Prosedur Pengujian Bakteri Coliform

a. Uji Penduga
1) Disiapkan 3 tabung yang masing-masing berisi 10 ml Lactose broth double strength (a-c),
dan 6 tabung yang berisi masing-masing 10 ml Lactose broth single strength (d-i), masingmasing tabung dimasukkan tabung durham dengan posisi terbalik.
2) Ke dalam tabung a-c ditambahkan 10 ml sampel.
3) Ke dalam tabung d-f ditambahkan 1 ml sampel.
4) Ke dalam tabung g-i ditambahkan 0,1 ml sampel.
5) Kemudian semua tabung diinkubasi selama 24-48 jam dengan suhu 37C.
6) Diamati apakah terbentuk gas, kekeruhan maupun perubahan warna pada tiap-tiap tabung,
terbentuknya gas menandakan tes perkiraan positif dan dilanjutkan ke uji penguat.
7) Bila dalam kurun waktu 24-48 jam tidak terbentuk gas, tes perkiraan dinyatakan negatif,
dan tidak perlu dilanjutkan ke uji penguat.

b. Uji Penguat
1) Ditanam 1-2 ose biakan yang positif gas pada media EMB dari uji penduga.
2) Untuk bakteri E. coli diinkubasi selama 24-48 jam pada suhu 37C.
3) E.coli ditunjukan dengan koloni yang berwarna hijau metalik.

c. Uji Pelengkap
1) Ditanam 1-2 ose biakan yang positif hijau metalik pada media agar miring NA dari uji
penguat.
2) Inkubasi selama 24-48 jam pada suhu 37C.
3) Amati secara mikroskopis.