IMPLIKASI METABOLIK AKIBAT DIET ASAM LEMAK TRANS.

Suzanne E. Dorfman1, Didier Laurent2, John S. Gounarides2, Xue Li1, Tara L. Mullarkey1,
Erik C. Rocheford1, Farid Sari-Sarraf2, Erica A. Hirsch2, Thomas E. Hughes1 and S. Renee
Commerford1
Diet asam lemak trans berhubungan dengan peningkatan risiko penyakit kardiovaskular dan
telah terlibat dalam kejadian obesitas dan diabetes mellitus tipe 2 (DMT2). Hal ini telah
ditetapkan bahwa diet tinggi lemak jenuh, relatif untuk diet rendah lemak, menginduksi
adipositas dan resistensi insulin tubuh. Di sini, kita menguji hipotesis yang menjadi penanda
dari obesitas, keadaan prediabetik (perlemakan hati, akumulasi lemak visceral, resistensi
insulin) yang juga diperparah dengan makanan diet rendah lemak yang mengandung asam
elaidat (18:1 t), isomer utama asam trans-lemak yang ditemukan dalam persediaan makanan
manusia. Tikus Jantan Sprague Dawley umur 8 minggu diberi diet 10% makanan asam
lemak trans yang diperkaya (LF-trans) selama 8 minggu. Awalnya, minggu 3 dan 6 obyek
penelitian berada di dalam spektroskopi resonansi magnetik secara in vivo (1H-MR) yang
dinilai adalah lipid intramyosellular (IMCL) dan lipid intrahepatik (IHL). Diawasi
hyperinsulinemia-euglikemianya (pada minggu 8) kemudian ditentukan sensitivitas
insulinnya di jaringan seluruh tubuh dan jaringan-jaringan spesifik lainnya dengan resolusi
tinggi ex vivo 1H-NMR untuk menilai biokimia jaringan. Tikusyang telah diberi makan
dengan diet LF-trans berada dalam keseimbangan energi positif, yang disebabkan oleh
peningkatan asupan energi menunjukkan peningkatan secara signifikan lemak visceral dan
akumulasi lemak hati relatif terhadap diet rendah lemak terkontrol. Sintesis glikogen murni
juga meningkat pada kelompok LF-trans. Penurunan pembuangan glukosa, pelepasan dari
akumulasi IMCL telah diteliti pada tikus-tikus yang diberi diet LF-trans, sedangkan pada
tikus-tikus yang diberi diet 45%, lemak jenuh (HF-sat),pembuangan glukosanya terganggu
berkaitan dengan peningkatan IMCLTA. Diet lemak jenuh ini juga tidak menginduksi
peningkatan IMCLsoleus. Temuan ini menyiratkan bahwa asam lemak dapat mengubah
pemeliharaan nutrisi dalam hati, jaringan adiposa, dan otot rangka dan mekanisme tersebut
yang mana asam lemak trans menginduksi resistensi insulin berbeda dari diet diperkaya
dengan lemak jenuh.

PENGANTAR
Hubungan antara obesitas dan diabetes melitus tipe 2 (DMT2) secara luas diakui.
Penyakit ini berada di bawah payung yang sama sebagai manifestasi sejumlah patofisiologis
lainnya
termasuk dislipidemia, aterosklerosis,penyakit perlemakan hati nonalkohol, dan hipertensi
(misalnya, sindrom metabolik). Diet makronutrisi sangat mempengaruhi adipositas dan kerja
insulin dan karenanya berkontribusi pada penyakit metaboli (1-4). Kelebihan kalori
menyebabkan keseimbangan energi positif secara langsung dapat menginduksi resistensi
insulin pada tingkatan sel melalui efek nutrisi spesifik pada sinyal transduksi, ekspresi gen,
dan aliran substrat melalui jalur metabolik. Pada tikus, kelebihan pasokan kalori kronis
dengan cara diet tinggi lemak menginduksi pertambahan berat badan, akumulasi massa
lemak, dan resistensi insulin (1,5-7). Namun, sejauh mana fenomena tersebut diamati berbeda
sehubungan dengan tipe diet lemak. Misalnya, diet tinggi asam lemak -3 (minyak ikan)
mencegah induksi resistensi insulin (8,9).
Data terbaru mengenai asam lemak trans melibatkan subkelas lipid ini sangat
merugikan bagi kesehatan manusia. Konsumsi asam lemak trans di Amerika Serikat
merupakan 2-3% dari total asupan kalori (10). Asam lemak trans adalah asam lemak tak
jenuh dengan setidaknya satu ikatan rangkap di konfigurasi trans. Secara historis, asam lemak
trans dianggap dimetabolisme secara sama dengan asam lemak jenuh karena konformasi
keduanya memiliki kesamaan. Baru-baru ini, asupan asam lemak trans telah dikaitkan dengan
peningkatan risiko penyakit kardiovaskular melalui efek pada metabolisme lipoprotein
(11,12). Pada manusia,telah jelas bahwa mengganti asam trans-lemak baik untuk hasil asam
lemak jenuh atau tak jenuh ganda dalam profil lipid yang lebih merusak daripada yang
diamati dengan jenuh asam lemak (12). Selain itu, asam lemak trans secara negatif
mempengaruhi fungsi endotel dan produksi sitokin, lebih lanjut meningkatkan risiko penyakit
kardiovaskular (13,14). Asosiatif dan bukti eksperimental yang menghubungkan asupan
asam lemak trans dan DMT2, bagaimanapun adalah terbatas. Sedangkan beberapa studi
prospektif menunjukkan bahwa konsumsi diet yang mengandung asam lemak trans dikaitkan
dengan peningkatan risiko untuk perkembangan DMT2 (15,16), yang lainnya tidak setuju
(17). Penelitian metabolisme manusia yang melibatkan obesitas dan/atau pasien DMT2,
asupan asam lemak trans mengakibatkan peningkatan penanda resistensi insulin luar yang
diamati dengan diet diperkaya dengan jenuh atau asam lemak tak jenuh tunggal (18-20) .
Dengan demikian , metabolisme penyakit timbul dengan asupan asam lemak trans lebih besar
mungkin hanya jelas dalam pengaturan metabolisme tertentu.
Karena masalah yang belum terselesaikan terkait dengan besarnya efek fisiologis
makanan asam lemak trans pada keseimbangan energi dan sensitivitas insulin , kami berusaha
untuk menentukan apakah diet asam lemak trans dapat mengubah adipositas dan sensitivitas
insulin dan jika demikian, dipahami perubahan terkait di kelompok lipid intraseluler dan
profil metabolik . Data di sini menunjukkan bahwa diet rendah lemak tapi tinggi asupan asam
lemak trans meningkatkan adipositas viseral , merangsang akumulasi lipid intrahepatik
( IHL ), dan mengurangi sensitivitas insulin perifer ke tingkat yang sama dengan yang dibawa
diet tinggi lemak jenuh . Meskipun tingkat resistensi insulin antara kedua diet adalah serupa,
mekanisme dimana resistensi insulin terjadi tampaknya berbeda .

METODE DAN PROSEDUR

Hewan Dan Desain Penelitian
Penelitian telah ditinjau dan disetujui oleh Novartis Perawatan Hewan dan Komite
Penggunaan dan sesuai dengan Peraturan Undang-Undang Kesejahteraan Hewan Pasal 1, 2,
dan 3 , dan pedoman lainnya (Panduan untuk Perawatan dan Penggunaan Hewan
Laboratorium , 1995) . Jantan Sprague - Dawley (Charles River Laboratory , Wilmington ,
MA ) , usia 8 minggu ,telah diizinkan bebas akses terstandar , semipurified chow diet dan air
atas kedatangan dan secara individual ditempatkan dalam kondisi yang terkendali ( 00:12 h
light -siklus gelap , 50-60 % kelembaban relatif , 22-23 C ) . Untuk meneliti efek asam trans
- lemak diet diperkaya pada parameter sindrom metabolik ,tikus diberi pakan percobaan
selama 8 minggu . Diet eksperimen berbeda dalam kuantitas dan kualitas lemak ( Tabel 1 ) ,
dengan mineral dan vitamin Mixes disusun sesuai dengan pedoman dari American Institute of
Nutrisi ( 21 ) . A 10 % lemak jenuh ( LF - sat ) diet dengan sumber lemak menjadi minyak
kedelai ( 24 g / kg ) dan lemak babi ( 19 g / kg ) dan 45 % lemak jenuh ( HF - sat ) diet
dengan sumber lemak terutama menjadi lemak babi dan tingkat yang lebih rendah kedelai
minyak yang digunakan sebagai kontrol dan diet resisten insulin , masing-masing. Diet
diselidiki adalah diet LF - trans yang identik dengan LF duduk diet, tetapi dengan lemak
babi seluruhnya digantikan oleh asam elaidat ( Nu - Chek Pre, Elysian, MN, LF trans ).Semua diet yang dibeli dari Diet Penelitian (New Brunswick , NJ) . Asupan makanan
dan berat badan diukur mingguan . Tikus ( n = 8-11/group ) yang temporal dinilai untuk
perubahan komposisi lemak tubuh (subkutan vs lemak visceral ) , IHL , dan intramyocellular
lipid ( IMCL ) konten menggunakan dalam spektroskopi resonansi magnetik vivo (1H - MR)
diikutidengan pengukuran metabolit jaringan menggunakan ex vivo 1H - NMR . Seluruh
tubuh dan jaringan resistensi insulin spesifik ditentukan oleh klem euglycemic hyperinsulinemic .
Dalam Resonansi Magnetik Vivo
Tiga hari sebelum memulai intervensi diet , dan pada 3 dan 6 minggu pemberian
makanan diet, in vivo 1H - MR bawah anestesi isoflurane 2 % dilakukan untuk mengukur
jumlah lemak tubuh , visceral dan lemak subkutan , IHL ,dan konten IMCL. Semua in vivo
1H - MR pengukuran dilakukan pada Bruker Avance 7.0 T/30 cm instrumen lebar bore
(Bruker Medis, Boston, MA) dilengkapi dengan diameter 20 cm aktif terlindung gradien
insert. Pengukuran adipositas seluruh tubuh, IHL, dan IMCL dilakukan seperti dilaporkan
sebelumnya (22,23) dengan penyesuaian untuk magnet 7T.
Euglikemik - Hiperinsulinemia Penjepit
Pada 7 minggu diet , tikus cannulated di arteri karotis dan vena jugularis dan
diizinkan untuk pulih selama 7 hari . Semua tikus dicapai > 100 % prebedah berat badan saat
ini . Pada 8 minggu diet, tikus dipuasakan semalam sebelum untuk menilai tindakan insulin
oleh euglicemik penjepit hiperinsulinemia.

Lima menit sebelum memulai infus, sampel darah diambil dari basal garis arteri menentukan
hormon basal dan konsentrasi substrat. Pada t = 0 menit, bolus cairan kinerja tinggi
kromatografi dimurnikan [3-3H] - glukosa diberikan (7,5 Ci) lebih dari 1 menit ke jalur
vena diikuti dengan infus vena konstan pada 0,1 Ci / min. Sebuah penjepit pankreas adalah
juga diprakarsai oleh infus somatostatin (1,2 mg / kg menit) untuk menekan insulin endogen
dan produksi glukagon. Insulin (0,24 mU / kg min) dan glukagon (0,8 ng /kgmin) yang
diresapi dengan harga untuk mempertahankan hormon ini pada konsentrasi basal. Sampel

darah arteri diambil pada t = 70, 80, 90 menit untuk menilai pencapaian pelacak stabil
menyatakan dan menentukan tingkat basal penampilan glukosa endogen (Ra) dan
penghilangan (Rd). Pada t = 90 menit, bolus kedua [3-3H] -glukosa diberikan (3,7 Ci) lebih
dari 1 menit ke jalur vena dan konstan Kecepatan infus [3-3H]-glukosa meningkat menjadi
0,2 Ci / min untuk sisa penelitian untuk meminimalkan perubahan glukosa darah aktivitas
spesifik dengan inisiasi dari hyperinsulinemic periode. A infus vena insulin pada 3,0 mU /
kgmin juga diinisiasi bersama dengan infus variabel glukosa (20% glukosa ke dalam vena
jugularis) sambil mempertahankan penjepit pankreas. Sampel darah arteri Kecil.(5 IL)
diambil setiap 5-10 menit untuk menilai beredar glukosa darah konsentrasi dan menentukan
perubahan yang sesuai dalam tingkat infus glukosa eksogen diperlukan untuk
mempertahankan glukosa pada 100
mg / dl .Untuk menilai glukosa perifer penyerapan ke dalam jaringan adiposa dan rangka
otot, bolus vena [ U - 14C ] - 2 - deoxyglucose ( 45 ICI dalam 100 iL dari 0,1 % BSA /
saline , Amerika Kimia radiolabeled , St Louis ,MO ) diberikan pada t = 135 menit selama 60
s . Sampel darah arteri diambil pada t = 137.5 , 140 , 145 , 150 , 155 , 160 , 165 , 170 , 175
,dan 180 menit untuk plasma aktivitas spesifik 14C - glukosa . Pada t = 160 ,170 , 180 menit
sampel darah lebih besar dikumpulkan untuk menilai plasma Aktivitas spesifik 3H - glukosa
dan penindasan insulin glukosa Ra .Pada t = 180 menit , tikus dibius dengan natrium
pentobarbital ( 100 mg / kg , iv ) dan jaringan dikumpulkan dan ditempatkan dalam nitrogen
cair .Untuk beberapa hewan di setiap kelompok diet (n = 6-8/group),
jaringan dikumpulkansetelah periode basal 90 min.
Hormon Plasma Dan Substrat
Selama studi penjepit , glukosa diperkirakan dengan One-Touch Ultra glucometer
(LIFESCAN, Milpitas, CA) . Glukosa plasma untuk penentuan aktivitas spesifik glukosa
dinilai menggunakan 2700 YSI Pilih(Yellow Springs International , Yellow Springs , OH).
Insulin, leptin,dan adiponektin diukur dengan enzyme-linked immunosorbent assay ( Linco
Research, St Charles, MO). Asam lemak bebas diukur spektrofotometri (Wako - C NEFA
kit,Wako Kimia,Richmond, VA). Jumlah plasma trigliserida diperkirakan fluorometrically
menggunakan divalidasi di rumah metode enzimatik .
Plasma Dan Radioaktivitas Jaringan
Sampel plasma deproteinized dengan Ba ( OH ) 2 dan ZnSO4 (0,3 N) dan
disentrifugasi (24) . Satu porsi dikeringkan untuk menghapus semua 3H2O , dilarutkan dalam
air deionisasi suling , dan dihitung untuk 3H dan 14C menggunakan Modus penghitungan
ganda cair kilau ( Beckman LS 6000IC ; BeckmanInstrumen , Fullerton , CA ). Terfosforilasi
[14C] - 2 deoxyglucose Konsentrasi ditentukan di tibialis anterior (TA ) , soleus danotot
gastrocnemius , dan lemak epididimis seperti yang dijelaskan sebelumnya(25). Secara singkat
, jaringan ( 50-100 mg untuk otot, 350 mg untuk epididimis lemak) yang dihomogenisasi
dalam asam perklorat 0,5 % pada 4 C ( 13.400 g , 20 menit )dan dinetralkan dengan 5 N
KOH . Sebagian dari supernatan , mewakili Total [14C] - berlabel 2 - deoxyglucose , 2 deoxyglucose fosfat dan seluler glikogen , dihitung . Ba ( OH ) 2 dan ZnSO4 ( 0,3 N ) yang
ditambahkan ke bagian kedua dari supernatan mengendap glikogen dan 2 deoxyglucose
fosfat . Sampel vortexed , disentrifugasi , dan dihitung , dengan perbedaan - 14C jumlah yang
mewakili 2 deoxyglucose fosfat dan glikogen . Spesifik jaringan penyerapan glukosa (R.g
untuk TA, soleus , otot gastrocnemius , dan epididimis lemak) dihitung menggunakan
akumulasi terfosforilasi 2 - deoxyglucose dan glikogen ,metabolik yang terperangkap dalam
jaringan kurang glukosa - 6 fosfatase kegiatan. Area di bawah kurva untuk peluruhan 14C glukosa spesifik aktivitas dalam plasma selama 45 menit terakhir dari klem juga ditentukan

.Pendekatan ini membuat asumsi bahwa perbedaan dalam penanganan metabolik 2deoxyglucose serupa di seluruh perawatan diet dan bahwa tracer diangkut mirip dengan
glukosa .
Glikogen Hati Dan Sintesis Glikogen Hati Bersih
Kandungan glikogen hati dan sintesis glikogen hati bersih ditentukan dengan metode
dijelaskan sebelumnya (26).
Perhitungan
Glukosa Ra dan Rd ditentukan dengan menggunakan persamaan state nonsteady
seperti yang dijelaskan sebelumnya (27) dan dinyatakan sebagai perubahan persen dalam
kondisi hyperinsulinemic relatif terhadap tingkat basal (% hati penindasan dan pembuangan
%).Tissue Rg ditentukan dengan mengoreksi konsentrasi jaringan [14C] berlabel 2
-deoxyglucose-6-fosfat Konsentrasi oleh daerah di bawah kurva untuk plasma 14C - glukosa
spesifik aktivitas selama 45 menit terakhir dari studi penjepit. infus glukosa tarif ditentukan
sebagai waktu rata-rata tertimbang selama terakhir 30 menit studi penjepit.Glycogenesis hati
bersih dihitung dengan menggunakan hubungan prekursor - produk, di mana [3H] - glukosa
terkait dengan glikogen jaringan dikoreksi untuk plasma [3H] aktivitas spesifik glukosa
dipertahankan selama 180 menit (studi penjepit).
Resolusi Tinggi ex vivo 1 H NMR
Jaringan diekstraksi dengan 7 % asam perklorat atau kloroform seperti sebelumnya dijelaskan
(28). Resolusi tinggi spektrum 1H - NMR diperoleh menggunakan urutan pulsa standar pada
300 1 K menggunakan Bruker - 600 Avance spektrometer ( 1H frekuensi 600,26 MHz ) .
1H - NMR yang diperoleh dengan 128-256 meluruh induksi bebas , 65.536 data yang
kompleks poin , lebar spektral 7,2-8,4 kHz , dan penundaan relaksasi 3 s. Tugas metabolit
dibuat atas dasar dilaporkan sebelumnya data ( 29,30 ) dan , dalam kasus tertentu ,
dikonfirmasi oleh spiking . metabolit dan resonansi asam lemak yang terintegrasi
menggunakan paket 7.0 ACD (Advanced Kimia Pembangunan , Toronto , Kanada). resonansi
untuk spesies asam lemak tunggal yang terintegrasi relatif terhadap gabungan
intensitas FA - metil resonansi ( tCH3 ) , termasuk - metil resonansi dari asam lemak 3 ( 0,98 ppm 1H ) , serta utama asam lemak - metil resonansi berpusat di 0,89 ppm 1H .
utama asam lemak - metil resonansi terdiri dari resonansi dari - 6 , - 9 ,dan semua
kelas lainnya (kecuali - 3 ) asam lemak . Diasumsikan bahwa masing-masing molekul asam
lemak yang terkandung suatu bagian - metil tunggal dan bahwa Intensitas tCH3 akan
mencerminkan jumlah molekul asam lemak.
Analisis Data
Data dilaporkan sebagai sarana s.d. Dua arah langkah-langkah diulang ANOVA
menilai efek tergantung waktu pengobatan diet . one - way ANOVA menilai apakah
perbedaan ada di antara kelompok diet untuk variabel yang tidak bergantung pada waktu atau
kondisi.Siswa- Newman - Kuels uji komparasi ganda ditentukan antara perbedaan kelompok.
Signifikansi yang ditetapkan pada P 0,05 .

Hasil
Diet LF - trans menginduksi keseimbangan energi positif Perbedaan berat badan yang
diamati mulai dari 6 minggu diet mana LF - trans dan kelompok HF - duduk ditimbang secara
signifikan lebih dari kelompok LF - sat ( 510 13 , 534 15 , 479 16 g; masing-masing, P
0,05 ) . Berat badan mingguan kumulatif tidak berbeda antara kelompok diet sampai 6
minggu karena peningkatan asupan makanan kumulatif mingguan di LF - trans dan
Kelompok HF - sat dimulai pada 2 minggu dan terus berlanjut sampai akhir 6 minggu
(Gambar 1) .
In vivo penilaian 1H - MR distribusi lemak , IHL, dan konten IMCL
Peningkatan adipositas seluruh tubuh secara signifikan lebih besar ( P 0,05 ) di LF trans (6week - dasar = 0,07 0,01 g) dan HF duduk kelompok ( 6week - dasar = 0,08
0,02 g ) dibandingkan dengan LF duduk kelompok ( 6week - dasar = 0,04 0,01 g ) .
Kelompok LF - trans akumulasi lemak terutama di depot visceral , sedangkan di HF duduk
kelompok , akumulasi lemak tersebar antara kedua subkutan dan daerah lemak visceral
( Gambar 2 ) . Kedua HF - duduk dan Kelompok LF - trans memiliki IHL secara signifikan
lebih tinggi pada 3 dan 6 minggu (diet - waktu interaksi , P 0,01 ) dibandingkan dengan
kelompok LF - sat , mewakili peningkatan enam kali lipat dari baseline ( Gambar 3a ) . di
sana tidak ada efek diet LF - trans pada akumulasi IMCL , sedangkan kelompok HF - sat
menunjukkan peningkatan IMCL di TA ( P 0,01 ) , yang didominasi glikolitik
otot ( Gambar 3b ) . Sebaliknya, soleus , otot yang sangat oksidatif , tidak signifikan interaksi
diet - waktu sepanjang 6 minggu, meskipun Konten IMCL cenderung lebih tinggi pada
kelompok HF-sat (data tidak ditampilkan).

Klem Euglicemik-Hiperinsulinemia
Setelah 8 minggu diet, aksi insulin seluruh tubuh dengan menggunakan Teknik
penjepit euglicemik-hiperinsulinemia dinilai. Dasar parameter plasma determinedimediateli
sebelum periode basal tracer infusion menyusul semalam cepat (Tabel 2). Preclamp
konsentrasi glukosa secara signifikan lebih tinggi di HF-duduk diet (P 0,01). Tidak Efek
diet signifikan yang diamati pada insulin preclamp, trigliserida, dan konsentrasi asam lemak
bebas. Demikian pula, tidak ada perbedaan dalam preclamp leptin dan adiponektin
konsentrasi.

Meskipun ditandai peningkatan adipositas seluruh tubuh dan viseral dengan makan
LF-trans, tidak ada diet yang signifikan efek pada aksi insulin seluruh tubuh seperti yang
diperkirakan oleh glukosa Kecepatan infus selama klem euglycemic-hyperinsulinemic (Tabel
2). Namun, relatif terhadap kelompok rendah lemak jenuh, % glukosa pembuangan berkurang
pada kedua kelompok rendah lemak trans dan tinggi lemak jenuh.

P 0,01; Tabel 2) Meskipun pembuangan glukosa secara signifikan lebih rendah%

di LF-trans dan kelompok HF-sat, Rg tidak berbeda di salah satu otot rangka individu yang
diuji (TA, soleus, gastrocnemius); juga bukan berbeda dalam epididimis lemak (Tabel 3).
Hati glycogenesis bersih meningkat pada hati dari tikus yang diberi diet LF-trans (Tabel 3).
Tidak seperti pembuangan glukosa%,di sana tidak ada indikasi efek diet pada tindakan
insulin hepatik (% Hepatik penekanan) dalam insulin penindasan hati melepaskan glukosa
tidak berbeda antara kelompok-kelompok (Tabel 2). Tarif Seluruh tubuh glikolisis juga tidak
berbeda antara kelompok bawah kedua basal dan hyperinsulinemic kondisi (data tidak
ditampilkan).
Profil metabolik jaringan
Komposisi asam lemak dari jaringan diukur dengan menggunakan ex vivo 1H-NMR.
(18:01 t n-9) konsentrasi asam elaidat secara signifikan tinggi di soleus, hati, dan lemak
epididimis dalam menanggapi untuk diet LF-trans (Tabel 4), sedangkan asam linoleat (18:02
n-6) dan lagi rantai asam lemak tak jenuh ganda, misalnya docosahexaenoic (22:06 n-3,
DHA) asam, secara signifikan berkurang pada semua jaringan. Karena penurunan
pembuangan glukosa%, kami menguji apakah ada perbedaan dalam diasilgliserol jaringan
(DAG) kolam renang, kolam lipid mekanis terkait dengan insulin terganggu signaling
(31,32), di bawah kondisi basal baik di TA dan otot soleus. Tidak ada efek pada konsentrasi
DAG di otot TA antara ketiga kelompok diet, tetapi dalam soleus otot, konsentrasi DAG
meningkat hampir dua kali lipat selama dua diet lainnya (Tabel 4). Metabolit larut air dalam
TA dan otot soleus juga berbeda antara diet dan otot jenis. -hidroksibutirat (creatine hydroxybutyrate/total) secara signifikan lebih rendah (P 0,05) dengan diet LF-trans, tetapi
hanya di soleus (Tabel 4). Selain itu, meskipun berbeda oksidatif kapasitas, TA dan soleus
glutamin dan konsentrasi glutamat (Glx / total creatine) secara signifikan (P 0,05)

Pembahasan
Dalam 2-3 dekade terakhir, penjelasan lebih lengkap tentang efek metabolisme diet
jenis lemak tertentu telah ada,dan memberikan bukti bahwa asam lemak terkait dengan
penyakit kardiovaskular, baik dari segi kuantitas dan kualitas , juga penyebab gangguan kerja
insulin dan perkembangan DMT2 pada manusia .Walaupun terdapat banyak bukti bahwa diet
asam lemak trans berdampak negatif pada profil lipid darah dan perkembangan lesi
aterosklerosis (11-14), bukti tersebut menghubungkan asupan asam lemak trans dengan
resistensi insulin dan obesitas adalah sedikit. Penelitian ini membandingkan marker dari
sindrom metabolik diantara tiga diet, satu tinggi lemak (45 % lemak) dari sumber lemak diet
khusus, dan kedua rendah lemak (10 % lemak) . Kedua diet rendah lemak dicocokkan dalam
segala hal kecuali komposisi asam lemak diet .Diet rendah lemak trans mengandung asam
elaidat yang memberikan kontribusi ~ 4,6 % dari total kalori tetapi terdiri atas ~ 40 % kalori
lemak ,sedangkan diet rendah lemak jenuh terutama terdiri dari lemak jenuh. Dengan
demikian, respon metabolik tak diinginkan diamati dengan diet rendah lemak trans, yang
termasuk hyperphagia , peningkatan berat badan, perluasan simpanan lemak hati dan organ
dalam, perubahan deposisi nutrisi di hati , dan gangguan pembuangan glukosa di seluruh
tubuh,sepertinya diakibatkan oleh sumber diet lemak yang berbeda, yang dinamakan asam
lemak jenuh vs asam lemak trans.
Peningkatan lemak visceral dan Hati pada tikus yang mengkonsumsi diet rendah
lemak trans pada tingkat yang sebanding dengan yang dicapai dengan diet tinggi lemak
jenuh.Hal ini terkait dengan efek yang sama besar pada asupan makanan dalam dua
kelompok meskipun diet rendah lemak trans yang jauh menurunkan persentase kalori lemak.
Proses yang menentukan hiperfagia pada tikus yang diberikan diet tinggi lemak adalah
beragam dan bervariasi dari segi kuantitas dan kualitas diet lemak (33,34). Namun,
mekanisme diet rendah lemak tapi tinggi proporsional asam lemak trans bisa meningkatkan
asupan makanan adalah tidak diketahui, tetapi kemungkinan besar terkait dengan malabsorpsi
kalori (35), khususnya mengingat bahwa asam elaidat terdiri hanya 4,6 % dari total kalori
yang dikonsumsi . Demikian pula,teristimewa peningkatan di lemak viseral dengan diet
rendah lemak trans, pengamatan serupa juga dilaporkan oleh orang lain dengan diet yang
diperkaya asam lemak trans ( 35,36 ), didorong oleh proses yang tidak diketahui yang tidak
dieksplorasi dalam karya ini.Peningkatan lemak viseral dalam kelompok diet rendah lemak
trans sebesar ~ 35 % seperti yang diperkirakan dengan in vivo NMR lebih dar i 6 minggu,
dengan kontribusi asam elaidat ~12 % terhadap total simpanan lipid dengan diet selama 8
minggu . Jadi lemak viseral pada kelompok rendah lemak trans, tampak bahwa retensi pada
diet asam lemak trans bisa menjelaskan sebagian besar kenaikan simpanan ini . Meskipun
menggoda untuk berspekulasi bahwa peningkatan hampir enam kali lipat pada lipid hati
mungkin disebabkan karena retensi akibat diet asam lemak, persentase asam elaidat pada
simpanan lipid hati menunjukkan bahwa ada proses lainnya yang berkontribusi untuk
kejadian perlemakan hati tersebut . Penurunan asam dokosahexaenoik (22:6 n - 3) pada
kelompok rendah lemak trans bisa menjadi indikasi penurunan aktivitas elongasi dan
desaturasi , sebagaimana telah dijelaskan sebelumnya dengan diet lemak trans (37,38), tapi
apakah atau bagaimana hal ini memberikan kontribusi secara jelas mengenai peningkatan
lipid hati masih harus ditentukan.
Peningkatan kadar lemak hati dengan diet asam lemak trans sering berkaitan dengan
kadar kolesterol yang meningkat, tetapi lebih sering dengan peningkatan trigliserida hati
(35,39-41). Dalam penelitian kami, persentase kolesterol yang berkontribusi ke lemak hati
total tidak meningkat pada kelompok rendah lemak trans . Secara mutlak ,bagaimanapun
kolesterol hati cenderung meningkat dibandingkan dengan kelompok lemak rendah jenuh

mengingat peningkatannya hampir enam kali lipat dalam lipid hati dengan diet rendah lemak
trans. Sebagian besar peningkatan lipid hepatik dengan diet rendah lemak trans,
bagaimanapun, penjelasan yang lebih mungkin oleh karena peningkatan trigliserida.
Akumulasi trigliserid dengan diet asam lemak trans telah dijelaskan, setidaknya sebagian
penjelasannya, oleh karena penurunan oksidasi lipid (42). Asupan kronis diet asam lemak
trans dibawahregulasi aktivitas CPT1, meskipun ada indikasi dalam hepatosit bahwa lemak
trans diatasregulasi oksidasi lemak akut (43,44), yang mungkin melalui peningkatan oksidasi
peroxisomal (43). Penelitian lainnya telah melaporkan peningkatan ekspresi sintesis asam
lemak dan sterol yang responsif terhadap elemen protein pengikat, konsisten dengan tingkat
peningkatan lipogenesis (45). Dalam penelitian kami, peningkatan sintesis netglikogen
dalam hati tikus yang mengkonsumsi diet rendah lemak trans mungkin menunjukkan peran
asam elaidat di hati pada jalur de novo lipogenik. Dibutuhkan lagi lebih banyak penelitian
untuk membuat pernyataan pasti tentang sejauh mana salah satu dari jalur ini yang
berkontribusi pada peningkatan lipid hati dengan diet rendah lemak trans yang digunakan
dalam penelitian ini. Selain sintesis glikogen bersih hati, marker jalur metabolik lain untuk
menjelaskan peningkatan kadar lipid hati tidak dievaluasi .
Tidak seperti dalam penelitian lain menggunakan diet lemak trans (45,46), glukosa
puasa, insulin, asam lemak bebas, dan trigliserida tidak berubah pada tikus yang diberi diet
rendah lemak trans . Insulin merangsang penurunan pembuangan glukosa di seluruh tubuh,
namun, meskipun tidak ada jaringan untuk penilaian Rg yang memiliki dampak yang jelas.
Itu perbedaan yang terlihat pada kelompok rendah lemak trans tidak memiliki pengurangan di
tingkat infusi glukosa tetapi satu yang signifikan adalah pembuangan glukosa yang
distimulasi insulin dapat berhubungan dengan laju glikogenesis hati yang lebih besar. Dapat
dibayangkan, pembuangan glukosa hepatik meningkat dalam rangka mempertahankan
ketingggian laju glikogenesis hati bersih, kompensasi secara efektif efek dari diet rendah
lemak trans terhadap laju infusi glukosa. Dengan demikian , meskipun kurangnya efek
kecepatan infusi glukosa pada kelompok rendah lemak trans aksi insulin mengindikasikan
normal pada hewan-hewan yang relatif terhadap kelompok rendah lemak jenuh, penurunan
laju pembuangan glukosa menunjukkan jaringan yang responsif insulin relatif lebih tahan
terhadap resistensi insulin . Pendekatan yang digunakan dalam penelitian ini (Rg) tidak dapat
memastikan jaringan mana yang berkontribusi terhadap penurunan pembuangan glukosa,
bagaimanapun, meskipun ada kecenderungan untuk penurunan pembuangan glukosa pada
lemak epididimis untuk kelompok rendah lemak trans dan TA untuk diet tinggi lemak jenuh.
Karena otot rangka adalah bagian utama pembuangan glukosa di bawah kondisi
hiperinsulinemia yang digunakan di sini , kami mengeksplorasi Rg, IMCL, dan isi DAG
pada otot yang berbeda dalam kapasitas oksidatif. Konsisten dengan penelitian sebelumnya
pada dexamethasonetreated dan tikus Zucker (22,23), IMCLTA meningkat pada kelompok
tinggi lemak jenuh, tapi tidak di otot soleus. Meskipun tidak signifikan, Rg juga lebih rendah
pada TA pada kelompok tinggi lemak jenuh. Pada tangan lainnya, tidak ada efek IMCL pada
jenis otot tikus yang diberi diet rendah lemak trans, dan bahwa Rg hampir tidak berubah pada
kelompok rendah lemak jenuh. Temuan ini menunjukkan pertama, bahwa resistensi insulin

yang terjadi dengan diet tinggi lemak jenuh melalui mekanisme yang serupa dengan model
resistensi insulin berat, yaitu deksametason-treated dan tikus Zucker (22,23), mungkin
melalui efek dari diet tinggi lemak pada fungsi mitokondria (7). Kedua, meskipun
peningkatan Isi DAG didalam otot soleus pada kelompok rendah lemak trans, tidak ada
indikasi resistensi insulin pada jaringan ini, berbeda dengan penelitian sebelumnya yang
menggunakan beban lipid dramatis pada otot untuk menginduksi insulin resistensi (31) .
Secara keseluruhan, data ini menunjukkan bahwa beberapa jaringan selain otot rangka
berkontribusi terhadap penurunan pembuangan glukosa yang distimulasi insulin . Ada
beberapa indikasi bahwa pemberian asam lemak trans mengurangi aksi insulin pada
jaringan adiposa sehubungan dengan penyerapan glukosa dan lipolisis ( 46,47 ) ,
yang kemungkinan melalui efek pada fluiditas membran ( 48,49 ) . memang ,meskipun
sangat bervariasi , Rg lemak epididimis dalam kelompok rendah lemak trans
~ 40 % berkurang dari pada kelompok rendah lemak jenuh.
Dalam soleus, konsentrasi - hidroksibutirat adalah menurun pada kelompok rendah
lemak trans, dan hampir sama di kelompok tinggi lemak jenuh, karena soleus yang terutama
terdiri dari otot kontraksi lambat, serat yang sangat oksidatif, - hidroksibutirat mungkin
dibayangkan menjadi marker perubahan dalam pemilihan bahan bakar otot ini. Demikian
juga, glutamat rendah dan tingkat glutamin dalam baik TA dan soleus tikus LF - trans bisa
menjadi indikasiswitch dalam preferensi bahan bakar juga (50) . Secara khusus dengan Diet
LF - trans, konsentrasi jaringan tinggi asam elaidat,karena merupakan substrat miskin
karnitin palmitoyltransferase (43), mungkin memaksa saklar dalam preferensi bahan bakar
pada jaringan tinggi kapasitas oksidatif seperti soleus. Penelitian yang lebih mendalam,
kemungkinan besar di bawah pengaturan yang meningkat pengeluaran energi (yaitu, latihan),
diperlukan untuk lebih memahami dinamika antara metabolit dan pemilihan bahan bakar
jaringan di hadapan diet asam lemak trans.
Dalam Penelitian ini, kami mengamati respon metabolik yang mendalam untuk
diet rendah lemak yang diperkaya dengan asam lemak trans yang dikaitkan dengan hiperfagi,
peningkatan lemak hati dan visceral, dan pembuangan glukosa seluruh tubuh berkurang,
semua keunggulan dari sindrom metabolik. Meskipun persentase lemak makanan dalam diet
rendah lemak trans rendah sehubungan dengan kalori (~ 4-5 %), Asam elaidat terdiri hampir
setengah dari lemak yang dikonsumsi , membuat diet rendah lemak trans ini agak tidak
fisiologis. Dengan demikian, setiap ekstrapolasi penyakit harus dibuat tentatif. Meskipun
demikian, banyak dari penyakit metabolik diamati dengan diet tinggi lemak jenuh yang
menirukan dengan diet rendah lemak trans. Memang, nilai kalori yang disediakan oleh diet
rendah lemak trans dari asam lemak trans agak sebanding dengan lemak trans harian yang
dikonsumsi oleh orang dewasa AS (10).Secara keseluruhan, temuan ini menunjukkan asam
lemak trans yang unik ditangani oleh hati, adiposa, dan otot sedemikian rupa untuk
menginduksi resistensi insulin ringan seperti yang belumnya, belum ditemukan
mekanismenya.
Penghargaan
Kami berterima kasih Brittany Yerby untuk bantuan teknis in vivo 1H MR selama
penelitian .

Daftar Pustaka
1. Kraegen EW, Clark PW, Jenkins AB et al. Development of muscle insulin
resistance after liver insulin resistance in high-fat-fed rats. Diabetes
1991;40:13971403.
2. Pagliassotti MJ, Shakrokhi KA, Moscarello M. Involvement of liver and
skeletal muscle in sucrose-induced insulin resistance: dose-response
studies. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 1994;266:
R1637R1644.
3. Rossetti L, Rothman DL, DeFronzo RA, Shulman GI. Effect of dietary protein
on in vivo insulin action and liver glycogen repletion. Am J Physiol Endocrinol
Metab 1989;257:E212E219.
4. Storlein LH, Jenkins AB, Chisholm DJ et al. Influence of dietary fat
composition on development of insulin resistance in rats: Relationship to
muscle triglyceride and -3 fatty acids in muscle phospholipid. Diabetes
1991;36:280289.
5. Buettner R, Parhofer KG, Woenckhaus M. Defining high-fat-diet rat models:
metabolic and molecular effects of different fat types. J Mol Endocrinol
2006;36:485501.
6. Chalkley SM, Hettiarachchi M, Chisholm DJ, Kraegen EW. Long-term
high-fat feeding leads to severe insulin resistance but not diabetes in Wistar
rats. Am J Physiol Endocrinol Metab 2002;282:E1231E1238.
7. Laurent D, Yerby B, Deacon R, Gao J. Diet-induced modulation of
mitochondrial activity in rat muscle. Am J Physiol Endocrinol Metab
2007;293:E1169E1177.
8. Podolin DA, Gayles EC, Wei Y, Thresher JS, Pagliassotti MJ. Menhaden oil
prevents but does not reverse sucrose-induced insulin resistance in rats.
Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 1998;274:R840R848.
9. Storlein LH, Kraegen EW, Chisholm DJ et al. Fish oil prevents insulin
resistance induced by high-fat feeding in rats. Science 1987;237:885888.
10. Allison DB, Egan SK, Barraj LM et al. Estimated intakes of trans fatty and
other fatty acids in the US population. J Am Dietetic Assoc 1999;99:
166174.
11. Katan MB, Zock PL, Mensink RP. Trans fatty acids and their effects on
lipoproteins in humans. Ann Rev of Nutr 1995;15:473493.
12. Lichtenstein AH, Ausman LM, Jalbert SM, Schaefer EJ. Effects of different
forms of dietary hydrogenated fats on serum lipoprotein cholesterol levels.
N Eng J Med 1999;340:19331940.
13. de Roos NM, Bots ML, Katan MB. Replacement of dietary saturated
fatty acids by trans fatty acids lowers serum HDL cholesterol and impairs
endothelial function in healthy men and women. Arterioscler Thromb Vasc
Biol 2001;21:12331237.
14. Han SN, Leka LS, Lichtenstein AH et al. Effect of hydrogenated and
saturated, relative to polyunsaturated, fat on immune and inflammatory

responses of adults with moderate hypercholesterolemia. J Lipid Res

2002;43:445452.
15. Hu FB, van Dam RM, Liu S. Diet and risk of type II diabetes: the role of types
of fat and carbohydrate. Diabetologia 2001;44:805817.
16. Meyer KA, Kushi LH, Jacobs DR Jr, Folsom AR. Dietary fat and
incidence of type 2 diabetes in older Iowa women. Diabetes Care
2001;24:15281535.
17. van Dam RM, Rimm EB, Willett WC, Stampfer MJ, Hu FB. Dietary
patterns and risk for type 2 diabetes mellitus in US men. Ann Intern Med
2002;136:201209.
18. Christiansen E, Schnider S, Palmvig B, Tauber-Lassen E, Pederson O. Intake
of a diet high in trans monounsaturated fatty acids or saturated fatty acids:
effects on postprandial insulinemia and glycemia in obese patients with
NIDDM. Diabetes Care 1997;20:881887.
19. Louheranta AM, Turpeinen AK, Vedgren HM, Schwab US, Uusitupa MIJ.
A high-trans fatty acid diet and insulin sensitivity in young healthy women.
Metabolism 1999;48:870875.
20. Lovejoy JC, Smith SR, Champagne CM. Effects of diets enriched in
saturated (palmitic), monounsaturated (oleic), or trans (elaidic) fatty acids on
insulin sensitivity and substrate oxidation in healthy adults. Diabetes Care
2002;25:12831288.
21. Reeves PG, Nielsen FH, Fahey GC Jr. AIN-93 purified diets for laboratory
rodents: final report of the American Institute of Nutrition ad hoc writing
committee on the reformulation of the AIN-76A rodent diet. J Nutr
1993;123:19391951.
22. Korach-Andre M, Gao J, Gounarides JS et al. Relationship between
visceral adiposity and intramyocellular lipid content in two rat models of
insulin resistance. Am J Physiol Endocrinol Metab 2005;288:
E106E116.
23. Korach-Andre M, Gounarides JS, Deacon R et al. Age and muscle-type
modulated role of intramyocellular lipids in the progression of insulin
resistance in nondiabetic Zucker rats. Metabolism Clin Exp 2005;54:
522528.
24. Somogyi M. Determination of blood sugar. J Biol Chem 1945;160:6973.
25. Halseth AE, Bracy DP, Wasserman DH. Limitations to exercise- and maximal
insulin-stimulated muscle glucose uptake. J Appl Physiol 1998;85:
23052313.
26. Chan TM, Exton JH. A rapid method for the determination of glycogen
content and radioactivity in small quantities of tissue or isolated hepatocytes.
Anal Biochem 1976;71:96106.
27. Steele R. Influences of glucose loading and of injected insulin on hepatic
glucose output. Ann NY Acad Sci 1959;82:42030.
28. Gounarides JS, Korach-Andre M, Killary K, Argentieri G, Laurent D. Effect of
dexamethasone on glucose tolerance and fat metabolism in a diet-induced

obese mouse model. Endocrinology 2008;149:758766.

29. Fan TW. Metabolite profiling by one- and two-dimensional NMR analysis of
complex mixture. Prog Nucl Magn Reson Spectrosc 1996;28:161219.
30. Wilker W, Leibfritz D. Assignment of mono- and polyunsaturated fatty acids
in lipids of tissues and body fluids. Magn Reson Chem 1998;36:S79S84.
31. Yu C, Chen Y, Cline GW. Mechanism by which fatty acids inhibit
insulin activation of insulin receptor substrate-1 (IRS-1)-associated
phosphatidylinositol 3-kinase activity in muscle. J Biol Chem
2002;277:5023050236.
32. Choi CS, Fillmore JJ, Kim JK. Overexpression of uncoupling protein 3 in
skeletal muscle protects against fat-induced insulin resistance. J Clin Invest
2007;117:19952003.
33. Lucas F, Ackroff K, Sclafani A. Dietary fat-induced hyperphagia in rats as a
function of fat type and physical form. Physiol Behav 1989;45:937946.
34. Loh MY, Flatt WP, Martin RJ, Hausman DB. Dietary fat type and level
influence adiposity development in obese but not lean Zucker rats. Proc Soc
Exp Biol Med 1998;218:3844.
35. Colandre ME, Diez RS, Bernal CA. Metabolic effects of trans fatty acids on
an experimental dietary model. Br J Nutr 2003;89:631638.
36. Kavanagh K, Jones KL, Sawyer J et al. Trans fat diet induces abdominal
obesity and changes in insulin sensitivity in monkeys. Obesity
2007;15:16751684.
37. Thomassen MS, Rortveit T, Christinasen E, Norum KR. Changes in the
content of n-6 fatty acids in liver phospholipids in rats as a consequence of
partially hydrogenated dietary oils. Br J Nutr 1984;51:315322.
38. Blomstrand R, Diczfalusy U, Sisfontes L, Svensson L. Influence of
dietary partially hydrogenated vegetable and marine oils on membrane
composition and function of liver microsomes and platelets in the rat. Lipids
1985;20:283295.
39. de Roos B, Duivenvoorden I, Rucklidge G et al. Response of apolipoprotein
E*3-Leiden transgenic mice to dietary fatty acids: combining liver proteomics
with physiological data. FASEB J 2005;19:813815.
40. Meijer GW, van Tol A, van Berkel T, Westrate JA. Effect of dietary elaidic
versus vaccenic acid on blood and liver lipids in the hamster. Atherosclerosis
2001;157:3140.
41. Bernal CA, Rovira J, Colandre ME, Cusso R, Cadefau JA. Effects of
dietary cis and trans unsaturated and saturated fatty acids on the glucose
metabolites and enzymes of rats. Br J Nutr 2006;95:947954.
42. Giudetti AM, Beynen AC, Lemmens AG, Gnoni GV, Geelen MJH.
Hepatic fatty acid metabolism in rats fed diets with different contents
of C18:0, C18:1 cis, and C18:1 trans isomers. Br J Nutr 2003;90:
887893.
43. Guzman M, Klein W, del Pulgar T, Geelen M. Metabolism of trans fatty acids
by hepatocytes. Lipids 2006;34:381386.

44. Woldseth B, Retterstol K, Christophersen BO. Monounsaturated trans fatty

acids, elaidic acid and trans- vaccenic acid, metabolism and incorporation
in phospholipid molecular species in hepatocytes. Scand J Clin Lab Invest
1998;58:635645.
45. Cassagno N, Palos-Pinto A, Costet P et al. Low amounts of trans 18:1
fatty acids elevate plasma triacylglycerols but not cholesterol and alter
the cellular defense to oxidative stress in mice. Br J Nutr 2005;94:
346352.
46. Ibrahim A, Natarajan S, Ghafoorunissa. Dietary trans-fatty acids alter
adipocyte plasma membrane fatty acid composition and insulin sensitivity in
rats. Metabolism 2005;54:240246.
47. Cromer KD, Jenkins TC, Thies EJ. Replacing cis octadecenoic acid with
trans isomers in media containing rat adipocytes stimulates lipolysis and
inhibits glucose utilization. J Nutr 1995;125:23942399.
48. Funari SS, Barcelo F, Escriba PV. Effects of oleic acid and its
congeners, elaidic and stearic acids, on the structural properties of
phosphatidylethanolamine membranes. J Lipid Res 2003;44:567575.
49. Kinsella JE, Bruckner G, Mai J, Shimp J. Metabolism of trans fatty acids
with emphasis on the effects of trans,trans-octadecadienoate on lipid
composition, essential fatty acid, and prostaglandins: an overview. Am J Clin
Nutr 1981;34:23072318.
50. Ponsot E, Zoll J, NGuessan B. Mitochondrial tissue specificity of substrate
utilization in rat cardiac and skeletal muscles. J Cell Physiol 2005;203:
479486.