CUADRO SINPTICO SOBRE LOS MTODOS DE CERTEZA Y ORIENTACIN,

USADOS EN EL ANLISIS CIENTFICO DE EVIDENCIAS.

LA PRUEBA DE KASTLE MEYER.
METODOS DE
ORIENTACION

VENTAJAS Y LIMITACIONES.

PROCEDIMIENTO.
Se atribuye a Louis-Jacques
Thenard (1777-1857) y
Christian Freidrich Schonbein,
(1799-1868) los primeros pasos
cientficos hacia un ensayo
confiable que permitiera
detectar la presencia de sangre

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS.

Las pruebas de orientacin (cualitativas) pueden arrojar resultados

bastante confiables sobre la deteccin de sangre pero no puede
asegurarse con 100% de seguridad que esta este presente. Slo las
pruebas confirmatorias sern definitivas

QUMICOS NECESARIOS PARA EL PERITAJE.

Para hablar de las ventajas y limitaciones de la prueba de fenolftalena, es importante

tener en cuenta dos nociones cruciales para la qumica forense: sensibilidad y
especificidad. La Sensibilidad se refiere al factor de dilucin de una sustancia (en este
caso sangre) que puede ser detectada por el reactivo. La sensibilidad de la prueba de
Kastle Meyer es de aproximadamente una parte en diez mil; 1:10.000. Esto significa que
si se agrega a una gota de sangre diez mil gotas de agua todava podra ser detectada
por el peritaje. La especificidad, en cambio, se refiere a cuantas sustancias, distintas a
la sangre podran arrojar tambin un resultado positivo al someterse a la prueba

La prueba de Kastle Meyer debera intentarse luego de un examen exhaustivo del escenario de los
hechos, una vez preservadas e historificadas todas las evidencias de inters que encontremos.
Podra ocurrir que detectemos manchas sospechosas o tengamos razones para creer que hay restos
hemticos en el sitio que hayan sido limpiados o diluidos por accin dolosa o natural. Tenga siempre
presente que debemos evitar la contaminacin a toda cosa. USE SIEMPRE GUANTES DE LTEX Y
PROTECCIN EN BOCA Y NARIZ.

Agua Destilada o Desinonizada: No

es un reactivo. Es, bsicamente, agua
libre
de
impurezas,
sales,
contaminantes, etc. Es de gran
utilidad para transferir las sustancias
que vayan a peritarse al papel de
filtro, hisopo, cotonete, etc. La mejor
forma de recolectar una mancha seca
de sangre, la que ha formado una
costra, o si ha sido limpiada o esta
muy diluida, es usando unas gotas de
agua destilada sobre el hisopo. El
agua destilada tiene adems la
ventaja de no interferir en la pericia
pues es pura, as que no se corre el
riesgo de que alguna sustancia
extraa genere un falso positivo.
Tambin, esta claro que permite
mantener la muestra sin degradarse
por accin bacteriana por ms
tiempo.

Perxido de Hidrgeno: Es, esencialmente, agua con

un tomo extra de oxgeno. Normalmente se lo usa
como antisptico y sirve como un oxidante en esta
prueba.

Es un ensayo de orientacin que se realiza

para investigar material hemtico, en sitios
donde se presume que ocurri un hecho
punible (Homicidios) y el sitio del hecho,
haga presumir que ha sido modificada,
alterada o lavada. Ej.: pisos, tapicera de
auto, ropa, lencera, etc. Este ensayo se
realiza en total oscuridad, visualizndose la
positividad de la reaccin mediante una
Quimioluminiscencia, produciendo un brillo
de color azul.

Muestra de Control: se trata de un pequeo

trozo de papel de filtro o tela impregnada
con sangre seca de origen animal. Se usa
sangre animal para evitar la posibilidad de
transmisin de enfermedades.

Materiales para Tcnica de

Contacto: esta tcnica consiste en
tocar la mancha sospechosa con un
hisopo o aplicador con punta de
algodn, cotonete, papel de filtro
etc.,

REACTIVOS:

Alcohol: Metil o Etil alcohol, o lo que es

lo mismo, etanol. Este se usa para
incrementar la sensibilidad de la
prueba. Esto se logra al limpiar el rea
alrededor de la mancha y exponer
mejor la hemoglobina

Fenolftalena: se trata de un qumico en polvo que se prepara en una solucin

de etanol que acta como indicadora de color. Al prepararse, la solucin se
hierve por varias horas para eliminar el oxgeno disuelto en ella. Este qumico es
muy sensible y se ve como un lquido incoloro. Al exponerse al oxgeno, cambia
de color a un rosado profundo. Es por eso que debemos mantenerlo con una
tapa bien segura, sin exponerlo al aire ambiental.

Se practica macerado con hisopo a nivel de la

mancha de aspecto pardo rojizo presente en la
pieza en estudio, la cual es sometida a reaccin
con este reactivo, si se observa una reaccin que
se manifiesta en un color verde azulado, la
reaccin es positiva.

De igual forma, se debe tener en cuenta los

siguientes parmetros de Positividad:
Intensidad: De la Quimioluminiscencia
Durabilidad: De la Quimioluminiscencia
Morfologa: Si se observa: arrastre, contactos,
Proyecciones (Cada libre y salpicaduras); as
como huellas (zapatos, pies descalzos, etc.)
Es altamente recomendable realizar macerados
a nivel de las reas donde se observa la
Quimioluminiscencia,
los
cuales
sern
sometidos a la reaccin de Kastel Meyer y/o
Ortotolidina.

Son muy especficas y de

menor sensibilidad. Se
basan en comprobar la
presencia en la muestra
de alguno de los
componentes de la
sangre. Estas pruebas no
permiten determinar si la
sangre analizada es o no
humana.

Procedimiento
a) Colocar la muestra problema en el centro de una
laminilla de vidrio y poner encima de ella un
cubreobjetos.
b) Deslizar entre lmina y lminilla por capilaridad,
unas gotas del reactivo de Teichman.
c) Calentar lentamente y a baja temperatura la
laminilla hasta evaporacin.
d) Dejar enfriar y observar al microscopio.
e) En caso positivo se observarn cristales
romboidales de color caf obscuro.

Procedimiento
a) Colocar una pequea cantidad de muestra
problema entre una laminilla portaobjetos y un
cubreobjetos.
b) Deslizar por capilaridad unas gotas del reactivo
entre lmina y laminilla.
c) Calentar la laminilla a baja temperatura durante
30 seg.
d) Observar al microscopio. En caso positivo se
observarn cristales romboidales de color rosa
alredor de la muestra.

METODOS DE
CERTEZA

FUNDAMENTO: La hemoglobina en presencia de Acido Actico

es transformada en globina, hemtica y sales halogenadas (CI, Br,
I) de derivados de formacin cristalina; los cristales de
Clorhidratos de hematina obtenidos son de color rojizo,
romboidales en forma de prismas alargados. Basta con visualizar
un solo cristal para decir que es sangre. Esta tcnica sirve para
Manchas, costras y sangre liquida. La hematina unida a un
sustrato nitrogenado es reducida de nacimiento en presencia de
glucosa a derivados hemocromogenos cristalinos, en la reaccin
intervienen un agente reductor (NAOH), el sustrato nitrogenado
(PIRIDINA) y el agente reductor (Glucosa). La tcnica es utilizada
en costras de sangre.