FITUR SELULER DARI FILAGGRIN

Epidermis adalah bagian yang kompleks, sangat dinamis, jaringan barier self-renewing
menutupi sebagian besar dari tubuh. Program diferensiasi epidermal diilustrasikan pada
Gambar 1 dalam Lampiran Tambahan, tersedia dengan teks lengkap artikel ini di NEJM.org.
Proliferasi sel di epidermis terbatas pada sel-sel epidermis batang pada lapisan sel terdalam,
lapisan basal (Gbr. 1 dalam Lampiran Tambahan). Setelah pembelahan sel, sel anak keluar
dari siklus sel dan bermigrasi ke atas untuk membentuk lapisan sel spinosus, di mana
sambungan sel diperkuat dan protein keratin tambahan diekspresikan. Lebih dekat ke
permukaan kulit, sel-sel dari lapisan granular mengandung butiran sitoplasma padat terutama
terdiri dari profilaggrin, dengan komponen protein lain yang diperlukan untuk pembentukan
squames, yang diratakan, sel-sel mati dari stratum korneum terluar yang bertanggung jawab
untuk fungsi barier kulit (Gbr. 1 dalam Lampiran Tambahan). Dua fungsi penghalang penting
dari stratum ini, cornified epitel skuamosa adalah untuk mencegah kehilangan air melalui
area permukaan besar dari tubuh manusia dan untuk memblokir masuknya zat asing (patogen,
antigen, alergen, dan iritasi kimia) dari lingkungan eksternal.
Profilaggrin diekspresikan lebih lambat dalam program diferensiasi epidermal, di
lapisan sel granular dari berlapis, cornified epitel 14 (Gbr. 1 dalam Lampiran Tambahan).
Sitoplasma sel granular epidermis dikemas dengan butiran granula padat keratohyalin,
konstituen utama yang profilaggrin - sebuah fakta dikonfirmasi oleh tidak lengkapnya
granula pada orang yang mempunyai mutasi homozigot nol di FLG (Gambar 1 dalam
Lampiran Tambahan.). Granula ini bertindak sebagai reservoir profilaggrin aktif, bersama
dengan protein lain yang penting untuk pembentukan dan pematangan squame, seperti
loricrin. Zona transisi pada dasarnya adalah lapisan paling atas dari sel granular yang sedang
dalam proses akhir diferensiasi yang kemudian diratakan, erat dikemas, dan keratinosit
anuclear (skuamosa), yang membentuk stratum corneum. "batu bata dan mortir" model
stratum korneum telah diusulkan, di mana sel sisa gepeng (squames) bertindak sebagai batu
bata dan cornified bertindak seperti amplop sel sebagai mortir. Bersama-sama, mereka
membentuk sebuat matrik yang dapat segera diperintah dan terutama lipid. Produk akhir dari
proses filaggrin ditemukan diantara sisa sitoplasma dari squames ini.
Pada sel transisional, proses profilaggrin dilangsungkan. Hal yang memicu proses
tidak jelas, tetapi kemungkinan melibatkan defosforilasi dari proprotein dengan derepresi dari
kaskade protease yang menyebabkan pembebasan cepat dari monomer filaggrin fungsional
aktif. Beberapa protease telah ditemukan berhubungan dengan proses ini, dengan data
definitive yang datang dari penelitian knockout dan tikus transgenic. Baru-baru ini, kulit

spesifik retroviral seperti protease aspartat telah terbukti secara khusus diekspresikan dalam
lapisan transisi dan menjadi enzim kunci yang bertanggung jawab untuk pembelahan unit
filaggrin berulang dalam individu. Adanya LEKTI serin protease inhibitor, dikodekan oleh
SPINK5, menyebabkan pengolahan dini profilaggrin dan fenotipe kompleks yang mencakup
ichthyosis, kelainan-rambut poros, dan atopi (sindrom Netherton).
Dalam squames, filaggrin mengalami modifikasi lebih lanjut. Fragmen filaggrin telah
diidentifikasi di cross-link kovalen dimediasi oleh transglutaminase; Oleh karena itu, protein
berkontribusi untuk pembentukan amplop sel cornified- Yang sangat impermeabel, struktur
mortir proteolipid dari stratum korneum. Residu arginin dalam filaggrin dikonversi ke
citrulline; hal ini diduga memfasilitasi proteolisis menjadi peptida pendek dan, pada akhirnya,
menjadi asam amino higroskopis dan turunannya, yang dikenal sebagai faktor pelembab
alami (NMF). Proses ini melibatkan caspase 14 dan protease lainnya.
Derivatif penting dari asam amino termasuk asam trans-urocanic dan asam karboksilat
pirolidon. Asam Urocanic memberikan perlindungan terhadap radiasi ultraviolet dan
memodulasi fungsi kekebalan tubuh. Asam karboksilat pirolidon merupakan turunan kimia
glutamin. Profilaggrin adalah salah satu protein yang paling kaya histidin dan kaya glutamin
dalam genom manusia, dan bertindak sebagai penggabung asam amino, yang pada gilirannya
memodulasi pH stratum korneum, mengerahkan aktivitas humektan intracytoplasmic (yaitu,
mempromosikan retensi kelembaban), dan mungkin mengerahkan aktivitas antimikroba
terhadap staphylococcus. Pengukuran epidermal NMF dengan cara spektroskopi in vivo
confocal Raman telah terbukti sangat berkorelasi dengan filaggrin nol mutasi genotipe.
Pengukuran asam urocanic dan asam karboksilat pirolidon di epidermis pita strip sangat
berkorelasi dengan filaggrin genotipe. Multifungsi dari filaggrin jelas digambarkan dengan
membandingkan tikus ekor bersisik (yang memiliki FLG tanpa ekspresi mutasi) dengan
caspase tikus 14-KO. Pada tikus ekor bersisik, kehilangan filaggrin menyebabkan Biogenesis
menyimpang dari stratum korneum (ichthyosis) serta kulit normal kering (Xero-sis).
Sebaliknya, caspase hewan 14-nol, di mana profilaggrin untuk pengolahan filaggrin adalah
normal tapi filaggrin untuk pengolahan NMF tidak ada, terdapat xerosis dan kepekaan
terhadap sinar ultraviolet tanpa ichthyosis.
Kekurangan filaggrin secara eksperimental telah terbukti menyebabkan kegagalan
fungsi barier kulit. Epidermis pada tikus dengan kekurangan filaggrin memungkinkan
transfer pasif alergen protein. Pada kultur keratinosit Organotypic manusia, knockdown
ekspresi FLG oleh interferensi RNA memperlihatkan penyerapan pewarna fluorescent dan
pelacak logam berat. Tidak jelas bagaimana kekurangan filaggrin menyebabkan defek ini

pada fungsi barier dalam hal model batu bata-dan-mortir; Namun, karena perakitan
komponen lipid dan protein dari stratum korneum harus dikoordinasikan, sinyal dua arah
harus ada antara sistem ini. KO dari 12-lipoxygenase, sebuah enzim penting untuk Biogenesis
lipid dalamstratum korneum, 37 atau ATP-binding cassette transporter A12 (ABCA12),
transporter lipid, menyebabkan pengolahan profilaggrin menyimpang, mensugesi sinyal
protein lipid. Telah terbukti bahwa mempertahankan pH rendah dalam stratum korneum
sangat penting untuk sekresi lipid dan perakitan.
ASMA, RINITIS ALERGI DAN ALERGI MAKANAN.
Selain peran mereka dalam dermatitis atopik, filaggrin dengan hilangnya-fungsi mutasi
menyebabkan risiko genetik untuk beberapa penyakit lain yang kompleks (Gambar. 4, dan
Tabel 1 dalam Lampiran Tambahan). Hubungan mutasi FLG dengan asma adalah kompleks.
Dalam studi populasi yang besar, FLG dengan hilangnya-fungsi mutasi telah memberikan
risiko asma secara keseluruhan mulai dari 1,48 ke 1.79,60,66 tetapi efek ini terbatas pada
subyek dengan dermatitis atopik. Filaggrin tidak diekspresikan pada epitel respiratori.
Terdapat asumsi bahwa dermatitis atopic dapat merupakan faktor resiko dari asma dan
sensitisasi sistemik alergen dalam konteks mutasi filaggrin. Mekanisme dari hubungan
tersebut masih belum jelas. Peningkatan penetrasi alergen dan pathogen melalui stratum
korneum diikuti dengan stimulasi dari keratinosit yang berasal limpopoietin timus stroma,
interleukin-7 seperti sitokin, pada epidermis yang mengalami inflamasi dapat berefek pada
dasar paru-paru.
Hubungan antara dermatitis atopic, asma, dan mutasi FLG adalah komplek, telah jelas
sekarang bahwa diantara pasien dermatitis atopic, dengan mutasi FLG mempunyai resiko
yang lebih besar terkena asma dibandingkan mereka yang tidak mempunyai mutasi FLG,
dimana diantara pasien asma dengan mutasi FLG lebih sulit sembuh dan lebih sering
mengalami eksaserbasi (Gbr.4). Fenotip yang berbeda dan kompleks dari "asma dengan
dermatitis atopik" membutuhkan pemeriksaan lebih lanjut. Sebuah hubungan yang kuat
dengan rhinitis alergi juga telah dicatat dalam beberapa studi populasi.
Alergi kacang adalah kondisi yang diwariskan, dengan konkordansi monozigot
sebanyak 64% dibandingkan dengan 7% pada kembar dizigot. Studi terbaru kami
menunjukkan bahwa mutasi FLG memberi rasio odds keseluruhan 5,3 untuk alergi kacang
(didefinisikan oleh tantangan makanan yang positif), dengan rasio odds sisa 3,8 ketika
dikoreksi untuk dermatitis atopik. Data ini menunjukkan defek barier kulit yang

menyebabkan peningkatan paparan alergen kacang ke antigen presenting sel, bahkan tanpa
adanya dermatitis atopik.
Mekanisme penyakit dari mutasi filaggrin
Mekanisme dari cacat genetik yang merupakan penyebab penyakit pada manusia telah secara
intens diteliti. Ichthyosis vulgaris, penyakit Mendel merupakan contoh kekurangan filaggrin,
ditandai dengan kering, kulit mengelupas (Gbr. 2). Mutasi FLG adalah penentu utama dari
tingkat pemecahan produk higroskopis dan humektan filaggrin, asam karboksilat pirolidon
dan asam urocanic, dan komponen lain dari NMF. Dengan demikian, mekanisme dimana
kekurangan filaggrin jelas dapat menyebabkan kulit kering yang abnormal pada vulgaris
ichthyosis (Gbr. 5). Mekanisme dari kekurangan filaggrin dapat menyebabkan diferensiasi
epitel yang diwujudkan secara klinis sebagai kulit kering dan bersisik akan dibahas di bawah.
Dermatitis atopik, merupakan penyakit kompleks primer yang terkait dengan
defisiensi filaggrin, ditandai dengan kulit kering, kerusakan barier kulit, meningkatkan
alergen priming, kerentanan kulit terhadap kolonisasi bakteri dan infeksi (terutama infeksi
Staphylococcus aureus), dan peradangan kulit yang didorong oleh sel T helper tipe 2 (Th2).
Meskipun dermatitis atopik selama bertahun-tahun dianggap sebagai penyakit imunologis
primer yang akan menyebabkan kecacatan barier kulit sekunder (yang disebut di dalam-luar
hipotesis),

beberapa

peneliti

memiliki

hipotesis

bahwa

penyebab

utama

kerusakan berada pada barier kulit (luar-dalam hipotesis). Abnormal fungsi barier dari kulit
telah lama ditemukan pada ichthyosis vulgaris, bahkan terdapat pada dermatitis atopic.
Asosiasi dari mutasi FLG dengan dermatitis atopic telah divalidasi diluar-dalam hipotesis.
Mutasi FLG mungkin menjadi pemeran utama dari setiap kunci keberadaan dermatitis
atopic (Gbr.5). Meskipun telah banyak diketahui bahwa mutasi ini dapat menyebabkan defek
fungsional barier, mekanisme dari defek ini masih perlu dijelaskan. Pengetahuan yang
penting telah didapatkan dari penelitian dengan subjek manusia dan model murine. Penelitian
ini menunjukkan bahwa kekurangan filaggrin dapat menyebabkan patogenesis dari penyakit
melalui bermacam efek spesifik yang berbeda (Gbr. 5). Meskipun penelitian pada tikus
mempunyai keterbatasan dalam relevansinya dengan penyakit manusia yang kompleks
(karena pengaruh potensi ketegangan, latar belakang imunologi, diferensiasi epidermal
haplotype kompleks, dan fakta bahwa kulit murine jauh lebih berburu dari kulit manusia),
wawasan yang berguna telah diperoleh dari studi murine. Semua penelitan dari tikus ekor
bersisik, yang membawa langsung analog hilangnya fungsi mutasi FLG, telah menunjukkan
kelainan pada fungsi barier kulit, dengan penurunan ambang batas iritan dan peningkatan

penetrasi alergen kulit. Kelainan dasar minor ini sangat ditingkatkan oleh paparan alergen dan
iritan standar seperti sodium lauryl sulfate.
Integritas barier stratum korneum terutama dilapisi oleh lamellae lipid ekstraseluler.
Kekurangan filaggrin dapat menyebabkan kecacatan lamellae lipid melalui sejumlah
mekanisme. Pada zona transisi dari stratum korneum, kekurangan filaggrin dapat
menghambat agregasi filamen, yang kemudian dapat mengganggu pematangan dan ekskresi
dari badan lamelarekstraseluler. Persimpangan yang ketat sangat penting untuk pertautan
integritas epidermal dari sel ke selnya; persimpangan ini tampaknya berkurang jumlahnya
pada orang dengan defisiensi filaggrin. Demikian pula, orang tersebut memiliki penurunan
kepadatan corneodesmosin, komponen protein utama corneodesmosomes (organel yang
penting untuk adhesi sel-sel stratum korneum).
Efek pengasaman dari produk pemecahan filaggrin adalah penting. Elevasi pH kulit
dipermukaan ditemukan pada orang dengan defisensi FLG yang menunjukkan mekanisme
alternatif untuk kecacatan barier.
pH netral atau basa adalah ph optimal untuk beberapa protease serin. Aktivasi
protease serin kallikrein merupakan konsekuensi utama, termasuk aktivasi plasminogen
activator tipe 2 yang merupakan mediasi reseptor blokade sekresi badan lamelar. Aktivasi
protease serin juga dapat langsung mengaktifkan kallikrein 5- yang dimediasi peradangan
Th2, bahkan tanpa adanya alergen yang mendasari.
Peningkatan pH stratum korneum dapat menyebabkan peningkatan adhesi S. aureus
dan multiplikasi. Selain itu, asam urocanic dan asam karboksilat pirolidon dapat
menimbulkan efek antistaphylococcal tertentu dengan langsung menghambat ekspresi bakteri
dari permukaan regulasi-besi yang ditentukan oleh protein A, yang kemudian menimbulkan
adhesi bakteri ke squamosa.
Meskipun mutasi FLG mengarah pada kelainan seperti diuraikan di atas, penting
untuk dicatat bahwa dermatitis atopik berkembang hanya sekitar 42% dari semua heterozigot
FLG; dengan demikian, baik modifikasi genetik dan faktor lingkungan juga sangat penting.
Studi epidemiologi menunjukkan bahwa paparan awal kucing mungkin merupakan faktor
lingkungan yang penting. Selain itu, adanya dermatitis atopic pada saudara yang lebih tua
dapat meningkatkan risiko dermatitis atopik dalam hal karier mutasi FLG. Dengan demikian,
jalur kausal yang berbeda antara gen dan lingkungan mungkin penting pada pasien dengan
dermatitis atopik yang membawa mutasi dibandingan mereka yang tidak. Efek genetik
epistatik, termasuk efek dari gen SPINK5 dan KLK7 yang dapat merupakan penyebab, belum
diidentifikasi

IMUNOMODULASI DARI FILAGGRIN

Meskipun mutasi FLG merupakan penentu genetik yang kuat dari dermatitis atopik,
mayoritas anak-anak dengan dermatitis atopik yang membawa mutasi FLG sembuh dari
penyakit kulit setelah 12 tahun, menunjukkan bahwa mungkin ada faktor-faktor penentu
imunologi yang menurunkan ekspresi FLG. Fungsi barier kulit tampaknya berkurang pada
semua pasien dengan dermatitis atopik, dan penurunan ekspresi filaggrin umumnya
ditemukan bahkan pada mereka yang tidak membawa mutasi FLG. Konsisten dengan
pengamatan ini adalah temuan bahwa Th2 sitokin interleukin-4, interleukin-13, dan
interleukin-25, yang terlibat dalam respons alergi, mengurangi ekspresi FLG oleh keratinosit
in vitro. Signifikansi in vivo dari temuan ini didukung oleh pengamatan bahwa tikus dengan
overekspresi STAT6, faktor transkripsi yang menengahi aksi interleukin-4 dan interleukin-13,
telah mengurangi ekspresi filaggrin. Interleukin-4 dan interleukin-13 mungkin dapat
menghambat ekspresi filaggrin melalui down-regulasi diferensiasi keratinosit oleh modulasi
protein kalsium-sensing S100A11. Peningkatan aktivitas protease dalam respon inflamasi
kulit dapat menyebabkan degradasi berlebihan filaggrin yang akan mempengaruhi
pengolahan profilaggrin. Respon imun dan inflamasi yang beragam mungkin memodulasi
ekspresi filaggrin dan berkontribusi terhadap disfungsi barier kulit.
Pertimbangan terapi dan obat personal
Penemuan peran penting defisiensi filaggrin terhadap ichthyosis vulgaris dan penyakit
atopik telah membuat fungsi barier kulit menjadi perhatian dalam upaya untuk
mengembangkan

pengobatan

pada

kondisi

ini.

Pendekatan

pertama

adalah

immunomodulation. Agen anti inflamasi topikal telah terbukti dapat mengurangi penurunan
ekspresi filaggrin yang ditemukan pada lesi dermatitis atopik, sebuah temuan yang konsisten
dengan konsep bahwa peradangan dapat menurunkan ekspresi filaggrin. Mengingat bahwa
sitokin Th2 dapat menghambat ekspresi filaggrin, intervensi yang mengganggu respon imun
alergi juga dapat meningkatkan ekspresi filaggrin di kulit pasien dengan dermatitis atopik dan
dengan demikian dapat memperbaiki kerusakan barier kulit yang melekat.
Kedua, skrining high-throughput yang digunakan untuk mengidentifikasi senyawa
yang meningkatkan ekspresi filaggrin, dengan menargetkan jalur regulasi yang mengontrol
ekspresi filaggrin dan protein kulit-penghalang lainnya. Namun, FLG adalah gen spesifik
diferensiasi lambat yang tidak biasanya diekspresikan dalam kultur monolayer keratinosit,
sehingga sulit untuk mengembangkan alat tes skrining high-throughput.

Strategi ketiga adalah untuk menargetkan mesin penerjemah protein untuk menipu sel
sehingga dapat "mengabaikan" mutasi dan dengan demikian mengembalikan ekspresi protein.
Hal ini terutama berlaku untuk orang-orang yang mempunyai senyawa homozigot atau
heterozigot untuk FLG, yang memiliki kasus ichthyosis vulgaris atau dermatitis atopik yang
paling parah (sekitar 1% dari populasi umum). Pendekatan ini, sudah dalam pembangunan
untuk fibrosis kistik dan distrofi otot Duchenne, memiliki potensi untuk mengobati beberapa
dari pasien dengan banyak kelainan genetik lain dan oleh karena itu memiliki penerapan yang
lebih luas.
Intervensi farmakologis yang secara langsung ditergetkan pada filaggrin ditemukan
jauh dari hasil klinis yang diharapkan, tapi di masa depan, orang mungkin memilih
menggunakan pengobatan yang lebih murah, pengujian genetik cepat untuk varian filaggrin,
ditambah dengan rejimen pengobatan yang tepat dirancang untuk meningkatkan fungsi barier
kulit, sebagai intervensi dini atau tindakan pencegahan pada orang yang berisiko untuk
dermatitis atopik. Hal ini masih harus dilihat apakah restorasi atau augmentasi ekspresi
filaggrin pada pasien dengan dermatitis atopik yang sudah ada sebelumnya akan terapi.
Namun demikian, penemuan filaggrin telah melahirkan bidang baru terapi tambahan barier
kulit, yang merupakan kesempatan yang menarik untuk mengatasi penyakit umum.