Anda di halaman 1dari 2

TUGAS PRAKTIKUM UJI BIOKOMPATIBILITAS

Aditya Arinta Putra/021311133142

Pertanyaan:
1.
2.
3.
4.

Apakah fungsi penggunaan Laminar Flow?


Apakah fungsi pemberian versene trypsine?
Apakah fungsi DMSO?
Bagaimana prinsip kerja dari MTT assay menghitung jumlah sel hidup?

Jawaban:
1.
Untuk mencegah kontaminasi dan meciptakan kondisi yang steril sehingga hasil uji
menunjukkan hasil/jumlah sel fibrolas yang relevan dan tidak tercampur oleh
kontaminan.
2.
Versene Trypsine atau Trypsin-EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) merupakan
reagen penggabung (combined reagent) yang digunakan untuk memindahkan sel dari
wadah kultur ke permukaan suspensi yang berisi assay. (Trypsin / Trypsin-Versene
(EDTA) / Versene (EDTA), 2009)
3.
Dimethyl Sulfoxide ditambahkan untuk melarutkan zat ungu formazan yang tidak
terlarut, sehingga membentuk larutan yang berwarna.
4.
Garam tetrazolium dapat digunakan untuk penghitungan kuantitatif melalui assay
colorimetric untuk menghitung tingkat proliferasi dan jumlah sel yang hidup. Assay tersebut
hanya mengukur sel yang hidup bukan sel yang mati berdasar sinyal yang dihasilkan
tergandung dari derajat aktifasi sel tersebut. Metode ini dapat digunakan untuk mengukur
sitotoksisitas, proliferasi, dan aktifasi sel yang dapat dibaca dengan reader ELISA melalui
teknik spectrofotometer. (Mosmann, 1983)
Pengukuran viabilitas dan tingkan proliferasi sel dengan teknik in vitro yang paling
popular adalah menggunakan teknik MTT assay. Pada sel hidup reagen tetrazolium kuning
MTT (3-(4, 5-dimethylthiazolyl-2)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) produk metabolisme
aktif sel yang diproduksi organel mitokondria berupa enzim dehidrogenase dapat mereduksi
reagen MTT tersebut, proses tersebut terjadi pada saat sel melakukan reduksi untuk
menghasilkan NADH dan NADPH. Proses tersebut mengakibatkan zat ungu formazan yang
terdapat dalam sel dapat di larutkan dan dihitung dengan metode spectrophotometric
menggunakan panjang gelombang 630nm. (MTT Cell Proliferation Assay, 2011).
DAFTAR PUSTAKA

Mosmann, T. (1983). Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to
proliferation and cytotoxicity assays. Journal of Immunological Methods, 65(1-2), pp.55-63.

MTT Cell Proliferation Assay. (2011). ATCC MTT Cell Proliferation Assay, [online] p.6.
Available at: http://www.atcc.org/~/media/DA5285A1F52C414E864C966FD78C9A79.ashx.

Trypsin / Trypsin-Versene (EDTA) / Versene (EDTA). (2009). Lonza Walkersville, Inc


products
survey,
[online]
p.2.
Available
at:
http://bio.lonza.com/uploads/tx_mwaxmarketingmaterial/Lonza_BenchGuides_Trypsin_TrypsinVersene_EDTA_Versene_EDTA.pdf [Accessed 3 Mar. 2015].