7
7
9
9
10
11
14
14
17
19
19
21
21
22
24
24
26
28
30
30
30
31
31
36
36
37
37
38
40
40
45
49
49
50
51
52
53
53
54
56
56
57
58
60
60
62
63
63
65
68
70
73
78
78
79
84
86
88
90
92
92
93
96
97
101
101
101
103
106
108
110
PLANTELE TEXTILE
13.1. Producerea de smn la inul pentru fibr
13.2. Particulariti tehnologice i certificarea n producerea de
smn la in
13.3. Producerea de smn la cnep
13.3.1. Producerea de smn pentru soiurile de cnepa dioic
13.3.2. Producerea de smn pentru soiurile de cnep monoic
13.4. Particulariti tehnologice i certificarea n loturile semincere la
cnep
UNITATEA DE NVARE 13. PRODUCEREA DE SMN LA
SFECLA DE ZAHR I CARTOF
14.1.1. Producerea de smn pentru soiurile diploide la sfecla de
zahr
14.1.2. Producerea de smn pentru soiurile poliploide la sfecla de
zahr
14.1.3. Producerea de smn pentru hibrizii triploizi la sfecla de
zahr
14.2. Particulariti tehnologice i certificarea n loturile semincere la
sfecla de zahr
14.3. nmulirea cartofului
14.4. Particulariti tehnologie i certificarea n loturile de nmulire a
cartofului
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
113
114
115
116
117
118
119
121
121
121
125
125
128
130
133
UNITATEA DE NVARE 1
UNITATEA DE NVARE 2
UNITATEA DE NVARE 3
i smna este foarte sump din cauza unui numr mare de lucrri manuale
care trebuei efectuate (hibirii de tomate)
3.4. Metodologia ameliorrii la speciile alogame.
Plantele alogame sunt plante la care polenizarea se face cu polen
strin.
Aceste specii prezint o serie de adaptri la mpiedicarea polenizrii
cu polen propriu:
- separarea sexelor n flori diferite unisexuate, care pot fi situate pe
aceiai individ (monoicitate flori femele i flori mascule, cum este cazul
porumbului) sau pe indivizi diferii (plante femele i plante mascule, la
cnep)
- maturizarea la date diferite a organelor femele i a celor mascule:
protandria cnd polenul se maturizeaz ai devreme dect stigmatul, sau
protogenia, cnd stigmatul florii se maturizeaz nainte ca polenul s fie
eliberat. Aceast adaptre apare la unle specii de poli fructiferi;
- heterostilia cnd stigamtul este mult mai lung dect staminele i
polenul nu poate ajunge pe stigmatul florii proprii. n aceast situaie,
polenizarea este realizat de ctre insecte, care realizeaz i un amestec de
polen de lao flori diferite (floarea soarelui);
- autoincompatibilitatea care este un fenomen genetic prin care
polenul nu poate fecunda ovarul florii proprii. n cazul autoincompatibilitii,
se inhib pe cale enzimatic geminarea polenului sau formaera tubului
polinic, dac grunciorul d epolen re aceiai zestre ereditar cu cea prezent
n ovar (sfecl, unele specii de pomi fructiferi)
La plantele alogame fecundarea are loc ntre gamei produi n flori
diferite, de pe indivizi diferii, care au zestre genetic diferit. Indivizii acestor
specii au o stare heterozigot care creeaz o variabilitate foarte mare a
populaiilor i o slab stabilitate de la o generaie la alta. Ameliorarea
plantelor alogame trebuie s pun n eviden marea variabiliutate genetic
existent, care nu se manifest fenotipic. Matoda clasic ce ofer aceast
posibilitate este consangvinizarea. n urma consangvinizrii mare parte dintre
gene ajunge n stare homozigo i se manifest fenotipic i genele recesive.
Dac acestea sunt utile se pstreaz n populaie, dac sunt duntoare sunt
eliminate, astfel se aplic selecia n crearea de soiuri la plantele alogame.
Noile populaii vor fi mai uniforme i cun un numr redus de gene
nefolositoare. n cazul n care variabilitatea manifestat n urma
consangvinizrii nu este satisfctoare, se pot aplica toate metodele clasice
sau neconinionale de crearea a variabilitii.
Cea mai valoroas cale de folosire a consangvinizrii este cea care
duce la obinerea de hibrizi comerciali. n acest caz, consangvinizarea are ca
scop formarea unor populaii homozigote (linii consangvinizate) care sunt
utilizate ca forme parentale pentru obinerea hibrizilor comerciali. Hibrizii
comerciali se pot obine la toate speciile alogame, dar apare problema
producerii seminei hibride n cantitile necesare. Dac hibridarea nu se
poate efefzua uor prin lucrri manuale sau dac nu este cunsocut
fenomenul androsterilitii, hibrizii coerciali nu vor putea fi nmulii pe scar
larg.
Test rezolvat
22
UNITATEA DE NVARE 4
n care s-au format, fiind rezistente la factori nefavorabili (ger, secet, boli
etc.). Totodat, dup cum s-a menionat deja, soiurile primitive prezint un
polimorfism accentuat (fiind de fapt un amestec de numeroase biotipuri) care
le confer o foarte mare plasticitate ecologic.
n ameliorare, soiurile locale se folosesc ca material de selecie n
vederea identificrii i izolrii unor genotipuri valoroase i rar ca genitori
pentru hibridare. La plantele alogam ale sunt folosite i ca material iniial
pentru obinerea liniilor consangvinizate.
Materialul iniial din flora spontan cuprinde genuri, specii, subspecii,
forme spontane nrudite cu specia de cultur la care se efectueaz
ameliorarea.
Formele spontane reprezint o important surs de germoplasm
pentru procesul de ameliorare datorit numeroaselor nsuiri de rezisten la
factorii nefavorabili de mediu, la boli i duntori, a capacitii de adaptare i
a plasticitii ecologice, caracteristici rezultate n urma ndelungatei aciuni a
seleciei naturale.
Stocuri genetice speciale. Materialul iniial de ameliorare pentru
fiecare specie de cultur trebuie s conin i diferite surse de utilizare
special n programele de ameliorare. Astfel, sunt necesare forme care
posed anumite nsuiri genetice, citogenetice i citoplasmatice care pot fi
transmise altor forme ca: surse de gene de rezisten, la anumite boli i
duntori; surse de androsterilitate; surse de gene restauratoare de fertilitate
a polenului; surse de aneuploidie i surse de gene specifice (porumb, sfecl,
cnep etc.); surse ce pot servi ca martori citologici (floarea-soarelui, orz)
etc.
Materialul creat cuprinde forme create n cadrul unor programe de
ameliorare care nu au fost introduse n cultur (linii, populaii hibride). Aceste
materiale pot fi mbuntite prin corectarea deficeinelor n cadrul
laloratoarelor unde au fost create.
28
UNITATEA DE NVARE 5
Cmpul de control
CCO
CCC
Testare la ISTIS
Figura 5.1. Schema seleciei n mas simpl
Cmpul de alegere
31
Cmpul de alegere
CC
Cmpul de control
CCO
CCC
Testare la ISTIS
Figura 5.2. Schema seleciei n mas repetat
Selecia n mas pe grupe se aplic dac materialul iniial este foarte
heterogen i concomitent se pot forma mai multe grupe de elite care trebuie
s se deosebeasc ntre ele prin caractere evidente. Extragerea elitelor se
poate realiza o singur dat, iar n cadrul grupelor formate, la plantele
alogame se poate aplica o selecie de uniformizare.
Cmpul de alegere
Cmpul de control
CC
Culturi comparative de orientare
CCO
Culturi comparative de concurs
CCC
Testare la ISTIS
Figura 5.3. Schema seleciei n mas pe grupe
Selecia individual.
32
Cmpul de selecie
Cmpul de control
CC
Culturi comparative de orientare
CCO
Culturi comparative de concurs
CCC
Testare la ISTIS
Figura 5.4. Schema seleciei individuale cu o singur legere
Cmpul de alegere
33
Cmpul de selecie
Cmpul de selecie
Cmpul de control
CC
Culturi comparative de orientare
CCO
Culturi comparative de concurs
CCC
Testare la ISTIS
Figura 5.5. Schema seleciei individuale repetat
ntrebri de autoverificare:
1. Definiia seleciei.
2. Clasificarea seleciei dup scopul urmrit.
3. Care este principiul seleciei n mas i care sunt variantele de
lucru.
4. Care este principiul seleciei individuale i care sunt
variantele de lucru.
34
UNITATEA DE NVARE 6
Cmp de hibridare
Cmp hibrizi F1
Cmp alegere
F2
41
Culturi
comparative
de orientare
Culturi
comparative
de concurs
Figura 6.1.Schema seleciei genealogice
Selecia n populaii pariale.
Conform acestei metode alegerea de elite ncepe n F 2 fcndu-se
apoi o triere a descendenelor acestora, cele mai bune descendene se vor
nmuli pn n generaiile F5-F7. (figura 6.3.)
Pe parcursul nmulirii, fiecare descenden va da natere unei
populaii. Prin acest mod de lucru se elimin de timpuriu multe din
genotipurile nevaloroase. Pentru a nu se pierde din variabilitatea aprut se
recomand ca numrul elitelor reinute n F 2 s fie foarte mare. Observarea
descendenelor n timpul nmulirii se face cu mare atenie pentru ac s nu fie
eliminate populaii ci indivizi valoroi.
La plantele alogame hibridarea poate fi folosit n dou direcii. O
posibilitate ar fi asemntoare celei aplicate la plantele autogame, dar soiuri
se cultiv la tot mai puine specii alogame. Pentru crearea de hibrizi, la
alogame, hibridarea se efectueaz n vederea valorificrii heterozisului
manifestat n generaia F1.
Efectuarea hibridrii A x B
F1
F2
F3
F4
F5-7
42
Cmp selecie
Cmp de control
Culturi comparative
orientare
de
Culturi comparative
concurs
Figura 6.2. Schema seleciei tardive
de
Efectuarea hibridrii
AxB
F1
F2
Cmp selecie
F3
Inmulire
F4
nmulire
F5
Cmp de selecie
43
Cmp de control
Culturi comparative de
orientare
Culturi comparative de
concurs
Figura 6.3. Schema seleciei n populaii pariale.
6.4. Tehnica general a hibridrii.
Hibridarea este o metod complex care necesit o succesiune de
operaii. Etapele care trebuie urmrite n obinerea unui hibrid prezint o line
general la toate speciile, dar i multe particulariti i diferene de la o
specie la alta
6.3.1.Stabilirea obiectivelor ameliorrii prin hibridare.
Stabilirea obiectivelor ine cont de specia cu care se lucreaz. Aceasta
trebuie s fie cunoscut foarte bine n privina variabilitii, mai ales care sunt
limitele existente pentru caracterele i nsuirile luate n studiu. Pentru a
uura munca de ameliorare, este bine ca numrul caracterelor care trebuie
mbuntite s fie redus, Din acest motiv, materialul de la care se pornete
trebuie s fie valoros, deficitar n privina unui numr mic de caractere.
O atenie deosebit trebuie acordat caracterelor cantitative
(capacitate de producie, calitate), care au o eritabilitate redus, din cauza
complexitii determinismului genetic mbuntirea lor se face foarte greu.
Se recomand ca aceste nsuiri s constituie obiective principale, celelalte,
care prezint un determinism genetic mai simplu i au o expresivitate mai
pronunat n fenotip, s fie ameliorare n paralel. Foarte important este
cunoaterea caracterelor i nsuirilor care limiteaz atingerea obiectivelor
principale. Pe ct posibil, genitorii trebuie s fie lipsii de asemenea nsuiri.
Succesele realizate de ctre ameliorare depind n mod hotrtor de
alegerea unui material iniial valoros. n cazul hibridrii, care este o metod
folosit frecvent n obinerea de soiuri, alegerea formelor parentale este cea
mai important faz. Modelul imaginat a fi obinut n urma hibridrii depinde
de gsirea unor forme parentale n care s fie reunite toate genele implicate
n realizarea nsuirilor urmrite.
6.4.Efectuarea hibridrii
Hibridarea necesit mai multe operaiuni prin care se asigur
polenizare formei mam cu polen de la forma tat. Pentru aceasta este
necesar s fie urmrite mai multe etape, fiecare avnd caracteristici distincte
i momente prielnice de executare. n ordinea desfurrii lor, n continuare
vor fi prezentate fazele tehnicii de hibridare.
Alegerea genitorilor este o etap despre care s-a vorbit deja,
aceasta trebuind fcut pe baze tiinifice i cu mult nainte de nfiinarea
cmpului de ameliorare. Din parcelele care cuprind genitorii, n scopul
aplicrii operaiilor necesare hibridrii se vor alege plantele cele mai
viguroase, cu nsuiri caracteristice cultivarului din care fac parte, neatacate
de boli i duntori, cu inflorecene bine dezvoltate. Aceste criterii sunt
44
valabile att pentru plantele cu care se lucreaz fcnd parte din forma
mam, ct i pentru cele din forma tat.
n cazul formei mam, inflorescenele vor fi izolate, pregtite pentru
castrat, castrate, apoi polenizate. De la plantele formei tat se va recolta
polen folosit n polenizarea florilor castrate.
Pregtirea plantelor pentru castrat este prima lucrare tehnic
asupra plantelor mam. Momentul optim pentru castrat este nainte de
maturizarea polenului. Pentru castrat se vor alege florile cele mai dezvoltate.
n cazul plantelor cu flori care nu sunt grupa n inflorescene, pentru hibridri
se utilizeaz numai primele 2-3 flori, acestea fiind mai bine hrnite de ctre
plant. Este recomandabil ca celelalte flori s nu fie lsate s fructifice ( la
ardei, vinete). n cazul speciilor la care florile sunt grupate n inflorescene se
vor folosi flori din primele inflorescene aprute: primele 2-3 inflorescene ( la
tomate, mazre, fasole), spicul principal la cerealele pioase, primul tiulete
la porumb, etc. Din fiecare inflorescen se vor elimina florile mai mici
lsndu-se numai cele mai mari i uniforme ca dezvoltare. Astfel, la gru se
ndeprteaz spiculeele de la baz i de la vrf, iar n spiculeele rmase se
las numai florile bazale; la mazre, tomate, via de vie, pomii fructiferi se
ndeprteaz din inflorescen florile mai mici. ndeprtarea acestor flori, ct
i ndeprtarea nveliului floral (secionarea glumelor i paleelor la cerealele
pioase, secionarea petalelor la florile de fasole, floarea soarelui, varz,
etc.) pentru a uura ajungerea la anterele staminelor care trebuie eliminate,
constituie faza de pregtire nainte de castrat.
Aceast operaiune pregtitoare are o serie de particulariti n funcie
de specie. n majoritatea cazurilor este obligatorie deoarece castrarea,
fcndu-se nainte ca floarea s fie matur, anterele sunt acoperite de
nveliul florii sau al inflorescenei.
Castrarea este operaiunea cea mai important. Dup ce floarea a
fost pregtit, urmeaz ndeprtarea anterelor sau distrugerea viabilitii
polenului. Aceast operaiune este obligatorie la speciile cu flori hermafrodite,
fie c sunt de la specii autogame, fie c sunt ale speciilor alogame. La
speciile cu flori unisexuate (monoice sau dioice) este suficient izolarea
florilor femele pentru a preveni polenizarea la ntmplare. Aceast izolare
trebuie fcut nainte cu cel puin dou zile ca stigmatul s fie receptiv pentru
ca, eventualul polen ajuns pe stigmat, s-i piard viabilitatea pn la
ajungerea la maturitate a stigmatului.
Castrarea florilor hermafrodite se poate realiza n mai multe moduri.
La cele mai multe specii se realizeaz manual, cu ajutorul pensetelor . Dac
de aplic aceast metod, se va avea grij ca anterele s fie extrase fr a
se rni sau fr a se rupe. Chiar dac antera nu a eliberat polen, dup
rnirea ei polenul se poate disemina i poate fi capabil de fecundare. De
asemenea, atenia trebuie s fie ndreptat i n direcia protejrii stigmatului.
n cazul speciilor cu flori de dimensiuni mici ( sfecl, soia, morcov), lucrarea
se face foarte dificil, numai de ctre persoane calificate i cu experien.
Castrarea poate fi nlocuit cu unele metode prin care se distruge
viabilitatea polenului. Aceste metode se practic numai cnd castrarea este
imposibil de realizat din cauza dimensiunilor foarte reduse a florilor.
Astfel, la unele specii se practic sterilizarea polenului pe cale termic,
prin introducerea inflorescenelor n ap cald. Spre exemplu, la orez,
sterilizarea se face la 45-48 0C, timp de 1-10 minute. Sterilizarea termic se
45
mai aplic i la sorg sau la unele ierburi furajere. La gru i la orez a fost
ncercat i sterilizarea prin temperaturi sczute (la 0 0C). Aceste procedee
nu asigur o sterilizare total, n plus sunt destul de greu de realizat n
condiii de cmp.
Literatura se specialitate semnaleaz i procedee chimice, prin
utilizarea unor substane care s distrug viabilitatea polenului. n cazul
lucernei, florile se introduc n alcool etilic. La alte specii au fost ncercate alte
categorii de substane, aa numiii ageni chimici de hibridare.
Exist i situaii speciale, la speciile autoincompatibile (unele soiuri de
mr, cire, nuc, ceap, varz, sfecl), la care castrarea nu este obligatorie,
.ns pentru siguran, se recomand a fi efectuat.
Izolarea i etichetarea inflorescenelor castrate este necesar
pentru a se mpiedica polenizarea la ntmplare. Deoarece, n momentul
castratului, stigmatele sunt imature, pn la polenizare trebuie s treac 1-2
zile.
Izolarea se face cu diferite tipuri de izolatoare, n funcie de specie.
Cel mai des folosite sunt pungile de hrtie de pergament (la cereale,
leguminoase, pomi fructiferi). Se pot folosi i izolatoare din tifon sau pnz
(la floarea soarelui, ceap) n cazurile n care inflorescenele sunt mai mari.
Izolatoarele trebuie s asigure o izolare perfect, dar s asigure
inflorescenei i viitoarelor fructificaii, o bun aerare, umiditate
corespunztoare i lumin suficient.
Izolatoarele se nchis n partea de jos i se prind de tulpina plantei prin
diferite metode (agrafe, inele de cauciuc, sfoar).
Odat cu punerea izolatorului se face i etichetarea. Ataarea unei
etichete este obligatorie i n cazul izolatoarelor din materiale textile. Pe
pungi, se scrie cu creionul, direct pe pung: data efecturii castratului i
combinaia hibrid care urmeaz a fi realizat.
Polenizarea se efectueaz la 1-2 zile dup castrat, perioad n care
stigmatele se maturizeaz. n funcie de viabilitatea polenului, acesta trebuie
utilizat proaspt sau poate fi recoltat i pstrat. n limita posibilitilor, se
recomand folosirea polenului proaspt. Dac este nevoie ca polenul s fie
pstrat, aceasta se poate face numai la temperaturi sczute (0-4 0C, numai
pentru cteva zile. Este posibil i pstrarea pe termen mai lung, dar n acest
caz trebuie controlat foarte riguros att temperatura, ct i umiditatea.
n privina polenizrii, exist mai multe modaliti de lucru: polenizare
liber, semiliber i forat.
Polenizarea liber const n lsarea florilor castrate neizolate, polenul
urmnd a fi adus de vnt sau de insecte. Aceast hibridare liber se practic
foarte rar n lucrrile de ameliorare. Posibilitatea utilizrii ei apare la pomii
fructiferi, cnd se lucreaz n livezi cu soiuri autoincompatibile, unde sunt
intercalate soiuri polenizatoare. n asemenea cazuri, exist o oarecare
siguran asupra hibridului ce va rezulta.
Polenizarea semiliber se aplic la un numr mare de specii. Aceasta
const n introducerea sub izolator, alturi de inflorescena castrat, a 1-3
inflorescene de la forma tat. Pentru aceasta, cei doi genitori trebuie s fie
semnai apropiat. n caz contrar, inflorescenele genitorului patern se menin
viabile n recipieni cu ap. Punerea n contact a polenului cu stigmatul , sub
izolator, se face liber, prin scuturare (la ovz) sau prin introducerea n izolator
a unor insecte polenizatoare ( la ceap, morcov)
46
4
47
Rspunsuri
corecte
UNITATEA DE NVARE 7
conform formulei:
m
2
O O O Cmp de autopolenizri
O
O
O
O
O
Primul ciclu
Cmp de polenizare liber
O O
O O
Cmp de
autopolenizri i
testare
Tester
51
Cmp de polenizare
liber
Figura 7.2. Schema seleciei recurente pentre capacitate combinativ
7.4. Obinerea i selecia liniilor consangvinizate.
Crearea liniilor consangvinizate se face prin autopolenizare forat 710 generaii, n funcie de gradul de heterozigoie. Aceasta presupune
izolarea inflorescenelor nainte de nflorit, colectarea polenului i distribuirea
acestuia pe stigmate. Ca izolatoare se folosesc pungi din hrtie sau sculei
din tifon. Seminele autopolenizate se pstreaz separat de la un la altul
pentru a se continua consangvinizarea.
Selecia liniilor consangvinizate se desfoar n mai multe etape.
Pentru caracterele cu determinism simplu, neafectate de ctre depresiunea
de consangvinizare (cum sunt rezistena la boli, la factori de clim
nefvorabili), selecia are pe parcirsul consangvinizrii, eliminndu-se de la
autopolenizare plantele care manifest simptomele afeciunilor.
Selecia hotrtoare este cea pentru capacitatea combinativ. Pentru
aceast nsuire, selecia se aplic dup ce liniile consangvinizate au fost
create. Selecia are loc n dou etape.
n prima etap se testeaz capacitatea combinativ specific, n
hibridri test-cross. Liniile create se ncrucieaz cu un tester. De regul, ca
tester se utilizeaz un hibrid simplu. Capacitatea combinatic general se
evalueaz n fucnie de performanele hibrizilor rezultai din testare.
T testerul, A, B, C, D, E, F
AxT BxT CxT DxT ExT FxT
n etapa a doua se organizeaz hibridri dialele pentru testarea
capacitii combinative specifice. Liniile care corespund n privina capacitii
combinative generale, se vor ncrucia ntre ele n toate modurile posibile.
Dintre hibrizii rezultai, n funcie de performane, se vor alege cei care vor fi
testati n culturi compatative.
AxC AxD AxF
CxD DxF
DxF
7.5. Utilizarea liniilor consangvinizate
Liniile consangvinizate nu prezint valoare economic din cauza
depresiunii de consangvinizare. Ele se folosesc la obinerea de hibrizi,
ncrucindu-se ntre ele. n urma hibridrii, la hibrizii din prima generaie se
manifest efectul heterozis care duce la sporirea capacitii de a produce
semine sau fructe (heterozisul generativ), rdcini, frunze sau tulpini
(heterozis somatic) sau a capacitii de adaptare la condiii nefavorabile de
mediu (heterozis adaptativ)
n funcie de numrul liniilor participante la crearea hibridului, n
producie se cultiv diferite tipuri de hibrizi. Hibrizi simpli (ntre dou linii
consangvinizate), hibrizi triliniari (ntre un hibrid simplu i o linie
52
Menintorul de fertilitate
MS ms
UNITATEA DE NVARE 8
55
poliploide este ntotdeauna mai groas iar rdcinile sunt mai mari dect a
celor diploide corespunztoare. Florile, fructele i seminele plantelor
poliploide sunt mai mari dect la formele diploide, dar adeseantr-un numr
mai redus. Formele poliploide prezint un ritm de cretere mai lent, nfloresc
mai trziu i au o perioad mai lung de vegetaie.
Comparativ cu diploizii, autopoliploizii au o fertilitate mai redus
datorit unor deranjamente n timpul formrii polenului i fecundrii,
deranjamente provocate de mperecherea i distribuia anormal a
cromozomilor n gamei.
Datorit acestor particulariti, autopoliploidia se recomand n
ameliorarea speciilor cultivate pentru pri vegetative, i mai puin a celor
cultivate pentru semine sau fructe.
Pentru a valorifica n mod corespunztor variabilitatea genetic prin
autopolilpoidie, se recomand ca formele utilizate ca meterial iniial s fie
forme homozigote. n cazul utilizrii heterozigoilor, genele recesive se pot
pierde n populaie, deoerece rapoartele de segregare mendeliene sunt mult
mai complixcare i frecvena homozigoilor recesivi este mult mai redsus.
Un alt element care influeneaz alegerea materialului iniial, este
numrul cromozomilor formelor cu care se lucreaz. Se recomand utilizarea
unor forme cu numr mai mic de cromozomi.
Dup numrul multiplicrilor setului cromozomial de baz,
autoploiploizii sunt: triploizi (3x), tetraploizi (4x), pentaploizi (5x), hexaploizi
(6x), etc.
8.6.Etapele ameliorrii prin autoploidie.
Inducerea autoploizilor se face prin mai multe metode (folosindu-se
colchicina sau produsul sintetic colcemida, care are efect similar). Colchicina
se aplic pe vrfurile de cretere ale plantelor prin udarea cu o soluie
apoas, prin stropire cu emulsie sau prin frecare cu o past de lanolin.
Tratamentul este eficient cnd se aplic la seminele germinate, la plantule,
rdcini sau puncte de cretere, ca de pild la boboci.
Pot fi folosite i metode fizice prin care se caut dereglarea diviziunii
celulare. Dintre acestea, n trecut s-au folosit ocurile de temperatur i
centrifugarea. n perioada actual metoda chimic, de tratare cu colchicin
este cea mai eficace.
Identificarea autopoliploizilor se face n prima generaie dup
aplicarea tratamentului. Calea direct de identificare este studiul la
microscop i numrarea cromozomilor. Se pot aplica i metode indirecte,
bazate pe corelaiile strii de poliploidie cu unele nsuiri morfologice: mrime
a frunzelor i florilor, mrime i densitate a stomatelor, mrimea grunciorilor
de polen, etc.
Formele poliploide se folosesc ca noi soiuri la speciile la care
modificrile datorate strii de poliploidie sunt avantajoase. Soiuri de acest tip
apar la plantele furajere (trifoi rou) care prezint un foliaj bogat. La secar
soirile tetraploide dau producii mai mari pentru c prezint boabe mai mari.
Formele cu grad par de ploidie (4x, 6x) se creeaz la plantele care se cultiv
i se nmulesc prin semine. Soiuri tertaploide exist n cultur i la pomii
fructiferi, fructele acestora avnd dimensiuni mai mari.
Formele cu grad impar de ploidie (3x) sunt forme sterile i intereseaz
la speciile la care se dorete obinerea de fructe fr semine. Acestea se
60
UNITATEA DE NVARE 9
METODE NECONVENIONALE FOLOSITE N AMELIORAREA
PLANTELOR
Cuvinte cheie: biotehnologie, culturi in vitro, medii de cultur, factori
de cretere, micromultiplicare, plante libere de viroze, hibridare somatic,
mutagenez in vitro, trangenez.
Rezumat
Biotehnologia, conform definiiei OCDE include orice tehnic ce
presupune utilizarea unor organisme vii sau unor componente ale acestora
pentru a ameliora plante sau animale, pentru a obine i modifica produse
sau pentru a produce microorganisme cu utilizri speciale
La plante, s-a evideniat capacitatea unor fragmente detaate din
esuturile plantelor de a genera prin cultur pe medii de cretere adecvate i
n condiii aseptice, ntregul organism.Aceast capacitate denumit
totipoten.
Culturile de esuturi se iniiaz n general din fragmente de esut
multicelular, care se numesc explante i care se obin din planta vie.
Explantele pot proveni din frunz, tulpin, rdcin, peiol, hipocotil,
cotiledon, embrion, diferitele meristeme. Pot fi folosite pentru regenerarea
plantelor i antere, polen, ovare, ovule. Pentru inducerea culturilor in vitro
sunt necesare: mediu de cultur difereniat, asepsie total, climat controlabil.
Metodele neconvcenionale sunt metode specifice biotehnologiilor i
sunt recent aprute n procesul de ameliorare. Avatajul lor este c pe
suprafee mici se poate manipula un numr marte de genotipuri. Tehnici ale
culturilor in vitro pot fi folsoite i pentru nmulirea formelor valoroase i
chiar nlocuirea producerii de smn de tip clasic. prin micropropagare,
genotipul se multiplic ntr-un numr nelimitat de exemplare, fr modificri.
Prin aceste tehnici se poate obine material de plantat liber de viroze Asupra
culturilor inh vitro pot fi aplicate metode asemntoare celor clasice
( selecia a variaiilor somaclonale, selecie pe medii selective, hibridare
sexuat sau somatic, mutgenez in vitro, poliploidizare) sau se poate
obine o variabilitate mult mai ampl prin transgenez.
Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 3 ore
9.1. Importana biotehnologiilor vegetale.
Speciile vegetale, aceste extraordinare i complexe structuri biologice
au fost n fapt proiectate printr-un singur proces evoluia natural.
Evoluia plantelor pe cale natural s-a desfurat n condiiile luptei
pentru existen, fiind avantajai indivizii i speciile cu o capacitate sporit de
adaptare la condiiile de mediu.
62
65
66
fost prelevat explantul de origine. Principiul este simplu i pus la punct sub
aspect teoretic.
Obinerea de plante libere de viroze. Propagarea clonal prin culturi
de esuturi meristematice, care a devenit o metod convenional de
multiplicare la unele specii (orhidee, plante horticole etc.), are un avantaj
decisiv care const n aceea c plantele rezultate sunt sntoase, nefiind
atacate de virui sau ali ageni patogeni.
Virusurile sunt prezente obinuit la speciile cu reproducere vegetativ
i nu pot fi combtute pe cale chimic, precum bacteriile i ciupercile.
Prezena virusului este foarte mare n frunzele i tulpinile plantelor i este
mic sau absent n esuturile meristematice aprute recent. Este clar c,
efectund clonarea din explantele vrfurilor de meristeme, se regenereaz
plante libere sau aproape libere de viroze.
Pstrarea i schimbul de germoplasm. Pstrarea germoplasmei
pe termen lung este necesar pentru procesul de ameliorare, pentru situaii
n care se cere o multiplicare rapid a materialului stocat i pentru
schimburile internaionale de materiale genetice. Ea se poate realiza n
condiiile deosebit de favorabile prin folosirea culturilor in vitro.
n cazul propagrii culturilor care se nmulesc vegetativ, metodele in
vitro sunt extrem de valoroase pentru c un numr mare de clone poate fi
pstrat ntr-un spaiu relativ redus, n condiii libere de boli, cu o vitez foarte
ridicat de multiplicare att pentru plantele de cultur anuale ct i pentru
cele lemnoase perene. Comparativ, prin folosirea metodelor tradiionale,
aceste plante, n special cele lemnoase necesit spaii foarte mari pentru
pstrare i sunt vulnerabile la boli.
Perioada de pstrare poate fi prelungit prin subculturi de rutin. Acest
mod de prezervare pe termen lung a genotipurilor valoroase este cel mai
sigur i ieftin i nu necesit echipamente costisitoare.
Avantajele i dezavantajele micropropagrii, comparativ cu
metodele convenionale de ameliorare i producere de material de
reproducere. Cultivarea in vitro a materialului vegetal (esuturi
meristematice, celule, embrioni somatici) prezint numeroase avantaje i
anume:
- asigur o rat de multiplicare ce nu poate fi atins de nici una dintre
metodele tradiionale. Prin aceast modalitate, la multe specii de cultur, n
special plante ornamentale, pomi i arbuti fructiferi i arbori, se asigur
multiplicarea n mas i rapid a noilor cultivare, ceea ce poate permite chiar
schimbarea rapid a sortimentului existent;
- asigur meninerea i nmulirea unor genotipuri dificil sau imposibil
de nmulit prin metode convenionale, precum cele heterozigote,
autoincompatibile, androsterile sau la care seminele germineaz foarte slab
sau sunt incapabile de germinare;
asigur material de reproducere liber de viroze i n unele cazuri i de
micoze;
- permite stocarea materialului n condiii relativ facile ceea ce face
posibil desfurarea produciei oricnd n timpul anului, eliminnd
dependena nmulirii de sezonul optim i de fenomenele de laten;
- permite prezervarea stocurilor genetice n spaii foarte restrnse i
pe perioade lungi fr pericole de contaminare cu ageni patogeni.
68
alt surs (virusuri, bacterii, animale, etc.), ceea ce extinde n mod nelimitat
posibilitile de ameliorare, compatibilitatea sexuat devenind neesenial.
Transgeneza presupune parcurgerea urmtoarelor etape: identificarea
i izolarea genelor de interes; realizarea unor construcii genetice (conin
secvene ADN care urmeaz a fi transferate, la care se ataeaz secvene
de reglare adecvate speciei sau esutului n care va funciona, pentru a
poseda semnalele utile expresiei genelor); clonarea (multiplicarea)
construciei genetice ntr-o bacterie; introducerea construciei genetice ntr-un
vector; introducerea genei la planta receptor; regenerarea plantelor
transgenice; selecia plantelor care exprim la un nivel optim caracterul
transferat; evaluarea n cmp a stabilitii expresiei transgenei.
9.5. Rezultatele i perspectivele folosirii transgenezei n
ameliorarea plantelor.
De la apariia primelor cultivare transgenice au trecut puini ani, dar
avantajele lor incontestabile au fcut ca aprecierea i rspndirea lor n
cultur s fie foarte rapide. Dac n 1986, s-a efectuat primul test
experimental al unui cultivar transgenic n condiii de cmp i deplin izolare,
n 1992 o astfel de form s-a introdus n cultur. n prezent asemenea forme
au fost obinute la peste 60 specii de cultur i suprafaa ocupat de acestea
depete , pe plan mondial, 45 milioane hectare.
Avantajele aduse de ingineria genetic sunt ns mult mai numeroase
i nu se rezum strict doar la aspectele economice sau de protecia mediului.
i ne gndim mai ales la potenialul extraordinar al ingineriei genetice de
sporirea diversitii biologice a plantelor, dar i la timpul infinit mai scurt
pentru apariia unor noi forme comparativ cu perioadele foarte lungi necesare
pentru apariia unor astfel de forme sub aciunea factorilor naturali, sau chiar
a metodelor neconvenionale de ameliorare.
Dar cel mai important fapt, dup cum meniona un renumit
biotehnolog, este c natura face modificri mari i substaniale, dar ea este
o cutie neagr, modificrile fiind haotice, ntmpltoare. n schimb, cine
cunoate genele le poate stpni i deci riscul modificrilor genetice fcute
de acetia este incomparabil mai mic dect al celor naturale.
Tehnologia ADN-ului recombinat este astzi inclus n categoria
metodelor de ameliorare folosit deja n mod practic la crearea de forme
tolerante la erbicide i rezistente la insecte.
Referindu-ne la implicarea ingineriei genetice n ameliorarea plantelor
trebuie s menionm i aplicaiile acesteia n metodologia propriu-zis de
ameliorare i producere de smn (obinerea de forme androsterile,
restauratoare de fertilitate; producerea de smn la speciile
autoincompatibile etc.).
Cele mai cunoscute i semnificative rezultate ale transgenezei n
ameliorarea plantelor, se refer la formele obinute cu rezisten la erbicide,
la atacul duntorilor i patogenilor.
Rezultatele obinute n ameliorarea rezistenei plantelor de
cultur la erbicide. Erbicidele reprezint o mare parte din pesticidele
utilizate n agricultur, majoritatea fiind selective i prezentnd riscuri
ecologice majore datorit remanenei lor, ele nefiind biodegradabile.
72
76
transport) pot provoca amestecuri ntre soiuri dac nu se cur foarte bine
dup fiecare soi.
Depozitarea necorepunztoare este un alt motiv al impurificrirlor. Se
recomand ca loturile de smn s fie depozitate i manipulate numai
ambalate n saci etichetai. Depozitarea n vrac, n magazii
necompartimentate sau n saci fr etichet este foarte periculoas.
Driftul genetic este un factor care are ca i consecin restrngerea
bazei genetice a populaiei soiului ca urmare a pierderii unor gene sau, n
cazuri mai grave, chiar a unor genotipuri care intr n structura soiului. Acest
fenomen apare ca o consecin a nerespectrii metodologiei producerii de
smn. Dac nmulirea soiului pornete de la cantiti mici de smn n
care nu au fost cuprinse toate biotipurile componente sau proporia de
participare a fiecrui biotip nu a fost respectat, n foarte scurt timp, soiul va
prezenta caracteristici deosebite fa de cele avute n momentul lansrii n
producie. Driftul genetic este poarte periculos n cazul soiurilor polimorfe,
constituite din mai multe biotipuri, mai cu seam dac acestea difer ntre ele
printr-un numr mic de gene.
Pentru a preveni apariia unor efecte negative datorate driftului
genetic, nmulirea soiurilor neomogene trebuie s nceap cu nmulirea
separat a fiecrui biotip, dup care acestea se vor amesteca respectnduse proporia de participare a fiecrui biotip. Dac biotipurile difer ntre ele
prin gene specifice rezistenei la diferite rase fiziologice a unui agent
patogen, se recomand practicarea infeciilor artificiale pentru a avea
sigurana c genele corespunztoare nu s-au pierdut. La plantele alogame,
afectarea fondului de gene din populaia soiului din cauza driftului genetic
este mult mai periculoas. La acestea, plantele tipice care stau la baza
nmulirii soiului trebuie foarte atent studiate. Genele recesive se pot pierde
foarte uor la o nmulire neatent.
Segregrile ntrziate apar n cazul soiurilor selecionate din populaii
hibride la plantele autogame. Dac selecia a nceput n primele generaii
segregante i descendenele nu au fost urmrite foarte atent, este posibil
apariia unor segregante capabile s impurifice soiul deoarece, este cunoscut
c acest fenomen se poate manifesta, chiar i n generaia F 15. Ca urmare, n
primii ani de cultivare a unui soi nou se impune o purificare biologic foarte
atent i mai cu seam, o studiere riguroas a descendenelor plantelor
tipice acre stau la baza procesului producerii de smn.
Condiiile ecologice pot afecta valoarea biologic a unui soi. Pe
lng faptul c n condiii improprii de cultur acioneaz selecia natural, la
unele specii smna se va deprecia prin dispariia biotipurilor valoroase i
scderea pronunat a valorii celor rmase. Seceta i temperaturile ridicate
pot afecta polenizarea (la porumb, leguminoase), astfel c produciile
realizate vor fi foarte mici. De asemenea, poate fi afectat acumularea
substanelor de rezerv n semine, crescnd gradul de itvire n
detrimentul capacitii de germinaie.
Duntoare pot fi i precipitaiile n exces care favorizeaz atacul
bolilor, stnjenesc polenizarea cu ajutorul insectelor (floarea soarelui, trifoi),
pot ntrzia recoltatul, situaie n care se ajunge la apariia cderii, a
supracoacerii i scuturrii ( la ovz, orz) sau chiar la ncolirea seminelor
nainte de recoltat (cum este cazul grului)
82
simpli comercial, cea a hibrizilor simplii forme parentale pentru hibrizi dublii
comerciali. Aceast categorie va fi supus certificrii pentru a respecta
cerinele referitoare la puritatea varietal i valoarea cultural.
Smna Cerctificat (C) poate fi produc de persoana fizice i
juridice autorizate, pe baza unui contract cu menintorul. Aceast categorie
cuprinde descendene ale seminei Baz n cazul soiurilor dar i smna
hibrizilor simplii sau dublii obinut n loturile de hibridare i destinat
nfiinrii culturilor pentru consum (F1). Aceast categorie biologic este
supus certificrii. La soiurile plantelor autogame pot aprea dou generaii
ale seminei certificate (C I i C II), pe cnd la plantele alogame, n cazul
hibrizilor, se admite o singur generaie (F1).
Pe lng aceste categorii biologice produse n cadrul unui proces de
nmulire fundamentat tiinific, ai pot aprea categorii ce se utilizeaz n
situaii limit, fiind destinate exclusiv obinerii unor culturi pentru consum.
Smna comercial este o smn care este certificat ca specie,
fr a se specifica soiul din care face parte, putnd face parte din populaii
locale bine conturate i stabilizate genetic. Cerinele care se impun sunt de a
prezenta caracterele specifice speciei i de a avea o valoare cultural bun.
Smna standard (St) este smna care este identificat ca specie
i soi dar nu se cunoate categoria biologic din care face parte. Poate fi
supus unui control oficial pentru a se stabili valoarea cultural i starea
fitosanitar. i aceast categorie este destinat obinerii unor culturi pentru
consum.
n procesul producerii de smn pot fi cuprinse toate tipurile de
cultivare. Acestea se difereniaz ntre ele prin nsuirile pe care le au i prin
metodele prin care au fost create. Cele mai importante tipuri de cultivare care
sunt cuprinse n producerea de smn sunt prezentate n continuare.
Soiul care este o populaie de plante creat prin metode
fundamentate tiinific, fiind caracterizat prin distinctivitate, omogenitate i
stabilitate. Pe lng soiurile astfel definite, caracterizate printr-un grad mare
de homozigoie la plantele autogame i indivizi heterozigoi ce constituie o
populaie cu o anumit frecven a genelor la cele alogame. Mai pot exista i
alte tipuri de cultivare asemntoare soiului: populaia local, soiul sintetic i
soiul compus.
Populaia local - este o grupare de indivizi nrudii dar diferii genetic
care aparin aceleiai specii i ocup un anumit areal avnd aceleai variaii
ereditare aprute datorit aciunii aceleiai selecii. La plantele autogame,
populaia local este un amestec de mai multe linii pure homozigote, iar la
alogame, un amestec de heterozigoi n continu schimbare.
Soiul sintetic - este un soi cu polenizare liber obinut din
componente stabile care prezint un anumit echilibru genetic, cu toate c
indivizii componeni sunt heterozigoi. n decursul nmulirii, componentele de
baz se certific, fiind controlate periodic.
Soiul compus constituie prima generaie rezultat din ncruciarea
unui numr mare de forme parentale stabile. Este asemntor hibrizilor, doar
c ncruciarea formelor parentale se face la ntmplare.
Linia consangvinizat este un material biologic cu genotipuri
homozigote, identice rezultate n urma autofecundrii forate i a unei selecii
aplicate mai multe generaii. n procesul de nmulire a liniilor
consangvinizate, la menintori trebuie parcurse urmtoarele etape:
86
UNITATEA DE NVARE 11
PREBAZ I (PB I)
Cmpul de obinere a categoriei
BAZ (B)
Cmpul de obinere a categoriei
CERTIFICAT (C)
92
Cmpul de meninere a
puritii biologice
PREBAZ I (PB I)
Cmpul de obinere a categoriei
BAZ (B)
Cmpul de obinere a categoriei
CERTIFICAT (C)
Figura 11.2. Schema producerii de smn la cerealele pioase
soiuri multiliniale
Tabelul 11.1.
Distanele minime de izolare
Cultura
Distana minim fa de :
Gru, orz, ovz 4 m fa de alte specii
50 m pentru categoria B
20 m pentru categoria C
Gru durum 100 m fa de grul comun, alte soiuri de gru durum
4 m fa de alte cereale pioase, alte categorii biologice
Secar, triticale 4 m fa de alte cereale pioase, alte categorii biologice
300 m pentru categoria B,
250 m pentru categoria C, fa de alte soiuri de secar i
triticale
Orez
50 m fa de alte loturi semincere
nsmnat cu
avionul
Tabelul 11.2.
Condiii de aprobare n cmp la cerealele pioase
Specificare
Categoria biologic
PB
B
C1
C2
Unitatea de control, ha
50 100 200
200
93
Panicum sp.
Specia i categoria
Tabelul 11.3.
Standarde privind valoarea cultural a seminelor de cereale pioase
Coninut maxim ca numr de semine la proba de
500 g
C1 i
2
85
98
10
Orez
B
C1 i
2
80
80
98
98
4
10
1
3
1
3
Tabelul 11.4.
Starea fitosanitar a seminelor la secara
Categoria biologic
Scleroi sai fragmente de scleroi de Claviceps
purpurea la eantionul de 1000 g
Baz
1
Certifict
3
11.3. Producerea de smn la leguminoasele pentru boabe
(mazre,m fasole, soia)
La leguminoasele pentru boabe, datorit faptului c sunt plante
autogame, se cultiv numai soiuri. Producerea de smn se desfoar
dup metodologia obinuit de nmulire a soiurilor, cu o modificare care
const n repetarea cmpului Prebaz I, deoarece la aceste specii (mai cu
seam la mazre), purificatul biologic se face destul de dificil. Verigile
producerii de smn sunt urmtoarele: (figura 11.3.)
Cmpul de alegerea plantelor tipice se nsmneaz cu Smna
amelioratorului sau cu smn categoria Prebaz I. Semnatul se va
efectua cu densitate redus pentru a se putea individualiza fiecare plat n
parte i pentru a mri coeficientul de nmulire. Alegerea plantelor tipice se
face n dou treceri deoarece caracterele evidente la nflorit, la maturitate nu
mai pot fi observate.
La nflorire se marcheaz plantele tipice soiului n funcie de tipul de
cretere, forma tufei, forma, culoarea i mrimea florilor, rezistena la cdere
i boli. Marcarea se face cu ajutorul unor fii de material plastic sau textil.
Dintre plantele marcate, la maturitate se vor reine numai cele care prezint
psti caracteristice soiului, uniformitate a coacerii, rezisten la boli i
duntori. Acestea se vor smulge i vor fi examinate n laborator n ceea ce
privete caracteristicile boabelor (culoare, form, mrime, etc.). Numai dup
aceast selecie, boabele fiecrei plante rmase se vor pstra separat.
Cmpul de meninere a puritii biologice. Smna fiecrei plante
tipic se va semna pe un rnd cu o lungime de pn la 2-4 m, la distana
ntre rnduri ce cel puin 50 cm. Compararea descendenelor se va face cu o
variant martor, semnat cu smna aceluiai soi, din categoria Prebaz I,
care are puritatea bioligic 100% i care urmeaz din 10 n 10 rnduri.
Descendenele sunt observate nc de la nflorit i continu pn la
maturitate, fiind notate cele care prezint plante netipice soiului. Cele rmase
se vor recolta n amestec.
Cmpul de obinere a categoriei Prebaz I. Prebaza I se obine n
doi ani consecutiv la mazre i fasole,. Care ua un coeficient de nmulire mai
mic i purificarea se efectueaz mai greu. (Prebaz I A i Prebaz I B).
Semnatul la mazre se efectueaz n benzi late de 2 m cu crri
separatoare de 25-40 cm, distana ntre rnduri fiind de 12,5 cm.. Aceste
crri servesc la accesul personalului pentru efectuarea purificatului biologic.
95
Cmpul de alegere a
plantelor tipice
Cmpul de meninere a
puritii biologice
A
Cmpul de obinere a categoriei
PREBAZ I (PB I)
B
Cmpul de obinere a categoriei
BAZ (B)
Cmpul de obinere a categoriei
CERTIFICAT (C)
Figura 11.3. Schema producerii de smn la leguminoasele pentru boabe
Condiii de certificare a leguminoaselor pentru boabe
Sunt supuse certificrii categoriile biologice ncepnd cu Prebaza II.
Controalele n vederea certificrii ncep n faza de nflorit i continu pn la
recoltare. Puritatea varietal de determin cu rama metric la mazre, iar la
fasole i soia se observ cte 50 plante dispuse pe dou rnduri vecine. n
cazul atacului de boli, se consider plante bolnave de bacterioze cele pe
care boala este prezent, iar n cazul antracnozei, cele la care petele ocup
mai mult de 1/5 din pstaie. Condiiie de certificare la leguminoasele pentru
boabe sunt prezentate n tabelele 11.5. pn la 11.7.
Tabelul 11.6.
Condiii de valoare cultural
Specia
Puritate fizic
Coninut maxim
Germinaia total
min.%
de semine din
min %
alte specii (%)
Mazre
98
0,1
80
Fasole
98
0,1
75
Soia
98
5 buc./100 g
80
Tabelul 11.6.
Condiii de certificare n cmp la leguminoasele pentru boabe.
Specificare
Categoria biologic
PB
B
C1
C2
Unitatea de control maxim - ha
25
50
100
Rotaia dup aceeai specie, ani - minim
3
Distana de izolare ntre soiuri i categorii
4
biologice, m - minim
Mazre
Puritate varietal % minim
99,9
99,7 99,0 98,0
Plante cu semine greu separabile (Pisum lips 1/30m
1/10m2
2
arvense)
Plante cu atac de: % - maxim
- ascochitoz (Ashochyta sp.)
1
5
- bacterioz (Pseudomonas pisi)
1,5
5
Fasole
Puritate varietal % minim
99,9
99,7 99,0 98,0
97
1,5
Soia
Puritate varietal % minim
Plante atacate de: % maxim
- man (Peronospora manshurica)
- mozaic (Soja virus 1)
99,5
99,5
99,0
1
1
99,0
2
5
Tabelul 11.7.
Specia
Mazre
Fasole
Soia
Condiii de
admisibilitate
5
lips
5
lips
2
3
ntrebri de autoevaluare:
1. Care sunt etapele nmulirii soiurilor la cerealele pioase?
2. Cum se realizeaz purificarea biologic la cerealele pioase?
3. care sunt buruienile cu semna greu separabil pentru cerealele
pioase?
4. Care sunt distanele de izolare pentru loturile semincere la cerealele
pioase?
5. Care sunt etapele nmulirii soiurilor la leguminoasele pentru boabe?
6. Care sunt lucrrile specifice n producere de smn la
leguminoasele pentru boabe?
7. Care care sunt diatanele de izolare la leguminoasele pentru boabe?
8. Care sunt condiiile fitosanitare de aprobare a loturilor semincere la
leguminoasele pentru boabe?
98
UNITATEA DE NVARE 12
100
D
Cmpul de
meninere a
puritii biologice
SIB
SIB
x
x x
SIB
x
SIB
Cmpul de
nmulire sub
izolator
Cmpul de
nmulire izolat n
spaiu
TT
M M M M TT
HS (AxB)
TT
M M M M TT
TT M M M M
TT
Lot de hibridare
simpl pentru
obinerea
formelor
parentale
HS (CxD)
TT M M M M TT
HT (AxB)C
Lot de hibridare
trilinar sau dubl
HD (AxB)
(CxD)
Figura 12.1. Schema producerii seminei hibride la porumb, pe baz de
forme parentale androfertile
AMS
AF
BNR
CRf
103
DRf
Cmp de
meninere a
puritii
biologice i
testri
AMS x BNR
AMS x CRf
AMS x DRf
Cmp de
control
AMS
AF
BNR
AF AMS AF
BNR AMS
BNR
AxB
HS pt
HD sau HT
C
Ax B
CRf
AMS
DRf
CRf
CRf
AxC
HS comercial
C
CRf
BNR
CxD
Cmpul de
nmulire
sub izolator
DRf
DRf
CRf
DRf
CxD
HS pt.HD
AxB
Cmpul de
nmulire
izolat n
spaiu
CxD
Lotul de
hibridare
simpl
Lotul de
hibridare
triliniar sau
dubl
(AxB)C
(AxB)(CxD)
HT comercial
HD comercial
Figura 12.2. Schema producerii seminei hibride la porumb pe baz de
androsterilitate nucleocitoplasmatic i restaurare a fertilitii polenului
regul pariti mai reduse se folosesc n cazul hibrizilor simpli, iar cele mai
mari la hibrizii dublii.
Ca lucrri speciale de ngrijire sunt purificatul biologic, copilitul formei
mam, castrarea sau verificarea formei mam, polenizarea suplimentar.
Copilitul este o lucrare obligatorie numai la plantele mam deoarece
copilii pot fi surse de polen. Lucrarea se efectueaz odat cu purificatul
biologic i const n eliminarea lstarilor crescui la baza tulpinii.
Purificarea biologic se face prin mai multe treceri i const n
eliminarea i scoaterea din lan a plantelor netipice i a celor atacate de boli i
duntori. Lucrarea se efectueaz att pe rndurile mam ct i pe cele tat
i trebuie ncheiat nainte de nflorit. Prima trecere se face n faza de 6-7
frunze. Pe rndurile tat ultima trecere trebuie efectuat nainte de apariia
mtsii la forma mam. Pe rndurile mam purificarea se ncheie dup
apariia mtsii.
Castrarea se efectueaz manual pe rndurile mam n cazul liniilor
normale. Perioada optim pentru castrat este la ieirea paniculului din
burduf, prin smulgerea acestuia. Trebuie avut atenie pentru a nu se rupe
mai mult de 1-2 frunze pentru c se vor sensibiliza plantele al atacul de
tciune. Trecerea prin lan pentru castrare se face la intervale de o zi pe o
perioad de dou sptmni. n perioada castrrii inspectorii aprobatori
efectueaz cel puin 5 controale n care verific existena plantelor mam
nflorite i necastrate
n cazul formelor androsterile se va efectua n perioada nfloritului un
control a plantelor mam pentru a depista plantele care prezint polen fertil.
Acestea se recunosc prin faptul c paniculele sunt mai bine dezvoltate i
prezint o culoare glbuie fa de cele androsterile care sunt mai mici, mai
slab ramificate i de culoare verde.
Polenizarea suplimentar se efectueaz n cazul n care forma tat
este srac n polen i n loturile de hibridare n care paritile sunt mai mari
(8:2 sau 12:4). Lucrarea se efectueaz prin atingerea paniculelor cu o
frnghie legat de dou stinghii care va ajuta scuturarea polenului. Perioada
optim din zi este ntre orele 9 i 13.
Recoltarea rndurilor mam pe care se realizeaz smna hibrid se
face manual sau mecanizat numai dup ce rndurile formei tat au fost
scoase din lan. Dup recoltare tiuleii se vor sorta manual ocazie cu care se
vor elimina cei netipici i atacai de boli. Umiditatea admis 14%.
Condiii de certificare n cmp a loturilor semincere de porumb.
Legislaia n vigoare prevede certificarea urmtoarelor categorii biologice:
- Prebaz II: linii consangvinizate care intr n componena hibrizilor
simpli forme parentale pentru hibrizi dubli sau trilinari comerciali
- Baz: linii consangvinizate care intr n componena hibrizilor simpli
sau trilinari comerciali i hibrizi simpli forme parentale pentru hibrizii dublii
sau trilianri
Certificat: prima generaie a hibrizilor simpli, trilianri sau dublii
comerciali.
Condiiile de certificare sunr prezentate n tabelele 12.1. pn la 12.4.
n nmulirea liniilor consangvinizate, acetea sunt supuse la minim trei
controale prin care se verific puritatea biologic. La liniile androsterile se
105
50 ha
2 ani
400 m
Lips
2%
5%
5%
5%
99,9%
Tabelul 12.2.
Hibrizi simpli forme parentale pentru hibrizi dublii.
Unitatea de control - maxim
Rotaia dup aceeai specie
Distana de izolare - minim
Boli i duntori de carantin inclusiv Cochliobolus carbonum
tiulei netipici - maxim
tiulei cu peste 20% boabe atacate de Fusarium sp. - maxim
tiulei atacai de Nigrospora orizae maxim
tiulei cu peste 5% boabe fisurate maxim
Puritate varietal - formam mam
- forma tat
106
50 ha
2 ani
400 m
Lips
2%
5%
5%
5%
99,9%
99,9%
Tabelul 12.3.
Hibrizi (simpli, trilianri, dublii) comerciali.
Unitatea de control - maxim
Rotaia dup aceeai specie
Distana de izolare minim
- pentru HD i HT
- pentru HS i HD zaharat
- pentru HS zaharat, floricele
Boli i duntori de carantin inclusiv Cochliobolus carbonum
tiulei netipici - maxim
tiulei cu peste 20% boabe atacate de Fusarium sp. - maxim
tiulei atacai de Nigrospora orzae maxim
tiulei cu peste 5% boabe fisurate maxim
Puritate varietal
- forma mam
- forma tat
100 ha
2 ani
200 m
300 m
400 m
Lips
2%
5%
5%
5%
99,8%
99,8%
Tabelul 12.4.
Categoria
biologic
PB, B
C
Numr de
semine strine
0
0
109
AMS AF
BNR
AMS x BNR
AMS x CRf
CRf
Cmp de
alegere a
plantelor tipice
Cmp de
control
AMS AF
Cmp de
polenizri SIB
SIB
AF AMS
AF
A
TT
SIB
MMMM
TT
C
TT
TT
Lot de hibridare
simpl
HS comercial
AXC
HS pt. HT
AxB
TT
MMMM
Cmp de
polenizare pe
grupe
M M
TT
Lot de hibridare
triliniar
HT comercial
(A x B) C
Figura 12.3. Schena producerii de smn hibrid la floarea soarelui
Tabelul 12.5.
Condiii de certificare n cmp la floarea soarelui.
110
Specificare
Unitatea de control maxim
Rotaia dup aceeai specie minim
Distana de izolare minim
Plante atacate de (% maxim):
- man (Plasmopara helianthi
putregai alb (Sclerotinia sclerotiorum)
-putregai cenuiu (Botrytis cinerea)
- Phomopsis sp.
Puritate varietal
Didstane de izolare n cazul soiurilor
Hibrizi forme
Hibrizi
parentale
comerciali
(categ.B)
(categ.C)
20 ha
100 ha
6 ani
1500 m
500 m
Lips
0,1
0,1
0,3
99,7 %
750 m
Lips
0,5
1,0
1,0
99,0%
500 m
Tabelul 12.6.
Procentul plantelor netipice admise n perioada nforitului
Categoria Baz (forme parentale)
linii consangvinizate
0,2%
hibrizi simpli:
- printele mascul, plante care au emis polen cnd cel putin
0,2%
2% din plantele de sex feminin aveau flori receptive
0,5%
- printele femel
Categoria Certificat (hibrizi comerciali):
componentul mascul, plante care au emis polen cnd cel putin
0,5%
5% din plantele de sex feminin aveau flori receptive
componentul femel
1,0%
Tabelul 12.7.
Condiii de valoare cultural a seminelor de floarea soarelui
Germinai Puritate Semine Sclerotinia
Coninutul maxim n numr
a minim
fizic
atacate sclerotioru
de semine din alte sepcii n
(%)
minim
de
m (numarul
proba de 1000 g
(%)
Botrytis
maxim de
Alte
Avena
Cuscut
sp. (%) scleroti sau specii
fatua,
a sp.
fragmente
de
A.sterilis
de scleroti
plante
in proba de
1000 g
85
98
5
10
5
0
0
Tabelul 12.8.
Starea sanitar a seminelor de floarea-soarelui
Specificare
Valoarea
111
10
3
5
0
0
ntrebri de autoevaluare:
1. Care sunt etapele producerii seminei hibride la porumb pe baz de
forme partentale normale?
2. Care sunt etapele producerii seminei hibride la porumb pe baz de
androsterilitate i restaurare a fertilitii?
3. Care sunt distanele de izolare a loturilor de hibridare la porumb?
4. Care sunt lucrrile specifice n loturile de hibridare la pourmb?
5. Cum se realizeaz castrarea formei mam?
6. care sunt procentele admise de plante mam nflorile i necastrate n
loturile de hibridare la porumb?
7. Care sunt etapele producerii seminei hibride la hibrizii de floarea
soarelui?
8. Care sunt distanele d eizolare a loturilor de hibridare la floarea
soarelui?
9. Ce msuri se iau pentru ajutarea polenizrii n loturile de hibridare la
floarea soarelui?
10. Cum se seamn loturile de hibridare la porumb i floarea soarelui?
UNITATEA DE NVARE 13
An I Cmpul de
meninere
a puritii
biologice
An II
.
An III
Categoria
PREBAZ I (PB I)
Categoria
PREBAZ II (PB II)
Categoria
BAZ (B)
Categoria
CERTIFICAT (C)
C1
C2
100
6
0,2
0,3
2,0
98,0
97,5
Tabelul 13.2.
Condiii de valoare cultural i stare fitosanitar a seminelor de in
Specificare
In pentru In pentru
fibr
ulei
Puritatea fizic % minim
99
99
Germinaia % minim
92
85
Semine din alte specii de plante, buc./150 g, maxim 15
15
Semine de Avena fatua, Avena ludoviciana, Avena
0
0
sterilis, buc./150 g, maxim
Semine de Lolium remontum, buc./150 g, maxim
2
2
Semine de Alopecurus mzsuroides, buc./150 g,
4
4
maxim
Semine de Cuscuta sp., buc./150 g, maxim
0
0
Umiditatea, % maxim
10
10
Semine atacate de Botrytis cinerea, % maxim
5
5
Semine atacate de Alternaria spp., , Colletotrichum
5
5
linicola, Fusarium spp., % maxim
Semine atacate de Phoma exigua var. linicola, %
1
5
maxim
13.3. Producerea de smn la cnep
La cnep se cultiv soiuri care pot fi dioice sau monoice. nmulirea
soiurilor dioice se efectueaz conform metodicii generale de nmulire a unui
soi. Pentru soiurile monoice, metodica este puin deosebit, deoarece
caracterul de monoicitate (dispunerea ambelor sexe pe aceiai plant) se
menine foarte greu.
13.3.1. Producerea de smn pentru soiurile de cnepa dioic.
Cmpul de alegere a plantelor tipice. Semnatul de face n cuiburi,
la distana ntre rnduri de 70 cm, iar ntre plante pe rnd, 50 cm. nainte de
nflorit se elimin plantele mascule netipice i cele atacate de boli i
115
Cmp de menienere a
puritii biologice
Smn categoria
PREBAZ I (PB I)
Categoria PREBAZ II (PB I)
Cmp de alegere a
plantelor tipice
117
Cmp de studiu a
descendenelor
Cmp de meninere a
puritii biologice
Smn
PREBAZ I (PB I)
Categoria PREBAZ II (PB II)
Categoria BAZ (B)
Categoria CERTIFICAT (C)
Figura 13.3. Schema producerii de smn la cnepa monoic
13.4. Particulariti tehnologice i certificarea n loturile
semincere la cnep.
n tehnologia producerii de smn la cnep intervin bunele lucrri
specifice.
Semnatul se efectueaz la distana ntre rnduri de 60-80 cm, culturi
fiind tratat ca o plant pritoare.
Purificarea biologic este principala lucrare efectuat n loturile
semincere de cnep. Cnepa dioic se purific n dou treceri. Prima
trecere se efectueaz nainte de nflorit cnd se acord atenie deosebit
pentru ndeprtarea tuturor plantelor mascule netipice. Plantele femele vor fi
purificate la a doua trecere, nainte de recoltat.
La cnepa monoic purificarea are loc tot n dou treceri. Prima
trecere trebuie efectuat cnd florile mascule sunt n faza de butoni florali. n
acest caz se ndeprteaz toate plantele mascule i cele monoice cu numr
foarte mare de flori mascule. A doua trecere se realizea nainte de recoltat,
cnd se elimin plantele netipice n privina altor caractere morfologice i
cele atacate de boli i duntori.
Recoltarea. Recoltarea loturilor semincere se realizeaz n dou
etape. Momentul optim este atunci cnd seminele de la baza inflorescenei
au culoarea specific soiului, chiar dac nu sunt ajunse la maturitate n
totalitate. n prima faz are loc tierea tulpinilor, legarea lor n snopi i
aezarea n foarfec pentru uscare i maturizare. n faza a doza are loc
treierarea.
118
UNITATEA DE NVARE 14
Rezumat
Sfecla de zahr este o plant alogam la care n cultur exist mai multe
tipuri de cultivare: soiuri diploide, soiuri poliploide i hibrizi triploizi. n
obinerea seminei hibride se utilizeaz androsterilitatea nucleocitoplasmatic. Pentru evitarea impurificrilor se reconand asigurarea unor
distane de izolare a loturilor semincere la distane foarte mari. Cartoful se
nmulete pe cale vegetatic. n nmulirea soiurilor de cartof trebuie luate
msuri pentru eliminarea plantelor degenerate din cauze ecologice sa din
cauza atacului de viroze. Din aceste motive, nmulirea cartofului este
autorizat n zone speciale, une propagarea virozelor este mpiedicat de
factori naturali.
Durata medie de parcurgere a unitii de studiu este de 3 ore
14.1. Producerea de smn la sfecla de zahr.
La sfecla de zahr se cultiv mai multe tipuri de cultivare: soiuri
diploide, soiuri poliploide i hibrizi triploizi. Metodologia este complicat de
faptul c sfecla este o plant bienal, smna obinndu-se numai n al
doilea an de cultur.
14.1.1. Producerea de smn pentru soiurile diploide la sfecla
de zahr.
Soiurile diploide se nmulesc dup metodica general de nmulire a
soiurilor. De fapt aceste soiuri sunt de tipul soiurilor sintetice, deoarece
nmulirea ncepe cu selecionarea din cadrul soiului a unor linii
consangvinizate care se vor poleniza liber ntre ele. Prin aceasta se caut
meninerea unei uniformiti mai bune a soiului. (figura 14.1.)
Cmpul de alegere a liniilor pure se va nfiina ca o cultur de
seminceri cu plante consangvinizate n generaia a asea de autopolenizare.
Plantele se autopolenizeaz. Pentru aceasta se izoleaz cu izolatoare din
hrtie. Smna fiecrei plante se va pstra separat pentru ca n anul
urmtor s se selecioneze descendenele dup aspectul butailor.
Descendenele care prezint butai netipici i cu slab capacitate de
producie se vor elimina. Butaii se vor recolta separat pe descendene.
Cmpul de obinere a categoriei Prebaz se realizeaz tot n doi
ani. n primul an butaii se planteaz pe descendene pentru a obine
smna din categoria Prebaz. Polenizarea se face dup modelul SIB, ntre
plantele din interiorul descendenei.. Descendenele se vor purifica nainte de
nflorit. La recoltat, smna descendenelor se va amesteca n anul urmtor
smna va fi semnat pentru a obine butaii din categoria Prebaz.
Cmpul de obinere a categoriei Baz se desfoar pe durata a
doi ani. n primul an se obine smna Baz, iar n al doilea an butaii Baz.
Butaii aparinnd unor linii consangvinizate diferite, se va realiza o hibridare
liber ntre acestea, astfel aprnd soiul sintetic. n ambii ani se efectueaz
purificri biologice. n primul an purificarea trebuie ncheiat nainte de
nflorit, iar n anul al doilea purificarea final se face dup recoltat, n funcie
de aspectul butailor.
Cmpul de obinere a seminei Certificat se organizeaz prin
plantarea butailor Baz i obinerea unei culturi de seminceri. Lucrarea
specific ce se execut este purificarea biologic.
120
S
1 2 3 4 5 6 7 8 9 ..
B
1 2 3 4 5 n
Microculturi comparative pt.
testarea capacitii de
producie
Cmp de alegere
i meninere a
puritii biologice
a liniilor
consangvinizate
1 2 3 4 5 n
Obinerea butailor
din liniile consangvinizate
valoroase
Categoria
PREBAZ
Categoria
BAZ
S
Categoria
CERTIFICAT
2x
Figura 14.1. Schema producerii de smn la sfecla de zahr soiuri
diploide (B cultur de butai, S cultur de seminceri)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Culturi comparative pt
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
122
Cmp de
alegere i
nmulire a
familiilor
potenial
componente
nmulirea
familiilor cu
bun
testarea capacitii de
producie
2 3 5 6 7 8 9
capacitate de
producie
S
B
H2 H3 H5 H6 H7 H8 H9
Testarea
capacitii
combinative
Categoria
PREBAZ I
S
Categoria
PREBAZ II
Categoria
BAZ
4x + 2x (3:1)
Metoda amestecului
x o o x o x o o x
o x o o o x o x o
4x
3:1
2x
Metoda sistematic
x o o o x o o o
x o o o x o o o
Categoria
CERTIFICAT
Amestec 4x+3x+2x
Figura 14.2. Schema producerii de smn la sfecla de zahr soiuri
poliploide (B-cultur de butai, S cultur de seminceri)
B
S
x x
x o o x
124
B
S
Categoria
PREBAZ I
x o o x
B
S
x o o x o o x
x o o x o o x
v v v v
v v v v
Categoria
BAZ
v v o o o v v o o o
v v o o o v v o o o
Categoria
CERTIFICAT
3x
Figura 14.3. Schema producerii de smn la sfecla de zahr hibrizi
triploizi
Condiiile generale de certificare sunt prezentate n tabelele 14.1.
pn la 14.3.
Condiii de certificare pentru samna monogerm i smna de
precizie sunt urmtoarele:
- smma monogerm trebuie s prezinte minimum 90% glomerule
germinate nu dau dect o singur plantul. Procentul de glomerule ce dau
trei plantule sau mai multe s nu depeasc 5%, calculat la numrul de
glomerule germinate.
- smna de precizie de sfecla de zahar trebuie s ndeplineasc
urmtoarele condiii: minimum 70% din glomerulele germinate s prezinte o
singur plantul. Procentul de glomerule ce dau trei sau mai multe plantule
s nu depeasc 5% , calculat la numar de glomerule germinate;
- procentul de materii inerte s nu depeasc 1,0% pentru seminele
din categoria Baz i 0,5% pentru categoria Certificat.
Tabelul 14.1.
Pentru culturile de butai
Specificare
Sfecla
Butasi de:
Prebaza
Baza
Unitatea de control, ha (maximum)
10
50
Rotatia dupa aceeasi specie, ani (minimum)
4
4
Distanta de
culturi industriale din aceeasi
4
4
izolare, m
specie
125
(minumum), fata
alte culturi de butasi
de
Puritatea varietala, % (minimum)
Butasi cu tulpini florifere la insilozare (maximum)
Plante cu tulpini florifere in camp, % (maximum)
99
lipsa
5
98
lipsa
5
Tabelul 14.2.
97
97
80
75
15
15
97
73
15
Alte semine
97
68
15
0,3
0,3
0,3
0,3
An I
An II
An III
127
Cmp de alegere a
plantelor tipice
Tuberculi
PREBAZ I
Categoria
BAZ clasa Superelit
Categoria
BAZ clasa Elit
Categoria
CERTIFICAT - clasa A
Categoria
CERTIFICAT - clasa B
Figura 14.4. Schema producerii cartofului semincer.
Prebaz
Baz
Certificat
clasa A
Certificat
clasa B
20
50
100
4
4
3
300
300
150
10
50
10
10
50
10
-
100
20
10
1,5
1,5
1,5
100
150
100
20
10
1,5
500
300
300
200
Tabelul 14.5.
Conditii de puritate varietala si stare fitosanitara
Procent maxim admis %
128
Alte soiuri
0,25
Netipice soiului
0,0
0,1
0,0
0,5*
0,01
0,0
0,1
0,0
0,5*
0,5
4,0*
0,25
0,1
Testare virus
0,1
Rhizoctonia solani
la o inspectie in
camp-total viroze
0,0
la ultima inspecie in
cmp nnegrirea
bazei tulpinii i
putregaiul umed al
tuberculilor
de plante netipice
soiului la inspectia in
camp
CEE 1
Baz clasa
SE
CEE 2
Baz clasa
E;CEE 3
Certificat
clasa A
Certificat
clasa B
de plante strine la
inspecia n cmp
Categoria biologica la
recoltare
Prebaz
In descendena direct
Puritate
0,1
0,25
1,0*
1,0
5**
4,0*
0,25
0,1
0,2
0,5
2,0*
1,5
10**
8,0**
0,5
0,2
0,2
0,5
5,0*
2,0
3, 4, 5 si 6
ntrebri de autoevaluare:
1. Care sunt etapele producerii seminei pentru soiurile diploide de
sfecl de zahr?
2. Care sunt etapele producerii seminei pentru soiurile poliploide de
sfecl de zahr?
3. Care sunt etapele producerii seminei pentru hibrizii triploizi de sfecl
de zahr?
4. Care sunt lucrrile specifice aplicate n producerea de semine la
sfecla de zahr?
5. Care sunt condiiile de certificare a loturilor semincere la sfecla de
zahr?
6. Ce tip de androsterilitate este utilizat pentru obinerea seminei
hibride la sfecla de zahr?
7. Care sunt etapele nmuirii soiurile de cartof?
8. Care sunt zonele nchise pentru nmulirea cartofului?
9. care sunt condiiile de certificare a loturilor de nmulire a cartofului?
10. Cum se realizeaz purificarea loturilor de nmulire a cartofului?
130
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
1. Badea Marcela Elena, Sndulescu Gabriela 2001 Biotehnologii
egetale, Fundaia BIOTECH, Bucureti
Ceapoiu N. 1980 Evoluia speciilor, Ed.Academiei RSR, Bucureti
2. Darbeswar R. 2000 Plant breeding, Analysis and exploitation of
variation, Alpha Sci.Intern., U.K.
3. Mado E., Ciulca S. 1998 Lucrri practice de ameliorarea plantelor,
Ed.Agroprint, Timioara
4. Mado E. 2000 Ameliorarea plantelor agricole, Ed.Marineasa,
Timioara
5. Nedelea G., Mado E. 2003 Ameliorarea plantelor, Ed.Eurobit,
Timioara
6. Nedelea G., Mado E. 2004 Evoluie i ameliorare la plante,
Ed.Marineasa, Timioara
7. Pttracu Minodora 1981 Inginerie genetic i ameliorarea programat
a plantelor, Ed.Ceres, Bucureti
8. Poehlman J.M. 1989 Breeding field crops, Pobl.by Van Nostrand
Reinhold N.Y.
9. Poehlman J.M. 1989 Breeding field crops, Ames Jowa State
Univ.Press
10. Potlog A.S., Suciu Z., Moisuc A., Nedelea G. 1982 Probleme actuale
n ameliorarea plantelor, ED.Facla, Timioara;
11. Potlog A.S., Suciu Z., Lzureanu E., Nedelea G., Moisuc A. - 1989
Principii moderne n ameliorarea plantelor., Ed.Facla, Timioara.
12. Pratt C. 1983 Somatic selection and chimears, Methods in Fruit
Breeding, Moore et Janick Eds.: 172-185
131
132