Anda di halaman 1dari 1

piring diinokulasi diletakkan di dalam wadah kedap udara besar dan lilin menyala

terus di dalamnya sebelum tutup disegel - menyediakan konsentrasi


karbondioksida yang merangsang pertumbuhan bakteri terbaru

In vitro layar untuk kegiatan senyawa memerlukan kemampuan untuk budaya P.


falciparum dalam eritrosit manusia [9]. The klorokuin tahan (K1) dan chloroquinesensitif (3D7) strain P. falciparum yang subkultur berkelanjutan in vitro dari
kriopreservasi dan dipelihara dalam sel darah merah manusia, diencerkan
sampai 7% hematokrit dengan media RPMI1640. Semua budaya ditempatkan di
jar lilin pada 37 C di bawah 3% O2, 6% CO2, dan 91% atmosfer N2.
Dalam kegiatan antiplasmodial vitro, mengikuti dehidrogenase laktat metode
(LDH) dinilai [10]. Spesies Plasmodium tergantung pada LDH untuk metabolisme
karbohidrat. Parasit LDH (pLDH) digunakan untuk konversi laktat menjadi piruvat,
yang merupakan langkah terakhir dalam glikolisis; Namun, hanya pLDH dapat
menggunakan koenzim 3-asetil-piridin adenin dinukleotida (APAD). Di hadapan
APAD, deteksi LDH spesifik untuk enzim parasit. Penentuan LDH dilakukan
dengan adanya tetrazolium biru nitro (NBT) yang direduksi menjadi formazan
yang terdeteksi pada 630 nm.

Ekstrak tumbuhan dinilai untuk aktivitas anti-plasmodial in vitro menggunakan


dimodifikasi parasit laktat dehdrogenase metode (pLDH) seperti yang dijelaskan
sebelumnya [19,20]. Ekstrak tumbuhan mentah pertama kali dilarutkan dalam
DMSO pada konsentrasi 50 mg / ml, disonikasi selama 10 menit dan kemudian
diencerkan dalam medium kultur malaria untuk menyiapkan solusi 2 mg / ml.
Konsentrasi tertinggi pelarut bahwa parasit yang terkena adalah <1%, yang
terbukti tidak memiliki efek yang dapat diukur pada parasit viabilitas