Tugas kimia Bioorganik

Fadhilah / 4311411023

Anis Wahyu

Review dari artikel :

enzymatic synthesis and Anti-Allergic Activities of curcumin Oligosaccharides
Kei shimoda1 and hiroki hamada2
Department of Chemistry, Faculty of Medicine, Oita University, 1-1 hasama-machi,
Oita 879-5593, Japan.
2
Department of Life science, Faculty of science, Okayama University of science, 1-1
ridai-cho, Kita-ku, Okayama 700-0005, Japan.
1

sintesis enzimatik dan Uji Aktivitas Anti-alergi dari kurkumin oligosakarida

Abstrak:

Kurkumin

4'-O-galactooligosaccharides

disintesis

oleh

dua

step-enzimatik

menggunakan almond -glukosidase dan siklodekstrin glucanotransferase (CGTase). Kurkumin

terglukosilasi menjadi curcumin 4'-O--D-glucopyranoside oleh almond -glucosidase
menghasilkan 19% rendemen. Curcumin 4'-O--D-glucopyranoside diubah menjadi curcumin 4'O--galactooligosaccharides, yaitu 4'-O--maltosida (51%) dan 4'-O--maltotrioside (25%),
dengan CGTase-katalis glikosilasi berlebih. Curcumin 4'-O--glikosida menunjukkan aktivitas
penekanan pada pembentukan antibodi IgE dan efek penghambatan pada pelepasan histamin dari
sel mast peritoneum tikus.
Kata

kunci:

curcumin,

-glucooligosaccharide,

almond

-glucosidase,

siklodekstrin

glucanotransferase, aktivitas anti-alergi

Pengantar
Curcumin [1,7-bis(4-hidroksi-3-metoksifenil) -1,6 heptadien-3-,5-dion] merupakan
prinsip penting antara kurkuminoid yang ditemukan di Curcuma longa Linn., yang telah
digunakan selama berabad-abad sebagai bumbu. Baru-baru ini, banyak Perhatian telah
dibayarkan kepada sifat farmakologi kurkumin karena potensi untuk menjadi sangat berguna
obat. Curcumin telah banyak dipelajari untuk antioksidan nya, antikanker, dan efek antiinflamasi. Terlepas dari sifat farmakologi nya, curcumin tidak larut dalam air dan kurang diserap
setelah lisan administrasi.

Anis Wahyu Fadhilah / 4311411023

Glikosilasi biologis memungkinkan air-larut dan senyawa organik yang tidak stabil yang
akan dikonversi menjadi sesuai yang larut dalam air dan stabil senyawa melalui nyaman satu
langkah enzimatik glikosilasi. Selanjutnya, glikosida dari senyawa aktif fisiologis, yaitu vitamin
glikosida, telah dilaporkan untuk menjadi agen antiallegic berguna. Nilai terapi kurkumin
glikosida adalah kepentingan farmakologis. Di sini kita melaporkan sintesis enzimatik kurkumin
4'-O--glucooligosaccharides dan sifat anti-allegic mereka.
Bahan dan Metode Umum
Kurkumin dibeli dari Tokyo Kasei KogyoCo Ltd dan dimurnikan dengan kolom silika
gelkromatografi sebelum digunakan untuk percobaan ini.Almond -glucosidase dibeli dari Wako
Kimia Murni Int. Ltd dan cyclodexringlucanotransferase (CGTase) adalah dari Amano
Pharmaceutical Co. Ltd. 1H NMR (nuklirresonansi magnetik) (400 MHz),

13

C NMR (100

MHz),HH COSY (spektroskopi korelasi), CH COSY, danHMBC (korelasi berganda-ikatan

heterobuclear)Spektrum diukur dengan menggunakan Varian XL-400spektrometer di CD 3OD
dan kimia pergeseran diekspresikan dalam (ppm) mengacu pada tetrametilsilan. The
HRFABMS (resolusi tinggiatom cepat spektrometri massa pemboman) spectrum dicatat
menggunakan JEOL MStation JMS-700 spektrometer.
sintesis kurkumin 4'-O--D-Glucopyranoside
Curcumin 4'-O--D-glucopyranoside disiapkan sebagai berikut. Untuk campuran (20 ml)
asetonitril dan air (9:1 v/v) yang mengandung 5mmol dari D-glukosa dan 500 U almond -Dglucosidase ditambahkan 5 mmol kurkumin. Campuran diinkubasi dengan pengadukan selama
48jam pada 40C. Campuran reaksi dipekatkan dengan penguapan dengan pengurangan tekanan,
dan residu dimurnikan dengan kolom kromatografi pada silika gel untuk memberikan curcumin
4'-O--D-glucopyranoside.
sintesis kurkumin 4'-O--Glucooligosaccharides
Untuk larutan yang mengandung 1 mmol kurkumin 4'-O--D-glucopyranoside dan 5 g
pati dalam 25 mM penyangga natrium fosfat (pH 7,0) ditambahkan 100 U dari CGTase. Setelah
pengadukan campuran reaksi pada 40 C selama 24 jam, campuran disentrifugasi pada 3000 g
selama 10 menit. Supernatan dikenakan pada kolom Sephadex G-25 diseimbangkan dengan air
untuk menghilangkan CGTase. Fraksi yang mengandung glikosida yang dimurnikan dengan

Anis Wahyu Fadhilah / 4311411023

HPLC preparatif untuk memberikan dua curcumin 4'-O--glucooligosaccharides, yaitu curcumin

4'-O--maltosida dan kurkumin 4'-O--maltotrioside.
Kegiatan anti-alergi
aksi penekan pada IgE pembentukan antibody Aksi penghambatan curcumin 4'-O-glikosida pada pembentukan antibodi IgE diperiksa sebagai berikut. Ovalbumin digunakan
sebagai antigen (1mg/tikus), dan Al(OH)3 dan vaksin pertissius digunakan sebagai adjuvant
(20mg dan 0,6ml/tikus, masing-masing). Sensitisasi dibuat oleh injeksi campuran (0,6ml) dari
antigen dan adjuvant ke dalam cakar masing-masing tikus (jantan, ca. 200 g). Edema Paw diukur
24 jam setelah injeksi dan diperlakukan tikus dibagi dalam kelompok-kelompok dengan rata-rata
sama pembengkakan volume. Setiap sampel dilarutkan dalam garam fisiologis yang
mengandung 10% Nikkol dan larutan disuntikkan ke tikus setiap hari selama 11 d dimulai pada
hari pengelompokan. Hidrokortison digunakan sebagai kontrol positif. Jumlah tersebut IgE
diukur dengan kutan pasif metode anafilaksis pada hari ke-15. Hasil dinyatakan sebagai rata-rata
tingkat IgE plasma 5 tikus diberikan total 10 mg / kg setiap tes majemuk.
Penghambatan pada pelepasan histamine dari tikus sel mast peritoneal
Efek kurkumin 4'-O--glikosida pada histamine rilis dari sel mast peritoneum tikus
diperiksa sebagai berikut. Sel mast Peritoneal dikumpulkan dari rongga perut tikus (Pria tikus
Wistar, Nippon SLC) dan dimurnikan ke tingkat yang lebih tinggi dari 95% sesuai dengan
metode yang telah dijelaskan sebelumnya. Sel mast tersebut dimurnikan disuspensikan dalam
fisiologis larutan buffer yang mengandung 145mM NaCl, 2,7mM KCl, 1,0mM CaCl2, 5,6mM
glukosa, dan 20mM HEPES (pH 7,4) untuk memberikan sekitar 104 tiang kapal sel / mL. Sel
viabilitas selalu lebih besar dari 90% sebagaimana dinilai oleh tripan tes pengecualian biru. Sel
mast yang preincubated dengan senyawa uji (1M) selama 15menit pada suhu 37C, dan
kemudian terkena senyawa 48/80 di 0,3mg/ml. Pelepasan histamine ditentukan dengan alat tes
fluorometric menurut Metode yang dilaporkan sebelumnya, 18 dan diungkapkan sebagai
persentase dari total histamin.

Anis Wahyu Fadhilah / 4311411023

Hasil dan Diskusi

sintesis kurkumin 4'-O--Glucooligosaccharides
Curcumin 4'-O--D-glucopyranoside (2) adalah disintesis oleh almond -D-glucosidase-katalis
reverse-hidrolisis. Inkubasi kurkumin (1) dengan almond -D-glucosidase di hadapan glukosa
dalam asetonitril / air (9:1) pelarut memberikan curcumin 4'-O--D-glucopyranoside (2) di 19%
hasil.
Glikosilasi enzimatik curcumin 4'-O--Dglucopyranoside (2) dengan CGTase diberikan
curcumin 4'-O--glucooligosaccharides (Gambar 1). Pati terlarut digunakan sebagai donorglukosa. Dua glikosilasi produk 3 dan 4 diisolasi oleh preparatif yang HPLC pada kolom YMCPack R & D ODS. Itu senyawa 3 dan 4 diidentifikasi sebagai curcumin 4'-O--maltosida (3,
51%) dan curcumin 4'-O--maltotrioside (4, 25%) atas dasar HRFABMS, 1H dan 13C NMR, H-H
COSY, C-H COSY, dan HMBC-spectra.

Aktivitas anti-alergi
Tindakan supresif kurkumin 4'-O--glikosida 2-4 pada pembentukan antibodi IgE
diselidiki by di vivobioassay menggunakan ovalbumin sebagai antigen. Rata-rata tikus tingkat
IgE plasma setelah pengobatan dari ovalbumin dengan atau tanpa senyawa uji adalah diperiksa
Anis Wahyu Fadhilah / 4311411023

dan diringkas dalam Tabel 1. The aktivitas penghambatan kurkumin 4'-O--glikosida 2-4 lebih
tinggi dibandingkan dengan hidrokortison. Curcumin 4'-O--D-glucopyranoside (2) dipamerkan
tertinggi aktivitas penekan di antara tiga curcumin 4'-O--glikosida; aktivitas penghambatan
menurun pada urutan 2, curcumin 4'-O--maltotrioside (4), dan curcumin 4'-O--maltosida (3).
Hasil ini menunjukkan bahwa curcumin 4'-O--glikosida 2-4 akan bertindak sebagai agen antialergi yang berguna.
Efek kurkumin 4'-O--glikosida 2-4 pada senyawa 48/80- terinduksi pelepasan histamin
dari tikus sel mast peritoneal diperiksa. Tingkat tinggi histamin (kontrol, 41%) dibebaskan dari
tikus sel mast peritoneal, yang telah dirangsang dengan 0,35g / ml senyawa 48/80 (Tabel 2).
Curcumin 4'-O--D-glucopyranoside (2) efektif menghambat senyawa 48/80-induced pelepasan
histamine dari sel mast peritoneum tikus;% penghambatan 1 adalah 70%. Kegiatan
penghambatan curcumin 4'-O--maltosida (3) dan 4'-O--maltotrioside (4) yang 46 dan 58%,
masing-masing. Temuan ini menyarankan bahwa curcumin glikosida yang memiliki -glukosida
dan -glucooligosides pada posisi C-4 'yang memiliki kuat aktivitas penghambatan terhadap
pelepasan histamin dari sel mast.

Baru-baru ini, kami melaporkan bahwa glikosilasi enzimatik senyawa aktif secara fisiologis
drastic meningkatkan mereka air-kelarutan dan bahwa glikosida bertindak sebagai agen antialergi yang potensial. Itu glikosida vitamin E menunjukkan aksi penekan pada pembentukan
antibodi IgE dan orang-orang dari polifenol efek penghambatan dipamerkan pada pelepasan
histamin dari tikus sel mast peritoneal. Hasil yang diperoleh di sini menunjukkan bahwa dua
langkah enzimatik glikosilasi dengan almond -D-glucosidase dan CGTase berguna untuk

Anis Wahyu Fadhilah / 4311411023

mempersiapkan curcumin 4'-O--glikosida dan curcumin 4'-O--glikosida memiliki kuat antialergi kegiatan

kesimpulan
Curcumin 4'-O--glikosida, yaitu 4'-O--glukosida, 4'-O--maltosida, dan 4'-O--maltotrioside,
yang berhasil disintesis melalui enzimatik glikosilasi oleh almond -D-glucosidase dan CGTase.
Tiga curcumin 4'-O--glikosida menunjukkan tindakan penekanan pada pembentukan antibodi
IgE dan efek penghambatan yang signifikan ditunjukan pada histamine melepaskan dari sel mast.
Curcumin 4'-O--glukosida menunjukkan aktivitas penghambatan tertinggi untuk kedua IgE

Anis Wahyu Fadhilah / 4311411023