Anda di halaman 1dari 22

Laporan Praktikum

Hari, tanggal : Rabu, 28 April 2015

Teknologi Bioindustri

Dosen

: Dr. Ir. Mulyorini R, Msi.

Asisten

1. Linda A

(F34110026)

2. M Raja Ihsan (F34110118)

PRODUKSI BIOINSEKTISIDA (KULTIVASI CAIR DAN PADAT)


Oleh :
Kelompok 2
Icha Pebriyanti

(F34120108)

Andi Reza Rohadian (F34120139)


Ramanda Anugrah A (F34120146)
Fachri Muhammad

(F34120149)

Noviza Hayatinur

(F34120152)

Siti Nurjannah

(G44110018)

DEPARTEMEN TEKNOLOGI INDUSTRI PERTANIAN


FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2015

PENDAHULUAN
Latar Belakang
Pada masa sekarang, para petani tidak begitu gelisah dengan hama serangga yang
menyerang tanaman pertanian mereka. Hal itu disebabkan telah banyak produk hasil
teknologi yang banyak beredar untuk membasmi hama serangga yang sering disebut
pestisida. Pestisida biologi saat ini banayak dipakai adalah jenis insektisisda biologi
(mikroorganisme pengendali serangga) dan jenis fungisida biologi (mikroorganisme
pengendali jamur)
Insektisida biologi dapat dibuat dari beberapa macam tumbuhan, hewan, bahkan
mikroorganisme. Insektisida yang dibuat dari mikroorganisme umumnya termasuk
dalam insektisida hayati karena mikroorganisme tersebut tdak diubah dalam tubuh
mikroorganisme tersebut terdapat substansi atau bahan aktif yang dapat membunuh
hama atau serangga sejenisnya apabila bahan aktif tersebut masuk ke dalam tubuh hama
atau serangga.
Insektisida mempunyai peranan yang sangat penting dalam pertanian dan
perindustrian, khususnya untuk melindungi hasil pertanian. Meskipun demikian,
penggunaan insektisida yang tidak terbatas selama beberapa dekade telah
mengakibatkan dampak yang negatif terhadap lingkungan dan spesies non-target. Selain
itu, insektisida kimia dengan dosis dan frekuensi yang tinggi menjadikan serangga
vektor penyakit menjadi resisten terhadap insektisida kimia yang menyebabkan serangga
target tetap hidup dan merusak hasil-hasil pertanian. Untuk mengatasi permasalahan
tersebut, maka bioinsektisida merupakan salah satu alternatifnya.
Mikroorganisme yang dapat berfungsi sebagai bionsektisida yaitu bakteri dan
virus. Virus merupakan mikroorganisme yang memberi harapan sebagai pemberantas
hama atau pengendali hama. Virus hanya bekerja terhadap satu atau beberapa spesies
dan tidak merusak organism lain dalam lingkungannya. Namun kendala dari
pengembangan virus adalah harus dikembangkan pada inang yang hidup, yang berarti
harus memelihara spesies tersebut.
Dari kendala pengembangan virus tersebut menimbulkan banyak insktisida kimia
yang diproduksi dan telah beredar di masyarakat. Namun penggunaan insektisida kimia
secara terus menerus untuk membasmi hama serangga dapat menyebabkan hama
serangga tersebut menjadi kebal (resisten), Tetapi dengan insektisida bakteri yang dibuat
secara bioteknologi maka problem resisten ini dapat diatasi. Selain itu, insektisida
bakteri ini tidak berbahaya terhadapa lingkungan. Salah satu jenis bakteri yang
digunakan untuk membuat insektisida adalah Bacillus thuringiensis aizawai
Tujuan
Praktikum kali ini bertujuan untuk mempelajari laju pertumbuhan dan yield pada
produksi bioinsektisida baik dengan kultivasi cair maupun dengan kultivasi substrat
padat.

METODOLOGI
Alat dan Bahan
Pada praktikum kali ini alat yang digunakan adalah autoklaf, inkubator goyang,
labu erlenmeyer, pH meter, spektrofotometer, petri dish, oven. Sementara bahan yang
digunakan adalah Nutrien broth, Bacillus thuringiensis aizawai, urea, MgSO4.7H2O,
FeSO4.7H2O, ZnsO4.7H2O, MnSO4.7H2O, CaCO3.
Metode

Tahap Propagasi

Tahap Fermentasi

Pengambilan Sampel pH

OD 660 nm

Biomassa Kering

Viable Spore Count (VSC)

Produksi Bioetanol dengan Teknik Kultivasi Substrat Padat

HASIL DAN PEMBAHASAN


Hasil Pengamatan
[Terlampir]
Pembahasan
Bioinsektisida adalah jenis pestisida yang bahan aktifnya merupakan
mikroorganisme seperti bakteri Bacillus thuringiensis, cendawan Beaveria sp,
Metarrhizium sp, dan virus Spodotera litura nuclea polyhidrosis. Bioinsektisida
merupakan bahan yang mengandung senyawa toksik yang berfungsi untuk membunuh
atau menghambat perkembangan spesies insekta yang dapat dihasilkan oleh tumbuhan
maupun yang menggunakan organisme hidup seperti virus, bakteri, dan jamur. Sifat
insektisida ini aman terhadap organisme non-target, manusia dan lingkungan. Sampai
saat ini telah banyak penelitian untuk memperoleh bioinsektisida yang ampuh dan ramah
lingkungan, salah satunya bioinsektisida mikrobial yang diperoleh dari Bacillus
thuringiensis (B.t) yang bersifat aman karena memiliki derajat spesifisitas yang tinggi
dan relatif kecil terjadinya resistensi (kekebalan) pada serangga hama. Bacillus
thuringiensis aizawai merupakan salah satu jenis bakteri yang banyak dimanfaatkan
dalam produksi bioinsektisida microbial (Behle et al, 1999).
Mikroba yang digunakan dalam pembuatan bioinsektisida adalah Bacillus
thuringiensis (B.t) yaitu bakteri bersel vegetatif berbentuk batang, gram positif, bersifat
aerob tapi umumnya anaerob fakultatif, mempunyai flagela dan membentuk spora.
Koloni Bacillus thuringiensis berbentuk bulat dengan tepian berkerut, memiliki diameter
5-10 milimeter, berwarna putih, elevasi timbul dan permukaan koloni kasa. Banyak
strain dari bakteri ini yang menghasilkan protein yang beracun bagi serangga. Spora
yang dibentuk oleh Bacillus thuringiensis berbentuk oval, berwarna hijau kebiruan dan
berukuran 1.0-1.3 mikrometer dan Bacillus thuringiensis membentuk kristal protein (endotoksin) bersamaan dengan terbentuknya spora. Bakteri ini mempunyai endospora
subterminal berbentuk oval dan selama sporulasi menghasilkan satu kristal protein
dalam setiap selnya (Gill et al, 1992).
Berbagai isolat Bacillus thuringiensis dengan berbagai jenis kristal protein yang
dikandungnya telah teridentifikasi setelah diketahui besarnya potensi dari protein kristal
Bacillus thuringiensis sebagai agen pengendali serangga. Sampai saat ini telah
diidentifikasi kristal protein yang beracun terhadap larva dari berbagai ordo serangga
yang menjadi hama pada tanaman pangan dan hortikultura. Kebanyakan dari kristal
protein tersebut lebih ramah lingkungan karena mempunyai target yang spesifik
sehingga tidak mematikan serangga bukan sasaran dan mudah terurai sehingga tidak
menumpuk dan mencemari lingkungan.
Bacillus thuringiensis aizawai termasuk salah satu bakteri yang telah banyak
digunakan untuk memproduksi bioinsektisida. Bacillus thuringiensis aizawai sangat
efektif mengendalikan larva ordo Lepidoptera dan Diptera, terutama ulat daun kubis dan
hama-hama sayuran lainnya (Lereclus et al, 1993). Salah satu hama ordo Lepidoptera

yang banyak menyebabkan kerusakan pada pertanian adalah Croccidolomia pavonana,


yang merupakan hama utama pada tanaman kubis yang juga menyerang tanaman
Brassicaceae lainnya. Serangan C. pavonana dapat menyebabkan kehilangan hasil kubis
sebesar 65%. Hama ini sangat merusak karena larva memakan daun baru di bagian
tengah tanaman kubis. Saat bagian tengah telah hancur, larva pindah ke ujung daun dan
kemudian turun ke daun yang lebih tua. Kebanyakan tanaman yang terserang akan
hancur seluruhnya jika ulat krop kubis tidak dikendalikan (Kementrian Pertanian RI,
2010). Bacillus thuringiensis aizawai menghasilkan protein yang bersifat insektisida
yaitu -endotoksin atau kristal protein yang akan berikatan dengan reseptor spesifik
dalam sel larva Crocidolomia pavonana, sehingga terjadi lisis sel yang dapat
menyebabkan kematian pada serangga target.
Bioinsektisida digunakan untuk menanggulangi gangguan hama seperti serangga
atau tunggau. Insektisida ini secara spesifik akan menyerang serangga yang menjadi
sasaran dan tidak menyerang serangga lainnya. Insektisida ini bekerja dengan cara
menginfeksi hama sehingga hama tidak dapat lagi mampu merusak tanaman.
Bioinsektisida dari mikroorganisme ini memilki efektivitas yang sama dengan pestisida
yang berbasis bahan kimia.
Bioinsektisida juga digunakan untuk menggantikan penggunaan insektisida
kimia yang telah banyak menimbulkan kerugian bagi lingkungan. Selain itu, pemakaian
insektisida kimia dengan dosis dan frekuensi yang tinggi dapat menjadikan serangga
target menjadi resisten terhadap insektisida kimia tersebut. Sedangkan keunggulan
bioinsektisida menurut Behle et al. (1999), antara lain spesifik terhadap hama serangga,
aman dan ramah lingkungan, serta tidak mengakibatkan residu pada hasil pertanian dan
tanah.
Cara kerja pestisida terhadap hama dapat dibedakan menjadi 4, yaitu:
1. Pestisida kontak, berarti mempunyai daya bunuh setelah tubuh sasaran terkena
pestisida.
2. Pestisida sistemik, berarti dapat ditranslokasikan ke berbagai bagian tanaman
melalui jaringan. Hama akan mati kalau mengisap cairan tanaman.
3. Pestisida lambung, berarti mempunyai daya bunuh setelah jasad sasaran
memakan petisida.
4. Pestisida fumigan, berarti mempunyai daya bunuh setelah jasad sasaran terkena
uap atau gas.
Keunggulan bioinsektisida menurut Behle et al (1999) yaitu spesifik terhadap
hama serangga, aman dan ramah lingkungan, dan tidak mengakibatkan residu pada hasil
pertanian dan tanah. Proses infeksi bakteri Bacillus thuringiensis pada hama tanaman
dimulai dengan larva ulat memakan tanaman yang telah mengandung spora dan kristal
protein Bacillus thuringiensis. Lalu dalam beberapa menit kristal protein berikatan
dengan reseptor spesifik pada dinding usus dan ulat berhenti makan. Beberapa menit
kemudian dinding usus pecah sehingga spora dan bakteri masuk ke dalam jaringan
tubuh, toksin pun larut dalam darah, maka dalam 1-2 hari ulat akan mati.
Bioinsektisida memiliki kelebihan dan kelemahan dibanding dengan insektisida
kimia. Kelebihan tersebut diantaranya aktifitas dengan spektrum luas, tidak memberikan
efek negatif pada vertebrata termasuk manusia serta tanaman, mudah diproduksi,
memiliki respon cepat terhadap serangga target, sifat relatif stabil selama penyimpanan,

dan sejauh ini belum dilaporkan adanya resistensi. Sementara kelemahan bioinsektisida
dibanding dengan insektisida kimia yaitu tidak tahan terhadap sinar ultraviolet dan spora
dan kristal harus termakan agar berefek insektisida.
Cara produksi bioinsektisida terdiri dari media pertumbuhan, kondisi kultivasi,
dan pemanenan. Media merupakan salah satu faktor yang sangat berpengaruh pada
proses fermentasi Bacillus thuringiensis. Menurut Dulmage et al. (1990) medium basal
untuk pertumbuhan Bacillus thuringiensis terdiri dari garam, glukosa, dan asam amino
seperti asam glutamat, asam aspartat dan alanin dalam konsentrasi yang cukup untuk
mendukung pertumbuhan dan sporulasi Bacillus thuringiensis. Karbon adalah bahan
utama untuk mensintesis sel baru atau produk sel. Beberapa sumber karbon yang dapat
digunakan untuk memproduksi bioinsektisida dari Bacillus thuringiensis dengan
fermentasi terendam adalah glukosa, sirup jagung, dekstrosa, sukrosa, laktosa, gula,
minyak kedelai, dan molase dari bit dan tebu (Dulmage dan Rhodes 1971).
Proses produksi bioinsektisida memerlukan suatu media sebagai tempat hidup
bagi bakteri yang akan digunakan untuk memproduksi bioinsektisida. Media untuk
memproduksi bioinsektisida terdiri dari dua bentuk yaitu media padat dan media cair.
Pertama akan dijelaskan mengenai media padat yang merupakan media berbentuk padat
yang mengandung agar 1 1.5%, misalnya nutrien agar. Jika ke dalam media
ditambahkan agar, jumlah agar yang ditambahkan tergantung kepada jenis atau
kelompok mikroba yang ditumbuhkan. Ada yang memerlukan kadar air tinggi sehingga
penambahan agar harus sedikit tetapi ada pula yang memerlukan kandungan air rendah
sehingga penambahan agar harus lebih banyak. Media padat umumnya dipergunakan
untuk menumbuhkan bakteri, jamur, dan kadang-kadang mikroalga terutama dalam
peremajaan dan pemeliharaan kultur murni dalam bentuk agar miring (Pablo 2012).
Kemudian, terdapat media cair yang merupakan media berbentuk cair yang tidak
mengandung agar, misalnya nutrien broth. Umumnya media cair digunakan untuk
menambah biomassa sel . Kalau ke dalam media tidak ditambahkan zat pemadat. Media
cair dipergunakan untuk penumbuhan bakteri, ragi dan mikroalga (Pablo 2012).
Pada proses produksi bioinsektisida ini digunakan media padat berupa onggok
yang berguna sebagai sumber karbon karena pada onggok masih mengandung pati yang
berkisar 60 70% berat kering onggok. Onggok sendiri merupakan limbah padat yang
berasal dari proses pengolahan ubi kayu menjadi tapioka. Onggok merupakan limbah
utama hasil proses pengepresan (Abbas et al. dalam Winarno 1985). Onggok memiliki
daya tahan yang relatif lama pada saat keadaan kering dibandingkan pada saat keadaan
basah. Hal ini dikarenakan pada saat keadaan basah onggok mudah sekali ditumbuhi
oleh kapang dan terjadi pembusukan. Pemanfaatan onggok masih terbatas dan umumnya
digunakan sebagai makanan ternak (Damarjati 1985). Onggok juga dapat digunakan
sebagai substrat untuk produksi selulase, amilase, amiloglukosidase dan angkak (Jenie
dan Fachda 1991). Komposisi kimia onggok dapat dilihat pada Tabel 1 dibawah ini.
Komponen (%)
Air
Abu
Serat Kasar

Tjiptadi (1982)
16,86
8,50
8,14

Anonim (1984)
13,39
4,90
11,02

Lemak
Protein
Pati
Karbohidarat

0,25
6,42
62,97
71,11
Tabel 1. Komposisi Onggok

0,15
0,58
68,79
79,81

Berdasarkan fakta ini maka timbul gagasan untuk memanfaatkan onggok tapioka
sebagai salah satu alternatif substrat untuk memproduksi bioinsektisida dengan teknologi
sederhana namun memiliki sifat toksisitas yang baik terhadap hama. Onggok tapioka
digunakan sebagai sumber karbon. Sedangkan media cair yang digunakan dalam
pembuatan bioinsektisida ini adalah limbah tahu. Limbah cair pabrik tahu ini memiliki
kandungan senyawa organik yang tinggi. Tanpa proses penanganan dengan baik, limbah
tahu dapat menyebabkan dampak negatif seperti polusi air, sumber penyakit, bau tidak
sedap, meningkatkan pertumbuhan nyamuk, dan menurunkan estetika lingkungan
sekitar.
Limbah cair tahu mengandung protein, glukosa dan komponen lainnya dengan
kadar yang relatif tinggi. Kandungan nutrisi tersebut menyebabkan limbah cair tahu
mempunyai potensi sebagai media untuk memproduksi spora Bacillus thuringiensis.
Mengingat bahwa limbah cair tahu umumnya dibuang ke sungai, maka pemanfaatan ini
sekaligus akan memberikan manfaat dalam mengurangi pencemaran lingkungan.
Penggunaan media limbah cair tahu adalah salah satu alternatif untuk memacu
pertumbuhan toksin Bacillus thuringiensis dengan harga yang lebih murah. Penggunaan
media limbah cair tahu ini akan membuat biaya pembuatan toksin menjadi jauh lebih
murah sebab tidak memerlukan media sintesis lagi. Limbah cair tahu digunakan sebagai
sumber nitrogen (Silvina et al. 2012). Biokontrol dari Bacillus thuringiensis merupakan
biokontrol yang efektif untuk membunuh jentik nyamuk tetapi memiliki harga yang
cukup mahal untuk negara-negara berkembang seperti Indonesia. Substansi aktif dari
Bacillus thuringiensis adalah spora yang dibentuk oleh Bacillus thuringiensis dibuat
dengan menggunkan media yang relatif mahal oleh karena itu dalam praktikum ini
digunakan media yang relatif murah, salah satunya dengan menggunakan media limbah
cair tahu. Adapun keuntungan dari penggunaan media limbah cair tahu yakni :
1. Bahan Media yang Murah
Saat ini biokontrol Bacillus thuringiensis dibuat dengan menumbuhkan strain
Bacillus thuringiensis pada media sintetis yang biayanya relatif mahal, sehingga
untuk 10 tablet dijual seharga 20 dollar. Sedangkan jika produksi Bacillus
thuringiensis dengan menggunakan media Nutrient Broth (NB), yang dalam satu
liternya mengandung 3 gr beef extract dan 5 gr tryptone maka perincian biaya yang
dihabiskan sebesar Rp. 25.000 per liter. Sedangkan untuk membuat media NB
sebanyak 100 liter maka biaya yang dibutuhkan sebesar Rp. 2.500.000.
Penggunaan media limbah cair tahu adalah salah satu alternatif untuk memacu
pertumbuhan toksin Bacillus thuringiensis yang lebih murah. Dengan menggunakan
media limbah cair tahu ini biaya pembuatan toksin menjadi jauh lebih murah sebab
tidak memerlukan media sintetis lagi. Sehingga dapat terjangkau oleh masyarakat.
2. Mengurangi Pencemaran Lingkungan Perairan

Pemerintah akhir-akhir ini sangat menekankan era "sadar lingkungan" dan


mengharuskan semua industri membuat analisis masalah dampak lingkungan
(AMDAL) sesuai dengan SK Menteri KLH No.52 Tahun 1986 dan SK Menteri KLH
No.29 Tahun 1986 serta SK Menteri KLH No.03 Tahun 1991 Tentang Peraturan
Pembuangan Limbah. Bagi industri baik yang sudah beroperasi maupun yang akan
dibangun serta yang air limbahnya dibuang ke perairan harus memenuhi standar baku
mutu limbah yang telah ditentukan. Berdasarkan data dari statistik yang ada industri
pengolahan tahu di Indonesia sebanyak 4.000 unit yang tersebar di Jawa Barat dan
berbagai daerah lainnya. Jika ditinjau dari komposisi kimianya, ternyata air limbah
cair tahu mengandung nutrien-nutrien (protein, karbohidrat, dan bahan-bahan
lainnya) yang jika dibiarkan dibuang begitu saja ke sungai justru dapat menimbulkan
pencemaran perairan. Selama ini limbah industri tahu dibuang begitu saja tanpa ada
pengolahan lebih lanjut. Limbah cair tahu ternyata bisa digunakan sebagai media
pertumbuhan Bacillus thuringiensis yang bermanfaat sebagai bioinsektisida larva
nyamuk. Dengan ditemukannya manfaat limbah cair tahu tersebut maka diharapkan
nantinya limbah tersebut dapat digunakan dan tidak lagi mencemari lingkungan
sekitar.
3. Mudah untuk Mendapatkannya
Pertumbuhan industri tahu sebagai industri rumah tangga cukup banyak. Banyaknya
industri pengolahan tahu tersebut menjadi cukup mudah untuk mendapatkan limbah
buanganya. Sehingga dalam proses produksinya tidak terlalu mengalami kesulitan
dalam mencari bahan sebagai media pertumbuhan Bacillus thuringiensis.
Proses produksi bioinsektisida dikenal dengan nama fermentasi. Fermentasi
adalah suatu proses biokimia yang menghasilkan energi dimana komponen organiknya
bertindak sebagai penerima elektron (Fardiaz 1988). Fermentasi media padat merupakan
proses fermentasi yang substratnya tidak larut dan tidak mengandung air bebas, tetapi
cukup mengandung air untuk keperluan hidup mikroba. Sebaliknya fermentasi cair
adalah proses fermentasi yang substratnya larut atau tersuspensi dalam fase cair (Chalal
1985).
Teknik kultivasi secara terendam dapat dilakukan dengan sistem tertutup pada
fermentor. Pada umumnya, jenis fermentor yang digunakan adalah fermentor tangki
berpengaduk karena merupakan jenis fermentor yang paling sederhana. Fermentor ini
digunakan untuk substrat yang mempunyai viskositas tinggi dan berbentuk koloid tanpa
mengakibatkan penyumbatan, serta enzim terimobilisasi dengan aktivitas rendah
(Machfud et al. 1989). Proses fermentasi terendam dapat dilakukan dengan tiga cara
yaitu fermentasi sistem tertutup (batch process), fermentasi kontinyu, dan fermentasi
sistem tertutup dengan penambahan substrat pada selang waktu tertentu atau semi
kontinyu (fed batch process). Bernhard dan Utz (1993), menyatakan bahwa produksi
bioinsektisida Bacillus thuringiensis pada umumnya dilakukan dengan fermentasi sistem
tertutup karena hasil akhir yang diharapkan adalah spora dan kristal protein yang
dibentuk selama proses sporulasi. Menurut Dulmage (1990), faktor-faktor yang
mempengaruhi proses fermentasi Bacillus thuringiensis adalah komposisi media dan
kondisi untuk pertumbuhan mikroba seperti pH, oksigen dan temperatur.
Selanjutnya adalah fermentasi dengan substrat padat. Fermentasi substrat padat
berkaitan dengan pertumbuhan mikroorganisme pada bahan padat dalam ketiadaan atau

hampir ketiadaan air bebas. Tingkat lebih atas dari fermentasi substrat padat (yaitu
sebelum air bebas tampak) merupakan fungsi penyerapan (absorbancy), dan dengan
demikian kadar airnya pada gilirannya tergantung pada jenis substrat yang digunakan.
Aktivitas biologis menurun bila kandungan air substrat sekitar 12%, dan semakin
mendekati nilai ini, aktivitas mikrobiologis semakin tertahan. Fermentasi substrat padat
tidak memperhatikan fermentasi slurry (yaitu cairan dengan kandungan zat padat
taklarut yang tinggi) ataupun fermentasi substrat padat dalam media cair. Substrat yang
paling banyak digunakan dalam fermentasi substrat padat adalah biji-bijian serealia,
kacang-kacangan, sekam gandum, bahan yang mengandung linoselulosa (seperti kayu
dan jerami), dan berbagai bahan lain yang berasal dari tanaman dan hewan. Senyawaan
tersebut selalu berupa molekul primer, tak larut atau sedikit larut dalam air, tetapi murah,
mudah diperoleh dan merupakan sumber hara yang tinggi (Prawira 2007).
Pada umumnya fermentasi terendam atau fermentasi cair lebih disukai karena
menjaga kesterilan kultur serta proses pemanenan dan pengaturan parameter proses
produksi atau fermentasi yang lebih sederhana dan dapat menghasilkan rendemen yang
lebih tinggi. Selain itu, produk hasil fermentasi cair dapat langsung digunakan
dibandingkan hasil fermentasi semi padat yang sulit disuspensikan karena ada
kecenderungan menggumpal. Akan tetapi penggunaan media cair ini relatif lebih mahal.
Sedangkan untuk media padat memiliki kelebihan harga lebih murah dan bahan lebih
mudah didapatkan. Namun penggunaan media padat menghasilkan rendemen produk
yang lebih rendah, dan lebih sulit dalam memisahkan hasilnya.
Faktor faktor yang mempengaruhi kultivasi dari Bacillus thuringiensis sangat
beragam. Berikut ini akan dijelaskan faktor faktor yang mempengaruhinya. Pada
komposisi media merupakan faktor yang sangat mempengaruhi kultivasi Bacillus
thuringiensis selain kondisi pertumbuhan seperti pH, oksigen, dan temperatur (Dulmage
dan Rhodes 1971). Glukosa dan onggok tapioka digunakan untuk sintesis sel baru atau
produksi sel karena merupakan sumber karbon. Konsentrasi sumber karbon yang terlalu
tinggi dapat menyebabkan pH media turun menjadi 5.6 5.8. Kondisi ini dapat
menghambat atau menghentikan pertumbuhan Bacillus thuringiensis demikian pula
halnya dengan konsentrasi glukosa yang terlalu rendah (Vandekar dan Dulmage 1982).
Bakeri Bacillus thuringiensis pertama kali ditemukan di Jepang pada tahun 1901
dari penyakit pada jentik ulat sutera. Ishiwata adalah orang yang pertama kali
mengisolasikan Bacillus thuringiensis dari larva ulat sutera yang mati. Namun pada saat
itu, bakteri tersebut belum dikenal sebagai Bacillus thuringiensis. Baru pada tahun 1911,
Berliner menemukan sejenis bakteri yang sama dengan yang ditemukan oleh Ishiwata
dari kumbang tepung Mediteranian (Mediterraneanflour moth), Anagasta kuehniella
yang mati (Swadener, 1994). Bakteri ini kemudian dinamakan dengan Bacillus
thuringiensis.
Bioinsektisida Bacillus thuringiensis merupakan 90-95 % dari bioinsektisida
yang dikomersialkan untuk dipakai oleh petani di berbagai negara. Kristal protein yang
dihasilkan Bacillus thuringiensis bersifat selektif (hanya toksik terhadap serangga
sasaran), aman terhadap organisme bukan sasaran dan manusia, serta tidak menimbulkan
residu yang dapat mencemari lingkungan. Bioinsektisida berbahan aktif kristal protein
diproduksi dengan cara kultivasi bakteri dalam media dan kondisi pertumbuhan yang
optimum. Kondisi kultivasi media berpengaruh terhadap toksisitas bioinsektisida yang

dihasilkan. Formulasi media fermentasi yaitu rasio C/N berpengaruh terhadap produksi
bioinsektisida, densitas optik dan pembentukan spora dari Bacillus thuringiensis
(Rahayuningsih, 2003).
Menurut Gumbira (1987), faktor lingkungan yang berpengaruh terhadap
pertumbuhan sel dan pembentukan produk adalah suhu dan pH awal medium. Spora dan
kristal protein dihasilkan pada saat akhir dari fase logaritmik. Kondisi kultur dalam
medium fermentasi berpengaruh terhadap pembentukan spora dan kristal protein.
Menurut Morris et al., (1996), derajat keasaman (pH) berpengaruh terhadap produksi
spora dan kristal protein. Suhu berpengaruh terhadap pertumbuhan sel, tetapi tidak ada
hubungan secara langsung antara pertumbuhan sel dengan produksi kristal protein.
Struktur dan susunan asam-asam amino di dalam toksin berpengaruh terhadap toksisitas
bioinsektisida. Pembentukan produk oleh mikroorganisme tergantung pada suhu yang
sama dengan pertumbuhan, tetapi suhu yang optimum untuk pertumbuhan dan
pembentukan produk tidak harus sama. Untuk menentukan suhu yang optimum
diperlukan hubungan antara suhu dengan produk yang dihasilkan.
Hampir semua mikroorganisme memiliki kisaran suhu untuk tumbuh dan
berkembang. Suhu yang optimal untuk produksi sel atau produk sel dapat ditentukan
secara empiris. Biasanya suhu yang optimal berada sedikit dibawah suhu maksimal
untuk pertumbuhannya dan suhu yang paling baik untuk pembentukan produk sering
tidak sama untuk pertumbuhan maksimalnya (Dulmage dan Rhodes, 1971). Bacillus
thuringiensis dapat tumbuh dengan medium buatan dengan suhu pertumbuhan berkisar
antara 15 - 40C. Menurut Gumbira (1987), terdapat tiga jenis kurva suhu pertumbuhan
mikoorganisme, yaitu psikrofilik, mesofilik dan termofilik. Mikroorganisme yang
kecepatan pertumbuhannya dibawah 20C disebut psikrofilik, yang diantara 30-35C
disebut mesofilik dan diatas 50C disebut termofilik. Pola pertumbuhan ketiga kurva
tersebut hampir sama, jika suhu dinaikkan ke arah suhu pertumbuhan optimal maka
kecepatan tumbuh rata-rata akan meningkat dua kalinya pada kisaran suhu 10C. Di atas
suhu pertumbuhan optimum maka kecepatan tumbuh akan menurun secara cepat
berlawanan dengan naiknya suhu.
Bacillus thuringiensis dapat tumbuh pada medium yang memiliki pH pada
kisaran 5.5 - 8.5 dan tumbuh optimum pada pH 6.5 - 7.5 (Benhard dan Utz, 1993).
Selama fermentasi pH dapat berubah dengan cepat tergantung pada penggunaan
karbohidrat (menurunkan pH) dan protein (menaikkan pH). Nilai pH dapat dikendalikan
dengan memelihara keseimbangan antara senyawa gula dan nitrogen (Quinlan dan
Lisansky, 1985). Mikroorganisme membutuhkan sumber air, sumber karbon, nitrogen,
unsur mineral, dan faktor pertumbuhan dalam medium pertumbuhannya (Vandekardan
Dulmage, 1982). Beberapa sumber karbon dapat digunakan untuk fermentasi Bacillus
thuringiensis secara terendam antara lain glukosa, sirup jagung, tepung jagung,
dekstrosa, sukrosa, laktosa, pati, minyak kedelai, dan molase dari bit atau tebu. Sumber
nitrogen yang dapat digunakan adalah tepung kedelai, tepung biji kapas (proflo), corn
steep, gluten jagung, ekstrak khamir, pepton, kedelai, tepung ikan, tripton dan kasein.
Bacillus thuringiensis adalah racun perut bagi serangga hama dan merupakan
bakteri yang menghasilkan kristal protein yang bersifat membunuh serangga
(insektisida) sewaktu mengalami proses sporulasinya (Hofte dan Whiteley, 1989).

Kristal protein yang bersifat insektisidal ini sering disebut dengan -endotoksin. Kristal
protein yang ada pada Bacillus thuringiensis ini sebenarnya merupakan pro-toksin yang
jika larut dalam usus serangga akan berubah menjadi poli-peptida yang lebih pendek
serta mempunyai sifat insektisidal. Kristal protein yang dimakan oleh serangga akan
dipecah oleh enzim protease di bagian tengah dalam saluran pencernaan menjadi
molekul toksik. Toksin tersebut akan mempengaruhi permeabilitas membran sel,
mikrovili pada sel-sel epitalium yang dapat menyebabkan paralisis saluran makanan dan
berubahnya keseimbangan Ph hemophilia, yang kemudian dapat menyebabkan
kematian.
Bacillus thuringiensis ini dapat menyebabkan terbentuknya pori-pori (lubang
yang sangat kecil) di sel membran saluran pencernaan dan dapat mengganggu
keseimbangan osmotic dari sel-sel tersebut. Karena keseimbangan osmotic terganggu,
maka serangga atau hama akan mati. Kematian serangga biasanya terjadi dalam waktu
3-5 hari, akan tetapi ada larva yang dapat bertahan hidup lebih lama. Tanda-tanda awal
serangan bakteri Bacillus thuringiensis pada serangga yaitu aktivitas makan serangga
menurun bahkan berhenti. Serangga menjadi lemah dan kurang tanggap terhadap
sentuhan. Setelah mati, serangga kelihatan berwarna cokelat tua atau hitam.
Proses toksisitas kristal protein sebagai bahan aktif bioinsektisida dimulai dengan
termakannya kristal protein oleh serangga. Kristal protein ini akan dipecah oleh enzim
protease pada kondisi basa dalam usus tengah serangga sehingga melepaskan endotoksin yang bersifat toksin. Toksin ini akan berinteraksi dengan reseptor-reseptor
pada sel-sel epithelium usus tengah larva serangga yang rentan. Setelah toksin ini
bereaksi, maka akan menyebabkan terbentuknya lubang-lubang pada membran sel
sehingga dapat mengganggu keseimbangan osmotik sel dan mengakibatkan terjadinya
pembengkakan yang menyebabkan larva berhenti makan dan mati. Apabila serangga
target tersebut tidak rentan terhadap aksi -endotoksin secara langsung, maka dampak
dari pertumbuhan spora di dalam tubuh serangga tersebut yang akan menyebabkan
kematiannya. Spora tersebut akan berkecambah dan menyebabkan membran usus
serangga rusak. Replikasi dari spora akan membuat jumlah spora dalam tubuh serangga
semakin banyak dan menyebabkan perluasan infeksi di dalam tubuh serangga yang pada
akhirnya menyebabkan serangga tersebut mati (Swadener, 1994).
Salah satu parameter yang diujikan dalam pembuatan bioinsektisida dari bakteri
Bacillus thuringiensis aizawai adalah nilai pH. Pengujian terhadap pH ini merupakan
cara untuk memantau kondisi dari bakteri tersebut. Dengan mengetahui nilai pH selama
proses fermentasi, maka dapat diketahui berapa rentang nilai pH untuk bakteri yang
digunakan dan berapa nilai pH optimumnya. Setelah diketahui, kita dapat mengontrol
pH tersebut supaya selalu pada kondisi optimum atau minimal pada rentang hidup dari
bakteri (Quinlan dan Lisansky, 1985).
Kendala utama dalam produksi bioinsektisida adalah bahan baku fermentasi yang
masih impor. Pada umumnya, fermentasi Bacillus thuringiensis menggunakan dekstrosa
karena dekstrosa kaya akan sumber karbon. Solusinya yaitu dari dekstrosa dapat
digunakan bahan-bahan yang memiliki kadar pati yang cukup tinggi, misalkan pati
singkong. Kadar pati yang tinggi menunjukkan bahwa terdapat banyak karbon pada
sumber tersebut. Sumber karbon juga bisa didapatkan dari bahan-bahan yang memiliki
kadar gula yang cukup tinggi. Selain itu sumber karbon dari dekstrosa dapat pula

digunakan selulosa karena selulosa kaya akan sumber karbon. Namun, untuk
menggunakan selulosa sebagai sumber karbon harus dihidrolisis terlebih dahulu menjadi
gula-gula sederhana sehingga dapat digunakan oleh bakteri tersebut. (Darwis et al
2012).
Salah satu parameter yang diujikan dalam pembuatan bioinsektisida dari bakteri
Bacillus thuringiensis aizawai adalah nilai pH. Pengujian terhadap pH ini merupakan
cara untuk memantau kondisi dari bakteri tersebut. Dengan mengetahui nilai pH selama
proses fermentasi, maka dapat diketahui berapa rentang nilai pH untuk bakteri yang
digunakan dan berapa nilai pH optimumnya. Setelah diketahui, kita dapat mengontrol
pH tersebut supaya selalu pada kondisi optimum atau minimal pada rentang hidup dari
bakteri (Quinlan dan Lisansky, 1985).
Berdasarkan data hasil praktikum diperoleh nilai pH yang berbeda-beda pada
produksi bioinsektisida dengan fermentasi cair. Pada jam ke 0 hingga 120 diperoleh nilai
pH akhir sebesar 8. Pada jam ke 0 hingga jam ke 96 terjadi peningkatan pH yang
awalnya 5, sedangkan jam ke 120 tidak terjadi perubahan pH. Pada produksi
bioinsektisida dengan kultivasi padat pada jam ke 0 hingga 120 mengalami peningkatan.
Bila dibandingkan dengan literatur terdapat beberapa perbedaan hasil nilai pH. Menurut
literatur, Bacillus thuringiensis aizawai merupakan organisme (bakteri) mesofilik,
dimana kisaran suhu pertumbuhannya 15-45oC dengan suhu optimum 26-30oC dan
kisaran pH pertumbuhannya ialah 5.5-8.5 dengan pH optimum 6.5-7.5 (Benhard dan
Utz, 1993). Literatur lainnya menyatakan bahwa pertumbuhan optimum sebagian bakteri
terjadi pada pH sekitar 7. Nilai pH awal media fermentasi sering kali diatur dengan
menggunakan larutan penyangga atau dengan penambahan alkali atau asam steril. Nilai
pH awal untuk media fermentasi Bacillus thuringiensis aizawai ditentukan pada kisaran
6.8-7.2. Selama fermentasi pH dapat berubah dengan cepat tergantung pada penggunaan
karbohidrat dan protein. Penggunaan karbohidrat yang terlalu banyak daripada protein
dapat menurunkan pH, sedangkan penggunaan protein yang terlalu banyak daripada
karbohidrat dapat menaikkan pH. Nilai pH dapat dikendalikan dengan memelihara
keseimbangan antara senyawa gula dan nitrogen (Quinlan dan Lisansky, 1985).
Perbedaan nilai pH antara hasil praktikum dengan literatur yang ada tidak terlalu
signifikan karena masih berkisar pada pH yang sesuai dengan pertumbuhan Bacillus
thuringiensis aizawai. Adapun perubahan pH terjadi karena adanya enzim urease pada
Bacillus thuringiensis aizawai. Enzim urease akan mengubah urea menjadi amonium
bikarbonat dengan reaksi kimia:
urease
(NH2)2CO + 3H2O
(NH4)2HCO3 + OH
Reaksi kimia tersebut menyebabkan urea terlarut dalam air sehingga terjadi peningkatan
pH hingga 8,5 (James, 1983). Literatur tersebut menjelaskan adanya perubahan pH
menjadi basa, adapun nilai yang berbeda dapat disebabkan pembacaan alat yang
digunakan yaitu kertas pH tidak tepat.
Peningkatan kembali nilai pH selama fermentasi disebabkan oleh pemanfaatan
kembali asam asetat yang terakumulasi dalam medium untuk memproduksi
polihidroksilat (PHB). PHB selanjutnya akan digunakan sebagai energi selama proses
spirulasi. Selain itu kenaikan pH juga disebabkan karena terakumulasinya bahan-bahan
alkali hasil metabolisme urea (Benoit, 1990).

Pembahasan selanjutnya yaitu mengenai pengaruh lama fermentasi dengan nilai


optical density (OD). OD merupakan salah satu metode langsung untuk mengetahui
pertumbuhan sel. Panjang gelombang yang digunakan pada prtaktikum kali ini yaitu 660
nm. Semakin tinggi nilai OD menunjukkan semakin keruh larutan tersebut, hal tersebut
disebabkan adanya pertumbuhan sel yang membuat kandungan sel di dalam larutan
menjadi meningkat. Pertumbuhan sel Bacillus thuringiensis aizawai akan memasuki fase
stasioner dimana pertumbuhan sel mulai melambat atau terkesan statis pada jam ke 36
dan umumnya pertumbuhan optimum pada sekitar jam ke 30 fermentasi (Benhard,
1993). Hasil yang diperoleh untuk nilai OD pada praktikum berbeda dengan literatur
yang ada dimana terjadi fluktuasi nilai OD. Nilai OD tersebut secara berurutan mulai
dari jam ke 0 hingga jam ke 120 adalah 84, 64.8, 69.6, 79.8, 68.4 dan 59.8.
Perbedaan hasil praktikum dengan literatur tersebut dapat terjadi karena adanya
ketidaktelitian praktikan dalam mengukur nilai OD saat menggunakan spektrofotometer,
perbedaan medium, serta perbedaan bahan baku yang menyebabkan nutrisi yang
diperoleh mikroba dalam pertumbuhannya berbeda.
Pengujian selanjutnya yaitu uji biomassa kering. Pengujian biomassa kering
yaitu pengukuran selisih massa biomassa setelah dan sebelum proses fermentasi. Selama
proses fermentasi, biomassa akan tumbuh dan secara tidak langsung massa nya akan
meningkat. Peningkatan massa ini akan terjadi seiring waktu fermentasi sampai terjadi
fase stasioner (Gumbira, 1987). Berdasarkan hasil praktikum, diperoleh data yang
menunjukkan adanya penurunan dan peningkatan seiring bertambahnya waktu
fermentasi. Adapun nilainya dari jam ke 0 hingga jam ke 120 dalam gram yaitu 1.03;
0.93; 1.03; 1.03; 1.08; dan 1.05. Data yang diperoleh telah sesuai dengan literatur yang
menyatakan bahwa semakin lama produk fermentasi dilakukan akan terbentuk hasl
biomassa yang semakin banyak pula hingga mulai memasuki ke tahap stasioner, dimana
pertumbuhan sel mulai statis atau tidak ada pertumbuhan lagi (Gumbira, 1987). Selisih
nilai biomasa tertinggi terdapat dari jam ke 72 hingga 96 hal tersbut menandakan
pertumbuhan sel paling maksimum. Nilai bobot kering biomassa tertinggi tidak selalu
memberikan jumlah sel tertnggi. Hal tersebut disebabkan pengukuran terhadap bobot
kering biomassa tidak hanya mengukur jumlah sel hidup saja, sel mati, spora dan bahan
lain yang tidak terlarut juga akan mempengaruhi hasil. Pada literatur diperoleh biomassa
kering terbanyak pada jam ke 30, akan tetapi bakteri yang digunakan untuk bioinsektida
adalah Bacillus thuringiensis israelensis, perbedaan jenis mikroba ini menyebabkan
waktu atau laju maksimum saat pertumbuhan biomassa berbeda.. Perbedaan hasil
praktikum dengan literatur dapat terjadi karena jenis mikroba yang digunnakan berbeda,
selain itu juga dapat disebabkan karena jenis medium dan bahan baku pembuatan
medium berbeda sehingga mempengaruhi nutrisi yang diperoleh untuk pertumbuhan
mikroba. Selain itu juga dapat disebabkan karena adanya kesalahan praktikan dalam
menghitung biomassa (Salamah, 2002).
Pembahasan selanjutnya yaitu mengenai nilai VSC. VSC (Viable Spore Count)
merupakan uji yang digunakan untuk menganalisa jumlah spora hidup yang terkandung
dalam campuran spora kristal. Pada uji ini, sampel yang akan diukur terlebih dahulu
diencerkan secara serial kemudian diberi renjatan panas dengan tujuan untuk membunuh
sel-sel vegetatif yang ada pada cairan kultivasi. Pada praktikum kali ini, pengujian
dilakukan untuk mengetahui pertumbuhan spora pada media cair dan media padat.

Penentuan nilai VSC dilakukan hanya pada jam ke 24-72, hal tersebut karena pada jam
ke 0 spora belum bertumbuh dan pada jam ke 96 pertumbuhan spora dianggap telah
menurun. Hasil VSC mengalami peningkatan seiring dengan pertambahan waktu
fermentasi. Adapun nilai pada VSC dengan media cair dari jam ke 24-72 pada
pengenceran 10-4 yaitu TSUD, TBUD, dan TBUD. Nilai VSC pada pengenceran 10-5
dari jam ke 24-96 yaitu TSUD, 94 dan TSUD. Nilai VSC pada pengenceran 10-6 dari
jam ke 24-96 yaitu TSUD, 32 dan TSUD. Terdapat perbedaan pertambahan nilai spora
pada setiap pengenceran dimana semakin tinggi pengencerannya maka jumlah spora
yang tumbuh semakin sedikit. Pada literatur nilai tertinggi spora terjadi pada jam ke 30
dengan pertambahan nilai spora terbanyak pada jam ke 24-30, dimana data mulai
stasioner setelah jam ke 30 (Salamah, 2002).
Adapun perbedaan yang terjadi pada hasil praktikum dengan literatur dapat
disebabkan oleh beberapa faktor. Diantaranya karena bahan baku yang digunakan
berbeda sehingga kandungan nutrisi didalamnnya berbeda serta mikroba yang digunakan
berbeda pada literatur yaitu Bacillus thuringiensis israelensis. Selain itu juga dapat
disebabkan karena kesalahan praktikan terutama saat inokulasi dan perhitungan jumlah
spora yang terbentuk, sehingga menghasilkan data yang berbeda.

PENUTUP
Kesimpulan
Bioinsektisida merupakan bahan yang berfungsi untuk membunuh atau
menghambat perkembangan spesies insekta yang dapat dihasilkan oleh tumbuhan
maupun yang menggunakan organisme hidup seperti virus, bakteri, dan jamur.
Insektisida ini mengandung senyawa toksik yang secara spesifik akan menyerang
serangga yang menjadi sasaran dan tidak menyerang serangga lainnya. Oleh karena itu
bioinsektisida aman terhadap organisme non-target, manusia dan lingkungan.
Bioinsektisida memilki efektivitas yang sama dengan pestisida yang berbasis bahan
kimia. Maka dari itu, dengan penggunaan bioinsektisida diharapkan dapat mengurangi
pemakaian insektisida kimia yang telah banyak menimbulkan kerugian bagi lingkungan.
Penelitian untuk memperoleh bioinsektisida yang ampuh dan ramah lingkungan
sampai saat ini telah banyak dilakukan. Salah satu hasilnya adalah bioinsektisida
mikrobial yang diperoleh dari Bacillus thuringiensis (B.t) yang bersifat aman karena
memiliki derajat spesifisitas yang tinggi dan relatif kecil terjadinya resistensi
(kekebalan) pada serangga hama. Bacillus thuringiensis aizawai merupakan salah satu
jenis bakteri yang banyak dimanfaatkan dalam produksi bioinsektisida microbial.
Produksi bioinsektisida dengan kultur Bacillus thuringiensis dapat dilakukan
dengan kultivasi/fermentasi padat atau semi padat (semi solid fermentation) dan cair atau
terendam (submerged fermentation). Fermentasi terendam atau cair lebih disukai karena
menjaga kesterilan kultur serta proses pemanenan dan pengaturan parameter proses

produksi atau fermentasi yang lebih sederhana. Selain itu, produk hasil fermentasi cair
dapat langsung digunakan dibandingkan hasil fermentasi semi padat yang sulit
disuspensikan karena ada kecenderungan menggumpal.
Pada praktikum bioinsektisida ini dilakukan beberapa uji parameter, diantaranya
uji pH, OD (optical density), biomassa, dan VSC (Viable Spore Count). Menurut
literatur Bacillus thuringiensis aizawai memiliki pH pertumbuhan 5.5-8.5 dengan pH
optimum 6.5-7.5. Uji parameter pH menunjukkan hasil praktikum yang diperoleh tidak
terlalu signifikan dengan literatur karena masih berkisar pada pH yang sesuai dengan
pertumbuhan Bacillus thuringiensis aizawai. Selama fermentasi, terjadi kenaikan dan
penurunan pH. Nilai pH berubah-ubah dengan cepat tergantung pada penggunaan
karbohidrat dan protein. Penggunaan karbohidrat yang terlalu banyak daripada protein
dapat menurunkan pH, sedangkan penggunaan protein yang terlalu banyak daripada
karbohidrat dapat menaikkan pH.
Uji OD (Optical Density) merupakan salah satu metode langsung untuk
mengetahui pertumbuhan sel. Semakin tinggi nilai OD menunjukkan semakin keruh
larutan tersebut, hal tersebut disebabkan adanya pertumbuhan sel yang membuat
kandungan sel di dalam larutan menjadi meningkat. Hasil uji yang diperoleh untuk nilai
OD pada praktikum bernilai negatif untuk setiap kelompok, hasil ini sangat berbeda
dengan literatur. Nilai negatif menandakan larutan yang diuji lebih bening bila
dibandingkan dengan blangko, hal tersebut dirasa janggal karena di dalam larutan yang
diuji terdapat sel bioinsektisida yang membuat larutan lebih keruh jika dibandingkan
dengan blangko.
Pengujian biomassa kering yaitu pengukuran selisih massa biomassa setelah dan
sebelum proses fermentasi. Berdasarkan hasil praktikum, diperoleh data yang
menunjukkan adanya peningkatan seiring bertambahnya waktu fermentasi. Data yang
diperoleh telah sesuai dengan literatur yang menyatakan bahwa semakin lama fermentasi
dilakukan maka akan terbentuk hasil biomassa yang semakin banyak pula. Peningkatan
massa ini akan terjadi seiring waktu fermentasi sampai terjadi fase stasioner, dimana
pertumbuhan sel mulai statis atau tidak ada pertumbuhan lagi.
VSC (Viable Spore Count) merupakan uji yang digunakan untuk menganalisa
jumlah spora hidup yang terkandung dalam campuran spora kristal. Pada praktikum kali
ini, pengujian dilakukan untuk mengetahui pertumbuhan spora pada media cair dan
media padat. Penentuan nilai VSC dilakukan hanya pada jam ke 24-72, hal tersebut
karena pada jam ke 0 spora belum bertumbuh dan pada jam ke 96 pertumbuhan spora
dianggap telah menurun. Hasil VSC mengalami peningkatan seiring dengan
pertambahan waktu fermentasi. Adapun nilai pada VSC dengan media cair dari jam ke
24-72 pada pengenceran 10-4 yaitu TSUD, TBUD, dan TBUD. Nilai VSC pada
pengenceran 10-5 dari jam ke 24-96 yaitu TSUD, 94 dan TSUD. Nilai VSC pada
pengenceran 10-6 dari jam ke 24-96 yaitu TSUD, 32 dan TSUD. Terdapat perbedaan
pertambahan nilai spora pada setiap pengenceran dimana semakin tinggi
pengencerannya maka jumlah spora yang tumbuh semakin sedikit. Pada literatur nilai
tertinggi spora terjadi pada jam ke 30 dengan pertambahan nilai spora terbanyak pada
jam ke 24-30, dimana data mulai stasioner setelah jam ke 30. Literatur tersebut
menggunakan bakteri Bacillus thuringiensis israelensis, hal ini mungkin merupakan
salah satu faktor perbedaan hasil tersebut.

Saran
Praktikum bioinsektisida ini sangat berguna sehingga dibutuhkan perhatian untuk
memahami tahapan proses yang sesuai prosedur. Pemahaman tentang prosesnya sangat
berpengaruh terhadap keberhasilan setiap uji serta pemahaman penggunaan alat
sehingga praktikan dapat dengan cepat dan cermat dalam melaksanakan praktikum.

DAFTAR PUSTAKA
Abbas, S., Halim dan S. T. Amidarmo. 1985. Limbah Tanaman Ubi kayu. Di dalam F.G
Winarno (editor). Monografi Limbah Pertanian. Kantor Menteri Muda Urusan
Peningkatan Produksi Pangan, Jakarta
Behle, et all. 1999. Makalah Formulations Forum 99. Formulating Bionsecticides To
Improve Residual Activity. University Peoria. Illinois
Bernhard, K. dan R. Utz. 1993. Production of Bacillus thuringiensis Insecticide for
Experimental and Commercial Uses. Di dalam P. F. Enwistle, J. S. Cory, M. J.
Bailey dan S. Higgs (editor). Bacillus thuringiensis, An Enviromental Biopesticide
: Theory and Practice. John Wiley and Son, Chichester : 255-266.
Benoit et al. 1990. Fermentation During Growth and Sporulation of Bacillus
thuringiensis. New York: Lett, Appl. Microbiol.
Chalal, D.S. 1985. Solid State Fermentation with Trichoderma ressei. Application
Environment. Microbiology 49(1):205-210.
Damardjati, D. S. 1985. Strategi Penelitian Limbah Ubi Kayu di Indonesia. Di dalam F.
G. Winarno (ed). Monografi Limbah Pertanian. Kantor Mentri Muda Urusan
Peningkatan Produksi Pangan, Jakarta.
Darwis AA, Khaswar S, Ummi S.2012.Kajian Produksi Bioinsektisida dari Bacillus
thuringiensis subsp israelensis Pada Media Tapioka. Jurnal Teknologi Industri
Pertanian Vol. 14(1) hal 1-5.
Departemen Pertanian. 2010. Rancangan Rencana Strategis Kementerian Pertanian
2010-2014. Kementerian Pertanian Republik Indonesia. Jakarta.
Dulmage, H. T., J. A. Correa and G. G. Morales. 1990. Potential of Improved
Formulation of Bt through Standardization and Cultivation Development. Di
dalam Bacterial Control of Mosquitoes and Blackfleis : Biochemistry, Genetics
and Application of Bt and Bacillus sphaericus. Eds : H. D. Barjac and D. J.
Sutherland. Rutgers University Press. New Brunswick, New Jersey, USA. 110
133.
Dulmage, H. T. And Rhodes, R.A. 1971. Production of Pathogens in Artificial Media,
pp.507-540 In : Burges, H.D. (ed). Microbial Control of Pest and Plant Diseases
1970-1980. New York : Acad press.
Gill, S. S., E. A. Cowles, dan P. V, Pietrantonio. 1992. The Mode of Action of Bacillus
thuringiensis. Endotoxin. Annu, Rev. Entomol. 37 : 615 636
Gumbira Said, E. 1987. Bioindustri. Jakarta: Penebar Swadaya.

Hofte H, Whiteley HR. 1989. Insecticidal Crystal Protein of Bacillus thuringiensis.


Microbial Rev 53 : 242-255.
Jenie, B.S. L. dan Fachda. 1991. Pemanfatan Onggok dan Dedak Padi Untuk Produksi
Pigmen Angkak Oleh Monescus purpureus. Pertemuan Ilmiah Tahunan.
Perhimpunan Mikrobiologi Indonesia, Bogor
Lereclus D, A Delecluse, MM Lecaded. 1993. Diversity of Bacillus thuringiensis toxins
and genes. Bacillus thuringiensis, an environmental biopesticides: theory and
practices. John Willey and Sons.
Machfud et al. 1989. Teknik Optimasi Rekayasa Proses Pangan. Bogor: PAU Pangan
dan Gizi, Institut pertanian Bogor.
Morris O.N., Converse V., Kanagaratnam P., and Davies J.S. 1996. Effect of Cultural
Condition on Spore-Crystal Yield and Toxycity of Bacillus thuringiensis subs.
Aizawai (HD133). Journal of Invertebrate Patology 67, 129-136.
Pablo,
Julian.
2012.
Kultivasi
Mikroba.
[Terhubung
berkala]
http://matakuliahbiologi.blogspot.com/2012/04/kultivasi-mikroba.html (4 Mei
2015)
Prawira, Y. 2012. Fermentasi Substrat Padat. http://www.yprawira.com [28 April 2013]
Quinlan, R.J. dan S.G Lisansky. 1985. Mikrobial Insecticides. Weinheim: Verlag
Chemist.
Rahayuningsih,
M.
2003.
Toksisitas
dan
Perbedaaan
Aktivitas
DipterosidalBioinsektisida Bacillus thuringiensis var. israelensis Tipe Liar dan
Mutanpada berbagai Formulasi Media dan Kondisi Kultivasi. Disertasi.
ProgramPascasarjana Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Salamah, U. 2002. Kajian Produksi Bioinsektisida dari Bacillus thuringiensis subsp.
Israelensis
Pada
Media
Tapioka.
[Terhubung
berkala].
http://repository.ipb.ac.id/bitstream/handle/123456789/16303/F02usa.pdf?
sequence=2 (7 Mei 2015)
Silvina, D et al.2012.Pemanfaatan Limbah Cair Industri Pengolahan Tahu Untuk
Memproduksi Spora Bacillus Thuringiensis Serovar Israelensis Dan Aplikasinya
Sebagai Biokontrol Larva Nyamuk (karya tulis PKM). Universitas Udayana,
Denpasar
Swadener, C. 1994. Bt. Journal of Pesticides Reform vol. 14. No.3 : 13 20. Northwest
Coalition for Alternative to Pesticides. Canada.
Vendekar, M and H. T. Dulmage. 1982. Guidelines for Production Bacillus thuringiensis
H-14. Special Programme for Research and Training in Tropical Diseases. Geneva,
Switzerland.

JOBDESC PRAKTIKUM DAN LAPORAN


No.

Nama

NIM

Praktikum

Laporan

1.

Icha Pebriyanti

F34120108

Membuat media
propagasi dan
pengamatan kultivasi
cair (OD)

Bahas data,
penutup dan
finishing

2.

Andi Reza

F34120139

Membuat kultivasi
padat

3.

Ramanda Anugrah

F34120146

Membuat kultivasi
cair dan blanko,
pengamatan
biomassa

4.

Fachri M

F34120149

Membuat kultivasi
cair

5.

Noviza Hayatinur

F34120152

Membuat dan
pengamatan terhadap
kultivasi padat

6.

Siti Nurjannah

G44110018

Membuat media
propagasi dan
kultivasi padat

Pendahuluan,
metodologi,
pembahasan

TTD