Jelajahi eBook
Kategori
Jelajahi Buku audio
Kategori
Jelajahi Majalah
Kategori
Jelajahi Dokumen
Kategori
OLEH :
I GUSTI AYU RESI PRADNYA DEWI
(P07134013005)
(P07134013019)
(P07134013028)
(P07134013032)
MARISSAH THAMRIN
(P07134013049)
Kromatografi
Kromatografi adalah suatu nama yang diberikan untuk teknik pemisahan tertentu.
Pada dasarnya semua cara kromatografi menggunakan dua fase tetap ( stationary ) dan yang
lain fase bergerak ( mobile) ; pemisahan-pemisahan tergantung pada gerakan relative dari dua
fase ini.
a. Analisis Kualitatif
Ada 3 pendekatan untuk analisa kualitatif yakni:
1. Perbandingan antara retensi analit yang tidak diketahui dengan retensi baku yang sesuai
(senyawa yang diketahui) pada kondisi yang sama.
2. Dengan cara spiking.
Metode spiking dilakukan dengan menambah sampel yang mengandung senyawa
tertentu yang akan diselidiki dengan senyawa baku pada kondisi kromatografi yang sama.
Hal ini dilakukan dengan cara: pertama, dilakukan proses kromatografi sampel yang tidak di
spiking. Kedua, sampel yang telah di-spiking dengan senyawa baku dilakukan proses
kromatografi. Jika pada puncak tertentu yang diduga mengandung senyawa yang diselidiki
terjadi peningkatan tinggi puncak/luas puncak setelah di-spiking, maka dapat diidentifikasi
bahwa sampel mengandung senyawa yang kita selidiki.
3. Menggabungkan alat kromatografi dengan spektrometer massa.
Pada pemisahan dengan menggunakan KCKT, cara ini akan memberikan informasi
data spektra massa solut dengan waktu retensi tertentu. Spektra analit yang tidak diketahui
dapat dibandingkan dengan spektra yang ada di data base komputer yang diinterpretasi
sendiri. Cara ini dapat dilakukan untuk analit yang belum ada baku murninya.
b. Analisis Kuantitatif
Berikut beberapa syarat yang harus dipenuhi dalam analisis kuantitatif baik pada
penyiapan sampel atau proses kromatografi, antara lain :
a. Analit harus telah diketahui dan terpisah sempurna dari komponen-komponen lain dalam
kromatogram
b. Baku dengan kemurnian yang tinggi dan telah diketahui harus tersedia
c. Prosedur kalibrasi yang sudah diketahui harus digunakan.
Dalam KCKT, kuantifikasi dapat dilakukan dengan luas puncak atau tinggi puncak. Tinggi
puncak atau luas puncak berbanding langsung dengan banyaknya analit yang dikromatografi,
jika dilakukan pada kisaran detektor yang linier.
1. Metode tinggi puncak
Metode yang paling sederhana untuk pengukuran kuantitatif adalah dengan tinggi
puncak. Tinggi puncak diukur sebagai jarak dari garis dasar ke puncak maksimum seperti
puncak 1, 2, dan 3 pada gambar 3. Penyimpangan garis dasar diimbangi dengan interpolasi
garis dasar antara awal dan akhir puncak.
Metode tinggi puncak hanya digunakan jika perubahan tinggi puncak linier dengan
konsentrasi analit. Kesalahan akan terjadi jika metode ini digunakan pada puncak yang
mengalami penyimpangan (asimetris) atau jika kolom mengalami kelebihan muatan.
2. Metode luas puncak
Prosedur penentuan luas puncak serupa dengan tinggi puncak. Suatu teknik untuk
mengukur luas puncak adalah dengan mengukur luas puncak sebagai hasil kali tinggi puncak
dan lebar pada setengah tinggi (W1/2). Teknik ini hanya dapat digunakan untuk kromatografi
yang simetris atau yang mempunyai bentuk serupa (Johnson dan Stevenson, 1991).
Baik tinggi puncak maupun luasnya dapat dihubungkan dengan konsentrasi. Tinggi
puncak mudah diukur, akan tetapi sangat dipengaruhi perubahan waktu retensi yang
disebabkan oleh variasi suhu dan komposisi pelarut. Oleh karena itu, luas puncak dianggap
merupakan parameter yang lebih akurat untuk pengukuran kuantitatif.
DAFTAR PUSTAKA
Peraturan Menteri Kesehatan RI No 722/Menkes/Per/IX/88 Tentang Bahan Tambahan
Makanan
Dewifianita,
Rizky.
2014.
Bahan
Tambahan
Makanan.
Online,
http://rizkydewifianita.blogspot.com/2014/04/bahan-tambahan-makanan.html
diakses pada 26 Mei 2015.
Anonym,
2011.
Bahan
Tambahan
Makanan.
Online,