STERILISASI, PEMBUATAN MEDIUM, PENGHITUNGAN JUMLAH

MIKROBA, DAN PEWARNAAN GRAM

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI

Disusun Oleh :
Kelompok XE
Burhan Aminuddin
Happy Ganis Rahmawati
Afit Setiawan
Ridha Dwi Jayanti
Heraghani Ibnu K
S. Mustaqim Ibrahim

23010113120050
23010113120057
23010113120072
23010113120093
23010113140223
23010113140227

PROGRAM STUDI S-1 PETERNAKAN

FAKULTAS PETERNAKAN DAN PERTANIAN
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2014

LEMBAR PENGESAHAN
Judul

: LAPORAN RESMI PRATIKUM MIKROBIOLOGI

Kelompok

: XE (SEPULUH)E

Jurusan

: PETERNAKAN

Fakultas

: PETERNAKAN DAN PERTANIAN

Tanggal Pengesahan

Juni 2014

Menyetujui,
Asisten Pendamping

Tri Vidyanto
NIM. 23010111120056

RINGKASAN
KELOMPOK XE . 2014. Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi. (Asisten: TRI
VIDYANTO).
Praktikum Mikrobiologi dengan materi Sterilisasi dan Pembuatan Medium
dilaksanakan pada hari Rabu, tanggal 21 Mei 2014 pukul 07.00 - 10.00 WIB dan
materi Metode Hitungan Cawan dan Pewarnaan Gram pada hari Kamis, tanggal
22 Mei 2014 pukul 09.00 - 11.00 WIB di Laboratorium Fisiologi dan Biokimia,
Fakultas Peternakan dan Pertanian Universitas Diponegoro, Semarang. Tujuan
praktikum adalah mengetahui cara sterilisasi kering dan basah, pembuatan
medium PDA, metode hitungan cawan, pewarnaan gram positif dan gram negatif.
Materi yang digunakan dalam praktikum adalah timbangan, erlenmeyer,
tabung reaksi, gelas ukur, waterbath, beker glass, gelas ukur, pisau, kain saring,
oven, autoklaf, cawan petri, pipet hisap, penghisap, bunsen, kaca objek, loop,
mikroskop. Bahan yang digunakan adalah kentang, asam tartarat, agar, aquades,
kertas pembungkus, kapas, alkohol untuk mensterilisasi dan aluminium foil,
medium berupa susu UHT, biakan bakteri dan larutan gram A (violet kristal),
gram B (larutan lugol), gram C (aquades), gram D (safranin). Metode yang
dilakukan pembuatan medium PDA, sterilisasi kering, dengan mengeringakan alat
pada oven dengan suhu 160C dan sterilisasi basah dengan memasukan pada
autoklaf dengan suhu 121C, perhitungan cawan yaitu menghitung bakteri yang
tumbuh, dan pewarnaan gram.
Berdasarkan hasil praktikum sterilisasi bahwa sterilisasi berfungsi untuk
membersihkan alat yang akan digunakan. Pembuatan medium digunakan sebagai
tempat pertumbuhan bakteri dan menyediakan nutrisi bagi bakteri. Berdasarkan
perhitungan cawan dan pewarnaan gram disimpulkan bakteri dihitung sesuai
dengan Standart Plate Count (SPC) diketahui jumlah bakteri pada susu UHT
adalah 3,3 x 1010 Cfu/ml. Pewarnaan bakteri dengan memberikan gram (violet
kristal, larutan lugol, aquades, safranin) yang dibedakan menjadi gram positif
berwarna ungu dan gram negatif berwarna merah muda. Hasil Praktikum
Mikrobiologi Umum yaitu sterilisasi pada alat dan bahan yang digunakan,
perhitungan jumlah bakteri dengan metode hitung cawan diperoleh hasil rata-rata
1,32 x 105 Cfu/ml , serta pewarnaan gram pada pengamatan E. coli berbentuk
coccus berwarna merah muda berarti gram positif. Pewarnaan gram pada
Lactobacilus asidiphilus berwarna ungu berbentuk bassil berarti gram negatif.
Kata kunci : Pembuatan Medium, Sterilisasi, Pengenceran, Perhitungan Cawan,
Pewarnaan Gram.

KATA PENGANTAR
Puji syukur kami panjatkan atas kehadirat Allah SWT yang telah berkenan
melimpahkan rahmatnya, sehingga penyusun dapat menyelesaikan Laporan
Praktikum Mikrobiologi. Praktikum ini diadakan bertujuan agar para mahasiswa
mengenal dan mengetahui lebih luas tentang berbagai metodedalam pembuatan
medium untuk pertumbuhan bakteri dimana medium tersebut harus memiliki
semua nutrien yang dapat digunakan bakteri untuk tumbuh dan berkembang.
Praktikum ini juga bertujuan untuk mengetahui jumlah mikroba yang terkandung
pada suatu bahan pangan, serta mahasiswa dapat melakukan pewarnaan gram
terhadap bakteri guna mengetahui morfologi bakteri tersebut.
Penulis menyampaikan terimakasih kepada Dr. Dra. Turrini Yudiarti,
M.Sc. selaku Koordinator Praktikum, Jenny Febrianti selaku Koordinator Umum
Asisten Praktikum, Tri Vidyanto selaku Asisten Pembimbing yang telah
membimbing dan membantu kami selama praktikum berlangsung sampai
penyusunan laporan praktikum Mikrobiologi ini selesai. Harapan penulis semoga
laporan praktikum ini dapat bermanfaat bagi pembaca.
Demikian kata pengantar dari penulis, penulis menyampaikan terimakasih
atas perhatiaan dan koreksi dari berbagai pihak.

Semarang, Juni 2014

Penulis

DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR...................................................................................

iv

DAFTAR ISI................................................................................................

DAFTAR TABEL........................................................................................

vi

DAFTAR ILUSTRASI.................................................................................

vii

DAFTAR LAMPIRAN................................................................................

viii

BAB I PENDAHULUAN............................................................................

BAB II TINJAUAN PUSTAKA..................................................................

2.1. Sterilisasi...................................................................................
2.2. Medium dan Pengencer.............................................................
2.3. Metode Hitungan Cawan..........................................................
2.4. Morfologi Bakteri.....................................................................
2.5. Pewarnaan Gram.......................................................................

2
4
7
9
10

BAB III MATERI DAN METODE.............................................................

12

3.1. Materi........................................................................................
3.2. Metode......................................................................................

12
13

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN.....................................................

16

4.1. Sterilisasi...................................................................................
4.2. Pembuatan Medium..................................................................
4.3. Penghitungan Jumlah Mikroba.................................................
4.4. Pewarnaan Gram.......................................................................

16
17
18
20

BAB V SIMPULAN DAN SARAN............................................................

24

DAFTAR PUSTAKA...................................................................................

25

LAMPIRAN.................................................................................................

27

DAFTAR TABEL

Nomor

Halaman

1. Penghitungan Jumlah Mikroba........................................................

18

DAFTAR ILUSTRASI
Nomor
Halaman
1. Gambar Pengamatan Bakteri Gram Positif Perbesaran 1000 kali....
20
2.

Gambar Pengamatan Bakteri Gram Negatif Perbesaran 1000 kali. .

DAFTAR LAMPIRAN
7

22

Nomor

Halaman

1. Gambar dan Fungsi Alat...................................................................

27

2. Perhitungan SPC (Standard Plate Count)........................................

30

3. Foto Copy Laporan Hasil Praktikum...............................................

31