan
13
ALKOHOL
berkembangnya S.cereviceae yang ada. Trend densitas yang cenderung
naik ini menunjukkan adanya aktivitas S.cereviceae dalam berkembang
dan tumbuh, termasuk didalamnya memfermentasikan glukosa menjadi
ethanol, sehingga menunjukkan berhasilnya fermentasi yang kami
lakukan.
Ditinjau dari %SB (Glukosa), fermentasi yang kami lakukan juga
dapat dikatakan berhasil, karena per harinya kadar glukosa cenderung
menurun, mengindikasikan adanya konsumsi gula dari S.cereviceae untuk
dijadikan ethanol. Berikut adalah reaksinya:
C6H12O6 2 CH3CH2OH + 2 CO2
(Ballinger, P.; Long, F. A. 1960. Acid Ionization Constant of Methanol
and some other Related Compounds. Journal of the American
Chemical Society 82)
(Morais PB, Rosa CA, Linardi VR, Carazza F, Nonato EA. 1996.
Production of fuel alcohol by Saccharomyces strains from tropical
habitats. Biotechnology Letters 18)
Variabel I
Variabel 2
10
%SB
Variabel 3
Variabel 4
Variabel 5
0
0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5
Variabel 6
Waktu (Hari)
Gambar 4.2.1. Grafik Waktu vs %SB Pada Fermentasi Sari Buah Mangga
Grafik diatas menunjukkan %SB cenderung menurun seiring dengan
waktu, meskipun pada beberapa titik sempat mengalami kenaikan. Hal ini
Laboratorium Mikrobiologi Industri
14
ALKOHOL
diakibatkan
oleh
aktivitas
S.cereviceae
yang
ada
pada
treatment,
15
ALKOHOL
Grafik Perbandingan %V Starter vs %SB pada Hari Keempat Fermentasi Grafik Perbandingan %V Starter vs %SB pada Hari Ketiga Fermentasi
10
10
8
Starter 1
Starter 2
Starter 1
Starter 2
0
25 30 35 40 45
25 30 35 40 45
Grafik Perbandingan %V Starter vs %SB pada Hari Pertama Fermentasi Grafik Perbandingan %V Starter vs %SB pada Hari Kedua Fermentasi
14
12
12
10
10
8
6
Starter 1
Starter 1
Starter 2
Starter 2
4
2
0
25 30 35 40 45
25 30 35 40 45
16
ALKOHOL
Starter 1
Starter 2
1.5
1
0.5
0
25 30 35 40 45
Gambar 4.2.2. Grafik Perbandingan %V Starter vs. %SB dari Hari 1 s.d. 2
Pada Grafik hari ke-2 dan hari ke-3, trend %SB menurun seiring dengan
naiknya %V yang ada di treatment. Hal ini sesuai dengan fenomena yang
seharusnya, dimana semakin banyak starter yang dimasukkan ke dalam
treatment, laju konversi ethanol seharusnya semakin tinggi karena agen
pengonversinya juga bertambah. Akan tetapi, pada grafik hari pertama,
keempat dan kelima, fenomena yang terjadi tidak demikian. Hal ini
dikarenakan distribusi S.cereviceae dalam starter yang tidak merata. Sehingga
dalam 25%, 30% dan 35%V belum tentu ada sejumlah S.cereviceae dalam
persen yang sama. Hal ini menyebabkan pada 25% bisa saja memiliki lebih
banyak S.cereviceae yang ada dalam starter dibandingkan 30% atau 35%V.
17
ALKOHOL
BAB V
PENUTUP
V.1
KESIMPULAN
1. Fenomena fermentasi sari mangga ethanol dapat dilihat dari fenomena
penurunan kadar glukosa dan penurunan densitas serta konversi % glukosa
menjadi ethanol.
2. Penurunan densitas starter disebabkan karena mulai terjadi fermentasi
akibat tidak adanya aerasi starter dan kenaikan densitas terjadi karena
bertambahnya massa larutan.
3. Semakin banyak %v starter jumlah Saccharomyces cereviceae semakin
banyak.
4. Penurunan % glukosa, semakin lama waktu fermentasinya semakin turun.
V.2
SARAN
1. Fermentasi harus dilakukan pada media yang terisolasi sempurna
2. Untuk menaikan kadar gula pereduksi sebaiknya ditambahkan glukosa.
3. Sebaiknya dilakukan aerasi starter agar fermentasi berjalan baik.
18
ALKOHOL
DAFTAR PUSTAKA
Villen, Rahael Almund, Walfer Bazani, Antonio Sacco Netto. Influence up the
Accumulation of phospate and Mg ions in the yeast cells on the ethanol
Productivity in batch. Ethanol fermentation. Brazillian archivas of
Biology and technology (2009).
Watanabe, Masaroni. Bioethanol production from rice washing drainage and rice
Bran. Journal of bioscience and bioengineering vol 108 no 6, 524-526
(2009).
19
ALKOHOL
LEMBAR PERHITUNGAN
Pembuatan Starter
1. menghitung starter
Hari I
starter 1= 1,078 gr/ml
starter 2 = 1,0754 gr/ml
Hari II
starter 1 = 1,095 gr/ml
starter 2 = 1,076 gr/ml
Hari III
starter 1 = 1,059 gr/ml
starter 2 = 1,0588 gr/ml
2. menghitung jumlah koloni
Hari I
1
31
x 33 x 10 x 10 x 100=1,6 x 10
yeast/sample
25
3
80 x 25 x 10 x 10
1
x 96 x 10 x 10 x 100=4,8 x 1031 yeast/sample
2.
25
3
80 x 25 x 10 x 10
Hari II
1
40
x 2240 x 10 x 10 x 100=1,12 x 10
1.
yeast/sample
25
3
80 x 25 x 10 x 10
1
x 2460 x 10 x 10 x 100=1,23 x 10 40 yeast/sample
2.
25
3
80 x 25 x 10 x 10
1.
Starter 1
25% :
30% :
35% :
21,3 ml10,5 ml
=10,02
gr
1,077
ml
21,3 ml8,76 ml
gr
= 11,6%
1,076
ml
21,3 ml8,86 ml
=11,6
gr
1,076
ml
Starter 2
A-1
ALKOHOL
25% :
30% :
35% :
2.
Starter 1
25% :
30% :
35% :
Starter 2
25% :
30% :
35% :
3.
21,3 ml15,29 ml
=5,6
gr
1,073
ml
21,3 ml9,08 ml
gr
= 11,21%
1,090
ml
21,3 ml10 ml
=10,472
gr
1,079
ml
23 ml13,9 ml
=8,36
gr
1,077
ml
23 ml11 ml
gr
= 11,11%
1,08
ml
23 ml13 ml
=9,31
gr
1,074
ml
23 ml16 ml
=6,511
gr
1,075
ml
23 ml15,02 ml
gr
= 7,425%
1,0774
ml
23 ml19 ml
=3,7
gr
1,0806
ml
Starter 1
25% :
30% :
35% :
Starter 2
25% :
25 ml15,83 ml
=8,99
gr
1,076
ml
25 ml16,63 ml
gr
= 8,276%
1,072
ml
25 ml16,2 ml
=8,643
gr
1,0754
ml
25 ml20,42 ml
=4,746
gr
1,07
ml
A-2
ALKOHOL
30% :
35% :
4.
Starter 1
25% :
30% :
35% :
Starter 2
25% :
30% :
35% :
5.
25 ml17,25 ml
gr
= 7,706%
1,0704
ml
25 ml22 ml
=3,25
gr
1,0758
ml
22 ml16,5 ml
=5,1
gr
1,078
ml
22 ml19 ml
gr
= 2,77%
1,080
ml
22 ml13 ml
=8,387
gr
1,073
ml
22 ml13,51 ml
=7,84
gr
1,083
ml
22 ml19,44 ml
gr
= 2,39%
1,070
ml
22 ml20,01 ml
=1,86
gr
1,069
ml
Starter 1
25% :
30% :
35% :
Starter 2
25% :
25,2 ml21,45 ml
=3,45
gr
1,0854
ml
25,2 ml22,3 ml
gr
= 2,65%
1,0928
ml
25,2 ml22 ml
=1,56
gr
1,0884
ml
25,2 ml25,17 ml
=0,02
gr
1,0956
ml
A-3
ALKOHOL
30% :
25,2 ml23,18 ml
gr
= 1,86%
1,086
ml
35% :
25,2 ml22 ml
=2,94
gr
1,0884
ml
LAPORAN SEMENTARA
PRAKTIKUM MIROBIOLOGI INDUSTRI
MATERI
ALKOHOL
Disusun Oleh :
Kelompok
Nama
: 13 / Selasa
: 1. Fatikhatul K. Ika S.
2. Oei Stefanny Yuliana
3. Satria Arief W.B.
21030111120001
21030111130062
21030111130066
A-4
ALKOHOL
I.
Tujuan Percobaan
1. Membuat alkohol dari sari buah mangga dengan cara fermentasi.
2. Membandingkan hasil alkohol dari fermentasi dengan variabel tertentu.
II. Percobaan
II.1 Bahan yang Digunakan :
1. Glukosa
2. KH2PO4
3. MgSO4
4. NaOH secukupnya
5. H2SO4 encer secukupnya
6. Indikator MB secukupnya
7.
Aquadest secukupnya
II.2 Alat yang Dipakai :
1. Erlenmeyer
2.
Buret, Statif, Klem
3.
Gelas ukur
4.
Pippet tetes
II.3 Variabel Percobaan :
Variabel tetap:
1. pembuatan Starter
Volume : 100 ml
MgSO4 : 0,02 gr
Urea
: 0,1 gr
KH2PO4 : 0,2 gr
Fermipan: 0,4 gr
pH : 4
waktu
: 3 hari
2.Fermentasi
Volume : 200 ml
MgSO4 : 0,02 gr
Urea
: 0,1 gr
KH2PO4 : 0,2 gr
Fermipan : 0,4 gr
waktu
: 7 hari
8.
9.
10.
11.
12.
Ragi roti
Fehling A+B secukupnya
Sari buah mangga
Urea
Sukrosa
5.
6.
7.
8.
Beaker glass
Pengaduk
Autoclave
Kompor listrik
variabel berubah
starter1 : 75ml sari mangga +25ml lar gula
starter2 : 25ml sari mannga +75ml lar gula
fermentasi
%v starter = 25%v, 30%v, 35%v
var1 : 60ml starter 1
var2 : 60ml starter 2
var3 : 70ml starter 1
var4 : 70ml starter 2
var5 : 80ml starter 1
var6 : 80ml starter 2
ALKOHOL
1. Buat larutan glukosa 2%W dan larutan madu 5%V basis 250 ml
dan tambahkan masing-masing (seperti KH2PO4, MgSO4, atau
2.
3.
4.
5.
tetes MB.
Titrasi lagi dengan glukosa standar sampai warna biru
ALKOHOL
3. Mengukur Kadar Glukosa Sari Buah
a. Ukur densitas sari buah.
b. Cari M (lihat langkah kerja terakhir).
c. Ukur kadar glukosa sari buah dengan rumus berikut :
( FM )
%SB=
Sari Buah
4. Penentuan Kadar Glukosa Substrat
a. Atur kadar glukosa substrat sebelum fermentasi sebesar
15%W.
b. %SB < 15%, perlu ditambah sukrosa :
180 X +(%SB V SB SB )
15 =
100
342 X +( V SB SB )
Berat sukrosa = X mol . 342 gr/mol = Y gram
Y gram dilarutkan ke dalam substrat tersebut.
5. Fermentasi media sari buah
a. Ambil substrat yang telah diatur kadar glukosanya.
b. Tambahkan starter sesuai variabel.
c. Ukur densitas dan volume konstan sebelum fermentasi.
d. Fermentasi anaerob selama 7 hari.
C. Analisa Hasil
1. Ukur volume total dan densitas setelah fermentasi.
2. Cari F dan M.
3. Analisa kadar glukosa hasil fermentasi dengan rumus :
V
V
( FM ) total pengenceran 100 0.0025
V titrasi V yang diambil
%h=
V total
4. Menghitung volume alkohol
a. Kadar alkohol terfermentasikan (%gf)
gF=14 %h
b. Mol glukosa terfermentasi
%gF hasil fermentasi V hasil fermentasi
X mol=
BM glukosa
c. Volume alkohol
2 X mol BM etanol
V=
etanol
D. Cara Penentuan M (M = Volume titran)
1. Ambil 5 ml sari buah, encerkan hingga 100 ml, ambil 5 ml.
2. Tambahkan 5 ml fehling A dan 5 ml fehling B.
ALKOHOL
3. Titrasi dengan glukosa standar sambil dipanaskan 600C-700C,
sampai warna biru hampir hilang, lalu tambahkan 2 tetes MB.
4. Titrasi lagi dengan glukosa standar sambil dipanaskan sampai
warna biru menjadi merah bata.
Catat kebutuhan titran.
Ph
3
M
10,5
12,4
3
4
5
6
3
3
3
3
12
15,3
12,9
10
Var
1
2
3
4
5
6
pH
4
4
4
4
4
4
Var
1
2
3
4
pH
4
4
4
4
M
16,5
13
13
23
13,5
22
1,077
1,075
4
1,076
1,073
1,090
1,079
17,5 1,077
20
1,08
12
1,074
16
1,075
15 1,0774
19 1,0806
F= 25,5 ml
1,076
1,072
1,075
1,07
1,070
4
1,075
8
%SB
10,02
8,276
8,643
5,6
7,706
10,472
F = 23 ml
%SB
5,10
2,77
9,31
6,51
7,42
3,7
%SB
8,36
11,6
11,6
0,62
11,21
3,25
F=22 ml
Var
pH
M
%SB
1
4
12,3 1,078
8,99
2
4
16
1,080 11,11
3
4
13
1,073
8,38
Mikrobiologi
Industri
4 Laboratorium
4
13,5 1,083
7,84
B-5
5
4
20
1,070
1,86
6
4
18,5 1,069
3,27
ALKOHOL
F=25,5 ml
Var
pH
18,8
22,3
23,5
20
20,6
22
1,085
4
1,092
8
1,085
6
1,095
4
1,086
1,086
4
%SB
3,45
2,65
1,56
4,746
2,39
2,94
Mengetahui,
Asisten
Puspita Firsty L.
NIM. L2C009126
:
:
:
:
:
III
Alkohol
Selasa
13
1. Fatikhatul K. Ika S.
2. Oei Stefanny Yuliana
3. Satria Arief Wicaksono B.
: Puspita Firsty L.
:
Variabel tetap:
1. pembuatan Starter
Volume
: 100 ml
75ml lar gula
MgSO4
: 0,02 gr
Urea
: 0,1 gr
KH2PO4
: 0,2 gr
Fermipan : 0,4 gr
pH
:4
waktu
: 3 hari
2.Fermentasi
Volume
: 200 ml
MgSO
: :0,02 gr
4
Tugas
Tambahan
Urea
: 0,1 gr
KH2PO4
: 0,2 gr
Fermipan : 0,4 gr
waktu
: 7 hari
variabel berubah
starter1 : 75ml sari mangga + 25ml lar gula
starter2 : 25ml sari mannga +
fermentasi
%v starter = 25%v, 30%v, 35%v
var1 : 60ml starter 1
var2 : 60ml starter 2
var3 : 70ml starter 1
var4 : 70ml starter 2
var5 : 80ml starter 1
var6 : 80ml starter 2
REFERENSI
DIPERIKSA
NO.
TANGGAL
KETERANGAN
TANDA TANGAN
1.
3 Desember
2012
Perbaikan I
-
2.
perhitungan
Benarkan lambing
mikrobiologi
4 Desember
2012
Perbaikan II
-
Perbaiki header
Judul BAB I, II, III dst
dibold
Bab III sesuaikan
dengan praktikum
5 Desember
2012
ACC