Kuantisasi artemeter dalam bahan baku farmasi dan suntikan dengan

kromatografi cair kinerja tinggi

ABSTRAK
Kuantisasi artemeter di kedua bahan baku farmasi dan suntikan dilakukan oleh
kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) dengan deteksi ultraviolet. Kolom Zorbax
C18 (150 x 4,6 mm; 5 m), pada 30 C, dan fase gerak yang terdiri dari asetonitril
dan air (70:30), di aliran tingkat 1ml / menit, yang digunakan. Deteksi panjang
gelombang adalah 216 nm dan volume injeksi adalah 20 uL. Metode ini terbukti
linear (r2 = 0,9999), tepat (RSD <20% untuk intra-hari dan antar-hari presisi),
akurat dan selektif mengenai kemungkinan kotoran dan eksipien sampel. Deteksi
dan batas kuantisasi 8 mg / mL dan 25 ug / mL, masing-masing. Isi artemeter
diperoleh dianalisis bahan baku adalah 99,26% dan di suntikan, 102,08%.
Metode dioptimalkan dan divalidasi dapat berhasil digunakan untuk melakukan
analisis pengendalian kualitas rutin.
PENDAHULUAN
Malaria adalah infeksi parasit yang paling penting di dunia dan kontrol
yang efektif dari penyakit ini menimbulkan besar menantang untuk sektor
kesehatan masyarakat di negara-negara miskin (Guerin et al., 2002). Insiden
malaria di seluruh dunia diperkirakan 300-500000000 kasus klinis setiap tahun,
dengan sekitar 90% dari yang terjadi di Afrika, sebagian besar disebabkan oleh
Plasmodium falciparum. Malaria diperkirakan membunuh antara 1,1 dan 2,7 juta
orang di seluruh dunia setiap tahun, sekitar satu juta di antaranya adalah anakanak Afrika di bawah usia lima tahun (World, 2000). Karena luas P. Falciparum
resistensi terhadap obat antimalaria konvensional, banyak negara telah
menghadapi kesulitan dalam malaria yang efektif kontrol dan perlakuan. Kasus
saat ini, ada dilaporkan resistensi terhadap semua kelas antimalaria, kecuali
untuk artemisinin dan turunannya (Wongsrichanalai et al., 2002). Artemeter,
juga disebut dihydroartemisinin metil eter (Gambar 1), merupakan turunan
sintetis dari artemisinin, luas digunakan dalam pengobatan malaria di daerah
endemis. obat ini dapat diberikan sebagai solusi berminyak oleh intramuskular
injeksi, atau tablet oral (Karbwang et al., 1997). Selain itu, artemeter dapat
dikaitkan dengan lumefantrine, di dosis tetap tablet kombinasi yang
mengandung 20 mg artemeter dan 120 mg lumefantrine, sebagai terapi lini
pertama di pengobatan malaria falciparum di Brazil (Brasil, 2006).

Terlepas dari meningkatnya penggunaan artemeter dalam mengobati

malaria dalam wilayah endemik, literatur ilmiah masih terbatas mengenai
metode analisis yang ditujukan untuk kuantisasi dari obat dalam produk farmasi,
dan di evaluasi kualitas formula yang tersedia. The International Pharmacopeia
(2006) menyajikan monograf bahan baku artemeter dan bentuk injeksi. Metode
uji produk ini adalah kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) dengan deteksi
ultraviolet (216 nm), dan metode alternatif di yang artemeter diajukan ke
hidrolisis asam, diikuti dengan deteksi di spektrofotometer UV, pada 254 nm.
Kuantisasi artemeter di farmasi produk digambarkan oleh Atemnkeng et
al. (2007a), yang dilakukan penentuan derivatif artemisinin di obat-obatan yang
digunakan di Kenya dan Kongo, sementara di kedua studi, Atemnkeng et al.
(2007b) dihitung artemeter, Methylparaben dan propylparaben dalam suspensi
kering formulasi pediatrik. Csar et al. (2008) melaksanakan kuantisasi simultan
artemeter dan lumefantrine di dosis tetap tablet kombinasi. Masing-masing studi
ini kromatografi cair kinerja tinggi yang bekerja dengan deteksi ultraviolet dalam
kuantisasi artemeter. penelitian saat ini tersedia pada penentuan kuantitatif
artemeter dalam bahan baku farmasi atau di suntikan, digunakan dalam
pengobatan pasien malaria di Brazil.
Oleh karena itu, tujuan dari penelitian ini adalah kuantifikasi yang
artemeter dalam bahan baku farmasi dan bentuk injeksi. Metode yang dijelaskan
di Internasional Pharmacopeia (4 ed.) Diadaptasi untuk analisis, dan parameter
linearitas, intra-hari presisi, antar-hari presisi, akurasi dan selektivitas yang
divalidasi. Metode yang digunakan untuk mengevaluasi kualitas artemeter yang
suntikan saat ini digunakan untuk mengobati malaria di Brasil.
BAHAN DAN METODE
BAHAN DAN REAGEN
Bahan referensi kimia artemeter (batch 10203215, kemurnian 100,0%) dan
bahan baku (batch 061010-4087ER) yang dibeli dari Dafra Pharma (Turnhout,

Belgia). Sampel injeksi artemeter (80 mg / mL - Cipla, angkatan ZD6375) yang

ramah disumbangkan oleh Brasil, Departemen Kesehatan. Asetonitril (HPLC
grade) dan isopropil alkohol, aseton, kloroform dan eter (kelas analitis) yang
dibeli dari Suntuk (Fairfield, OH, USA). Air dimurnikan menggunakan sistem
Millipore (Bedford, MA, USA).
KONDISI KROMATOGRAFI
Analisis HPLC dilakukan pada Agilent 1200 sistem (Palo Alto, CA, USA), yang
terdiri dari kuaterner pompa, autosampler, detektor diode array (DAD) dan
Software HP ChemStation. Kolom yang digunakan adalah Zorbax C18 (150 x 4,6
mm id; 5 m ukuran partikel) dari Agilent, dipertahankan pada 30 C. Fase gerak
terdiri dari asetonitril dan air, pada laju alir 1 ml / menit. Berbeda proporsi
pelarut ini dievaluasi, bertujuan untuk mengoptimalkan waktu retensi dan simetri
puncak. Dioptimalkan fase gerak terdiri dari 70% asetonitril dan air 30%. Deteksi
dilakukan pada 216 nm dan volume injeksi adalah 20 uL.
PEMBUATAN LARUTAN STANDAR DAN SAMPEL ARTEMETER
Standar solusi: Sekitar 20 mg artemeter standar referensi yang akurat
ditimbang, ditransfer ke 5 ml labu ukur dan diencerkan dalam fase gerak
(asetonitril: air - 70:30). Volume disesuaikan dengan fase gerak untuk
konsentrasi akhir 4 mg / mL.
Larutan sampel bahan baku: Sekitar 100 mg bahan baku artemeter, sebelumnya
dikeringkan pada 60 C dalam oven vakum selama tiga jam, yang akurat
ditimbang, dipindahkan ke 25 mL labu ukur dan diencerkan dalam fase gerak
(asetonitril: air - 70:30). Volume disesuaikan dengan fase gerak ke final
konsentrasi 4 mg / mL.
Larutan sampel bentuk injeksi: Sebuah alikuot 5 mL injeksi artemeter
dipindahkan ke 100 mL labu volumetrik. Beberapa pelarut dievaluasi untuk
miscibility dengan injeksi, dan campuran isopropil alkohol dan asetonitril (75:25)
terbukti pengenceran yang memadai. Volume disesuaikan dengan ini pelarut
dengan konsentrasi akhir dari 4 mg / mL.
VALIDASI
Setelah optimalisasi kondisi kromatografi, parameter linearitas, intra-day presisi,
inter-day presisi, akurasi, selektivitas, batas deteksi dan batas kuantitasi
dievaluasi untuk memvalidasi proses, sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan
dalam ANVISA Resolusi RDC No. 899
LINEARITAS
Larutan stok artemeter, pada 8 mg / mL, yang disiapkan dalam asetonitril, dalam
rangkap tiga. Aliquot ini solusi diencerkan dalam fase mobile untuk lima yang
berbeda konsentrasi. Linier yang dievaluasi adalah dari 50 sampai 150% dari
konsentrasi tes, yang sesuai dengan rentang konsentrasi dari 2 sampai 6 mg /

mL artemeter. Itu kurva analitis dengan luas puncak dengan konsentrasi

artemeter diplot dan data yang diperoleh menjadi sasaran untuk analisis regresi.
PRESISI
Intra-day presisi dievaluasi dengan cara enam penentuan pada 100% dari
konsentrasi uji (4mg / ml), untuk kedua bahan baku dan suntikan. Artemeter
solusi sampel disiapkan seperti yang dijelaskan sebelumnya. Untuk
mengevaluasi antar-hari presisi, prosedur yang sama diadopsi, melakukan
analisis lebih dari dua kali berturut-turut hari. Dalam setiap analisis, kandungan
artemeter dan standar deviasi relatif (RSD) dihitung.
AKURASI
Akurasi dievaluasi dengan penambahan standar Metode dan diketahui jumlah
standar referensi yang ditambahkan ke injeksi artemeter. standar artemeter
solusi, pada tiga konsentrasi yang berbeda, ditambahkan untuk injeksi untuk
memberikan konsentrasi akhir dari 3 mg / mL, 4 mg / mL dan 5 mg / mL, sesuai
dengan 75%, 100% dan 125% dari konsentrasi tes, masing-masing. di setiap
konsentrasi, solusi disiapkan dalam rangkap tiga dan pemulihan dihitung.
SELEKTIVITAS
Selektivitas metode kromatografi adalah ditentukan oleh evaluasi kemurnian
spektral artemeter yang puncak diperoleh di kromatogram kedua standar dan
solusi sampel. Tes ini dilakukan dengan cara spektrum ultraviolet yang tumpang
tindih yang diperoleh di berbagai titik dari puncak kromatografi, untuk
memverifikasi apakah zat lain co-dielusi pada waktu retensi yang sama puncak
artemeter.

LOD DAN LOQ

Batasan ini dihitung dengan menggunakan analisis parameter kurva (standar
deviasi dari intercept dan kemiringan), menurut persamaan dijelaskan dalam
Resolusi RDC No. 899.
ANALISIS BAHAN BAKU ARTEMETER DAN INJEKSI
Sampel bahan baku artemeter dan injeksi dianalisis menggunakan HPLC
dioptimalkan dan divalidasi Metode. Solusi untuk analisis disiapkan berikut
prosedur yang diuraikan sebelumnya. artemeter yang berarti konten dan relatif
standar deviasi (RSD) adalah ditentukan di masing-masing sampel dianalisis.