Anda di halaman 1dari 262

UNIVEISIDAD N!(DW.

DE COlOMBIA
SEDE PALMIIA

MAlINA SNCHEZ DE PRAGER


FERNANDO MmtoLEJO DE LA Tom
NELSON BRAVO OTERo

MICROBIOLOGA

Aspectos fundamentales

Asp

IOLOGI
fundamental
Sl1chez de Prager
olejo De la Torre
vo Otero
de los profesores
Hernando Patio Cruz (q.e.p.d.)
y Mara Elena Pineda, M. V.

Universidad Nacional de Colombia - Sede Palmira


Departamento de Ciencias Bsicas

Marina Snchez de Prager


Fernando Marmolejo De la Torre
Nelson Bravo Otero

ISBN: 958-B095-06-9

Fotografas
Eyder Daniel Gmez
Jorge 1. Victoria K.
Nelson Bravo O.
Marina Snchez de Prager
Femando Marmolejo De la Torre
Carlos A. Huertas
francia Varn de Agudelo
Hernando Patiiio C. (q.e.p.d.)
Hugo Sierra (q.e.p.d.)
Dibujos originales
Nelson Bravo O.
Asesora editorial
Julia Emma Ziga Rivera
Diseo e impresin
Feriva S.A.
Calle lB N 3-33
E-mail: reriva@l"eriva.com
www.feriva.com
Cali, Colombia

Los autores
Marina Snchez de Prager
Profesora titular de la Universidad Nacional de Colombia - Sede Palmira,
es Ingeniera Agrnoma, Magster en Ciencias Agrarias con nfasis en Suelos
y Aguas - Biologa del suelo; adelanta su Doctorado en Tecnologas Agroambientales. Su rea de investigacin ha sido la Microbiologa del suelo, tema
en el cual ha dirigido alrededor de 40 trabajos de grado y tesis de maestra,
un buon nmero de ellos en micorrizas arbusculares (MA). Adelanta trabajo
pedaggico con el fin de estimular el inters de los estudiantes y comunidad
por esta rea del conocimiento. Investigaciones en el campo de la Microbiologa, en las cuales ha participado, se han hecho acreedoras a dos premios
nacionales.

Fernando Marmolejo De la Torre


Huasan (Valle) 1945
Ingeniero Agrnomo, Universidad Nacional. Sede Palmira.
Magster en Fitopatologa, Programa de Estudios para Graduados en Ciencias Agrarias. Universidad Nacional - LC.A.
Mster en Citricultura con nfasis en Proteccin del Cultivo -Universidad Politcnica- Valencia, Espaa.
Profesor Asociado Universidad Nacional - Palmira, en las ctedras de
Microbiologa, Fitopatologa y Patologa de Semillas en el posgrado en Sistemas de Produccin de Semillas, labor por la cual recibi el premio de Docencia Excepcional (1997).
Labor durante 18 alios en el Instituto Colombiano Agropecuario -I.C.A.,
en la Divisin de Sanidad Vegetal, en actividades de clnica y diagnstico,
epidemiologa vegetal y campaas fitosanitarias.

Nelson Bravo Otero


Ingeniero Agrnomo y Magster en Sistemas de Semillas. A partir de su
trabajo de grado se inclin por el tema del control microbiolgico de hongos
fitopatgenos. rea en la cual realiz y dirigi investigacin a estudiantes.
Tambin ha incursionado en el tema de la taxonoma de hongos micorrizgenos y la patologa de semillas. En 1980 obtuvo el Premio Nacional de Fitopatologa "Gonzalo Ocho a Serna" (categora estudiantes).
Es miembro activo de la Asociacin Colombiana de Fitopatologa y Ciencias Afines (Ascolfi) de la cual fue Secretario.
Ha combinado su actividad acadmica con su aficin innata por las cuestiones artsticas: pintura a lpiz. canto y literatura. Es autor de dos novelas
inditas y ganador de tres premios en concursos de cuento y crnicas de
Palmira.

A Laura, mi madre.
A toda mi familia.
MARINA

A la memoria de mi padre, Vctor.


A mi madre, Edelmira.
A mis hermanos y sobrinos.
A mi esposa, Luz Mercedes.
A mis hijos, Adriana, Carlos Alberto y Fernando.
A los estudiantes de microbiologa
ya todas aquellas personas que se interesen en el tema.
FERNANDO

A la memoria de mis padres,


ejemplo de superacin y abnegacin.
A mi esposa por su amor y apoyo incansables.
A mis hijos, norte constante de mi vida.
A mis hermanos.
A mis maestros.
NELSON

Reflexiones
Lo infinitamente pequeo tiene importancia infinitamente grande.
1. PASTEUR

La mayor necesidad del mundo es la de hombres que sean


sinceros y honrados en lo ms ntimo de sus almas.
Hombres cuya conciencia sea tan leal al deber como Jo
brjula aJ polo.
RUDYARD KIPLING

Se puede ensear al estudiante una leccin para un da,


pero si logramos despertar su curiosidad seguir aprendiendo durante toda la vida.
ENRIQUE ROD

... Caminante,

no hay camino, se hace camino al andar.


Al andar se hace camino y al volver Jo vista atrs
se ve la senda que nunca se ha de volver a pisar.
A. MACHADO

Agradecimientos
Los autores expresan su gratitud a la Universidad Nacional de Colombia
-Sede Palmira-, en especial a la profesora Nancy Barrera M. de la Direccin
de Investigaciones-Dipal dc-) In sede, por apoyar la financiacin de esta obra,
a travs del proyecto para el mejoramiento y desarrollo de la capacidad de
investigacin N 98CG415051.
A los profesores Mara Elena Pineda, Hernanclo Ramrez, Jos Carlos Miranda y a los colegas Jorge 1. Victoria y Francia Varn de Agudelo por la
revisin y correccin de algunos de los captulos.
A los ingenieros agrnomos Gloria Patricia Castillo, Gabriel Daz, Alexander Rebolledo, Liliana Trujillo, Pablo Ivn Gallo yen especial a Eyder Daniel
Gmez por su valiosa ayuda en la toma de algunas fotografas y digitacin
del texto.
A las seoras Rosa Elena Salamanca, Mara del Carmen Calero y Ana
Milena Molina por su trabajo de digitacin.
A nuestros hijos Carlos Alberto Marmolejo R., Martn Prager S. y Nelson
Bravo S .. por su valiosa colaboracin en la elaboracin de dibujos y correccin del texto.
A los estudiantes de los cursos de Microbiologa, Biologa y Microbiologa del Suelo por sus aportes a travs ele la lectura de estos textos, sus observaciones e inquietudes nos han permitido mejorarlos y enriquecerlos. Al
auxiliar de Laboratorio de Microbiologa, Luis Hernando Lotero.
Finalmente al seor Enrique Torres. empleado de Feriva por la colaboracin en el diseo e impresin de la obra.

Contenido
Presentacin

15

Introduccin

17

Captulo 1

Desarrollo histrico de la Microbiologa

19

Captulo 11 --

Anatoma

~'

morfologa microbianas

65

Captulo III

Metabolismo microbiano

87

Captulo IV _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __

Catabolismo y anabolismo

115

Captulo V - - - - - - - - - - - - - - - - - -

Bacterias fitopatgenas

143

Captulo VI

Los micoplasmas o mollicutes: fitoplasmas

161

Captulo VII

Los hongos

171

Captulo VIII - - - - - - - - - - - - - - - - -

Virus, viroides y priones

205

Glosario

237

Bibliografa _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __

251

Presentacin
El quehacer acadmico en la Universidad Nacional de Colombia: docencia. investigacin y extensin. busca entre otros fines: la asimilacin crtica
y creacin de conocimiento en los campos avanzados de las ciencias, la tcnica. la tecnologa, el arte y la filosofa y hacer partcipes de su actividad
acadmica e investigativa a los sectores sociales que conforman la nacin
colombiana ...
El cumplimiento de estos fines implica que el proc.eso de dilogo de saberes conlleva a que la academia en las diferentes reas del conocimiento no
se limite a la importacin. aceptacin y transmisin de conceptos y tecnologas. Dentro de esta perspectiva los acadmicos estamos llamados a cumplir
un papel trascendental en la creacin de conocimiento y dejar una tradicin
mediante la palabra escrita.
Los acadmicos en nuestra actividad cotidiana e interaccin con la comunidad cientfica y la sociedad. construimos un discurso alrededor del
conocimiento. discurso en el cual permanentemente interpretamos, recreamos y creamos ideas. Es este ambiente un caldo de cultivo que estimula en
los estudiantes -partcipes directos de este clima mgico- yen nosotros mismos, un acercamiento crtico a la realidad, el cual nos coloca ante nuevas
perspectivas, y a trascender la cultura y encontrar verdades fundamentales
sobre lo naturaL
Las posibilidades de difundir el dilogo temporal y volverlo intemporal
-aunque sea por un momento. dados los avances vertiginosos del conocimiento- se hacen realidad cuando se pasa del discurso oral al escrito. Este
paso significa un esfuerzo intelectual necesario y permanente en la consolidacin de la vida universitaria.
Es por ello que la Universidad Nacional de Colombia tiene entre sus directrices apoyar el esfuerzo de sus acadmicos, en torno a publicaciones fruto de investigaciones y de la interpretacin y recreacin de las diferentes
disciplinas del conocimiento universal. Como requisitos establece que los
textos sean revisados por pares con el fin de estimular la sana crtica y el
avance en los planteamientos.
15

Con b8se en lo 8nterior surgi la idea de condensar en este libro los materiales concebidos bajo el nombre de Cuadernos de Microbiologa, los cuales paulatinamente se han escrito, revisado y actualizado durante ms de
cinco a1os.
Estos constituyeron, en su momento. el producto del inters de los autores por escribir las ideas y conceptos acopiados, analizados e interpretados a
lo largo del diario discurrir en varias ctedras de las ciencias biolgicas:
Mi crobiologa. Fitopatologa. Biologa y Microbiologa del suelo.
El Maestro Hernando Pati10 Cruz (q.e.p.d.l,lider el primer esfuerzo por
sistematizar el conocimiento en torno a la parte histrica de la Microbiologa
y sus alumnos y colegas asumieron el reto de continuar.
El captulo inicial presenta la sntesis histrica del d esarrollo de la Microbiologa que parte de los registros del enfrentamiento ciego con las manifestaciones microbianas en los albores de la humanidad y llega hasta la dilucidacin del genoma humano en el ocaso del siglo xx. pasando por la contribucin cientfica y tcnica de aquellos a quienes Paul de Kruif llam, tan
apropiadamente. cazadores de microbios.
Luego se adentran en la anatoma y morfologa microbianas. base para la
comprensin de los captulos siguientes dedicados al metabolismo microbiano, que permite comprender por qu los microorganismos constituyen
una poderosa fuerza ecolgica y biotecnolgica.
Dada la formacin bsica de los autores. los captulos siguientes estn
dedicados a aspectos particulares de grupos de microorganismos: las bacterias fitopatgenas. los mollicutes. los hongos y las entidades acelulares
-virus, viroides y priones-.
La publicacin que hoy presentamos. dirigida a investigadores. estudiantes. profesionales. docentes y sociedad interesada en el maravilloso mundo
de los microorganismos. fue financiada a travs del Proyecto N 98CG415051
de la Direccin de Investigaciones de la Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira (Dipal). Esperamos sea una muestra ms de la intencin explcita de la Universidad Pblica ele tener presencia nacional e internacional a
nombre del esfuerzo ele todos los colombianos y en particular de sus acadmicos.
Gabriel Antonio de la Cruz Aparicio

Vicerrector
Sede Palmira , agosto de 2000

16

Introduccin
El estudio del mundo microbiano se constituye en tema apasionante para
quien8s llevados por manifestaciones visibles tienen la paciencia y la sutileza para buscar lo supuestamente invisible, hasta encontrar dentro de la aparente sencillez la complejidad morfolgica, estructural y funcional que capacita a los microorganismos para manifestarse como fuerza ecolgica capaz
de transformar el entorno con rosultac\os positivos y beneficiosos, en la mayora de las veces.
Pero si hoy causa excitacin la observacin del sinnmero de formas y el
anlisis de comportamientos, suscitan perplejidad y entusiasmo los relatos
que se hacen acerca de la labor de los pioneros que con escasa formacin
acadmica, algunos, y exhibiendo gran creatividad, dados los exiguos recursos y avances tecnolgicos de su poca, lograron implementar metodologas
de estudio y aplicacin de resultados que hoy siguen salvando vidas y garantizando el bienestar de la humanidad. Esa plyade de genios admirables que
consigui tanto con tan poco, permite afirmar que nunca un grupo tan pequei'o de hombres logr sal var tantas vidas.
Por ello, despus de recrearse con la sntesis histrica, t8ma de por s
interesante, se hace ref8nmcia l los aspectos estructurales y morfolgicos
gracias a los cuales el lector se formar la idea de que a travs de su sencillez
ele estructura oxisten gran varieclad ele formas caractersticas de cada grupo
microbiano, mediante las cuales se han adaptado a las condiciones elel medio y logran sobrevivir t-1l1 Ull mundo cada vez ms hostil.
Pero causa admiracin cmo c1mltro ele esa aparente sencillez estructural
y morfolgica existo un sistema bioqumico tan complejo que capacita a los

microorganismos pnra realiznr funciones tan variadas, en las cuales las positivas o beneficiosas nI snr humano superan enormemente en nmero a las
que le pueden causar perjuicios. Este conocimiento ha llevaclo al hombre l
17

aprovechar tales actividades en el plano de la salud, el bienestar, la industria


y, desafortunadamente, aun en la poltica.
El estudio de grupos de organismos que se inicia con las bacterias fitopatgenas, conduce no slo al conocimiento de esta relacin ecolgica tan importante desde el punto de vista agronmico, ambiental y agroindustrial,
sino darse cuenta de cmo los avances en biologa molecular e ingeniera
gentica han permitido hacer descubrimientos y en los ltimos 25 aos pasar de cinco a casi treinta gneros de este tipo de bacterias, adems de la
reubicacin de especies dentro de cada gnero.
Los molicutes, bacterias sin pared celular o, como alguien las llam alguna vez, bacterias no convencionales, cuyas manifestaciones hicieron buscar,
inicialmente, caractersticas dentro del grupo de los virus o entidades afines,
para explicar su comportamiento y proponer estrategias de manejo o control.
Los hongos, esas plantas microscpicas con multitud de formas, colores,
modos de reproduccin y actividades, estn representados en el libro por
aquellos que ejercen acciones detrimentales como agentes de enfermedades
en las plantas.
Lo mismo se puede decir de esas fascinantes y a la vez temidas entidades
acelulares los virus y viroides y aun de los priones; estos con su misteriosa
capacidad de multiplicacin y de afeccin en animales, incluido el hombre,
a pesar de carecer, hasta donde se sabe, de cidos nucleicos.
Queda a disposicin de los lectores este esfuerzo producto del estudio
constante, del espritu inquieto y creativo de los autores, pero abierta la posibilidad de sugerencias que con nimo crtico permitan mejorar esta obra en
futuro no lejano.

Los autores

18

CAPITULO I

Desarrollo histrico de la Microbiologa


PRIMERA PARTE

Elementos de ecologa microbiana*

Introduccin
Desde finos del siglo pasado, cuando Pasteur y Koch demostraron la naturaleza microbiana de ciertas enfermedades del hombre y de los animales
domsticos, los microorganismos han sido puestos en el banquillo de los
acusados y enjuiciados casi exclusivamente como enemigos jurados de la
humanidad,
Es cierto que muchas entidades microbianas han constituido azotes ancestrales de la biologa humana, ocasionando en algunas pocas y regiones
verdaderos desastres sociales tal como aconteci con la peste bubnica en la
Europa del siglo XIV. Sin embargo, el temor colectivo que se les ha tenido a
los microorganismos como consecuencia de una interpretacin terrorista de
los descubrimientos de Pasteur, es exagerado y unilateral pues desconoce el
hecho de que slo un porcentaje minsculo de ellos son agentes causales de
enfermedades.
Segn clculos de los microbilogos, en la masa total de los microorganismos terrestres los elementos patgenos no representan ni siquiera el 1 %,
el resto, es decir la casi totalidad de las especies y el grueso del material
microorgnico que se produce en la naturaleza realizan funciones ecolgicas

Autora principal del profesor Hernando Patio C. (q.e.p.d.).

19

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

tiles. Mediante el examen directo ele los microorganismos en su hbitat o


ambiente natural la ecologa microbiana ha podido reconocer multitud de
funciones de gran trascendencia para la continuidad de la vida sobre el planeta y para el desarrollo econmico del hombre.
A ttulo de introduccin se destacan dos de los papeles ecolgicos ms
importantes de estos aliados invisibles del hombre. que permiten que se los
valore como verdaderos trabajadores annimos de la naturaleza.
Primero: La funcin fotosintetizante de microorganismos cloroflicos (diatomeas y otras algas). los cuales constituyen el forraje bsico de los ecosistemas acuticos. Esta asimilacin ele la energa solar les permite producir
millones de toneladas ele materia orgnica y una enorme masa dol oxgeno
necesario para sustentar la vicia acutica.
Segundo: La incorporacin al suelo de millones de toneladas de desechos orgnicos. cadveres de animales. restos vegetales, excrementos y basuras. Estos materiales son transformados por la actividad microbiana, en molculas simples, tales como el anhdrido carbnico y los nitratos. dos de las
materias primas de flcil asimi!lcin por las plantas imprescindibles para la
sustentacin de la vida.

Adems de las dos funciones antes comentadas, se pueden mencionar


las siguientes: meteorizacin de rocas e incorporacin primaria de materia
orgnica en el proceso de desarrollo del suelo; fijacin de nitrgeno atmosfrico; balance ecolgico de poblaciones de otros microorganismos, invertebrados, plantas y animales; promocin de la evolucin de organismos parasitados hacia estirpes resistentes, tolerantes o inmunes; transformacin de la
celulosa del forraje en materias primas de origen animal; conservacin de
forraje a travs del ensilado; produccin y conservacin de alimentos; produccin de antibiticos y otras substancias qumicas; elementos de investigacin cientfica, etc.
El trabajo incluye una discusin inicial sobre algunos elementos histricos. destinada a destacar la estrecha relacin entre el hombre y el recurso
microbial, a travs de los siglos.

Elementos histricos sobresalientes,


en el conocimiento ecolgico de los microorganismos
En relacin con los microorganismos, ll historiR del hombre equivale al
conocimiento y dominio gradual ele estl poderosa fuerza ecolgica a travs
ele los tiempos. En su transcurrir rnilenlfio. el hombre ha recorrido clifRrentes etapas, que Vln desde la n,lIural P1siviclad animal de sus ancestros primates frente a las enfermedades, hasta la fase experimuntal ele la microhiologa cientfiC<l contempornul, caracterizada por el gran ,'Ilocimienlo ele la
estructur3 y funcin de los microorganismos y el avanzad 'Iominiu tecnol-

20

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

gico de los mismos, sus aplicaciones econmicas en silvicultura, agricultura, zootecnia, industria, medicina y saneamiento ambiental.
La seleccin natural, el primer mecanismo de defensa
contra los microorganismos patgenos

Desde los albores de su desarrollo, la especie humana se encontr con


diferentes manifestaciones de la actividad microbiana. Al igual que el resto
de seres vivientes, los primates antecesores oel hombre debieron soportar
pasivamente las enfermedades de origen microbiano. Estas, a pesar de diezmar notablemente sus poblaciones, tuvieron a la larga el efecto beneficioso
de seleccionar los grupos de homnidos ancestrales ms resistentes a ellas.
De acuerdo con lo anterior. es muy probable que enfermedades microhianas hoy tan usuales, como la gripe o catarro comn. hubiesen sido originalmente azotes violentos de nuestros ahuelos)) antropoides. As, nosotros seramos los afortunnoos descendientes. relativamente tolerantes a tales dolencias, frutos de la prolongada y continua interaccin coevolutiva de nuestros antepasados con sus microorganismos patgenos: virus, bacterias, hongos, protozoarios. etc. Este mecanismo lentsimo, penoso y costoso de la seleccin natural, hoy afortunadamente superado por medios tecnolgicos y
culturales, constituy la nica defensa de la especie humana, a travs de los
varios millones de ai.os de su evolucin biolgica primitiva.
El esquema anterior qU(~ es aplicable alas relaciones microbianas de plantas y otros animales, demuestra cmo, ell un sentido evolutivo, los propios
microorganismos que producen enfermedades, son una fuente de desarrollo
de estirpes ms selectas y avanzadas, entre las poblaciones por ellos parasitadas, a la vez que constituyen un mecanismo de homestasis ecolgica, o
regulacin automtica de ellas.
El enfrentamiento sensorial o emprico, con la poderosa
fuerza ecolgica de los microorganismos patgenos

En los inicios de la vicia social, provisto de capacidad cognoscitiva, el


hombre primitivo empez a reconocer las enfermedades en sus manifestaciones ms crueles y a menudo fatales. Pero ante la incapacidad tecnolgica
para identificar sus causas invisibles, debi recurrir a explicaciones fantsticas ele ndole sobrenatural, mgica y supersticiosa. A esta fase corresponden
los primeros intentos de control ele la fuerza ecolgica de los microorganismos patgenos, mediante ritos sagrados. sistematizados posteriormente en
ceremonias rel igiosas.
Concepciones y pricticas tan generalizadas en los sectores marginales de
nuestra poblacin como aquella que atribuye ciertas enfermedades a un presunto rnaleficio mal ele ojO), o la que recomienda la quema de incienso o de
ramo bendito para alejar los malos espritus que enferman a la genle), COI1S21

Marina Snchez de Prager " Fernando Marmolejo De la Torre" Nelson Bravo Otero

tituyen reliquias culturales de aquella etapa primitiva, las cuales encuentran todava en pleno siglo xx, el terreno abonado por el atraso econmico y
cultural.
Simultneamente
y mediante el sistema 1
dizaje por ensayo
ro creciente de
para curar o atenuar
Un ejemplo gr
cia de estos descubrimientus
ele la farmacologa embrionaria, lo tenemos en el uso de la corteza del quino
(Cinchona sp) para el tratamiento ele la malaria o paludismo, por parte de las
tribus amaznicas, logro que sirvi de base a la moderniJ quimioterapia de
esta enfermedad microbiana (Figura 11,
Enfrentamiento
como agentes

microorganismos,
suelo

El descubri

tura, evento crucial que di


afos, enfrent al hombre
festaciones
microbiano, Muy pronlo
entendi que el estircol y los residuos orgnicos enriquecan el suelo; despus encontr que la siembra de ciertas especies como el frjol y la soya tena
efecto parecido. El abonamiento con estircol y orina y la siembra de leguminosas como abono verde, practicados por los agricultores romanos hace ms
de dos mil aos, as como la prctica de cultivos asociados de frjol y maz,
que data posiblemente de las pocas precolombinas. constituyen expresiones antiguas del
pero ciego, sobre las fuerzas
entonces
Agricultura,

microorganismos

Tambin cornu
incipiente desarrollo
bre descubri el proceso de panificacin e inaugur desde tiempos remotos
la industria del vino y la cerveza, aludida en pasajes bblicos bien conocidos
(Figura 21, Figurillas de madera que representan panaderos y cerveceros en
el Egipto de hace 3.000 aos, constituyen reliquias arqueolgicas del dominio temprano de procesos cuya naturaleza microbiana apenas pudo ser aclarada por Pasteur 8n el siglo pasarlo, Un fresco de Pompeya, que representa
una panadera,
I en la Italia de hace dos
Los indgenas
abroma, o alimento
prodigiosa,
se conoce es
gasas (Figura 3).

ropical que domesticaron


, descubrieron que el arorna
de fermentacin de la
accin enzimtica. de

22

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES


Figura 1. Indgen as procesan-

do la cort eza de quino (Cinchona sp) para el tratamiento de


la malaria (Dibujo: Nelson Bravo O)

Figura 2. Aplicaciones indu s-

trio/es del dominio temprano de


procesos de noturolezo microbiano.

Figura 3. Proceso de fermen-

tacin de semillas de cacao;


otra manifestacin de la actividad microbiana (Dibujo: Nelson Bravo O.).

23

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Agricultura y enfermedades de los cultivos

Con la invencin de la agricultura se pusieron en evidencia las enfermedades infecciosas de las plantas cultivadas y de las especies animales domsticas. Una tabla de arcilla, grabada con escritura cuneiforme, en los albores de la civilizacin agrcola de Babilonia, hace ms de 3.500 aos, se refiere a una enfermedad de la cebada, cuya descripcin coincide con la roya; en
ella se invoca la ayuda de la diosa Ninkilim para conjurar la afeccin.
La civilizacin precolombina de los aztecas reconoci el carbn del maz.
La enfermedad reciba el nombre de Popoyotl y la asociaban intuitivamente
con un hongo: cinnanacatl (cin=maz; nanacatl=hongo), relacionndola posiblemente con otros hongos macroscpicos, que ellos utilizaban como alimento o con fines alucingenos. Casi todas las tribus indgenas del Centro y
Suramrica empleaban como alimento las agallas jvenes producidas por el
carbn del maz.
Otra enfermedad, la pudricin de la mazorca, la asociaban los aztecas
con el crecimiento fungoso que se desarrolla en las mazorcas enfermas. Esto
se considera como la primera referencia a la asociacin entre un hongo microscpico y una enfermedad de plantas, en la historia de la microbiologa
agrcola. Cinteotl y otros dioses protegan el maz de estas afecciones.
En la Biblia como en el resto de libros religiosos se encuentran reiteradas
referencias a enfermedades de los cultivos. En el libro de Ams, artculo 4,
versculo 9 se lee: Te he castigado con el aublo y con el mildeo, dos
trminos utilizados hoy en la patologa vegetal para referirse a ciertas enfermedades, tal es el caso del mil deo de la vid producido por el hongo Plasmopara vitcola.
En los albores de la industria pecuaria
Tres milenios antes de que los cientficos lograran aclarar las causas microbianas de ciertos procesos ligados a la industria pecuaria los pueblos pastores de diferentes culturas ya haban podido manejarlos empricamente. Entre
ellos se mencionan la transformacin del forraje en trabajo animal, en carne
y leche; la preservacin de esta ltima mediante la conversin en yogur y en
queso, el almacenamiento del forraje a travs del ensilado, el curtido de las
pieles y la preservacin de las carnes mediante el ahumado, su tratamiento
con sal, etc. Los aspectos microbiolgicos implicados en los procesos mencionados se discutirn ms adelante.

Edad Media, peste negra, fin de una etapa ciega


Durante la Edad Media continu el predominio de las interpretaciones
mgico-religiosas sobre las enfermedades del hombre, los animales y las plantas. El desarrollo del comercio y el inicio de los Burgos o primeras ciudades
a fines del Medioevo, incrementaron notablemente las epidemias a conse24

cuencia del hacinamiento y las condiciones antihiginicas de vida. La peste


negra irrumpi como uno de los jinetes del Apocalipsis, a cuya accin devastadora no escaparon ni la nobleza feudal ni el alto clero. como lo insina
llna pintura c:lsica de la poca. Entre 1346 y 1350 la infeccin se extendi
por toda Europa, desde el Asia Menor hasta Inglaterra y Rusia.
En Avie'm, el Papa Clemente VI se salv aislndose en su cmara entre
dos lumbres enormes. All la peste bubnica trat con particular severidad al
pueblo. La Iglesia rog por el perdn de la peste, pero sta no respetaba siquiera a los frailes que participaban en las procesiones. De aCllerdo con una
ilustracin de la poca los vivos no daban abasto para enterrar a los muertos.
En Alemania la peste negra dio origen a los Cruzados flagelantes. penitentes
que on larga procesin se daban latigazos frenticos, intenLando infructuosamente aplacar la ira divina.
Aunque muchos hombres importantes murieron en toda Europa, los ricos, que podan huir de las ciudades y buscar abrigo en sus higinicas quinta:'. sufrieron notoriamente menos que sus contemporneos pobr~~s. Ni San
Roque, el Santo de la peste, ni Nuestra Seora de la Gracia lograron evitar la
catstrofe: :'L~ millones. la tercera parte de la poblacin europea. fue la cuota
astronmica de vctimas que cobr la epidemia en los fatdicos cuatro aos.
Como r:oIlsecuencia lgica el prestigio y autoridad espiritual de la Iglesia
decayeron notablemente, influyendo en los posteriores movimientos de reforma religiosa.
La desaparicin sbita de u n tercio de la mano de obra contribuy a acelerar las modificaciones en la estructura del rgimen feudal. Las insurrecciones campesinas de fines del siglo XlV se vieron estimuladas por las condico:les dramticas de existencia. que prornovi la muerte negra.
En el terreno del conocimiento, al poner en tela de juicio la interpretacin religiosa de las enfermedades, la peste influy en la bsqueda de concepciones realistas. animando el espritu cientfico que a travs del Renacimiento creRra las condiciones apropiadas para [a invencin del microscopio, la investigacin experimental del mundo microbiano y el desarrollo de
mtodos racionales en la prevencin ele las epidemias.
En una pintura do la poca, en la cual se presentaba un rito religioso para
aplacar la peste, se incluan en la ilustracin. numerosas ratas diseminadas
entre los enfermos. Esta puede considerarse como una de las observaciones
precursoras sobre las relaciones ecolgiCAS del agente microbiano que prodlIc(~ la peste negra. En efecto. hoy en da se sabe que la peste bubnica es
ocasionada por un patgeno bacteriano, nominado cientficamente como PasteL/rella pestis. en honor do Pasteur, reclasificado posteriormente como Yersina pestis. La bacteria 8S lransmitida por las pulgas a partir de ratas infectadas, lo cllal explica la amplia difusin de la peste a travs de los puertos
25

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

\
, ", ...'
,,-

, , ......" 1)
\ ea
1/
-~.-/
Pasteurella ~stis

./
,/

Figura 4. Transmisin de /(1 peste bubnico o peste negra (Dibujn: Ne!son Bravo O.).

comerciales de Europa. a los cllales arribaban los barcos invadidos de ratas


en el siglo XIV (Figura 4).

Descubrimiento del mundo microbiano


Los profundos cambios econmicos, polticos y culturales que dieron al
traste con el jerarquizado y caduco orden feudal, crearon condiciones favorables para lAS innovaciones tcn icas. El desarrollo de la ptica prctica condujo a la construccin del microscopio. abriendo el campo a las primeras
observaciones directAS del mundo microbiano, en el siglo XVII.
Robert Hooke. 81 oescubridor de la clula, observ por primera vez algunas estructuras de organismos microscpicos. Una ilustracin de su propia
mano insina las teleutosporas oscuras de Phragmidium, el hongo que ocasiona la roya del rosal. Sin embargo, se consioera como el verdadero descubridor del nuevo universo de lo diminuto, l un comerciante no ilustrado,
Anthoni van Leeuwenhoek, por realizar observaciones ms detalladas y precisas .
26

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Este vendedor holands de telas se encontr con la nueva realidad del


microcosmos, a travs de exmenes habituales destinados a detr.rminar la
calidad de las fibras textiles, utilizando para ello microscopios simples que
l mismo construa, Este micromundo de maravillas no lo abandonara posteriormente por espacio de cincuenta ai'ios.

Leeuwenhoek y el principio de la ubicuidad microbiana


No hubo material que escapara a la observacin pertinaz e inquisitiva de
Leeuwenhoek, ni pedazo de naturaleza en el cllal no apareciera como una
constante infalible la presencia de animlculos, o pequeos animales, como
l llam a los microorganismos.
As. se insinu por primera vez uno ele los prinr.ipios claves de la ecologa microbiana: la ubicuidad o carcter cosmopolita de Jos microorganismos, es decir, el hecho de que estas entidades se encuentren prcticamente en todos los rincones de Jo corteza terrestre.
La comprobacin de este postulado constituye una de las experiencias
sencillas ms interesalltes de la Microbiologa. Basta con situar en condiciones apropiadas de humedad y temperatura, cualquier tipo de material orgnico: frutos, hortalizas, hojas, troncos de rboles, excrementos de animales,
carne, pan, tela, papel, cuero, etc., para percatarse del florecimiento profuso
en su seno, de una gran diversidad de formas microbianas, algunas de ellas
con manifestaciones observables n sim pIe vista, la mayora solamente visibles al microscopio.
Observaciones similares pueden lograrse exponiendo un medio de cultivo estril (libre de microorganismos), al ambiente atmosfrico o en contacto
con diferentes materiales como piel, cabello, material bucal, rocas, suelo,
agua, entre otros.
El desarrollo posterior de la Microbiologa ha comprobado la extraordinaria importancia ecolgica que reviste esta distribucin generalizada de los
microbios, al garantizarse en cualquier sitio del planeta, la incorporacin al
suelo de desechos orgnicos, o el aprovechamiento de la energa solar por
parte de los microorganismos fotosintetizantes. La ubicuidad microbiana refleja la gran capacidad de adaptacin y la enorme diversidad de formas, tamaos y funciones que presentan los microorganismos.
Hasta en los Jugares de condiciones ms extremas es posible encontrar
formas microbian1s, adaptadas a esos ambientes difciles. La nieve de algunas regiones templadas puede tomar un hermoso color rosado, como consecuencia de la acumulacin de esporas de resistencia pertenecientes a CJamydomonas y otras especies de algas. En algunas fuentes termales se pueden
desarrollar cianofceas a temperaturas de 7DOC. Su presencia se hace evidente por el crecimiento verdoso que producen. En algunas ocasiones, adems
27

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo O/ero

de la elevada temperatura, coinciden condiciones extremas de acidez, como


es el caso de las aguas termales azufradas del Parque de Pisimbal, en el
departamento del Cauea. En manantiales clidos, l temperaturas de 85 a 8BoC.
es posible encontrar masas rosadas d e bacterias termoflicas, que crecen all
en los lmites trmicos. permisibles para la vida. En salinas de California
crecen bacterias halfilas, en concentraciones de sal cercanas a la saturacin
y en donde la alta presin osmtica tiende a producir la muerte por deshidratacin en la mayora de formas vivientes. Tambin se registran especies
de algas en estos ambientes salinos. Dunaliella viridis forma masas verdosas;
Dunalielln salina se acumula en manchones rosados con apariencia ele minsculos rubes. las clulas rojizns de esta alga se pueden observar al microscopio en medio de los cristales de sal. Se han encontrado microorganismos
en las capas superiores de la atmsfera y hasta en los circuitos de refrigeracin de los reactores nucleares.

Pasteur y la teora de la generacin


espontnea de los microorganismos
La consecuente proliferacin de microorganismos y otras formas vivientes, en todo tipo de material orgnico inerte, proporciona la falsa apariencia
del origon espontneo de la vida a partir de materiales inanimados.
Lzaro Spallanzani, genuino sucesor de Leewenhoek en el siglo XVIII combati experimentalmente la tesis de la generacin espontnea de los microbios. al demostrar que un material orgnico hervido y sellado hermticamente no se corrompa y permaneca libre de microorganismos.
Los idealistas comandados por el abate Needham arguyeron que el cierre
hermtico le impeda el acceso al principio espiritual que originaba la vida.
Correspondi a Luis Pasteur. el padre de la Microbiologa cientfica, aclarar definitivamente el problema, a mediados del siglo pasado. Realiz )a ms
sencilla. pero a la vez ms ingeniosa hazai1a experimental en la historia de la
biologa, demostrando que los microorganismos no tienen origen en la transformacin espontnea de los materiales orgnicos sino que provienen de estructuras microbianas o grmenes preexistentes que llegan a travs del aire o
de otros agentes y se reproducen profusamente al encontrar suficiente humedad y un sustrato alimenticio apropiado.
Para su demostracin histrica. Pasteur construy un matraz con cuello
de cisne, a travs del cual poda circular libremente el presunto elam vital
de los espiritualistas. Veamos con sus propias palabras. apartes de ID descripcin ele su experiencia: Coloqu en un matraz de vidrio uno de los siguientes lquidos que son extremadamente alterables cuando entran en contacto con el aire ordinario: agua de levadura azucarada. l'rina, jugo ele remolacha azucarera yagua de pimienta. Despus estir el cuello del matraz bajo
28

MICROBIOLOGiA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

una llama, ele tal modo que se produjeron en l varias curvaturas ... Despus
herv el lquido durante varios minutos hasta que sali vapor libremente por
el extremo del cuello. Esta punta permaneci abierta sin ninguna otra precaucin. Se dej entonces enfriar los matraces. Cualquiera que est familiarizado con la sutileza de los experimentos en relacin con la llamada generacin espontnea quedar asombrado al comprobar que el lquido tratado
de esta manera permanece indefinidamente sin alteracin. Los matraces
pueden ser manejados de cualquier manera, ser transportados de un lugar a
otro, se les puede dejar sufrir todas las variaciones de temperatura de las
diferentes estaciones, que el lquido no sufre la ms ligera alteracin. Despus de uno O ms meses en el incubador, si se quita el cuello con una
lima, sin tocar el matraz de cualquier otra manera, despus de 24, 36 48
horas, comienzan a aparecer mohos e infusorios, tal como es habitual, o
como si se hubiera inoculado en el matraz polvo del aire ... En este momento tengo en mi laboratorio muchos lquidos altamente alterables que han
permanecido sin cambiar durante 18 meses, en matraces abiertos con cuellos inclinados o curvados.

La naturaleza microbiana de los procesos


de fermentacin, putrefaccin y enfermedad infecciosa
Sobre la base de experiencias similares a la anterior, Pasteur logr concebir explicaciones naturales a tres procesos ecolgicos que se haban considerado hasta entonces en trminos misteriosos o sobrenaturales. Son ellos: la
fermentacin, la putrefaccin y la enfermedad infecciosa. Los dos primeros resultaron ser consecuencia de la actividad microbiana sobre los residuos orgnicos inanimados y no el efecto de ningn espritu o diablillo del
licor o de algn duende de los pantanos. La enfermedad infecciosa apareci
en sus verdaderas dimensiones naturales, como el fruto de microorganismos
parsitos, independientes de presuntas fuerzas divinas o demonacas.
El desarrollo posterior de la microbiologa se encargara de valorar la
trascendencia de estos procesos que hacen del mundo microbiano una poderosa fuerza ecolgica invisible.

Berkeley, Koch y otros microbilogos


destacados de la poca de Pasteur
Por supuesto que la aclaracin cientfica de los fenmenos microbianos
antes mencionados, no fue obra exclusiva de Pasteur, pues corresponde a
todo un esfuerzo social que vena acumulndose desde la antigedad. Un
siglo antes ya se haba sugerido que algunos de los animlculos de Leewenhoek podran obrar como agentes patgenos contagiosos. En relacin con el
carcter microbiano de las enfermedades infecciosas, 20 aos antes, el fitopatlogo ingls 1.M. Berkeley haba demostrado que el responsable de la gota

29

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

de la papa era un hongo microscpico, el Phytophthora infestans, sobre el


cual el mismo Berkeley efectu ilustraciones muy precisas.
Las investigaciones de Berkeley, realizadas en la dcada del 40 del siglo
XIX, respondieron a la tristemente clebre hambre de Irlanda, catstrofe so-

cial que cobr varios millones de vctimas a consecuencia de la devastacin


de los cultivos de papa, por el ataque de la gota. Esta enfermedad sigue siendo hoy en da uno de los principales problemas fitosanitarios de la papa y el
tomate.
Un contemporneo alemn de Pasteur, el mdico rural Robert Koch, estableci el carcter bacteriano del carbunclo o ntrax del ganado, de la tuberculosis y el clera en el hombre. Experimentando con el carbunclo, la peor
de las enfermedades del ganado en su poca, Koch desarroll un proceso
lgico que despus generaliz en los famosos cuatro postulados que llevan
su nombre y de acuerdo con los cuales, para probar que un microorganismo
es el agente causal de una enfermedad determinada, deben cumplirse los
siguientes pasos:
1. El microbio debe encontrarse siempre en el organismo que padece la enfer-

medad y no debe estar presente en los individuos sanos.


2. El microorganismo debe aislarse en cultivo puro.
3. Tal cultivo, cuando se inocula en individuos susceptibles debe reprodu-

cir los sntomas caractersticos de la enfermedad.


4. El microbio debe ser aislado de nuevo de los individuos inoculados y
cultivado otra vez en el laboratorio (Figura 5).
Iluminado por la teora de Pasteur, acerca del carcter microbiano de las
enfermedades infecciosas, el escocs Joseph Lister introdujo la tcnica de la
ciruga antisptica que comprenda desde la abolicin de la venerable pero
mugrienta levita o frac del cirujano tradicional, hasta el tratamiento con cido fnico de todo lo que entraba en contacto con los pacientes, instrumentos
de ciruga, vendajes, ligaduras, manos de los cirujanos, el rociado del aire y
la aplicacin del germicida en las propias heridas.
Para juzgar realmente el valor del aporte de Lister, basta recordar que en
los hospitales de Munich mora hasta e180% de los pacientes operados, como
consecuencia de la infeccin de las heridas quirrgicas. La introduccin de
las tcnicas antispticas de Lister baj espectacularmente esta cifra al 0%.
Un siglo antes que Pasteur lograra la inmunizacin contra la hidrofobia
en el hombre, el carbunclo en el ganado y el clera en las aves de corral,
Edward Jenner, un mdico ingls, haba realizado una proeza similar con la
ms temible enfermedad de su poca, la viruela. Jenner sistematiz observaciones tradicionales de los ordeadores, de acuerdo con las cuales estos sobrevivan con mayor frecuencia a las catastrficas epidemias de viruela. Como

30

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

~
,.:fV"-,0

~/2'

Postulado de Koeh: AISLAMIENTO


DEL MICROORGANISMO PATOGENO
EN CU;nVO PURO

l U Postulado d. Koeh: RELACION MICROORGANISMO


PATOGENO - INDIVIDUO ENFERMO

(---@
/

3" Postulado de Koeh : LA INOCULACION


DEL MlCROORGANISMO AISLADO

"""'~""" _M","
4' Postul.do de Koeh: REAISLAMIENTO DEL MICROORGANISMO
PATOGENO A PARTIR DEL INDIVIDUO INOCULADO

Dibujo: Ne/son Btuvo O.

Figura 5: Rf'presf'nlocin de los postulodos de Rohprt Koch.

lo pudo constatar experimentalmente, los ord ei'adores se inmunizaban al


contraer el cowpox o viruela de los vacunos, una forma benigna de la enfermedad, que pasaba de las pstulas de las ubres a las manos,
El artculo cientfico en el cual consign Jenner sus investigaciones fue
rechazado por la Real Academia Britnica y como si esto fuera poco, el eminente pero modesto mdico rural fue objeto de todo tipo de mofa y ridiculizacin. lS lo demu es trl una caricatura del siglo XVIII. en la c ual se insina la
transformacin d e las personas en monstruos vacunos, como consecuencia
de la vacunacin practicada por Jenner.
Tambin en su tiempo, Lister debi soportar los ataqu es de sus colegas
britnicos y Pasteur la persecucin de sectores recalcitrantes de los gremios
d e mdicos y veterinarios franceses. quienes por sus concepciones elitistas
no podan co n ceb ir que un simple laboratorista qumico, incursionara en
terrenos presuntamente restringidos a los doctores de la poca. Irnicamente, correspondi a aquel tcnico de laboratorio, sin cartn de mdico, la fundacin de la medi c ina y la veterinaria cientficas sobre la base de sus aportes
microbiol()gicos , los cU1les fueron definitivos en el terreno de la salud humanrl y rlnim11.
Estos hechos demuestran que tambi n la Mic robiologa debi 1hrirse paso
en franca lid contra la supersticin, el oscurantismo y los privilegios soci11es.
31

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

La Microbiologa moderna y contempornea, como fruto


de los aportes de Pasteur y otros investigadores de su poca
Alguien afirm que la verdad es muy simple, despus de que otros ya la
han establecido. Por ello, nos parecen extraordinariamente sencillos los aportes de los padres de la Microbiologa. No obstante, sus descubrimientos fueron determinantes en la historia de la humnnidad, al sealarse rumbos definitivos al bienestar y a la cultura.

Implicaciones industriales: Respondiendo a las exigencias sociales de


su poca y de su regin, la provincia vincola de Lille, Pasteur aclar el fenmeno de la alteracin de los vinos como consecuencia de la actividad de
bacterias tipo espirilos. Estos microbios lgicamente no se observan en un
vino de condicin normal, en el cual se desarrollan las clulas de la levadura, responsables de la fermentacin alcohlica corriente.
El origen de la pasteurizacin: Demostrando una capacidad excepcional para combinar la teora y la prctica, Pasteur no slo aclar el problema
terico, sino que para resolverlo ide un procedimiento tan ingenioso y prctico, como sencillo: el tratamiento con calor suave, despus de que la fermentacin inicial haba transcurrido. As se eliminaban los vibriones perjudiciales pero se conservaban el aroma y otras propiedades importantes del
licor. Se trata del conocido procoso de pasteurizacin, llamado as en honor
de su descubridor y el cual constituye en la actualidad la base de la proteccin antimicrobiana. no slo del vino y otros licores, sino de la leche, el
yogur, los jugos de frutas y otros alimentos. El proceso se realiza hoy en
plantas apropiadas. calentando rpidamente a 71 oC por 15 minutos o a 63C
durante 30 minutos y enfriando despus instantneamente.
Aplicaciones industriales de la tcnica del cultivo puro: Gracias a la
tcnica del cultivo puro ideada por Koch, hoy en da pueden cultivarse en el
laboratorio microbios tiles. Estos se incrementan en grandes plantas que
pueden alcanzar una capacidad hasta de 60.000 litros.
Basta con suministrarles un sustrato alimenticio apropiado, a menudo
cosas muy elementales, por ejemplo, el azcar contenido en el guarapo de
caa o en el jugo de uvas; all se multiplican rpidamente. Despus, pueden
extraerse de ellos muchas substancias tiles, como alcoholes, cidos, vitaminas, hormonas, antibiticos, o protena para alimentacin humana o animal.

Escherichia eoli, habitante natural del intestino del hombre y de los


animales, es capaz de desdoblar doscientas veces su propio peso de lactosa
en una hora; un hombre tardara treinta aos en hacer algo equivalente
(Figura 6).

Aplicaciones del principio del matraz cuello de cisne: Por medio de


sus famosos matraces de cuello de cisne, Pasteur demostr que si se elimina32

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

ban los invisibles microbios del aire, las sustancias vegetales y animales podran permanecer indefinidamente incorruptas. As convenci al mundo ilustrado de la bondad de los mtodos empleados por el cocinero Appert, medio
siglo antes, hirvicmdo los alimfmtos y conservndolos en vasijas hermticamente cerradas. La experiencia de los matraces no slo aclar un gran problema terico do la biologa, sino que ele carambola le proporcion bases
cientficas a la industria de las conservas, uno de los logros tecnolgicos ms
tiles del ltimo siglo.
Hablando del laboratorio de Microbiologa, se pueden citar aplicaciones
tan tiles del mencionado principio del matraz de Pasteur, como el empleo
d~) tubos de ensayo y erleIlmeyers con tapn de algodn y la famosa caja de
Petri, para el cultivo puro de microorganismos. Mientras en el matraz de
Pasteur los microorganismos del aire circulante se decantan por gravedad en
la curvatura inferior del cuello. en la caja de Petri se detienen en la parte
inferior de la tapa, y en los erlenweyefs y tubos de ensayo, en el tapn de
algodn (Figura 7).

Implicaciones agrcolas: En sus aspectos microbianos, la agricultura cientfica tambin se iniciR con Pastem. Beijerinck y Winogradsky prosiguen los
estudios de su maestro francs en el rea de las transformaciones microbianas del suelo y aclaran fenmenos tan importantes en la agricultura como los
procesos de nitrificacin y fijacin del nitrgeno. Las tcnicas modernas de
fertilizacin no habran sido posibles sin esa labor pionera de los microbilogos del suelo.
En el campo fitosanitario. los aportes de Pasteur y Koch hicieron posible
el surgimiento del estudio cientfico de las enfermedades de las plantas o
Fitoprttologa.
El estudio de la pebrina. llna enfermedad microbiana del gusano de seda,
producida por un protozoario, inici otro campo de gran importancia prctica para la prevencin y el control de las enfermedades de insectos benficos,
yen sentido contrario. sent las bases del control microbiolgico de las plagas insectiles, mediante la utilizacin ele hongos, bacterias y virus parsitos
d(-~ insectos perj\ldiciales. Sorprende la simplicidad de los materiales utilizados por PastGUf en este tipo de investigaciones. a travs de las cuales msolvi un grave problema a la industria de la seda natural en Francia.

Implicaciones pecuarias: Muchas de las investigaciones adelantadas por


Pasteur y Koch, respondieron a las exigencias prcticas del desarrollo ganadero de Europa en f-d siglo pasado. El caso ms conocido es el elel carbn
bacteriano ant,)s mencionado. Los experimentos de control preventivo de
esta enfermedad mediante la vacunacin con bacterias debilitadas, fueron
realizados por Pasteur pblicamente con el fin de enfrentar eficazmente la
oposicin de los crculos mdicos y veterinarios.
33

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Figura 6. Ln al/o copocidod de


metabolisJllo de Escherichia
r:oli perrni/e su rpido crecimiento en pocas horas.

Figura 7. Aplic(Jclones del principio delnwlmz cuello de cisnA An Alluboralorio.

A partir de la labor pionera de los fundadores de la Microbiologa cientfica se pudieron mejorar los procesos de la industria lctea, el curtido de
c:ueros y el ensilaje.

Implicaciones mdicas: En el terreno de la salud, los aportes de esta


plyade de superhombres dividi la historia humana, marcndole el paso a
la vida civilizada. Nunca un grupo tan pequeo de hombres, logr salvar
tuntas vidas. A consecuencia de sus descubrimientos, uno de los jinetes del
Apocalipsis result herido de muerte, La peste, como smbolo de las epidemias catastrficas, pas a la historia.
Todas las tcnicas mdicas y sanitarias que han permitido controlar o
atenuar enfermedades tan graves como el sarampin, la peste bubnica, la
sfilis. la viruela, la tosferina, la tuberculosis, la poliomielitis y el ttano,
entre otras. se desarrollaron sobre los aportes bsicos de los cazadores de
microbios del siglo pasado, como los llam Paul de Kruif. en una de las
obras ms interesantes sobre divulgacin de la historia de la Microbiologa.

34

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

La teora sobre la naturaleza microbiana de las enfermedades infecciosas ha


permitido el desarrollo de las ms variadas tcnicas de medicina preventiva,
ingeniera sanitaria y terapia qumica de las enfermedades, desde las ms
simples como el lavado de las manos, el tratamiento de las heridas y el consumo de agua hervida, hasta los modernos acueductos y alcantarillados, los
quirfanos ultramodernos, el control de insectos transmisores de enfermedades, los antibiticos de potencia increble, las tcnicas avanzadas de vacunacin, etc.
Adems de los cazadores de microbios que se han considerado, muchos otros hicieron aportes definitivos en ellltimo siglo. Corriendo el riesgo
de ser injustos al omitir nombres importantes, adicionamos a la lista los siguientes: Los dos Emilios de la Difteria, Roux y Behring. desarrollaron la
antitoxina diftrica; Teobaldo Smith demostr que la garrapata transmite el
protozoario causante de la fiebre tejana en el ganado; David Bruce comprob
la transmisin por la mosca tse tse del TIypanosoma causante de la enfermedad del sueo; Ronald Ross y Batista Grassi demostraron la transmisin por
el zancudo Anopheles del protozoario que produce el paludismo; Carlos Finay y Walter Reed, aclararon la transmisin del virus de la fiebre amarilla por
un pequeo mosco; Cruz, cientfico brasileo, demostr la transmisin del
mal de chagas por el pito, o chinche reduvido; Pablo Erlich, el padre de la
quimioterapia, al descubrir un compuesto de arsnico que controlaba el Treponel1lC1 pallidum, la bacteria espiralada que produce la sfilis; Domagk, el
descubridor de las sulfas como antibacteriales; Fleming, Florey y Chain, los
descubridores de la penicilina; Iwanowski. Bawden, Stanley, Pirie y Herelle,
descubridores de los virus; Metchnikoff, descubridor de los fagocitos, los
glbulos blancos, soldados que engullen las bacterias invasoras del organismo.
En los planos terico, filosfico y cultural. las tesis sobre la naturaleza
microbiana de las enfermedades han contribuido notablemente en la lucha
contra las ideas atrasadas, derrotando en la cabeza de los hombres los ejrcitos de duendes y espritus malignos o benignos.
y para concluir este recuento histrico, un motivo de reflexin: En Colombia como en el resto de los pases inapropiadamente denominados subdesarrollados, las llamadas enfermedades hdricas o infecciones gastrointestinales constituyen la primera callsa de mortalidad. De acuerdo con las propias estadsticas oficiales. estas afecciones ocasionan alrededor de 50.000
defunciones, anualmente. En diez ai'os la cifra superara ampliamente el
monto total de vctimas de la violencia poltica, en la dcada del 50, cuyo
recuerdo tanto conmueve a la opinin pblica.

En los barrios marginados de las ciudades y en las veredas campesinas,


las muertes de los nios por diarreas y vmitos constituyen uno de los fen-

35

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

menos ms corrientes. La desnutricin, la falta de agua potable y de letrinas,


la proliferacin de moscas y el desconocimiento de las mnimas normas de
higiene se combinan infernalmente para definir este cuadro desolador de la
salud, uno de los peores del mundo, aunque se diga lo contrario.
Desde el punto de vista del conocimiento terico y de las tcnicas sanitarias, el problema de estas enfermedades fue solucionado hace un siglo por
Pasteur y colaboradores. No nos estar demostrando este hecho con claridad meridiana, que el conocimiento cientfico es una condicin necesaria
pero no suficiente y mucho menos determinante en la solucin de los problemas de salud y en general en el bienestar de los pueblos?
No reflejar esta situacin el trasfondo de una estructura econmica y
poltica caduca y completamente inadecuada y refractaria a la aplicacin de
los avances cientficos y al progreso social en general?

36

SEGUNDA PARTE

El desarrollo de la Microbiologa
en el siglo xx

Introduccin
El intenso avance de la Microbiologa en este siglo no hubiese sido posible sin la labor pionera de aquellos cazadores de microbios cuyas principales cualidades fueron la curiosidad, la paciencia, la persistencia y la creatividad.
Como se dijo con anterioridad, la historia del hombre en relacin con los
microorganismos equivale al conocimiento y dominio gradual de esta fuerza
ecolgica. Abordar el desarrollo de la Microbiologa en este siglo es un tema
difcil y complejo. pues los principios bsicos de otras ciencias pasan a ser
esenciales para entender su avance; igualmente los descubrimientos en esta
rea se tornan fundamentales para otros campos del conocimiento y refuerzan nuestra conviccin de considerar a los microorganismos como los trabajadores annimos de la naturaleza.
En este aparte se pretende presentar una secuencia de algunos de los
principales sucesos cientficos ligados a la Microbiologa, ocurridos en lo
que ha transcurrido del siglo y que han contribuido a entender las bases de la
vicia y al mismo tiempo a ubicar esta rea del conocimiento en un lugar de
vanguardia. Se ha optado por organizar la informacin por perodos de 20
aos, a partir de 1900.

En los albores del siglo

xx

Los ltimos afias del siglo X1X correspondieron a una poca en la cual la
Microbiologa pas de la nilez a la adolescencia. Entre 1880 y 1900 quedaron sentadas las bases para el desarrollo posterior de esta ciencia.
Pasteur y Koch personificaban dos escuelas de pensamiento a las cuales
acudan estudiosos de todo el mundo y sus discpulos propalaron y enri-

Marina Snchez de Prager Fernando Marmo/ejo De /a Torre Ne/son Bravo Otero

quecieron sus ideas en Europa y toda Amrica. Presentemos un resumen del


avance en el conocimiento de la Microbiologa en los albores del siglo xx.
Se haba rebatido la teora de la generacin espontnea, demostrado la
naturaleza microbiana de los procesos de fermentacin, putrefaccin y enfermedad infecciosa y la especificidad metablica microbiana implcita en
dichas actividades.
Varios investigadores haban reconocido que las levaduras estn involucradas en los procesos de fermentacin; sin embargo, correspondi a Pasteur
clemostrar que la produccin de alcohol y cidos orgnicos por microorganismos estaba ligada al metabolismo bsico que permita la vida sin aire. Actualmente se conoce que mientras todas las formus de vida 111 ulticelulares, plantas y animales. rlependen del metabolismo aerbico. al igual que muchas bacterias del suelo y otros microorganismos. algunos tienen metabolismo anaerbico. y otros pueden vivir en cualquiera de las dos condiciones.
A pesar de la claridad de pensamiento que caracteriz a Pasteur, se convirti en el principal defensor de la teora vitalista, que sostena que as actividades qumicas que llevan a cabo los tejidos vivos no se podan realizar en
condiciones de laboratorio y categorizaba las reacciones como qumicas o
vitales. Segn l. los maravillosos cambios que tienen lugar en la transformacin del jugo de frutas en vino, eran vitales y slo podan realizarlos las
clulas vivas de levadura.
No obstante los grandes adelantos en qumica. esta controversia persisti
ha.sta fines del siglo, cuando los qumicos alemanes Edward y Hans Buchner
(1897) demostraron que una sustancia extrada de las clulas de levadura
poda producir fermentacin alcohlica fuera de la clula viva. A esta sustancia se le denomin enzima. de la palahra griega zyrne que significa
levadura o fermento. Se demostr as que una reaccin vital era qumica, y al
mismo tiempo se refut la teora vitalista. Este trabajo constituye un aporte
pionero en el campo de las enzimas.
Estos nuevos conocimientos permitieron que en dicha poca se emplearan cultivos puros de levaduras y bacterias para producir tipos especiales de
fermentaciones de valor industrial, por ejemplo, para la fabricacin comercial del vin3gre. la mantequilla y el queso. El uso de la tcnica de pasteurizacin permiti aislar microorganismos fermentan tes.
Las bases del concepto de los seres vivos constituidos por los mismos
componentes qumicos y fsicos de los entes inanimados y obedeciendo a las
mismas leyes qumicas y fsicas, quedaron sentadas en las postrimeras del
siglo XJX. sin embargo, sera en el transcurrir del siglo xx cuando se aceptaran terica y prcticamente, abriendo campo ilimitado a la investigacin.
Un sinnmero de investigadores desde diferentes reas del conocimiento, se dedicaron a estudiar los microorganismos como agentes causales de

38

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

enfermedades en el hombre. los animales y las plantas. y encontraron en


muchos casos respuestas afirmativas. La teora de los grmenes patgenos y
procedimientos para confirmarla se tornaron paradigmticos.
As como algunos de estos minsculos seres vivos generan enfermedades. tamhin en ellos se encuentra la alternativa de prevencin. a travs de la
vacunacin con microorganismos atenuados o muertos, o las antitoxinas correspondientes. En relacin con vacunas. adems de Jenner y Pasteur. recordemos a Emil von Behring y Shihasaburo Kitasato (1890), quienes con su
trabajo con los agentes causales de la difteria Corynebacterium diphteriae y
el ttano Closfridium tetani, idearon el mtodo para producir inmunidad
contra las infecciones causadas por estos organismos. mediante la inyeccin
ele sus toxinas (antgenos) 8n animales; en esta forma obtenan su antitoxina
(anticuerpo). Las reacciones antgeno-anticuerpo son sumamente importantes en el establecimiento de los principios de inmunidad y constituyen los
pilares de la moderna serologa o inmunologa. La obtencin y utilizacin de
las vacunas prob la respuesta inmune pero an quedaban por entender los
fundamentos de Bsta respuesta.
Con los avances tecnolgicos logrados y la disponibilidad de mejores
tcnicas, el trabajo de los cazadores de microbios se hizo ms eficiente: el
perfecciollmiento del microscopio compuesto. con lentes que amplifican
1.000 veces. fue fundamental; el microscopio ptico moderno es obra en su
mayor parte de Emest Abbe (1840-1905) quien mejor el sistema ptico e
introdujo el objetivo de inmersin y el condensador de Abbe (dehajo de la
platina); las tcnicas de aislamiento. cultivo y caracterizacin de los microorganismos incrementaron el conocimiento sobre la morfologa de bacterias.
hongos, protozoarios y algas, y permitieron vislumbrar la existencia de otros
organismos ms pequeos, los cuales fueron llamados virus filtrables; la
caja de Petri ideada por Richard J. Petri (1887). discpulo de Koch, la Tincin
de Christian Gram (1894), la invencin del autoclave y los filtros bacterianos
por Chamberland (1884). el uso del agar como agente solidificante y las tcnicas de cultivo puro de Koch, entre otros, conformaron un cmulo de experiencias y aportes que an persisten con pequefias modificaciones.
Los aportes visionarios. pioneros de la moderna quimioterapia sucedieron precisamente en las postrimeras del siglo XIX; la anestesia y su administracin a los pacientes a ser intervenidos. proviene de esa poca, igualmente
el uso de antispticos durante la ciruga, por Lister (1865-1869).
Los primeros estudios sobre microbiologa del suelo se efectuaron a finales del siglo XIX. Sergei N. Winogradsky (1856-1933) y Martinus W. Beijerinck (1851-1933), hicieron importantes aportes al elucidar el papel que desempean las hacterias del suelo en la fijacin de nitrgeno atmosfrico; adems, Beijerinck en 11388 realiz aislamientos de rizobios que desarrollan sim-

39

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

biosis con leguminosas, y de bacterias de vida libre como Azotobacter, ambos con la particularidad de fijar N2
A finales del siglo XIX, el clima intelectual en torno a la discusin sobre
el origen de las especies y su evolucin era un caldo de cultivo enriquecido;
las teoras de Jean Baptiste Lamarck, Charles Darwin y Alfred Russell Wallace constituan temas de controversia; igualmente, Malthus haba postulado
su hiptesis de crecimiento humano y alimentario. Se conocan los trabajos
de gentica de Mendel que arrojaban luces sobre la herencia; la Biologa,
Microbiologa, Qumica y Bioqumica, competan y ganaban un espacio que
revolucionara y enriquecera las ciencias de la vida, y se engrandeceran a
su vez con los logros en las dems reas del conocimiento.

Siglo XX: El siglo de la luz


1900 -1920

A comienzos del siglo se aceptaban plenamente los conceptos y teoras


de Mendel y sus estudios eran repetidos en forma independiente por Hugo
de Vries, Carl Corren s y Ernst van Tschermak; esto marc el inicio de la
Gentica como disciplina biolgica y permiti a Walter Sutton proponer formalmente en 1902 la teora cromosmica de Ja herencia, la cual sostena
que los factores hereditarios o genes residan en los cromosomas del ncleo.
La evidencia que sustent esta teora fue acopiada por varios investigadores
en los aos que siguieron, hasta lograr su plena aceptacin en 1916. A este
avance contribuyeron varios genetistas bajo la direccin de Thomas Hunt
Morgan en la Universidad de Columbia, quienes demostraron, utilizando la
mosca de la fruta Drosophila melanogasteI; que la transmisin de ciertos
genes era paralela a la del cromosoma que los contena. El nacimiento del
siglo tambin se caracteriz por especial atencin al conocimiento de aquellas entidades a cuyo misterioso mundo abrieron la senda Adolf Mayer,
Iwanowsky y Martinus W. Beijerinck: los virus.
El afn por establecer la relacin entre los mosquitos y la fiebre amarilla
llev a Jesse Lazear, colaborador de Walter Reed, a convertirse en conejillo
de indias y entregar su vida para probar la hiptesis del desordenado, y para
muchos chiflado, Carlos Finlay, quien hacia 1900 sostena que esta enfermedad era causada por efecto de la picadura de un mosquito.
Aunque Walter Reed, quien haba llegado de Washington a Cuba con rdenes de dedicar atencin especial a las cuestiones relativas a la causa y
manera de prevenir la fiebre amarilla. lament lo sucedido a Lazear, pensaba que era necesario que algunos hombres murieran para salvar a otros hombres. Su trabajo lo llev a demostrar que un mosquito era el vector de la
enfermedad, en tanto que James Carrol, tambin colaborador suyo, despus
de superar un ataque de fiebre amarilla contrada experimentalmente, esta-

40

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

bleci que el agente causal de la enfermedad pasaba a travs de filtros de


porcelana a prueba de cualquier microbio visible, en las condiciones de la
poca. Quince aos despus Smith y Bonquet hallaran el mismo tipo de
relacin entre insectos y enfermedades virales de las plantas.
El premio Nobel fundado en 1895 para recompensar a las personas que
en el curso del ltimo ao hayan prestado los mayores servicios a la humanidad, segn frase testamentaria de su fundador Alfred Nobel, se convirti
en un estmulo para los hombres de ciencia y algunos microbilogos lo obtuvieron como reconocimiento a sus esfuerzos por ayudar a la humanidad a
comprender sus relaciones con el mundo microbiano.
Emil von Behring fue premiado en 1901 por su descubrimiento acerca de
la antitoxina diftrica y la introduccin de la llamada en ese momento, vacunacin activa o sueroterapia contra el peligroso Corynebacterium diphtheriae, agente causal de la difteria, consistente en la utilizacin teraputica de
sueros humanos o de animales, que posea un elevado ttulo de anticuerpos.
Ronald Ross (Nobel 1902) en sus estudios de la relacin mosquito-agente
causal del paludismo, logr describir el ciclo de vida del parsito en el cuerpo de las aves y proporcion la base para la identificacin del patgeno en
los humanos.
Robert Koch (Nobel1 905), mediante la aplicacin sistemtica de sus postulados, logr aclarar la etiologa de enfermedades tan graves como la tuberculosis en los humanos Mycobacterium tuberculosis. el carbn bacteriano o
ntrax de los bovinos Bacillus anthracis. entre otras.
Los estudios morfolgicos a nivel citolgico y tisular permitieron a Camilo Golgi y Santiago Ramn y Cajal. contribuir al conocimiento de la estructura fina del sistema nervioso; de paso llegaron al descubrimiento de
estructuras que luego se llamaron clulas de Golgi y aparato de Golgi. Los
dos ganaron el Nobel en 1906.
Los estudios llevados a cabo por Elie Metchnikoff acerca de la fagocitosis
en el endodermo del tubo digestivo. le permitieron desarrollar su teora de
que los fagocitos no slo digeran el alimento sino que se ocupaban de defender el organismo produciendo anticuerpos contra la infeccin por parsitos;
sta se convirti en la generadora de la controversia entre la teora celular y
la teora humoral de la inmunologa. La primera sostena que la respuesta
inmunolgica del organismo era mediada por una clula. el linfocito, y la
segunda asignaba la reaccin al anticuerpo, sustancia contenida en solucin
en el suero y otros humores del organismo. Metchnikoff comparti el Nobel
con Paul Ehrlich en 1908. Este ltimo se constituy en el fundador de la
quimioterapia moderna por su bsqueda de balas mgicas; su mayor xito
lo alcanz con el experimento del compuesto 606 o arsfenamina, empleada
para el tratamiento de la sfilis.
41

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

Por esta misma poca se registraron evidencias de la relacin entre la


actividad enzimtica de microorganismos (hongos y bacterias) y la sintomatologa de algunas enfermedades infecciosas de las plantas; se determin
que aquellas enzimas capaces de disolver los elementos de unin de las clulas vegetales (pectatos). inducan pudriciones blandas y otras alteraciones
caractersticas en los tejidos que atacaban.
En el campo de la qumica celular, Albrecht Kossel hizo valiosos aportes
con sus estudios acerca de las nuclenas (nucleoprotenas o cidos nucleicas) que ya haban sido descritas por Friedrich Miescher en 1871, al aislar
una sustancia cida de los ncleos de los leucocitos. As, Kossel inici el
estudio de la qumica de la herencia, al lograr identificar las bases purnicas
y pirimidnicas, al igual que una sustancia a la que dio el nombre de histona.
Gan el Nobel en 1910.
El carcter gentico o hereditario de la resistencia a enfermedades ocup
a otros investigadores como Biffen, quien en 1905 describi la herencia mendeliana y la resistencia a la roya en dos variedades de trigo y su progenie;
Orton por su parte, estableci la diferencia entre resistencia, escape y tolerancia a marchitamientos. La prdida de resistencia de algunas variedades
de plantas a infecciones microbianas permiti encontrar que ello se deba a
la habilidad de ciertos microorganismos para producir variantes morfolgicamentc indistinguibles dentro de sus especies, las cuales fueron denominadas razas fisiolgicas.
Las dos primeras dcadas de este siglo permitieron a otros cazadores de
microbios llegar a nuevos descubrimientos: la asociacin de protozoarios
con plantas de la familia Euphorbiaceae, la identificacin de uno de tales
organismos como agente causal de la malaria, el cual fue denominado Hoemamoebo loverani, actualmente Plasmodium sp, estudio que junto con el de
su papel en la transmisin de enfermedades le vali a Charles A. Laveran el
Nobel en 1907; los avances en aspectos de morfologa, clasificacin y mtodos de trabajo con nematodos fitoparsitos (cuya primera especie fue descubierta por Needham en 1743); los estudios de Charles Richet sobre anafilaxia
o reacciones alrgicas de carcter inmediato y generalizado como consecuencia de la administracin de determinadas sustancias antignicas o txicas, le
permiti al mencionado investigador obtener el Nobel en 1913. Los ensayos
preliminares en cultivo de tejidos, tcnica por medio de la cual Alexis Carrel
(Nobel 1912J logr mantener vivo durante varios aos un cultivo celular,
sentaron las bases para la ciruga cardiovascular y el trasplante de rganos.
El cultivo de tejidos facilit el desarrollo de estudios y experimentacin con
virus. Hacia 1919, Jules Bordet analiz, en colaboracin con su cuado Octave Gengou, el proceso biolgico denominado fijacin del complemento, el
cual es adicional al sistema de los anticuerpos y al activarse produce disrup-

42

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

cin de las membranas celulares y como consecuencia causa la destruccin


de clulas o Je microorganismos.
1920 - 1940

A mediados de la dcada del 20, F. Parker y R.N. Nye reprodujeron virus


usando con xito tcnicas de cultivo de tejidos; otros investigadores como
Emest Goodpasture utilizaron embriones de pollo (1931) para el cultivo de
otros virus, con lo cual facilitaron su estudio y lograron avances en la investigacin ele los mismos. En 1934 se inici la era del cultivo de tejidos, sus
aplicaciones permitieron el estudio de tumores producidos por Agrobocterium tumefociens.
Las investigaciones que apoyaban la afirmacin de que los genes estaban
formados por cidos nucleicos, pasaron por mucho tiempo desapercibidas
debido a que se pensaba que el ADN no poda ser el material hereditario. En
1928, Frederick Griffith realiz una curiosa observacin con dos cepas de la
bacteria Streptococcus plleumolliae: una cepa lisa (S), virulenta y letal la
cual, al ser inyectada en un ratn ocasionaba que desarrollara neumona y
muriera; la otra, una cepa rugosa (R), avirulenta.
Observ con gran sorpresa que cuando inyectaba una mezcla de clulas
S inactivadas por calor y clulas vivas de las cepas R, el ratn mora. Las
clulas S inactivas y las clulas R vivas no podan convertirse espontneamente en las clulas S vivas que se aislaban del ratn muerto. En las clulas
vivas R avirulentas tena que haber una sustancia capaz de convertirlas en
letales. Concluy que la capacidad de cambiar una clula avirulenta a una
forma gentica nueva, en este caso virulenta y estable, estaba en una molcula libre que era transferida de la bacteria donadora (S) a la receptora (R) y que
esta sustancia era la responsable de la herencia. A este proceso se le llam
Transformacin (Figura 8). Debieron transcurrir aproximadamente quince
aos, antes de tener respuestas a los interrogantes que plante este experimento.
Retomando el hilo de los acontecimientos en orden secuencial, en 1929,
un descubrimiento importante abon el camino de la quimioterapia: el bacterilogo escocs Alexander Fleming public acerca de la accin antibacteriana de cultivos de la especie fungosa PeniciJljum llototum la cual mataba a
la bacteria Staphylococcus aureus cuando el hongo contaminaba accidentalmente las placas de cultivo (Figura 9). En la dcada del 30, continuaron los
descubrimientos de agentes quimioteraputicos y a principios de la dcada
del 40 el microbilogo Selman Waksman registr varios microorganismos
del grupo de los actinomicetos con propiedades antibiticas, la estreptomicina producida por Streptomyces griseus lleg a ser la ms conocida. Los
antibiticos se conocieron desde mediados del siglo XIX, pero su uso clnico
43

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Olero

data de 1940, cuando la presin por el nmero de muertos en el campo de


batalla de la Segunda Guerra Mundial llev a los dirigentes a buscar alternativas, no a la guerra, sino al tratamiento de la infeccin de las heridas causadas por microorganismos patognicos.
Donadora

L--------,I
~formacin.

E;.I"' "-

~
ADN libre

.,

O ,.
Receptora

ADN bacteriano

l..--Tr_anSd_ucc_in---,1

GiSi~iJ>e

<e( O )

Plsmido

Conjugacin

Figura 8. Procesos de transformacin. conjugacin y fransduccin.

A finales de la dcada del 20, la observacin detallada de plantas que


presentaban anormalidades como achaparramientos, crecimiento excesivo,
tumores, etc., indujo a muchos investigadores a buscar desbalances en los
niveles de reguladores de crecimiento, Kurosawa en 1926 demostr que podan obtenerse plntulas de arroz excesivamente altas al ser tratadas con
filtrados del hongo Gibberella (Fusarum); en 1933 y 1934 Tanaka y Clayton
involucraron la presencia de toxinas, al encontrar que filtrados del hongo
Alternara y de la bacteria Pseudomonas labaci causaban manchas necrticas en frutos de pera y hojas de tabaco respectivamente. En 1939, Yabuta y
Hayashi demostraron que el componente activo del filtrado responsable de
la elongacin excesiva de las plntulas de arroz afectadas por el hongo Gbberella, era un regulador de crecimiento llamado giberelina.
En 1935, Wendell Stanley cristaliz el virus del mosaico del tabaco (TMV)
y demostr que estaba compuesto principalmente por protenas: al compro-

44

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Figura 9. AlItibiosis produ c ida por Ja bacteria


Bacillus sp sobre el hongo Rhizoctonia SoliJni.

barse la capacidad infectiva ele los cristales cuando se inoculaban en un hospedero, la controversia aC(~ rca de su carcter biticn se reanud con mayor
vigor. Por este descubrimiento S(, concedi a Stanley el premiu Nobe] de
Qumica en 1946.
En 1937 Frederick Bdwden y Norman Pirie, determinaron que el virus
del mosaico del tabaco (TMV) estaba compuesto de ARN y que otros virus
tenan ADN o ARN. Adems, concluyeron que los nicos componentes esenciales para el virus son una cubierta de protena que le sirve de proteccin y
el cido nucleico. Aproximadan18nte desde 1940, se ha aplicado exclusivamente el nomhre de virus a partculas de tamao muy pequelo y naturaleza
acelular, que slo infectan y se replican en el interior de las clulas del hospedero.
Los adelantos en materia de microscopa favorecieron el estudio de los
virus: en 1911 se invent el microscopio de fluorescencia y en 1929 Ernst
Ruska, formando parte del grupo de cientficos dirigido por Max Knoll yA.
Mathias en el Politcnico de Berln , desarroll los lentes electrnicos de
deflexin magntica ele corta distancia focal. En 1939 con base en este tra bajo, los Laboralorios Siomens y Halske de Berln lanzaron el primer mo delo comercial. Este iIlstrumento fue utilizado ese mismo ao por Kausche
y colaboradores plra observar partculas virales , y encontrar que estas pequeas entidades prAselltan diversidad de aspectos. Se cuenta ya en esta
poca con tcnicas de separacin de molculas mediante centrifugacin y
electrofresis.
45

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmo/ejo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

Los adelantos de estas dos dcadas permitieron a los investigadores plantearse interrogantes ::>obre los mecanismo::> de la herencia: cmo se transmiten los caracteres do una generacin a otra y cmo los cambios del material
hereditario se expresan en los organismos. Los genetistas empezaron a explorar la ndole del gen, su estructura, composicin, propiedades y papel en
la qumica interna de los organismos vivos.
1940 - 1960

En 1940, Max Dclbrck y Salvarlor Luria, emprendieron estudios con


bacterifagos, concentrando su investigacin en un grupo de siete virus,
emparentados entrA s, que atacaban a la bacteria Escherichia coN, habitante
normal del intestino humano. Estos, fueron enumerados Tl a T7; el anlisis
qumico ele ellos revel que sencillamente consisten de ADN y protena, las
dos principales molculas, contendientes en la dcada del 40 para hacer el
papel de material gentico. Los genes virales, material hereditario por el cual
se forman nuevos virus dentro de la clula bacteriana tenan que estar en la
protena o en el ADN. Si se pudiese determinar en cul de los dos estaba. se
identificara qumicamente el gen.
Hacia 1941. George Beacl.le y Edward Tatum publicaron los resultados de
sus estudios sobre el control gentico de las reacciones bioqumicas en el
hongo Neurospora. Valindose de rayos X para incrementar la tasa de mutaciones, analizaron los mutantes y sus rutas metablicas. Se comprob que
varias mutaciones afectaban la actividad de determinadas enzimas, lo cual
los llev a afirmar que la mutacin que ocurre en un gen se puede correlacionar con la prdida de la funcill1 de una enzima. Basndose en estos experimentos. lo quo les mereci el Nobel, formularon la hiptesis de que cada gen
es responsable de la produccin de una enzima.
En 1943 .T. Avery y sus colaboradores, basndose en los experimentos
de transformacin q uo haba realizado Griffith con neumococos, tomaron los
extractos celulares de las bacterias transformadas. destruyeron selectivamente
sus molculas componentes, una tras otra, y demostraron que el ingrediente
activo que converta bacterias avirulentas en virulentas, era el ADN y que
adems esta molcula poda autoduplicarse, o sea, que se poda obtener de
los descendientes transformados, mucho ms AON con la misma capacidad
de transformacin.
Durante muchos aos, se pens que las bacterias se reproducan solamente por fisin binaria. No se posea ninguna prueba de reproduccin sexual
entre ellas hasta 1947, cuando J. Lederberg y E.L. Tatum obtuvieron evidencias inel irectas de que E. coli pod a rcprod ucirse sexualmente: algunos aos
despus se observ al microscopio el apareamiento en esta bacteria. A este
fenmeno se le denomin conjugacin. La primera descripcin del proceso
se hizo en la cepa K-12 de E. eolio
46

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Hoy se conoce que en este sistema, la diferenciacin sexual y la capacidad


de conjugacin dependen de la presencia intracelular de un elemento gentico extracromosmico que se llam factor sexual o de fertilidad (FJ, conocido como plsmido r o plsmido conjugante.
En 1952 los genetistas A.D. Hershey y Martin Chase hicieron una serie de
experimentos con virus, los cuales aportaron evidencias adicionales de que
el ADN era el material hereditario bsico. Ellos demostraron que los bacterifagos logran reproducirse mediante la inyeccin de su ADN en las clulas
bacterianas, dejando la mayor parte de su protena en el exterior. Estos resultados evidenciaron toda la importancia del ADN en la multiplicacin de los
bacterifagos y, para muchos fue el experimento decisivo para concluir que
ste era el material gentico.
En contraposicin a los sistemas de transferencia gentica bacteriana descritos anteriormente, que requieren el contacto clula-clula o la captacin
celular del ADN desnudo (en los casos de la conjugacin y transformacin,
respectivamente), en 1952 se demostr la transferencia de material gentico
mediada por bacterifagos. Se le llam transduccin, la cual se produce como
resultado de la infeccin de una bacteria por una partcula viral que contiene
por error ADN bacteriano. Actualmente se conoce una serie de virus capaces
de transducir ADN bacteriano, denominados fagos transductores; adems se
han ohservado transducciones en un grupo restringido pero variado de gneros bacterianos, por ejemplo Escherichia, SalmonelJa, Shigella, Pseudomonas, Proteus, Bacil1us, Klebsiella y Staphijococcus, entre otros.
El conocimiento de que los genes consisten en ADN y que las protenas
especficas son producidas por genes especficos, permiti que se formulara
una primera hiptesis que los relacionaba directamente, la cual sostena que
el ADN sirve de molde para la produccin ele protenas, pero sencillamente
en ese momento del conocimiento no haba manera de hacer concordar una
cadena de protena con una cadona molde de ADN.
El acontecimiento que abri el camino a la gentica molecular ocurri en
1953. cuando James Watson y Francis Crick. propusieron la estructura de la

doble espiral para el ADN; esto permiti aclarar la forma en que la informacin gentica es almacenada y expresada. El modelo propuesto sirvi para
sentar las bases del entendimiento de cmo la gran cantidad de informacin
gentica de las clulas puede ser usada para dirigir la sntesis de otras macromolculas involucradas en las funciones celulares. Estos investigadores
dedujeron que el ADN no tiene estructura helicoidal de una sola cadena,
como las protenas, sino una doble hlice entrelazada, de extraordinaria longitud. cuya columna vertebral consiste en grupos alternantes de azcares y
fosfatos, en cuyo interior cuatro bases nitrogenadas deletrean el mensaje gentico.
47

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo O/ero

En 1957, A. Isaacs y J. Lindenmann obtuvieron una protena de bajo peso


molecular, producida por las clulas de los animales vertebrados al ser parasitados por un virus. Dicha protena los haca resistentes a otras invasiones
vricas, gracias a un mecanismo de competencia enzimtica. Fue denominada interfern; al parecer su accin consiste en inhibir la sntesis del cido
nucleico viral. El estudio de esta sustancia abri el camino para la investigacin de la teraputica etiolgica de las enfermedades virales, entre ellas el
cncer.
En 1958, George Beadle, Edward Tatum y Joshua Lederberg, compartieron el Nobel por sus investigaciones en gentica microbiana.
En 1959, Severo Ochoa y Kornberg, obtuvieron por sntesis los cidos
nucleicos ADN y ARN; logro que proyect el pensamiento cientfico hacia la
manipulacin del material gentico de los organismos. Se les premi con el
Nobel de ese ai'o.
Con el establecimiento de la naturaleza estructural y bioqumica del material gentico de las clulas, se lleg al momento de unificar criterios entre
la gentica microbiana y el metabolismo bioqumico.
En los primeros aos del uso de antibiticos, se observ que mediante
mutaciones cromosmicas espontneas, las bacterias podan tornarse resistentes a ellos. En una de cada diez millones de clulas de una poblacin, se
produce dicha mutacin, la cual se traduce en resistencia a un antibitico en
particular o a una determinada clase qumica de antibiticos. Este tipo de
resistencia se convirti en un obstculo muy importante para la quimioterapia, el cual se superaba mediante tratamientos combinados con distintos
compuestos. En 1959, Tsutoma Watanabe y Naomi Datta, cientficos japoneses observaron un gran nmero de cepas bacterianas resistentes, que soportaban la accin conjunta de cuatro o ms antibiticos qumicamente distintos. Igualmente encontraron que esta resistencia se situaba en elementos extracromosmicos del ADN y era transferible genticamente entre bacterias
diferentes. A estos elementos extracromosmicos responsables se les denomin p!smidos de drogo-resistencia o plsmidos R. Como se dijo anteriormente, ya se haba reseado un elemento de esta naturaleza y era llamado
plsmido F, ligado a la transferencia por conjugacin de ADN. Los plsmidos R se han aislado en todo el mundo, y aparentemente son los responsables de la mayor parte de la resistencia bacteriana a los antibiticos. Por
considerarlo de gran inters, en el Cuadro 1 se incluyen caracteres situados
en plsmidos bacterianos. Se describi tambin por la misma poca la resistencia de hongos fitopatgenos a algunos fungicidas protectores. Actualmente,
el aumento de la resistencia de los patgenos a la accin de los antibiticos
constituye una gran preocupacin mundial.
48

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES


CUADRO 1. FUNCIONES r-ENOTPICAS y RESISTENCIA A AGENTES ANTIMICROBIANOS,
ESPECIFICADAS POR PLAsMIDOS.

Funciones fenotpicas

Replicacin autnoma*
Incompatibilidad*
Funciones ele conjugacin (genes de transferencia)
Exclusin de entrada
Resistencia a antibiticos (por ejemplo, estreptomicina, ampicilina. tetraciclina,
sulfonamiuas y cloramfenicol)
Resistencia a metales pesados (por ejemplo, Cd, Hg, Pb, Co y Ni divalentes)
Resistencia a luz ultravioleta
Resistencia a fagos p.specficos (por ejemplo, Tl, A.l
Restriccin y modificacin de DNA (por ejemplo, sistema EcoRl)
Produccin ue bacteriosinas (por ejemplo, colicinas E, V, K Y B)
Produccin ele toxinas (por ejemplo, enterotoxina)
Produccin de fa .. tores que aumentan la virulencia y de antgenos celulares ue
superficie (por ejemplo, antgeno K8S, ele formacin de tumores en la enfermedad agalla de la corona de las plantas)
Formacin de vaellolas de gas (por ejemplo, ciertas halobacterias)
Produccin de hemolisina, coagulasa o H 2 S
Catabolismo de substrato (por ejemplo, degradacin de octano, o naftaleno, o
fermentacin de lactosa o sacarosa)
Sistemas o sistemas de recombinacin especializados (por ejemplo, determinante RTF-r de disociacin-asociacin, y transposicin de resistencia a medicamentos)
Resistencia a agentes anlimicrobianos
Amikacina
Cefalosporinas
Cloramfenicol
Clindamicina-lincomicina
Eritromicina
Acido fusdico
Centamicina
Kanamicina
Liviclomicina

Neomicina
Penicilinas
Espectimicina
Estreptomicina
Tobramicina
Sulfonamidas
Tetraciclinas
Trimetropim

Nota: Las dos funciones sealadas con asteriscos son comunes a todos los plsmidos.

1960 -1980

Estas dos dcadas abarcan lo que se ha considerado como la tercera etapa


en el conocimiento de los cidos nucleicos, partiendo de su descubrimiento,
estudio de las mutaciones, reconocimiento y comprensin del papel de los
plsmidos, descripcin de la estructura molecular de los cidos nucIeicos y
49

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

su sntesis en el laboratorio, hasta llegar al aislamiento e identificacin de


las nucleasas de restriccin y la secuenciacin de virus, como se ver ms
adelante.
Entre 1960 y 1962, Francis Jacob y Jacques Monod descubrieron el mARN;
encontraron que ste funciona como un pequeo cdigo gentico; propusieron la teora del Opern, la cual explic cmo la informacin gentica
controla la sntesis de protenas. El Opern es un grupo de genes estructurales, es decir genes que codifican protenas, a menudo enzimas, que trabajan
en forma secuencial en una va de reaccin particular. Los elementos genticos de este modelo son un gen regulador, un gen operador y un conjunto de
genes estructurales.
En 1962, los estudios en biologa molecular fueron estimulados con trabajos como la sntesis in vitro del ARN, llevada a cabo por Chamberlain y
Berg, empleando una ARN-polimerasa obtenida de E. coli pero bajo <da direccin del ADN.
El trabajo sobre la estructura molecular de los cidos nucleicos y su significado para la transmisin de informacin en la materia viva, permiti a
F.H. Crick, M.H.F. Wilkins y J.D. Watson recibir el Nobel de Medicina y Fisiologa en 1962.
A travs de estudios sobre la relacin hospedante-agente patgeno, Muller estableci en 1961 que la resistencia de las plantas a las enfermedades
es, a menudo, producida por fitoalexinas, lo cual fue confirmado y ampliado
por Cruickshank en 1963. Las fitoalexinas son metabolitos antimicrobianos
que se encuentran en niveles no detectables o ausentes en plantas sanas,
pero que se acumulan en niveles altos como resultado del estmulo causado
por organismos fitopatgenos.
Respecto a resistencia de las plantas a los patgenos, Vanderplank sugiri en 1963, la existencia de dos tipos: uno controlado por unos pocos genes
mayores, que es fuerte pero est dirigida a una raza especfica del patgeno; llamada resistencia vertical u oligognica; el otro tipo es determinado
por muchos genes menores, es ms dbil, pero efectiva contra todas las
razas de una especie patognica; se denomina resistencia horizontal, polignica o multignica.
Hacia 1964 se demostr que cuando aparecen mutaciones en un gen, el
orden de dichas mutaciones corresponde a cambios en el orden de los aminocidos de la(s) protena(s) codificada(s). El cdigo gentico fue descifrado
completamente en 1966.
En agosto de 1967, en la ciudad alemana de Marburgo, en los laboratorios
Behring Works, donde se realizaban experimentos con monos salvajes capturados en la frontera entre Zaire y Uganda en las cercanas del Monte Elgn,
el encargado de limpiar las jaulas muri repentinamente vctima de hemo-

50

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

rragia interna. Otras siete personas, de 31 contagiadas, murieron con los mismos sntomas. La causa se asoci con un virus que se design como virus
Marburgo (que es un filovirus, llamado as por su peculiar forma alargada).
Las investigaciones realizadas por R.W. Holley; H.G. Khorana y M.W.
Niremberg al interpretar el cdigo gentico y la relacin funcional entre la
estructura de los cidos nucleicos y las protenas, condujeron a estos cientficos a alcanzar el Nobel en 1968. De la misma manera fueron premiados en
1969 Max Delbruck, Alfred Hershey y Salvador Luria por sus estudios acerca
de la estructura gentica y los mecanismos de reproduccin de los virus,
especialmente bacterifagos: ellos encontraron que el cido nucleico viral
codifica la secuencia reproductora de los componentes virales dentro de la
clula del hospedante.
En 1970 Hamilton Smith descubri la primera nucleasa de restriccin,
una enzima que corta el ADN en cierto punto de una secuencia nucletida
especfica. En ese mismo ao, la comprensin y manejo de la gentica bacteriana y los avances logrados en biologa molecular, permitieron a Harold
Boyer y Stanley Cohen realizar ensayos de ingeniera gentica que condujeron a la obtencin de clones de genes, logrando la creacin de nuevos
micioorganismos. Su trahajo consisti en insertar genes extraos en un plsmido y luego introducirlos en bacterias, las cuales clonaron, es decir, multiplicaron el plsmido y el ADN extrai'io dentro de ellas.
En 1971 se conoci la existencia de una nueva entidad infecciosa a la
CUJl Diener llam viroide. Los viroides son un grupo interesante de agentes
infecciosos constituidos por un pequeo fragmento de ARN que no est asociado con ninguna envoltura protenica. El viroide mejor estudiado es el sealado por Diener como agente causal de la enfermedad tubrculo ahusado
o alargado de la papa -PSTV-. El ARN de este agente tiene 359 nucletidos
(casi el 10% del tamao del virus ms pequeo conocido), y sin embargo, es
altamente infeccioso. Es resistente a las nucleasas, lo cual se debe a que su
ARN es circular y principalmente, de doble cadena.
En el campo de la inmunologa, las investigaciones dirigidas a dilucidar
la estructura de las inmunoglobulinas (anticuerpos) y los caracteres genticos involucrados en la respuesta inmunitaria, hicieron merecedores del Nobel
de 1972 a los inmunlogos G.M. Edelman y R. Portero
Los avances tecnolgicos logrados en la Fsica se convirtieron en herramientas valiosas para los investigadores en biologa molecular e ingeniera
gentica. Por ejemplo, el proceso de centrifugacin diferencial permiti a A.
Claude el aislamiento de estructuras celulares, siendo la primera persona en
ver partculas virales de cncer en clulas tumorales. Mediante ese mismo
proceso fsico, en equipo con G.E. Palade y Ch.R. de Duve, lograron aislar los
microsomas, con lo cual proporcionaron un mtodo efectivo para el estudio
51

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

preciso de las actividades y funciones de las partculas citoplasmticas. Los


dos ltimos cientficos citados, ampliaron y perfeccionaron las tcnicas para
el anlisis bioqu
y sus componentes. lo e
a sus descubrimi
con ribosomas y lisosonl
partieron el
!:gracin ele estos avances i-l
a una nueva rc:d
aplicada que estimul
muchas complfl
Durante la dcada de los setenta se enriqueci el potencial de la serologa
con I1lwvas tcnicas para detectar e identificar agentes patgenos en el hombre, los animales y las plantas, mediante la introduccin de procedimientos
relacionados con inmunoabsorcin: el llamado lTlicroscopa electrnica serolgiclmente especfica o microscopa electrnica de inmunoabsorcin
(lSEM) que fue
por Dnrrick en 1973, y hacia 1970, con
pruebas exploral
losas realizadas en el ~
I
Comparative Med
y M.E Clark describ
cin del proced
llncllliagnstico Elisa (Enzyllle~li
nosorbent Assayl 1
11 cuantitativa de virus
diferentes variall
Isa, la ms usada en
la IltJmada Elisa doble sandwich (Das-Elisa) o puente de anticuerpos, la cual
es de Lipo indirecto.
En F)75 mediante tcnicas de ingeniera gentica se logr la clonacin
en bacterifagos de fragmentos de ADN de un gen de mamfero. Tambin se
obtuvo una clula hbrida por fusin de una clula del bazo, productora de
anticuerpos, con
tUlllor del mieloma que se
en forma autnomA,
rla tumorosa (hibridomaJ
cial para producir
id{:nlicos (monoclonales) en
da. El m i e l o m a l ,una neoplasia maligna
mticas de la mece!
ser de localizacin focal
co). o de localizacioll
el ms comn.
En el mismo ao, H.M. Temin, R. Dulbecca y D. Baltimore (NobeI1975),
dieron l conocer los resul tados de sus investigaciones acerca de los mecanismos a tfavs de los cuales los virus productores de tumores inducen transformaciones en los cidos nucleicos de las clulas que infectan, lo cual las
ucamente; sus observaciones
capacita para
bas que demoslraron 1
una enzima especfico
de virus ARN
mediante la cual
copia ADN a
umberg relativos a nuevos
Los descubr j
de origen y diseminacin de las enfermedades infecciosas, y de D.e. Gajdusek sobre la naturaleza viral ele algunas enfermedades neurolgicas, contri-

52

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

buyeron decisivamente a establecer el concepto de una enfermedad infecciosa producida por un virus, cuyo perodo de incubacin puede abarcar
entre diez y veinte aos. Los dos investigadores compartieron el Nobel de
Medicina y Fisiologa en 1976.
En 1976 se desat en el sur de Sudn, a 800 kilmetros del monte Elgn,
una epidemia que cobr centenares de vctimas. Esta epidemia comenz con
un empleado de una fbrica procesadora de algodn en la aldea de Nzara, el
cual muri a consecuencia de una fuerte hemorragia interna, contagiando a
otros tres compaeros que tambin fallecieron. La causa fue atribuida a un
filovirus asociado con el virus Marburgo y se llam Ebola Sudn. En septiembre del mismo ao, el virus se encontr en la zona de Bumma (Zaire) a
orillas del ro Ebola, y se propag en el hospital de Yambuku infectando a
mdicos y paramdicos. Se extendi as a 55 aldeas, muriendo alrededor de
300 personas. El virus se denomin Ebola Zaire.
Armin C. Braun, de la Universidad Rockefeller, demostr que los tumores formados en algunas plantas afectadas por la enfermedad agalla de corona se deben a la accin de la bacteria Agrobacterium tumefaciens. Sugiri que este procariota ejerce su efecto tumorgeno al inducir un cambio permanente en las clulas infectadas; esta conjetura se corrobor porque las
clulas de la planta y sus clulas hijas mantenan su comportamiento canceroso aunque no estuviera presente la bacteria.
Mary-Dell Chilton y sus colaboradores de la Universidad de Washington
demostraron que los genes involucrados en la afeccin agalla de corona
no son las bacterias en s, sino un gran plsmido denominado Ti. Cuando A.
tumefaciens infecta la planta introduce en sus clulas parte de su plsmido
Ti el cual es incorporado al ADN de la planta. La presencia del plsmido en
el cromosoma hospedante no slo conduce al crecimiento acelerado e incontrolado caracterstico de la enfermedad, sino tambin a la produccin de
algunas protenas inusuales que cumplen dos funciones: aportan nutrientes
para las clulas de la bacteria y promueven la conjugacin entre ellas, favoreciendo de esta manera la propagacin de los plsmidos inductores del tumor. Es as como A. tumefaciens utiliza su plsmido para aduearse del cromosoma de la clula hospedera y subvertir su economa celular en beneficio
del desarrollo bacteriano. Correspondi a Drumond en el mismo ao la demostracin de que el T-ADN incorporado es transcrito por la clula vegetal.
Actualmente se conoce la presencia en A. tumefaciens del plsmido Ti
(tumor inducing) y Ri (root inducing) en A. rhizogenes (Figura 10), que adems de ser responsables de su virulencia y de la induccin de hiperplasia e
hipertrofia celular, producen niveles elevados de la hormona de crecimiento
vegetal citocinina. Tambin, como resultado de la alteracin de su metabolismo, la clula vegetal infectada produce sustancias denominadas opinas,
53

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Figura 10. Manifesto cin del plsmido de A. rhizogen es en zanahoria Daucus carota.

derivados simples de aminocidos y cetocidos que constituyen el alimento


preferido de las bacterias.
Tambin en 1977 Sanger y sus colaboradores del Consejo de Investigaciones Mdicas de Cambridge, complementaron la secuenciacin de los 5.375
pares de bases del AON del fago <l> X 174. Se descubri igualmente el hecho
de que la mayora de los genes son hendidos. esto es, no constan de una
banda continua de AON. sino que son partidos en varios segmentos mediante AON no-gene. En este ao se complet el primer secuenciamiento de un
gen de un mamfero.
Hacia 1980 se determin la secuencia exacta de los 8.000 pares de bases
del virus del mosaico de la coliflor, cuyo genoma se encontr constituido por
un cromosoma circular de AON de doble cadena.
/980 - 2000

Los avances en la gentica moderna, el reconocimiento del genotipo y


fenotipo, (W.L. Johannsen, 1920). el establecimiento de la unidad y diversidad del mundo viviente, basada en la molcula de ADN, como cdigo unitario , el cual a travs de diferentes secuencias de nucletidos codifica diversos
mensajes y estos se traducen en diversidad biolgica; el conocimiento de las
propiedades fsicas y qumicas del ADN que permite el desdoblamiento de
54

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

esta molcula y separacin completa de sus dos bandas y la capacidad de


mezclar e hibridar molculas de ADN, podra asemejarse a una historia de
ciencia ficcin que se torn realidad.
En la medida que se ha profundizado en el conocimiento de la gentica
molecular, ha sido posible el desarrollo de procedimientos complejos para el
aislamiento, la manipulacin y la expresin del material gentico, dando
paso en esta forma a un campo nuevo de la ciencia denominado Ingeniera
Gentica o Tecnologa del ADN recombinante. En los ltimos veinte aos, la
tcnica ele hibridacin (fundamentada en las propiedades de aparear bases
de los cidos nucleicos) se ha constituido en una de las herramientas ms
poderosas para el estudio do muchos aspectos de la gentica molecular; permite conocer cun estrechamente relacionados estn dos organismos, as como
tambin la relacin entre un ADN y ARN dacios; purificar genes, ARN, y
acercarse l la respuesta de algunos interrogantes como: cuntos genes hay en
X y especies, cul es la longitud de ellos y establecer el mapa gentico de
los organismos, inclusive del hombre mismo.
La clonacin de genes constituye la base de la mayora de los procedimientos de ingeniera gentica. Los desarrollos del conocimiento, esenciales
para el avance actual de la ingeniera gentica, se registran en el Cuadro 2.

CUADRO 2. DES/\RROLLOS DEL CONOCIMIENTO, ESENCIALES PARA EL AVANCE ACTUAL


DE LA INGENIERA GENTICA.

Eventos
1.

Qumica del ADN: desarrollo de los


procedimientos para aislamiento, determinacin de las secuencias V sntesis
del AON.
.

2.

Enzimologa del ADN: descubrimiento de las endonucleasas de restriccin,


ADN ligasas y ADN polimerasa.

Observaciones complementarias

Las primeras endonucleasas de restriccin


fueron purificadas y aisladas de cepas K de
E. coli (1968). Hasta 1985 se haban cJasHicado y catalogado 355 de ellas. En los ltimos aos la lista crece diariamente.
En biologa molecular se utilizan dos ti pos
de Iigasas: la Iigasa de E. coli y la T4 ADN
ligasa obtenida del bacterifago T4 de E.
coli. Entre las ADN-polimerasas, algunas de
las ms usadas son: E. coli ADN-poJimerasa, fragmento Klenow de la AON polimerasa 1 de E. coli, T4 ADN polimerasa, Taq polimerasa obtenida de la bacteria Thermus
aquaticos y transcriptasa reversa.
55

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmo/ejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Eventos

Observaciones complementarias

3.

Replicacin del ADN: comprensin de


cmo tiene lugar la replicacin del
ADN y la importancia de los vectores
de ADN capaces de una replicacin
independiente.

4.

Plsmidos: descubrimiento ele los plsmidos y determinacin de mecanismos


mediante los cuales se replican los plsmidas.

5.

Bacterifagos temperados: comprensin de cmo se controla la replicacin,


as como la integracin en el ADN, de
los bacterifagos temperados.

6.

Transformacin: descubrimiento de los


mtodos para obtener ADN libre a partir de clulas.

7.

Enzimologa y qumica del ARN: comprensin de cmo trabajar con el ARN


mensajero, cmo se fabrica el mARN
eucaritico. la importancia del procesamiento elel ARN para la formacin
del mARN eucaritico maduro.

La investigacin en enzimologa ha evolucionado hasta el punto que existen enzimas


sintticas que cortan el ADN en los sitios
especficos en que lo hacen las enzimas
purificadoras de los microorganismos.

8.

Transcripcin inversa: el descubrimiento de la enzima Transcriptasa inversa de los retrovirus y su desarrollo


como medio para transcribir la formacin del mARN de nuevo en ADN.

Actualmente existen comercialmente dos


tipos diferentes de transcriptasa inversa:
uno que proviene del virus de mieloblastosis de ave (AMVJ, purificada de partculas
de un retrovirus de ave. y otro, del virus de
la leucemia del Moloney ele raln, clonada
en E. eoli.

9.

Regulacin: comprensin de los factores que partici pan en la regulacin de


la transcripcin incluyendo el descubrimiento de los sitios promotores y el
control del opern.

Opern: conjunto de genes relacionados por


su funcin, cuya expresin est controlada
por un solo operador.

Las tcnicas de ingeniera gentica han hecho posible la construccin en el laboratorio de un nmero nuevo e ilimitado de plsmidos artificiales.

10. Traduccin: comprensin de los pasos

que participan en la traduccin, la importancia de los sitios de unin de ribosomas sobre el ARNm, la funcin del
codn de iniciacin y la importancia
de un marco de lectura adecuado.
11. Qumica protenica: desarrollo de los
mtodos para el aislamiento, la puriFicacin, las pruebas y la determinacin
de la secuencia de protenas.

56

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Eventos

Observaciones complementarias

12. Excrecin de protenas y modificacio-

nes postraduccionales: comprensin


de cmo se hacen las protenas consecuencias de seal que son eliminadas
durante o despus de la excrecin. Descubrimiento de otros tipos de modificaciones postraduccionales de prot.enas del tipo de la eliminacin de polipptidos en el extremo de iniciacin de
la protena.
13. El cdigo gentico: descubrimiento del
cdigo gentico y de que es el mismo
en todos los organismos. La comprensin de la importancia del marco de
lectura adecuado y de que ciertos codones eran empleados con menor frecuencia en algunos organismos que en
otros.

A finales de junio de 2000 se ha informado


que alrededor del 97% del genoma humano ha sido decodificado.

14. Modelacin: grandes avances en inge-

Han permitido el desarrollo de programas


computarizados y la modelacin como herramienta fundamental.

niera de sistemas.

(Tomado de Brock, Smith y Madigan, 1984; Madigan, Martinko y Parker, 1999; Umaa y G6mez, 2000,
con observaciones de los autores de esta lectura).

El descubrimiento de los plsmidos, su estructura y facilidad de aislamiento, los ha convertido en una poderosa herramienta de la tecnologa del
ADN recombinante, ya que en ellos se pueden insertar genes nuevos, provenientes de otras especies y el plsmido modificado puede ser reintroducido
en una clula hospedera normal, para que sea replicado, transcrito y d lugar
a la fabricacin de protenas codificadas por el gene introducido artificialmente. Adems de los plsmidos, se cuenta actualmente con vectores basados en los bacterifagos lambda (A) y M13, entre otros. Se ha construido una
tercera clase de vector, los denominados csmidos, que combinan las propiedades de plsmidos y fugas.
Los hospederos ms tiles para la clonacin son aquellos microorganismos que proliferan bien y de los que se cuenta con gran cantidad de informacin gentica, como es el caso de Eseheriehia eoli, Bacillus subtilis y la levadura Saeeharomyces eerevisiae. Tambin la clonacin de genes puede llevarse a cabo en clulas animales y vegetales.
Algunos de los descubrimientos ms importantes de la gentica molecular en los ltimos diez al10s se han hecho empleando tcnicas de ingeniera

57

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Olero

gentica. En cuanto a la investigacin aplicada, la ingeniera gentica ha permitido el desarrollo de cultivos microbianos capaces de producir, en masa,
metabolitos de gran importancia. La primera protena humana que fue producida comercialmente en las bacterias fue la insulina, para el tratamiento
de la diabetes. Algunos ejemplos de genes de mamferos que han sido expresados en bacterias, se presentan en el Cuadro 3, igualmente especies de gneros bacterianos en los cuales se han introducido genes para fijacin de N!.

CUADRO 3. ALGUNOS GENES BACTERIANOS Y DE MAMFEROS QUE HAN SIDO EXPRESADOS EN BACTERIAS.!I

Protena

Funcin

nterrern

Agente antiviraI, anticancergeno.

Insulina

Tratamiento de diabetes

Albmina srica

Aplicacin en transfusiones

Hormona de crecimiento

Defectos elel crecimiento

Urocinasa

Alteraciones de la coagulacin sangunea

Hormona parasiloidea

Regulacin del calcio

Virus humanos (hepatitis B,


citomegalovirus, influenza)

Vacunas

Virus animales (fieure aftosa)


nitrogenasa (Ingeniera gentica
en gneros Salmone/la, Escherichia
y Serratia)

Vacunas
Fijacin de N z

1/ Tomado de Brock, T.D. el al. 1984. p.430


Paul EA. and Clark, F.E. 1989. p.167

Hasta 1983 para una especie como Eseheriehia eoli, tal vez la ms estudiada en el mundo, se estimaba que su cromosoma circular tena algo ms de
3.000 genes, de los cuales para una cepa como la K 12, se conoca con precisin la localizacin relativa de 52 de ollas, y haban sido mapeados alrededor de 1.000. La longitud promedia de sus genes se estimaba en 1.300 pares
de bases(bp).
Hace ms de treinta aos, Brbara McClintock descubri los llamados
genes saltarines en clulas eucariotas vegetales. Estos elementos genticos
mviles se han encontrado en bacterias y eucariotas. En 1982, los bilogos
moleculares consiguieron extraer, de clulas cancerosas humanas, segmentos de ADN que transforman en clulas cancerosas a los fibroplastos de ratn
desarrollados en cultivo de tejidos. A tales segmentos se les denomina onco58

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

genes. Algunos de estos segmentos fueron clonados y las tcnicas de hibridacin revelaron que tambin existen en el ADN de las clulas humanas normales. Este descubrimiento sugiere que los cnceres podran deberse a cambios en la regulacin celular, introducidos por la transposicin de un gen
normal de un sitio a otro del genoma. Tales transposiciones podran ser inducidas por agentes externos como radiacin o mutgenos qumicos, por
virus que trasladan genes de un organismo a otro, o por acontecimientos
internos en la clula. La conjetura de genes recogidos por virus de una clula
eucaritica en algn punto de su historia evolutiva, para ser procesados y
pasados despus a otro hospedero (transduccin). es tema de debate.
Uno de los ejemplos a los que so acude en esta discusin, es al gen de la
leghemoglobina. la cual como su nombre lo sugiere pertenece a la familia de
la hemoglobina. Su rasgo inslito es que se produce en las leguminosas asociadas con bacterias (rizol1ios). con el fin de fijar y hacer disponible el nitrgeno atmosfrico. El ADN que codifica la leghemoglobina, posee todas las
caractersticas de un gen primitivo para globina. Hasta ahora la mejor explicacin de su presencia en las leguminosas es que fue trasladado all por un
virus procedente de un hospedero animal.
Vale la pena mencionar que hasta el momento. la nica recombinacin
gentica registrada, que ocurre naturalmente entre procariotas y eucariotas,
es la enfermedad en plantas llamada agallas de corona, cuyo agente causal
es A. tumefaciens.
Aunque no se ha terminado la discusin en torno a posible transposicin
de genes en forma natural en el caso de la simbiosis leguminosa-rizobios y
en otros ms. los grandes avances logrados en el conocimiento del gen ama
viral, bacteriano. de los protista y de los animales en las dcadas de 1970 y
1980. han trascendido al campo vegetal. El avance de la tecnologa del ADN
recombinante, ha permitido que actualmente se cuente con especies de plantas
transformadas genticamente.
Como parte esencial. en la ingeniera gentica de las plantas se requieren
vectores de clonacin de genes. Uno de los enfoques para resolver este problema ha sido el empleo de ADN de virus vegetales. ya que se conocen muchos de ellos que lo contienen. y se han estudiado virus con ADN tanto monocatenario como bicatenario. Los adelantos han sido obstaculizados por el
escaso conocimiento de los virus vegetales y por la lenta proliferacin de
cultivos de clulas vegetales. Otro enfoque ha sido la utilizacin de A. tumefaciens, aprovechando que su plsmido T.i se integra en el ADN de la planta
y su replicacin queda bajo control del vegelal. El plsmido Ti se emplea
como un vehculo para la introduccin de genes extraos en clulas vegetales y. puesto que puede proliferar tanto en las bacterias como en las plantas.
es muy promisorio para clonacin; se ha demostrado que los genes que se

59

Marina Snchez de Prager Fernando Marmolejo De la Torre Nelson Bravo Otero

colocan en esta forma en el genoma de la planta se transmiten sexualmente a


las siguientes generaciones, a travs de semillas, y tambin pueden propagarse asexualmente si se desea.
La utilizacin de tcnicas sensibles para separacin de molculas, tales
como la sedimentacin en gradientes de densidad de sacarosa, la electrofresis en gel poliacrylamida, la utilizacin de enzimas especficas para seleccionar molculas, unidas a los grandes avances en materia de microscopa,
permitieron identificar en 1982, a un nuevo agente infeccioso: el Prin (proteinaceous infectious partide), el cual est formado por una glucoprotena,
que contiene por lo menos 250 aminocidos de longitud, de los cuales Prusiner y colaboradores haban identificado hasta 1984 los primeros 15 aminocidos del grupo ami no. La aparente ausencia de cidos nudeicos que
codifiquen su estructura, ha planteado serios interrogantes sobre el paradigma ADN -> ARN -> protenas.
As como hasta el momento slo se han encontrado los viroides asociados con problemas en plantas, en el caso de los priones se han detectado
ligados a enfermedades en animales y en el hombre. Tal es el caso del prurito
lumbar (scrapie), una alteracin neurolgica en ovejas y cabras; la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, una rara demencia humana; el kur diagnosticado
en tribus de Nueva Guinea; el sndrome Gertstmenn-Strauser y aparentemente la enfermedad de Alzheimer.
Tambin en 1982 se hall una entidad similar a un viroide, de ARN corto
y circular de banda simple, que est presente dentro de algunos virus con
ARN, constituyen parte del material gentico de estos virus y forman una
asociacin obligatoria con ellos, se les denomin virusoide. Ni el virus ni el
virusoide se pueden multiplicar e infectar una planta en ausencia de su socio. En este ao igualmente, se determin completamente la secuencia de
bases del TMV, constituido por ARN de una sola banda.
Como se ha podido observar a travs de este recuento histrico, los estudios en biologa molecular de organismos eucariticos han sido guiados por
los conocimientos alcanzados en procariotas. La llamada revolucin biotecnolgica que recorre el mundo al finalizar el siglo xx, ha sido posible gracias
a largas, constantes y pacientes investigaciones bsicas sobre procariotas,
algunas veces aparentemente irrelevantes, pero con un profundo sentido de
oportunidad, hasta el punto que su acumulacin y concatenacin han permitido el rpido e intenso desarrollo en reas como la Bioqumica y la Biologa e Ingeniera Gentica, entre otras.
La identificacin de especies procariota y eucariota, mediante descriptores morfolgicos, fue complementada cuando surgieron los marcadores bioqumicos (isoenzimas) y al finalizar el siglo se dispone de una herramienta
fruto de la ingeniera gentica: se trata de los marcadores moleculares, los

60

MICROBIOLOGIA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

cuales permiten hacer mapeos genticos en forma ms rpida y menos costosa.


Los RFLPs (polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restriccin),
ADN- Fingerprinting (huella dactilar del ADN), la tcnica del PCR (reaccin
en cadena de la polimerasa) y los RAPDs (amplificacin aleatoria de ADN
polimrfico), son ejemplos de marcadores moleculares.
Como casos concretos de su utilizacin, se tienen: la deteccin del viroide del tubrculo ahusado de la papa PSTv. Su reconocimiento por electrofresis en geles de poliacrilamida es muy laboriosa y costosa. En 1990, mediante el conocimiento de la secuencia de bases de su ARN se logr su identificacin a travs de sondas PSTV cADN; mediante el uso de la tcnica de RAPDs
se ha demostrado la amplia diversidad gentica de ColJetotrichum lindemuthianum, agente causal de la antracnosis del frjol comn, en Colombia y en
Mesoamrica, e igualmente del patgeno de la mancha angular del frjol comn Phaeoisariopsis griseola en Amrica Latina. La tcnica PCR se ha empleado para la deteccin de patgenos en semillas como en el caso del agente
causal del aublo de halo Pseudomonas syringae pv phaseolicola en semillas de frjol.
Los registros anteriores constituyen unos pocos ejemplos tomados en
nuestro pas, del gran potencial de estas tcnicas en la deteccin y/o identificacin de patgenos de plantas como virus, hongos, nematodos. bacterias.
etc. Su uso, adems de tornar las actividades de diagnstico ms confiables,
permite la eliminacin de patgenos en cultivos de tejidos, a partir de materiales, donde era imposible detectarlos por mtodos tradicionales como plantas indicadoras y electroforesis. Fuera de ello. permite que se explore un
nuevo enfoque en el control de enfermedades en humanos. plantas y animales, en donde el nfasis lo constituye el conocimiento de los principios moleculares que propician el ataque de un patgeno y cmo contrarrestar a partir de all su accin.
En el plano de la ingeniera gentica, a partir de la dcada del 90 se presentan en Colombia trabajos sobre plantas transgnicas. como el que se resume a continuacin: Segmentos de hojas de Nicotiana tabacum fueron transformados con Agrobacterium tumefaciens, cepa EA 101 que contiene el plsmido pGV1040. Las plantas transgnicas regeneradas expresaron el gen GUS,
resistencia a kanamicina y al herbicida fosfinotricina ... .
En el plano de la salud, en octubre de 1994 los estadounidenses Alfred G.
Gilman y Martin Rodbell obtuvieron el Nobel de Medicina; su investigacin
ha demostrado la forma en que la toxina producida por la bacteria del clera
se une a una protena conocida como G (debido al mecanismo de unin con
el nucletido trifosfato de guanosina o GTP). y la deja como un semforo en
verde permanente, para impedir la absorcin del agua y la sal en el intestino,
61

Marina Sanchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son Bravo O/ero

produciendo una intensa diarrea lquida. Un mecanismo similar genera sntomas de infeccin con la bacteria E.eoli. El descubrimiento de varios tipos
de protenas G y la forma en que ayudan a las clulas a convertir las sei'iales
del ambiente y del interior del cuerpo en reacciones celulares, abre la puerta
a una nueva generacin de drogas, que solamente trabajen en la molcula
que se quiere y en ninguna otra molcula del cuerpo.
Estos descubrimientos se convierten en una esperanza para el tratamiento de enfermedades en humanos, sin embargo, al finalizar el siglo dos epidemias se ciernen sobre el mundo: una de ellas es el sida o aids registrada en
Estados Unidos en 1 981, cuyo agente causal, el virus HTLV III (HIV) fue identificado en 1983 por el equipo del profesor Robert Gallo. A partir de 1985 se
han efectuado esfuerzos infructuosos para encontrar vacuna para el virus
con base en la biologa molecular, lo cual llev a que en el Congreso Internacional sobre Sida en Berln, llevado a cabo en 1993, se impusiera como prioritario el regreso a la inmunologa. En enero de 1995 se detectaron clulas
inmunitarias en mujeres africanas resistentes al virus.
La segunda es el Ebola, ocasionada por un filovirus como se dijo anteriormente, del cual se han identificado cuatro miembros: el virus Marburgo, el
Ebola Sudn, Ebola Zaire (registrados en 1976 en los sitios que les confieren
sus nombres), y el Ebola Restan, encontrado en 1989 en Restan, a 15 kilmetros de Washington, en monos importados de Filipinas; all, ningn humano
fue contagiado, cosa muy diferente a lo sucedido en los otros casos.
En junio de 1995 se present un nuevo brote de Ebola Zaire, en Kikwi
(Zaire). poblacin que ha sido declarada en cuarentena, pues los muertos
pasan de cien. En este lugar mueren nueve de cada diez infectados, sin que
hasta el momento se conozcan cura ni tratamiento algunos para su prevencin y control.
En el 2000 los mapas establecidos mediante enzimas de restriccin, clonacin molecular de genes y secuenciacin de ADN son tcnicas de uso rutinario para los genetistas. Estos instrumentos han permitido que actualmente
se tenga prcticamente el mapa gentico de Eseheriehia eoli y de otros procariotas. La gentica y metabolismo de este microorganismo ha sido compendiada un el libro de Neidhart, et al, titulado E. coli and Salmonella: cellular
and molecular biology.
La biotecnologa se perfila hacia el tercer milenio en diferentes frentes,
uno de ellos es la aplicacin de la ingeniera gentica para crear nuevos microorganismos, capaces de producir sustancias especficas de alto valor industrial (vacunas, protenas de mamferos, etc.). vegetales y animales transgnicos. biotecnologa ambiental, regulacin gnica y terapia gnica.
A finales de junio de 2000 representantes del Proyecto Genoma Humano
(consorcio pblico internacional) y de Celera Genomics (empresa privada
62

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

dedicada a la investigacin gentica) anunciaron al mundo que el mapa gentico del hombre, llamado por algunos el libro de la vida estaba secuenciado casi en su totalidad (los anuncios variaron entre 89% y 97% Y se esperaba completarlo en los prximos dos aos.
Este hito, comparable al descubrimiento del interior del tomo a principios del siglo xx, plantea mltiples posibilidades, entre ellas, en un futuro,
el diagnstico, la prevencin y curacin de enfermedades mediante terapia
gnica. Para ello ser necesario completar la secuenciacin del gen ama humano, establecer la localizacin de los genes y su interaccin; avanzar en el
estudio de la relacin entre estructura y funcin de los genes y de las protenas correspondientes, y buscar la aplicacin de estos hallazgos a la medicina, ya sea corrigiendo o reemplazando los genes implicados en determinada
patologa, o c1isefiando frmacos que tengan en cuenta la composicin gentica de cada uno.
El siglo XX finaliza con un balance que hace pensar que en estos ltimos
cincuenta afios la humanidad ha avanzado a pasos agigantados en el conocimiento, proporcionando las bases fundamentadoras del conocimiento humano actual, posiblemente en la mayora de los campos del saber; sin embargo, los problemas de desigual ciad social. violencia, hambre y contaminacin
ambiental. entre otros, Hltes que ser solucionados se agudizan.
Al finalizar el siglo xx la humanidad acepta incrdula y al mismo tiempo
indiferente la existencia d(~ microorganismos, plantas y animales transgnicoso En este largo trasegar los microorganismos han jugado un papel trascendental, al convertirse en una herramienta de trabajo bsica para los investigadores, quienes les deben su eterno agradecimiento.
Una serie de alternativas a nivel del conocimiento sern reclamadas con
el fin de solucionar problemas vigentes al finalizar este siglo y con mayor
razn, en el tercer milenio. Dentro de esta perspectiva, la Microbiologa est
llamada a jugar papel crucial dentro de reas comprometidas con el bienestar humano como la salud, produccin de alimentos, generacin de energa
no contaminante, descontaminacin ambiental, utilizacin eficiente de los
agroecosistemas, etc.
En el plano de la salud, aunque en pases como Estados Unidos y en otros
del continente europeo en el ltimo siglo las enfermedades causadas por
microorganismos casi que se han erradicado, no se puede decir lo mismo de
los pases en vas de desarrollo, en donde estos avances tan valiosos para la
humanidad si no se hace una inversin importante en ciencia y tecnologa
pueden agudizar la brecha entre pases desarrollados y subdesarrollados, aumentando la dependencia.

63

CAPITULO II

Anatoma y morfologa microbianas


Con base en la conformacin de las clulas que los integran, los microorganismos se han agrupado en procariotas y eucariotas. Mediante la comparacin de las secuencias de ARN ribosmico 16S y 18S se ha logrado establecer
que a partir de un organismo ancestral comn evolucionaron tres linajes celulares. Dos de ellos: Bacteria y Archaea, con estructura procaritica y un
tercero: Eukarya, conformado por clulas eucariticas, en el cual se encuentran las algas (verdes, rojas, diatomeas. etc.), los hongos y los protozoos (Figura 1).
ANCESTRO UNIVERSAL

Eukarya
Di plomonaclas
Microsporidios
Tricomonadas
Flagelados
Ciliados
Hongos
Hongos mucosos
Entamebas

Methanosafcina
Mcthanobacterium
Methanococcus
Thermococcus ce/el'
Thermoproteus
Pyrodictium
Halfilas

Plantas
Animales

LEUCARIOTAS~

L -_ _ _ _ _

PROCARIOTAS - - - - - - - - '

Figura 1: \fisin global del rbol filogentico universal.

65

Hydrogenobacterias
Termotogales
DeinocoCClls
Cianobacterias
Proteobacterias
Planctomyces
Espiroquetas
Bacterias verdos
no sulfreas
Bacterias verdes sulfreas
Citofagas
Bacterias grampositivas

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

Los dos linajes procariotas permanecieron al nivel microbiano, mientras


que los microorganismos eucariticos constituyeron los antecesores de las
plantas y animales. Algunos orgnulos surgidos en estos ltimos -tales como
mitocondrias y cloroplastos- presentan relacin filogentica con las bacterias. As, las clulas eucariticas actuales, con sus orgnulos caractersticos,
seran el resultado de procesos endosimbiticos que sucedieron miles de
millones de aos despus que ocurriera la separacin de lneas de descendencia a partir del antepasado universal.

Tamao de los microorganismos


El tamao generalmente microscpico de los microorganismos (llmense
procariota o eucariota) constituye una do las caractersticas ms importantes
de estos seres vivos que los convierte en una fuerza ecolgica fundamental
en la naturaleza, ya que esto les significa el intercambio ms eficiente con su
medio ambiente, ocasionado por la alta relacin superficie/volumen que presentan. Veamos un ejemplo: si un microorganismo fuese esfrico y tuviese 1
micrmetro de radio, su superficie sera de 41t x 10 n y su volumen sera
41t/3 x 10- IB , lo cual llevara a una relacin superficie/volumen de 3 x 10",
representada en la cantidad de membrana disponible para transportar sustancias hacia afuera o adentro del microorganismo, que se va a traducir en
alta capacidad metablica y velocidad de desarrollo.
Si hacemos el mismo ejercicio plra un organismo que alcance un radio
de 1 m (10'i micrmetros), la relacin de estos dos parmetros slo alcanzara
a 3 y por lo tanto su mayor tamao le significara menor capacidad de intercambio con el medio que lo rodea.
Los microorganismos procariotas son unicelulares y los ms pequeos;
en ellos se halla una amplia variacin de tamaos; se encuentran formas tan
diminutas como las de algunos micoplasmas que alcanzan entre 0.2 a 0.3
micrones l de dimetro; Escherichia eoli, la bacteria habitante natural de nuestro intestino que mide aproximadamente 2jlm x 0.5jlm; Oseillatoria, cianoficea que alcanza 3711m x 5.25Ilm, cuyas masas filamentosas se pueden apreciar a simple vista en las aguas dulces. Los microorganismos eucariticos
generalmente son pluricelulares y de mayor tamao, aunque tambin los
hay unicelulares como la Saccharomyces cerevisiae microscpica levadura
y la sorprendente alga marina Caulerpa que alcanza entre 60 y 100 cm de
longitud, la cual, el pesar de estar conformada por una sola clula, consta de
una compleia estructura de filoides, cauloides y rizoides.
El Cuadro 1 y la Figura 2 presentan ejemplos de ambos grupos de microorganismos y los comparan con las organizaciones moleculares llamadas
1.

El tamao de los microorganismos se mide en micrones o micrmetros (~I) cuya equivalencia es de


10-3 mm.; nanmetros (10- 6 mm) y Angstroms (A). cuya unidad equivale a 10-9 mm.

66

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

(a)

,I

Figura 2. Tamao relotivo de microOlganismos tipo procariota y eucariota. a) Bacteria (100x); b) Hongo (40x); e) Hongo a
esco lo real: d) Pro/azoo (100x) ; e) Alga
(100x)

67

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

entidades, que pasan del plano microscpico al submicroscpico, las cuales


no pueden considerarse como organismos vivos; sin embargo, son de gran
importancia para la Microbiologa y las Ciencias Biolgicas en general. Dichas entidades son los virus, viroides, virusoides y priones.
CUADRO 1. ALGUNOS EJEMPLOS DE TAMAOS DE MICROORGANISMOS PROCARIOTAS,
ELJCARIOTAS y DE ENTIDADES.

Organismo

Dimetro

Longitud

Pasteurella tularensis

0,2 flm

0,3-0,7 11m

Brucella

0,3 flm

0,3-1,0 flm

Escherichia coli

0,4-07 flm

1,0-3,0 flm

Bacillus QllthmGs

1,0-1,3 flm

3,0-10,0 flm

StaphylococcLls aumus

0,8-1,0 flm

Stl'eptococcLls pyogenes

0,6-1,0 flm

Sal'cina ventriculi

3,5-4,0 flm

Picornavirus

17-30 nm

Arbovirus

20-100 nm

Papovavirus

40-55 nm

Adenovirus

65-85 nm

T.M.V. (Tabacco Mosaie Virus)

15nm

300 nm

E.S.M. V. (Barley Stripe Mosaie Virus)

20nm

130nm

P.V.X. (Potato Virus Xl

10-13 nm

480 nm

C.T. V. (Citrus Tristeza Virus)

10-13 nm

2000 nm

Viroides

250-400 nucletidos

Hongos (en general)

0,5->100 flm

Poeasllm-m

Fuente: Agrios, 1989. Carpenler, 1969; Pelczar y Reid, 1966.

Forma de los microorganismos


La forma de un microorganismo, aunque el ambiente puede modificarla,
influye en el comportamiento y estabilidad que presenta.
Las bacterias generalmente muestran formas caractersticas, aS: esfricas
u ovales (cocos), alargadas, en forma de bastn (bacilos), en forma de espiral
o helicoidal (espirilos o espiroquetas), y algunas con lados y esquinas en
ngulo recto. Por su parte, las cianobacterias pueden presentar formas esfricas, ovaladas, filamentosas, etc. A medida que se avanza en los estudios de
microorganismos eucariotas, la diversidad de formas y tamaos se hace an
ms compleja (Figura 3).
68

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

---- --

~--:;::.. -

../'

/"

,/

/~/

(d)

(e)

I
~

e
~

",

.... y

..

.-

...

,1

I I

\~

- .

.. ... .
r:
,..)
r.
.:
.
. ..: .. I.{.

.
....
.., .....

'-',;"

..

... ... - ....

w"

.J

'

Figura 3. Algunas formos comunes en los microorganismos. a) Bastn-Estreploboclo; b)


Helcoidal-Espirilo; cl F/alT//jn/nso -Algo y d) Esfrica (estreptococo)

Una determinarla forma en un microorganismo le puede significar ventaja ecolgica frente a otro. As, las formas esfricas como las de los cocos,
implican menor distorsin ante fenmenos de desecacin y en consecuencia, usualmente soportan mejor la deshidratacin que los bacilos o espirilos;
stos por su parte tienen mayor superficie expuesta por unidad de volumen
que los cocos y por tanto pueden tomar ms eficientemente los nutrimentos
del ambiente en el que se desarrollan.
Cuando las clulas microbianas se dividen, en algunos casos permanecen unidas unas con otras, formando arreglos caractersticos tanto del organismo como del tipo de divisin que han efectuado . As, cuando los cocos
se dividen en un solo plano vertical pueden separarse y conservar su individualidad, en cuyo caso se denominan micrococos; en otras ocasiones,
aunque la divisin ocurre de manera similar, las clulas hijas tienden a
permanecer unidas y presentarse en pares que se distinguen con el nombre

69

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Cocos

Bacilos

Planos de
divisin

Tipo de
arreglo

Tipo de
arreglo

Planos de
divisin
Diplococos

Diplabacilo

o ----+CD
Estreptococos

,\PIObaCilO
Ttradas

Estafilococos

*
Sarcinas

Figura 4. Arreglos y planos de divisin de cocos y bacilos (modificado de Brandao. 1992).

70

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

de diplococos, y en otras, forman cadenas que se designan estreptococos


(Figura 4).
Cuando hay tendencia de las clulas hijls a permanecer unidas pero con
divisin celular en dos o ms planos, los cocos aparecen formando grupos
irregulares, en muchas ocasiones de gran volumen, asemejndose a racimos
ele uvas y toman el nombre do estafilococos. En un nmero reducido de cocos, la divisin celular puede realizurse en dos o tres planos perpendiculares, formando grupos de cuatro, conocidos como ttradas, o en paquetes de
ocho clulas, conocidas como sarcinas (Figura 4).
Los bacilos siempre se dividen en un solo plano; cuando forman cadenas
de elos clulas se llaman diplobacilos. y cuando stas son largas, estreptobacilos (Figura 4).

Arquitectura de las clulas


Los componentes celulares pueden divirlirse en dos grupos: las estructuras invariables. esto es, que se encuentran en todas las clulas procariotas y
probablemente son esenciales para la vidi1. y las variables. que se hallan en
algunas pero no en torlas las clulas y seguramente participan en funciones
rns especializadas.
Las estructuras invariables de la clula incluyen la membrana celular o
membrana citoplasmtica. los ribosomas y el ncleo o la regin nuclear. Las
estructuras variables de la clula son la pared celular. mitocondrias, flagelos.
fimbrias o pelos. retculo endoplasmtico. cpsulas. desmosoma. cuerpos de
inclusin, endosporas. aparato de Golgi. plsmidos.
Estructuras invariables
Membrana celular

Una clula existe como unidad gracias a la presencia de la membrana


celular. membrana plasmtica o apoplasto. la cual exhibe propiedades como
la elasticidad. la resistencia mecnica y elctrica. la regeneracin y la permeabilidad selectiva que regulan el movimiento de materiales hacia y desde
la clula.
Esta membrana. cuyo grosor es de 7 a 9 nanmetros. se ha observado con
el microscopio electrnico como una lnea doble. muy fina y continua. Su
composicin qumica consiste en fosfolpidos y protenas; los Jpidos confieren alguna resistencia elctrica y permeabilidad l este tipo de molculas.
mientras que las protenas hacen que presenten baja tensin superficial y
elasticidad. Las clulas bacterianas con frecuencia poseen un solo tipo de
fosfolpido; por ejemplo. E. coli contiene 70% en peso de fosfatidil etanolamina. En la membrana citoplasmtica de los eucariotas. adems del anterior
se encuentran fosfatidilcolina. fosfatidilinositol y fosfatidilserina.
71

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Su organizacin molecular se ha explicado desde diferentes modelos;


uno de los ms aceptados es el del "mosaico fluido", el cual sostiene que la
membrana celular de los procariotas consiste en dobles capas de molculas
de fosfolpidos, con sus cabezas hidroflicas extendidas y sus colas hidrofbicas agrupadas hacia el interior formando un "emparedado molecular", que
posee protenas que sobresalen en una o ambas superficies. Las protenas
que permanecen en la superficie son denominadas perifricas y las que estn
inmersas o se extienden a travs de la bicapa se conocen como protenas
globulares o integrales (Figura 5).

Grupos
hidroflicos

Grupos

hidrofbicos
Protenas
integrales

Figura 5. Esquema que ilus/ra la conformacin de la membrana celular, segn modelo


del mosaico fluido de Singer y Nicholson (Adaptado de Curlis, 1985 y Garrahan y Rega.
1977).

Algunas de estas protenas actan como portadoras, acarreando molculas a travs de la membrana y otras son enzimas. Estas adoptan una orientacin definida dentro de la doble capa y las porciones que sobresalen a cada
lado tienen distintas composiciones de aminocidos y diferentes estructuras
terciarias.
Las dos caras de la membrana difieren en su composicin qumica. La faz
cito plasmtica se caracteriza por presentar molculas proteicas perifricas,
unidas a las protenas integrales, incluidas en la doble capa; mientras que la
faz exterior se distingue por presentar cortas cadenas de carbohidratos, unidas a las protenas integrales formando glicoprotenas, y a algunas de las
molculas de lpidos (glicolpidos). Estos, glicoprotenas y glicolpidos, son
puntos de anclaje para otras clulas, bacterias infecciosas, virus, hormonas,
toxinas, anticuerpos y muchas otras molculas que intervienen en procesos
de reconocimiento y la adhesin entre las clulas (Figura 6). El reciente co-

72

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Virus

,'-..
jf
~

Figura 6. Carbohidratos de la superficie celular que se unen qumicamente a protenas y


Jpidos, formando g/icoprotenas y glicolpidos. bsicos en fenmenos de reconocimiento
y adhesin entre clulas (Sharon y Lis, 1993).

nocimiento de estos compuestos ha permitido avanzar en el entendimiento


de la relacin patgeno-hospedero y en la generacin de nuevos frmacos
para el control de patgenos.
Esta conformacin de la membrana cel ular se encuentra tambin en las
clulas eucariotas. con la diferencia de que en estas ltimas se hacen presentes molculas de esteroles (colesterol y ergosterol) que intervienen en la estabilidad de la membrana y no se encuentran en procariotas. salvo algunas
excepciones. como es el caso de algunas bacterias -procariotas anaerobios
como las bacterias fototrficas- que poseen molculas similares a los esteroles. llamadas hopanoides.
La composicin lipdica de las membranas constituye una de las principales caractersticas que distinguen bacteria de archaea. En esta ltima. los
enlaces ter son responsables de la unin entre el glicerol y las cadenas laterales hidrofbicas, mientras que en bacteria y oukarya. son enlaces ster. Fuera
de ello. carecen de cidos grasos y en su lugar poseen cadenas laterales compuestas por unidades repetidas de isopreno.
Algunos fungicidas tienen la propiedad de alterar la biosntesis del ergosterol. principal esterol en los hongos superiores (Ascomycetos. Basidiomycetos y Deuteromycetos). En esta forma se desestabiliza la estructura de la
membrana citoplasmtica y se altera su permeabilidad y dems funciones.
conllevando a la muerte de la clula y del organismo.

73

Marina Snchez de Prager . Fernando Marmolejo De la Torre Nelson Bravo O/ero

Todas las membranas que se encuentran en una clula, incluso las que
rodean diversas organelas, poseen esta estructura bsica. Sin embargo, varan en las cantidades y tipos de lpidos, protenas y carbohidratos. Esto les
confiere caractersticas especficas, de acuerdo con la funcin que estn llamadas a cumplir.
La membrana citoplasmtica en los procariotas tiene gran importancia
funcional. pues adems de regular el paso ele sustancias en la clula es el
sitio donde se localizan varias enzimas, como por ejemplo citocromos, enzimas que participan en la sntesis de molculas complejas, tales como componentes de pared celular, y enzimas que intervienen en el transporte de
electrones y en la fosforilacin oxidativa. Tambin a partir de all se forman
intrusiones membranosas (mesosomas) que intervienen en procesos metablicos y de reproduccin, tales como la formacin de tabiques durante la fisin bacteriana.
Permeabilidad celular y transporte
Para que una sustancia entre o salga de una clula dehe atravesar la membrana citoplasmtica. Su composicin de doble capa, aparentemente, permite el fcil acceso do molculas hiclrofbicas y excluye gran cantidad de iones
y molculas hidroflicas esenciales para la vida de la clula. El CO 2 y el 02 que
no son polares, se disuelven en los lpiclos y difunden con facilidad a travs
de la membrana, mientras que la mayora do las molculas de importancia
biolgica poseen grupos funcionales polares, en consecuencia son hidroflicos, de manera que no difunden con libertad a travs de la doble capa lipdica, por lo cual la clula debe acudir a diferentes estrategias de transporte.

Tanto en clulas procariticas como en las eucariticas, el flujo molecular hacia el interior o afuera de la clula ocurre mediante difusin, transporte
pasivo, transporte activo y por translocacin de grupos y citosis.
La difusin y la smosis permiten que las molculas de una sustancia se
muevan desde regiones de mayor hacia las de menor concentracin. En esta
forma, cuando existe diferencia de concentracin de un soluto en cualquier
lado de la membrana, el agua se mueve para tratar de equilibrar tal concentracin en ambos lados o hasta que la fuerza de la presin impida mayor
flujo de agua.
La smosis, en las clulas microbianas como en cualquier otra clula,
puede ser desfavorable porque si la clula se encuentra en un medio en donde la concentracin de so lutos sea menor afuera de ella, el agua tender a
penetrar en la clula produciendo la expansin de su membrana, fenmeno
denominado turgencia. Esto es especialmente peligroso para las clulas microbianas que no poseen pared celular (protozoarios, zoosporas, amebas, etc),
en las cuales la excesiva turgencia puede hacer que la clula estalle. En sentido contrario, si la clula se encuentra en un medio cuya concentracin de

74

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

sol utas es mayor afuera de ella, el agua tender a salir de la clula causando
la contraccin del protoplasma o plasmlisis. Si esa condicin no se modifica la clula puede morir.
En el transporte pasivo, las sustancias atraviesan la membrana sin intervencin enzimtica y gasto energtico, aprovechando la diferencia de gradientes entre la parte externa e interna. Este transporte por difusin es facilitado por mecanismos como la existencia de pequeiios poros permanentes en
la membrana, originados por la estruct ura terciaria de algunas protenas integrales o por el movimiento de las molculas lipdicas que la constituyen. A
travs de ellos pueden difundir el ngua (la molcula polar ms pequea de
importancia biolgica) y otras molculas polares; su paso o no, es inversamente proporcional a su tamaiio. La membrana en este caso acta como un
tamiz. Adems. la mpidez de la difusin est determinada por el gradiente
de concentracin: a mayor gradiente ms rpido el movimiento.
Otro mecanismo lo representan las protenas integrales. que actan como
acarreadoras. transportando ()n ambas direcciones molculas que no pueden
atravesar la membrana por difusin. dodo su tamai'io o polaridad. Estas protenas son muy self'!ctivls, pueden aceptar una molcula y exr:luir otra casi
idntica. Se las ha denominado permeasas, y a diferencia de las enzimas no
producen necesariamente cambios qumicos en las molculas con las cuales
interactan. Algunas protenas portadoras slo acarrean sustancias a travs
de la membrana, si el gradiente de concentracin es favorable. Este transporte se conoce como difusin facilitada y permite el movimiento de molculas
de zonas con mayor concentracin a otras donde estn menos concentradas.
Otros portadores vencen el gradiente de concentracin, proceso que requiere gasto de energa por parte de la clula y se conoce como transporte
activo. En este proceso las sustancias no sufren cambios al pasar a travs de
la membrana. Uno de los sistemas ms importantes de este tipo de transporte
es el de la bomba Na+/K+ que mantiene los iones de Na+ en baja y los de K+ en
alta concentracin en el citoplasma, junto con un potencial elctrico negativo neto en el interior de la clula.
Los microorganismos poseen sistemas de transporte que involucran enzimas que son excretadas para degradar sustancias complejas a unidades
ms sencillas (metabolismo exocelularl, las cuales pueden ser movilizadas a
travs de la membrana para la sntesis celular.
Tambin puede ocurrir movimiento controlado desde y hacia la clula
mediante exocitosis o endocitosis, en las cuales las sustancias se transportan
en vacuolas constituidas por fragmentos de la membrana celular. La endocitosis de slidos se denomina fagocitosis, y la de molculas disueltas, pinocitoss; mientras que la eliminacin de gotas lquidas o pequeas partculas
slidas a travs de la membrana se llama cJasmocitosis. En las bacterias el
75

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

citoplasma es inmvil, por tanto no se observan corrientes citoplsmicas ni


movimiento mediante pseudpodos, tampoco endocitosis ni exocitosis.
Ribosomas
Pequeas partculas oscuras dentro del citoplasma, que forman parte del
mecanismo sintetizador de protenas de la clula. Su composicin es aproximadamente 60% de cido ribonucleico (ARN) y 40% de protena. Una clula procariota normal puede tener 10.000 o ms ribosomas dispersos en el
citoplasma; las clulas eucariticas poseen una cantidad mucho mayor y
estn unidas a un retculo endoplasmtico.

Existen diferencias significativas entre los ribosomas de las clulas procariotas y las eucariotas. Los microorganismos procariticos tienen ribosomas ligeramente ms pequeos y livianos que los eucariticos, caracterstica
que se expresa por su constante de sedimentacin (70S) en comparacin con
la de los eucariticos (80S). Las arquibacterias tienen valores ms altos de S.
El tamao de los ribosomas 70S y 80S se mide por unidades Svedberg
(S), que corresponde a la velocidad a la cual sedimentan cuando son sometidos a centrifugacin de alta velocidad o ultracentrifugacin.
Regin nuclear
El ncleo es la estructura que contiene el ADN de las clulas eucariticaso Visto al microscopio ptico, sin recurrir a tincin, apenas puede percibirse y se observa como un cuerpo ovalo esfrico, plido, suspendido en el
citoplasma, en el cual ocupa aproximadamente el 10% del volumen total de
la clula. Fue observado por primera vez por Robert Brown en 1831.

El ncleo en reposo est rodeado por una envoltura delicada, pero ntida
y bien definida, la membrana nuclear. la cual est formada de dos capas

concntricas perforadas a intervalos; esto permite que molculas seleccionadas sean transportadas activamente hacia y desde el citoplasma.
El ncleo tiene un lquido viscoso que no se tie, el jugo nuclear, y uno o
ms cuerpos esfricos refringentes, los nuclolos. Cuando se encuentra en
reposo, el ncleo presenta dos redes de filamentos intermedios: una de tales
redes (la lmina nuclear) sostiene la capa interna de la membrana nuclear, en
tanto que la otra red rodea la capa ms externa de la misma.
La lmina nuclear puede constituir lo que algunos autores llaman material cromtico, el cual se tie fuertemente mediante colorantes comunes debido a la tendencia de algunos de estos a reaccionar con los cidos nucleicos;
estos, a menudo, se encuentran combinados con protenas de naturaleza especial, denominadas nucleoprotenas.
El material cromtico en el ncleo en reposo contiene uno de los principales cidos nucleicos: el ADN (cido desoxirribonucleico). El otro cido
nucleico, ARN (cido ribonucleico), se encuentra tanto en el ncleo en repo-

76

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

so como en el citoplasma. Se ha demostrado tambin la presencia de ADN,


en pequeas cantidades, en organelas citoplsmicas como las mitocondrias,
los cloroplastos y los centrolos.
El ncleo se considera de suma importancia en la determinacin de la
estructura y funcionamiento de la clula. Si el ncleo se extirpa, mediante
microciruga, la clula degenera rpidamente hasta que muere. Los cidos
nucleicos, contenidos en gran parte en el ncleo, ejercen el control de las
actividades celulares, lo mismo que la transmisin de caractersticas celulares de una generacin a otra.
Cada molcula de ADN est empaquetada en un cromosoma separado; la
informacin gentica almacenada en los cromosomas de un organismo se
dice que constituye el genoma.
Se sabe que las bacterias y las cianobacterias no presentan ncleo propiamente dicho, sino la llamada regin nuclear, nucleoidal o nucleoide, la cual
cumple las funciones del ncleo, aunque el ADN no se encuentra contenido
dentro de una membrana limitante. Las clulas de algunas algas, hongos y de
ciertos animales inferiores poseen ms de un ncleo.
La industria qumica ha producido ciertos fungicidas cuyo modo de accin afecta la sntesis de ARN con efecto secundario sobre la sntesis de otras
macromolculas. Otros fungicidas alteran la sntesis de ADN al impedir la
incorporacin de la base Timina, en esta forma se interfiere la divisin celular (mitosis) y por tanto la reproduccin del organismo.
El nucleoide bacteriano o genforo
La presencia de ncleo en las bacterias ha sido motivo de controversia.
Algunos niegan la existencia de dicha estructura en ellas, otros la afirman en
forma categrica, en tanto que hay quienes sostienen la presencia de un ncleo difuso. No hay duda de que existe cierto tipo de estructura que contiene
ADN, de la cual depende la constitucin gentica de la clula, aunque ella
no corresponde en estructura y forma de duplicacin con el ncleo de los
organismos eucariticos.
El material gentico en los procariotas se localiza en la regin nucleoidal
o nucleoide. Al microscopio electrnico el nucleoide aparece como un rea
irregular y menos densa que el citoplasma que la circunda. Dependiendo de
la actividad de la clula, sta puede presentar uno o ms nucleoides, los
cuales contienen una copia del mismo ADN en donde estn localizados los
genes caractersticos de la especie. La molcula desnuda del ADN de doble
cadena no est ntimamente ligada a las protenas de los procariotas y en los
cortes de clulas aparece como una densa maraa fibrilar. En algunas archaea, el ADN cromosmico forma extensos complejos con protenas, en forma parecida a lo que ocurre con el cromosoma eucaritico.
77

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

La molcula de ADN tiene aproximadamente 2 nm de ancho y miles de


nanmetros de largo y su conformacin probablemente es circular en todas o
en la mayora de las especies. El plegamiento estrecho del ADN en el nueleoide compacto se debe a la unin del ADN con protenas y con ARN. No se
conoce el papel del ARN en la estabilidad del nucleoide pero se sabe que
algunas de las protenas que unen el ADN presentan alto contenido de aminocidos bsicos y que en algunas la composicin de estos es muy semejante
a las protenas de los cromosomas eucariticos. Se desconoce la funcin estructural que tienen las protenas en el plegamiento del ADN en el genoma
bacteriano.
Estructuras variables

Pared celular

Es la estructura que rodea la membrana citoplasmstica de casi todas las


clulas procariticas y de muchas eucariticas. Se considera una estructura
que protege a la clula contra los choques osmticos. Aquellos organismos
que no poseen pared celular presentan otros mecanismos para protegerse de
la presin osmtica.
La pared celular no restringe el flujo de molculas pequei1as hacia adentro o afuera de la membrana citoplasmtica, aunque los polmeros muy grandes no son capaces de pasar a travs de ella. Algunas enzimas secretadas por
la clula pueden quedar atrapadas en el peri plasma (espacio entre la pared
celular y la membrana citoplasmtica), el cual se considera una zona de gran
actividad enzimtica.

La pared celular bacteriana: En los procariotas la pared celular es normalmente rgida, lo cual le confiere la forma caracterstica de cada tipo en
particular. En casi todas las bacterias la pared celular contiene murena, tambin conocida como mucopptido o peptidoglucano, compuesto que no se
encuentra en eucariotas.
La murena o peptidoglicano consta de unidades repetidas alternativamente de aminoazcares N- acetilglucosamina, y cido N- acetilmurmico,
los cuales forman la porcin glucano de la molcula. Algunas de las unidades de cido N-acetilmurmico estn unidas con cadenas cortas de pptidos
compuestos por cuatro aminocidos. Algunos de estos, como el cido diaminopimlico, se encuentran en las bacterias y en ningn otro sistema biolgico. Todos los tetrapptidos incluyen a-alanina, cido D-glutmico, a-lisina o
cido diaminopimlico (D.A.P.) y D-alanina. La lisina se halla en las bacterias grampositivas y el cido diaminopimlico en las gramnegativas.
Las cadenas de tetrapptidos se enlazan mediante un puente peptdico
entre el grupo carboxilo en una cadena de tetrapptidos y el grupo amino de
un aminocido en la cadena de otro tetrapptido (Figura 7). En estos enlaces
7B

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

[MJ~[MJ

-[MJ
I

[MJ~[MJ
,/

@]

@]
@]
@]
@]
I
: ........
I
/
/
[MJ ....r+ [MJ
[MJ ~ [MJ
[MJ :.--.t-------:
/
"
I
@]
@]
@]
@]
@]
I
/
/
,/
/
CM] ~ [MJ
[MJ ~ lE]
[MJ
..... ,'-.....
/
/
/
@]
@]
@]
@]
@J
~':

Lisozima
Penicilina

Figura 7. Esquema de la estructura de la murena de la pared celuJar de las bacterias. G.


representa el azcar amiJlado acetil-glucosamina. y M. un compuesto similar denominado cido mllrmico. Las lineas quebradas que unen [l las cadenas paralelas de G y M
estn formadas por aminocidos. El nmero de estos "puentes" entre cadenas paralelas
varo con las especies. y tombin vara el tipo y el nLmero de los aminocidos de esos
puentes. La lnea punteada entre G y M indica el punto de ataque de la enzima lisozima
.1' el antibitico penicilina. La unir!ar! encerrada en un rectngulo de lneas punteadas,
representa aquella cuya incorporacin en la fabricacin de la pared celular es impedida
por la penicilina (PaJ/erolli, 1970. Madigan. Martinco y Parker, 1999).

cruzados, los cuales se denominan puentes, sucede la mayor variacin en


los peptidoglucanos. Estos enlaces pueden presentarse entre tetrapptidos
en diferentes cadenas o en cadenas adyacentes, de manera que el peptidoglucano forma una hoja rgida de varias capas.
El xito de un antibitico para controlar infecciones bacterianas radica
en su capacidad para romper las uniones cruzadas, lo cual induce la formacin de paredes celulares defectuosas y por tanto la muerte de las clulas. La
penicilina no tiene tal poder y no tiene cfecto sobre las bacterias que no
estn en crecimiento, en cambio la enzima lisozima rompe la porcin glucano en el enlace P(1.4) entre el N-acetilglucosamina y el cido N-acetil murmico. por tanto degrada la molcula de peptidoglucano ya formada.
La pared celular de las bacterias grampositivas presenta una capa de peptidoglucano que equivale al 90% de la pared celular, y se piensa que ella es
la responsable de fijar la coloracin primaria en el espacio periplsmico al
aplicar la tincin de Gram, impidiendo que dicha coloracin sea climinada
por el agente decolorante. Adems del peptidoglucano, las bacterias grampositivas tienen en su pared celular tambin cidos teicoicos los cuales son
polisacridos cidos, contienen carbohidratos como la glucosa, fosfato y un
alcohol que puede ser glicerol o ribitol. Al parecer el cido teicoico puede
ser responsable de la unin de sustancias en la superficie de la clula o de]
almacenamiento de fsforo.
79

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Por el contrario. las bacterias gramnegativas presentan pared celular ms


compleja. La capa de peptidoglucano es muy delgada y puede representar
slo el 10% de la pared celular. No presentan cidos teicoicos pero s fosfolpidos. lipopolisacridos y protenas que conforman la capa externa de la
pared. Al colocar bacterias gramnegativas en KOH al 3%. stas forman un
moco caracterstico (Figura 8a).
Los fosfolpidos y los lipopolisacridos de la capa externa se conocen
como la envoltura celular y conforman una membrana adicional que regula
el flujo de materiales hacia adentro o afuera de la clula. permitiendo la
difusin de molculas hidroflicas e hidrofbicas. en tanto que la membrana
citoplasmtica excluye casi todas las sustancias hidroflicas. excepto el agua.
Sin embargo. la membrana externa es menos permeable a las sustancias
hidrofbicas o anfipticas como los fosfolpidos que tienen terminaciones
polares y no polares. De ah que las bacterias gramnegativas sean menos sensibles a los antibiticos. Adems. los lipopolisacridos de la capa externa se
conocen como endotoxinas microcpsula o antgenos somticos los cuales
producen sntomas de enfermedad como los que caracterizan a la diarrea del
viajero. Las anteriores consideraciones hacen que las bacterias gramnegativas predominen sobre las grampositivas en las infecciones humanas.
No todas las bacterias poseen peptidoglicano en su pared celular. por
ejemplo algunas Archaea metanognicas contienen paredes celulares conformadas por un polisacrido parecido al peptidoglicano. llamado pseudopeptidoglicano. en el cual el cido N-acetilatalosaminurnico reemplaza al
N-acetilmurmico del peptidoglicano. Tampoco poseen esta molcula Sulfolobus y Halobacterium. El gnero bacteriano Mycoplasma no presenta pared
celular y adems incorpora esteroles en la membrana citoplasmtica a partir
de una clula eucaritica hospedante. Por carecer de pared celular los Mycoplasmas no son inhibidos por la penicilina.
Pared celular de los organismos eucariticos
Esta estructura est presente en muchos de estos organismos a los cuales
tambin protege del choque osmtico. Muchas algas tienen pared celular
compuesta por celulosa. adems de otros polisacridos como las pectinas.
xilanas. mans y cido algnico que se encuentran como componentes importantes de algunas algas.
Otras poseen paredes celulares ricas en calcio o silicio. formando una
especie de concha o frstulo. como en las diatomeas. Las algas del coral
contienen carbonato de calcio en sus paredes celulares. con lo cual forman la
base de los arrecifes de coral. El gnero Eugleno est constituido por algas
que no presentan pared celular verdadera.

80

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

En los hongos la pared celular est conformada por microfibrillas de celulosa o quitina o una combinacin de las dos. Las llamadas lamas (hongos)
no presentan pared celular en buena parte de su ciclo biolgico y son, por
tanto, pleomrficas. Para la sntesis de la pared celular en los hongos es necesaria la formacin de glicolpidos a partir de las membranas, lo mismo que
la fijacin de C-glucosamina a la quitina en la pared celular. Algunos fungicidas ejercen su modo de accin afectando la biosntesis de los componentes
de la pared celular.
Los protozoarios no tienen pared celular verdadera y muchos presentan
mecanismos especiales de osmorregulacin. Algunos de ellos forman una
pared externa o concha, compuesta de carbonato de calcio en los foraminferos y de bixido de silicio o sulfato de estroncio en los radiolarios.
Mitocondrias
Uno de los rasgos importantes de las clulas eucariticas es su carcter
membranoso, lo cual se demuestra mediante micrografa electrnica. Las
mitocondrias aparecen como cuerpos independientes rodeados por membranas dobles. En esos cuerpos ocurre de manera importante la actividad
respiratoria. Estn constituidas principalmente de lipoprotenas con pequea cantidad de ARN. Contienen enzimas respiratorias, y por ello se denominan centrales generadoras de la clula. Se supone que ellas contienen el
factor extra nuclear citoplasmtico que estimula el mecanismo hereditario
encargado de mantener ciertos caracteres, tales como las actividades bioqumicas, que no estn controladas, hasta donde se sabe, por mutacin de genes. Ensayos realizados acerca de la sntesis de enzimas respiratorias y otras
actividades biolgicas de las levaduras, suponen la presencia de un factor
que se origina y se duplica en forma autnoma en el citoplasma y el cual est
relacionado con las mitocondrias. Las mutaciones inducidas por cambios en
las mitocondrias son unidireccionales, irreversibles y diferentes en otros aspectos de los cambios resultantes de la mutacin de genes.
Flagelos
Muchas bacterias son mviles y esta capacidad para desplazarse independientemente, en general. es debida a la presencia de un organelo especial
para la motilidad, el flagelo. En las bacterias son apndices largos y delgados, libres por uno de sus extremos y unidos a la clula por el otro.
Los flagelos se disponen de manera diferente en las bacterias, sirviendo
como criterio para la clasificacin de algunos gneros. Por ejemplo, los gneros Pseudomonas y Xanthomonas tienen flagelacin polar y los gneros
Erwinia, Agrobacterium Bacillus, Curtobactel'ium, Clostridium, Alcaligenes
Acetobacter y Enterobacter, flagelacin pertrica.
81

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo O/ero

En la flagelacin polar, los flagelos (uno o varios) estn unidos a uno


(flagelacin loftrica) o ambos extremos (flagelacin anftrica) de la clula.
Los flagelos localizados alrededor de la clula, reciben el nombre de flagelacin pertrica (Figura 8b).
Los flagelos bacterianos estn compuestos de subunidades de una protena denominada flagelina, salen a travs de la pared c'elular y se originan en
una estructura granular en el citoplasma, inmediatamente por debajo de la
membrana celular.
La longitud del flagelo suele ser varias veces la de la bacteria que lo posee, pero su dimetro es una pequea porcin del dimetro de la clula.
Cilios
Son estructuras citoplasmticas cuyas formacin y actividad, al igual que
en los flagelos, estn controladas por el centrosoma. Se proyectan a partir de
la superficie externa de la membrana celular en cierto tipo de clulas y son
estructuras relativamente cortas y muy numerosas. Organismos unicelulares
como el Parameciu11l poseen gran nmero de cilios que se mueven rtmica y
coordinadamente, pueden contarse por cientos y son los responsables de la
gran movilidad de estas formas unicelulares.
Fimbrias, pili o pelos
Muchas bacterias gramnegativas tienen apndices filamentosos que son
ms pequeos, ms cortos y ms numerosos que los flagelos y no forman
ondulaciones como lo hacen estos.
Estn compuestos por subunidades de una protena denominada pilina y
emanan de la superficie de la clula; parece ser que estn involucradas en
funciones de unin o adherencia con clulas vegetales animales y materiales
inertes. Estas estructuras no tienen funcin de motilidad y se encuentran en
especies mviles y no mviles.
Al parecer hay varios tipos diferentes de pili que se pueden asociar con
la superficie de las bacterias; el pilus F o sexual est involucrado en el apareamiento y se le encuentra slo en las clulas donadoras; al parecer el contacto del pilus F de la clula donante con la pared celular de la clula receptora establece el apareamiento e inicia la transferencia del ADN. A los pili,
adems, se les ha involucrado en la habilidad de las bacterias para reconocer
los sitios receptores especficos en las membranas de la clula hospedante;
al parecer permiten a las bacterias fijarse y colonizar las clulas hospederas y
algunas veces son la puerta de entrada del patgeno al susceptivo.

Retculo endoplasmtico
Adems de los cloroplastos y mitocondrias, que estn involucrados en la
conversin de energa, las clulas eucariticas contienen una extensa red

82

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

(b)

," .-

L .

i . ," I
'.....

"

t-

f
(

CJ>

, , ,
\..

f'" "
, , ,,
!

,~ '

l.

.. (e) . (d)

,
I /

,,

..

Figura 8. a) Formacin de moco por ba cteria gromn egotiva . b} F!oge!C1 cin perlrico en }o
ba cteria Erwinia, e} Endospom sllbtermina! y d} Endosporo ba cteriana en Clostridium.

membranosa que se conoce como retculo endoplasmtico; el cual vara mucho


entre las diferentes clulas, pero siempre forma un sistema de sacos llenos
de lquido. coMenidos dentro de una red de membranas.
Esta red membranosa al parecer realiza distintas funciones dentro de la
clula eucariota. Existe evidencia de que el retculo endoplasmtico se une
con la membrana nuclear externa, comunicacin a travs de la cual se coordinan las funciones metablicas de la clula. El retculo endoplasmtico es
de dos tipos: un retculo endoplasmtico de apariencia rugosa porque tiene
ribosomas adheridas y uno liso, el cual no se encuentra asociado a ribosomas . Los ribosomas de las clulas procariticas no estn fijos a estructuras
membranosas anlogas.
La fijacin de los ribosomas al retculo endoplasmtico permite la coordinacin de la actividad y los canales del R. E. proporcionan un sistema a
travs del cual pueden ser transportadas las protenas sintetizadas fuera de
la clula o para ser incorporldas en las membranas. Muchas de las enzimas
estn asociadas tanto al retculo endoplasmtico rugoso como al liso, y esta
83

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

red de membranas proporciona gran importancia a las actividades enzimticas, incluyendo la sntesis de lpidos para las membranas.
Cpsula
Son estructuras gruesas, viscosas y gelatinosas que rodean las clulas de
algunas especies bacterianas. Se consideran acmulos de polmeros de polisacridos o polipptidos. Las cpsulas se colorean dbilmente y generalmente
se demuestra su presencia mediante un mtodo de coloracin por contraste
o "negativo" en el cual se colorean el fondo y las dems estructuras celulares
quedando las cpsulas incoloras. Cumplen funcin de proteccin contra la
desecacin y agentes nor.ivos: las bacterias encapsuladas patgenas no son
fagocitadas por los leucocitos.
Cuerpos de inclusin

Son cuerpos inertes que aparecen en el citoplasma de clulas bacterianas


en cultivos envejecidos. Parecen ser materiales alimenticios de reserva, puesto
que se acumulan durante pocas de suficiente aporte nutricional y disminuyen durante la inanicin. En muchas especies de bacterias y en hongos, algas
y protozoarios aparecen grnulos de volutina denominados grnulos metacromticos; se colorean intensamente con colorantes bsicos y estn integrados por cido fosfrico polimerizado, conocido como polifosfato. En varias
bacterias, esper.ialmente grampositivas, aparecen glbulos de lpidos. En otras
especies S8 encuentran tambin azufre y hierro.
Esporas

Otra caractAfstica que se emplea con frecuencia para diferenciar especies microbianas es la produccin de esporas, caractersticas importantes en
la clasificilcin taxonmica de microorganismos eucafticos y para algunos
gneros do bacterias.
Endospora bacteriana

Es una estructura compuesta por siete capas que contienen murena y


dipicolinato de calcio. Estructura resistente y refractaria a la desecacin que
mantiene su viabilidad durante largos perodos, en condiciones que no permiten el crecimiento del organismo, pero que sobreviven aun expuestas a
altas temperaturas durante largos perodos.
Pocos gneros de bactflfias son capaces de formar endosporas, las principales formadoras de ellas son miembros de los gneros Bacillus y Clostridium, lo mismo que otros bacilos y cocos gramnegativos como Amphibacillus, Desulfotomaculum, Oscillospim, Sporohalobacter, Sporolactobacillus,
Sporosarcina, Sulfdobacillus y Syntrophospora. Las endosporas se dan cuando las condiciones de vida se tornan dosfavorables para el desarrollo continuo de las bacterias; una vez se forman pueden rnant8ner viabilidad durante
84

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

milenios. Las endosporas se reconocen fcilmente al microscopio por su caracterstica localizacin intracelular, su gran refringencia y su resistencia a
teirse con colorantes de anilina bsica (Figuras Bc y Bd).
Aparato de Golgi

Estructura distintiva del citoplasma de las clulas eucariticas; nunca se


encuentra en las clulas procariticas. Es un complejo membranoso, en forma de disco, cuyas numerosas membranas se hallan prximas entre s y a las
del retculo endoplasmtico. Sirve de estructura empaquetadora, ya que dentro
de sus vacuolas van encerradas y transportadas varias clases de productos
celulares.
El aparato de Golgi est formado normalmente por cuatro a ocho cuerpos de Golgi. que son sacos membranosos aplanados, agrupados. Este aparato algunas veces es llamado complejo de Golgi y el conglomerado individual de membranas se denomina dictiosoma. Las protenas formadas en los
ribosomas del retculo endoplasmtico rugoso son transferidas al aparato de
Golgi mediante un proceso de gemacin denominado burbujeo. Los cuerpos
de Golgi son los sitios en donde se efectan las distintas actividades de
sntesis a travs de los cuales los polisacridos y lpidos pueden ser adicionados a las protenas para formar li poprotenas, glucoprotenas y varios derivados de polisacridos; estos compuestos bioqumicos son esenciales para
la sntesis de varios constituyentes celulares. Los sacos membranosos del
retculo endoplasmtico transportan protenas y lpidos del aparato de Golgi, en donde ocurre su empaquetamiento dentro de vesculas secretoras. Las
vesculas secretoras. que son formadas por el aparato de Golgi. se movilizan
a la membrana citoplasmtica en donde descargan su contenido mediante
exocitosis. Tal proceso es importante para la construccin de estructuras
celulares que se encuentran por fuera de la membrana citoplasmtica, como
la pared celular.
Plsmidos

Adems del nucleoide, las bacterias pueden contener una o ms molculas circulares de ADN denominadas plsmidos. las cuales no estn presentes en todas las bacterias. Esas molculas contienen cantidad limitada de
informacin gentica especfica y complementaria a la informacin contenida en el nucleoide. Dicha informacin puede establecer la capacidad de apareamiento. la resistencia a los antibiticos y la tolerancia a los metales txicos, garantizando su supervivencia en condiciones desfavorables.
Estas estructuras son tiles en ingeniera gentica como transportadoras
de informacin ya que por su tamao resulta fcil manipularlas; se pueden
aislar. introducir en ellas informacin gentica e implantarlas en otras clulas bacterianas viables en las cuales se expresa la informacin que portan.
85

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero


ALGUNAS DIFERENCIAS IMPORTANTES ENTRE PROCARIOTAS y EUCARIOTAS

Procariotas

Caractersticas

Eucariotas

Tamao de la clula

La mayora pequeos
(l-10!1 m)

La mayora grandes
(10-100)lm)

Sistema gentico

DNA no asociado a protenas en los cromosomas

El DNA complejado con


protenas en los cromosomas

Nucleoide no rodeado por


membrana

Ncleo con membrana

Un grupo de unin
Poco o ningn DNA repetitivo

Dos o ms grupos de unin


DNA repetitivo

Membranas internas (organelos)

Transitorias, si se presentan

Numerosos tipos: mitocondrias, cloroplastos, lisosomas, Golgi, etc.

Formacin de tejidos

Ausente

Presente en muchos grupos

Divisin celular

Fisin binaria, gemacin,


otros medios; no hay mitosis

Varias formas, asociadas a


la mitosis

Sistema sexual

Transferencia unidireccional de genes de donador a


receptor

Fusin nuclear completa


de genomas gamticas
iguales; asociada a la
meiosis

Organelos de motilidad

Flagelos simples en las


bacterias si se presentan

Cilios o flagelos complejos, si se presentan

Nutricin

Principalmente absorcin,
algunos son fotosintetizadores

Absorcin, ingestin, fotosntesis

Esteroles en la membrana

Ausentes

Presente

Ribosomas

70S

80S

Subunidades ribosomales

50S + 30S

60S + 40S

Pared celular

Contiene murena

Varios tipos, ninguno con


murena

86

CAPITULO 111

Metabolismo microbiano
Acerca de cmo los microorganismos obtienen su energa *
Permanentemente estamos en contacto con manifestaciones de la actividad microbiana al consumir pan, yogur, kumis, queso, bebidas fermentadas
en general (vino, cerveza, sake, chicha, whisky. vodka, etc.); presenciar la
descomposicin de residuos orgnicos que se adornan con paraguas de diversos colores y sentir que se genera calor; ir por la carretera y percibir un
olor desagradable a huevo descompuesto que se desprende de suelos anegados adyacentes; cuando enfermamos o enferma un animal o un cultivo; al ser
tratados con antibiticos o cuando se acude a la inmunizacin a travs de
vacunas; al observar que el pan. los alimentos. telas, maderas. etc. se enmohecen y descomponen ms rpidamente si hay humedad en el ambiente. En
fin. cada uno de nosotros ha vivido cantidades de situaciones que le permitiran hablar de la accin de los microorganismos.
Sin embargo, pocas veces nos interrogamos acerca de por qu los microorganismos realizan talo cual actividad. Normalmente, como testigos pasivos. simplemente calificamos y categorizamos a los microorganismos como
buenos o malos. segn nos beneficie o perjudique su actividad biolgica.
Este captulo pretende resumir algunos conceptos bsicos para el tema
del metabolismo microbiano. haciendo nfasis en el catabolismo y su significado a nivel del microorganismo en s. para el ecosistema y para el hombre,
en particular.

Conceptos bsicos para abordar el metabolismo microbiano


La propiedad de crecimiento
La caracterstica ms importante de la materia viva es la propiedad de
crecer. La clula crece partiendo de compuestos qumicos simples tomados
Con la coautora de la profesora Mara Elena Pineda MoV.

87

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

del medio, y con ellos, modificados apropiadamente, construye sus macromolculas caractersticas. La clula se divide y la divisin significa la duplicacin ordenada de todos sus elementos celulares; sin esta duplicacin ordenada las propiedades de los seres vivos variaran profundamente de una
generacin a otra. Brock et al (1987), por su parte, consideran que la caracterstica fundamental de los sistemas vivos es su capacidad para organizar
molculas y reacciones en secuencias sistemticas cuidadosamente controladas. La expresin final de esta organizacin es la capacidad del organismo
para replicarse a s mismo.
As, entendemos la actividad microbiana sobre diferentes materiales como
la necesidad de los microorganismos de aprovechar sustratos que les sirvan
de materia prima para ejercer la propiedad de crecer, proceso que requiere
alto grado de organizacin en los organismos vivos, que implica consumo y
transformacin permanente de energa como fenmeno central del proceso
de la vida.
Energa

La energa est presente en diferentes formas en los procesos biolgicos;


por ejemplo, la energa trmica o calrica, causada por el movimiento molecular. A pesar de ser producida por los organismos en sus procesos normales
de transformacin de energa, no puede usarse como fuente energtica primaria por ellos mismos, es liberada en forma de calor y se considera energa
de desecho. La energa mecnica originada durante el movimiento celular,
por ejemplo movimiento de cilios, flagelos y corrientes citoplasmticas, tampoco puede ser empleada como fuente primaria energtica.
Igual sucede con la energa atmica contenida en la estructura de los
tomos, la cual se libera como radiaciones atmicas y puede causar daos
importantes en los organismos. La energa elctrica se produce por el movimiento de electrones de un sitio a otro; todos los organismos vivos la producen como parte de sus funciones celulares.
Por su parte, la energa electromagntica se presenta en forma de radiaciones y en biologa, la ms importante es aquella que cae dentro de la luz
visible o cerca de estos lmites, como las radiaciones solares. La luz constituye la fuente primaria de energa para los organismos que realizan la fotosntesis y puede ser empleada para distintas funciones por muchos organismos
no fotosintticos.
La energa qumica es aquella que puede liberarse a partir de compuestos orgnicos o inorgnicos mediante reacciones qumicas y es la fuente primaria de energa para los organismos no fotosintetizantes.
Biolgicamente son tiles a la clula microbiana estas tres formas de energa: qumica, elctrica y lumnica. La premisa de la vida como proceso fun88

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

damentalmente qumico, conduce a que la mayora de las reacciones energticas dentro de la clula requieran energa qumica; incluso el empleo de la
luz como fuente energtica primaria implica que debe ser convertida a energa qumica; igualmente, la energa elctrica no puede emplearse directamente pero es muy importante como forma intermediaria en las conversiones energticas y en el transporte de algunas sustancias a travs de la membrana celular.
Se acepta entonces que el nico tipo de energa utilizable por las clulas
para el trabajo de modificar las sustancias tomadas del exterior y convertirlas en sus macromolculas, es la energa qumica contenida en las uniones
de los tomos que forman las molculas. Las clulas microbianas hetertrofas obtienen dicha energa de los compuestos qumicos procedentes del medio exterior, y en el caso de los auttrofos, de la radiacin solar y la gastan en
los trabajos celulares propios del acto de crecer y dems funciones celulares.
Recordemos que las formas de energa pueden transformarse unas en otras
y la unidad ms usada para expresarlas es la kilocalora (kc) -cantidad de
energa calrica necesaria para elevar la temperatura de un kilogramo de
agua en lC-. Tambin se expresa en julios o kilojulios (kJ). Una kilocalora
equivale a 4.184 kilojulios.
En las reacciones qumicas ocurren cambios energticos que se manifiestan en trminos de ganancia o prdida de energa. La cantidad de energa
liberada durante una reaccin qumica tiene tres componentes: H, G Y S.
H corresponde a la cantidad total de energa liberada durante la reaccin
y se le denomina entalpa; parte de ella no est disponible para efectuar trabajo til, se pierde como energa calrica y se la distingue como S o energa
entrpica; G se utiliza para expresar la energa libre disponible para efectuar
un trabajo. El cambio en la energa libre durante una reaccin se expresa
como ~Go y es modificado por las concentraciones de los sustratos, los productos, el pH y la temperatura. Si ~Go (obtenido en condiciones estndar:
pH 7, 25 oC, todos los sustratos y sus productos en una cantidad iniciallMJ,
es negativo, entonces se libera energa libre, la reaccin tiene lugar espontneamente y se denomina reaccin exergnica; por el contrario, si ~Go es
positivo, la reaccin no podr efectuarse espontneamente, requiere energa
y se llama endergnica.
Es esencial para la vida de los microorganismos que la energa desprendida de reacciones exergnicas sea utilizada para efectuar las reacciones endergnicas. Afortunadamente, los organismos han creado vas de acoplamiento de estos dos tipos de reacciones. El principio bsico implicado es que
haya un reactivo comn. Los de mayor uso para las clulas son aquellos
capaces de transferir ciertas cantidades de energa libre, llamados compuestos de alta transferencia de energa.
89

Marina Snchez de Prager - Fernando Msrmolejo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

El Cuadro 1 incluye algunos de los compuestos de alta transferencia de


energa encontrados en bacterias, de stos el ATP es el ms importante.
CUADRO 1: ALGUNOS COMPUESTOS DE TRANSFERENCIA DE ALTA ENERGfA ENCONTRADOS EN BACTERIAS. CON SUS CAMBIOS DE ENERGA.

Compuesto
-7.3
-7.3
-7.3
-7.3

ADENOS/NA TRlFOSFATO (ATP)


GUANOS/NA TRlFOSFATO (GTP)
URlD/NA TRlFOSFATO (UTP)
CITID/NA TR/FOSFATO (CTP)

ACETIL - FOSFATO

-10.1

CIDO 1.3-DIFOSFOGLICRICO

-11.8

CIDO FOSFOENOLPIRVICO (PEP)

-14.8

Fuente: Pelczar. 1993

Recordemos que en los sistemas biolgicos el ATP es la moneda energtica de uso de la clula en el intercambio entre las reacciones exergnicas y
endergnicas que le van a permitir realizar sus funciones vitales. Los compuestos del Cuadro 1 que tienen valores DG ms negativos que el correspondiente a la hidrlisis del ATP. pueden transferir su energa directa o indirectamente para la sntesis de esta molcula (ATP).
1,3 - cido difosfoglicrico + ADP ~ 3 - cido fosfoglicrico + ATP

Reacciones de xido-reduccin

En la produccin de energa intervienen varios tipos de reacciones qumicas, siendo la ms comn la xido-reduccin, cuya base fundamental es
la transferencia de electrones. Oxidacin es la prdida o liberacin de electrones y reduccin es la ganancia de stos. Frecuentemente. las reacciones
de oxidacin son deshidrogenaciones (ya que acarrean la prdida de tomos
de H). Como un tomo de H consiste en un protn y un electrn. un compuesto que pierde un tomo de hidrgeno ha perdido esencialmente un electrn y por lo tanto ha sido oxidado.
Ni las oxidaciones ni las reducciones tienen lugar en forma aislada. siempre deben estar acopladas ya que los electrones no existen aislados en solucin. En otras palabras, la inversa de cada reaccin de oxidacin es una reaccin de reduccin y viceversa. Tambin. en cada reaccin participan un par
de sustancias: una es la forma reducida y la otra la forma oxidada.
Las sustancias varan en su tendencia a ceder electrones y oxidarse. Esta
tendencia se expresa como potencial de reduccin; este potencial se mide
elctricamente en relacin con una sustancia estndar, constituida por el H 2
90

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

La mayora de las molculas pueden ser tanto donadoras de electrones (reductoras) como aceptaras de electrones (oxidantes) en diferentes momentos,
dependiendo de las otras sustancias con las cuales reaccionan.
En el catabolismo biolgico, al donador de electrones frecuentemente se
le denomina fuente de energa, sin embargo, es necesario tener claro que este
trmino no significa que toda la energa est contenida en el donador de
electrones y es liberada mediante una oxidacin, ya que es el proceso redox
acoplado el que libera energa. En otras palabras, la cantidad de energa liberada depende tanto del donador como del aceptor de electrones.
Enzimas
Todas las reacciones metablicas de los microorganismos, implicadas en
la generacin y uso del ATP, del poder reductor y de los precursores macromoleculares, son enzimticas. En otras palabras, todas las reacciones qumicas de la clula microbiana son catalizadas por enzimas.
Las enzimas son protenas solas o combinadas con otras molculas. dotadas de capacidad cataltica, es decir, en pequeas cantidades aceleran las
reacciones qumicas sin alterarse ellas mismas despus de las reacciones y
sin que necesariamente las inicien. Poseen las mismas propiedades de las
protenas, es decir, se desnaturalizan con el calor. precipitan con el etanol, a
concentraciones elevadas de sales inorgnicas como el sulfato de amonio y
no dializan ti travs de membranas semipermeables.
Muchas enzimas contienen molculas pequeas no proteicas que intervienen en la ca.tlisis, en este caso la protena se denomina apoenzima. Seglin como estn asociadas estas molculas con la enzima se llaman coenzimas y grupos prostticos. Cuando se unen las dos formas: apoenzima y coenzima o grupo prosttico, integran la enzima que se denomina holoenzima.
Se conoce como coenzimas a aquellas molculas orgnicas de bajo peso
molecular unidas Jaxamente con las enzimas, las cuales pueden estar asociadas con un nmero de enzimas distintas, en momentos diferentes durante el
crecimiento celular. La parte principal de algunas coenzimas es una vitamina. entre ellas varias del complejo B. Por ejemplo: el cido flico es parte de
la coenzima cido tetrahidroflico, la holoenzima interviene en el intercambio de unidades de un carbn en la clula; la vitamina B.} -riboflavinahace parte de la coenzima flavina-adenina-dinucletido, (FAD). cuya holoenzima interviene en la transferencia de hidrogeniones en reacciones de xido-reduccin; la piridoxina -Vitamina B1; - es parte integral del fosfato de
piridoxal y est relacionada con la transaminacin y decarhoxilacin de
aminocidos.
En otros casos, la porcin no proteica de una enzima puede ser un metal
el cual pueele estar unido estrechamente a la protena o en forma laxa que le
91

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo O/ero

permite disociarse con facilidad, todo depende de la naturaleza de la enzima. Cuando la porcin no proteica est unida a su enzima casi permanentemente, se conoce como grupo prosttico. Tal es el caso del grupo herno en
los citocromos. Muchas enzimas requieren de la adicin ele iones metlicos,
como por ejemplo: Mg<2, Mn+ 2 , Fe+ 2 , Zn+ 2 ,los cuales activan su funcin enzimtica. A estos iones metlicos se les conoce como coenzimas inorgnicas o
cofactores. Algunas veces tanto el cofactor como la enzima se requieren para
que la enzima empiece a ser activa. As, en la simbiosis rizobios-Ieguminosa,
la fijacin ele nitrgeno molecular est mediada por la enzima nitrogenasa,
de la cual hace parte el Fe.
Las enzimas son altamente especficas, es decir, cada una cataliza tan
slo una reaccin o un grupo de reacciones ntimamente relacionadas. Los
nombres de las enzimas hacen relacin al sustrato sobre el que actan o a
las reacciones que catalizan, agregando la terminacin asa. Por ejemplo, las
proteasas catalizan la ruptura de protenas, la celulasa cataliza la degradacin de la celulosa; la glucosa-oxidasa cataliza la oxidacin de la glucosa,
etc.
La actividad enzimtica puede ser influenciada por diferentes condiciones como la concentracin de la enzima, la concentracin del sustrato, el pH
y la temperatura. Dado que las enzimas son las responsables de catalizar las
reacciones asociadas con el proceso de la vida, las condiciones fsicas y qumicas que afecten su funcionamiento, naturalmente se manifiestan en su
respuesta en trminos del desarrollo de los microorganismos.
Una clula consta de gran nmero de enzimas diferentes, cuya sntesis
depende de factores endocelulares muy importantes para la economa de la
clula; en esta forma cuando la clula no requiere determinadas enzimas
puede muchas veces dejar de producirlas (represin de la sntesis), y en otros
casos, no produce normalmente ciertas enzimas sino cuando se requieren en
el metabolismo (induccin enzimtica).
Aunque todas las enzimas se producen inicialmente en las clulas, algunas son excretadas a travs de la pared o membrana de stas y funcionan en
el medio externo. Segn el sitio donde acten, se denominan enzimas intracelulares o endoenzimas (funcionan al interior de la clula), y enzimas exlracelulares o exoenzimas (actan fuera de las clulas); estas ltimas propician los cambios en el sustrato para permitir que entre a In clula como alimento. Las endoenzimas catalizan reacciones ele biosntesis. al igual que reacciones catablicas.
Las caractersticas generales de las enzimas son iguales, independientemente de que hayan sido producidas por microbios, animales, plantas o el
hombre mismo. Incluso, clulas de organismos muy diferentes de hecho contienen varias enzimas idnticas o que tienen funciones similares.

92

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Actualmente se conocen ms de 1.000 enzimas diferentes, y ms de 150


han sido cristalizadas. La primera enzima que se aisl en forma cristalina fue
la uroasa. logro quo hizo merecedor a J.B. Summer del Nobel en 1946.
Acarreadores de electrones
En la mayora de las reacciones biolgicas de xido-reduccin, la transferencia de electrones de un donador a un aceptor no ocurre directamente sino
que es mediada por uno o varios intermediarios a los que se denomina transportadores o acarreadores de electrones. Cuando esto ocurre, al compuesto
inicial (sustrato) se le llama donador primario o inicial, y el que recibe por
ltimo el flujo de electrones aceptar final o terminal de electrones.
Estos acarreadores de electrones son de dos tipos: unos que se pueden
movilizar dentro de la clula asocindose con diferentes enzimas, y otros
que se unen a la membrana celular en forma permanente. Como ejemplos de
los primeros tenemos las coenzimas NAD (nicotin adenin dinuc!etido) y
NADP (NAD fosfato) que son los transportadores que difunden comnmente: el NAD participa en las reacciones de produccin de energa, y el NADP
fundamentalmente en las reacciones de biosntesis.
En el proceso de respiracin, adems del NJ\D intervienen otros acarreadores permanentes de electrones como los denominados flavoprotenas, de
los cuales se conocen el mononucletido de flavina (FMN) y el dinocJetido
de flavinadenina (FAD) y protenas ferrosulfurosas, semejantes a las ferredoxinas pero con potcncinl reductor mayor, que se nsocian con la cadena de
transporte de electrones en diversos sitios; cilocromos que son protenas que
contienen un anillo de porfirina con hierro denominado hem. Fuera de los
anteriores, se conoce un acarreador electrnico no protenico, las quinonas
liposolubles, denominadas en ocasiones coenzima Q.

Metabolismo microbiano
Como se dijo con anterioridad, para realizar las actividades qumicas organizadas requeridas pam crecer y duplicarse, los microorganismos deben
tomar materiales (kl ambiente y transformarlos med iante una serie de reacciones que se CO!locen C0ll10 metabolismo, las cuales comprenden dos partes: la extracr:in ele energa y del poder rnductor del medio qU[) rodea al
microbio y la utilizacin ele la energa.
La primera parle denominada catabolismo, comprende nqucllas transformaciones tendientes a obtener energa de los compuestos tomados del medio, la cual es transferida y almacenada temporalmente dentro de la molcula de ATP.
La segunda pilrte compronde el uso de esta energa en las reacciones bioqumicas endergnicas, requeridas para transformar las sustancias tomadas

93

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

del medio y adaptarlas a las necesidades constructivas del organismo; estas


transformaciones dirigidas a la sntesis, se denominan anabolismo. El poder
reductor generado durante el metabolismo (por acoplamiento de la reduccin de las coenzimas con reacciones de oxidacin). es necesario para la
conversin de las formas oxidadas de carbono a sus estados reducidos, tal
como se encuentran on las macromolculns de los microorganismos.
Catabolismo y anabolismo constituyen una unidad dialctica. Se requieren grandes cantidades do energa para poder desarrollar las extensas actividades de un microorganismo, llmese hongo, bacteria o protozoario, entre
otros. La energa faculta para hacer un trabajo y por lo tanto se utiliza para
sintetizar, por ejemplo, componentes ele la membrana celular, de la pared,
enzimas, cidos llucIeicos, polisacridos; reparar dailos de la clula o conservar su estabilidad; mantener sustancias al interior de la clula en contra
de un gradiente de concentracin, para mantoner a otras fuera; en el desplazamiento del microorganismo, etc.
La separacin que se hace entre anabolismo y catabolismo es ms didctica
que natural. Parte de la maquinaria celular puede funcionar con fines catablicos cm determinadas condiciones y en otras, con fines anablicos -como se ver ms adelante- aunque la va bioqumica en la biosntesis de una
molcula no es, por lo regular, idntica a la que sigue para su catabolismo.
Estos dos procesos estn ligados ntimamente y el equilibrio de la vida se
debe en buena parte a su coordinacin precisa.
Todas las reacciones metablicas de los microorganismos son cata/izadas
por onzimas, ya sea que estn implicadas en la generacin y uso del ATP, del
poder reductor y en la generacin y utilizacin de los precursores macromoleculares. Un microorganismo requiere miles de enzimas para llevar a cabo
sus reacciones metablicas, las cuales suceden en una serie de pequeos
pnsos. Estos pasos sucesivos entre las molculas del sustrato y el o los productos finales, constituyen el metabolismo intermediario de la clula.
Atlas (1990) compara el metabolismo intermediario con el movimiento
para subir del primero al segundo piso de un edificio o viceversa. La mayora
de nosotros no dispondramos de la energa necesaria para saltar tres metros
y alcanzar el nivel deseado; entonces para subir o bajar eficientemente se
recurre a las escaleras, mediante las cuales somos capaces de alterar los niveles de energa en pasos pequeilos. En esta misma forma, un microorganismo
no convierte un sustrato en producto en un paso grande, sino que ejecuta
una serie de reacciones metablicas ms pequeas. Esos pasos pequeos del
metabolismo intermediario son necesarios porque a pesar de que la hidrlisis del ATP es exergnica. la cantidad de energa desprendida es limitada,
entonces al liberarse en pasos sucesivos puede ser acoplada con reacciones

94

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

endergnicas que requieren menos de 7.3 Kcallmol. Adems de lo anterior,


si las reacciones que llevara a cabo una clula fueran altamente exergnicas,
se producira gran cantidad de energa libre, capaz de disturbar la organizacin estructural y funcional del microbio.

Produccin de energa en los


sistemas biolgicos: Reacciones catablicas
Los microorganismos emplean una amplia gama de fuentes de energa y
de mecanismos para sintetizar enlaces de fosfato de alta energa en ATP. Es
de recordar una vez ms, que tanto la energa qumica como la lumnica se
emplean para esta sntesis de ATP. Entre las sustancias qumicas lo mismo
pueden servir compuestos orgnicos o inorgnicos como donadores de electrones; en igual forma, en las reacciones redox acopladas, se emplean diferentes aceptares de electrones que incluyen tambin tanto compuestos orgnicos como inorgnicos.
El conocimiento de la serie de reacciones que participan en la oxidacin
de un solo compuesto, permite establecer un corredor central que se denomina va bioqumica o ruta metablica.
La degradacin de los compuestos orgnicos que contienen farmas reducidas de carbono, es la fuente de energa en todos los animales, yen la mayora de los microorganismos, incluyendo hongos, protozoarios y casi todas las
bacterias. Sin embargo, existen microorganismos capaces de derivar su energa de compuestos inorgnicos.
Las principales rutas metablicas mediante las cuales los microorganismos obtienen su energa son: fermentacin, respiracin, (o respiracin aerbica), respiracin anaerbica y fotosntesis.

Fermentacin: Los procesos redox ocurren en ausencia de un aceptor


externo de electrones es decir que el sustrato orgnico acta como donador
interno de electrones y un producto de este sustrato acta como aceptor interno. Esta va metablica ocurre en ausencia de aire ya que no se requiere
oxgeno u otro aceptar externo de electrones para equilibrar un cambio en el
estado de oxidacin de la molcula orgnica.
Respiracin: El oxgeno molecular (O) acta como aceptor de electrones. Se precisa obligatoriamente del aceptar externo ya que mediante la reduccin de este aceptar final, la clula es capaz de equilibrar el cambio en el
estado de oxidacin de los productos metablicos en relacin con el sustrato
inicial. Se la denomina tambin respiracin aerbica.
Respiracin anaerbica: En este proceso participa un aceptar externo
de electrones. diferente al O 2 , por ejemplo nitratos (NO]-). sulfatos (SO 4 =) o

95

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

carbonatos (CO:I =). Como su nombre lo indica, en esta va metablica no se


requiere la presencia de aire.

Fotosintesis: Consiste en la absorcin de la energa luminosa por la clorofila y otros pigmentos y su conversin en energa qumica (ATP) que se
utiliza para la reduccin del CO. de la atmsfera a carbohidratos.
De manera simplificada se presentan cada una de estas rutas metablicas
y su importancia para los microorganismos, el hombre y el ecosistema.

Fermentacin
Como se estableci, la fermentacin ocurre sin aceptor externo de electrones, es un proceso anaerbico; el compuesto orgnico fermentable se oxida parcialmente y el microorganismo slo obtiene una cantidad pequea de
energa, la restante queda en productos intermedios de oxidacin y una parte se manifiesta en forma de calor.
Stanier et al (1977) sealan que de las clases de metabolismo productores
de energa, la fermentacin, desde el punto de vista de su mecanismo es la
ms simple. Pasteur afirm: La fermentation e'est la vie sans }'air.
Mecanismos de la fermentacin

A manera de ejemplo se analiza en forma global lo que sucede con respecto al sustrato, a la energa y a la clula microbiana, cuando ocurre la
fermentacin de la glucosa por parte de la levadura, Saehnromyees cerevisiae:
C6 H120r

---;~~

Glucosa
(sustrato)

Enzimas

2CH:CHpH
Etanol
(producto reducido)

2CO:

Dixido de carbono
(produr.to oxidado)

57 kcal
Energa

Como se puede observar, algunos tomos del carbono de la glucosa se


han oxidado a mayor escala (COJ mientras que otros han alcanzado un nivel
de oxidacin menor en el etanol (C 2 H s OH), el cual en comparacin con la
glucosa es un compuesto ms reducido ya que tiene ms hidrgenos y electrones por tomos de carbono. En cuanto a la energa generada en este proceso (57 kcal): una parte se transforma en calor y otra se conserva como enlaces
fosfato de alta energa con produccin neta de 2 molculas de ATP.
La degradacin de la glucosa (Figura 1) ocurre por una va bioqumica
llamada gluclisis o va de Embden-Meyerhof. La primera parte no implica
xido-reduccin y lleva a la produccin del intermediario clave gliceraldehdo 3-fosfato. Para ello, al inicio, la molcula de glucosa sufre fosforilacin
con consumo de ATP dando origen a glucosa 6-fosfato, la cual sufre isomerizacin y otra fosforilacin que la convierte en fructosa 1-6 difosfato.

96

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Glucosa

Cr.HI2 O"

~ATP
1~

ADP

Glucosa 6 - Fosfato

~-ATP
1~

Fosfato de dihidroxiacetona'

ADP

Fructosa 1.6 difosfato aldolasa


Gl icera Idehdo-3-fosfato

Pi~

NADJ

Fosforilacin
a nivel de
sustrato

NADH

1,3 difosfoglicrico

ADP~

CH,.

/1

ATP

C=O

ATP

I
COOH

ADP
fosfoenol
pirvico

---

3 fosfoglicrico

(cido pirvico)

COz

+ CH.

Dixido
de Carbono

NADH

CH=O

NAD
-----------~..
-

CH.

(acetaldehdo)
'Para que sea utilizado debe isomerizarse hasta gliceraldehido-3-fosfato, reaccin que es catalizada por la triosa-fosfato-isomerasa.

CH.,OH
(etanol)

Fjgura 1: Fermentacin de la glucosa por la levadura SClccharornyces cerevisiae.

97

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Esta molcula se parte, por accin de la enzima aldolasa, dando lugar a dos
triosas fosfato: el fosfato de hidroxi-acetona y el gliceraldehdo -3-fosfato.
En la segunda etapa ocurren reacciones de xido-reduccin, hay produccin de energa (ATP) a partir del enlace fosfato y se originan como productos finales etanol y CO2 (Figura 1). Para ello, el gliceraldehdo 3-fosfato es
convertido en cido 1, 3 difosfoglicrico por la incorporacin de fsforo inorgnico -fosforilacin al nivel de sustrato-, con la intervencin de la coenzima NAD, la cual se reduce a NADH. Esta reaccin ocurre dos veces, una
por cada molcula de gliceraldehdo 3-fosfato.
La conversin posterior del difosfoglicrico en fosfoglicrico permite la
generacin de ATP: una etapa siguiente lleva al cido fosfoenol pirvico el
cual al oxidarse da lugar a la formacin del cido pirvico y a la generacin
de ms energa en forma de ATP.
As, en la gluclisis se consumen dos molculas de ATP -en las dos
fosforilaciones de la glucosa- y se producen cuatro molculas de ATP -dos
de cada cido 1,3 difosfoglicrico que se convierten en piruvato-, lo cual
significa para el organismo que realiza la fermentacin una ganancia de dos
molculas de ATP por cada molcula de glucosa fermentada.
En el caso de la fermentacin alcohlica llevada a cabo por Sachal'omyces cerevisiae, el cido pirvico es oxidado a acetaldehdo y COz; a su vez la
coenzima NADH, transporta de nuevo electrones al acetaldehdo reducindolo
a etanol. En consecuencia, el producto final de esta fermentacin es la sntesis de dos ATP, dos molculas de etanol y dos molculas de COz (Figura 1).
Algunos productos finales de la fermentacin, como el etanol que es para
el microorganismo material de desecho, representan para el hombre sustancias utilizables, en la mayora de los casos, y constituyen la base de desarrollos agroalimentarios, farmacuticos e industriales.
La degradacin de la glucosa por va fermentativa al generar CO2 como
uno de los productos finales contribuye a incrementar la presencia de ste
en los ecosistemas.
La glucosa, sustrato base en el ejemplo planteado, es fermentada por gran
variedad de microorganismos, cada uno con contenido enzimtico y propiedades fisiolgicas especficas, lo cual hace que los productos finales sean
variables segn los gneros y especies microbianas involucradas (Figura 2).
Algunos microorganismos generan un solo producto y se denominan homofermentativos, otros, llamados heterofermentativos, como su nombre lo indica, dan origen a varios productos (Figura 3).
Los conocimientos actuales acerca de la fermentacin permiten comprender integralmente lo que constituy, en su poca, gran reto para Pasteur: dar
explicacin a los viticultores de LiIle (su provincia natal) por qu mientras a

98

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES


Carbohidratos

Glucosa
CaH1z Oa

cido

m, ,A<;d. "'pi.;. +-- ,,,,,.,,,

+--

2,3 Glicol bulilcno

Acetil Metilcarbiool

cido Pirvico

Acetato activo
(Acetil CoAl

Alcohol Isoproplico

+-

Acetona

+-

cido
Aceto . actico

cido +cido t Hz +CO z


Aclico Frmico

-----1"... cido Actico

---!lO- cido Bulrico

--.. Alcohol Butrico

cido B Hidroxibulrico

Figura 2. Vas de (-tIllen/arin Il/icm!Jinno de la gllIcosa. L.os productos finales corres-

ponden o mic/'Ool8anismos di/rmmles.

Streptococus laclis

C;llIcosa

[ha Jllofermentativo)

((;,,11./),)

1 /

Esrheric:}a coli
(HAterofcrmentativo)

c;Lrmtco

' . I " . ~ Amia


lactlco
, .
, .
cido lr.lico ... - - ACH o plruvlco
~... Ando SlICCll1lCO
',,- ;\Cf~til CoA
_
Figura 3. Fr['menfan

0;6';'0 d""boo", Hid<g,"o

Alcohol etlico + cido actico

ne lo ghw()s(J jior Ull microorgonismo heterofermentativo y UIlO

homofernwntatiFo

99

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmo/ejo De /a Torre - Ne/son Bravo Otero

- - --

Levadura

Vino descompuesto

Vino bien fermentado

(cido actico)

(Alcohol etlico)
Dibujo: Ne/soll Bravo O.

Figura 4: Pas /pur pn su poco debi encontrar uno exp/icocin a l os vinos descompu estos v {ermpntnrlos (]rfpr:uadnmente. /0 cual/e permiti ps/ah/peer /0 especlficidad metablica microbiano.

partir del zumo o mosto de uva, algunos vinos fermentaban adecuadamente


y se obtena etanol. en otros slo se lograba vino descompuesto con sabor a
vinagre -cido actico-o Las ohservaciones microscpicas que efectu este
investigador le permitieron relacionar el producto final que se obtena con el
tipo ele microorganismo qu e estaba presente (Figura 4). Hoy estos dos productos de fermentacin; etanol y cido actico, al igual que muchos otros,
tienen liSO industrial, se conoce acerca de la especificidad metablica microhiana conferida por las enzimas que poseen, y estn identificados la mayora
de los organismos que generan cada uno de los productos industriales obtenidos mediante fermentacin, buena cantidad de los cuales son manipulados comercialmente.

Sustratos fermentables
Segn Schlegel "la mayora de productos naturales en cuya composicin
intervengan tomos de carbono, hidrgeno, oxgeno y/o de nitrgeno pueden ser fermentados en condiciones anaerbicas". La condicin para que un
sustrato sea fermentable es que no presente un nivel extremo de oxidacin ni
de reduccin; los carbohidratos constituyen un ejemplo clsico de sustratos
fermentables.
Entre los sustratos fermentables estn: polisacridos -hexosas, pentosas, tetrosas y polialcoholes-, cidos orgnicos -glucosdicos, cido gluc100

MICROBIOLOGfA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

nico. mlico, tartrico. etc.-, aminocidos -excepto los aromticos, que


necesitan condiciones especiales-. las purinas y pirimidinas.
.

Sustratos no fermentables
En condiciones anaerbicas no pueden ser fermentados hidratos de carbono aromticos y alifticos. esteroides, carotenoides. terpenos. cidos grasos a partir de cinco tomos de carbono y porfirinas. La estabilidad de tales
compuestos en condiciones anaerbicas parece deberse a que no se consigue
energa por hidrlisis interna de stos, ya que la mayora contienen slo tomos de carbono y de hidrgeno.

Respiracin aerbica
En este proceso los donadores de electrones son compuestos orgnicos o
inorgnicos reducidos y el aceptor final es el oxgeno molecular (OJ. La disponibilidad de oxgeno hace posible la oxidacin completa de los compuestos orgnicos hasta ca:!,
La cantidad de ATP considerablemente mayor que se produce durante la
respiracin se debe a la fosforilacin acoplada al flujo de electrones a travs
de la cadena respiratoria de transporte, la cual se conoce como fosforilacin
oxidativa.
El sistema de transporte de electrones en los procariotas est asociado
con la membrana citoplasmtica. ya sea unido a ella o haciendo parte integral; en los eucariotas los citocramos y el sistema transportador se encuentran en las mitocondrias.
Respiracin aerbica de sustratos orgnicos

Se parte de la actividad de la misma levadura: Sacharomyces cerevisiae


sobre el mismo sustrato orgnico que se utiliz como ejemplo en la fermentacin -glucosa-. con una diferencia. en este caso las condiciones son aerbicas. La reaccin global es:
~

C;HPb + 60,

6 CO 2 + 6 HP + E (ATP) 674 kcal

Enzimas
Como se puede observar. los tomos de carbono de la glucosa sufren su
grado mximo de oxidacin en el COz. En cuanto a la energa generada en
este proceso, 674 Kcal. una parte se transforma en calor y otra se conserva
como enlaces fosfato de alta energa con una produccin neta de 38 molcuias de ATP.
En la respiracin aerbica, el cido pirvico que se origina de igual manera que en la fermentacin (gluclisis) se descarboxila con la produccin
de una molcula de NADH y de Ull radical acetilo que se acopia con la coenzima A formando el acetil CoA cuyo enlace es rico en energa. (Figura 5). El
101

Marina Snchez de Prager . Fernando Marmo/ejo De /a Torre Ne/son Bravo O/ero

grupo acetilo del cetil CoA se combina con el cido oxalactico para producir cido ctrico e incorporarse al ciclo de Krebs, del cido ctrico (CAe) o de
los cidos tricarboxlicos (ATe). como se le conoce,
Suceden reacciones posteriores de deshidratacin, descarboxilacin y
oxidacin con la produccin consecutiva de cidos acontico o aconitato,
isoctrico, a-cetoglutrico, sucCnico, fumrico, mlico; este ltimo es transformado en cido oxalactico completndose el ciclo, Se liberim adems, dos
molculas de CO 2 ,
El resultado neto de este ciclo es la oxidacin completa del cido pirvico a CO 2 con la produccin rlc cuatro mol{)(.:ulas de NADH y una de FADH,

,t
IhC)

GIII\./',Ii",

"ciclo pir\'iclJ

A nc)

co,

~t

ocel,l C"A

NAIJ+ CoA

N\D11

~t
~ ~~~~~o c:itljf~

CoA

NAlll1 :jJCidllOXiJlit:O
(4C)

..

d'

, "

(':i~lr, c\".ar.OllltlCO

NAI)
acidom,i111,o

('le)

"cid" isoclrico

1'1\1)1 I ..--_,t':idO fum,ir:co (4C)

(1;C)r

FAD .,-Jacl<lo succm,en


Co, A ~4Cj

N1\D(P)f-]

,i .. iJo f""lu"I<,c:nicu
( f i C l r CO "

~'---....

GTP

GDP+Pi

N \lJ(l'j'

",ceinil Co/\
(4C)

NAIJ

CoA

, 'd'"
Ae,
o v. -o"tog l"
utanco C')
,) ,

NADH
Reccin glohal del ciclo Ilel r.ic!o trkarbuxlico: Pifllvato + 4 NAO + FAU ---+- :leO, + 4NADH + FAD
'
Mediante fosforilacin al nivDI de SlIstratu:

GOP + Fosfato _ _
GTP + ADP

GTP
GUP + ATP

A travs de fosforilacin por transporte de electrones:


4NAUII ~ 12 ATP

FAIlH = 2 ATI'
M,;s: oxidacin de 2 NADlI (gluf,tilisisj
Fosforllacin al ohel de suslroto

Cido del dd" ctrico + gluclisis

._._~

GATP

21\TP

:18 ATP/glucosa

Figura 5, Ciclo resumido de la respiracin aerbica

102

15 ;\TP/cidu pirvico

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Mediante el sistema de trallsportt~ de electrones (NAD; flavoprotP.nas, citocromos, quinonas). cada una de las molculas de NADH y FADH pueden ser
oxidadas. Gran partfl de la ellergalihmada por la transferoncia de electrones
del NADH al 0" se conserva por medio de la sntesis de ATP a travs de la
fosforilacin oxidativa.
Por cada lllol(kula de NADH" que se oxida se produnm tres molculas de
ATP y cuatro de agua, mientras CjUfl FADH produce 2 ATP. Teniendo en cuenta los f\TP producidos en las dems reacciones, en cada vuelta del ciclo se
sintetizan 15 molculas de ATP por molcula de cido pirvico, lo cual equivale a 30 molculas de ATP por molcula de glucosa oxidada; adem,s, por la
oxidacin de las dos molculas ele NADH producidas en la gluclisis se obtienen seis molculas ms de ATP, y dos molculas ms por la fosforilacin l
nivel de sustrato corresponoif.:nte al paso ele glucosa l cido pirvico. As,
los microorganismos aerohios estrictos o facultativos pueden formar 38 molculas du ATP medi<mte la oxidi1cin de la glucosa, mientras que los anaerobios slo obtienen dos molcu las cuando fermentan el mismo sustrato.
La respiracin ele sustratos orgnicos por parte de los microorganismos.
en algunos casos, se interrumpE) naturalmente o mlldiante manipulncin del
hombre. entonces se forman productos orgnicos parcialmente oxidados, por
ejemplo los cidos ctrico. fumirico, -cetoglutrico, todos ellos de importancia illdustrial. En cuanto al ambientu, la respiracin y la fermentacin
constituyen lns vas ms importantes de retorno de CC\ a la atmsfera.
Ad(~mils de su funcin en la produccin de energa (ATP) es importante
resaltar que el ciclo de Kreus (ATC o CAC) proporciona productos intermediaros claves para la bioslltesis. O sea que es una va anfiblica: funciona
no slo en el catabolismo SillO tambin en la generacin de precursores para
reacciones anablicas. Un ejemplo de ello es la utilizacin de U-cetoglutarato y oxalacetato para la sntesis di: aminocidos (Figura 6).

--

cillo
glutmico

--

cidu
Asprtico

Figura 6. Sntesis de

0}g1l110S

cido ucetoglutarico

Ciclo de Krebs

Acido OxaloachlO

~.'"

Arsintna

_Prolina

-..... Glutamina
~

Asparagina

<:.

I\letionina

- - Homoserina

----...

Lbina

.. Tr~OIjlla

atninodcidos jJor}o va del ciclo de Krebs


103

Isolellcina

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Respiracin aerbica de sustratos inorgnicos


Algunas bacterias del suelo y de ambientes acuticos pueden obtener
energa a partir de la oxidacin de compuestos inorgnicos, mediante un
proceso generalmente acoplado a la reduccin de eo.,. Varias sustancias pueden servir de donadores de electrones y energa, generando diferentes cantidades de energa, como se observa en el Cuadro 2. Los microorganismos que
realizan respiracin de sustratos inorgnicos tienen gran importancia en el
suelo, pues mediante su actividad se pueden llevar a cabo procesos como la
nitrificacin. donde el amonio, liberado de la materia orgnica en descomposicin, es transformado al in nitrato, generando disponibilidad de nitrgeno altamente asimilable, el cual a su vez se lixivia muy fcilmente y genera tambin acidificacin del suelo.
CUADRO 2. RESPIRACIN DE COtv1PUESTOS INORGNICOS POR DIFERENTES MICROORGANISMOS

Microorganismos

pH

Reaccin

Productos Finales

Ni/rosomonas, Nilroso!ubus
Nilrosospira, Nilrovibrio

NH,+1/2 O2

NO, + 2H' + 2HP + 66Kcal/mol

Ni/robacter

NO;+1/2 O,

NO,-+ 18Kcal/mol

Beggia/oa y Thiotrix

H2 S+1/2 O2

S+H,D + 50Kcal/mol

Thiobacil/us Ihioxidans y
Thiobacillus ferrooxidans

S+11/20,+H,D SO4 2-+H'+ 140Kcal/mol

T. ferrooxidans

Fe"+H'

Hidrogemonas, MicrocOCCllS,
Pselldomonas, Rhizobium
Azospiril/lIm y Azotobaclel'
Carboxidomonas

1/40~

Fe':!+ 1I2H,D+ 17Kcal/mol

2-3

H2 + 1/202

H,D + 57Kcal/mol

CO +1/2 O,

CO 2 + 61Kcal/mol

Fuente: Brock, 1984; Paul y Clark, 1989; Burbano. 1989; Garca 1992; Neves, 1992 y Vicloria el al, 1992

Diversos compuestos reducidos de azufre son usados tambin para promover fosforilacin oxidativa que genere ATP y reductores necesarios para
la fijacin de CO 2 En esta oxidacin el pH disminuye drsticamente en el
suelo y puede llegar a valores cercanos al, como consecuencia del metabolismo de estos microorganismos. Los productos que se forman en esta oxidacin, como azufre elemental, pueden ser depositados en el interior de los
microorganismos en forma de grnulos o excretados al medio ambiente, como
cido sulfrico por ejemplo.
104

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Tanto el in ferroso como el monxido de carbono pueden ser oxidados


generando energa para las reacciones de sntesis. Las bacterias que oxidan
monxido de carbono para obtener ATP y poder reductor son importantes en
procesos de desintoxicacin de ambientes polutos por esta molcula.
Otra va de metabolismo de la glucosa: la hexosa monofosfato

La mayora de los microorganismos metabolzan entre 60 y 80% de la


glucosa a travs de la va de Embden-Meyerhof, tambin denominada gluclisis, gliclisis o de las hexosas difosfato, por lo cual como se vio con anterioridad, la glucosa se convierte en piruvato sin prdida de carbonos, reduciendo dos molculas de NAD a NADH y generando dos molculas de ATP. La
pregunta es: qu ocurre con el resto de la glucosa'? Generalmente la glucosa
restante es metabolizada por la va de los fosfatos de pentosa, llamada tambin va de las hexosas monofosfato. El punto que controla la proporcin de
e que fluye hacia cada ruta se encuentra generalmente en la va de EmbdenMeyerhof al nivel de la fosforilacin de fructosa-6-fosfato a fructosa-l,6 difosfato, catalizada por la fosfofructoquinasa. La conexin entre la va de la
gluclisis y de la hexosa monofosfato se aprecia en la Figura 7.
Va de la hexosa difosfalo
(gluclisisl

Va de la hexosa monofosfalo
CO,

Glucosa

Glucosa-6 fosfalo

Fruclosa-6 fosfalo

Gliceraldehdo-3 fas falo

eritrosa-4-fosfato

CIlJO PIRVICO

Figura 7. Conexin entre la va de la gluclisis y de la hexosa monofosfato.

La va de la pentosa monofosfato es estrictamente aerbica y muy importante para proveer pentosas requeridas para la sntesis de cidos nucleicos y
grupos prostticos que contienen nucletidos, al igual que elementos necesarios para la sntesis de aminocidos aromticos y de vitaminas.
105

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

Esta va no provee energa directamente, pero s NADPH que puede constituir una fuente de ATP a travs del flujo de electrones que son transportados al 02 mediante la cadena respiratoria. Su ecuacin general es:
3g1ucosa-6P + 6NADP ~ 2 fructosa-6P + gliceraldehdo-3P + 3CO z + 6NADPH

Adems de las dos vas mencionadas, existen otras alternativas para metabolizar la glucosa, como la de Entnor-Doudoroff y la de la pentosa-fosfocetolasa, las cuales son menos comunes y funcionan en microorganismos especficos.
El ciclo del glioxalato

Muchas bacterias reponen los intermediarios del ciclo Krebs (ATC o CAC)
mediante el ciclo del glioxalato, cuya reaccin es:
~

2 Acotil-CoA

Succinalo

ZH

zeoA

Esta va no ocurre en los animales superiores, porque estos no basan su


alimentacin sobre molculas de dos carbonos, como s sucede en los microorganismos. El succinato y el malato que se forman como se puede apreciar
en la Figura 8, continan con la secuencia habitual de las reacciones del
ciclo del ATe.
Si un organismo crece sobre un compuesto de dos carbonos (CJ. sobre un
cido graso o sobre un hidrocarburo -el cual es degradado inicialmente a
unidades C2- . el ciclo de Krebs no explica su metabolismo, puesto que los
compuestos e 2 no pueden ser convertidos en piruvato, ya que no hay forma

Oxalilcetalo
\ \

ISflcitrato

(4C)

Malalo (4C)

Acetil CoA
(2C)

:6C)

Glioxalato

Asp,rtico

-----.. Succinil CoA _

Porfirinas

Succinato-- \zcares

(2C)

cido graso
Hidrocarburo

______ Oxalacp.t<J lo

(4C)

Resumen
2C,-C,

Figura 8. Ciclo del glioxolalo


Fuente: Bulod<. 1991; Burbano. 1989

106

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

para que el oxalacetato o cualquier compuesto C4 pueda ser producido a


partir de un compuesto C~ por las reacciones del ATe. As. la va por la cual
los compuestos Cl se convierten en C4 se conoce como la desviacin del
glioxalato, para lo cual se requieren dos enzimas adicionales a las elel ciclo
de Krebs (ATe), la liasa Isoctrica y la sintotasa mlica (Figura 8).

Respiracin anaerbica
En el mundo microbiano es posible encontrar algunas especies capaces
de respirar. en ausencia de oxgnno del aire. cuando tionml a su disposicin
otras molculas que sean alternativas de aceptares de electrones como nitrato. sulfato, fumarnto. etc.
El nitrato. que es uno de los ms frecunntes aceptores alternos, s(' convierte a formas ms reducidas ele nitrgeno: N 2 0 y N:. En los microorganismos que realizan esta actividad metablica. el nitrato es reducido l nitrito
por la nitrato-reductasa respiratoria. que cataliza la reaccin acoplando la
reduccin del nitrato con la oxidacin de un citocromo. Observemos la reaccin completa para la oxidacin de la glucosa:
+

UNO,
Nitrlto

N. reclllr:tasa

fJ COl +

6Hp+

12N02 + ATP
Nitrito

El nitrito se acumula el1 el medio y es txico para buen nmero ele organismos; con fmcuencia se realiza la reduccin elel nitrito u xido ntrico.
xido nitroso o nitrgeno en forma gaseosa. El proceso completo se llama
Desnitrifcacin. La secuencia de las reacciones es:

2NO I

---..

2NO e

En comparacin con la respiracin aerbica, la cadena de transporte ele


electrones es !lU1S corta en este proceso y se genera menos ATE Esto significa
que el crecimiento microbiano con el nitrato es menos eficiente que con el
O,,; en la mayora de los microorganismos que realizan la reduccin elel nitr~to. sta se inhibe en presencia del 02'
Todas las bacterias que reducen el nitrato son anaerobias facultativas.
puesto que slo transfieren electrones al nitrato en ausencia de oxgeno. Algunos g!~neros de bacterias que participan en la clesnitrificacin o denitrificacin son: PseUdOmOllQs. Achromobactel'. Rhizobium. Denitrobacillus, etc.
Los hongos no estn asociados con la desnitrificacin.
Los estudios ele la desnitrificacin han cobrado gran inters. por una parte, ante la nncesidad de disminuir las prdidas de nitrgeno en el suelo. pues
los costos de produccin y uso de los fertilizantes nitrogenados son muy

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

altos. Por otro lado, los productos gaseosos de la desnitrificacin como el


xido nitroso (NP) y el xido ntrico (NO), reaccionan y afectan negativamente la capa de ozono que rodea la tierra, lo cual puede conducir a serios
trastornos ecolgicos en la medida que esta actividad prolifere en el planeta.
En otros casos, el aceptor de electrones es el sulfato que es reducido a
cido sulfhdrico (H 2 S). Generalmente, las bacterias reductoras del sulfato
son anaerobias estrictas incapaces de crecer o emplear el O2 , Este tipo de va
metablica lo ilustran las bacterias del gnero Desulfovibrio que oxidan sustratos reducidos como el lactato de sodio y el gas hidrgeno, transfieren electrones al sulfato y lo reducen directamente a sulfuro, as:
2 lactato
donador

SO.= + 4H
aceptar

----.. 2 acetato + 2CO z

+ S + HP + ATP

2 CH,CHOHCOOH + S04=
cido lctico
aceptor
donador

2CH,COUH + 2C0 2 + S2-

4CH,COCOOH + SO.=
cido pirvico
aceptar
donador

2 CH,COOH + HS + 4CO z + ATP

+ HP + ATP

Entre los principales gneros de bacterias que llevan a cabo la reduccin


de sulfatos estn, entre otras, Desulfovibrio, DeslIlfotomacLllum y Desulfomonas. A altas temperaturas los sulfatos se reducen por la accin de CJostridium nigricalls, un anaerobio esporulante. BacillLls megatherium y Pseudomonas zelinski tambin reducen los sulfatos.
La reduccin de nitratos o desnitrificacin, al igual que la reduccin de
sulfatos son procesos de gran significado geoqumico, en ambos disminuye
la disponibilidad de dichos elementos para las plantas y ocurre su transferencia a la atmsfera.
Un ejemplo de un aceptar de electrones orgnico lo constituye el caso del
fumarato, utilizado por amplia variedad de bacterias con este propsito, tales como Vibrio succinogenes que puede crecer con el Hz como nica fuente
de energa, Desulfovibrio gigas, bacteria reductora del sulfato, Escherichia
eoli, algunas especies de Proteus y CJostridium. En esta reaccin el fumarato
es reducido a succinato -caso contrario a lo que acontece en el ciclo de
Krebs- donde el succinato es oxidado a fumarato, como se observa en la
Figura 4.
Otro ejemplo lo constituye la reduccin del CO 2 a CH 4 llevada a cabo por
las bacterias metangenas. Estas - muy importantes en el ciclo anaerbico
del carbono - son un grupo de organismos muy sensibles al oxgeno, se encuentran en los lodos anaerobios, en el tubo digestivo, en el rumen de bovinos y otros rumiantes y en las instalaciones para el tratamiento anaerbico
108

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

de las aguas negras. Es comn que estas bacterias crezcan con el Hz como su
nico donador de electrones y el COz como su nico aceptor de electrones.
Algunos de los gneros de bacterias que realizan este proceso son Methanobacterium, Methanosarcina, Methanospiril1um, etc.
La frmula ms comn de la reaccin que tiene lugar. es:
4H,
+
daador

COl
aceptor

CH, + 2HP + ATP

hidrogenasa

Por otra parte, algunos microorganismos pueden promover la reduccin


del in frrico Fe+:1 mediante una reaccin que puede ser representada as:
Materia orgnica
Donador

Fe.!
+
aceptar

e"

..

nitrato-reductasa

En los suelos bien aireados. la mayor parte del hierro est en estado oxidado. Cuando se suscitan condiciones anaerbicas generalizadas en micrositios (inundacin de los suelos. fenmenos de gleizacin. adicin de abundante materia orgnica e interfase aerobia-anaerobia de los agregados del
suelo). ocurre acumulacin de in ferroso. Entre las bacterias que pueden
realizar este proceso estn anaerobias facultativas como los gneros Bacillus.
Klebsiella, Pselldomonas y anaerobias como las pertenecientes a los gneros
ClostridiuJ1l y Desulfovibrio. Este proceso puede ocasionar la corrosin de
tuberas de hierro. Es muy comn que en condiciones anaerbicas ocurra
adems de la reduccin de fe+\ la reduccin de azufre y la formacin de
cido sulfhdrico. que con el hierro ferroso forma sulfuro ferroso.
Este proceso se observa tambin en muchos organismos que reducen el
nitrato, lo cual ha llevado a que se considere que posiblemente el mismo
sistema enzimtico est involucrado en ambas reducciones.
Otro ejemplo de respiracin anaerbica lo constituye la reduccin del
manganeso. que ocurre por un proceso muy semejante a la reduccin de
hierro. En este caso. el MnOz funciona como aceptar final de electrones en la
cadena respiratoria. Este fenmeno sucede en suelos hidromrficos y en
ambientes pobremente aireados. hacindose ms manifiesto si existen sustratos carbonados para ser metabolizados; tambin la adicin de materiales
orgnicos estimula la reduccin del Mn.
La reaccin se puede esquematizar as:
R-Hz
+
Donador

Mn+<02
Aceptar

Mn+ 2(OH12 + R+2 + ATP

La reduccin biolgica del manganeso es realizada por bacterias como


Thiobacillus thiooxidans, especies de los gneros Bacillus, Clostridium, Micrococcus. PscudOl1lonas y varios hongos.
109

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son B,avo Otelo

En tnninos generales, la cantidad de ATP que puede ser generada por la


respiracin anaerbica es ms baja que aquella que los microorganismos obtienen por la va de la respiracin. Por esta razn, los microorganismos que
realizan esta ruta, para generar la cantidad de ATP necesaria para su desarrollo y reproduccin, deben degradar cantidades considerables de sustrato, lo
cual explica su marcada importancia en las reacciones biogeoqumicas cclicas que tienen lugar a gran escala.

Fotosntesis
La fotosntesis es el proceso biolgico fundamental que permite la continuidad de la vida en el planeta. En trminos cuantitativos, las plantas y las
algas realizan el mayor aporte, sin embargo existen tambin bacterias capaces de efectuar la fotosntesis, aunque su aporte es menor en trminos de la
economa de la naturaleza; a pesar de ello, los estudios acerca de cmo ocurre la fotosntesis bacteriana han permitido profundizar en el conocimiento
del mecanismo de la fotosntesis en general.
El proceso de fotosntesis microbiana ocurre en dos etapas, el resultado
ms importante de la primera de ellas es la absorcin de luz por la clorofila
de los organismos fotosintticos y su conversin en energa qumica en la
forma de ATP.
En la segunda etapa, en la cual no es necesaria la luz, la energa de ATP se
invierte en la fijacin de anhdrido carbnico -ciclo de Calvin- o sea, en la
produccin de materia orgnica. inicialmente hidratos de carbono simples
que pueden ser almacenados como productos de reserva y/o ser utilizados
como materiales estructurales o funcionales de los microorganismos fotosintetizantes (celulosa, lpidos, protenas, etc.). Esta segunda etapa es similar
para las plantas verdes. las bacterias fotoautotrficas y las bacterias quimiautotrficas.
Como se dijo con anterioridad, para que ocurra este proceso de conversin de energa, conocido como fotofosforilacin oxidativa. es necesario que
la energa luminosa sea captada por la clorofila y otros pigmentos. Las bacterias fotosintticas 1 poseen clorofilas diferentes a las de las plantas. tanto en
su estructura como en sus propiedades para absorber la luz. Las bacterioclorofilas absorben la luz en las proximidades de la regin infrarroja (660 a 870
nm), stas no estn contenidas en cloroplastos, sino extendidas en sistemas
membranosos.
1.

Las bacterias fotosintticas pertenecen al orden Rhodospirillales, el cual se divide en tres familias:
Rhodospirillaceae, antiguamente llamada Alhiorhodaceae, se conocen como bacterias prpuras no
sulfreas; Chromatiaceae, antiguamente llamada Thiorhodaceae, se las conoce comnmente como
bacterias prpuras sulfreas y, Chlorobiaceae, llamadas antiguamente Chlorobacteriaceae, se las
denomina bacterias verdes sulfreas. Las bacterias de este orden son capaces de efectuar metabolismo fotolitotrfico o fotoorganotrfico, en forma anaerobia. Se han aislado principalmente en ambientes acuticos.

110

MICROBIOLOGiA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

En la fotofosforilacin oxidativa (fotosntesis), una molcula de clorofila,


al absorber energa luminosa, se excita energticamente y emite un electrn
que es transferido por una cadena de transporte de electrones. anlogo al
sistema de transporte de electrones de la fosforilacin oxidativa. Dicha transferencia de electrones implica una serie de portadores conocidos en conjunto como fotosistema. En esa transferencia de electrones por la cadena de
transporte se establece un gradiente de iones hidrgeno a travs de las membranas. Las membranas fotosintticas contienen ATPasa, enzima que interviene en la sntesis de ATP.1
En todos los fotoauttrofos, el mecanismo quimioosmtico que dirige la
sntesis de ATP es el mismo. sin embargo, hay una diferencia bsica entre las
algas y las bacterias fotosintticas anaerobias en los fotosistemas que emplean para transferir la energa absorbida de la luz a la sntesis de ATP. Las
algas 2 tienen dos folosistemas conocidos como Fotosistema 1 y Fotosistema
II; en las bacterias sulfreas fotosintticas verde y prpuras (anaerobias) hay
un solo fotosislema conocido como Fotosistema 1 o de fotofosforilacin Cclica.
Ellipo de fotosntesis al que comnmente se hace mencin es el realizado por las plantas. algas y otros organismos eu y procariticos. Esta se caracteriza por la formacin de 0l como subproducto; algunos autores la denominan fotosntesis oxignica. Es responsable del oxgeno presente en la atmsfera y ha hecho posible la vicia aerobia en el planeta. Su ecuacin general es:

Energa rad iante


Clorofila o pigmentos fotosintticos
Sistema enzimtico

En este tipo de fotosntesis, el agua aporta el poder.reductor al donar Hz y


al mismo tiempo todo el 0. liberado proviene de ella.
Otro tipo de fotosntesis menos conocida es la llamada fotosntesis bacteriana o anoxignica que se caracteriza porque no produce 02' es un proceso
anaerbico y la reduccin del NADP se logra utilizando el poder reductor de
los constituyentes de los medios anaerbicos donde habitan las bacterias
que la realizan, como H 2 S, H. y otros compuestos orgnicos. Las reacciones
se expresan as:
(CHP).. + 2S + 2HP

Energa lumnica
Enzimas
Bacterioclorofila
1.
2.

Principalmente en ambientes acuticos.


Incluye a las algas verde-azules, cianofceas o cianobacterias.

111

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

La llevan a cabo las familias Chromatiaceae y Chlorobiaceae.


~

COz + 2CH,CH,COOH + HP

(CHpl"

Energa lumnica
Sistema enzimtico
Bacterioclorofila

Este ltimo tipo de fotosntesis anoxignica la realiza la familia Rhodosp irill acna e.
Un caso especial de conversin de energa luminosa a qumica lo presentan las bacterias del gnero HaJobocterium que poseen una membrana prpura que permite tal conversin por un mecanismo diferente a los tratados
para los fotoauttrofos. Dicha membrana contiene bacteriorrodopsina, una
protena cuya estructura es similar al pigmento rodopsina del ojo humano.
Cuando hay oxgeno, estas halobacterias acuden a la respiracin para generar su ATP, pero cuando falta, obtienen ATP mediante una forma de fotofosforilacin. Al recibir luz. la bacteriorrodopsina bombea protones al exterior
de la membrana. estableciendo un gradiente de iones hidrgeno. que conducen a la sntesis de ATP por quimiosmosis. El conocimiento de este mecanismo rlespierta la curiosidad de los cientficos, quienes plantean la posibilidad de su utilizacin en la fabricacin de "chips" para computadores.
Organismos como los que realizan fotosntesis o las bacterias de la nitrificacin que pueden vivir con CO 2 como nica fuente de carbono, se llaman
auttrofos, los primeros son llamados fotoauttrofos. mientras que a las bacterias nitrificantes se las denomina quimitrofas o quimiauttrofas, como se
ver en el siguiente captulo.

Consideraciones generales sobre los procesos


mediante los cuales los microorganismos obtienen su energa
Los microorganismos requieren de energa qumica para poder llevar a
cabo funciones como locomocin, formacin de nuevas organelas, reproduccin, etc., en fin, para ejercer su propiedad de crecimiento. La utilizacin de
esta energa en los organismos vivos implica reacciones de xido-reduccin,
cuya base fundamental es la transferencia de electrones, los cuales no se
encuentran en estado libre sino que son acarreados por sustancias denominadas acarreadores o transportadores de electrones. Estos transportadores se
encuentran al nivel de la membrana citoplasmtica en las clulas procariticas y de las membranas de las mitocondrias en las clulas eucariotas. La
sntesis de ATP est acoplada a las reacciones de transferencia de electrones;
al ATP se lo considera como la molcula energtica primaria de los seres
vivos. sin embargo. es una fuente energtica que debe utilizarse rpidamen112

MICROBIOLOGiA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

te. Para el almacenamiento energtico de largo plazo, los microorganismos


deben recurrir a la formacin de compuestos orgnicos como el almidn,
glucgeno. o a molculas especficas segn el tipo de microorganismo.
Todas las reacciones qumicas de la clula microbiana son catalizadas
por enzimas, las cuales son determinadas por el genoma microbiano y le
confieren a los microorganismos su especificidad metablica.
El metabolismo microbiano comprende aquellas transformaciones tendientes a extraer energa ele los sustratos. transferirla y almacenarla temporalmente en la molcula ele ATP (catabolismo). utilizar esta molcula para
modificar las sustancias tomadas del medio y adaptarlas a las necesidades
constructivas del microorganismo (anabolismo). Las dos fases constituyen
una unidad dialctica y el equilibrio de la vida se debe en buena parte a su
coordinacin precisa.
Los microorganismos utilizan amplia gama de sustratos (fuentes de energa) y de mecanismos para generar ATE Tanto la energa qumica como la
lumnica se emplean para sintetizarlo. Como sustratos pueden servir sustancias orgnicas o inorgnicas e igualmente compuestos orgnicos o inorgnicos pueden emplearse como aceptares de elr.ctroncs. Las vas para la oxidacin de estos compuestos se agrupan en: fermentacin, respiracin, respiracin anaerbica y fotosntesis.
Los microorganismos son extraordinariamente diversos con respecto a la
clase y al nmero de compuestos orgnicos o inorgnicos que pueden usar
como fuente de carbono y energa. Esta diversidad se manifiesta en que no
hay en la naturaleza ningn compuesto orgnico natural que no pueda ser
utilizado como fuente de carbono por algn microorganismo. Esto los convierte en una fuerza ecolgica de extraordinaria importancia.
Los microorganismos que realizan fermentacin pl,leden ser anaerbicos
estrictos o facultativos o aerotolerantes. El proceso de fermentacin le significa al microorganismo baja obtencin de ATP, sin embargo, desde el punto
de vista industrial le significa al hombre la posibilidad de obtener amplio
nmero de sustancias de manera econmica, mediante el trabajo silencioso
de los microorganismos. Como sustratos fermentables se tienen los carbohidratos, cidos orgnicos, aminocidos. excepto los aromticos; las purinas y
las pirimidinas.
Los microorganismos que realizan respiracin son aerobios estrictos o
facultativos. Es un proceso muy eficiente de obtencin de ATP para el microorganismo. El ciclo de Krebs. adems de su importancia catablica. implica
la presencia de molculas intermediarias fundamentales para la sntesis microbiana. Desde el punto de vista industrial, la manipulacin de la respiracin microbiana le permite al hombre la utilizacin de un sinnmero de
113

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

molculas que antes se obtenan a altos costos, como por ejemplo, cidos
orgnicos, protenas, carbohidratos. etc. Desde el punto de vista ecolgico. la
respiracin hace que compuestos complejos como los hidrocarburos saturados, los hidratos de carbono aromticos y alifticos puedan ser degradados y
reciclados.
La respiracin anaerbica, ms restringida. reviste gran importancia biogeoqumica y para la conservacin del ambiente. A diferencia de la fermentacin y respiracin que son compartidas por eucariotas y procariotas. este
proceso slo se roaliza on procariotas. La cantidad de ATP generada es muy
baja. sin embargo. la alta capacidad de degradacin de estos microorganismos compensa la ineficiencia del proceso.
La fotosntesis es el proceso biolgico fundamental que permite la continuidad de la vida en el planeta, mediante ella la clorofila de los organismos
fotosintetizantes absorbe la luz y la convierte en energa qumica (ATP). la
cual se invierte en la fijacin de anhdrido carbnico, o sea en la sntesis de
materia orgnica. Es docir que en la fotosntesis 01 catabolismo y anabolismo
se ligan estrechamente. convirtindose en ejemplo clave de cmo la separacin de estos procesos es ms didctica que real.

Es necesario tener en cuenta quo el metabolismo microbiano, ya sea catabolismo o anabolismo. est inl1uido por condiciones ambientales como pH,
temperatura. humedad. eo,. O" nutrientes. sustancias txicas, etc. Las condiciones ambientales que pue~len ser limitantes para un microorganismo
pueden ser ideales para otro.
La comprensin de los procesos de obtencin de energa por los microorganismos permite explicar parcialmente la accin patognica que ejercen
algunos de ellos sobre plantas, animales y sobre s mismos.

114

CAPITULO IV

Catabolismo y anabolismo
La degradacin y sntesis de molculas
por los microorganismos
Introduccin
En el captulo anterior so observ que los procesos de obtencin de energa para la actividad microbiana, adems de producir ATP proporcionan productos intermedios precursores de otras molculas que requieren los organismos, situacin ilustrada en el caso de la respiracin aerbica -ciclo de
los cidos tric.arboxlicos-. Sin embargo, quedan pendientes interrogantes
como: qu hacen los organismos con esa energa? .cmo llevan a cabo la
biosntesis de sus molculas?, entre otros.
En esta seccin se ilustra mediante ejemplos que la degradacin o escisin -catabolismo- y la construccin o sntesis -anabolismo- de molculas son actividades complementarias, procesos que se separan con fines didcticos pero que realmente son indivisibles y.como tales intgran
una unidad conocida como metabolismo, la cual requiere de un genoma
que confiere especificidad a los organismos -expresada en trminos de
enzimas y capacidad para trabajar sobre algunos sustratos- y de condiciones ambientales que propician o reprimen su accin.
Se pretende que el lector se acerque al concepto de metabolismo microbiano de manera sencilla e integral -sin desconocer su complejidad- en
un esfuerzo que le permitir posteriormente entender las similitudes y particularidades metablicas de diferentes microorganismos.

Catabolismo y anabolismo:
las dos caras de la moneda llamada metabolismo
Como se deca en el captulo anterior, la particularidad ms importante
de un organismo unicelular o pluricelular. es la propiedad de crecer. Para
115

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolcjo De la Torre - Nelson Bravo Otero

ello recurre a los compuestos qumicos del medio exterior, los modifica de
acuerdo con sus n
ron ellos -transformados-,
macromolculas
11
le van a permitir alean?;;
mao y madurez,
pacidad para replcarsc
Desde esta
que realizan los microorga
diferentes sustr;!
jnorgnicos presentes en su
se entiende como llllil
disponer de materias
~nutrimenlos- y de energa para ejercer la propiedad ele crecer, la cual requiere
alto grado de organizacin en los organismos vivos que les permita dirigir las
reacciones qumicas y ensamblar sus molculas en estructuras especficas. A
esta serie ele procesos qumicos que se cumplen dentro de la clula se le
denominJ metabolismo.
catabolismo (del griego
En el metabal
kot!. abajo. y bllrin,
ctos qumicos utilizados
puestos o degradados
de energa y nul
1bma se transfiere yalml[(;llil
ms sencillos y I
A su vez, los nutrimen
mente dentro de
energa generadus, son tomados por la clula y transformados en nuevo material celular. Este proceso se conoce como anabolismo o biosntesis (del griego
nnobol. que significa progresin). El anabolismo y 01 catabolismo estn ligados n timamun le y consti tu yen una II nielad, cuya coordinacin precisa se
torna en eje de equilibrio de las funciones vitales del organismo.

Qu nutrimentos
Nuestras mo
H, 0, N, P Y S. En
culas del hombre,
decirse que somos
de una clula correspullde

microorganismos para
J

Ll

es se caracterizan por la
emento mayoritario de
plantas y los microorgJn
C. Normalmente, el 50

C.

Despus del carbono, el nitrgeno es el elemento ms abundante, puede


representar h8sta 0112% del peso seco de una bacteria. Es componente fundamental de aminocidos, protenas, ATP, ADN Y ARN, entre otros. El H Y O
bsicos para la construccin de macro y micromolculas provienen del agua,
de procesos de oxido-reduccin de compuestos orgnicos y del O:,,
Al nivel celu
males. el agua representa
peso hmedo y.
96% del peso seco I
macromolculas
Iisac:i:ridos, lpidos y cidos
quiere decir qw,
(;1 3;\) est representad
molculas -amn
, llicletidos y sus precu
por iones inorgnicos como P, K, Ca, Mg. S. Fe, Zn, Mn, Cu, Mo, Ca, Ni, Se, V,
entre otros, segn las necesidades de cada organismo.
116

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Adems de macromolculas, pequeas molculas orgnicas. macronutrientes (P, S,K,Mg, Ca, Na, Fe) y micronutrientes (Zn, CUt Mn, Mo, Co. etc.),
los microorganismos precisan tambin de factores de crecimiento,los cuales
son compuestos orgnicos. Al igual que los micronutrientes, son requeridos
en pequesimas cantidades y slo ror algunas clulas. Pueden ser vitaminas, aminocidos, purinas y pirimidinas, entre otros, que normalmente son
sintetizados por el mismo microorganismo o tomados del medio ambiente.
Entre las vitaminas estn el cido flico, biotina, cobalamina (vitamina Bu),
niacina, cido pantotnico, tiamina (vitamina B I ), quinonas, hidroxamatos,
etc.
En trminos generales, estas son las necesidades nutricionales que los
microorganismos deben suplir a partir de los productos qumicos exteriores
(sustratos orgnicos e inorgnicos) en unas condiciones ambientales dadas y
las que se deben llenar en el caso de cultivar los microorganismos en ellaboratorio.
Alternativas nutricionales en los microorganismos

Teniendo en cuenta las fuentes de energa y de C que utilizan los microorganismos para derivar su alimentacin -trofos-. stos se han agrupado
en fottrofos, cuya fuente de energa es la luz, y quimitrofos, que la derivan
de la degradacin de compuestos qumicos.
Si el C lo obtienen del CO~, son auttrofos -tambin se los conoce como
Iittrofos o litoauttrofos-. En caso de provenir de materiales orgnicos,
entonces son hetertrofos u organtrofos. El Cuadro 1 ilustra las alternativas
metablicas a disponibilidad de los microorganismos. Como se puede observar, algunas de dichas alternativas metablicas slo son factibles y se conocen en el mundo microbiano, en particular en las bacterias y en el dominio
de las Archaea y sus ambientes.
En la medida que se profundiza en el conocimiento de los tipos nutricionales se han encontrado situaciones particulares, como es el caso de algunas
bacterias quimiolittrofas que tienen capacidad de asimilar compuestos orgnicos como fuente de C, usando oxidaciones de compuestos inorgnicos
para obtener energa, se las conoce como mixtrofas -la bacteria del azufre
Beggiatoa es un ejemplo de mixotrofa-, situacin que les confiere \'entaja
ecolgica al utilizar compuestos orgnicos e inorgnicos simultneamente.
Qu condiciones ambientales se requieren
para que los microorganismos realicen su metabolismo?
Ya sea en la naturaleza o en condiciones de laboratorio, las propiedades
fsicas y qumicas del ambiente tienen influencia marcada sobre el crecimiento de los microorganismos como individuos aislados o interactuando
en comunidades.
117

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

CUADRO 1: ALTERJ\IATIVAS NUTRICIONALES DE LOS MICROORGANISMOS, DE ACUERDO


CON LAS FUENTES DE ENERGA Y DE C QUE PUEDEN UTILIZAR.

Tipo

Fuente
de energa

Fuente de C

Microorganismos

Fotlrofos
Fotoaultrofos, o
fotolitlrofos o foloti toau ttrofo.

Luz

Foloorganotrficos
(fotohelerlrofos).

Luz

CO 2

Compuestos
orgnicos

Cianobaclerias, algas -verdes.


pardas. rojas- Chromotium.
Las Rhodospiri/loceae. Chromaliaceae y Ch/orobioceae cuando
utilizan fuentes inorgnicas de
C. Fuera del mundo microbiano, las plantas.
Rhodopsel1domonas, en general
las Rhodospirillaceae (bacterias
prpuras no sulfreas). Chromaliaceae (bacterias prpuras sulfreas) y Chlorobiaceae (bacterias verdes sulfreas), cuando
utilizan fuentes orgnicas de C.

Quimitrofos
Quimioaultrofos Oxidacin de
(quimiolittrofos o compuestos
quimiolitoaultro- inorgnicos
fos).

COz

Bacterias nitI'ificantes: Nilrobacler, Nilro!:>pina, Nilrococcus,


Nilrosomonns, Nitrospira, NitroSOCOCCIlS y Nitros%bus.
Bacterias del hidrgeno: Hydrogcnomonas.
Bacterias oxidantes del azufre:
Thiobacil/us. Beggiatoa, ThioIrix, 5u1f010bus, etc.
Bacterias que depositan Fe u
xidos de Mn: familia Siderocapsaceae.

Quimioorgan- Oxidacin de
trofo (quimiohele- compuestos
rtrofo).
orgnicos

Compuestos Hongos. bacterias como Escherichia, Pseudomo/las, Xonorgnicos


IholTlo/lGs. Bacilllls, etc., y protozoos. Este tipo de nutricin lo
presentan el hombre y los animales.

Adaptado de: Pelczar. Reid y Chan. 1982; Burbano. 1989; Snchez de P. y Pineda. 1996 y Madigan.
Martinko y Parker. 1999.

118

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Dentro de los factores que afectan significativamente el metabolismo microbiano estn la temperatura, disponibilidad de agua, presencia de 02' pH Y
luz, entre otros.
A medida que la temperatura se incrementa, aumenta la velocidad de las
reacciones enzimticas, por tanto el metabolismo microbiano y el crecimiento se hacen ms rpidos. Esto es vlido hasta cierto punto, pues existen lmites de temperatura por encima de los cuales los cidos nucleicos, protenas y
otros componentes de las clulas microbianas pueden sufrir daos irreversibles. Dichos lmites varan dependiendo de las especies, as, hay temperaturas mnimas y extremas que si se superan, impiden el crecimiento y la temperatura ptima que favorece el desarrollo de cada microorganismo.
Se encuentran microorganismos capaces de crecer en ambientes que alcanzan temperaturas bajo cero, algunos a temperaturas bajas entre 5 - 100 e y
otros que soportan 100 0 e y ms. Aquellos microorganismos que crecen en
condiciones extremas -llamados extremfilos por algunos investigadoresacuden a diferentes adaptaciones moleculares que les permiten prosperar en
dichos ambientes.
De acuerdo con su temperatura ptima, los microorganismos se han agrupado en psicrfilos, cuyas temperaturas estn por debajo de ooe y la ptima
de crecimiento de 15e o menos; mesfilos, con temperaturas ptimas entre
25 y 40 o e; termfilos, con temperaturas ptimas superiores a 45e e hipertermfilos, aquellos cuyo ambiente ptimo supera los 80C. Esta ltima categora se localiza en hbitats limitan tes para la mayora de los organismos
vivos, como son los giseres, fuentes hidrotermales abisales y en hendiduras
encontradas en perforaciones profundas de la corteza terrestre; los termfilos, en aguas termales superficiales; los psicrfilos en ecosistemas fros como
las regiones nevadas, zonas como el rtico y el Antrtico, siempre que dispongan de agua en forma lquida, y los mesfilos predominan en ambientes
tropicales y templados (Figura 1).
La temperatura ptima del psicrfilo Polaromonas vacuolata es de 4e y
por encima de 12C es incapaz de desarrollarse. Escherichia coli, nuestro
simbionte intestinal, es un ejemplo de mesfilo, cuya temperatura ptima en
el tracto digestivo es similar a la del cuerpo humano, es decir, 37e; en medios de cultivo ricos y complejos, sta es de 39e, la mxima de 48e y la
mnima de 8C. Pyrolobus fumarii, ejemplo de hipertermfilo, crece mejor
en ambientes con temperaturas de 105e y llega a soportar 113e, sin embargo a temperaturas menores a gOoe no crece. Metanopyrus sp es otro hipertermfilo que habita en las chimeneas volcnicas.
Al igual que la temperatura, cada microorganismo tiene un rango de pH
que posibilita su crecimiento ptimo. Hay que separar el pH interno de la
119

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

clula, el cual debe estar siempre cercano a la neutralidad, independiente


del exterior. y el pH del medio extracelular.
Son pocos los microorganismos que crecen a pH extremos inferiores a 2 o
mayores de 10. Aquellos que proliferan en ambielltes con pH entre 6 y 8 se
les denoll1ina neutrfilos y son comunes en los medios naturales que presentan esta caracterstica; aquellos que crecen a valores inferiores a 6, se distinguen corno acidfilos. Los hongos tienden a soportar mejor las condiciones
de acidez que las bacterias, sin embargo, muy pocos prosperan a pH 2. Aunque generalmente las bacterias se localizan corno neutrfilas. hay tambin
acidfilas, algunas COIl carcter obligado como ThiobocillllS, Sulfoloblls y
Thermoplnsmo. (jue no pueden crecer a pH neutros pero lo hacen en condiciones ptimas a pH inferior a 2.
El pH ptimo para los microorganismos alcalfilos est entre 10 y 11.
Estos se encuentran en suelos y lagos con altos contenidos de carbonatos. La
mayora se ha registrado dentro del g nero Bocillus, tal vez por la propiedad
de formar endosporas. Algunos de ellos son tambin halfilos, corno es el

Figura J. Allluienl," nl/tlimf'~ qUE' pmp/clUJJ lo pre6enc ia cite! d//P/f'n/f's g/l/pOS de micmorgnllislllos 01 F/lf'IIIf'., len/lnles de ['/silllhnl fdepor/cIlJlen!o ripl l,allca). bl npducto sel
vot[(:n de la Costo ['([ci!l('([ 10'/1 f'1 departamento del Vo/l e. el Suelos ,([linOS del Vallp dpl
Cnurll v. di /I/JJ/J/cnll' Ilcurtu'() del df'pllrtomeJJlo rif'1 COllCU.

120

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

caso de Natranobacterium gregoryi. Muchos de estos microorganismos alcalfilos se han utilizado con fines industriales, pues producen proteasas alcalinas que pueden emplearse como suplemento para los detergentes.
Los procesos metablicos de los organismos ocurren en un ambiente acuoso lo que hace que la vida est ligada a la presencia de agua lquida, cuya
disponibiJidad no slo depende elel contenido dol ambiente, sino tambin
de la concentracin de solutos en ella. Dicha concentracin va a definir que
el agua difunda hacia el interior -turgencill- o exterior de la clula, plasmlisis. Los microorganismos halfilos son capaces de crecer a concentraciones de cloruro de sodio entre 1 y 30{" localizndose en este nxtremo
aquellos fuertemente halfilos como Haloferax volmnii. Tambin hay organismos que crecen en elevadas concentraciones de azcar -osmfilos-,
otros que se desarrollan en ambientes con escasa agua disponible -xerfiJos
e hidrfilos- que se tornan inactivos cuando la tensin de agull es superior
a 7."1 megapllscales (= 71 atm). En ambientes como el suelo, la mxima actividad de los microorganismos ocurre n tensiones entre 0.01 y 1 megapascales.
Dependiendo de la clisponibilidnd de ngua, los microorganismos acuden
a diferentes estrategills que les permitan obtener agua del ambiente, como
por ejemplo, incrementar la concentracin interna do sustancias muy solubles en ngua -solutos compatibles- tales como aZl1cares (sacarosa, trehalosa), poli alcoholes (glicerol, manitol), aminoncidos y derivados (glicocola betana, ectona y prolina, entre otros) y en caso de ambientes snlinos extremos, al in K+.
Los microorganismos varan en sus necesidades de O 2 , Los aerobios crecen en tensiones de oxgeno total normales en el aire (21 %) y algunos son
capaces de soportar concentraciones ms altas. Dentro de este grupo estn
los microaeroflicos que requieren su presencia, pero las concentraciones
deben ser menores a las del aire. Los anaerobios, por el r:ontrario. no utilizan
esta molcula como captadora final de electrones: algunos de ellos, a pesar
de no emplear el 0l en su metabolismo pueden crecer en su presencia por lo
cual se los denomina aerololerantes, mientras que para otros es letal, es el
caso de los anaerobios estrictos, los cuales perecen en atmsferas aerbicas
posiblemente por su incapacidad enzimtica para degradar algunos derivados que se producen en la reduccin del oxgeno hasta agua durante la respiracin, talos como el perxido ele hidrgeno (agua oxigenada H~OJ, superxido (O~-) y radicales hidroxilo (OR). Los perxidos pueden dafiar los componentes celulares, siendo ms txicos los O 2 - y radicales hidroxilo.
Los organismos aerobios. a diferencia de los anaerobios estrictos, estn
equipados con enzimas capaces de degradar estos productos txicos. La ms
conocida es la catalasa que degrada el perxido de hidrgeno, al igual que la
121

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

peroxidasa. Ambas tienen en comn que dan origen a agua, y como diferencia que la actividad de la catalasa libera O~, as:
-----I
.~
.

2 HP + O~ (forma burbujas)

cata lasa
-----1)00
...

HP + NAO'

peroxidasa

El superxido es degradado por la enzima superxido dismutasa, la cual,


en trabajo combinado con la catalasa, puede reconvertir los superxidos a
oxgeno. Los aerobios y aerobios facultativos generalmente contienen estas
dos enzimas; la superxido dismutasa es fundamental en los microorganismos aerbicos y su carencia en los anaerobios estrictos hace que el oxgeno
sea mortal para ellos.
Entonces. en general se puede decir que dependiendo de sus necesidades de oxgeno, los microorganismos pueden agruparse en aerobios estrictos
u obligados, aerobios facultativos, microaeroflicos. anaerobios estrictos y
aerotolerantes.
Muchos microorganismos aerobios facultativos pueden degradar un mismo sustrato por la va de la respiracin y el de la fermentacin. Un ejemplo
bastante conocido -que se utiliz en el captulo anterior- es el de las levaduras Sachal'Omyces cerevsiae, que si se cultivan en condiciones anaerbicas fermentan la glucosa a alcohol y COz. mientras que si su crecimiento
ocurre en presencia de 0z' respiran la glucosa oxidndola completamente
hasta COz.
La respiracin y la fermentacin microbianas, adems de la funcin metablica que cumplen naturalmente, pueden ser utilizadas por el hombre
con fines industriales. El vino, al igual que la cerveza, whisky, vodka, ron,
ginebra, sake y chicha son aplicaciones prcticas del metabolismo fermentativo, mientras que cidos orgnicos, aminocidos, etc., son producidos mediante manipulacin del metabolismo respiratorio microbiano.
Pruebas sencillas de laboratorio, como la aplicacin de agua oxigenada
(H 20J sobre el cultivo puro de un microorganismo, su crecimiento en sustratos azucarados en condiciones aerbicas y/o anaerbicas controladas y la
degradacin de almidones, son indicativos de la presencia de enzimas de
diferente naturaleza y la capacidad de diversos microorganismos de realizar
o no, esta o aquella actividad metablica, dependiendo de la informacin
gentica que posean (Figura 2).

122

MICROBIOLOGiA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

(b)

3()7

Testigo

P. () IF

314

.t\MILASA
Figura 2: Ild ivir/udfS ('nZlm/ic(J:; ~Il lfi/un:nlp" llIicroolgonismos: o) A/ ogrcgar aguo
OXigflluclu u /0 mups/m rif I;uclerjas l/e /0 i2(]ui~:rclo, se observo que posee /u enZl mo
colo/uso y /u C/-, /0 111'['('(;/)([ 110, /1/ E/ c rcciJl1i r~ 1I10 d-, lwc/crias PIl ll/pdios ricos en glucosa ,
[lfl'l1litc co ncluir IJLIe /11 !1C!c/priu 170 elcgrodo p/ ll/ pelio en condicion es aerbicos, mienIms qlw /0 J 73 lo lin cE' en presenciu v ousencio dI" oXfjPno, es elecir, es aerbico jo(;u/lo/ivo c) Lo [;n c lerill 307 pospe /(1 enzill/o ullliloso y dpgmdo un suslro l o rico en almieln, en
C(IJ)I/ io, /0 ho c/I'r :)1';, (J/ no /elle r -,slo enzima no lien e CllfJoc idod ele u/i/izorcs toju ente
de energio,

Ejemplos de metabolismo microbiano


Procesos catablicos, escisin o descomposicin de sustancias

Catabolismo de carbohidratos
C ualqui er s us lanci:l que ocurra naturalmente puerle ser degradada por
una o varias espe c ies mi crobianas, las cuales, como se afi rm con anter ioridad, la utilizan parrl derivar su energ a para sus funciones vitales y obtener
mol c ulas ms simples que lAS s irv an de pi ezas fundamentales para la fab ricac in de sus componentes r.c1ulares especficos ,
Los nutrientes y la cantidad d e ene rgrl que provea una sustancia van a
d epender de lo qu e e lla contC!nga y de Irls co ncli ciones amb ien tales en las
r.uales ocurra s u d egradacin por pa rte de los microoorgmis mos , As se po123

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

dran analizar un buen nmero de sustratos al nivel de la naturaleza y en


condiciones de laboratorio. Tomar los tejidos vegetales que llegan al suelo y
se convierten en fuente de nutrimentos para los microorganismos puede servir para ilustrar la degradacin o catabolismo de sus componentes.
El Cuadro 2 ensea las macromolculas que estn presentes normalmente en los tejidos vegetales. La degradacin de los disacridos (sacarosa, lactosa), trisacridos (rafinosa) y polisacridos (celulosa, hemicelulosa) por hongos y bacterias ocurre en el exterior de los microorganismos, quienes excretan sus enzimas (exocelulares) al medio. Mediante reacciones hidrolticas,
estos compuestos son degradados a sus componentes ms simples -monosacridos- como la glucosa, as:
hemicelulosa + HP

celulosa + HzO

..
hemicelulasa

-----'lI
...
~

azcares simples
cidos urnicos

celobiosa

celulasa
celobiosa + HP

.. glucosa
13 - glucosidasa

sacarosa + HzO

Aerobios CO 2 + HP + ATP
Anaerobios CO 2 + Ac. orgn. + ATP

.. glucosa + fructosa
sacarasa

almidn + HP

----~
..~

maltosa

alfa amilasa
maltosa + H 2 0
(J.. -

.. glucosa
glucosidasa

CUADRO 2. COMPOSICIN MEDIA DE LOS TEJIDOS VEGETALES

Macromolcula
Carbohidratos

Lignilla
Celulosa
Hemicelulosa
Azcares (hexosas y pentosas)
Protenas y compuestos nitrogenados
Ceras, grasas, taninos
cidos orgnicos, pigmentos y otros

%
30 -75
10 - 30
20 -50
10 -30
1 -5
1 -15
1 -8
5 -20

Fuente: Siqueira y Franco, 1988; Gmez Z. y Snchez de P. 2000.

Cada una de las molculas analizadas es descompuesta por microorganismos especficos. As, sobre la celulosa actan bacterias aerobias: Cellulo-

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

monas, mixobacterias -Cytophaga-, bacterias anaerobias y termoflicas


-Clostridium, Ruminoeoeeus-, actinomicetos -Streptomyees y Noeardia-hongos filamentosos -Aspergillus, PeniejJJillm y n'iehoderma- y protozoarios como Hartmanella. Algunos microbios de estos gneros pueden
tambin degradar almidn como los actinomicetos citados, Clostridium y
Aspergllus, a los cuales se suman Baellus, Pseudomonas y Fusarium, entre otros.
Molculas como la hemicelulosa y celulosa, insolubles en agua, son degradadas hasta glucosa -la cual es soluble-o Esta ltima penetra a la clula microbiana donde es consumida como fuente de energa para lo cual es
atacada por las enzimas endocelulares microbianas. La mayora de los microorganismos hetertrofos utilizan esta molcula, pero la forma como la
degradan depende del contenino enzimtico de las diferentes especies, es
decir, de su genoma.
La degradacin de la glucosa por los difflrentes organismos que la usan
como fuente de energa sigue el esquema general de la gluclisis y/o sus
modificaciones, pero a partir del piruvato se pueden originar gran variedad
de molculas, sin embargo, ninguna especie microbiana es capaz de producirlas todas. La Figura 2 del captulo anterior da ejemplos de esta naturaleza.
Catabolismo de protenas y otros compuestos nitrogenados
La degradacin de las protenas de origen vegetal y animal provee de
aminocidos esenciales a los microorganismos. Al mismo tiempo. la protelisis es el inicio de la mineralizacin del nitrgeno que hace posible la
presencia de amonio y nitratos. formas disponibles de N para los auttrofos
y quimiolittrofos.

Las protenas son demasiado grandes para atravesar la membrana celular de los microorganismos, por lo tanto su digestin ocurre por enzimas
exocelulares. Entre los organismos proteolticos se conocen bacterias -Pselldomonas, Baeilllls, Clostridium, Sel'rotia, ProtclIS y Mieroeoeeus-, hongos
-Alternara, Penieillium, Aspcl'gillus, Mueor, Rhizopus y Cladosporiumy tambin los actinomicetos.
La hidrlisis de las protenas ocurre as:
Protena + HzO

polipptidos + H:P

proteasas

aminocidos

peptidasas

Los aminocidos pueden ser incorporados a las clulas microbianas como


unidades para la construccin de sus propias protenas o ser degradados a
formas ms simples, mediante diferentes reacciones:
125

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

desaminacin oxidativa
R-CHNH 2 COOH + 1/2 O 2

R-COCOOH + NHI

..

desaminasa
proceso que puede estar unido a una descarboxilacin:
R-CHNH 2 COOH + O 2
....
R-COOH + COz + NH
desaminasa

desaminacin hidroltica
R-CHNHzCOOH + HP
.. R-COHCOOH + NH
desaminasa
tambin puede ocurrir descarboxilacin:
R-CHNH.rOOH + O 2

..

R-CHzOH + COz + NHI

desaminasa y descarboxilasa

clesaminacin rcductiva

---4......

R-CH 2 COOH + NH

desaminasa

Puede ocurrir la descarboxilacin del cido graso:


R-CH COOH
.... COz + R-CH,
descarboxilasa
desaminacin directa
R-CH;CH NH L COOH
..... R-CHCHCOOH + NH
desaminasa
desaminacin oxidativa-reductiva, en la cual un aminocido sirve de
donador ele hidrogcniones y otro de aceptar ele ellos.
R-CHNHCOOH + 2HP +
R-CHNH 2 COOH
.. R-CO-COOH + NH + X -CHzCOOH
desaminasa

transaminacin: es una reaccin importante en el metabolismo de los


aminocidos. en la cual un grupo amino de un aminocido se transfiere a
un ceto-cido. por ejemplo la transaminacin del cido glutmico en cido asprtico:
HOOCCH,CH, NH ,COOH + HOOCCOH COOH
cid~ gl~tm(co
cido oxalactico

....
transaminasa

HOpCCH z -CH -COCOOH + HOOCCHNH zCH 2 COOH


Acido cetoglutrico
cido asprtico

En la descomposicin de nucleoprotedos por hidrlisis se obtienen bases nitrogenadas y protenas, as:


126

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Nucleoprotedos

peor"'

Nuclena

Acidos nucleicos

protelnas

Aminocidos

I
. l.
Adenina tlmlna

. l.

guaI1lna cltoSlna

I
poi 4"

La degradacin de aminocidos azufrados como la cistina, cistena, metionina, en condiciones anaerbicas produce cido sulfhdrico, mercaptano
y metilmercaptano, los cuales se caracterizan por olores desagradables. En
estas mismas condiciones ambientales, los aromticos como el triptfano,
originan cido indolactico -escatol e indol- que junto con los anteriores
participan en la produccin de los olores propios de las putrefacciones. Es
conveniente tener en cuenta que el cido indolactico tiene efecto estimulante sobre el crecimiento de las races de las plantas. En condiciones aerobias, la descomposicin de estos aminocidos finalmente produce amonaco, sulfato. anhdrido carbnico y fosfatos.
Degradacin de la urea
Esta molcu la es utilizada como fertilizante. sin embargo, tambin se
encuentra en las excreciones de los animales y cuando se descomponen las
bases nitrogenadas de los cidos nucleicos. Diferentes hongos, bacterias y
actinomicetos poseen la capacidad de degradar la urea:
CO(NH)2 + HP

---~~
...

CO c + 2NH,

ureasa

El metabolismo de la urea es aerbico pero puede ocurrir en condiciones


anaerbicas ya que la ureasa es una enzima exocelular que puede ser retenida por el suelo. El amoniaco resultante de este proceso ocasiona cambios en
el pH del medio (lo alcaliniza).
El principal producto de este proceso y en general de la descomposicin
de los aminocidos es el amoniaco, que puede ser tomado por las plantas y
por los microorganismos. u oxidado a nitratos mediante el proceso llamado
nitrificacin, que se ilustr en el captulo anterior, como ejemplo de respiracin aerbica de sustratos inorgnicos.
Del catabolismo de los aminocidos. adems del nitrgeno. quedan los
esqueletos de carbono, los cuales entran al ciclo de Krebs. Esta incorpora127

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolefo De fa Torre - Nelson Bravo Otero

cin puede ser por diferentes vas como por ejemplo acetil-Coa, a-cetoglutarato, sllccinato, fnmarilto tI oXillaCf~tato_
Catabolismo
Los lpidos
damentales de las
y tambin son
lrwteriales de reserva de mi
Los triglicridos
de glicerol y cidos grasos.
en el caso de los carbohidratos com pIejos y las protenas, su degradacin
ocurre por enzimas exocelulares llamadas lipasas, formndose glicerol y cidos grasos libres.

El glicerol es metabolizado por los microorganismos por la va conectada


con la degradacin de los carbohidratos. El fosfato de dihidroxiacetona se
metaboliza por
Glicerol + ATP

---------':~

\[)P + a-glicerol fosfato +

ci

fosfato de dihidroxiacefona

+NAD

glicerol

ti

Los cidos grasos son oxidados removindose sucesivamente fragmentos


de dos carbonos en forma de acetil-CoA, que entran al ciclo de Krebs, y los
tomos de hidrgeno o sus electrones correspondientes pasan a ser parte de
la cadena respiratoria que lleva a la fosforilacin oxidativa.
En sntesis, los productos finales del catabolismo de las grasas son cidos
grasos, cido actj
, valerinico y butrico, los
ciones aerbicas
anhdrido carbnico
que en ausencia
mulan o transforman en
orgnicos como
cuyo metabolismo se
lante.

Catabolismo de hidrocarburos
Entre los compuestos orgnicos difciles de descomponer estn los hidrocarburos debido a que pocos microorganismos pueden utilizarlos como
sustratos, entre ellos, Pseudomonas, Mycobacterium, Nocardia y algunos
hongos. Cuando se trata de hidrocarburos alifticos de cadena larga como el
hexadecano y el
descomposicin ocurre en con
bicas. Estos
en condiciones anxicas
yen la base de
eo. Los alifticos no Siltll
ser degradados
Los hidrocarbmos
condiciones naturales
balizados en condiciones aerbicas o anaerbicas y requieren de la presencia de oxigenasas. Por la primera va se obtienen inicialmente productos sim128

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

pIes como protocatecuato o el catecol que continan degradndose a formas


ms sencillas que posteriormente entran al ciclo de Krebs como succinato,
acetil CoA o piruvato. En condiciones anaerbicas o anxicas los intermediarios -cidos grasos o dicarboxlicos- se descomponen hasta acetil-CoA
que puede entrar al ciclo de Krebs o ser precursores para procesos anablicos como se ver ms adelante.

El metano: El hidrocarburo ms sencillo


Dentro del ciclo del C, el metano (CH 4 ) reviste inters pues se vislumbra
como biocombustible de amplio uso en el tercer milenio, junto con el metano1. La produccin de esta molcula la realizan microorganismos clasificados como Archaea, ubicados en gneros como Methanobacterium, Methanococcus y Methonosarcino, entre otros.
Los metangenos hacen parte de los organismos vivos ms primitivos de
la tierra ya que pueden crecer en forma auttrofa con base en H 2 y CO 2 en
condiciones anaerobias estrictas, aparentemente las predominantes en la atmsfera primitiva del planeta.
Como se estudi en el captulo anterior, estos microorganismos obtienen
su ATP por respiracin anaerbica, utilizando CO 2 como aceptar de electrones y H. como donador, reducindolo a CH 4 , en un proceso llamado metanognesis.
4 Hz + CO 2 ~ CH. + 2 HP

Son escasos los compuestos de carbono que son precursores directos de


la metanognesis, entre ellos, metanol, CHpH; el formiato, HCOO-; metilmercaptano, CH:SH; el acetato CH, COO- y las metilaminas pueden convertirse en metano. Estas molculas son producidas por diferentes microorganismos a partir de materia orgnica compleja, en ambientes anxicos, como
pantanos, zonas encharcadas, micrositios anaerbicos que se presentan entre las partculas del suelo, biodigestores, el rumen, tracto intestinal de mamferos, insectos que se alimentan de madera, endosimbiontes de amebas y
flagelados, entre otros.
Es as como a partir de polmeros de elevado peso molecular -polisacridos, protenas y grasas-la actividad conjunta de diferentes microorganismos conduce a la formacin de CH 4 La Figura 3 resume los procesos anxicos -fermentacin y respiracin anaerbica- que dan origen a CH4 Como
se present anteriormente, las bacterias celulolticas degradan la celulosa a
celobiosa y sta a su vez a glucosa, a partir de la cual se producen diversidad
de molculas: acetato, propionato, butirato, succinato, alcoholes, H 2 y CO 2
La totalidad del H2 producido en estos procesos fermentativos la consumen
las bacterias metanognicas, homoacetognicas o reductoras de sulfato. Fue129

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

ra de ello, como se observa, el acetato puede ser convertido en motan o por


algunos microorganismos metanognicos.
Las bacterias que degradan cidos grasos y alcoholes para obtener ATP
producen abundante Hl que se convierte en limitante para su crecimiento.
situacin que es superada en la naturaleza asocindose con microorganismos consumidores de Hz -como los metangenos o bacterias reductoras de
sulfato--. A esta relacin se la denomina sintrofa, que significa comiendo
juntos y el gnero Syntrophomonas es un ejemplo de degradaclor de cidos
grasos con produccin de acetato, COl y Hz, los cuales pueden ser consumidos por las arqueas metanognicas o tambin por bacterias reductoras de
sulfato.
En la conversin anaerhica de polmeros complejos a metano, exceptuando las bacterias celulolticas, los otros grupos microbianos que intervienen dependen unos de otros, chndose una transferencia de electrones entre
especies. que se ha denominado transferencia interespecfica de hidrgeno
que conduce a la formacin de CH .
As como el CH 4 se acumula para que algunos microorganismos puedan
obtener su ATP mediante la metanognesis. tambin hay otros que son capaces de degradarlo con fines energticos (Figura 3). En su oxidacin interviene la enzima metano monooxigenasa:
CH. _ _ _ CH,GH _ _ _ HCHO _ _ _ _ HCOO _ _ _ HCO" _ _ COz
Melanol
forma ldehdo
formiato
bicarbonato

Las bacterias oxidadoras del metano o metantrofas, son aerobias estrictas, en el cicJaje del carbono se encargan de convertir este compuesto en
material celular yen CG.,; algunos gneros de ellas son: MethyJococcus, MethyJocystis, MethyJobactf!I: etc.
Catabolismo de otras molculas: La lignina
La lignina es un polmero aromtico complejo, componente mayoritario
de la madera, estructuralmente relacionado con muchos compuestos que
causan problemas de contaminacin en suelos; es tambin fundamental para
la formacin de humus en el suelo. Este polifenol complejo apnrentemente
es estable a la degradacin anaerbica y se descompone mediante la accin
microbiana en condiciones aerbicas:
.. fenoles + alcohol coniferlico
fenoloxidasa, lacasa, lignina-pcroxidasa
+ alcohol sinaplico + alcohol paracumarlico + otros polifenoles
+ hexosas + pentosas.

Lignina

130

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

lJilcterias celulolticas

'! otras hidrolticas

Hidrlisis

Monlmcros
(Azcar, aminocidos)

H, + ca,

Acetato

Fermentacin

(propionato, succinato,
lmtirato, alcoholes)

I
Homoacetgellos

Bilcterias uxidantes de
cidos grasos y productores
de H, (sntrofos)

Acctogp.llesis

Atetillo

I
I

Melilngenos

Acetillo

H,+ CO,

I
Metangenos

Figura 3: Formacin .v degradacin del mutano, a travs de /a accin de microorganismos me/ol1ognieos y me/untrofos.

Procesos anablicos, de construccin o biosntesis microbiana

La biOSntosis en los microorganismos permite que estos construyan las


molculas pequm1as y macromo]culas que los integran y las cuales requieren para realizar su crecimiento. Aquellas pequeas pueden encontrarse libres en el citoplasma o constituir parte de las ms grandes. Estas molculas
pequeas comnmonte son las mismas en organismos diferentes. Las macromolculas, por el contrario, son diferentes y confieren las caractersticas que
distinguen a un microrganismo de otro, hasta el punto que la diversidad de
organismos es un reflejo de la extensa gama de macromolculas que se encuentran en la naturaleza.
Algunos organismos como los fotoJittrofos son capaces de elaborar sus
componentes celulares -pequeas y rnacromolculas- a partir de COz. HzO
131

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

y energa solar, mientras que otros deben recurrir al medio externo para obtener las molculas pequeas que no pueden construir y que son bsicas para
fabricar sus macromolculas. Estas ltimas se construyen siempre al interior
del organismo y caracterizan cada especie.
En general, se puede afirmar que para hacer sus macro y pequeas molculas, los microorganismos refJuieren de energa, la cual es suministrada
por el ATP y de piezas o molculas simples, que ensamblan, dependiendo de la informacin gentica del microorganismo. Esos componentes simples son intermediarios que se forman durante el catabolismo y que pueden ser usados para la obtencin de ATP o para procesos anablicos. La
Figura 4 mu es tra estos intermediarios o precursores, los cuales se originan
en la gluclisis y en el ciclo de Krebs.
Aunque estos precursores o intermediarios pueden ser utilizados con
fines catablicos y/o anablicos, la va qumica en la biosntesis de una
molcula, normalmente no es igual a la que se sigue para su catabolismo, y
aunque puede haber corredores metablicos con varios pasos idnticos vas anfiblicas - normalmente hay por lo menos una o varias reacciones
enzimticas que son diferentes en las reacciones de biosntesis y de descomposicin. Estas diferencias aseguran la permanencia de molculas constituyentes de estructuras biolgicas estables.
Adems, la biosntesis microbiana al requerir ATP est ligada obligatoriamente con la desintegracin de esta molcula, cuyo proceso es exergnico
e irreversible en la direccin del anabolismo. Fuera de ello, las enzimas que
controlan y regulan la velocidad de las reacciones catablicas no participan
en el anabolismo, es decir, que la regulacin de ambos procesos es independiente. La biosntesis se regula por la concentracin de los productos finales
y la clula, en condiciones normales, slo sintetiza lo que necesita de un
compuesto, en un espacio y tiempo determinados.
Palleroni (1980) presenta un esquema resumido de vas de biosntesis de
algunas molculas pequeas y macromolculas fundamentales que se derivan de ellas (Figura 5). La glucosa como molcula de amplia utilizacin puede ser convertida en diversos azcares, incorporada a polisacridos -para
constituyentes celulares o materiales de reserva-, degradada a compuestos
de dos carbonos que se incorporan al ciclo de Krebs, o se convierte en precursora de lpidos y/o aminocidos. Tambin puede ser convertida a pentosas o intervenir en la sntesis de purinas y pirimidinas, materias primas para
la sntesis de cidos nucleicos. Fuera de ello, puede servir de base para las
porfirinas, constituyentes de citocromos y clorofilas.
Atlas, 1990, permite entender la estrecha relacin entre el anabolismo y
catabolismo de los organismos y comprender por qu son estos dos proce132

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

AlIttrofos

Heterlrofos
Compuestos orgnicos

yo,
I

CO,

Intermediarios
r-lacromolculas

Molculas
pequeas

Glucosa1 - Fosfato
Glucosa 6 . Fosfato
Polisacririos +-- Carbohidratos +-- Ribosa 5 - Fosfato
Entrosa 4 - Fosfato
FosfoenolpiruvalO
Acilus
Lpidos
+-Piruvato
Otros Cofactures +-- 3fosfoglicerato
a-Cetoglutarato
Succinil - CoA
Oxaloacetato
llihidroxiacetona
Fosfato
Acetil-Co 1\

Molculas
pequeas

Macromolculas

Aminocido

NucJetidos ~

Protenas
cidos
nudeicos

Vitaminas

Figura 4: Precursores o intermediarios metablicos que se originan en la gluclisis, ciclo


de Krebs y pueden SRr utilizados por los microorganismos en biosntesis.

Diversos
azcares

Glucosa

-----)00-

Polisacridos

/J
~

",1,,,/

Aminocidos
Fosfoglicerato

,1 /

Protenas
Lpidos

Aspartato

/ / Piruvato
t -----)oo-Acetato
t

----i~...

GI!~.

1
cidos
Nucleicos

(Succinato)
Glutamalo
Citocromos

Pminas

Porfirinas ~ [

[
Pirinidioas

Clorofilas

Figura 5: Esquema simplificado de mios de biosntesis de molculas pequeas JI mac/'Omolculas constituyentes de las clulas microbianas.

133

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo O/ero

analizados holsticamente, con sus caractersticas en comn y particularidades, los que conforman el metabolismo microbiano (Figura 6).

SOS,

Con esta visill


sntesis de algullas

mclabolismo se presentan
mentales.
Carbohidralos

Aminocidos -

'r
{I',

1
1

Glucosa

___- - - - Ribosa

~ ' 'f0'f' "'

\minocidos _ _

Piruvalo

'"

'o;

e..c

o...

:\millocidos

Figura 6: nulas metablicas en el catabolismo v el anabolismo. Se observa que algunos


corredores bioquimicos son similares y (J travs de estas vios an/iblicas el carbono puede ser revertido dando origen o uno red que conecta los principales macromolculas.

Biosntesis de carbohdratos

Las hexosas

az{cares muy importantes


Las primeras pueden sur
pxtcrno o sintetizarlas en su

precursores
iliza una hexosa por
.1
Cuando el
como fuente de caruono y energa, esta misma se convierte en precursora de
las hexosas que requiere sintetizar el organismo, La glucosa-6-fosfato -pro134

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

. - - - - - -...
~

Polisacridos

Peptidoglucano
(Pared celular)

uorG
Uridin Difosfalo Glllcosa

Glucosa l-Fosfato

ca,

Ribulosa S-Fosfato

1
Glucosa 6 - Fosfato +-- Fosfoenolpiruvalo

+--

OxaJoacelalo

Gluconeognesis
Ribosa S-Fosfato

1~rin,"
~nidinas

Glucosa

ARN

AON
Figura 7: Vas a travs de las cuales se efeclda anabolismo de hexosas y pentosas.

cedente de la gluclisis- y el uridin difosfoglucosa (UDPG) son intermediarias clave en el metabolismo de las hexosas. Esta ltima, sintetizada a partir
de uridn trifosfato y glucosa-l-fosfato (originada en la glucosa-6-fosfato),
constituye la base para la construccin de polisacridos y de nuclesidos
difosfato requeridos en la biosntesis. La UDPG se considera la molcula intermediaria central en el anabolismo de la glucosa (Figura 7), mientras que
en el catabolismo es la glucosa-6-fosfato.
En otros casos, el microorganismo mediante un proceso llamado gluconeognesis sintetiza la glucosa al interior de sus clulas, usando precursores
diferentes a carbohidratos. El precursor de partida es el fosfoenol piruvato o
fosfoenol pirvico -intermediario on la gluclisis- que da origen a glucosa
- 6- fosfato.
Con relacin a las pontosas, estas se obtienen generalmente por descarboxilacin de las hexosas por diferentes vas que llevan a la formacin de la
135

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

ribosa y desoxirribosa, fundamentales para la sntesis de ARN y ADN, respectivamente. La Figura 7 resume la biosntesis de estos azcares.
Biosntesis de aminocidos

Algunos microorganismos pueden obtener del medio todos o parte de los


aminocidos qU8 n:quieren, otros deben proceder a sintetizarlos. El cdigo
gentico codifica 21 aminocidos que son insertados en las protenas durante la traduccin.
Los aminocidos se forman dentro de la clula usando azcares como
materia prima. pero adems requieren de nitrgeno. La mayor parte del nitrgeno est en la atmsfern en forma ele N, y slo pocos organismos tienen
la capacidad de incorporar este nitrgeno -del aire llevndolo a amonaco,
nitritos y nitratos, que son usados por el mismo organismo que lo incorpora
y por el resto de los seres vivos, otra parte se encuentra en las molculas
orgnicas que contienen nitrgeno, a partir de cuya degradacin lo obtienen
gran cantidad de microorganismos.
Entonces, el esquema bsico de un aminocido es
H
I
R-C-COOH
I

NHz

Para que ocurra la biosntesis de aminocidos se requiere adems de la


construccin o existencia de un esqueleto carbonado, la sntesis y unin del
grupo amino. Las molculas precursoras de la fraccin carbonada son algunos compuestos orgnicos que provienen principalmente de la gluclisis y
del ciclo de Krebs, de los cuales so originan las familias de aminocidos que
se presentan en la Figura 8.
Dad o que el nitrgeno puede convertirse en un factor limitan te, la sntesis y unin del grupo amino es trascendental para la construccin de los
aminocidos, paso que puede ocurrir por la accin de transaminasas que
intercambian un grupo amino de un compuesto a otro como se vio anteriormente, o por aminocido dehidrogenasas que catalizan la asimilacin reductiva del amonio, el cual procede del medio ambiente.
Aunque pueden existir gran variedad de aminocidos diferentes slo veintiuno de ellos se utilizan para construir las protenas, independiente que se
trate de una bacteria, una clula dA una planta o de un hombre. Las protenas
se ensamblan al unirse un grupo amino de un aminocido al grupo carboxilo
de otro formando cadenas unidas entre s a travs de enlaces covalentes dan136

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

cido f l i C y Glicina

cido 3 - .
-Fosroglicrico

H~Cistena
,

Serina

Gluclisis cido
Anlranlico

Triptfano

Tirosina

Alanina

Valina
Acido
u-celoisovalrico
Leucina

Prolina

---+.

Ciclo del
Acido Ctrico o de Krebs
o
<O
Q;
u
o

ca'"><
O

Glulamina

Ornitina - - - . Arginina

/Lisina
---.... Asparagina
~

Metionina

~ Homoserina

~ Treonina ----. lsoleucina

Fosforibosil pirofosfalo---"

- - -.., Hislidina

Figura 8: Origen de las familias de aminocidos en general, a par/ir de precursores carbonados procedentes de la gluc/isis y ciclo de Krebs.

137

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

do origen a polipptidos. La secuencia de los aminocidos en la cadena polipeptdica es definida por la informacin hereditaria que cada organismo contiene y que va a determinar la especificidad de sus protenas.
Biosntesis de lpidos

Los cidos grasos se forman a partir de fragmentos de Acetil-CoA cuyo


grupo acetilo se transfiere a una protena llamada ACP -Acyl carrier protein- a cuyo conjunto se une la enzima cido graso sintetasa. La vitamina
biotina es fundamental para su construccin. Los cidos grasos ms comunes en procariotas son compuestos de 12 a 20 carbonos. Los cidos grasos
ramificados e in saturados tienen gran importancia en el mantenimiento de
la fluidez de la membrana celular.
En cuanto a las grasas se forman por sucesivas esterificaciones de fosfato
de glicerol por derivados de CoA y ACP para formar un diacil glicerol fosfato
(cido fosfatdicoJ, al cual se le elimina el fosfato y se adiciona un tercer
cido graso. En los fosfolpidos el cido fosfatdico se convierte en un derivado de los nucletidos. Es de recordar que los fosfolpidos son constituyentes fundamentales de las membranas celulares.
Un tipo de lpidos llamados isoprenoides. que se deriva del isopreno
-un hidrocarburo ramificado de cinco carbonos- cumple importantes funciones metablicas. Dentro de ellos se encuentran los carotenoides. la coenzima Q y los bactoprenoles. que son acarreadores en la sntesis de paredes
celulares bacterianas. El fitol. componente de la clorofila tambin es isoprenoide y los esteroles presentes en la membrana de los eucariotas son derivados del isopreno. Otros isoprenoides. ausentes en microorganismos pero comunes en vegetales, son el caucho y los terpenos. que participan en la defensa de las plantas.
La unidad del metabolismo

Como ejemplos que permiten una visin holstica de la unidad del metabolismo se tienen la fotosntesis y quimiosntesis. con sus particularidades y
puntos en comn. La primera de ellas requiere la presencia de agua. luz y
nutrimentos. La segunda es una alternativa a la que acuden un menor nmero de microorganismos y se convierte en opcin de vida en condiciones extremas como ausencia de luz, oxgeno y concentraciones elevadas de compuestos txicos como el sulfuro de hidrgeno (H 2 S). entre otros (Figura 9).
La fotosntesis es el proceso en el cual la energa lumnica es captada por
la clorofila y/o pigmentos fotosintticos en los cloroplastos (plantas y algas)
o sistemas membranosos (bacterias y cianobacterias) y convertida en energa
qumica (ATP) mediante la fotlisis o catabolismo del agua. Este ATP generado se invierte en la fijacin de CO 2 a travs del ciclo de Calvin, es decir. en la
138

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Fotosntesis

Quirniosnlesis

\)
\ ) Sulfuro de \ )
Hidrgeno

A:!./\
Fuente Hidrotermal
Sol

Energa

Energa

eo,
Plantas
1\lgas
Bacterias
Fotosintticas

Bacterias
del
H,S

\TP
Cido
de
Calvin

ATI'

fijacin de e
(\zlcarrs, grilsas, aminocidos)

Consumidores sAcund"rios

Consumidores secundarios

Figura 9: Similitudes JI diferpncias entre fotosntesis JI quimiosntesis como ejemplos de


metabolismo microbiano.
Fuente: Childress el at. 1987.

biosntesis de compuestos reducidos de carbono, materia orgnica bsica para


la construccin de los constituyentes celulares y almacenamiento de reservas, y al mismo tiempo produce una molcula fundamental para la vida sobre el planeta: el oxgeno - 2 , La eficiencia de este tipo de metabolismo hace

139

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

que los fotoauttrofos o fotolittrofos sean los productores primarios en la


mayora de los ecosistemas marinos y terrestres.
En la quimiosntesis, al igual que en la fotosntesis se requiere de ATP
para la fijacin de CO 2 A diferencia de ella, en este caso los microorganismos para obtenerlo acuden al catabolismo de compuestos inorgnicos como
el sulfuro de hidrgeno. Este ATP en forma similar a los fotoauttrofos se
invierte en la fijacin del caz, pero aqu no se produce O 2 , En los ambientes
donde habitan, estos microorganismos son productores primarios y se los
denomina quimiolitoauttrofos o quimiolittrofos.
El conocimiento del proceso de quimiosntesis ha permitido explicar la
presencia de vida en fuentes termales terrestres y en manantiales termales
abisales como los encontrados en 1977 por los gelogos del submarino de
investigacin Alvin, en cercanas de las Islas Galpagos, en chimeneas hidrotermales situadas a 2600 metros de la superficie. All, las cadenas trficas
se han organizado en torno a la capacidad de bacterias del azufre de hacer
quimiosntesis (Figura 9).
Metabolismo secundario
Adems de las macromolculas y pequeas molculas inherentes al crecimiento microbiano -metabolismo primario-, los organismos tambin fabrican y acumulan molculas destinadas a cumplir funciones bioinformticas, de defensa, llamadas metabolitos secundarios -aunque tal vez deberan
denominarse metabolitos complementarios- cuya produccin se maximiza
en la fase estacionaria del microorganismo. Durante algn tiempo se pens
que eran errores metablicos de la clula, pero hoy se entiende que son
fundamentales en sus relaciones dentro de los ecosistemas. Para sintetizarlos los microorganismos utilizan diversos intermediarios del metabolismo
primario que participan en la gluclisis y en el mismo ciclo de Krebs, como
se observa en la Figura 10.
Los metabolitos secundarios ms estudiados y conocidos son los antibiticos. De los 6.000 o ms antimicrobianos reconocidos, alrededor del 67%
son producidos por actinomicetos y cerca del 90% de ellos provienen de
Streptomyces. Otras bacterias como Bacillus, Enterobacter, Pseudomonas,
flavobacterias y hongos como Penicillium, Trichoderma, Aspergillus y Fusarium, tambin producen antibiticos.
La hormona sirenina es otro metabolito secundario que interviene en el
reconocimiento y atraccin entre los gametos de hongos inferiores como el
gnero Allomyces. Los metabolitos secundarios de origen microbiano se han
convertido en una industria muy importante. Adems de los antibiticos,
algunos de ellos exhiben propiedades como anticancergenos, antitumorales
140

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

e hiperestrognicos, lo cual hace prever que la microbiologa industrial tiene


en ellos una importante fuente de desarrollo.

--

Espf'Ctinomicina
Neomicina
Glucosa

Gentamicin~

Estreptomicina
Kanamicina

Serilla

Penicilina
Cdamicina
Cefalosporina

t {

Corismato

Fosfoglicerato

;/

j
"'"""00'' '7 j

Ergotamina
Roquefortina
Equinulina

Pirul'ato

--

A,partato

"
'/
Oxaloacelalo

Triptofano

Cisteina
Valina

Erilrosafosfalo

TIrosina {

Esporidc~mina

Acetil Co A

Acidos grasos

rl.Cetoglutarato /
:\cido lIa~llico
_______ Omitina }

Xantocilina
NOl'obiocina
Micelianamida
Lincomicina
Sirodesmina

).

~natl
AcidO>larISiC!

Bacilina
CandicidiDa
Corinecinas
Cloramfenicol

Griseofulvina
Lanoslerol
Eritromicina
Carolenoides
tlnlraciclillas
Sireninas
Acido lrisprico
Aflatoxinas

Gramidicina

Glutamato
-------...... Prolina

Figura 10: Vas de diversos melabolitos seclIndarios. Nuevamente intermediarios de la


gluclisis y del ciclo de Krevs. juegan papel fundamental.
Fuente: Santa na. Segura y Snchez, 1994.

Consideraciones finales
El anabolismo y el catabolismo integran el metabolismo del organismo,
el cual les permite quo ejerzan su propiedad de crecimiento. Para ello, el
catabolismo provee la energa (ATP) y piezas fundamentales, los cuales se
utilizan para la biosntesis de molculas constituyentes de la clula, para su
reproduccin, locomocin, etc. Todas las reacciones qumicas son cata lizadas por enzimas, las cuales son determinadas por el genoma de cada organismo y le proporcionan su especificidad metablica.
Esta especificidad metablica se manifiesta en la construccin de macromolculas caracterstcas para cada microorganismo y en la degradacin de
unos sustratos y de otros no. adoptando rutas metablicas que llevan a dife141

. No/son Bravo

Marina Snchez

rentes productos finales, dependiendo de su contenido enzimtico y de las


condiciones ambientales en que se desarrollan.
inimmediari
c:tablicos
ongman
gluc(lisJS
ciclo
puedell
ilizados
Hes catablicos v/o
anablicos. Sin embargo, las vas qumicas que se siguen no son iguales. y
aunque puede haber corredores bioqumicos con varios pasos idnticos, normalmente, hay por lo menos una o varias reacciones enzimticas que son
en las
ones de bi
y de dcscmnposicin.
diferent:ias Hseguran la
o culas COI tuyentes de
ras
estables.
bio
La diversidad microbiana es un reflejo de la extensa gama de macromolculas que se encuentran en la naturaleza y que estos organismos son capaces
de conslruir gracias
disposici
de; hacer uso el diferentes sustratos y
de
a con
es ambiell 1 . aun extrcm
Adems del metaholismo primari ~a travs
110s microorganismos obtienen la energa y molculas fundamentales para su crecimiento-,
los organismos tambin sintetizan una serie de biomolculas que desempean funciones de defensa, comunicacin, etc., en un proceso Jlamldo metabol
secundari. cual, tal vez c1dlPrn c1enom i
metabol
COffipkmenlario o sim
consid
metabolismo corno uno
Este
tiene tarnbin como precursores a cornpuestos originados en la gluclisis o
en el ciclo de Krebs.
Los compuestos que se originan en el metabolismo primario y secundario
microorganismos, adem,s
mportanca
revisten
ellos
en , constituyen
de la microlJologa indus!
biotecnol
con
toel
desarroll pwsentes y

142

CAPITULO V

Bacterias fitopatgenas
Introduccin
Los disturbios de salud de origen hitico que sufren las plantas son causados por organismos procariticos, eucariticos y por entidades acelulares.
En el primer grupo se localizan las bacterias y los mollicutes, dos tipos
de organismos caracterizados por tener ncleo primitivo conocido como nueleoide (ADN no incluido en una membrana) y ribosomos 70 S. La principal
diferencia estriba en que las bacterias poseen pared celular y los mollicutes
no presentan dicha estructura, por lo cllal son pleomrficos.
En el grupo de los eucariotas (organismos que presentan clulas con ncleo verdadero) fitopatgenos se enumeran hongos, nematodos, algas, protozoarios y plantas superiores. Las entidades acelulares estn representadas
por virus y viroides.
Este captulo est dedicado a consideraciones generales acerca de las bacterias fitopatgenas en lo que corresponde a morfologa, ecologa, formas de
diseminacin, sintomatologa, condiciones ambientales, taxonoma, manejo
y clnica y diagnosis. En cuanto a taxonoma se mencionarn los gneros que
comprenden especies fitopatgenas, algunas de las cuales no estn presentes
en nuestro medio, pero constituyen problemas potenciales dado el gran nmero de pases de los cuales se importan semillas y material vegetal en general.

Morfologa
Se han descrito alrededor de 1.800 especies bacterianas, entre las cuales
se encuentran patgenos del hombre, los animales, las plantas y muchas saprofticas. Anteriormente se mencionaban casi 200 especies fitopatgenas pero
en la actualidad ese nmero se ha reducido a 80 100, con base en la evolucin de las tcnicas de identificacin de los caracteres taxonmicos.
143

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

La mayora de las fitopatgenas tienen forma de bacilos con algunas excepciones, como C1Il1obacterium, que tiene forma cocoide en cultivos envejecidos, A/caJigenes sp. (bacilos o varillas cocoides o cocos). Nocardia sp. y
Streptomyces sp. (filamentosos).
En cuanto a la disposicin celular, generalmente son clulas simples (individuales) o agrupadas en pares (diplobacilosJ, en algunos casos dispuestas
en V, aunque Clavibacter forma empalizadas de 4-6 clulas; Erwinia en algunos casos puede formar cadenas cortas.

Motilidad
Algunos gneros exhiben movilidad mediante flagelos dispuestos en formas variadas.
a) Flagelas polares: Un solo flagelo polnr Xonthomonas, Xylophilus, Rhizomonas, Acidovo/'Qx. Uno o varios flagelos polares Pseudomonas, especialmente la especie P. margina/is que presenta un haz de flagelos, y Rhizobacter.
b) Flagelos peritricos: AgrobacterillH1 presenta 1-6 flagelos y Erwinja numerosos, a excepcin ele E. steH'artii que es no mvil. Presentan tambin
este tipo de flagelacin Bacillus, Curtobocterium, Clostridium, Alcaligenes, Acetobacter, Enterobacter y Pantoea.
e) No mviles: COl)'nebactel'ium. XylelJa, Clavibactel', Rhodococcus, No-

cardja, Stl'eptomyces, Arthl'Obacfer.

Reproduccin
Ocurre mediante fisin binnria o bi particin. Debe tenerse en cuenta que
en algunas bacterias se ha determinndo cierto tipo de intercambio gentico,
anlogo a "reproduccin sexual", el cual ocurre por conjugacin, con la participacin de los llamados pili sexuales. Esta caracterstica puede aprovecharse para llevar a cabo clonacin mediante ingeniera gentica y establecer
las llamndas geno tecas.
Mediante el proceso ele conjugacin, lo mismo que a travs de transduccin (paso de genes de un hospedante a otro mediante virus). o el de transformacin (transferencia oc gClws de una clula bacteriana a otra) o por el de
mutacin, pueden ocurrir modificaciones genticas en las clulas bacterianas, cambios que pasan a nuevas generaciones.

Ecologa
La mayora de las bacterias fitopatgenas se desarrollan principalmente
en el hospedante como parsitos y parcialmente como saprfitos en desechos vegetales o en el suelo.
144

IIICROBIOl.OGA: ASPECTOS RNlAMENTAlES

E. amylovoro (aublo de fuego de peral y manzanos) produce sus poblaciones en el hospedante y cuando cae al suelo su nmero disminuye rpidamente porque no liene mecanismos para resistir condiciones adversas. De
all que produce ciclos de infeccin planta-planta debido a la naturaleza perenne de sus hospedantes. a travs de insectos vectores. o a la asociacin de
la bacteria con los rganos de propagacin o semillas.
Otras bacterias como A. tumefaciens (agalla de corona) Burlcholderia soJanacearum (= Pseudomonas solanacearum) que causa el man::hitamiento
vascular de algunas solanceas y el moko del pltano y Streptomyces scabies
(sarna comn de la papal son habitantes del suelo y aunque producen sus
poblaciones en los hospedantes. ellas se reducen lentamente cuando son
liberadas en el suelo. Pseudomonas puede sobrevh"r en la rizosfera y en el
rizoplano aprovechando las secreciones de las plantas hospedantes.

CJavibacter sp. sobrevive sobre. dentro o con semillas. C. f1accumfaciens


se encontr viable en semillas de frjol despus de 5 - 24 aos. C. f1accumfaciens varo ouronticum fue aislada y mantuvo su ~rirulencia en semillas de
frjol de 15 ai'ios. Tambin Xanthomonas phaseoli varo fuscans fue aislada y
patognica en semillas de frjol despus de 15 aos.
La mayora de las filopatgenas se consideran invasoras del suelo y llegan a l en los tejidos de su hospedero o como clulas libres, pero debido a
su poca habilidad para competir como saprofitos. persisten en el suelo el
tiempo que resisten dichos tejidos el proceso de degradacin o por periodos
variables que dependen de las especies bacterianas y de las condiciones de
humedad y temperatura del suelo.
Las bacterias. adems de vivir en el suelo en materiales vegetales principalmente y en menor proporcin libre o saprofticamente. tambin lo hacen
en sus exudados naturales los cuales las protegen de condiciones desfavorables. Pueden sobrevivir adems dentro o sobre las semiDas, otras partes de la
planta o en insectos que se encuentran en el suelo. En las plantas pueden
vivir epifticamenle, en yemas, sobre heridas. en sus exudados o dentro de
diferentes tejidos u rganos que ellas infectan.

Diseminacin
La dispersin de las bacterias de una planta a otra o de una parte a otra de
la misma planta puede ocurrir a travs de diversos factores:

Enforma autnoma: Aquellas bacterias que poseen flagelos pueden desplazarse a muy cortas distancias.
Agua: Se considera el agente de diseminacin ms importante si se tiene
en cuenta que las bacterias la requieren en mayor cantidad que otros microorganismos. En forma de lluvia o de riego por aspersin, produce lavado o
145

Marina Snchez de Prager Fernando Marmolejo De la Torre Nelson Bravo Otero

salpique que lleva y distribuye bacterias entre plantas o en la misma planta y


desde el sucIo a las partes inferiores de ellas. El agua tambin separa v lleva
bacterias sobre
otras reas en las cuaks
plantas suscepti

Insectos: Pueden
bacterias adheridas a su
de Jos exudados
aparato bucal en sitic;s
los cuales ellas
10. Por ejemplo E. omy]cJlforn
por insectos Hymenoptera a los capullos y su penetracin ocurre a travs de
estructuras semejantes a los estomas presentes en los nectarios situados en la
base de la flor.
Algunas bacterias persisten dentro del insecto y dependen de l para su
dispersin y sobrevivencia. E. traclwjphifo penetra en el insecto cuando ste
se alimenta en
ledones de plantas sallas
en las cuales se el
lema. Se ha comprobade)
puede sobreviv el
otra en insectos Coleoptera
dllodecimpllnctnto],
severidad de la enfermedild,
sis del mnz. se
base en la poblacin del
en el cllalla bacteria se
tro del insecto. E. cClrotovora puede sobrevivir en pup;:s de la mosca de la
semilla de maz (Hyfemia ciclicrural, Elunque puede vivir en todns las etapas
del ciclo del insecto. En otros casos los insectos son importantes pero no
esencinles para la diseminacin de algunas bacterias fitopatgenas.

Otros animales: Aunque no se conocen casos especficos, se asegura que


aves, conejos y
sitan las plantas y se mI
pueden llevar bn(
su cuerpo y diseminarl
ha comprobado
cumplan el papel de vee!
meda des bacteriH
COllocen algunos pocos
jos patolgicos
Humanos: El hombre se considera un elemento importante en la diseminacin de enfermedades bacterianas. En forma local (planta-planta en un
cultivo) l travs de la manipulacin de las plnntas y de las prcticas de culti vo. Las herramientas, maquinaria y ropa empleadas en dichas prcticas
pueden servir como agentes de diseminacin. Se sabe por ejemplo que la
bacteria Cfovibocter xvIi subsp. xyIi (rnquitismo de las socas en caa de azcar) puede sobrevivir
en machetes empleados
diseminacin de
grandes distancias,
di ante el transporl
tes de plantas infectadns
duccin de ellas
;ll estos eventos las sem
infectadas por
estas sobre o dentro d?
a cortas o grandes distancias, por cualquiera de los agentes de dispersin de
semillas.
146

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Penetracin
Las bacterias no poseen mecanismos para penetrar directamente en los
tejidos como lo hacen los hongos y los nematodos. Para este efecto utilizan
aberturas naturales o heridas. En el primer caso la penetracin ocurre a travs de estomas (las aberturas ms importantes para ellas), hidtodos, lenticelos, nectarios y la abertura formada en la raz principal al emitir races secundarias. En la penetracin a travs de estomas es condicin, en algunos
casos, la presencia de pelcula ele agua continua desde la superficie foliar
hasta la cavidad estomtica lo cual facilita la penetracin para las bacterias
que poseen i1agelos, en caso contrario la penetracin se realiza en forma
pasiva.
Ya se expres la importancia ele los insectos para inocular con su aparato
bucal bacterias como E. tracheiphila y E. stewartij a travs ele las heridas que
producen durante su proceso de alimentacin. Las heridas naturales como
cicatrices ocasionadas por la abscisin de las hojas, o durante el perodo de
lluvias las que dejan las flores al caer, son vas de penetracin para P. savastanoi, agente causal de la agalla del olivo.
Cuando la humedad relativa es alta, las plantas exudan la llamada agua
de gutacin a travs de los hidtoelos (poros abiertos en forma ms o menos
permanente), situados en los bordes y pice de las hojas. Esa secrecin as
expuesta al medio ambiente puede contaminarse con bacterias. Al disminuir
la humedad relativa el exudado es reabsorbido por la planta, llevando al
interior su carga bacteriana. De acuerdo con algunos investigadores, ciertas
bacterias pueden inclusive multiplicarse en el agua de gutacin que, debido
a su constitucin, se puede comportar como un medio de cultivo. Est comprobado que el agua de gutacin constituye fuente de inculo importante en
el caso de Xanthomonos albilincons (raya clortica de la caa de azcar) la
cual se disemina a travs de maquinaria.
Los lenticelos son aberturas naturales en los frutos, tallos y tubrculos,
los cuales estn llenos de clulas conectadas en forma laxa para permitir el
paso del aire. A pesar de que permanecen abiertos durante la fase de crecimiento, pocos hongos y bacterias penetran a travs de ellos. La mayora de
los patgenos que utilizan esta va de penetracin tambin lo hacen mediante heridas y los lenticelos son una alternativa secundaria y menos eficiente.
Los nectarios o nectrtodos, como ya se anot anteriormente, son va
im portante para la penetracin de bacterias portadas por insectos o por gotas
de lluvia arrastradas por el viento a la parte basal de la flor.
Las heridas a travs de las cuales pueden penetrar algunas bacterias pueden ser: a) por dao mecnico a las clulas y tejidos; b) heridas por insectos,
y c) heridas naturales. El primer tipo de herida es aprovechado por bacterias
147

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

causantes de pudriciones suaves como E. carotovora y patgenos vasculares


como CJovibacter michigallense subsp. sepedonicum. A. tumefaciens requiere.
adems de las heridas, la respuesta del hospedante (atraccin y principio
inductivo) tanto para su multiplicacin inicial como para la formacin posterior de agallas.

Sintomatologa
Las bacterias fitopatgenas inducen el desarrollo de casi todas las clases
de sntomas en las plantas que parasitan al igual que lo hacen los hongos.
Ellas pueden atacar cualquier rgano ele las plantas y varios gneros originan
cualquier lipa de sntoma dado. Cada gnero contiene algunas especies capaces de ocasionar diferentes tipos de (~nferrrwdades. En forma general las
bacterias que afectan plantas pueden promover el desarrollo de:

lHanchas foliares: Las cuales pueden ser clorticas, trasl cidas, intervenales, circulares, angulares, nccrticas, COIl apariciencia acuosa o seca (Figura la). Las manchas foliares puedun ser suscitadas por especies de los gneros Xonthomonas y Pselldomol1as.
Pudriciones suaves: Ocurren en tojiclos suculentos o carnosos ya sea en
campo o en almacenamiento, con desprendimiento de olor ftino clebido a la
formacin de sllstmcias voltiles dllTinte la desintegracin de los tejidos.
Estos se vuelven hlandos y acuosos y a menudo exudan masas viscosas de
bacterias y residuos celulares. En muchos casos las bacterias involucradas
en tales pudriciones no son patgenos sino ms bien saprofitos o parsitos
secundarios, o soa que crecen en tejidos muertos por otros patgenos y factores ambientales o en tejidos tan dnbilitados o viejos cuyo deterioro fisiolgico no les permite resistir el ataque de cualquier microorganismo. Adems de
estos factores secundarios de pudricin, existen algunas bacterias que atacan tejidos vegetales vivos en el campo o en el almacenamiento, tales como
especies de Envinia (grupo caratovora o de las pudriciones suaves o blandas
en frutos carnosos, hortalizas y ornamentales) (Figura 1 e), Pseudomonas (en
papa y hortalizas carnosas) y BaciJJlls y CJostridium, gneros recientemente
incluidos entre las bacterias fitopatgenas.
Marchitamientos vasculares: Son causados por bacterias que afectan
principalmente plantas herbceas, tales como hortalizas, ornamentales y tropicales (Figura lb). Los principales agentes de este tipo de afecciones pertenecen a especies de los gneros ClavibactedCorynebacterium), Erwinia, Pseudomonas y Xanthomonas.
Agallas: Son el resultado del sobrecrecimiento no organizado o desorganizado de algunos tejidos vegetales en tallos y races. En este caso los agentes
ms importantes son especies de los gneros Agrobacterium y Pseudomonas. Las agallas tambin pueden originarse por la proliferacin de tejidos
148

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Figura 1. Tipos de s fT/lumos inducidos por bac lerins en plantas susceptibles: a) tvlanchas
foliares (Xantholl1onas ca mpestris pv. malvacearull1 e n algodn), b) Pudricin s uave o
acuosa (Erwinia chrysantheJ1li pv. purad isi ac a en se udotallo de plc(OT/O), e} Marchitamienlo vascu lar (Burkho lderi a solanac(~a rum en taba co), y d} A ga llos (Agrobacterium
tum e fa c ien s en eu ca lipto).

149

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

que desarrollan rganos teratomrficos (de forma anormal) ms o menos organizados inducidos por especies de Agrobacterium y Corynebacterium (Figura ld).
El tipo de sn
Agrobacterium depende
mido que porta
ccmtiene el plsmido Ti
mor) induce agal
ella engloba el plsm
de enraizamiento)
o en cabellera. Las
eradas en estos desrdenes celulares son A. tumefaciens, A. rubi y A. rhizogenes; todas pueden contener el plsmido Ti y ocasionar agalla de corona,
pero hasta ahora slo razas de A. tumefaciens y A. rhizogenes pueden llevar
el plsmido Ri y promover la proliferacin anormal de races.
La especie Corynebactel'ium fascians produce agallas foliceas, sntoma
conocido como flsciacin (aplanlmiento anormal de un rgano despus de
alcanzar su tamafio
ornamentales herbCf~as
perennes.

Pseudomonos
del olivo y la

sorostanoi produce las


I lantro.

Sarna o costra. Las enferrllcdadcs bacterianas que dan origen l cste tipo
de sntoma afectan principalmente partes de la planta que se desarrollan en
forma subterrnea. Las lesiones son de tipo sarnoso o costroso en los tejidos
externos de los rganos afectados. La especie bacteriana reconocida en esta
afeccin es Streptomyces scabies, que causa la sarna comn en papa y la
viruela de la batata.
Cncer:
por bacterias, peru
causando grandes
plantas de ellas.
cies de Pseudomonos

enfermedades de este tipo


amplia distribucin y son
grandes esfuerzos
importantes son producidas
Xonthomonas en ctricos

Raquitismo: Sntoma hipoplsico que conlleva a la apariencia de subdesarrollo y que puede confundirse con deficiencias hdricas o de elementos
nutricionales. El caso ms representativo es la enfermedad denominada RSD
o raquitismo de las socas en caa de azcar producida por Clavibacter xyli
subsp. xyli, bacteria ubicada en el grupo de las fastidiosas que actan en el
xi lema y especficamente en los vasos de metaxilema (Figura 2c).

Condiciones
Los factores
patgenas son: 1

tienen mayor efecto sobre


humedad.

Temperatura: La mayora de estas bacterias son mesfilas, por tanto la


temperatura ptima est entre 20 - 35e, y los extremos, mnima lOoe y mxi150

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Figura 2. Sintomas inducidos por hacterias en plantas susceptibles: al Sorno o costra (X.
campestris pv. citri) en frutos ctricos. bl Cncer (X. campestris pv. c itri) en ctricos. c)
l1aquitismo, I1Sn (l.lavibacter xyl i subsp. xylil en cu u de azcar, sntomas externos en
planta afectada comparada con planta sana, y d) Raquitismo (e. xyli subsp. xylil en caa
de azcar, sintomas histolgicos por fluorescencia en vosos de metaxilema.

151

Manna Snchez de Prager - Fernando Marmo/ejo De /a Torre - Ne/son Bravo Otero

ma 52C. Existe un segundo grupo de mesfilas cuya temperatura ptima


est entre 35 y
pH: Es un
lo. Lo ideal para
[6.5 - 7.5). En

aquellas bacterias que


pH alcalino o cercano
las bacterias tienen los 1

En muchas de las enfermedades el efecto de la acidez del suelo (pH) parece actuill' sobre el patgeno, aunque en algunas el debilitamiento del hospedante a travs de la alteracin nutricional por la acidez del suelo puede
afectar la incidencia y la severidad de la enfermedad.
Humedad: El agua se considera como el factor mediante el cual los orgamas y mohos) obtienen
I
nismos holofticos
microorganismos comu
nan productos
tienen los mayor!;:;
dricos, los cuales
sentados como
(80 - 90%) en el ambien!
idos de la misma.
la planta, o agua

Gneros de bacterias fitopatgenas


Hasta la dcada de los aos setenta se hablaba de cinco gneros de bacterias que afectaban plantas; hoy el nmero ha aumentado de manera significativa. De acuerdo con Young et al (1992) la evolucin en la taxonoma bacteriana se puede dividir rm tres perodos:

1932 - 1940.

especies y el
cientemente

proliferacin de much
princi pios taxonmicos

realizados en este
jeron a proponer gran nmero de sinnimos o nombres inapropiados;
adems, en este transcurso se elaboraron los principios de clasificacin
en trminos fenticos (agrupacin de organismos y poblaciones por semejanzas, resultantes de la comparacin de gran nmero de caracteres
independientes).

1940-1975,

De 1975 hasl
ficati vos en
a los avances

o en el cual han ocurrido


entan la clasificacin

Los gneros
patgenas de plantas
este captulo,
acin de Young, J. M.
siguiendo el esquema y caractersticas del Bergey's Manual ojDelermlllative
Bacteriology p,n su novena edicin 1994, en el cual se han establecido 35
grupos para la ubicacin de todas las bacterias. Hasta ahora seis de esos gru152

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

pos contienen gneros en los cuales se han identificado especies patgenas


de plantas, as:
Grupo 4: Bacilos y cocos Gram-negativos, aerbicos o microaeroflicos.
En este grupo se encuentran los gneros:

Agrobacterium: Con su especie tipo A. tumefaciens. Otras especies: A.


rhizogenes, A. rubi y A. vitis.
Pseudomonas: Tiene una especie muy importante desde el punto de vista fitopatolgico (P syringne) en la cual se han ubicado en la categora de
patovar muchas de las especies fitopatgenas del gnero conocidas en la dcada de los aos setenta (P syl'ingae pv. phaseolicola, P.s. pv. pisi, P.s. pv.
glycinea, etc.).

Recientemente el gnero se dividi en dos: Pseudomonas. en el cual quedaron ubicados aquellos individuos del grupo nuorescente, y Burkholderia,
para las no fluorescentes, J. 1. Victoria K. (comunicacin personal, 1995).
As, la especie causante del marchitamiento bacteriano de las solanceas y
del moko del pltano, Pseudomonas solanacearum, pas a ser Burkholderia
solanacearwl1.
Xanlhomonas: Este gnero incluye ms especies patgenas que todos los
dems combinados. Al igual que en Pseudomonas, muchas de las especies
conocidas anteriormonte se han ubicado como pv. de la especie X. campestris (X.c. pv. campes/riso X.c. pv. malvacearum, x.c. pv. phaseoli, x.c. pv.
vesicatoria, etc.).
Xylophilus: Gnero creado por Willems et al (Hall, ].G. et al1094). tiene
como especie tipo y nica X. ompelinus (antes Xanthomonas ampelina).
Causa necrosis y chancro y ha sido aislada principalmente de tejidos leosos
de vid en el Mediterrneo y Surfrica, lo mismo que en Suiza, Austria, Bulgaria, Islas Canarias y Argentina.
Acelobacter: Las especies de este gnero se han encontrado en flores,
frutos, miel de abejas, jugo de ca1a, sake, tequila, vino, cerveza, vinagre,
jugo de caa de azcar, suelo de jardn yagua de canal. Algunas causan el
mal rosado en el fruto de la pi1a y pudricin en manzanas y peras. Una
especie que habita en races y tallos de ca1a de azcar es fijadora mi croaeroflica de Nitrgeno.
Rhizomonas: Fue creado en 1990 por Van Bruggen et al (Holt, J.G. et al,
1994). con la especie tipo y nica R. suberifaciens, que causa la raz corchosa
en lechuga.
Acidovorax: Gnero propuesto por Willems et al (Holt, J. G. et al 1994).
En l se han descrito tres especies, dos de ellas anteriormente ubicadas en el
gnero Pseudomonas: la especie tipo A. facilis (antes P facilis) , A. delafieldii
(antes P. delafieldii) y A. temperans.
153

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

XyJella: Gnero creado en 1987 por Wells et al (Holt, ].G. et aI1994). Forma parte de las bacterias "fastidiosas", anteriormente agrupadas en Organismos Similares a Rickettsias o RL.O. Son organismos restringidos al xilema
(vid, alfalfa y durazno), aunque otras fastidiosas estn circunscritas al floema
(trbol). La especie tipo y nica es X. fastidiosa que se ha encontrado en los
vasos xilemticos de plantas de vid afectadas por la enfermedad de Pierce. De
acuerdo con Agrios, G. N. (191:18], todas las bacterias fastidiosas Gram-negativas son transmitidas por insectos que se alimentan del xilema, tales como
saltahojas (Cicade/lidae y Cercopidae). Los vectores adquieren y transmiten la
bacteria en menos de dos horas. Si los insectos son adultos pueden transmitir
la bacteria durante toda su vida, pero no la pasan a la progenie.
AJcaJigenes: Gnero que se ha encontrado principalmente en agua y suelo. Posiblemente en el futuro quede incluido en el gnero Burkholderia [J. 1.
Victoria, comunicacin personal, 1995).
Rhizobacler: Este gnero fue propuesto por Gota y Kuwata en 1988 (Holt,
J. G. et al, 1994). Incluye slo la especie R. dauCl/s que es la especie tipo y se
encuentra en el suelo, causa agallas en races de zanahoria en forma natural.
Grupo 5: Bacilos Gram-negativos. facultativamente anaerbicos. Las especies fitopatgenas corresponden a los gneros:
Erwinia: Gnero estudiado principalmente por los fitopatlogos. Varias
especies fueron ubicadas en el gnero Pectobacterium, nombre que, aunque
vlido, no es muy empleado. Las especies de Erwinia se han encontrado
asociadas con plantas como patgenos, saprofitos o como parte de la flora
epiftica. La especie tipo es E. o11lyJovora. Young, J.M. et al, HJ92, mencionan
que mediante estudios fenotpicos se han establecido tres subgrupos conformados por las especies: 1) E. amyJovora, E. trncheiphila. E. quercina. E. fUbrifaciens, E. salicis y E. stewartii. 2) E. herbicoJo, E. onanas y E. uredovol'O,
y 3) E. corotovora y sus subespecies y E. chrysanthemi.
Se ha propuesto la reclasificacin de E. herbicola en el nuevo gnero
Pantoea creado en 1989 por Gavini et al (Holt, J. G. et al. 1994), el cual incluy dos especies: P agglomel'Ons (sinnimos: Enterobacter agglomerans,
Erwinia herbicolo. E. milletiae) y P dispersa.
Enlerobacter: Gnero ampliamente distribuido en la naturaleza, se ha
encontrado en agua fresca, suelo, plantas, lo mismo que en heces fecales de
animales y humanos.
Grupo 18: Bacilos y cocos, Gram-positivos y formadores de endosporas.
En poca reciente se ha venido prestando atencin a la asociacin de los
gneros Bacillus (aerbico o anaerbico facultativo) y Clostridium (anaerbica estricto) con pudriciones especialmente en tubrculos de papa. Seran as
las primeras bacterias esporgenas reconocidas como fitopatgenas (J.1. Victoria, comunicacin personal, 1995).
154

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Grupo 20: Bacilos irregulares, Gram-positivos, no esporgenos. En este


grupo se reconocen especies fitopatgenas en los gneros:
Corynebaclerium: Se ha considerado un gnero heterogneo, constituido por organismos cuya pared celular contiene peptidoglicano basado en
ciclo mesodiaminopimlico, componente lpido que contiene una cadena
corta de cido miclico. Las especies corineformes fitopatgenas no tienen
eslas caractersticas y por tanto han sido reubicadas en los gneros ClavbacteI~ Curtoboctcriulll y Arthrobocter. El gnero se caracteriza por contener
parlsitos ouligarlos en membranas mucosas y la piel de algunos mamferos,
aunque ocasionalmente se ha encontrado en otras fuentes. La especie tipo es
COJynebactcrium diphtherioe.
CJavibaclcr: Gnero propuesto por Davis et al, en 1984 (Holt, J. G. 01 al.
1994), para aquellas especies fitupatgenas aerbicas de COJyneuacterium
cuyas paredes celulares contirmen cido 2-4 diaminobutrico en vez de cido mesodiaminopimlico quo est presente en dicho gnero. y adems ausencia de cidos miclicos. Las especies de Clavbacter tambin son consideradas bacterias "fasticliosas", grupo en el cual son las nicas Grnm-positivas; al igual que XyJella son propias del xilema y se han encontrado causando el R.S.D. (Ratoon Stunting Disease) o raquitismo de las socas en cai1a de
azcar (C]oviboctcr xyli suusp. xy1i) y el achaparramiento del pasto Bermuda
(C xyli subsp. cynodontis). Algunos inv(!stigadores las consideran parsitos
obligados, debido a que ninguna de las bacterias "fastidiosas" puede ser cultivada en los medios bacteriolgicos convencionales; sin embargo, todas las
restringirlas al xilema pueden crecer en medios nutritivos ms o menos complejos, en los cuales crecen de mallera lenta y producen colonias diminutas
(1-2 mm de dimetro).
La especie tipo es C]avibacter michgonense y a esta han sido transferidas. al nivel de subespecies, la mayora de las especies reconocidas en Corynebocterium: Clavibacter michiganense subsp. michiganense (cncer bacterial y marchitez del tomate) Cm. subsp. insidiosum (marchitamiento bacterial de la alfalfa), Cm. subsp. sepedoniw111 (pudricin anular de la papa).

Curtobactcrium: El p(~ptidoglicano en este gnero est basado ~m la presencia de ornitina y tambin ausencia de cidos miclicos. A este gnero
pasaron otras especies fitopatgenas ubicadas anteriormente en COlynebacterium. Se encuentra en plantas, en el suelo y en salmuera de aceite. La especie tipo es Cllrtobocterium citreum. La especie fitopatgena ms importante
es C flaccllmfaciens, que comprende los patovares C.f. p\'. flaccumfociens
(marchitamiento bacterial del frjol), C.J. pv. betae, C.J. pv. oortii y C.f. p".
poinsettiae.
Arlhrobacler: Gnero conformado por organismos ampliamente distribuidos en el ambiente, principalmente en los suelos. La especie tipo es A.
globiformis, y desde el punto de vista fitopatolgico, la especie A. ilicis, que
155

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

fue transferida de Corynebacterium con base en un subcultivo de la raza


tipo.
Grupo 22: Actinomycetos Nocardioformes. El grupo se divide en cuatro
subgrupos, el primero de los cuales comprende bacterias que contienen cidos miclicos en su pared celular. En este subgrupo se han incluido los gneros fitopatgenos que tpicamente producen micelio ramificado, que temprano o tarde se fragmenta en elementos bacilares o cocoides que son marcadamente pleomrficos.

Rhodococcus: Son organismos Gram-positivos aerbicos, sensibles a la


lisosima. Estn ampliamente distribuidos en la naturaleza y abundan principalmente en el suelo y el estircol do herbvoros. Algunas razas son patgenos de los animales. incluidos los humanos. La especie tipo es Rhodococcus
rhodochrous y como fitopatgena se ha registrado la especie R. fascians (antes conocida como Corynebactcriwn Jascians)' que se ha encontrado causando agalla foliosa en muchas plantas herbceas ornamentales. anuales o perennes.
Nocordio: Gnero que contiene organismos Gram-positivos o Gram-variables y aerbicos. El glicano de la pared celular contiene residuos de Nglicolil. Est ampliamente distribuido y abunda en el suelo. Algunas razas
son patgenos oportullistas en humanos y animales. La mayora de especies
son resistentes a la lisosima. La especie tipo es Nocardia asteroides y se ha
registrado a N. vaccini como especie fitopatgena.
Grupo 25: Estreptomicctos y gneros relacionados. El nico gnero que
contiene especies fitopatgenas es Streptomyces, el cual forma micelio extensivamente ramificado que ti veces se fragmenta. Algunas especies producen estructuras similares a esclerocios, picnidios o sinemas. Son Grampositivos y aerobios. Producen amplia variedad de pigmentos. los cuales son
responsables del color del micelio vegetativo y areo. Tambin se pueden
formar pigmentos de color difusibles. Muchas razas producen uno o ms
antibiticos. La especie tipo es Streptomyces o/bus y la nica especie fitopatgena registrada hasta ahora es S. scabies (sarna comn en papa y la viruela
de la batata).
Grupo 30: Los Mycoplasmas o Mollicutes: bacterias sin pared celular. En
este grupo se han ubicado organismos procariotas muy pequeos, totalmente carentes de pared celular, limitados slo por la membrana plasmtica e
incapaces do sintetizar peptidoglicano y sus precursores. En consecuencia
son resistentes a la penicilina y antibiticos anlogos y sensibles a la lisis
mediante choque osmtico, detergentes. alcoholes y anticuerpos ms complemento.
Son organismos pleomrficos y varan en forma desde esfricos o piriformes hasta filamentos helicoides o ramificados. Generalmente no mviles;
156

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

sin embargo algunas especies muestran movilidad por deslizamiento sobre


superficies hmedas. Las especies que tienen forma de filamentos helicoides exhiben movimiento rotatorio, flexional y traslacional.
Los mollicutes son Gram-negativos. La mayora de las especies requieren
esteroles para crecer en medios artificiales, aunque algunas especies pueden
crecer pobremente en medios artificiales y pueden ser fcilmente aisladas
mediante procedimientos de cultivos de clulas. La mayora son anaerobios
facultativos. aunque algunos son anaerobios obligados. En condiciones adecuadas la mayora do especies forman colonias que tienen la apariencia de
"huevo frito". Todos los mollicutes son parsitos, comensales o saprofitos y
muchos son patgenos de humanos, animales. plantas e insectos. Los organismos de este grupo hasta ahora reconocidos como especies fitopatgenas
se han relacionarlo con el nombre genrico de fitoplasmas.
La mayora de especies requieren colesterol o esteroles relacionados para
su crecimiento. En plantas las enfermedades ms conocidas son: amarillamiento del Aster, que tiene como vector al saltahojas Macrosteles fascifrons,
el amarillamiento letal del cocotero y otras clases de palmas; el insecto Myndus crudus ha sido reconocido como uno de los vectores; necrosis del floema del olmo. asociada al saltahojas Scophoideus /uteo/lIs; enfermedad del
dL azno. transmitida por saltahojas de los gnerl . Collodonus y Scaphytopius; declinacin del peral. diseminada por la especie insectil Psyllo pYl'ico/0, amuchamiento, machismo o proliferacin de yemas de la soya, cuyo vector es la especie Scaphytopius fuliginosus.
Spiroplasma: Son fitoplasmas helicoides que se mueven mediante flexin
o contraccin. Requieren colesterol o posiblemente otros esteroles para su
crecimiento. Han sido aislados de la hemolinfa e intestinos de garrapatas, de
fluidos de plantas vasculares e insectos que se nlimentan de dichos fluidos y
de la superficie de flores y otras partes de las plantas. La especie tipo Spiroplasmo citl'i es patgena en ctricos (toronja y naranja) en las que causa la
enfermedad conocida como "stubborn", la Lual puede ser transmitioa con
frecuencia moderada meoiante yemas e injertos y en los huertos a travs de
saltahojas como Circulifer (Nevaliturus) tenel/us. Scophytopius nitridus y S.
Clcutus delollgi. La misma especie (S. citri) se ha encontrado afectando rbano y otras plantas herbceas con la participacin de Macrosteles fasci/rons
como vector. S. kunke/i se determin como el agente causal del achaparramiento del maz y en este caso los insectos vectores son entre otros Da/bu/us
elinlCltus y D. maydis.

Manejo
Las bactorias. al igual que cualquier otro agente fitopatgeno, deben ser
"manejadas" mediante la implementacin de una serie de estrategias que
157

Marina Sanchez de Prager - Fernando Marmo/eJo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

integren los principios ti travs de los cuales se enfrentan los disturbios sanitarios ele los cultivos Tlles principios son:
1. Exclusin.

rigen para el i
ele la selecc
cada.

cuenta las normas cu


]ps vegetales a cada pas
propagilcin y el uso ele
(:11

2.

Eliminacin o erradicacin de plantils o pilrtes ele la planta que se emplean como semilla. Esta mediela Sl:~ aplicd cUdndo es una priictica viable
o posible, medill1te prcticas ele cultivu (m6toclus culturlles), tratlmiento f[sico, por ejelTlpl aplicar:in ele udor. secamiento de granos y frutos,
refrigeracin y el empleo de radiaciones.

3.

1 h lgico o control qumico.


se tirme con el
mc!;o!)(J(:fc[' para la proteccin
siembra COll
En cuanto il sustaIlcias
que algunos I
cobre tienen efecto bactr:ri
forma se pueden
pau tratamientos al follaje, a la semijla, al
lo, t1 las heridas y con algunos materiales vegetales en poscosecha.

4.

Proteccin

Slle~

Inmunizacin mediante la produccin de materiales resistentes, que resulta el mtodo ms econmico y spgmo l travs del mejoramiento gentico. El principio de inmunizaci6n incluye adems el mejoramiento de
las condiciones de crecimiento de las plantas. Para las enfermedades bacterianas no
relacionados con prol'cci
;1
resistencia

5. Terapia med
qumico: se han utilizadu
mente alguIlos
la estreptomicina, ten]
que su t!mp
adems que son sustanci;s
::
cas en cuanto al sitio ele accin y pueden llegar a inducir resistencia. La
tetraciclina se ha ensayado en el caso de los mollicutes.

Tratamientos trmicos o termotempia con niveles de temperatura y tiempos de exposicin que afectan al patgeno ms no la viabilidad del material vegetal.
Ciruga o el
en plantas

poda de partes afectadas,

E'l caso lo amerite.

6. Evasin: Es!,
manejo de condiciones
pH y humee! d.
1
al estudio o anlisis de
ca, la seleccin elel stio de siembra y seleccin de la poca propicia para
la siembra.

158

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Clnica y diagnosis
El dingnstico e1(! enfermedades ele origen bacteriano se desarrolla con
base en una serie de pasos, algunos comunes para todos los agentes fitopatgenos y otros espncficos _)(Ira este tipo ele organismos. A continuacin se
enumeran los pasos gnnnrtles, sin entrar en d(!talles:
a.

Identificacin elel hospednnte, ojal l nivel de 8specie con informacill


complementmia acerca elel sitio en el cual se est desarrollando. condiciones ambientillns, dnl1sidild de siembra (si se trnta de cultivos). cOllCliCones de suelo. prcticas dl~ cultivo dectuadils. otc.

b. Descripcin df) la sintomalologil: sta es irnporlElnte pero no suficientn


para determinar la etiologa de lil enfermedad.
c. Consulta bihliogrMicn: con buen conocimiento en estos tres pas()s se puede
iclentifiC1l' la causa ele l!nfcrmcdades de comn ocurrencia.

el. Desarrollo dp los postulados de Koch: conducen con mayor seguridad ElI
diagnstico. En el caso de parsitos obligados deben introducirse algunas variantes al segundo de dichos postulados: "aislamiento del agente
causal (m cultivo puro".
e. Descripcin elel organismo: algunas de ' s pruebas que se Dnumeran El
continuacin. principalmente las relacionadas con morfologia, sn pueden rnalizar a medida que su ponen en prctica los postulados ele Koch.
OtrElS que tienden a definir (l! gnero bacteriano, la especie y qu iZs el
piltovar o la subespecie deben realizarse una vez se ha comprobado la
patogenicidad elel organismo involucrado. La descripcin comprende:

Morfologa: Forma, tamoo, reaccin de Gram, movilidad

Caractersticas de cultivo: Consistencia de lo colonia, elevacin, tamao, forma, produccin o no de pigmento, fluorescencia, etc.

Caractersticas fisiolgicas: Tem; eratura ptima de crecimiento, sensibilidad a sales, etc.

Actividades bioqumicas: Produccin ele catalasa. urensa, oxidasa.


cido sulfl1drico, indol, reduccin de nitratos, acumulncin de PHB
(grnulos de poli-beta-hidroxibutiratol. capacidad para hidrolizRr gelatina, almidn, pectatos. utilizacin ele carbohidrntos (Fructosa,
Mannosa, Galactosa, Arabinosa) como fuente de C y energa, etc.

Cuando el proceso de identificacin se hace complicado lo ideal es recurrir a los especialistas y una buena fuente es el envo de cultivos puros a
instituciones como el I.M.I. (Intmllltional Mycologycal Institute), el cual,
mediante el pago de algunos derechos, hace la descripcin y enva el resultado por escrito.
159

CAPITULO VI

Los micoplasmas omollicutes:


fitoplasmas
Introduccin
Los organismos procariticos que causan enfermedades en las plantas
estn ubicados en dos grupos: las bacterias y los micoplasmas o mollicutes
hoy llamados fitoplasrnas. Los miembros del primer grupo, como se expuso
en el captulo anterior, son organismos que tienen pared celular y, en general, pueden crecer en medios bacteriolgicos comunes. En la segunda agrupacin se ubican bacterias carentes de pared celular. pertenecientes al Grupo 30, de acuerdo con la clave taxonmica propuesta en la novena edicin
del Manual de Bacteriologa Determinativa de Bergey, 1994.
Los micoplasmas o mollicutes incluyen especies parasticas, comensales
o saprofitas y muchas son patgenos de humanos. animales. plantas e insectos. En el caso de las especies patgenas en plantas. inicialmente se emple
la denominacin M.L.O. (Mycoplasma Like Organisms) u organismos similares a micoplasmas, para diferenciarlos de los otros; en esa denominacin
se incluan organismos con caractersticas de los gneros Mycoplasma y Spiroplasma. Recientemente se ha propuesto y se est generalizando el uso del
trmino fitoplasmas para incluir a los antiguos M.L.O. y dicho vocablo se
utilizar en este captulo.

Generalidades
El grupo do los Mollicutes, probablemente los organismos ms pequeos
con crecimiento autnomo. reviste especial inters evolutivo debido a su
estructura celular extremadamente simple. Estos procariotas carecen de pared celular y estn limitados por la membrana plasmtica. son incapaces de
sintetizar peptidoglucanos y sus precursores. por lo tanto son resistentes a la
penicilina y sus anlogos. pero susceptibles a la tetraciclina y sensibles a
lisis por choque osmtico, detergentes. alcoholes y anticuerpos especficos
161

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo O/ero

ms complemento. Los organismos helicoidales son sensibles a la digitonina, amfotericina 8 y al sulfato de sodio polletanol.
Son organismos pleomrficos, su forma vara desde esfrica o estructuras
piriformes (0.3 a 0.8 um de dimetro) a filamentos helicoidales ramificados.
La duplicacin del genoma precede a la divisin celular, pero no est estrictamente sincronizado con ella. Su multiplicacin ocurre por gemacin y
pueden observarse cadenas a manera de las cuentas de un collar, pero tambin se presenta la clsica fisin binaria.
Generalmente son no mviles, aunque algunas especies muestran movilidad por deslizamiento en superficies hmedas. Las especies que tienen
forma de filamentos helicoidalns exhiben movilidad rotatoria, flexional y
de traslacin. No se conocen estados de reposo (endosporas) y son gramnegativos.
Las especies hasta ahora est udiadas pueden crecer en medios artificiales de complejidad variada. En condiciones adecuadas, en medios slidos,
la mayora de especies forman colonias que tienen apariencia caracterstica de "huevo frito" y requieren colesterol y grandes cad8nas de cidos grasos para su crecimiento. Sin embargo, ciertas razas pueden crecer pobremente en medios artificiales y ser aisladas ms fcilmente mediante cultivo de clulas.
La mayora de especies son anaerobios facultativos, algunos son anaerobios obligados y mueren por exposicin a cantidades mnimas de oxgeno.
Las colonias en medio slido son diminutas, menores de 1 mm de dimetro.
Los organismos tienen la tendencia a penetrar y crecer dentro del medio.
El tamai'o del genoma vara de casi 5 x 10X a 1 x lO" daltons. El mol % G
+ e de ADN es bajo y va de casi 23 a 40%.
Estos organismos presentan metabolismo por:o eficaz para producir energa por lo cual deben consumir grandes cantidudes de sustrnto y as mantener el adecuado aporte de energa para la sntesis de macromolculas. Su
capacidad biosinttica es limitada, por ello son nutricionalmente exigentes.
Esto se ilustra por el requerimiento de lpidos y precursores complejos para
la sntesis de la membrana.
La mayora de las especies emplean carbohiclratos como fuente de energa, algunos son oxidativos, poseen sistema cilocromo y producen ATP en la
cadena de transporte de electrones. Otros se asemejan a lns bacterias cido lcticas que siendo fermentativas estrictas producen energa por fosforilacin de sustrato y cido lctico como producto final de la fermentacin de la
glucosa.
Su metabolismo lipdico es complejo y no est totalmente aclarado, jugando papel importante los esteroles. Algunas especies que poseen esteroles
162

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

en su membrana no los sintetizan, los requieren preformados en el medio de


cultivo. La mayora de especies en medio de cultivo forman en sus colonias
corpsculos oscuros mediante los cuales almacenan calcio y magnesio debido a la gran capacidad lipoltica que tienen.

Clasificacin
La novena edicin del Manual de Bergey ubica los mollicutes como eubacterias y los clasifica a nivel de gnero, si son aerobios facultativos o anaerobios obligados ya su vez si requieren o no esterol.
CUADRO 1. CLAVE Pt\Ri\ LOS CNEROS DE MOLLICUTES.

1. Anaerobio facultativo o microaerobio.


A. Requiere esterol
1. Clulas helicoidales durante el crecimiento logartmico.
Gnero: Spirop/asIlw
2. Clulas no h8licoidaJes

a. Ureasa positivo

Cnero: UHwplasnlO
b. lJreasa negati\'o
G;llero: I'v!.\cop/osma

Gnero: AcholeplosIna
JI. Anaerobios ohl igados.
A. Rp.qu8re esLerol

Gnero: A nneroplosma

B. No requiere esterol
Gnm'o : Astt:roleplosmn

Agrios, 1994, los ubica en la clase Molliclltes, orden Mycoplasrnatalcs:


familias Mycoplasmataceae con el gnero Mycoplosmo, Acholeplasmataceae con el gnero Acholeplasl11a y SpiroplusmatacfJuc con el gnero Spiroplasma.

Fitoplasmas
Estos organismos so observaron por primera vez al microscopio electrnico en 1967, ell el floema de plantas con snt'Jmas de amarillamientos, los
cuales en principio fueron considerados do origen viral. En ese mismo ao
se determinaron los insectos i.'ectores de <Jstas enfermedaoes y adems se
demostr que los agentes causales eran susceptibles a Id. tetraciclina pero no
163

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

a la penicilina y que los sntomas de las plantas podan suprimirse temporalmente mediante tratamiento con antibiticos, lo cual no sucede cuando el
patgeno es un virus.
Desde ese entonces los investigadores han desplegado su actividad para
aislarlos y cultivarlos como clulas libres en medios de cultivo, empleando
tcnicas usadas para cultivar micoplasmas de animales, con el fin de caracterizarlos y demostrar su patogenicidad utilizando los postulados de Koch.
En Colombia se han identificado las enfermedades Amachamiento de la
soya causada por un fitoplasma (Figura la) y el espiroplasma del achaparramiento o enanismo del maz Corn Stunt Spiroplasma (Figura lb).
Los fitoplasmas son organismos pleomrficos que habitan solamente en
los tubos r.ribosos del floema do las plantas infectadas, as como en tejidos
vasculares de races, tallos, hojas, pecolos, pedicelos y estructuras foliceas
de flores. Como se dijo al principio nste grupo contiene los antiguos MLO,
entro los cuales se ubican los organismos con caractersticas do micoplasmas
y los espiroplasmas.
Preparaciones purificadas obtenidas de plantas afectadas por la filodia
del trbol (Clover PhyllodyJ CP y del Amarillamiento del Aster (Aster Yellows) AY mostraron formas no helicoiclales pleomrficas (esfricas, ovaladas y
filamentosas).
La membrana celular de estos organismos es igual a la de todos los seres
vivos (naturaleza fluida), carece de mesosomas y las protenas constituyen la
mayor proporcin de sus componentes; las cuales se supone juegan papel
importante tanto en los procesos estructurales como catablicos; todo indica
que los sistemas de ATP-asas que se encuentran en ella estn ntimamente
relacionados con la porcin interna de la membrana.
Presentan citoplasma con ARN en forma de ribosomas en nmero relativamente bajo y en el cual se halla un sistema de fibrillas de DNA enredadas
sobre s de forma circular, similar al cromosoma bacteriano. Todos los constituyentes se encuentran en mucho menor proporcin que en las bacterias;
as por ejemplo, mientras que los fitoplasmas poseen unos pocos cientos de
ribosomas, las bacterias poseen 50 a 100 veces ms.
Por electroforesis se determin que en los fitoplasmas CP y AY la protena est ubicada en 11 a 13 bandas respectivamente, que su peso molecular
vara entre 33.000 y 117.000 daltons para el primero y 38.000 a 117.000 para
el segundo.
La composicin de los aminocidos para ambos fitoplasmas fue similar;
la concentracin del aminocido glicina fue ms alta, seguida de alanina;
isoleucina, leucina, valina y arginina estuvieron presentes en concentracio164

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

nes relativamente altas pero las cantidades de fenilalanina, prolina y tirosina fueron bajas.
Con preparaciones puras del AY se demostr que la actividad enzimtica
del NADH oxidasa y de la ATPasa est confinada a la membrana celular y la
del NADPH oxidasa al citoplasma. La RNAasa y P-nitrofenil fosfatasa se encontraron principalmente asociadas con la membrana y la DNAasa con el
citoplasma.
La ATPasa y el NADH oxidasa juegan papel importante en la respiracin
y acople de energa. La actividad de la RNAasa y las fosfatasas actuando

como p-nitrofenil fosfatasa pueden estar involucradas en la degradacin de


macromolculas a molculas ms pequeas, capaces de ser permeables a la
membrana.
Las nucleasas pueden inducir y aun contribuir a la patogenicidad, hidrolizando el cido nucleico del hospedero pnra producir nucletidos y nuclesidos que sean transportables.
La composicin de los lpiclos del CP y AY constituyen aproximadamente
el 301<) al 40% de la c:lula respectivamente. La mayor clase de lpidos en
ambos fitoplasmas fueron fosfolpidos, glicolpidos esteroles y cidos grasos.

El gnero Spiroplasma
A este gnero pertener.oj) los fitoplasmas helicoidales de longitud variable y dimetro de 90 a 250 nm. Aunque el papel de los organismos helicoidales observados en extractos de plantas enfermas no se estableci en su momento, tal descubrimiento contribuy significativamente a su cultivo pues
su morfologa permiti monitorearlos durante su aislamiento. El trmino espiroplasma fue sugerido por la movilidad de los organismos helicoidales
asociados con el achaparramiento del maz. Al mismo tiempo se especul
que los filamentos sinusoides observados en cortes ultrafinos de plantas ele
ctricos afectadas por el Stubborn exhiban morfologa helicoidal parecida a
los del achaparramiento del maz.
El descubrimiento de espiroplasmas como patgenos de plantas estimul gran inters en estos microbios los cuales son nicos en su capacidad de
mantener su forma helicoidal y exhibir movilidad en medios lquidos.
Aparte de los espiro plasmas patgenos de plantas de ctricos y maz,
Spiroplasma citri y S. kunkellii respectivamente, han sido aislados otros a
partir de artrpodos tales como abejas y la mosca DrosophiJa en la cual
aparentemente acta como simbionte que regula el sexo en poblaciones
naturales.
S. citri, el agente causal del Stubborn de los ctricos (Figuras le, ld) es el
ms estudiado de todos los espiroplasmas por ser el primer mollicute culti165

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son Bravo Otero

vado de plantas. Aunque su morfologa puede cambiar durante su crecimiento,


todas las clulas son filamentos cortos durante la fase de crecimiento logartmico y pueden ser mucho ms largos en la fase estacionaria; en la fase de
muerto las clulas son usualmente distorsionadas, a menudo no helicoidales
o esfricas. Las clulas muestran bandas de DN1\, ribosomas de aproximadamnte 17 11m de dimetro distribuidos en el citoplasma.
Recientemente, S. citri y S. kunkellii se han encontrado en plantas afectarlas de Catlwrantus rosew; y en ambos casos se ha demostrado que se multiplican en ciertas especies de saltahojas despus de que los insectos son inyectados con suspensiones de cultivo que contienen los microorganismos.
La homolillfa del vector Dolbulus eJjmatus examinada al microscopio de campo oscuro mostr la pres(~ncia elo organismos helicoidales despus de sor
inyectados los insectos. 1\1 respecto el espiroplasma del achaparramiento
del maz, S. kunkcllii, difiero del stubborll de los ctricos, S. citri, porque
ste en la hemolinfa del saltahojas Eusr:elis plchejus disminuye el nmero de
hlices dos a tres das despus de inyectado el insecto y gradualm(~nte el
fi lamento se distorsiona. Dpspus de una semana ni hiilices ni filamentos
son observados pero s cuerpos pleomrficos; sin embargo S. citl'i pudo ser
cultivado a partir de la hemolinfa ele insectos cuatro semanas despus de
inf(~ctados con clIltivos que contenan espiroplamas mviles y helicoidales,
as mismo fue aislado de glndulas salivales de saltahojas doce a catorce das
despus de ser inyectados.
Todas las razas de espiroplnsmas aisladas de plantas son helicoiclales y
mviles, excepto una raza de S. citri la cual no ('S helicoidal ni mvil; aunque produce la tpica colonia de "huvo frito" en medios slidos nunca ha
producido cllllas helicoidales. Esta raza causa sntomas en plantas irlntcos a los producidos por las razas helicoidalns. Pruebas de serologa, hibridacin de DNA y otras propiedades demostraron que verdaderamente corresponde a una raza de S. citri.
La memhrana de S. citri contiene principalmente protenas y Ipidos y
baja concentracin de carbohidratos. Las protenas representan aproximadamente 57%, los lpidos 34% y los carbohidratos e12% del total del peso soco
de las membranas con densidad aproximada de 1.18 g/ cm:!.
Investigaciones en la actividad de enzimas en S. citri han demostrado
que Adenosin trifosfatasa (ATPasa) y p- nitrofenilfosfatasa fueron asociadas
a fracciones de la membrana. Nicotinamida-adenina-dinucleotido oxidasa
reducida (NADH) se encontr en fracciones do citoplasma. La concentracin
de ATPasa dependi del estado de crecimiento de S. citri y se increment
durante la fase de crecimiento pero disminuy rpidamente tan pronto como
la actividad metablica disminuy. La concentracin de ATPasa fue encontrada estrictamente proporcional al nmero de clulas durante el estado o
166

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Figura 1. Enfermedades causadas por fitopla .mlOs: a) Amachamiento de la soya, presenciu de filo dio en la planlo de lu izquierda , b) Achoparramienlo o enanismo del maz,
c) Stllbborn de los ctricos. asimetra y frutos pequeos, d) Stllbborn de los ctricos,
hojas angostos, c!orticas a lo 100gO de las nelvadurns . similar a deficiencia de zinc.

167

Manna Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

fase de crecimiento y es considerado un exc elente mtodo para determinar


su es tado de crecimiento in vitro.
La mayora de los lpidos en S. citri estr: localizados en la membrana.
Alteraciones en la composicin de los lpidos en los medios de cultivo inducen cambios en las caractersticilS morfolgicas del espiroplasma con prdida de vi abilidad de clulils. La composicin de los cidos grasos de la membrana mostr ser especialmente constante para cido palmtico (50%), seguido por cido esterico (20%), cido oleico (20 % ) y cido linoleico (5%).
Todos los espiroplasmas, incluyendo razas de S. citri, h an demostrado
tener molculas de DNA extracromosmico (plsmidosl cuyo nmero y tamao varan de acuerdo con el espiroplasma examinado.
Segn investigilci ones recientes, basadas en la caracterizacin de su DNA ,
esp ecialmente el contenido C+C determinado por hibrida cin de DNA-DNA,
serologa y patrones de protena (mapeo de pptido) determinados por electrofo resis en ge l de polilcrilamida se han determinado 11 grupos. de los
cuales el grupo I al cual pertene ce S. citrj conti e ne ocho s ubgrupos.
Los primeros cultivos de espiroplasmas (S. citri) fueron re alizados en
medios relativa mente simples, con una com p osicin sinlllar alusaoo para el
crecimi ento dA m icoplasmas de animales. El medio contena PPLO broth o
agar, suero de caballo, extracto fres co de levadura y triptona suplementado
con suerosa , glucosa, fructosa y sorbitol. El S. citri crece bien en medio de
cu lt ivo usado para mantener in vitro el espiroplasma del enanismo del maz,
en el cual el suero de caballo es reemplazado por colesterol y cido palmtico. Ms de ve inte medios d e cultivo han sido formulados para el cultivo de
espi roplas mas fitopatgenos.

Transmisin
La mayora de fitopla smas son transmitidos d e planta a planta por insectos de las fa m ilia s Cicadellidae y Fulgoridae y unos pocos de la familia Psyllid eae.
Los insectos vectores pu eden adquirir el patgeno despus de que se alimentan sobre plantas enfermas durante varias horas o das. Los fitoplasmas
son organismos qu e en relacin con su vector son considerados patgenos
transmitidos en form a persistente, por lo tanto requieren largos perodos d e
adquisicin. Los hasta ahora reportados en la transmisin de fitoplasmas
son muy variables. La gran mayora son transmitid os entre 8 y 24 horas.
Los insectos vectores se tornan ms infectivos cuando se alimentan sobre
hojas y tallos jvenes d e plantas enfermas que sobre plan tas adult as. El insecto vector no puede transmitir el fitopl asma in me diatamente d espus de
alimentars Aen una planta enferma , pero empieza a transmitirlo luego de un
168

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

perodo ele incubacin de 10 a 45 das y en tocios los casos hasta ahora estudiados requieren tiempo desde que lo ldquieren hasta que lo transmiten para
ser infectivns.
El pnroclo 00 incubacin es requerido para la multiplicacin y distribucin del fitoplasma dentro del insecto; primero se multiplica en las clulas,
luego pasa l la hcmolinfa e infecta los rganos internos y eventualmente
invtlde el cerebro y las glnndulas salivales: cuando la concentracin alcanza
cierto nivel nn este ltimo rgano el insecto inicia la transmisin eh;! patgeno a nuevas plantas y contina hacindolo mns o menos eficiente por el
resto oe su vicla.
Varios ()studios han demostrado que son propagativos en su vector y plWden inducir cambios benficos dutrirnentaJos en ollas. Los fitoplasmas pueden ser adquiridos tanto por ninfas como por adultos y sobreviven despus
de las mudas, pero no pasan ele adultos a huevos y por ende a la generacin
siguiente. por lo cual los nm)\fOS indiviouos deben alimentarse con el fin de
llegar a ser infectivos.

Serologa
Las Cl1forllleclades causadas por fitoplasrnas son normEdmnntl) diferenciadas sobre la base de sus sntomas, rango rlu hospederos y especificidad
del vector.
Aunque las tcnicas inmullolgicas (s:rologa) SOIl d(~ gran valor para la
identificacin eh) enfernwclndes callsadus por virus, bacterias y espiroplasmas, estas han sido empleadas para el diagnstico de unos pocos fitoplasmas. Han sido preparados antisueros para el diagnstico ele AY, ep. EPX,
Grapevinc flnvesccnce dore)' (GFD) y escoba de bruja de la papa (Potato
Witches Broom) PWJ3.
La tcnica de Elisa hn sido rncomndaela como ulla prueba conveniente,
sensible y rcpida para la deteccin de S. cit en plantas enfermas y tambil1n
puedu ser usada para estimar cuantitativamente el nmero de clulas del
mismo organismo en un medio de cultivo. Mediante esto mtodo puede ser
detectado un nivel mnimo do 10 4 Y 10" clulas. Las tcnicas de Elisn. e inmunoelectromicroscopia (LE. M.) fueroll lIsadas para dete~:t;U" AY Y EPX y su
mnima concentrnc:in requerida fue 4 y 12 ~g Iml rOspt:cti\'amOl;te.
Anticuerpos monoclonales han sido lIs:tclos para rletectar AY, pero no
dieron ninguna reaccin; 10'<: antisueros policlonales siempre dieron alguna
reaccin r.ontra antgenos en plantas, aunque se reruieren prepamciones altamente purificadas del organismo (fitoplasma) para producir antisueros, lo
cual es difcil de obtener.
La rlistribucin y relativa concentracin de S. citri en plantas de CatharGnthus rnseus L. infectadas por injerto pueden sor determinadas mediante
169

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Elisa. Antgenos del espiroplasma permitieron detectarlo siete a diez das


despus de inoculado; el primer sntoma en plantas no apareci hasta antes
de quince a diecinueve das despus de injertadas, esto demostr que este
mtodo puede ser utilizado como diagnstico temprano antes que el desarrollo de sntomas o microscopia electrnica.
Antgenos de S. citri tambin han sido detectados en el saltahojas Eusce/idus variegatus que fueron inyectados con altas dosis de espiroplasmas, as
como de insectos recolectados en el campo. Los resultados fueron obtenidos
usando antisueros policlonales, Jos cuales no permitieron comparar razas de
la misma especie por tener antgenos determinantes comunes.
El uso de anticuerpos monoclonales, producidos para S. citri, ha demostrado tener gran valor en pruebas ele Elisa para diferenciar las razas de las
distintas reas geogrficas; de la misma manera anticuerpos monoclonales
contra el espiroplasma del enanismo del maz mostraron reaccin especfica
en pruebas de Elisa con tres razas del mismo espiroplasma, pero no con otras
razas de espiroplasJ11as de diferentes grupos o subgrupos.

170

CAPITULO VII

Los

gas

Introduccin
"Cuando en el pas llJya hamhre, o peste, o las plantas se sequen por el
calor. o vengan plagas de hongos, escucha entonces toda oracin. Antiguo
Testamento, Libro 1 de Reyes 8:37.
primeros ese!!
sobrelah
de la huma
el indican
desde
momento en
a depencll;f
la produccirn de
alimcll
, forrajes
vegetales.
problernas
p()rdidas ele
LClsechas y escasez de alimentos, ocasionados por el ataque de hongos, causaron
continuas preocupaciones.
Es un hecho incuestionable ql18
hongos h,m ejercido y ejercen hoy
gran i lU)J1cia en 1
del hombr;
los animal
,as prdi
debidas
ff::Tmeelades
plantas.
onadas por
contri bu
en
alto porcentaje a los problemas de bienestar de la sociedad.

Alrededor de dos tercios de las enfermedades de las plantas son causarlas por hongos; se conocen cerca de cien mil especies. de este tipo de organisl
mayora el
tienen hih
proftico erHoximadampll ocho
mi
es son filo
itas.
El estudio de los hongos tiene aproximadamente 270-300 ai.os, poca en
la cual, dehido a sus manifestaciones devastadoras en los cultivos, investig=dores como Mathieu Tillet (1714-1791) comenzaron a realizar experimentos
con
hongo Tllc(iu
agente
I del carb("1Il d trigo, encontra
que
ntagioso;
en 1729
espores
ongos que:
en J1l
de cultivo ofbi'nicos, como rodajas de mel ,observ el
110 de micelio y lleg al pleno convencimiento de que los hongos provenan
de sus propias estructuras.
En 1807 J.B. Prevosl demostr
trigo era
ionada por

llitivamente
hongo, del
171

la enferm
estudi la

del

Marina Snchez de Prager - Fernando MarmoleJo De la Torre - Nelson Bravo Otero

cin y reproduccin de sus esporas, la influencia de los factores ambientales


en la incidencia y desarrollo de la enfermedad y propuso un sistema ele control remojando
jj
r()
11
ucin de sulfato de cobre.

Caractersticas
Definicin
latn Fungus (seta) y del
Se utiliza la
(esponja) par,) denominar a los organismos cornpucstos de clulas eucaritiCilS portadoras de esporas, aclorofl1cils que por 10 general se reproducen
sexuill y ilscxualrnente y cuyas estructuras som,ticas filamentosas y ramificadas, conocidas como hifas, estRIl rocleildas por pareeles celulares que contienen quitina, o celulosa, () lmbas, junto con otras molculas orgnicas complejas.
Por carecer ti
saprofticas, s1mbi
nismos helerl
tituidos por unil
cleo, nucl()olos.
lo rmdophsmtico, etc.

n!ticos se han adaptado


absorbiendo su alim
nica preformada. En gel
ele clulas, con todas sus
membrana celular, mitncnn

[.1S,

La fase somtica o vegetativa de la mayora de los hongos est constituida


por filamentos microscpicos denomirwdos hifas, los cuales se originan en
forma ele tubos germinales cortos que surgen de una coniclia en germinacin
(Figura Id), cwcen apicalll1ellte y so ramifican en toclls direcciones formando en conjunto 1
l.nmo micelio (Figura lb).
Morfologa
Inelividualnli'lltc
f()fInada por una pared
rente, tubular 1]
en tapizada por una cap~t
de grosor varia
1) dentro de las clulas
interrumpido a intervalos regulares por paredes transversales, conocidas como
septas, que divide a cada hifa en compartiminntos o clulas (Figura lc).
Las septas son en general tabiques perforados, 10 cual permite la comunicacin y nI flujo de protoplastos entre las clulas adyacentes; los hongos con
esta caracterstica se dice que tienen micelio septado. Los poros suelen ser lo
suficientt;munt8 grand8s para p8rrnitir el paso de los ncleos y otros orgnulos, en clulas 11]
En algunos
cticos o ele miceii
se considera critprio

presen tan septas y se


presencia o ausencia de
para ubicar los hongos en el

Algunos hOllgos son


otros no forman talos o
sino estructuras conocidas como plasmodios: masas amorfas de protoplasma
172

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

mllltinucleado, desprovisto de pared celular, y que corresponden a la fase


somtica, de la clase Plasmodiophorornyr:etes (Figura 1d).

Transformaciones de micelio
Durante cierlas fases del ciclo de vida, las hifas que conforman el Illicelio
de algunos hongos se agrupan en tejido organizado, flojamente entrelazado,
que se denomina plectnquima: ste recibe el nombre de prosnquima cuando
sus clulas tpicamente alargadas son fciles de distinguir y las hifas que lo
componen son ms o menos paralelas unas a otras, o pseudoparnquima
cuando sus clulas son ms o menos isodiamtricas y ovaladas y las hifas
pierden su inrliviclualidad y no son distinguibles como tales.

(e)

Figura 1. o ) Conirlio genllillullrfli (</OOxl. b) C'uju rle Pclri c on mict:lio, e ) MiL' p/io septado
HOOs) vd) P/asL1ludi() (-fOOs).

173

IvlcFiIH S,Jllc/Jez de Prager - Fernando MarrJl,'/e/o [\' Id Turre

,Aje/son Bravo Otero

L(JS h()llgos penetran inter o intracnlul;lfml~Ilte en los tejidos del hospeobtenir:ndn :-~li ;I
~ri:1 1

te 11a ustorios, q llC son


de hifas su!tltiC:l
r,'
adas que terminan en ir:
que l(~ sirven cornr)
IIIl
I t l l l n de l1utriClltes (Figurd
dc~r().

:,{ 1

En

()casi()nl~:;

"

Illdll

Illt

ld micelio

."t~

agr

,OIllOi'tIIS.

micu;';l~ptd(). CUd!
1 el organismo 81su lllildl1rcz so forman los conidicforos 'Uf; (()rrl'l;p()nden a hifas simples () lilI1lificlclas, en CllyO pice () lat.~r"'IIC:]I! 'le f()rmall las clulas conidigellds (ill(~ dan origen l las conidias (
I Lh)' (~n ;'Cj!lellos de micelio
ilseptaou (1 U)!), nliO algunas !Jifas fOflIl "
ngil:foros en cuyos extrt;1Il0S Sl~ rniginc:n ICs ,-. ------: - J,'igura Le).

Ell los h()ngos que presentan

C:ill1Zl

E1ll1icclio t!

lsexual

111

~(

's

mllios formando 8stnu u

COllW;

Picnidios,

Cllil

lUSO.

en cuyo interior se

Il

[oros \' tonidias (


masa !ll, hifas en forma de c()pa. sobre el
Ims c!cn"lnwute agrupados.

el"

lUi[

crecen conidi-

Clomidospora, coniclia oc pared gruesa, formad;l por la cliferenciacin


() intermedias, la cual funciona 8n general como espora

ll~luJ;ls !(~rlllillalns

di: J'l:;,isteI1cjil.

Esclerocios,

i'

() I

l'

wsistcnt8 a con
durante largos P l ) (
rabIes (FiglllH 3hi

Esporodoqu

Il il

!!!rmildo por el enrollan


es, que puede pernwll
umdo las condiciones

( 1)

'''II!

,:1

! \

en forma de alrl1oha ll.,.i

,j

ete cOllicli(f()[os.
EstroIllu, .:structura somi1tica compiletil sobre o dentro de la cual se forlIl<lIl

fruc:tifiGH:iOIlCS.

Rizoide, ramificacin COfta y dHlgHla del talo, parecida a una raz.


gClS,

U!l:! vez c:ull1nliclo ni I1lRxillln desarrullo de lil filse sumticR algunos hon()xccpto la e ,_.') I
\1 di:
prooucen estrllcturas el'i (1

La cLlS(' Chyr
p le! ni IglllltL

La

c:laS()

tdllgi,li

non

produccin sexual medLil1i


" 'el 111

,.

f1l'If)!'Ug"ni,<l1l5,Cd

,d i(.cin sexual a trav8S ele II!!l


pruclLlce oosporas (Figura 3c:).

Lll' Zygolll"cetes por reproduc:cilll SI:'(llli y t:rlpulncilI1 gametangial prodUD:1l ',tU Zygospora (Figura :Id).
174

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTAL ES

(b)

(a)

(e)

Figum 2. o) Ilnustoros de
mngio (4()()xll' d) ,<,'iJlelJ/O

UJl
(>

hongo (400x). 1)) C()nidifol'OS y conidil/s (40()x), e) E::;po(4()Ox).

COf'eJJ/}o

Los Ascomycetes por reproduccin sexual y copuldcin gametdngial,


contacto glmetangial. espermatizacin o sornatogamia producen ascosporas, las cuales se forrmm dentro de una estructura en forma de saco
llamada asea (Figura 4a). El asea puede estar o no contenida dentro de un
cuerpo fructfero IGmado aseoearpo.
Si lls dscas se forman en un cuerpo relativamente llllorfo cun una o
ms cavidadc:s es un ascocarpo tipo aseostroma: si el ascocarpo es ms
o menos glolJoso y completamente u)rrado n~cilJt) el nombre ele cleistotecio (Figura 4b); si ns ms o menos globoso, y presenta cuello corto o
largo, con una abertura cOllcida como ostiolo, se denomina peritecio
(Figura 4cl. y si es sell1i<1bicrtn o abierto en forma de copa se llama apotedo (Figura 4d).
La formacin dl-) los dift~ rcntus ascocarpus son criterios taxonmicos illlportantes para clasificm los ascomycetes en el nivel de rdenes.
175

_" _ _ _ Ma!ina Sanchez de Pra!lfi' - Fernando Ma,mo~ejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

En los Basidiomycetes las esporas sexuales S8 forman en tina estructura


cO!1ocidil cOlllO basidio. que tiene forma de masa () clava. mI la cual generalmente se forman cuatro basidiosporas.
A

IlHIIWJ'i1

ele sntf)sis so puede decir que los hongos son organismos:


Sl~

Cosmopolitas, porque

Eucariticos, Hwsto que prnsentan cIu las con ncleos verdaderos.

Hetertrofos, porrIuo su alinwntacin ocurre nH~diante absorcin a trRV:,


do sus hifas o de haustorios, sncretando enzimas extracelulares para degradar molclIlas qllf! no pueden tomar directamente.

Cuyo cn~cimient(j ocurre por elongacin apical de sus hifas.

Que tienen pared celtdar rgida; muchos contienen quitina.

QlW

Qun desarrollan ciclo de vida simpln o cOlllplHjO.

Con hbito saproftic(), parastico () on asor:aciones simbiticas.

dnsarroIlan en casi torlos los ambinntes.

presentan llwcanislllOS de reproduccin asexual u sexuaL () ambas.

Ecologa
Huy da se habla continuilnwnte del problema que implica d deterioro
progresivo del Ilwdiu alIlbientl~. en Jlllrjuicio df) los seres vivos qlln habitan
en csn [J1(!dio. Los hongos no ptwdun cunsiderarse aislados. ni independientl)S t!ld entorno donde se dl!surrollan~' menos an si tenemos en cuenta que
ddJido a Sil carencia de clorofild u de pigml)ntos C[lIimio o fotosintticos se
v{~n obligad()s. COIllO organismos hetertrofos. il bl:scar los nutrientes orgnil:(JS producidos por otros Sl~I'llS para lograr as su supervivencia.
En Illuchos aspoc:tos dl! la ecologa de los hongos se dtm1ll8stra que debido iI las grandes simlaridadl!s y gnnernlidades con otro grupos, incluyendu
al hombre, hay principios [lilril ellos que son fUlldanwntal(!s.
l.()~

h(Jngos se hilll adaptado

todas las formas dll vida posibles,

l()~;

hay

d(:uticos dt~ lguas dU!cl!S v Silladas, tUfwstres. con amplio rango ele hbitats
y con diferentes ni\'f~lps fin pnrElsitismo () f()fmas de vida.
En organismos fIallwntosus () unicelulares como los hongos, la superficit! du contacto COIl d substrato ns extremadamente alta con wlac:in al total
de la Illasa de protoplasma. po!' uso Hl8clnn crecer rpidamente y tener gran
infllllmcia sohf(! el nwdio ambif!ntn quP los rodea.

Niveles de parasitismo en los hongos


So

COlWCUll

entfl! los hongos dist i nlos

II i vnles (h~

parasi tisll10 como:

Simbiosis: ])os organismos vivos jlueden estar l~()ciados y en cierto senStH' lllutllanwnlf! parasitarios; sin 'H11bargo. no son en absolulo

tido puuden

176

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

(d)

Figura 3. (1) Pil.lliriio (4IJnx). !J) Es(:!l-.'m( :ios .

cJ Oosporas (400x! y d) Zygospora

(4IJOx).

patgenos e l uno para el otro. sino que, inc:lusivR, cada un o de ellos puede
ser esencial para e l desarrollo del otro. o l l rnfmos tener infl uencia beneficiosa en dicho cleslrrollo.
Los orgm ismo s qu e en l participan se conocen como simbiontes y un
ejemplo clsico son los lquenes: un hongo y una alga que viven en asociacin ntimo . o loS micorrizas qUA son simb iosi s mutualistas entre hongos del
suelo y roces de pbntas superiores.

Parsitos: Hongos qll(~ viven


dolos y causndoles dao.

expensas ele otros , de ord inario invadin-

177

Md!!!C,'

Sanchez de Prager - Fernando Marmolco [)c la Torre - Ncl.'lon Bravo Otero

Pon:,i{()s obligados: Organismos qlle; no jlllCc!Pl1 completar sus ciclos


binl('
IS SilW
1:;
di'
,1,II,l!!1 (1(: parasitislllo con Stl 11
'1 ji
jl()clnm llllliSllC

;C'

jll

l'arsitosf.

'J;

milli;rl

, ir

,,1

dCI

qlle

tlllll,

() tlmhi6Jl cr(:Ulr sohm

jllleden (Jutener al' 11\t,]


!lltiv8dos Pl1 me;c!ios elc (;1

,',lu

!i\i(11 \ 1 1 , '

protopLISIllil vi,!!], \ lI(:


ratorin,

orgnic:a

pued~lll
CJ

inflcr:t<1rC1 "
\ \
dl-; (llll [ivo ele lahoratorio,

lllHcli()s

Saprofito!:: !\qllf~l()s mWll1ismos CjtlC se, :Ilintentan de; sllbstancii1s orgniG1S el1 d(:Sli1llljlClSicin, son los m{s ilbuJldlllltfls en ll lldtllralezi1 y en general son IllllV beneficiosos ~'a qlle al c!l'sn!("grar 11li1lerii1 orgnica muerta.
los p l'ud u (lllS rtlsullan !l,s de s u des ntflglilci n s(m f{ei 1111(; II te as mi lactos por
otros lll'ganisI1ll \( :'1 ((mil' !dlll ,animales mic:rosc()pi(( \
(lIie
(lrg;llli~Il]()~,

Saprofitos
part ir de; tcjicl!

q I il~ oht irmrm su ali!llcm tn l'


o de maturidS inorgin e

ill!

1\

Sapn~rit()s J ___
lJ elll illfi~(lH

:llgUS Ci\pacr~s df~ creerr sub!!' llLllcr


otros orgallismos vivos, S(~g(lll lls circunstallcias,

Los hong(Js C1IC\ s()n facultativos

!-l0sc'im filS;S

muen"

parlstiG1S y saprufticas (-m

sus (ie:!lls !liCl[giclJs.

Nutricin y crE:ci
Los hong(ls

IWC,"il
1I f'1: 1111"
t(;S de [Js Il1lZill (" i 1" li( ,~"
c(ln rpdllilcil l
mento ( nduce [lli i I \,111

\'0

lc:iall~S como actiVdc!OII'1


illllclllll '.
rcncid () bajos Sllll1inisl 1>, II ll csporulclC:iln: el [dlll!:
l~tlZillHlS () metaholitos 1;-, Sil
\,1 1:1,;

mlltliros. com() hiddlgeno, Glrl]()lJo. nitd)geDU. ()xgrno, fsforo y

(-L<":lll'n;.

M:t;!(,()s, CO!110 potil.sio, Illagnesio, hierro, znCI, manganeso, cohn-;,


lihdeno v Ilel],I,),

Ll;; h()ng();.; del


v C:Olllpll(lStos r
qlle11S clllticlilrl

i.'

i ( ti

'qUif
!I

dl

, i.lslhstralo

II

pi
Ji]i"

,ll'CH!'.

tomar tOel'IS H
(lx(leplo (d oxgenu i
I

( bono

[!ll'd

qllH

obtienen de

010-

1('li

I;

Ningnl1d Sllstr111Cld puede LllILlI U :..)dlir de In clula sin quu c~,)i


a u.>
gl;s qllll son inlwrcmtfls a la niltur(ll~z," de; ll Ilwlllbr;na celular, Cllyd princi]lid fllnci)) es la regulacin elel paso de los elementos que tonEl e1el medio
178

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

- -- - - - - - - -- - - -- -

(a)

(d)

(e)

Figura 4.1/) AsO! (-lOOx). })) (:If'islult>cio i'WOx). e ) Periteo (-lOOx) y d) Apolecio (400x).

179

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

para sintetizar sus compuestos celulares y obtener la energa necesaria para


sus procesos metablicos.

Crecimiento
Pocos estudios sobre cintica de crecimiento han sido realizados en condiciones naturales porque son numerosas las dificultades tcnicas inherentes a trabajos de este tipo.
El parmetro de crecimiento se puede medir en aumento de masa celular
o en el nmero de clulas. Por lo general ambas formas de incremento ocurren simultneamente; su potencialidad depende de la composicin del medio y de las condiciones ambientales a las que est expuesto.
Si un hongo crece en un medio lquido que contiene todos los nutrientes
esenciales. el peso seco puede ser graficado contra el tiempo obtenindose
una curva que presenta las siguientes fases (Figura 5).
e

Tiempo (horas)
Figura 5. Fases de de.'iC1rrollo de un microorganismo.

a: Fase lag o retardada. La inoculacin de un hongo a un medio nuevo no


va seguida de la multiplicacin inmediata de la poblacin, la cual permanece sin cambios durante algn tiempo; en este caso las clulas individualmente aumentan su tamao, fisiolgicamente son ms activas y
sintetizan nuevo protoplasma. La clula en el nuevo medio puede ser
deficitaria en enzimas o coenzimas, las cuales han de sintetizar en primer lugar en cantidades necesarias para el funcionamiento ptimo del
mecanismo qumico de la clula.
b: Fase logartmica o exponencial. La velocidad de crecimiento es mxima, la poblacin en cuanto a composicin, actividad metablica y otras
caractersticas fisiolgicas es casi uniforme. La acumulacin de micelio
en peso seco es mxima.
c: Fase estacionaria. La fase exponencial comienza a decaer en forma gradual, llegando a un estado de suspensin del crecimiento, atribuible en180

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

tre otros al agotamiento ele los nutrientes y en parte a la acumulacin ele


sustancias txic.as.

el: Fase de autolisis o de muertc. En general el agotamiento oe elementos


nutritivos esenciales y la acumulacin oe subproductos txicos en concentraciones inhibieloras son suficientes para explicar esta fase.
La rata de crecimiento medida durante la fase exponencial es conocioa
como ral<l ("specficc1 ele crucimiento y es influenciada por el tipo de hongo y
las condiciot1l~S ambicntales empIcadas.

Mtodos de medicin
El cwcimitmto ele los hongos

plledl~

ser m()clido en trminos ele:

Nmero oc clulas.
Crecimiento lincal ele la colonia.
Masa micelial.
Volumen.
Actividad metablicn.
Cantidnc! du algullos constituyentes.
Nmero de clulas
Las tcnicns empleadas para este mtodo estn restringidas a aquellos
hongos unicelulares o para el conteu ele coniclias () esporas, y se pueden
realizar mndiante:
Conteo microscpico directo un placas portaobjetos.
Suspensin de clulas o esporas en clmaras de recuento tipo hematocmetro de Spencer.
Determinacin del nmero ele clulas o esporas con capacidad d8 multiplicacin en dehmninadas condiciones, por el recuento del crecimiento
en cajas de Petri.
Determinacin de la densidad ele una suspensin por medidas pticas,
utilizando un colormetro-espectrofotmetro.
Determinacin de la concentrll:in celullJ' por valoracin del contenido
de nitrgeno, conocido como mtodo MicroKjeldahl.
Los siguientes mtodos pueden ser aplicados a hongos filamentosos:
Determinacin

8n

peso seco.

Determinacin por valoracin de activiclad metdblica, mediante la medicin de algn componente producido en el medio.
181

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo O:e-ro

Estimacin visual del crecimiento.


Medicin lineal de colonias.

Factores ambientales que influyen en el crecimiento de los hongos


Temperatura
Es uno de los factores ambientales que ejercen mayor influencia en el
crecimiento y supervivencia de los hongos. Cuando aumenta la temperatura
el crecimiento se acelera porque las reacciones enzimticas y qumicas de la
clula se producen a ritmo ms rpido; sin embargo. las protenas, cidos
nucleicos y otros componentes celulares pueden quedar inactivos irreversiblemente por ser sensibles l las altas temperaturas.
En los hongos por debajo de (lC sus clulas pueden sobrevivir en estado
de latencia como estructuras de resistencia tipo clamidosp0rGs. esclerocios o
estromas; por encima de 40C muchos detienen su crecimiento y pueden
morir.
En genernl para todo organismo vivo hay una temperatura mnima por
debajo clt~ la cual no se produce cmcimiento. una temperatura ptima en la
Cll1C ()C\JIT(~ el cwcimiento normal y Ulla temperatura mxima por encima de
la cual no ps posihle el crecimiento. La temperatura ptima est siempre ms
CEJfCtl del mximo qun del mnimo.

Du acumdo clJlllos rangos cluntro ele los cuales Plwden crecer los hongos.
estos se pm~clen clasificar en:
Psicrtilos o crifilos. hongos que pueden crecer a temperatura de Oe.
Mesfilos. hongos que crecen a t(~mperaturas entre 25 y 40C.
Termfilos. hongos que crecen por encima de los 45 y SOe.
El estudio ncolgico (k organismos que viven en manantiales calientes
ha demostritr1o que las velocidades de crecimiento son sorprendentemente
altas. poseen estructurn muy fina donde sus enzimas y dems protenas son
Il1<1S resistclltus al calor que las de los mesfilos y tienen la membrana celular
COlllpuusta d) lpidos ricos en ciclos grasos saturados. los cuales permiten a
1,1S membranas permanDcer nstnblcs y funr.ionales a temperaturas clevadas.
Unos pocos hungos se closnrrollan a temperaturas ele 40-50"C. nivel en el
cual su crecimionto ptimo esta por (mcima de 40C; entre ellos Penh:illium
dUpOlltii. que crece bien entre 40 y 47 C C pnro pobremente por debajo de
40C; especies de Chnetomium crecen l temperaturas ptimas de 50C con
habilidad para desarrollarse aun a GOe.
Agua
Todos los organismos necesitan agua para vivir. La cantidad vara en los
diferentes ll1lbientes. sin embargo. la disponibilidad no depende solamente
182

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

del contenido sino que es una funcin compleja de factores de absorcin y


disolucin y se puede expresar como actividad del agua y est relacionada
con la presin de vapor de agua contenida en el aire sobre una solucin o
sustancia; se calcula midiendo la humedad relativa y se da en trminos de
porcentaje.
Para que una espora germine se precisa de humedad relativa ambiental
alta, en la mayora de los hongos, superior al 70%, la cual normalmente tiene
lugar despus de las lluvias.
Como agua libre es un factor ambiental que afecta a los hongos; la cantidad de agua influye sobre la disponibilidad de nutrientes y la concentracin
de sustancias txicas; afecta la morfognesis, la naturaleza, el tamao, el grado de ramificacin de las hifas y la intensidad de esporulacin y en ocasiolles el tipo de reproduccin.
Los hongos se consideran normalmente como estrictamente aerobios,
aunque muchos de ellos son capaces de crecer en tensiones bajas de oxgeno
de ambientes subterrneos.
Potencial de hidrgeno (pH)

El pH del substrato puede trmer una importante influencia en la ecologa


de los hongos. La composicin de la microflora respecto a bacterias y actinom~'cetos se ve favorecida por condiciones neutras o alcalinas, mientras
que los hongos muestran mojar actividad en condiciones de acidez.
Para los hongos del suelo, el pH afect3 su desarrollo y frutificacin; la
gran mayora encuentra su ptimo en suelos con valores oe pH que estn
entre 4 y G; es decir cidos.
Luz

Muchos hongos son afectados por la luz y su efecto puede influir en la


morfogtnesis. ya sen induciendo o inhibiundo la formacin de estructuras;
en la rlta o direccin ele crecimiento de las mismas yen la sntesis de compuestos.
Aunque la luz no es necesaria para el cwcimiento de los hongos, algo de
ella es esencial para la esporuJacin de muchas especies. El fenmeno, obs()rvado en los laboratorios, de la alternancia de reas esporulantes y no esporulant(~s pawclJ ser causado por los cambios de luz y oscuridad.
La luz d~~smllpejla papel importanle en la dispersin de las esporas, puesto
que los rganos portadores de ellas en muchos hongos presentan fototropis1110 posi ti va y descargan sus esporas hacia ia luz.
183

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Tanto la fase vegetativa como reproductiva de los hongos responde a la


luz. La respuesta hacia IIn estmulo de luz es demostrada por ll mayor parte
ele los hongos fi

Reproduccin
La formacin
de la especie ocu

duos con todas las carae!


travs de:

Reproduccin asexual
Dcnomin3e1a tambin somtica o vegetativ3; es cualquier mtodo de propagacin sin In participacin de rganos scxualr:s. Las formas de reproduccin asexual que ocurren ell los hongos son:
Frugllle Jl toe i 11

en las clulas qu i
esporas conocidas
quedan rccubier!
denominan cl3rni
hongos ci: micelius

( : n este caso, las hifas

rnport<incloseluego cad
uidios o artrosporas. Cu
lesa antes de separ(H'SF~
t:
de reproduccin es fu]
es [\gullomycetales).

Fisin ])utumJ ele clulas somtic:as para dar lug3r a clul3s hijas, mediante la formacin de una pared transversid.

Gemocin de cJu!os somticos. Es la produccin de sohrecrecimientos o


yemas i1 partir ele una clula. Las yemas crecen y posteriormente se separan
para constituir un nllflVn individuo.
Produccin

cSJ.l(;cw1i;;;odos: conocidas corno

nidias.

En la reprod
desarrollarse muchas
en forma sucesi
vista epidemiolgico
te porque origina gran can!
inculo en un perodo y ren
dos; cuando las condiciones son favorables al hongo, bs esporas o conidias
germinan generando graves epifitotias.

Reproduccin sexual
Es la unin de dos ncleos o gametos compatibles y en los hongos implica la conjugacin.
I
nunto y fusin de dos cl I
el nombre de
son iguales y heterogamelos
masculina se deno
es y ascogonio para los
Las gametas
forman una clula denom
su ncleo usualmente es el resultado ele la fusin del ncleo de los dos
gametos.
184

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Fases en la reproduccin sexual


Las diferentes formas de reproduccin sexual presentan tres fases:
P]aslllogamia. Unin de los dos protoplastos de las gametas junto con
sus ncleos haploidcs en el interior de una misma clula. Los dos nc:!eos,
uno por cada progenitor. forman un dicarin (n+n). el cual puede perpetuarse pasando ele una Cl~lula a otra mediante la divisin simultnea de los dos
ncleos estrechamente asociados y mediante la separacin de los ncleos
hijos, rosultantes en las dos clulas hijas.
Cariogm]]ia. La fusin de los ncleos de los gametos la cual cla origen a
ncleos diploicles (2n); es la f(:~cundacin propiamente dicha.
Mfosis. O divisin reducciollal, fase mediante la cual se efecta el cambio del estado diploide 2n al haploi(!t~ (n); o sea, se reduce la cantidad ele
cromosomas a la mitad; las clulas h<1ploides son las precursoras de cuatro
clulas o esporas que se originan por dos divisiOlH:JS sucesivas, y que son las
que garantizan la continuid,HI de la especie.

Formas de reproduccin sexual


Copulacin plullogomrticu. La fusin de dos gametas desnudas, de las
cuales por lo menos una es mvil, ocurro por:

Conjugacin de planogametas isogcmicns. Los dos gametos, que son morfolgic:nll1()ntc semjantes pero fisiolgicamente distintos, se unlln formando un zigoto mvil.

Conjugacin dn planogamctas anisgamas. Una de las gametas es considerablemente ms grande que la otra.

Fecundacin de una gameta femenina (vulo) por una gameta masculina


(anterozoide).

Contacto gametangial. Dos gametangios entran en contacto pero no se


fusionan; el ncleo de la gameta masculina migra a travs de un poro o tubo
de fecundacin, hasta el gametangio femenino. En ningn caso los gnmentangios realmente se fusionan o pierden su identidad durante el acto sexual.
Una vez los ncleos pasan al gametangio femenino, ste contina su desarrollo y el gametangio masculino se destruye.
Coplllocin gametangial. Los dos gametangios. o sus protoplastos, se
fusionan y dan lugar a un zigoto que se transforma en una espora de resistencia.
Espermatizocin. Algunos hongos llevan numerosas estructuras masculinas pequef'as. uninucleadas, con apariencia de esporas, llamadas espermacios que son transportadas por el viento. insectos, agua, etc., a la gameta
185

Marina Sanchez de Prager . Fernando Marmolejo De la Torre Nelson Bravo Otero

femenina, constituida por hifas receptivas. En el punto de contacto se desarrolla un poro y el contenido de espermacio pasa a la hifa receptiva.

Somatogamio. En muchos hongos superiores no se forma ningn rgano


sexual y entonces las clulas somticas o del talo desempean dicha funcin.
Organos implicados en la reproduccin sexual
Algunos hongos producen gametas masculinas y femeninas en un mismo
talo, por lo tanto 5011 considerados hermafroditas o monoicos; en otros sus
gametas estn formadas en talos separados y son llamados diocos, en los
cuales una parte de los talos porta slo rganos masculinos y otra rganos
femeninos.
En otros organismos fungosos, las gametas son morfoJgicamcnte indistinguibles, es decir, no se pt18de diferenciar la masculira de la femenina,
pero son sexualmente funcionalus: son los llamarlos hongos sexualmenle
indiferenciados.
Estn clasificacin indica quP desde el punto de vista de compatibilidad
los hongos se pueden clasificar en:

!\utocompatiblcs, los hongos hennafroclitns u homotlicos 011 los cuales


cada talo es sexualmente ilutofrtil y pueocn reproducirse sexualmente
por s I1l:,!llOS, sin la ayuda de olro talo.

Autoincompatil)le, los hongos heterotlicos, en los que cada talo es sexualmente rlutoestril, por lo tanto r()[luieren la ayuda de otro talo compatible
de diferente tipo do apawamiento para la reproduccin sexual.

Ciclo para sexual


En Jos hongos imperfectos o deuteromyeetes. en los cuales no se presenta un ciclo sexual verdadero, ocurre el llamado Ciclo parasexual, meoiante
el cual se obtienen los beneficios de la sexualidad.
Ln sm:umH:ia de sucosos
1.

(h~

un ciclo pJrasexual completo es la siguiente:

Formacin de micelio hctmocaritico, o sea que ncleos genticamente


distintos cstn asociados en el mismo protoplasto (plasmogamia). La forma como ocurr(~ un J1liu~lio hclerocaritico es mediant~~ la anaslomosis
de hitas somticas clf-; distinta cOIlstitucin gentica. o mediante mutacin en uno o 111<1S nc]uus.

2. Fusin entre ncleos iguales o distintos (cnriogamia)

3. Multiplicacin de ncleos diploides junto a ncleos llaploidcs. Cuando


un micelio se ha convertido en helerocaritico, tiene lugar la fusin entre
ncleos haploides ele el istinto o del mismo genotipo.
186

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

La primera fusin origina ncleos diploides homocigticos. Esta es la


fase ms importante del ciclo parasexual, ya que brinda al hongo algunas de
las ventajas de la sexualidad. y desde el punto de vista de evolucin de las
especies, en los deuteromycetes puede ser tan importante como el ciclo sexual
en otros hongos.
4.

En los hongos que producen conidios uninucleados la independencia de


ncleos haploides se produce mediante su incorporacin a conidios que
luego germinan y producen micelios diploides.

5. Los micelios diploides producen a menudo sectores con conidios haploides que pueden ser aislados y cultivados para dar origen a colonias haploides; esto significa que algunos ncleos diploides experimentan haploidizacin en el micelio y luego se independizan. Algunas de estas cepas haploides son genotpicamente diferentes de ambos
progenitores, debido a que las recombinaciones mitticas producen
nuevos grupos de genes ligados, que se independizan en forma de conidios haploides.

Clasificacin
Los estudios paleontolgicos indican que los hongos constituyen un grupo muy antiguo; los principales grupos fngicos estn representados en los
registros fsiles ele finales de la era paleozoica y muchos de ellos presentan
semejanza sorprendente con muchos gneros existentes bien conocidos hoy
da.
De acuerdo con la recomendacin de la comisin encargada de las reglas
internacionales de nomenclatura botnica, los hongos estn ubicados en el
Superreino Eucariontes, reino Fungi (hongos). Las divisiones deben terminar en Mycotes, las clases en Mycetes, los rdenes en ajes y las familias en
aceae. Los nombres de los gneros y especies no presentan terminaciones
estndar.
A manera de ejemplo, se da la clasificacin del hongo que produce la
gota de la papa y el tomate.

Superreino: Eucariontes
Reino: Fungi
Divisin: Mastigomycotcs

Clase: Oornycetes

Orden: Peronosporales
Familia: Pythiaceae
Gnero: Phytophthora
Especie: P. infestans
187

Marina Sanchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

AlgUl10S de los hongos imperfectos (Deuteromycetes) representan o constituyen fases conrlicas rle AscOmVCf-ltAs y ms raramente de los Basirliomvcetes; en estn caso
COl1l
sus anamorfos o fase
1, ii
caso de Sphnr:elio
ica o anamorfa de ClClViups
(Ascomycetel que
l,omorfo O teliomorfo O est
hongo; es por esl
lumbru para el estado imperfectu
y otro para el (-~st
(rfo).
1\ criterio de los autores, como roferencia en forma resumida, se presen-

ta un esquema simple de clasificacin obviandu las suhdivisiones y subclases c!l) l{)s principales hongos fitopatgenos registrados en Colombia;
anotaIldo algunas caractersticas ele las c];ses, (rclcncs y Llmilias, a las cuales pertenecen.
Sn toman com
troduccin a la Mi
of 1m perfect Fung"
gos fitopatgenos
vadis en Colombid H,
Juan Orjuela N. y

consulta y ampliacin 11
!cxopou]os; la clave "Ilu
B.B. HUllitlT y las publiraL
ice ele l)llfermndades di' I
Agrnomos Vctor M;]l
. cspectivaHwnte.

188

ro

Orden

PLASMODIOPHORALES
Parsllos obligados, que se reproducen en el intenor de la clula (endobitlcos).

CHVTRIDIALES
Especies acuaticas. terrestres.
Endoparsitos.
Por reproduccin asexual produ
ce zoosporas que se forman
dentro de esporangios.

PERONOSPORALES
Presentan diferentes niveles de
parasitismo.
Son los hongos ms especlallzados de los oomycetes.
Micelio bien desarrollado. con
tlnuo y ramificado.
Las hifas de las especies parashcas son intracelulares e intercelulares. dentro de la clula
hospedera producen haustorios.

Clse

PLASMODIOPHOROMVCETES
No producen micelio, su fase
somtica es un plasmodio.
El plasmodlo se transforma en
esporas (zoosporas) con dos
flagelos lisos poslenores.
Reproduccin sexual y aSGxuaL

CHVTRIDIOMVCETES
Produce clulas mviles (zoosporas y planogametas) con
un solo flagelo liso y posterior.
Talo continuo (cenocllCO).
Por reproduccin sexual produce un zigoto que se convierte en
una espora de resistencia.

OOMVCETES
Por reproduccin sexual produce oosporas.
Reproduccin sexual por contacto gamentangial de anteridlo
y oogonio. Micelio continuo bien
desarrollado. Asexualmcnte produce esporangios con zoosporas biflageladas.
Causan enfermedades graves a
los CUltiVOS.

Supcrreino: Euc:riontes.
Reino: Mvcctes (Hongos).
Divisin: Mast vgolll ycotcs

ALBUGINACEAE
Conocidas como royas blancas.
Parsitos obligados.
Los esporangiforos son gruesos, cortos y clavlformes; forman esporangios en cadena.

SVNCHVTRIACEAE
Parsitos holocarpicos.
El talo continuo se diVide y queda rodeado por una membrana
formando una masa de esporangios o esporas (soro).

PLASMODIOPHOR ACEAE
Hongos del sucio. especlalmen
te de pH cido. ParSitos de races en las cuales ocasiona hiperplasla e hipertrofia. El gnero Spongospora es vector del
Potato Mop Top Virus.

Familia

Vector del RSNV. VIrUS del entorchamlento del arroz

Polymyxa gramfnis

A/bugo eandlda
A. por/u/aeae
A. blitti

Roya blanca de las crucferas


Roya blanca verdolaga
Roya blanca amaranthaccas

Sarna verrugosa de la papa

Sarna pulverulenta de la papa

Spongospora sllbterranea

Synehyrrium endoblOticum

Hernia de la col

Nombre de la Enfermedad

Plasmodiophora brassleae

GneroEspecie

CLt\SIT'lL.\U()N DE LOS PRINCIPALES HONGOS FfT(JP\TCEM)S RECISTRAIJUS I-.N Ll 'LnvUS Ilh C()UJ:-'IBL\

en

~
m

s:
m

e
z
~

."

en

m
O

"U

en

:;;.

G)

6r

ro

::tJ

s:

::;

CD

OOMYCETES

Clase

Superreino: Eucariontes.
Reino: Mycetes (Hongos).
Divisin: Mastygomycotes

PERONOSPORALES
Reproduccin sexual por
unin de oogonios '1 anteridios (heterogametos), homotlicos o heterotlicos.
En algunas especies el esporangio acta como espora germinando en vez de prodUCir zoosparas.
En la mayora de las especies
produce zoosporas reniformes
bliflageladas.
Su claSificacin se basa pnncrpalmente en los caracteres de
los esporangios y los esporangiforos.
La clasificacin a nivel de familias se basa en la terminacin
de los esporangiforos.

Orden

PERONOSPORACEAE
Esporangioforos de crecimiento determinado. diferentes de las
hifas somticas.
Esporangios formados sobre los
extremos det esporangiforo.
La terminaCin del esporangiforo es caracterstica para cada
gnero y sirve como base para
claSificarlos.
ParSitos obligados.
Producen enfermedades conocidas como mildeos vellosos o
nOowny mildew<>.

PHYTtACEAE
Esporangiforos de creClmlen
to definido o Indefinido con respecto a las hitas.
Parsitos facultativos que pro
ducen enfermedades graves
tipo Oamping-off.
En algunos gneros el esporan
glo es caduco y germma dlrectamente en vez de produCIr
zoosporas.

Familia

Plasmopara viticola
P halstedii
P. nivea
Bremia lactucae

Peronospora manshurica
p. destructor
P dianthicola
P parasitica
Pe/fusa
P /arinosa
Pseudoperonospora cubensis

P palmivora

P megasperma
P nicotianae var. parasitica

Mildeo velloso de la soya


Mildeo velloso cebolla
Mildeo velloso clavel
Mildeo velloso repollo
Mildeo velloso espinaca
Mildeo velloso remolacha
Mildeo velloso meln, sanda.
pepino
Mildeo velloso vid
Mildeo velloso grasol
Mildeo velloso zanahoria
Mildeo velloso lechuga

Gota papa y tomate


Pudricin races. pia. aguacate. ctricos
Gomosis ctricos
Gomosis ctricos pudricin raz
pia. papayo, tabaco
Pudricin races soya
Pudricin fruto '1 tallo de pia.
raz papaya
Pudricin mazorca cacao

Phytophthora infestans
P cinnamomi
P cltrophthora
P parasitica

Nombre de la Enfermedad

GnerolEspecie

CLASIFICACIN DE LOS PRT:JCII'.I\LES HONGOS FITOPATC)CENOS RECrSTRADOS EN CULTIVOS DE COLOMBIA (CONTINUACIN)

iS'

iil

to

::o

ti;

(l)

CI

ji)

o'
li?

lb"

g.

::o

3ti>

iil

1l

1S-

~.

......

<D

Por reproduccin sexual produce esporas de resistencia


de paredes gruesas llamadas
zygosporas.
Micelio continuo bien desarrolla
do. No producen esporas mvl'
les (flageladas).
Reproduccin sexual y asexual.
ParSitos facultativos y saprofi
tos.
Adems Incluyen hongos mico
rrizgenos Importantes.

ZVGOMVCETES

CJase

ENDOGONACEAE

Importantes en la agricultura por


ser hongos micorrizgenos en
muchos cultiVOS.

La mayora de las especies pro


ducen esporas aisladas en el
suelo; otras forman esporocarpos que contienen zlgosporas,
clamldosporas o esporangios,

Algunos hongos son utilizados


industrialmente.
Algunos forman rizoides.
Presentan hifas que conectan
los rizoides llamados estolones.
Producen esporangios grandes
con muchas esporas.

MUCORACEAE

Familia

ENDOGONALES

Mayor a saprofitos.
Algunos parsitos dbiles de
frutas y semillas.
Muchas especies que son
saproftlcas sintetizan productos
Industriales Importantes.

MUCORALES

Orden

No son hongos fitopatgenos,


son micorrizgenos en muchos
cultivos.

Glomus mamhotls
Gigaspora pel/ucida
Aeaulospora longula
Seutel/ospora spp.
Gigaspora spp,
Sc/erocystis spp.
Entrophospora sp,

R.oryzae

Moho negro del pan, utilizado


industrialmente para producir
cido fumrico. Moho negro frutas, cpsulas de algodn, sorgo y maz.
Utilizado Industrialmente para
producir alcohol, cidos lctico,
ctrico, succinico Y oxlico.

Nombre de la Enfermedad

Rhizopus stolonifer

GnerolEspecie

CJ)

s::
m

e
z
~

"TI

CJ)

el

"mo

CJ)

F."

(5

al

::c

lIiib..

()
~

ENDOMYCETALES
Forman ascas a partir de zigotos.
No forman ascocarpos.

ASCOMYCETES
Formacin de ascas dentro de
la cual se forman generalmente ocho ascosporas.
Micelio septado. algunos no poseen miceliO. son unicelulares.
La mayora producen ascocarpos que contienen las aseas.
El tipo de ascocarpo proporcIona criterios para clasificacin a
mvel de orden.
La fase sexual es la ascgena y
la asexual es la condica. imperfecta o anamorfa y corresponde
a las fases condicas de muchos
hongos de Ja clase Deuteromycetes. Presenta diferentes niveles de paraSitismo.

SACCHAROMVCETACEAE
Levaduras. talo unicelular. producen ascosporas en ascas libres a partir de zigotos. Fermentan glcidos (azcares) e Industnalmente son Importantes para
las Industnas cervecera y pam[cadora.

Familia

OPHIOSTOMATACEAE
Parsitos de plantas, especlalmente rboles.

MICROASCALES
Ascas dentro de pentecios.

- -

EUROTlACEAE
Importantes por sus fases 1m
perfectas Aspergillus y PenlciIlium.
Hongos ampliamente dlstnbuidos a nivel mundial.

EURDTIALES
Producen ascocarpos tipo clelstoteclo.

TAPHRINALES
TAPHRINACEAE
No forman asco carpos. No pro- lAscas desnudas; no forman asducen rganos sexuales; la re
cocarpos.
produccin sexual ocu rre por Parsitos de plantas.
copulacin entre conidlos Oflglnados por gemacin de ascos
poras.

Orden

Clase

Superreino: Eucariontes.
Reino: Mycetes (Hongos).
Divisin: Mastygornycotes

C. paradosa

Ceratocystis fimbrlata

Euro/lUm sp.
" Asperglllus
Penrci/lium

Taphrma deformans

Saccharomyces cerevisiae

GnerolEspecie

Mal del machete: ctricos. caf,


guama, mango. cacao.
Pudncln corona de pia, pudricin frutos chontaduro, necrosis
inflorescencia cocos. pudriCin
basal tallo pltano, chancro talio yuca. mal de pia. caa.

"Fase anamorfa. Imperfecta o


conldlca. Se menciona en la clase DeulOromycetes causando
dao en granos almacenados.

Enrollamlento de las hOjaS de


durazno. cerezos.

Levadura para la fabricaCin de


cerveza. vino. pan.

Nombre de la Enfermedad I

CLASIFICACIN DE LOS PRINCIPALES HONCOS FITOPt\TGENOS RECISTRADOS EN CULTIVOS DE COLCl:v!l3IA (CONTINUACIN)

~l

C
O
;

iil

c:o

;;

(1)

<:

(1)

Ol

o'

'

;;
~
::.
g-

iil

"1J

~
~

C/)
1:1>.

tu

c.o

ASCOMVCETES

Clase

Phyllachora maydls
P grallsslma
Pguaduae
P. graminlS
Rosellinla necatnx
'Oematophora necatnx

PHVLLACHORACEAE
Producen peritecios Inmersos
en tejido foliar. protegidos por
tejido estromtico
XVLARIACEAE
Per!eclos rodeados por tejido
estromllCo

XVLARIALES
Ascocarpos tipO pentecio. oscuros. coriceos. globosos o perrlormes. ostolados. saproflticos.
coprolllos y parSitos

Rose/finia pepo

Sphaerotheca pannosa
Podosphaera leucotricha
Mlcrosphaera betae
Untcinula necator
' Acrosponum

GnerolEspecic

ERVSIPHACEAE
Mildeos polvosos. cenicillas u
oidios.
Los generos se clasifican por el
numero de aseas por clelstoteCIO y por el fulcro.
ParSitos obligados.

Familia

ERYSIPHALES
Ascocarpos lipo clelstoteclo.

Orden

malz
aguacate
guadua
gramneas
Pudncln blanca. alfalfa. cacao
Fase ana morfa. Imperfecta o
conldca.
Llaga raz trigo: ctncos. caf.
guama. pltano. cacao. eucalipto. yuca. pino. papa. etc.

Mancha de asfalto
Mancha de asfalto
Mancha de asfalto
Mancha de asfalto

Oidios rosas
Oldlo manzano
Oidio remolacha
Oldio vid
' Fase anamoria. Imperfecta o
condica. En Colombia est reglstrado el genero Oidlum. hoy
da Acrosponum.

Nomhre dc la Enfermedild

Ul

~
m

e
z
~
os:
m
z

Ul

,.,

-i

"

Ul

C)
~.

or

ro

:lJ

s:

.::.

(O

CJase

Superreino: Eucariontes.
Reino: Mycetes (Hongos).
Divisin: \1astygomycotes

CLAVICEPETACEAE

Pentecios inmersos en estromas. Ascosporas germinan y


penetran en el ovario de semilIas de gramneas y producen
acrvulos donde se desarrollan
conidiforos cortos que emiten
conidias mezcladas en secreciones pegajosas y azucaradas.
El alucingeno LSD puede sintetizarse a partir del Cido lisrgico que se encuentra en los
esclerocios del cornezuelo.

Producen peritecios dentro de


estromas bien desarrollados.
Los escleroclos contienen alcaloides venenosos para el hombre y los animales.

Hongos no estromticos. ParSitos de plantas. Forman apresonos al germinar la conidla.


Producen las antracnosis.

POLlSTIGMATACEAE

Familia

CLAVICEPETALES

Orden

--

Sphacelia sorghi

Ergo!. cornezuelo de avena, trigo, centeno, pasto Rey Grass.


- Fase anamorfa, imperfecta o
condica, registrada en Colombia como agente causal del mal
de azcar en sorgo.
Claviceps purpurea

- -

Antracnosis soya
Antracnosis algodn
Sorgo, maz, caa
Muermo rojo caa
Antracnosis tomate

G. g/yeines
G.gossipii
G. graminico/a
G. tucumanensis
G. /ycopersici

Colletotrichum
G/oesporium

la Enfermedad I

Antracnosis frijol
Antracnosis: pitaya, pia, chirimoya, guanbano, repollo, pimentn, papaya, ctricos. tomates, manzana, mango, maracuy. lulo, granadilla, aguacate, guayaba, etc.
Fase anamorfa, imperfecta o
condica

Nombre de

G/omerella /mdemuthianum
G. cingu/ata

GnerofEspecie

CLASifiCACiN DE LOS PRINCIPALES HONCOS FITOPATGENOS REGISTRADOS EN CULTIVOS DE COLOMBIA (CONTINUACIN)

~
a

Li'l

ce

::3

Oi
~

;-

<1>

CS'

~-

~::3
&

Li'l

"O

~
-

g.

lb.
::3

~.

CIl

(JI

te

ASCOMYCETES

Clilse
DOTHIDIACEAE

Peritecios dentro de ascostromas uniloculares llamados seudoteclos.

DOTHIDIAlES

Familiil

Ausencia de hlfas interascales.


Forma aseas bitunlcadas. Per iteclos dentro de lculos estromaticos.

Orden

....

'Pseudocercospora musae

Mycosphaere/la musicola

Mycosphaerella henningsli
'Cercosporidium henningsii

Mycosphaerella gossypma
'Cercospora gossypina

'Paracercospora fijiensis

Mycosphaerella fijiensis

Mycosphaerella dlanthl
'Cladosporrum echmulatum

Mycosphaerella arachidis
'Cercospora arachldicola

GnerolEspecie
Mancha foliar man
Fase anamorfa, Imperfecta o
condrca
Mancha foliar clavel
Fase anamorfa, Imperfecta o
condica
SigatoKa negra pltano y banano
Fase anamorfa, imperfecta o
condlca
Mancha parda hojas algodn
Fase anamorfa, imperfecta o
condica
Mancha parda hojas yuca
Fase anamorfa, imperfecta o
conidica
Sigatoka amarilla pltano y banano
Fase anamorfa, imperfecta o
condlca

Nombre de la Enfermedad

s::

C/)

~
m

;
s::
m

'TI

e
z

el
C/)

(')

-u

C/)

~.

"

or

:::c
O
m

CD

en

ASCOMYCETES

Clase

Superreino: Eucariontes.
Reino: Mycetes (Hongos).
Divisin: Mastygomvrotes

sus pentecios super


flclalmente en estromas bien
desarrollados

Periteclos inmersos en estro


mas.

DIAPOATACEAE

Produce~

NECTRIACEAE

DIAPORTALES

Familia

Ascocarpos tipO peritecios.

Orden

- -

Diaporthe phaseolorum
Phomopsis soiae

Diaporthe citri
Phomopsis Gitri

Fusarium moniJiforme

GibereJla fUjikuroi

Gibberella avena cea


Fusarium avenacearum

Fusarium solani

N. hematococca

Cylmarocarpon heteronemum

Nectria cocclnea
N. ingae
N.galligena

Nectria cinnabarna
Tuberculana vUlgafls

Gr,ncrofEsper.ie

MelanOSIS citricos
Fase anamorfa, imperfecta o
conidica
Secamiento soya, frijol
Fase ana morfa, impelfecta o
condica

Secamiento ramas cacao


Fase ana morfa, imperfecta O
condlca
Secamiento ramas ctncos
Mancha fruto guamo
Chancro manzano, durazno,
pera
Fase anamorfa, Imperfecta o
condica
Pudricin races papaya, loma
te, maracuy, frijol, papa, mano
zana, granadilla,
Fase anamorfa, Imperfecta o
conidlca
PudriCin raiz pino, lenteja
Fase ana morfa. Imperfecta o
conidlca
Marchitez GrlSanlemo, coco, cla
vel, cana, papa. tomate. pudrl'
cin cpsulas algodn, pokkah
boeng cana, moho panoja sor
go
Fase anamorfa, imperfecta o
condlca

Nombre de la Enfermedad

CLASIFICACIN DE LOS PRINCIPALES HONCOS FITUPATC)CENClS !{;:C;ISTRMJClS EN DjLflVOS DE COLUr.!HL\ (O J"lTlNr JAC;(lN)

s"

<ii
Q

O)

iil
o
:::.

C1l

2:

Qi

!1)

o'
D

o
"

8-

~:::.

""'

l
~

""ti

15-

'"

!1)

:::.-

:::.
C)

Ol.

CJ)

Ol

...,,

co

Repfoduccl'~

mo.

Diferenlc'

bies
micor ;Iciccs

asexual.

lr,"Sltis-

n()ngos

promlcello, en
por reproduccllYteliosporas.
Micelio septadc.
Reproduccin

HOlg0S patgenos de plantas


conocidos corno royas. de las
cuaes eXisten unas 4.000 espeCICS, toda s parasltas
Producen esporas de resistencia conocidas corno

pleJ8
Hong()"
Honc:os
corrl
noscs

UREDINALES

BASIDJOMYCETES

Orden

Produce un basidio sobre el


cual por reproduccin sexual
se forman cuatro basidiospo-

Cl~se

,~acos

1)'

c;l1e~~ Lspeci Ir

P hortana

PUCCirll3 hellaC"

-- r

P malvacearUI7.
dos I P So(~/!,
hospe~erOS: en el Sf:cnd~,!o o
P arracachae
maleza las Jasos:
espumo- I P arach:dls
;,5110 con espermaclos e "'.s r
septivas; (1) aecias form;.
;iosporas; en el hospe,leipal primario las fases
Jredo portador de uredc'
ala
(111) Telia portador de Te
J,;'SE'ol,
,',as y (IV) Basidios o pr' "
o portador de basidlosr
'eliosporas,
:::;yas microciclicas, sl"
I,oce un hospedero en dr'v
,nsenta las fases (1), (111) Y
UredD y uredcsvr:cs const,!uPhakopsora gc.rS}P"
yen la fas,"
Vil. 39r8s'va.
PucClnia zeae
p, uva
dair~C1 y ex~ ,0S~V3 de !;:s 'Jyas.
Heml/ela vasta"'x

Parsi'.Cs ob:

PUCCINIACEAE

famili;;

Ro'.
Ro'
, P'ya
:-;::'ya
I R,oya
Hcva

Ro~

Ro'.
Ro' -

Ro'
Ro'!
Ro'

RO'

_J
algodon
del malz
uva
del cafeto

"1

Enl(rrrne(la~1

Roya girasol
[leya blanca crisantemo
Fo,,-o,ya. malvceas
Hcya sorgo
Rcya arracacha
Roya man
Ha'.' --Ru,

\:lJmhrr. de I_il

(f)

s:

e
z
o

'T1

(f)

O
---1

\J

(f)

j;'

el

or

ro

n:o

:s:

00

(O

BASIDIOMVCETES

Clase

Superreino: Eucariontes.
Reino: Mycetes (Hongos).
Divisin: Mastygornycotes

USTILAGINALES
Llamados carbones y caries.
Todos son patgenos de plantaso
Parasitos obligados. autolcos.
no tienen hospedero alterno.
Relacionados con las royas por
producir teliosporas y basldlo
septado y difieren de ellas por
la ausencia de espermaclos y
aeclas; produciendo slo tellosporas, basldlosporas y cOnldias.

Orden
Ustilago avenae
U. hordei
U. scytaminea
U. tn/lci
U. nuda
U. maydis

Tilletia barcJayana
T tritiCI
T loe/ida

TILLETIACEAE
Difieren de los Ustilagmaceae
por la germinacin de las teliosporas formando tpicamente
ocho basldiosporas.
Forma soros en los ovariOS produciendo masas de esporas.

GnerolEspecie

USTILAGINACEAE
La clasificacin de gneros se
basa en la morfologa de la Teliospora. hospedero y sntomas.
Son hongos patgenos econmicamente Importantes.
ParSitos de cereales como trigo. cebada y arroz.

Familia

Carbon grano arroz


Carbn trigo
Carbn hediondo del trigo

Carbn volador avena


Carbn cubierto cebada
Carbn caa de azcar
Carbn trigo
Carbn cebada
Carbn mazorca maiz

Nombre de la Enfermedad

CLASIfICACIN DE LOS PRINCIPALES HONGOS FITOPATGENDS REGISTRADOS EN CULTIVOS DE COLOMBIA (CONTINUACIN)

ib

tD
QJ

;-

!ti

:2

!ti

Q1

'O
~

ii)

:J

ti>

ri;t
:;

"'O
QJ

g.
le

:J

tO
tO

-'"

MONILlALES

Grupo muy grande de hongos


formado por ms de 7.000 espec1es
Se caracterizan por produCIr sus
conidlas sobre comdiforos 1,bres. es deCir, no al interior de
los cuerpos fructferos.

Se reproducen solo asexualmente. especialmente por conldlas: por carecer de reproduccin sexual se les denomina
hongos imperiectos.
Sus fases condicas son semejantes a las de algunos Ascomycetes y en unos pocos casos de
Basidlomycetes.
El ciclo parasexual les brinda
algunas ventajas de la reproduccin sexual.
En su mayora saprofitos. otros
parSitos de plantas yammales.
Exceptuando el gnero Agonomycetales. que no produce
conldias. los dems se reproducen especialmente por conidias
no flageladas.
Las conidias presentan gran
variedad de formas. colores:
producidas en diferentes estructuras, lo que es bsico para su
clasificacin. Los conidiforos
dan origen a conidias y pueden
desarrollarse aislados, en grupos o en el interior del cuerpo
fructfero, criterios bsicos para
clasificacin.

Orden

DEUTEROMYCETES

Clase

GnerolEspecie

Erysiphe, Microsphaera, Podosphaera. Uncinu/a, Sphaerotheca.

O. tuckeri

o. cancae - papayae
o. erysiphoides
o. /eucoconium
o. manguiferae
o. tabaci

Eurotium
PenicilllUm ita/icum
P. dlgitarum
P. hirsutum
P. oxac/um
Eurotium
Botrytls cmerea
Botryotinia fucke/iana
B. g/adi%rum
Cy/indroc/adium scoparium
Ca/ocnectria kiotences
Moni/iophthora roren'
Sc/erotinia, Neurospora, Moni/ia
Ovu/ariopsis gossipll
Phyllactinia
Oidium (Acrosporium) (sp.)
Oidium asteris - punicei

A. niger

Aspergil/us flavu$
Aspergil/us candldus
A. g/aucus

-~

Producen conidias sobre conldiforos hialinos o directamente a partir de hlfas hialinas.


Mayora saprofitos, otros patgenos de plantas y animales.
Las conidlas pueden ser hialinas o coloreadas.

MONILlACEAE

Familia

Mildeo polvoso algodn


Fase teliomoria
Mildeo polvos o vaL cultivos
Mlldeo polvoso girasol, cucurbitceas, tabaco, papa, mango
Mildeo polvoso papaya
Mildeo polvos o tomate de rbol
Mildeo polvoso rosas
Mildeo polvoso mango
Mildeo polvoso tabaco
Mildeo polvoso vid
Teliomorios de Oidium hoy lIamado Acrosponum.

PudriCin semillas
PudriCin granos almacenados
Pudricin granos almacenados
tngo. maiz.
Pudricin cpsulas de algodn.
ctricos. maz. sorgo. Vid.
Fase tellomoria
Moho verde frutos ctricos
Moho verde frutos ctriCOS
Pudricin azul bulbo cebolla
Moho granos almacenados
Fase teliomoria
Moho gris varios cultivos
Fase tellomoria
Pudricin gladiolos
Madura viche soya
Fase teliomoria
Moniliasis cacao
Fase teliomoria

Nombre de la Enfermedad

s:

);!
r
m
(f)

s:
m

:t>

(f)

el
e"
z

()

"'D

(f)

:t>

;'

G')

O
r

tD

:D

1\)

~-----

--

DEUTEROMYCETES

Clase

Superreino: Eucariontes.
Reino: Mycetes (Hongos).
Divisin: Mastygomycotes

MONIllA LES

Orden

Las conldlas son bastante grandes, plUricelulares, tpicamente


con septas transversales y Iongitudinales. formadas en cadenas o solitarias a partir de conidlforos que son Virtualmente
indistingUibles de las hifas somticas.

DEMATIACEAE

Hlfas y conldias tpicamente oscuras. No producen cuerpos


fructferos organizados. La mayora son saprofitos, unos pocos
parSitos al hombre. plantas y
anima/es.

DEMATIACEAE

Familia

Mancha amarilla repollO


Quemazn foliar remolacha
Quemazn foliar c/avel
Mancha foliar cltrcos
Mancha foliar tabaco
Mancha fruto maracuy
Mancha prpura cebolla
Tizn temprano papa-tomate
Mancha follar algodn
Mancha follar zanahoria
Mancha foliar repollo
Mancha follar frijol
Mancha foliar pimentn
Mancha de hierro caf
Mancha fohar crisantemo
Mancha foliar algodn
Fase teliomorfa
Mancha foliar rosas
Mancha prpura semilla soya
Mancha amarilla hala caa
Fase tehomona
Mancha cafe arroz
Mancha parda caa
Mancha loliar mango
Slgatoka amarilla pltano banano
- Fase teliomona
Slgatoka negra pltano
Fase te/lomarla
Mancha fohar tabaco
Mancha foliar papayo
Mancha fahar frjol
Mancha foliar ajonjol
Mancha foliar ojo sapo soya
Mancha fohar hOla sorgo

Cercospora betlcola
C. brassicicola
C. canescens
C. capslci
C. coffeicola
C. chrysanreml
C. gossyplna
Mycosphaere/la areola
C. hialina
C. kikuchu
C. koepkel
Mycove/loslella koepkei
Cercospora oryzae
C.longipes
C. manguiferae
C. musae
Mycosphaerella musae
C. fijlensls
Mycosphaerella fijiensis
C. nlcotianae
C.papayae
C. phaseolma
C.sesami
C.sojina
C. sorghl

Nombre de la Enfermedad

Alternara brassicae
A. dauc
A. dlanthi
A. citri
A.longipes
A. passlflorae
A. porri
A. solanl
A. tenuis

GnerolEspeci e

CLASIFICACIN DE LOS PRINCIPALES HONGOS FJTOPATGENOS REGISTRADOS EN CULTIV()S DE COLOMBIA (CONTINUACIN)

3o

O
Cii

ti!

::>
Ol

Ql
..,
il

o'

::>

:3

<l>

..,

<o

ti!

1:1

::>

1.

(J)

~
..,

o
.....

1\,)

MONILlALES

MONillA LES

DEUTEAOMYCETES

Orden

DEUTEROMYCETES

Clase

Los conidlforos forman sinemas o coremios.

ESTILBELACEAE

Forman sus conidiforos sobre


tejido estromtlco en forma de
cOJin llamado esporodoquio.
Algunos son senos patgenos
en plantas.
Las conidias se forman a partir
de fialides. estructura en forma
de botellita que corresponde a
una clula conidlgena.

TUBERCULARIACEAE

DEMATIACEAE

Familia

l. sp.
l. sp.
l. sp.
l. sp.
f. sp.

Isariopsis gnseola
Graphlum sp.

F roseum

F oxysporum
F oxysporum
F oxysporum
F oxysporum
F oxysporum

phaseoli
dianlhi
fcoperslci
vasinfectum
cepae

F oxysporum f. sp. cubense

Fusarium monl!iforme
F oxysporum

Magnaporte gnsea

G/oeocercospora sorghl
Gurvu/ana /unata
Helmmthosponum maydls
H.oryzae
Gochi/obo/us miyabeanus
H.sacchari
H. satlvum
H. turclcum
Pyocu/aria grisae

G/adosporium allil
G fulvum

e vltico/a

Gn e rolEs ped e

Mancha angular hoja frijol


Secamiento vid

Pudricin flecha palma africana


Marchitez remolacha. repollo.
pimentn. crisantemo. maracuy. rosas, papa, lulo. sorgo. tomate. etc.
Mal de Panam pltano y banano
Marchitez frijol
Marchitez clavel
Marchitez tomate
Marchitez algodn
pudricin bulbo y ramas de cebolla
Pudricin raiz clavel, pudricin
rosada cpsulas de algodn,
pudriCin tubrculo papa. pudricin semillas de maiz

Mancha follar vid


Mancha follar cebolla
Moho gris follar tomate de arbol.
tomate de mesa. papa
Mancha zanada sorgo
Pudrlcion granos arroz. malz. sorgo
Quemazn follar maiz
Quemazn foliar arroz
Fase teliomorfa
Mancha ojival caa
Mancha foliar trigo
Mancha lineal follar maiz. sorgo.
Bruzone. PlrlculariOSIS arroz, quemazn
Fase te llamarla

Nombre de la Enfermedad

en

,~

s:
m

'TI

b
en

en
-u
m
o

l>

~.

G')

(5

ti!

s:

:;
::o

'"

'"o

Picnidlos claros de color brillante, sus paredes son blandas o


cerceas. Pueden ser o no estromticas.

NECTRIODIACEAE

SPHAEROPSIDACEAE

Los picnidlos pueden variar su


aspecto de un gnero a otro.
Plcnldios de color oscuro. globosos, que fcilmente se extienden sin romperse, estromtlcos
o no, generalmente provistos de
una abertura circular.

SPHAEROPSIDALES

COnldiforos y conldlas forma


das dentro de plcnidios.
De acuerdo con las caracters
ticas del picnldlo se han claslfi
cado las familias.
El pienldio es la estructura que
los identifica como orden.

DEUTEROMYCETES

Familia

Orden

Clase

Superreino: EucClriontes.
Reino: Mycetes (Hongos).
Divisin: MClstygomycotes

000

Aschersonia sp.

D. gossypina
D. manihotis
O. natalensls
D. zeae
Phoma caryophi/li
P uvicu/a
P andina var. crustalllniformis
P exigua
P sorghina
P aff. eastarieensis
Phomopsis balatae
. Oiaporthe phase%rum
Phomopsis phaseo/i
Oiaporlhe phaseolorum
Seplaria apii
S.g/yeines
S. Iyeopersici
S. selenophomoides
S. tritici f. sp. avenae
Macrophomina phaseolina

Ascochyta caricaceae
A. zeae
A. gossypii
A. phaseolorum
A. pisi
Oip/odia theobromae

GnerolEspecie

Control biolgico cochinillas


(coccidos).

Mancha negra tallo papaya


Mancha foliar maz
Mancha ceniza algodn
Mancha pecosa foliar frjol
Mancha foliar, vainas arveja
Secamiento ramas chinmoy a,
anonas, papaya, aguacate, pu
dricln mazorca cacao
Pudricin cpsu las do algodn
Muerte descendente yuca
Pudncin bulbos orqudea
Pudncin tallo maiz
PudriCin negra clavel
Pudricin negra uva
Carate tomate
Pudricin fruto tomate
Mancha hojas sorgo
Muerte descendente caf
Tizn tallo soya
Fase Teliomorfo
Cncer tallo fnjol soya
Fase Telomorfa
Mancha foliar apio
Mancha angular soya
Hojas tomate
Mancha foliar orqudeas
Mancha hoja avena
Pudricin carbonosa sorgo,
maz, caa, frjol, soya. etc.

Nombre de la Enfermedad

CLASIFICACIN DE LOS PRINCll'i\LES HONGOS FITOPATGENOS REGISTRADOS EN CULTIVOS DE COLOMl3lr\ (CONTINU/\CI(lN)

~.

<b

()

III

1ii'

Qi
~

o'
D
(!)

..@'

3o

~
;p
~:::.
g.

"

~
~

(f)
tll.

r\)

o
w

DEUTEROMYCETES

Clase

Reciben el nombre de Mycella


Sterllia puesto que no producen
conidias,

AGONOMYCETALES

No presentan famlhas, su reproduccin es por fragmentacin


del micelio
Forman escleroclos de color
caf claro.

MELANCONIACEAE

Los acrvulos se desarrollan


subepldermalmente_
El gnero ms frecuente es
Colletotrlchum. del cual hay
aproximadamente 20 especies
y se diferencia de Gloesporium
por formar setas en los acrvulos.

MELANCOI'lIALES

Familia

Conldlforos y cOnldlas formadas dentro de acrvulos; capa


de hifas en forma de copa o almohadilla.
El acrvulo es la estructura que
los Identifica.

Orden

Athe/ia rolfsii

Thana/ephorus cueumeris
Se/ero/lUm cepivorum
S.oryzae
Magnaporthe sa/vinii
S. rolfsli

Rhlzoetoma so/ani

Produce Damplng off cebolla,


anonas, repollo, aji, pimentn,
orqudeas, crisantemo, caf, remolacha, clavel, algodn, soya,
tomate, yuca, caa, papa, etc.
Fase leliomorfa
Pudricin blanca cebolla
Pudricin vaina arroz
Fase leliomorfa
Pudricin basal tallo de remolacha, aj, sanda, zanahoria, clavel, girasol, tomate. tabaco.
arroz. maracuy. frjol. soya,
papa, ajonjol, algodn.
Fase teliomorfa

Anlracnosls cebolla
Fase tehomorfa
Pudriclon rOJa tallo caa
Fase teJiomorfa
Antracnosls anonas, papaya,
tomate, aguacate, tomate de
rbol. lulo. maracuy, guayaba,
caf, mango.
Fase teliomorfa
Antracnosls fresa
Antracnosis algodn
Anlracnosis sorgo
Antracnosls friol
Punta negra dedos pltano
Anlracnosls soya
Pudricin pltano
Antracnosis naranja
Roa frutos guayaba
Quemazn foliolos palma
Secamiento ramas uva

Colletotrichum Clfcmans
G/omere//a circinans
Colletotrichum fa/catum
Physa/ospora tucumanensls
Colletotflchum gloeosporoldes

G/omerella cingu/ata
Colle/otriehum fragarie
C gossypli
C, grammieo/a
C /indemuthlanum
C. musae
C. truneatum
G/oeosporium musarum
G. limetieo/a
Pestalotla disseminata
P. pa/marum
P. uvieo/a

Nombre de la Enfermedad

GnerolEspecie

(J)

5::
m

e
z

"TI

(J)

-t

()

"ti

(J)

~-

o
ttJ
6r
oC)

:o

CAPTULO VIII

Virus, viroides y priones


Virus
Historia

Hacia 1870 en Europa. ms concretamente en Holanda. en el cultivo del


tabaco apareci una enfermedad con la cual se inici la investigacin de un
nuevo grupo de agentes causales de enfermedades de las plantas: los virus.
Sus dectos. pero no la causa. se conocen posiblemente desde a de c.: el
primer registro de ellos fue la variegacin de los tulipanes en Holanda en
1576. y aunqtw la causa era desconocida los cultivadores saban que se transmita por injerto ele bulbos.
Los agentes infecciosos (hongos y bacterias) conocidos hasta finales del
siglo XIX. tenan como caractersticas generales las siguientes:

Estaban constituidos por partculas visibles al microscopio ptico

Eran retenidos por filtros de porcelana a prueba de bacterias

Podan ser cultivados en medios artificiales

El nuevo grupo de agentes causales de enfermedades en los cultivos no


tenan estas particularidades.
En 1883 Adolf Mayer, estudiando la enfermedad del mosaico del tabaco
demostr que era infecciosa, concluyendo que no se trataba de un hongo y
que posiblemente era una bacteria tan pequei'ia que pasaba los filtros a prueba de ellas.
Trabajando con la misma enfermedad, Dimitri Ivanowski ensay hacia
1890 la inoculacin de plantas con el macerado de hojas de tabaco enfer-

mas pasado por filtros a prueba de bacterias, y logr probar Sil infectividad;
adems demostr que esta se perda mediante calentamiento del jugo e interpret sus resultados creyendo que se trataba de una bacteria filtrable o
una toxina.

205

Maflna Snchez da Pragar - Fernando Marmolejo De la Torre Ne/son Bravo Otero

----

l\lartinus 'vV. f3nijminck. alumno de Mayer, re~ol\'i investigar COll el mosaico del tabaco para probar si se difunda en un bloque ele agar. Al encontrar
que se propagaba y qlle una pequea cantidad ele este jugo ma infeccioso lo
llam "Contagiul1l vivul1l fluiclum" (lquido vivo contagioso) y utiliz la palabra virus, que significa veneno, para describir su contagio.
D(~

sus invesl igaciones concluy qUl":

El ngente causal infecthba e invacla tejidos jvenes ms rpidamente que


tejidos viejos.

Se mO"a por el f10cma y el xilema.

Era transmisillle por injerto.

Era capaz de inf()ctar plantas por contacto entre sus races.

La trlllsmisin por insectos fue demostrada en 1894 por Hashimoto, quien


prob la relacin existente entre el saltahojas Nephotetts npicalis y la transmisin del virus cId enanismo del arroz Rice Dvmrf Virus,
DUfmte 3D ailos, perodo comprendido entre 1 Q04 y 1935, muchas enfermedades causadas por virus fueron reseadas sobre la base de su sintomatologa y mtodos de transmisin.
Wcmdell Mereditb Stanley en 1935 inici la virologa moderna, descubriendo qun los cristales del virus del mosaico del tabaco tenan protena. Al
i)o siguipnto Frederik Charles T3awdon y colaboradores demostrlron que los
crista les del TMV ostab<1n constituidos por protena y cido ribonucleico.

Definicin
De acuerdo con sus caractersticas podemos definir a un virus como:

Entidad acollllar, subl1licroscpica. parsito obligado, constituida por


protena y ARN o ADN; capaz de multiplicarse en su hospedero a expensas (!L- la energa quo ste prodllce, ocasionando sobre M efectos que se
hacen evidentes por la aparicin de diversos sntomas.

En d estado exlracellllnr. los virus son partculas submicroscpicas que


contienen cido nuc:leico rodeado por una protena y ocasionalmente otros
compOneJltl~s; son metablicamente inertes y no efectan funciones respiratorias o biosintticas.

Origen y evolucin
En este sentido existen dos teoras: Una que indica que pudieron haberse
originado independientemente, y otra que se originaron a partir de clulas.
Se sabe que tanto la mutacin como la recombinacin gentica se presentan
en los virus; estos procesos indudablemente tuvieron alguna participacin
en la evolucin, puesto que permitieron el desarrollo de nuevos tipos de

206

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

ellos. Un hospedero puede volverse resistente a la infeccin viral mediante


la modificacin de sus sitios receptores. igualmente el virus puede. a su vez,
mutar a una forma capaz de adherirse al sitio receptor modificado.

Composicin
En 1935, Wendell Mereclith Stanley logr purificar el virus del mosaico
del tabaco (TMV) y pudo com probar que se trataba de una sustancia proteica. El anlisis elemental para el TMV mostraba contenido de nitrgeno de
1G.6%. el cual corresponda a los valores medios obtenidos para las protenas, pero tamhin el contenido de fsforo de 0.50% y 2.5% de azcar daba a
entender quo la protena no estaba sola sino asociada con otro elemento. La
relacin fsforo-azcar permita intuir la presencia de un cido nucleico.
En 1936 Freclerick Charles Bawden demostr que la partcula en realidad
estaba formada por una cubierta proteica y un cido nucleico.
Los valores para el rango de protena varan d(~sde 63 a 95'7'0, lo cual
indica que la partcula viral es dominada por el componente proteico. El
contenido de ARN por los diferentes virus vara entre 5 y 37%.
Es probable que la mayora de los virus que contienen ARN no posean
ms de 30 gm1es: 500, son por lo menos requeridos para efectuar la slltesis
de protenas, lo cual no es lo suficientemente necesario para codificar la
sntesis de ollas, por lo tanto utilizan la de su hospedero para realizar la
construccin de las protenas que necesitan para su desarrollo.
Las estructuras de las partculas virales son diversas, el cido nucleico se
localiza en el centro y est rodeado por ulla cubierta protenica llamada cpside.
Las protenas individuales que constituyen la cpside se denominan subunielades protenicas, subunidad capsclica o capsmeros (Figura 1). En los
virus ms simples. la envoltura protenica est compuesta de un solo tipo de
protona, mientras que en los ms complejos pueden estar presentes diversos tipos de protelJls.

Componentes de los virus


1. Cpside

y subunidad capsdica

Funciones
La subunidad capsdica o proteica es la unidad elemental de construccin de los virus; tiene varias funciones bsicas para la supervivencia del
virus, tales como la de reconocimiento entre el virus y su hospedero, la de
autoensamblndo. de reconocimiento y unin con el ARN viral que permite la
construccin de la cpside y la proteccin de la informacin gentica.

207

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

En el caso de organismos vectores, la cpside le confiere al virus potencialidad de dispersin en la naturaleza, por ejemplo al fijarse. como en el
caso de la transmisin por nematodos al odontoestilete. adems de establecer interaccin especfica con el hospedero en los sitios que autorizarn o no
su deca psiclacin y la liberacin de la informacin gentica.

Componentes
Las protenas virales constan ele aminocidos y su secuencia est determinada por el material gentico que en los virus es el cido nucleico. ARN o
ADN.
Los componentes protenicos de los virus que atacan a las plantas estn
constituidos por unidades wpHtitivas, lo cual es constante para las subunidades. pero puede variar plra los diferentes virus. Se saben el contenido y la
secuencia completa de aminoicidos de la protena del virus del mosaico del
tabaco (TMV). el cual consta de 158 aminocidos.
En los rhabdovirus las nuc:leoprotenas helicoidales se encuentran cubiertas por una membrana lipdica con dos capas. en la cual encajan dos o
tres tipos de protenas y una l1ucleocpsida formada por ARN y protena
viral. asociada a una estructura helicoidal suelta.
2. cido nucleico

El cido nucleico d" la mayora de los virus que infectan las plantas es
ARN. pero se ha demostrado que existen aproximadamente 27 de ellos cuyo
cido nucleico es ADN. Tanto el ADN como el ARN son molculas largas en
forma do cadena, que constan ele centenares o miles de unidades de nucletidos.
La secuencia y frecuencia de las bases de la banda (cadena) de ARN varan de un ARN a otro, pero estn fijas dentro de un ARN dado y determinan
sus propiedades. La mayora de los virus que infectan a las plantas (alrededor de 400) tienen ARN de una sola banda (monocatenarios) pero aproximadamente 10 poseen ARN de doble banda (bicatenarial; de los que tienen ADN.
12 son de doble banda y aproximadamente 15 de una sola banda.
En las plantas slo existe un grupo de virus, los caulimovirus. con ADN
de dos bandas, el virus del mosaico de la coliflor es uno de ellos.
Los virus icosadricos contienen los ms altos porcentajes de cido nudeico y los ms bajos de protena; mientras que los clongados tienen bajo
porcentaje de cido nucleico y alto porcentaje de protena.
Virus con genomas divididos
En las plantas existen virus cuya informacin gentica necesaria para la
infeccin est repartida en varios tipos de partculas, es decir, que adems

208

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

del genoma entero encapsulado existen en la clula fragmentos del mismo


que se denominan ARN subgenmicos. El virus del cascabel del tabaco Tobacco Rattle Virus)) (TRVl, de simetra helicoidal, se presenta en forma de
partculas alargadns ele 180 11m' y de partculns cortas de 45 a 55 nm; esto
indica que ambas son necesarias para realizar infeccin normal. La corta
inoculada por separado no es infecciosa; la larga inoculada sola determina la
sntesis de un virus defectuoso que no posee cpsida.
El virus del mosaico de la alfalfa. "Alfalfa Mosaic Virus" (AMV), consta
de cuatro componentes o bandas distintas de cido nucleico, encapsuladas
en partculas ell~ diferente tamai'io farmacias por las mismas subunidades proteicas.
Los virus multicolllponentes como los l1amnn algunos virlogos. estn
en dos grupos sobre la base de su sodimentacin: las partculas de cada componento ticnl;}) diferentes tamaiios y otros sedimentan como una nica protena ya que las partculas de tnles virus tim1en tamaios muy cercanos y por
lo tanto coeficientes do sedimentacin muy parecidos.
Preparaciones puras de virus 11l11lticompllestos sedimentan en columnas
con gradientes de densiclJd en suerosa, como tres componentes serolgicamente idnticos; se da el nombre de "Top" al componente protenico run se
ubica en la parte superior y qtW corresponde a partculas no infecciosas y
vacas por carel.or do ARN; "Midclle" y "Botton" a las que se ubican en la
mitad y al fondo de la columna; las cuall"s siempre contienen ARN y protena (nucleoprotenas).
En los virus multicompuestos. ninguna nucleoprotena por s sola muestra infectividad y slo son infectivas cuando actan mezclados los compuestos nllcleoprotenicos.
Los virus con genoma dividido estn compuestos por dos a cuatro segmentos ele ARN; dos ocurren ell los grupos Tobravirus, Comovirus, Nepovirus, Furovirus y en Pea Enation Mosaic Virus; tres segmentos en los Bromovirus, Cucumovirlls. Ilarvirus y Hordeivirus y cuatro segmentos en Alfalfa
Mosaic Virus, Rice Stripe Virus y Tomato Spotted Wilt Virus (Tabla 1).
Los i\RN son referidos como ARNs 1,2,3,4. de acuerdo con el decrecimiento de su peso moleculnr, en el caso de los virus compuestos por dos
piezas. ambas son necesarias para su infectividad, mientras que tres o todas
lo son en el caso de virus con genomas de cuatro partculas.
Virusoides
En 1982, en i\ustralia se descubri un grupo de virus que presentan dentro de sus cpsulas una entidad similar l un viroide constituida por ARN
nm = nanmetro = 0.001 de micrn.

209

____
M_arina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo Do la Torro - Nelson Bravo Otero

corto y circlllar de :WG l1ucletidos, ademis ele su A.RN lineal de 4.500 nucletidos. y que constituyen piHtp dol material gontico formrmdo \H1R 2S0ciacin obligator
I infeccin.
A estas part
n virusoides, y se defi
lcula viroidal
tc.:~rada, cuya presencia
penslble para ll III
\RN viral, o pequeas IIlCd(:cuL1S
rircular de una
id a un viroide, que se en
ele algunos virus ele ARN y que forman pnrte de su material gentico, estableciendo ulla r('!acin obligatoria, de tal forma que ninguno puede propagarse
e infectar il su hoslwdl~ro cuando est ausente unu ele ellos.

Los satlites
El t(~rJllino Siltl,1 itp
que estn en de!
tenic:a alguna
f\RN viral genlYi i

SP

hi1 ulilizlOO parl denominar los cidos nuclpicos


no codifican por s mi
en el mismo tipo ele 1

Virus satlites.
mtos en 1962 como peql
asociadds a algu f
lculas dependen elel virus
111 i
plicacic'll1 y' son scrolgicamcnte diferentes de las pilrtc:ulas virales, por lo
cual se l~s ha denominado virus satlites.
ARN satlites. PequeI1lS molculas de A.RN lineal CJlW flxisten en ciertos
virus mult p,Hliculados y que pueden f~star relacionadas con el ARN elel virus o de lR pLlI1l11 hospedml, los cuales puedell atenuar los efectos de las
infecciol1l)s vir,,!
el posiblemente Ulla WSpl
Cill elel hosped,
\11al.
Lls tres paut1s ( 11
Y los ARN satli! SOll.

Lacias para caracterizar


en presencia del virus

Solamente pi
virus asistunte.

No se necesitan para multiplicacin del virus asisllmtc,

Sus (Iciclos nucleicos no tienen fuerte lwmologa


noma viral.

III

d(]

CUI

secuencia con el ge-

Virus conocidos por poseer satlites son: Tobacco Necrosis Virus (TNV),
Tobacco Mosail.
), ;\icllmber MOSlic Virus
Fanleaf Virus [e

Arquitectura y
Existen tres

virus
rq ui tect uras:

Los virus de simetra helicoielal, que se observllll al microscopio electrnico en forma de bastoncillos rgidos o de filamentos flexuosos. El virus
210

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

del mosa ic o de l tabaco (TMV) se presHn ta en formi1 de bi1stoncillos : e l de


la trist eza de los ct ri cos (CTV) y el virus X de la papa (PVX) en formi1 de
fi lamentus flexu osos (Fig ura l. 1).

Los virus de simetri1 icosa clrica o iso m tric os , que se prese ntan en forIll a el " Rsfp.ras , como el virus e1 el amarill eo del nab o y el virus en anill o
elel tabaco (TRSV) (rigura 1.2).

Los virus gruesos o con e nvoltura , rodeados por una tni ca lip op rotei ca
cuy o cuerpo presenta a menudo s im etra helicoi dal. co mo el viru s del
mosa ico dHI ma z (MMV) (Figura 1. 3) .

Estos viru s difiernn claI'1mente de los vinls des nud os . de simetrcl hclicuidl! () icosadri ca , por la presencia ele) una e nvoltura ex tern a y por la naturdl p.zi1 de su genollla qu e es un ARN( -), es dec ir, un ARN que so lamen te puede ser leclo por e l s is tema de trad ucc in desp us d e una transcrip cin en
ARN(+).
(i)

!lrllll:ll\,,,,, N j."np:-'lflll>1 (l~)


dc l.. l~p~lct(>

Prnlt'il l h

iIo t (1 .. 1(1

rn ~m hrall,1

.1' u/,!/Il itr"r:! uru rlt' Jo.' virus:


De sil1 w l/'ll/ helin) irlu} (l!uslo1ll:i ll os
ugir/os () fil(lI1/(,llt o~ (le.'\(/o s()s) . 2. nI-' sim etl'iu iUIs(j(j(lrir:o (1 isoJll (' lrir ;os (es/ricos) . l ' .1.

Fixuru 1. f','s lm du/'il


(:0/1

ell\'u /!uJ'!/ . de "ill(('l r/u helicoir/u/. mr/podo:; CO/1 un n

211

('( (jJ O

/ipoproteinl .

Marma Snchez de Prager - Fernando MarmoleJo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Ciclo del virus en la clula


La entrada de un virus en la clula de un hospedero y su multiplicacin
aCUITe en cuatro etapas:
Unin y adsorcin
Penetracin
DecapsidRcin
Multiplicacin y encRpsidRcin.

1. Unin y adsorcin
El adherirse el virus a la mernbrna de la c(~lula de su hospedero es cuestin primordial: existe alta especificidad ele interaccin entre ellos.
La adsorcin elel virus es un fenmeno inmediato. esto se puede comprobar a travRs ele la inoculacin mecnica de hojas y el lavado inmediato de las
mismas. de una planta indicadora que reaccione formando lesiones locales:
se podr comprobar qlle el nmero de lesiones puede ser inclusive mayor
que en aquellas hojas inoculadas y que no hayan sido lavadas.
Las clulas liemHl componentes superficiales especficos que actan como
sitios receplor8s. tales corno protenas. polisar.6ridos o complejos lipoprotenns-polisacridos. en donde S8 adhieren las partculas virales. En ausencia
de un sitio fecoptor los virus no pueden ser aclsorbidos y en consecuencia no
pueden infectar: en el caso ele que se modifique el sitio receptor el hospedero
puede volverse l'losistente. pero en los virus pueden aparecer mutantcs que
rompan In resistencia y ser adsorbidos por la planta.
En las bacterias. algunos receptores dA los fagos son pelos o flagelos: en
otros son C:Ol1lpOneles de la envoltura celular yen ocasiones son las protenas que participan en el transporte celular. El receptor para el virus de la
influenza es una glucoprotellR que se encuentra en los eritrocitos y sobre las
cllllas ele la mombrlna mucosa ele los animales susceptibles, mientras que
el sitio receptor del virus del polio es una lipoprotena. Muchos virus de
plantas y animales no tienen sitios de unin especficos y los virus entran
pasivamcnt(~ como resultado de la fagocitosis Cl algn otro proceso de endocitosis.
En el caso del grupo de los polyvirus. estos tienen una protena en su
ARN que posiblemente ](-1S sirve para enganchar su complejo multiplicativo
en un sitio de la membrana colular y en sta puede ocurrir una invaginacin.
Tanto el estmulo viral como la mmnbrana o el "itio al cual clt-:be engancharse
estn por dilur.idarse.

2. Penetracin
El mecallismo por el cual un virus penetra depende de la naturaleza de la
clula elel hospedero. especi;. dlmmte de las estructuras de su superficie. Las
212

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

clulas con paredes celulares son infectadas de manera diferente a las


que carecen de ella y los primeros acontecimientos que llevan al virus a
penetrar en la clula y realizar su infeccin es una pregunta no resuelta;
todo lo que se conoce en plantas es a travs de informacin obtenida
mediante inoculacin mecnica, en la mayora de los casos con inoculacin artificial. Lo que s est claro es que una hoja intacta sumergida en
una suspensin de virus no se infecta, por lo tanto para que esta tenga
xito se necesitan heridas o lesiones rf'cientes, esto para el caso de virus
transmitidos mecnicamente.
Varias hiptesis han sido propuestas, respecto al ingreso de la partcula
viral la clula del hospedero:
1.

A truvs del sistema membranoso

a. Por pinocitosis o endocitosis. Procesos mediante los cuales las sustancias fmtran al citoplasma de las clulas dentro de vesculas membranosas. Una Vl~Z las partculas del virus se fijan a la membrana celular se induce una invaginacin en el punto donde se fijan. quedando
las partculas virales dentro de la vescula, pasando luego al interior
ele la clula, en don(h~ so liburan.
}y.

Ingreso

(1 travs de IlIicrolesiones. Por medios experimentales se ha


concluido que heridas transitorias en la membrana celular son necesarias para el ingreso del virus.

c.

PUl' mecanismos electro-osmticos.

basa en la conjetura de qUB


uno de los posibles mecanismos preexistentes de toma de nutrientes
puede sor 01 responsable de la penetrncin de los virus; esto debido a
la interaccin entre las cargas do la superficie de la membrana celular
y l<1s sustancias adsorbidas. situacin que puede ser 01 ms posible y
apropiado fenmeno para esta situacin. Las fuerzas responsabl~)s del
transporte de nutrientes pueden ser simultneas o paralelas al transportn de la partcula viral.
Sl)

2. A travs del eclodcsmata.


El ecturlesll1ata ha sido sugflfido como la posihle puerta de entrada de los
virus. Una correllcin elltre la susceptibilidad de hojas de tabaco al TMV
yel nmero promedio dl~ ectodesmatas lo sugieren.
3. Decapsidacin

No se sabe todava si el virus penetra completo en la clula o si se decapsida y entra como cido nucleico libre de la protena; pero s es necesario
que el cido nucleico (ARN o ADN) viral salga de la cpside para que sea
reconocido como mensajero por los ribosomas.
La decapsidacin ocurre segundos o minutos despus de que el virus
penetra en la clula; aproximadamente entre el15 y 20% del cido nucleico
213

Manila Sanchez de Prager - Fernando MarmolcJo De la Torre - Nelson Bravo Otero


LS lilwrilrlo de las partculas d(~l virus del TivlV denlro de los siete minutos
siguientes a la inoculacin, aunque con e] virus del "Turnip Yello\\' Masaie
Virus" (TYMV)
Ii
('1
lIC puede s~r un proCCS(j 111
donde las f-lilrtCl
d
,,11 entre 4;') sl~gundos el (1
pus ele haber 1)(:

El p r o b l u m i l l l l i ! iCLlcin virl pUec1l) d',I! hi


llera muy si 111 p!c,
d i , d alguna forma. indller ! h
que sinteticl el ,cdo l1ucieco y la protena lwcl:sarius pilra prodUCIr ms
partcu Ids virales. Estos compollcnt(~s c1cbcn lnS,ll11hL:nsc nn el orden adecuado v las nucvas partculas virales USCapill' de; 1<1 clull n infectar il otras.
La s]icla del cido I1llclcico liS la pril1l()fa f(1SII. bloQllc,lrlo sllra una forma
di: imlwclir qLllI el virus sca illfeccios(): slo se llodrill lIH\'ir il cabo il1vnstigacioncs de sust,1!1r:iilS iwlivilS () dI' \'CHic:cllldes rc:sistcl1t(~s l Id rltT1psicIHCir'11
cuando s(~ hayil
'rl 1 r) I
L mente el Jl](IClI1islllO de I 1)
, u
4. l\1ultiplicaci

El icido !1\uir
rlc:lw dirigir la
illl1illOcidos !lil

llllCiLtlilllWlllc cI~ISpU(:S le pi
Ce d
1I
1I Ilcrtic!os P,lLl su lcielo J
"u l:lIvLJituril prlJlt:nic;l.
(1) \1

i1

llcl"IUI \'

11,) r

Plril cllu el \'irus t0l1111lllmanr!o elcla J11lruin,nil hi()sint(:tica clp] hospcdl'fO \' la utili7l para su propiu sntesis: inducicndo l'lltUI1C(IS a lo c:~Jula a
sint(llizilf (1llzimns clcllomillilclas j\r~N polillwraszls. lo C:Ui] ocurre c!fC uno a
diez minutos c!espu(s ele III inoculacin. Estas lI1lZi1l18S. lm presf::l1cia elel
\R.N \'ir81 cun sirve: como lllod>!o y ele los llllckticlos que la constituyen,
sintetizall m,s \
que se sntetiza no es
\rll, SI l1 1I11
cldenEl que es III
el" su \RN v que en lel lwcli Ci
sintetiza S() UI]( f
cadena c!ld ARN viraL
n
ARN ele doble han d
:s
lempo se sC[lelra :v forma cd
original y la baIl(J;
HijO (-) de las cuales la ti 1
modelo de la Sll!L;SlS dl: i\f(\J
Ce mds virus.

La imelgl~11 lm espejo de su i\.RN es el ARN mensajero que ha sido sintetizado despus do la infeccin viral: en sntesis, depende del tipo ele virus y
especialmente si su material gentico es ARN o i\DN y si es cadena sencilla
() dohle.
Los virus con ARN [+), es dpcir nqucllos cuyo ARN tiene una funcin de
ARN mensajero,
[,111
ele los virlls de plantas.

La replicaci
divididos, de al I
da, difieren cOll';idc!,d

de ARN ele una sola bal


de algunos virus de AH
proceso anterior.

Los virlls COll


cuajes se encuentran los
de
los vegetalcs, poseen asociada a su cpsida una polimerlsa cuya funcin es
214

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

tl'Clnscribir (d ARN genlllico (-) (~n un J\1<N mnnsajDro (+) y Sf) supone que ti
ptlrtir ele esta situtlcin las l:t"pilS podran ser semejantes a las que ocurren
1m Itllllultiplicllcicn ele los virus con J\RN (+1, por lo I1WIlOS (m lo rcf(~rel1te ti
ItI traduccill.

En los virus clo gnnomas divididos, ltls pintculas que contienen su geno111a

debnn

l~stilr

todllS en la misma clula pll'il que se multipliquen y se desa-

rrolle ltl int"t:ccin.

En los \'irus isomtricos de doble h,llIda, clARN se cncucntr, segmentado dl'ntro elCllllislllO virus, no es infecciuso ~' depellde para su multiplicacin l:n el IHlslwd(~ro ell: una ellzillla transc:riptustl, sta copia el ARN tell un
i\DN complumentario, qlw ttlllll>in porttl el virus.
La IllultipliclCi()l1 el(: los virus dI: ADN cl(~ elohk banda (ADNds) es un
prncrso lllS complejo, UlIll vez pf()rlucicli \; infuccirn, el ADNds vir"l lmtra
tl ncleo d: la (:(:lulu \. rOl"llla un microsolll<l, r:stc SI: duplica [JClrcialmcllte y
tambit'm es tl"lll\sc:ritu en dos \RNs d~: 1I1lil sola banda: (:] ARN mis jJp.lJunilo
(~s trul1sjlortt!o ll citoplasnw. (Illllt!l' S() triduCl~ en protelJ\s modificadas
por el virus, p) i\RN 1l1is granell) Lll1lbin S~.' Lrlllsportl al citoplasll18, pl~ro
Il se utiliza como muld(: l)ir, C]lll:. por medio d(~l proceso d(: transcripcin
ilwersa. Sl~ tral1sforJl\e (:n UIl ,\DNds cumplutu dld virus, qlw n'piclllllentc s~)
l~lH;PSllJ1 por SUI)llllirlncl(:s pro!l)iCDS par,1 f()J'IT)i1I' partculas c1n virus COIllpl~,ts.
l.Ill<! V()Z Id ,cielu nucl(:ico virill se sintetiza. illduce l la c(Jlula hospedera
pina 4llC sintetice lS molculas protollicas que sern sus subunidatlEs de
protena () qlle formartn la cubit:rta protenicl d(:1 virus. Plwce ser que slo
UIl, parte de 1" banda do ADN o ARN c1l:l virus se recluinre para participar en
la sntesis de la protena viral.

Durante la sntesis de las pruli:ni1s del virus, la porcin del ARN vir,d
que codifica la protena del virus funciona como el ARN mcnsajero; el virus
utiliza los lminocidos, los ribosomas y los ARN de transferencia del llOSpCclero, pero en realidad sirve como su propio modelo, de ah que la protdna
sintetizada sea utilizada exclusivamente por el virus para su cubimta o para
otras funciones.

El virus. adems de sintetizar las protenas para su cpside, sintl!tiza protenas que son enzimas, caso di) las replicasas quP se requieren para la replicacin del ,cido Ilucleico viral, pero ln se desconoce la funcin que desempol1tll1 la mayora de esas protenas.
Cuando se han formndo nuevtls sllbul1icl,ul:s protenicas y l1UOVO cido
I1uc:leico del virus, parece s()r que el cido nucleico organiza las subuniuades
protenicas (capsHlcroS) alrededor de l formando la partcula viral completa.
215

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Clt_e_,o_ __

El sitio O sitios de la clula en los que la protena y el cido nucleico del


virus se sintetizan y se unen varan de acuerdo con el grupo de virus de que
se trate; por ejemplo. los rhabdovirus se replican en el ncleo de sus hospederos y los tymovirus lo hacen sobre la membrana de los cloroplastos.
La replicacin de los virus celulares es un fenmeno masivo; en una clula de tabaco infectado por el virus del mosaico se puede estimar en 60xl0 ';
el nmero de partculas que ocupan el citoplasma; en una planta de tomate
infectada por el mismo virus el 70% de las protenas son virales.
Se ptwde resumir el ciclo de vida de los virus en los siguientes eventos:
1.

Unin y adsorcin de partculas virales por las clulas del hospedero.

2. Decapsidacin
nucleico viral.

prdida de la cpsida; liberacin y replicacin del cido

3. Sntosis dc aminocidos y lllcletidos para su protena y cido nucleico,


empleando el ARNm que ha sintetizado despus de la infeccin viral.
4.

Ensamblaje del cido y de los capsmcros protenicos en nuevas partculas virales. Esto implica el reconocimiento del ARN genmico del virus
por las unidades de protelliJ del mismo para formar partculas del virus
complPt1s.

5.

Maduracin y liberacin dll las partculas virales por parte de las clulas
del hospedero.

Clasificacin

Ha habido varios intf:~lltos por parto de los vir]ogos para clasificar los
virus; lino ele ellos fue tratar ele ubicarlos en familias segn la sintomatologa
como mOI'momc('oc para los mosaicos. y nnnlllaccoe para anillos; sta no
funcion por favon~cer mezclas entre ellos antes que operm como una dasificlcin.
Hoy clla se han acloplclclo grupos en donde se ubican los virus de acuerdo
con su gClloma. el nmero de partculas que lo conforman y la composicin
cid mismo. Por ejemplo. pI Comit Internacional de Taxonoma de los Virus
(lTCV) reconoce fm los grupos Dromovirus, ClICLllllovirus. l/orvirus y al Alfalfo lv[()soic Vints (\MV). a aquellos que tiullen en su gen ama i\RN. un nmero de (res partculas en su gelloma y encapsulados en partculas baciliformes o polidricas. Estos cuatro grupos han sido propuestos pnra conformar
la familia li'icornoviridoe: tri (tres partculas en su genomal, co (cooperacin
de las tres para la infeccin), rna (tipo de cido nucleico) y viridae (terminacin aprobada para las familias de virus).
Para narle el nombro al virus se sigue utilizando, tal como ha sido publicado en el tercer informo del TCV, la denominacin anglosajona. llamndolo por la sigla del nombre en ingls. Ejemplo TMV para "Tobacco Mosaic
216

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Virus", PVX para "Potato Virus X", etc. Si el virus es descrito por virlogos
hispanohablantes se considera el nombre en espa'ol. Por ejemplo. Rice Hoja
Blanca Virus (Figura 2(1). En la Tabla 1 se dan las principales caractersticas
de los grupos de virus fitopatgenos, algunos de ellos registrados para Colombia.

Transmisin
Hay que hacer distincin entre transmisin natural y transmisin expcrin1('nta1.
La transmisin natural se refiere al proceso de diseminacin de un virus
en su estado natural, sin la mediacin del hombre.
La introduccin y la infeccin en el hospedero son gobernadas por la
interaccin planta - virus y otros factores biticos y abiticos.
Los factorl-;s biticos pueden incluir a vectores tales como insectos, nematodos, bongos y al hombre en la medida que facilite, mediante pi'cticas
culturales, su transmisin. Los factores abiticos incluyen temperatura, suelo, fertilidad, densidad de plantas, etc.
Los medios de tr;:nsmisin o diseminacin no han sido determinados
paf} todos y cada uno de los virus, los ms generales son por injerto, en
forma mecnica y por vectores.
1. Por injerto

Es posiblemente la forma de transmisin ms generalizada, y ocurre con


injertos hechos con material procedente de plantas enfermas en plantas sanas, apareciendo los sntomas en un perodo que cambia segn la variedad
de la planta y la raza del virus.
Para ello se requiere que ni virus sea sistmico en la planta, adems de un
perodo lo suficientemente largo que permita el contacto de tejido vascular
en la unin de las partes injert;:das.
El tipo ele injerto utilizado no afecta Jara nacla la transmisin, aunque
para recol1ocimitmto o diagnosis debe utilizarse el ms convlmiente. El proceso do transmisin por injerto ha sido denominado como mtodo universal
de transmisin ele virus, porque casi todos los virus pUl)den ser transmitidos
por nstc mtodo.

2. Mecnica
un cuenta cup la transmisin por aperturas naturales como t)SI[)mls es poco c:orril)lltc () improbable. el empleo de este ml)todo consisto un
la transmisin cid virus a t)';:vs de heridas o llsiones provocadas natural o
artific:ialnwntc, sobre todu (ln las hojas.
TCllit'IH][)

217

1'\)

00

1_

Tc'nbusvirus

~---~

,-

'

ARI'J

AkN

ARN
ARN

t----

AD\J

ADN

hl.onocat

Icosae

Icosae

TIPO

Arquitectura

!cosae
Helicoi

'Helicoi

'1'lcosae,
Ic053e,_. . ._
. __ _
1

---J

.........

-=...

'

~ I:---T~:~::i.

Circular

Circular

I FOR~lrI

NO,
PARTIC.

~.~~ I ~~;~~-1 ~

Ah\

~___~ __----'-_

-"--

Tvmovirus - - - - - _ .
Potyvirus

CJsterovirus

'jubamovirus

-----

Monocat
MonDcat
1vlonocat

Monocat

Bicatenari!v[onocdt
------Monocat

Monocat

1--.......

No,

CADE~i\S

Bicatenaria

DE

Genoma

------

r------' COMPOSC

Sobemovirus * *
ARN
r------,--Tobacco
Necrosis
Virus
ARN
f--c:- . - - - - - - - - . , --,
Potexvirlls
-hRN

Reovirus
7habdovirus
*
1--::------- . _ Luteovirus

f---

Ceminivirus

--

""ulime ,virus

Grupo

_____

Tabla 1. Grupos rJp \'irlJs filopat,;"nos, cOnlcler!,f''r:cs rJ' su gAllomr i '

Virus representati\

(3

2)

()

iil

'en"

~o

<:

t")

<t>

CJ
-

o'

rt

'3-"
'"

t)),

U)

""

'teS:

5-

CD

......

ARN

Hordeivirus
Alfalfa Mosaic Virus
Rice Stripe Virus
Tnmalo Spotted Wilt Virus'

Ivlonoea!
Monacal
Monacal
Monacal

Monocal

Monoeal

Monacal
Monoea!

Monocal

Monocal

PARTIC.
I FOR~I.-\

DE CADENAS

Monocal

No,

NO.

Genoma

Virus con envoltura


nm = nanmetro = 0.001 de mlcron
Los virus que presentan Vlrusoldes hacen parte de este grupo
Icosae
= Icosaedrico
=Helicoidal
Helicoi
Monocat = Monocatenano

ARN
ARN

ARl"J

ARN

ARN
ARN

Tobrarus
Cucumovirus

Ilarvirus

ARN

Dianlhovirus

ARN

ARN

COI11ovirus

Bromovirus

ARN

COMPOSIC.

Nepovirus

Grupo

Tabla 1. COlltinuacin

Helieni,
Hclicoi,
Helicoi,
Icosae.

Icosa(~,

lcosae.

Helic.
[eosoo.

Helic.

Icosae.

[eosile

TlPO

iOBO

2i.30 \'35

26

185 \' 46
30

25

28

(N~I)

TA~I.-\t\'O

Arquitectura

Tobaceo Ring Spot Virus (TRSV)


Tomalo Ring Spo! Virus (TRSV)
Cowpea !vlosaic Virus (C\I\1)
Bean Pod Motile Virus (BPMV)
Beel ~ecrotic Yellow Vein Vims (BNYVV)
Polalo Mop Tr:.Eyirus (PMTV)
Tobacco Rattle Virus (TRV)
Cucumber /\insaie Virus [C,IV)
Tomalo Aspermy Virus (TAV)
Brome I\losair VifllS [BMV)
Broad Bean Mottle Virus (BBMV)
Cowpea Chlorolic Mottle Virus (CCMV)
--Tnhaceo Slreak Virus (TSV)
Cilrus Lenf Rugoso Virus (CiLRV)
Cilrus Crinkly LeafVirus [CiCLV)
Barley Stripe Mosaie Virus (BSMV)
Alfalfa f...losaic Virus (AMV)
Rice hoja Blanca Virus
Tornalo Spotted \'Vilt Virus (T5\\1V)

Virus representativos

C/l

~
m

5:

"l1

(f)

>

~.

"

....

(5

OJ

::o

Marina Sanchcz de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Ne/son Bravo 1J_le_ro_ __

En la actualidl1d la tcnica lllundialll1elt) adopt<1c!a consiste en espolvorear las hojas ele la planta a inocular con un abrasivo. que puede sur celita.
frot1ndolas despus con d mazo del mortnfo o con un copito de algodn
im1Jregl1~ldo con ni jugo extndo de la planta ellferma; firlillmente se debcn
lavar las hojas COll agua limpia pilW que la inoculacin sea <~xitosa.
3. Por vectores

Posiblemlmte es el mtodo ms efici()ntc del cual se vale la naturaleza


para proJagar los virus, y se denomina as a la transmisin consoguida con la
ayuda de ciertos animales, principalml-:nle insectos, denominados vectores.
Las interacciOlWS virus-vnctor, vector-plallta son extremadamente complejas; cada planta, vector. virus y medio ambiente constituyen una condicin particular.
La actividad virus-vt~ctor nunca t~S pasiva; existe siempre afinidad especfica entre la cpsida cld virus y el vector, tal es el caso entre la especificiclilCl de varias razas del lJarley Ycllow Dwarf Virus (JJYDVj, las cuales se
pueden diferenciar por sus vectores; la raza MAV se transmite principalmente por el Mido lv!ucroSip}Ulll (IVCl1oe.
Los pulgones constituY()11 el grupo ms lIumeroso y eficiente de los vectores
do virus; son ms ele cien las virosis as transmitidas. Existen diferentes tipos de
relacin entre el pulgn y los virus; los pcrocJ os do adquisicin, de latencia y de
retencin de la partcula virnl por el vector permiten clasificarlos en:

* Virus

110

persistentes o virus lIevados en el estilete

La adquisicin y transmisin de la partcula viral ocurre en segundos, la


persistencia en el vector es corta, no hay perodo de incubacin en el insecto, es decir se transmite inmediatamonte despus de adquirido, 01 virus no se
encuentra en la hemolinfa ele! insecto y se pierde con la muda.

El grupo de Jos Potyvims, entre los cuales se encuentran el Potato Virus Y


(PVY). el Dnan Common Mosaie Virus (BCMV) y el Lottuce Mosaic Virus; los
CUCUlllOVi1'llS COIllO ul Cucumbcr Mosaie Virus (CMV) y el Tomato Aspermy
Virus (TI\V) se transmiten de forma no persistente.
* Viru.<''' scmpersistentes
Necesitan un perodo rl Hr1qU isicin mayor CJlW los no persistentes. el
iusecto clubt) alillwlltarS() un el tloema y ul pl)roclo cl() latencia es variable. El
virus no pasrl l la IlPl1wlillb y se pierde COll la Illuda: necesita perodos dp
inoculaci(lll largos y pm()clus el() rduncill ele uno l dos das, por lo tanto
puede inf()ctar varins plantils.

El grupo elulos Clostmuvirlls. cntre Jos CUides se OllCllClltl'l el Citrus Tris!r)za Virus (CTV) (Figura 2b), es cUl1sidcrnrlo smnipcrsistcnte.
220

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

* Virus persistentes o circulantes

El vector necesita bastante tiempo para su adquisicin, el cual puede


variar entre quince rninutos y una hora; el perodo de latencia es variable y el
poder infeccioso se mantiene varios das, algunas veces hasta que el insecto
muere, o sea que tiene la capacidad de infectar sucesivamente numerosas
plantas.
Existe un perodo de incubacin en el insecto, necesario para que ocurra
la transmisin. Estos virus se acumulan en las glndulas salivales y cuando
el insecto muda conserva su poder infeccioso, lo cual significa que el virus
se encuentra en otros sitios del insecto diferentes de sus piezas bucales.
La especificidad virus-vector es muy estrecha y no pueden, en general,
transmitirse mecnicamente por lo que son virus que se multiplican en el
liber y deben ser inoculados en este tejido.
Dentro de este grupo estn los virus persistentes propagativos; los cuales
se multiplican tanto en la planta como en el vector y algunos de estos vectores pueden pasar el virus transovricamente, en donde los huevos resultan
infectados y las ninfas o estados inmaduros son capaces de inocular plantas
desde su eclosin, como ocurre con el Rice Dwarf Virus (RDV) y el Rice Hoja
Blanca Virus.
Son vectores de virus. algunos hompteros como: Cicadlidos, Aleirdidos. Fulgridos, Cercpidos y Membrcidos; nemtodos de los gneros Xiphinema. Longidorus y Trichodorus: eriofidos como Aceria ficus y Eriophyes
insidiosus; hongos como Olpidium brassicae, vector del virus de la necrosis
del tabaco. Polymixo grominis, vector del virus del mosaico del trigo y del
entorchamiento del arroz, Spongospora subterronea, vector del Mop-top de
la papa, y el hongo Synchytrium endobioticum, vector del virus X de la papa.
4. Por cscuta

La cscuta, planta parsita de la familia de las Convolvulceas, es transmisora de virus en la naturaleza y muy utilizada con fines experimentales.
Acta como puente, como si fuese un conducto o canal de transporte del
virus, intercambiando la savia entre planta enferma y sana.
5. Por semilla

La transmisin de virus por semillas ocurre muy poco, tiene importancia


en la diseminacin de ellos a travs del comercio lo cual constituye un factor
vlido en la epidemiologa de ciertas enfermedades causadas por virus.
Semillas de soya provenientes de plantas afectadas con el Virus del Mosaico (SMV) dan plntulas infectadas y sanas en proporcin de 1 :2; su transmisin depende generalmente de la infeccin en el embrin. Otros virus transmitidos por semilla son el Tomate Mosaic Virus (TMV); el Southern Bean
221

Marina Sanchez de Prager - Fernando MarmoleJo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Figuro 2.
/lfI/J( (/

1(/

11 hll-'Il

Viru' de 1" IWJo


!JI \ fU.' de
,11' 10<; n/llUb.

I}}

(Ir')

fI/"II)?

MOSHic Virlls (SRMV); el virus del mosaico comn de la habichuela: el viflls


elel ITlos,lico d{~ Ii] lechug,l: el Tol>acc:o Ringspot Virus (TRSV), entre utros.
Entl'l~

los f1clores que pllr,elen influenciar el grado de transmisin por


semilla estn: l. Ll espf,ci; o varied1d de la plallta hospedante, 2. Li1 vilriante o raza drd virus, y 3. La ec!;,d ele 11 pl1I1 en el momento ele la infeccin.
Otras formas de tr1nsmisin qllP ocurren naturlllllPnte son: por races, al
enlrar en contlr:to planti1s enferm1S COl! sanas y por polpt1, que aunqu e suceele I1lU~1 ]lOCO 1m la ni1turnlcza, es otm forIlla rk rliseminar:in ele ellos.
222

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Identificacin y reconocimiento
Es necesaria la identificacin de los virus que causan las enfermeclades
de las plalltas para flnfocar las medidas de manejo o control. Los procedimientos para ello vman de acuerdo con el virus involucrado y se logran
mediante:

Sintomatologa uspecfica en plantas hospederas.

Determinacin del mtodo de transmisin: injerto. insectos, clscuta, etc.

Determinacin del rango de posibles plantas hospederas.


Obsmvacin morfolgica. por intermedio del microscopio electrnico,
de partculas y (bi'os cL)lulares en el hospedero.

Purificacin y aislamiento para determinar:


Cuac!ersticls fsico-qumicas.
Interaccin ()

n~lacin

con otras virosis.

Propiedades del virus en jugo crudo.


-Caracterizlcin serolgir.a.

Caractersticas Fsico-Qumicas
Se r!l:S!Cilll las siguicll!l~s'
* Relacin () purcentaje dl) cido nuclLlico (entre 5 y 35%).
* CIaSll ele cir!o lluclcico.

Dl~terll\inl\cil)1l

del ilmilloicido tcrminal.

* N nwro de ca pSlmeros

(slll)Unidadf~s

proteicas).

* Pr~so lI1olc(;ulllf de la j)ilrtcula viral.

* TUlllai'lo y forma de

LIS

Pilrtcu las vira les.

* Constante (ilJ scdinwntacin.


* Punto iSOld(;ctrico.

* Movilidad

cl[~ctrofor6tica.

Coeficiente dr~ difusin.

* Difraccin a los rayos X.

Interaccin con olros Virus


Una relacin s(~rolgica estrecha entre un virus conocido y uno no determinado proporciona eviclenc:iil de que este pueda ser una variante del virus
conociclo. El mtodo utilizado con este fin es ele preinmunizacin, (JI cual se
basa !ln llll() una planta illvadida por un virus suave (raza suave) no sufre
clai'os gravcs postcriurcs si se reinocula con razas agresivas estrechamrmte
relacionadas con aqll()l; este es un caso de proteccin cruzada como ni em-

223

Marina Sanchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

pleo el() razas suaves del Virus ele la Tristeza ele Jos Ctricos [CTV) contra
razas agresivas del mismo. Si 1,1 planta sufre c1ai'Jo con facilidad por la inoculacin se estnblece que son virus no relacionados.

Propiedades en jugo nalural


Se debe tener en cuenta que hay mucha variacin experimentAl al determinar estas caractersticas, por lo tanto, los virus deben compararse en las
mismas condiciones ambientales, utilizando en lo posible las mismas plantas hospederas.

Gmdo de innctivncin tp.l"micn

Se clunominu as la temperatur,l necesaria para lograr la c:ompluta inactivacin <lnl virus, en un jugo tratudo durante un puroclo de diez minutos.
Se determina colocando en hallO Mara jugo natural siJl diluir. procedente de plantas infer.tadas en tubos pncunl10s que permitan la difusin rlpida
d~) calor al jugo durante diez minutos. grmeril1mcntt: a intervllos ek 5 grados
(mtn~ 40 y D5 ce:; procediundu luego a enfriar rpirlnl11cntc para inundar plantas indicadoras.
* Longcvic/ud in \'ilro

Se rldl)rmina guardando el jugo infectivo (m recipientes cerradus qlW se


mantienen a temperatura ambielltl~. inoculando el jugo en plantas indicadoras a intervalos quo Sp duplican suC()sivanwn!n. hasta que el jugo deja de ser
infcctivo.

Punto fino} de dilucin


Se establece mediante una serie de diluciones del jugo infectivo. con un
factor de 10 (1/10, l/lOO. 111.000, ... 1/100.0(0). inoculando plantas con cada
dilucin para detennin;u la ltima de stas a la cual el extracto es infectivo.

Caracterizacin serolgica
Las t{:cnicas serolgicas constituyen el mtodo ms rpido y especfico
en el estudio ele las enfermedades virales y son una de las principales formas
de identiricar virus y de establecer la relacin y las similitudes entre estos.
Su limitacin reside en que slo se pueden aplicar a aquellos virus que se
pueden purificar. Se basa ell que las reacciones serolgicas son el resultnelo
ele la combinacin especfica entre nntgcnos y nntjcllcrpos.
Los antgenos son sustancias, generalmente una prottdna. de peso molecular superior a 10.000 dalton. que inyectadas en animales. usualmente conejos, provocan la aparicin de anticuerpos (inmunoglobulinas,lgG) con los
cuales reaccionan especficamente .
Dalton: Unidad de masa. igual a 1.66x1 0. 27 kg.

224

MICRO BI OLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTAL ES

-----------------------------

En el caso c!(: los virus. Ii1 C:p s lIl1 o ccipside de n,l t llfd lcZ<1 pr {J t l~jC l(:s
conficw la propir, dacl de ser antgenos ,d s(~r in yectarl os (:11 illli l11,[r)s .
Mtodos d e deteLLin

- Meto(!o Eh.,o
La c!1:tpcr :i(lI1 rld antgl-mo (viru s) p()r los ; nti r: ll(:rjl ()s LOl rr:spl ll1dii ~ l t P.S sr'
hilc:l pUl' un,l simple ViSli]i zdcin dcl [l mr:ipi til d o lI1Ig(:l1()/'lllt ic:ue rp o .
llled.ianl e t(:cniCls scrol()gicds de lg1uti n'H.i(n y pn:c ipitdcirn. II()\' c n dd
los llltooos conocidos CO/110 conjugo(in ..,. l:ntw lus que s r: l:nCtH-:Il trd rd m todo Eliso (J;:n zy lll e L inKerl[lllJ)[JIl() 0.() J'lJ en! Ass(lI ), son llls ms lI l ili/.ados . Vi l
qu e wrlllilpn clr:t edlf tllllV IH:qILPi1ilS cdnti dil t!r:s d(: virus .
J ,<1 Cr! moderna de Id Il:r:nolog<1 drd di nglll stir:o cn td lIlilllCj() de las enfermedad es dI: ];S pl-lIlt<IS CO!11fm( l:n llJ 7b . C0 11 1,) pri llwrl ;) plicaci(m dl: la
tcnica r!pl l:nsaYl) inlllUl1Cl -alJsorlw nt!: lig ad o ; Id l:nzill lil () J:l iSd . f\ Inf: r! iHdos dr: la dC:Cildd de los d11()S OCIW llt il jp;I"( :c:il~ l"() 11 en el c Ollll :rr :i() los " Kits"
rlP, cld cccin, los cUdlcs. 11Il~gO l lt~ Ullil scrie tlr) prlsos sHncill us. perm ilen la
caracterizacin el e l agente c,-l\lsdl dt: la cnfl:rnwcl ad: e ll al gunos C;;SllS r!1 n)sltltaclo se oiJtir:nc no dicz minutos .

Los conjugados consist(:ll r:11 r:I1 /.im'IS tillf:s CO l1l0 fllS !I;Sil ,]r:d illd , [lt) roxidasl. dc .. qU(~ s()n C<1pilCeS dr! produci r, ,H:tUdllll o sobre lIll sust ra t(), c olores vivos rcilml:nte visibll:s incluso ti simpl l) vis ta .
El m todo Elisd SP ]Jn:sc nld lm difcn:nll:s vilr iil hll!s eOlllO cl! ':lisd Si.lll(lwieh (DAS) cuyo esqu ema op! :r)(:iollill !!S el si glli lmt!: (Fi gmil 3)
1.

/\.c!icin de ll1ti c ur:rp os (lgC) r: s pt:dficos para tapi zar l()s pocill os .

2.

A Adir 1<1 Il11LPstril: e l


cu erpos PS pl:c: fi r:os.

:~.

A'lncJir anticucrp()s pspr:r:ficos lllill"C<1cl()s con la cn z im a . SI) fijil r;ll los


age ntes jJ ltrgr:110S d(: ll lllLlt:slril .

l g l : ntr ~

pilt(J gCUIl (v iru s ): si lo ha y. se fi ja

los lllti-

4. Aadir e,l sLlstritto CSJHH :fico rl( ~ ll r~IlzimrL p ;lr l qll e pro dLl zca I" P ' W C Ir lll.
que: se r po s itiva si s~: {l ror!l lC(: co lmdc i(l ll: :sta se r pro p lJl"C iOlliil d Id
conct' lllracil')n e1(:1 virlls ell la Illllr:strl .
* Sueros III()JlOdolloJes

Ull illlportillltr: progrcs Cl r~l sC I'I]o g a e s ]; jllls ihil idilrl de ()htclll ~r Hnti clIerpos 11l1lJlnclon,d cs. Un,\ Pl rtlc u la d e v irus c ont ir:ne IIUtnC[C)SllS s ilios
iHllgeI1os. y l:ll;wdo sr ~ inyr:( :tr\;) \l 1l 'lIl.i Ill a 1 los i1 nt ic \lr: r[lo s cllrrr:s[lond icllte s a carlil lIll() dI: HStoS s it ios se: si n tr! t iZil n y se so!J rC ilr!r)tl l! lo s C"J.1I1) Vil
:xistel1 y sr: s<1lw ejlll : C,H!c d:llll ll Clll ll pdl )(ltr! s l() Sl:grl:ga \lll tip() d r: ilnticu erpo. Si Sr: hlr:l~ lusiollM u nl dI : nSlS cl Lll ils c o n u n;) clula dr llli(:! OIll i-l

225

____
M_a_n_n_a Snchez de Prage r - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

(c lul as dOIlde se s inteti zil D lils gmllmaglob ulina s) se obti ene un hibrid oIllil, que colocado en Ull cultivo constitllye una ln ea que segrega iln ticu erpos d c~ [or ma Wrmm pn te. Por mtodos de clonacin y d e seleccin se p uede degir la lnea celular qu e prudUC8 e l anticuerpo que se desee: se selec c iOllafi. por e jcmplo , f-~ l anticuerpo que tcnga mayor afinidad por un virus.
() (~ l qllf-~ l'I~C:O ll()Z Ca llllil r Cl7.a precisa del virus y las c!el1l<1s. Es ta produccin
[:o ntillu a in vitro d e anticuerpos tielle ad ems la ventaja de pod e r serv ir de
referenc ia estable,
Ulll

Los mtodos inlllLlllolgicos slo d e tect an la dpsicla el e l virus, es decir,


pdt't l~ soLllllentt' del producto d e sus gfmes.

Trp izado. r:ijoc in de anticLlerpos esjlt:c ifi c:os ('T) IgC riel age nte potgeno
l dt~ lt~c tar so bre un soporte (pt aca) utili;;ar!() CU!110 illIllUlloadsorbl:ntc.
Lavado

2.

A di c i(lll de la muestrl (llltgt~nn) (Ol;


si :1 age nLA patgeno es t pnsente , reacci ona r con su onti c: u e rpo (IgC;) esIlPcfico qm:d unclo fijad os l la placa.
Lavado

3.

to s antic; uc-,rpos ( ):( ) esp ecficos dpl Clntgt:IlO a cl e lec: tilr, conjugados o marcados con una e n z im a .
Lavado

4.

Ad ici n de l sLlstrato
sobre e l c: u al
sea C:ilpa z de ac:tuar la enz im a m arcadora.

~.

Lcc:t u ril d e las placas a s imptc:~ v ista o


con un co lormetro i:! lo lon g itud de

Adic in de

(::1

o lld a apropiilrio segn el prDdll<:to fi !lal coloreadu.

226

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

* HuriclOCn

eOIl

sondos cADN

El mtodo dD hibridacin eh! seCUel1CiilS eln <1ciclo nucleieo constituyo la


tecnologa m<s moderna aplicada a la delnccin dn los fitopatgenos, entre
ellos los virus. Consiste un pngilr oligol1ucletidos sobw un soporte slido y
luego ll1alizar cmo las moleulas ciD AON o ARN elel patgeno que SH quiere irtentific:ar se hibridizan las sondas fijas.
Dentro do las nuevas t{)cnicas se ellcuontra la m.lcein en cartena cle la
polimerasa o PCR (Polyrrwrase Chain Ruaction), que consiste en amplificar
secuencias especficas de cido dpsoxirribollucleico (ADN), de tal manera
que a pdrt i r clp II na mnimil cn I i cIad dn nst Po com punsto su obtienen niveles
suficiontes para ser detectados ~m Ull g(~l de clcctrofwsis. La parte) ms irnport<lnte posee niCanWlll() el palc'lgt)1l0, el cual pucele utiliziHsc para realizar
lIn arnplificaeitJl1 s()I(~r:tiva cid \DN.

Viroides
/\ principius de la d'!c:ada de 1 ~l70 s(~ crea qllP las cnfl)rI1lUdndes de plantas v allimalus orln causadas sulClllwnte por hongos, bacturias o virus. En
19G7, los l~stlldios inicildos pilra dulurminr ll llnturaluza del agellll) causal
dul tubrculo illtusado o fusiforme du ] pilpa "Potala Spindl() Tuber Disuase -PSTV- (Figurl 4u) y la Exocortis ele los ctric()s -CEV- (Figura 4b). llevaron al descubrimiento dl) Ull lllW\'O grupo dr! pdtgunos en las plant<ls: los
vimicles.
Las il1\'()stigaciones prulilllillarcs c!cllwstrlrun !]lW estos nuevos agcnl!!s
infectivos. los viroides, !lO slo wdimelllabilll a una velocidad ms blja que
la mayora de !s parlclllils de virus analizadas. sino que admns lu hacan
m,~s lentamente Cjllf} la fraccin <In cido nucleico do taks pflftc:ulas. Estos
rcsultlclos IlnvlIron a la conclusin de que estos nuevos agentes causales de
enfmmedades en pllntas podran ser AON o ARN. Tratando el material infectivo con la enzima ribolluc\cnsil, que digi()rc~ ni ARN, s!~ inletivaba el agont8;
mientras que el tratamiento con enzimas que degradaban el ADN o las protenas por el contrnrio no teIla ningn efecto sohre la infectividad [j:~ la partcula. Esto significaba que el elt~nwnto escllcial eu la infeccin tena que ser
ARN y que probablemente no haba ni protena ni ADN implicados.
Los estuclios revelaron rm 1971 que ellos errtn simplemente molriculas de
ARN desnudo. con peso molecular de aproximadamente 120.000 dalton, es
clncir. diez veces ms pequeilos que el ltwnor ele los virus conocidos y se !r)S
llam viroidl.~s.

Qu son los viroides?


Los viroic!(-)s son cidos nucleicos de bajo peso molecular, que estn presentes en ciertos organismos: pero cuando se inoculan en ellos se multiplican en forma autnoma oCSiOnimc!o Hnfermedad.
227

Marina Sflnchez de Prager . Fernando Marmolejo De la Torre Nelson Bravo C.'ero

Los viroidcs son (denwntos pJtgenos ilutorrq>roclucibl es , cadenas circulares el(; 40 ,1 3HO nllcl e ticlos, no protegidos por ulla dpsic!a (pr otena) ;
t iClwn un genuIno el ic;z vecus lIlis n;c!ucic!o que los ms pequeos bacleriLlgos ele ARN y solamente su les ha encontrado en las plantas superiores en la s
cuales ocasionan graves (~nfe rmeelad es.
Los viroiclc,s SOIJ pcru6l<ls 1l101 6c llllS de .ciclo ribol111clcico (ARN) de
bajo peso 1ll01(;Cl];W, qUC) pueden infectar;1 la s ccqulas veg etales, S8 auto!l1ultipli ulT1 v producen (;nfcrmedacl.
Los viroiclHs difieren de los virus por lo menos

(;]1

dos C<1rflCtc;rsticas:

.}. El 1,1111 ai10 del i\RN, el cual tiUllf; un peso moleculm que \'(t de 75.000 il
1 LO.ono en los viroides, complraclo con el "alor de 1.000.000 - 10.000.000
ele los virus ilutorrec!upli( :;blcs.
L.

El ARN el(; los virus se encuentra roclCilclo por ulla cubierta de protena,
micntrlS que los viroidcs Ci!l'l!um de el la y 'tl parecer (: xisllm COlllO ARN
libr t;s.

El pcqlll~i1() tll11lllCl dvl J\R N cI(~ los viroiclcs inclicJ quu (~st;1n consti tuidos
por lln nnwro pmxill1ilclo de 250 ,1 ::l50 Ilucletidos. L" comprohacin ele
CjU(-; lus viroidcs ('xis;11 (:01110 ll1ol(~culas ch~ ARN libres flli)S que como I1Ucll~()pr(llcn;ls. recui(m; Clll Sll dl; mtodos de extrJcci(l1l, ,lis];1Jllilmlo y puriticac:inll iJ<ISldllte distintos de los que se utj lizaI1 para lus "irus y S ll ohst~rvacin
Ptll;] microscopio cll'clr(J]lic:u se ];CC uxtf(~llll1c1amcnt() difcil, ,1un lm prej!arilciulles purificlrlas, lniclltr~lS cue Pll L1 SilVi O 8n los Ipjidos ele las ]Jl,llltas
s u cleleccin con (d microscupio eIuctdmic:o gener,IJrllente es imposible.
Origen de las enfermeda des causadas por viroides
Las cn !l;rm(;c!adus Cilllsdcla s por viroiclc;s hall sido recunocidas recien temente. y en OjJillicill ele ,tlgullOS inv()sligldores su origen y aparicin S011
atribuidos a la inlrodur:t :io d; Ill(;toc!os intensivos en la agricultura, espe(:iall11clltl~ lllonocultiv()s.
Dich os rnloc!os h,1n contrihuido ,1 la di spm il1i1cin, en ocasiones inad\'l;rtidn, pur va vegetativa, mediante h proplgaci6n de plantas <1sintomtic:as <1fcc: ladas por viroides. tales corno tul){;fculos de papa. esquejes de crisantumo . illj(~rto dc; ll1an zal1i1S, ctricos y vicies.
Otra pxplicacill dl posihle origen ele los viroides en pl an tas cultivadas
es que se o riginaron por introduccin accidental dl;sc!e n~servorios de planta s s ilv es tres , lo cllal suponu que lus vroiclus JlO proc!uu;n s ntomas eJl hospederos nativos o plilnlcls silvestres.
Multiplicacin
Sp d(;scu110U; ll forma 111(~diilnle la c:u;11 se; l11ullipliulIl los viroides. S(~
cncuentr,.n r:<lsi exclusv,lll1(mtC) en los nucleolos d.; las clula s infectadas y
228

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

[os expl~rillwnt()S han demostrado que el i\RN de los viroides no funciona


como ARN mellsajero. A diferencia dol ADN o ARN de los virus, no se traduce a enzimas qUl'
pia replicacin. La loull I1
1111
viroicles en el IHU
el ele tlctuar como ARN 1
llevaclo a la hipl
!I I(ls sntomas interfiriendo
c:in g'nica do 1,1'; (1:1
Esta hiptesis (~s apoy;:1
d~l quu ciertds p
1,:lli
L
que se encuelltran en el:1
prc,~enttlll un r:,llllidaclb:s mayorus un C[lIlls infectaclas.

Por el pllqUElt10 tan1llo del ARN de los viroides parece que no ticlle la
sllfic:icnlll informacin incluso para cocJiJicar un; sola ellzima rcpJicasa que
es la CJue l:rielct"lil la copia de lllW hlice de {cielo rilJonllcleico en otra hlice
com]llemcllllria del ARN. Dp ah que Slla incaplz de llll\'l!" a cabo ltl rnultiplicdcin cid viroidl~.
Rl~cie!)llinWIl!'

el iHlct amell Ili (11


que S(~ rliqllicn'll
r SI, son propon
;\ ti II se cI(',,(

lid

p!(
.1
11)

l{

los viroides se rnulti


;(eso en el cual todos I(lS
(d viroidll. illcluYlmc!o 1,
l)iic!llro,

11 i1 j'()l l Illli di ,111 t l~ 1;1 CUi[ lus \1


(1'11 ('l1f('!l111'11'1I1, Lils cnl":rllwdadlis gll]]l'fl([;S Pllr r.:,'l!()S [ldtgtl110S 1l1\l(~strdn
tI]];1 grllll \'lricdud d(1 snlollliS que se ilSlill1l:jil]l Il los UGIsioI1r!os por las
i])lc(c:iol](,,~ viridcs. PilrcC:l~ que In C:i111lidilcl de viruicll1s Cjue Sl) proc]IICPI1 en
Ids U':]t!dS l'S (i,\!nlll1nc!iIIlWl1ll1 wque1cI, (le ah CJuc Sla improbtlbJc CjlW arrojllll UI1 clMirit!iJ1 los Illlcl'(llic!os del \T\N de L1S u"lul(ls. Adcm,'1s, corno suceclll ((Jll J(lS \'irus, 11111(:llflS de' l[lS lHlSl)cr!(:fOS inf(lclcldos no lmlpc:trilll (1:1i'10';
\'ir()ir\esslic!uplic(ll1el II ,1:; ( )
C:()J1sidllrilbl~ls. dI (II:I':
I() ]ilU'IJ1 llll hoS:,()(I,
;pMPnlcll1lilltc los viii I! ;r!(,(
([
111 lI li,d J() lis l!1ll el (:1 11 ( l ( ' ti (
'l qUH se ilsclllcja a los v
(:'(

()

t,lll

Transmisin y
Lus \'iroidlJ,s Sl) clisCJlllll1ll clescll; L1S pL1lll1S 11l1fcrmas l [,IS sanas, principl1mullll' por medios ll1Pcnicos, es decir. i1 tra\'(~s de la Silvia, ()O las
l11illlOS o lwrranliplltas durilnte las activir];lc!c!s ell; propag<lcin O de cultivo
\'. Jlor SlIp\lllstO. nwdiillltn propLlglcil1 vllgetativI. Algunos viroidcs, como
p1 dlll tulJI:rcu[u illlllsaclo de la papa, achapdrramimllo del crisantemo y la
I11dJ1lha cJor!ica ele (Istl) ltimo, son transmitidos eOIl gran facilidad a
lrav(ls ele 1;1 savi..III
q' 1,1\
, como la exocortis elle
11
I
son l trilV(IS de I\d\'
ti cultlcl. Algunos de el
CC1SO clld IlIlJ0rclI 1111)
I!i "Ipil. se transmilfm l tril 1
Ilil Y del polen PII 1 I
!Jll
Vd]] desde O hasta 100~:
hllSld ,horilllin2lill in
(';IWl
I 1I ()Iros vcc:tonlS de; loC!
I
irll,.l
qlll1 PlI)"l'lY que (Isllh 1l11111lOS "U !r;,llsll1itic!os l tr;1\i(lS c!e las pcltds o lS
Pil'lllS Inlcilllls de algllnos inS(lctoS. E.'\jJlirimllI1LII111l111tr, el PSTV pucde sur

229

Marina Sanchez de Prager - Fernando Marmo/ejo De /a Torre - No/son Bravo Olero


-----

tr,lllsmitido por los fielos j\lfucJ'Osiphulll eupl!orhioe y


pdpl ,1 pL1l1t(1s de tomate.
La mayor dis(llll
campo y vivero::
PSTV puede ser d
vii1munte fueron 1I

1:

l\lyZlIS

persicne de

()rmecladf)S CilllSdc!as por


i en las y mur \l i naria cc
illldc' tubrculos S(1!10S con 1
ICls enfermos.

lO

Se cree C]lW (TI I


Idl
iroides solJreviven fueril
u::;pl'l
() en el material vegetd inerte, durante perodos epw van desde unos cuantos minutos hast'! algunos meses. En generilJ pnrecc ClW invernan en plantils
hospcclculs pcrennHs qlW inc:Juyc)J1 a los hosprldcTCls mi1s importantes de
cilsi tudus los viroic!()s que su cOlloccm. Los viroic!(ls comnmente son muy
resi.stcntes d las nltas tcmpm'<lturcls
,1 liicisc]is cnfcrmccli1clcs en pi

S:) sClbu npro iJlJ


dilS por viroidc)s l

,11

'. i Ii!l!

~ _ _ _ ~)I\IBRE DE~ VIR()ID~.

(11If'

(ut' (leleclu(lo.

I
-----

__._--

, PulitluSpllHllp lulwr\'!rtIlc1lPSrV)
-,--_._"._"-.

Cilrlls E'\()cor1is Viroid (LEV)

1..._

----

ClnysIlJl!ili'fllUIll Stunl Viruicl (ChSV)


Chrv.Sdnt IWfllll 111

ChCMV)

Cocunu! Cmlang (

-_._--._"'- - - - - " , , - -

Cl JUIVO
Pilpil

nl71

Ctrir ()s

1072

CriSllllpll10

1973

CriSiJn!f~nHl

Cocoton,

;111:'

Ao

----+----~

j l)

7:-,

Pllpine,

Cueuflll)pT Pllc FTni:


Hup Stunt Viruid (l

--------------

~ C(~urnnra LltiJI1. ! Viruid (CLV)

1978

LAvucac!o Sunbloteh Viroe! (ASBV)


I

--

T0111i:!lu \pjcal Stunt Viruid (TASV)

Tomate

Tomatu Plilnta 1v1acho Viroicl (TI'MV)


Llurc10ek Slllnt Vi
Carnatiun Stllnt

19C1l

--._ .. _---+--Tomate
1082

C1<1\'8
_, 1

- - - - -- - - - - _ ....

Applp, Sear Skin

tvlanzan:

Crapcvine Vroid

Uva

_0-"_-

Citrn

230

MICROBIOLOGA : ASPECTOS FUNDAM ENTALES

Figura 4, u) J'n/%
SJ!/IIr1le 'Ji!i)f-'! V}m}rl n 'Jihenll/n nllllsarJn de In papo (PSTV), h)
U lru.' E\()(;(lrtls \'/m/rf (I:': \'/.

231

_ _ _ Marin.a Snchez de Prager Fernando Marrnolejo De la Torre Nelson Bravo Otero

Priones
Estos ag~n tes en usal (!s de enftHIrl(-!oadcs in fecciosas plant8an un acerti jo
biolgico: cOlltimwll protena y se reproducen en las clulas, pero no se ha
encontrado en ellos ADN ni ARN.
Los Hcidos t1uclcicos AUN v ARN son el comn denominador de la vida
y t,l dogma central dn la biologa llloleculiH: la informacin gentica fluye
invariabll)llWllle de l()s i-ciclos nuc:Jeicos a las protenas.

El agentr. illfnccioso dl~nominaclo prin constitu~le, segn parece, la excnpcill ms IlotalJln l la wgla de que cada organismo lleva en s cidos nuc:J(!ic(Js que rlJ~fin()n su propia idenlidad.
St) sabn rue ni prilll es capaz de iniciar la produccin de nuevos priones,
al menos ()!l cinrtas clulas del mamfero, adems, entre sus componentes
Illoleculams hay almenas una protena, por lo que sera de 8spernr la presencia c!(: un Il1old() de J\DN o ARN que especifique su estructura.

Las pruehas reIllitidas hasta el momento illdican, sin embargo, que el


prin carnc(: absolutmwnte d(~ <.leido nucleico y en ltima instancia, en caso
de que SP. (:t1cnnlrara algo de fl. probablemente no bastara para codificar la
()strudura ck ] protena_
No se COllocell cllfermedad(~s en plantas ocasionadas por este grupo de
agentes infecciosos, los cuales son causantes ele un grupo de patologas neurodegenel'iltivas Jctalt!s carac!ersticls de mamferos, incluyendo al hombre.
Estos agnntt,s son capaces de transJllit-irsn de hospedero a hospedero con elevados tinm!1()s de incuhacin.
J\ dift)J'(:ncia de los virus y viroidns, son resistentes a tratamientos inaclivantes de cidos nuclcicos. pero comparlen con stos la existencia de una
v;lfiabilidild clf! in(clllos dentro de la misma especie (diferenciables por el
patrn de la lf:si(n y la magnitud del timnpo de incubacin) y de una infectviclad sujp.ta l hnrrera de especie_
La trallsmisin d~) priolws entre distintas especies es un proceso variahle. parCCt~ comprobada la transmisin de vacas l humanos. y en el caso de
ocurrir es muy poco dicaz y sucede con una prolongacin del tiempo ele
inclllJaci(n que tras pasos subsiguientes. o adaptacin, se acorta y estabiliza
y la transmisin c!t"ja de ser un proceso probabilslico.

La barrera dn especi(~ ocurre por la man festacin de las restricciones de


seclInncia j(-: un proceso dn reconocimiento molpcldar.

Qu son los priones?


Son protenas que poselm la disposicin de infectar clulas. Estas prote!las tinnl)O capacidad de il.utognnnracill. al igual que las bacterias y virus
qlle pr()dllCf~n enfermedades infecl"ivls habituales.

232

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

En las c{~lul\s existen protunns l1ormaj()s (protopriolles) quc, al sufrir Ull


cambio en su l,structura, se trtll1sformnl1 en priolles. El cambio en la cstructura ele las protenas PUl)[lP ocurrir por dos Il1CCillliSllJos:
1. Mutac:iln un ul gen nor)llal ((~llferll1uclacl clu Crcutzfeld-jacob).

2. Consumo de alinwntos (eJ1f()rnwdad du las vacas locas): en esto caso el


alimento cOlltiene la protena alterada en su estructura (prin). Esta causara la Ir,1l1sfnrmacit'i1l dI) IJs protenas cdull1wS normales (protoprio!les) en protonas alteradas (priones).

Estructura
La bsquer!a el!) la tmtidild !llolucul,lr C:Ol1stituti\'a de estu agente re\'(~l
COIlJU compunente mayoritario, si no llico, una protena PrP.Sc [protena clp
prin ele SCl'llpicl y la ilUSl)llciil de UIl cido nuc:lt)ico eSjlecfic(). l,on estHs
pn)misas estructurales, unidas a Ll c:apilcidacl ele infeccin, Prusil1cr S. B.
acui1 el t6rmillo Pl?l()N (partcula infocciosa ele 11Ituraj()7a prot(lica) para
clft~rCIJciarlo rk virus v viroidf-~s.
Dadas las CllraclersliCilS JlULO cOJ\vPIlcionaJes de los prioIlBs se han (dalJUrado nUIllcrosas hip(ltcsis sollf() Sil eslructura, siendo un la actllalidad la
delllayor ilC()ptncn 1<1 c01\ocida como "Slo pm!f)lla" plantnacla por GriITith UIl 1m,7, forll1alrm:lIe CI1lIllCillla v ac:tualizllla por Prusinnf:
"Se de\lomina prill a la forl11<l llturlrLI de tilla protdna celubr funciollal
(PrP (m IlHllllfuros) que ha podidu perder su funcirJn normal ~wr() que ha
adquirirlo b capacidad dI) traI1SfOrm<lf la formil normal en patolgica".

Lo pl'Otr.'lllO celulur del prin


La protena del prin est codificada por Ull g(m cromusmico de copia
nica (ILIe ha sido identificado en ms di) tn)ce especies de mamferos.
El prorlucto traducido l partir elel /\RNm es una c'lclena polipcptdica ck
alrededor de 2~O aminOi.'icidos, dopondin!1rlo d~) la 8specie.
La conclusin ele que d compOlwnte del prin es proteico y de que su
presencia es necesaria para la in!'uccit'ill, se bilS en la capacidad de distintos
reactivos qumicos para alterar III infeclividad al claillr las protenas del prit'in;
ya que sustancias que no tienen efecto sobre las prutcnas no la altman.
Lll prueba mLs clara elel experimento se hizo cun protnasas, cun las cuales se demostr en forma convillcente que nstas enzimas s r~clLlcian la infuctiviclac! elel prin. En comparacin cun la mayora de las protenas celulares,
el PRP (protena riel prin) es resistente al tratamiento con proteasas, Detergentes como doclecil-sulfato sdico (SOS) y otros como fenol-urea y otras
SillAS reducen la actividad biolgica d los priunes.
Se ha intentaclo en repetidas OCCIsiones inactivar los priones con tratamientos qumicos quo atacan los cidos nucleicos, en este caso empleando

233

Marina Sanchez de Prager, Fernando Marmo/e/o De /a Torre, Ne/son Bravo C'ero

l111clut!SilS, incluyendo enzimllS que destruyen a lu Vl'Z ADN y ARN sin que
Sf! dismilll1yll sigllificllti\'amnnte la infcctividao del pril1,

UIl,l posible obj(!ci(n H estos resultadus flS que las enzimas no tengan
acceso l\ los cidos nuclllicos; Illuchos virus SOJl l'flsistBntcs a las nucleasas
porque la cubi~lrta protnicillos protuge. sin mllhargo. al trutar los priunes con
l1lolcu]as cknominldas PsoruJenos, que atra\'iesan la cubimta protenica ele
la mayor fa de los virus. y al expollerlos a la luz ultravioleta esta sustancia se
lllW ni {cirio l1ucll'cu y Ju inacti\'dn; al probar la infl!ctividad del prin no se
obSllrV( p('~rd ida [p Ll 1I <l,

El [r,le aso de la c!1!leccin ckl cido nucllic:o en lus priones no nillga


su existellcia, Podran (lsconclcrsc) de lllguntl manera en unn estructura
que lo.,> rockasc. o prclSp.ntarsp (ln c:antirlnc!()s tan peCJueiins que impidan
su dctc;:in,

El PI)SO !llolncular eln] PrP cornlSpO))<!(! a Ulla cadena dl'l nI memos 250
iUllillOcidus ~' pawcll rlzonalllc sugt:rir <jllfl si (:] prin ienfl icido l1uclcicu.
probahlt:l1ullltc su IOllgitud 110 SIl]W1Ll los :iD llucktidos ~' sf'gn el cdigo
g()lll"licll U)]]\,()llci()llal j;)w haber InlS Illlc!c(tidos por cada 1mitlociclo; por
lo tanto, (;[ SUpUl'sto ge'llOlllil cI('] pric'll1 110 por!ri1 codificar un) !lrotclln q\W
t \I\'ipsp llls dI' \111<1 dOC()ll1 dt' llllinocic!ns,
canil1u para ()sLlhl('u)r c()n u'ltcza qun l'l pri('JI) ('S pur,1
prot(:na: ddcrlllinar la SI'CUt!ncid cornpld clp ,lfnillO,cidos d!l PrP. silltnti,
Zdr 11n<l protdn1 artificial U)J) esa misma sCLlInlH:ia y c!nllloslr;f cun posuP
idntica acli\'idlc! biolgica q\l~~ d PrP l1i1turaL

Slo (:'\istp

UIl

Multiplicacin
El lllcLanislllo llledinlltc ni cual S!: multiplican los prioll(:s no se conoce
COll precisin, AUIH!\I(! algul10s il1\'l:stig,lClon's SigU(lll postulando la necesielad 11(1 \In ,cido Illlclcico csp(!cHico dI) priOlHls. no [lxist(lll evic].nci'ls lsiciJS
ni CUlllicdS <!u su cxis!(:nci,1. En el CSU dl~ (:xistir, cul)(! (lSp(!r;r qlW dicha
mol(:utla dirija III Il1l1ltiplicacit'JIl d(l priOIl(lS Ill11plcndo una lstrutegia simil"r a Irl dll los virlls,

Existlln (lll l:Sllllcia tnls hiptesis sol)[(l su lHuJtiplic8cin: la prinwra es


que rll prill. a !)(lSar de todas lns indicar:icJl1l1S a favor dfl In contrario, 11S un
virus tpico con UIJ gCllomll de ,\DN o i\RN rue dcterminn la estructura COH1pida cln la protella del prin; );1 segunda es quu. de alguna mannrn, los aminokids de PrP 11Spccifillllnn S\I propia SBcuullcin dmante LI wplic:c:in del
prin, Ello se d()(:tunra indir(!r:tu!1wnl(l, por nwdio dI: III "tradllccin il1\'(lrsa" ell:]1 protPlla H I\DN (] i\RN, qll!l 11Iego illtl!rpretara el l[Jarilto ullu]Clr, a
la rn,IlHl[H hilhitUid. I1M,l falJricilr ms prot(lll'l. li.d proU1SIl nu SI) hn bscll'vado j1I11is \' constituird Ulll1 f1<lgr<lnt(~ \'ioJncil'lI1 riel dogma CClntral. quP (lstnblpCfl qm! pI flujo de inforI1wcin \'n, ~m lu c:lula. de Ius l1ucIctidus a las
234

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

protenas. La tercera hiptesis es la de que exista un gen ele ADN que no se


encuentre en el prin y que codifique la secuencia de aminocidos de la
protena del prin. Ese g{m debe ser un componente del genoma normal del
hospeoero y que la infeccin 10 activar de alguna manera. Una objecin a
esta hiptesis es la observacin de que parece haber varias "razas" o "cepas"
de priones, y si la replicacin no requiere sino de la activacin de un gen,
entonces, cmo puedo el mismo hospedante servir de hospedador a varios
prioncs?
Qu enfermedades producen?
Los prionos son los agentes causantes ele un grupo de patologas ncurooogenerativas letalos caractersticas de mamferos, tambin conocidas como
encefalopatas ospongiformns transmisibles.
Se conocen unas pocas enfermedades causadas por priones: el prurito
lumbar (scrapicl. una alteracin neurolgica de ovejas y cabras; la enfermeoad de Creutzfeld-Jacob, una rara demencia humana y la enfermedad de las
vacas locas.
Los priones se consideran tambin agentes probables de otras enfermedades humanas quo af't1ctan el sistema nervioso: el Kuru, observado slo en
las tribus ele las tierras altas de Nueva Guinea; el sndrome de Gerstmann
Strausslery y la enfermedad de Alzheimer, la cual posiblemente es la ms
importante por S()f la forma Il1<lS comn de clemencia senil y la cuarta de las
principales causas ele I1lUHrte en el hemisferio occidental.
El prurito lumbar y dems enfermedades en las que estn implicados los
priones Sl) codifican comu "unfermeclades lentas". Se caracterizan por un
prolongado perodo de infuccin. durante el cual el paciente o los animalns
no muestran sntomas.

235

Glosario
Acelular. No compuesto por clulas.
Aceptor de electrones. Substancia que acepta electrones elurantn la reaccin
ele xido-reduccin. El H:eptor de electrones es un oxidante.
Acrvulo. Cuerpo fructfero en furma de copa que contiene conidiforos cortos y conidias. caracterstico d() los Melanconiales.
Acetognesis. Procnso en el cual bacterias recluctorns de
tato en lugar de metano (eH).

ca:!

producen ace-

Acetgeno. Microurganismo que rompe la Illolcula ele acetato en CH. y ca:!,


Acido Desoxirribonucleico - ADN. Polmero de nuc!etidos llnidos por un
esqueleto de azcar fosfato de soxirribosa; es el material gentico de la
clula. Molcula universal ele la herencia.
Aciuo Nucleico. ADN o ARN. Polmero formado por nudeticlos que contienen las bases purnicas adcnina. guanina y las bases pirimdicas citosina. timina y macilo.
Acido Ribonucleico - ARN. Polmero ele nucletidos conectados por un esqueleto de fosforribonucletidos que participan en la sntesis de protenas. Polmero lineal de riuonucletidos en el cual los residuos de
ribosa estn unidos por enlaces 3 5'- fosfadister. Las bases nitrogenadas fijas a cada residuo de rihosa pueden ser adenin. guanina. uracilo a
citosina.
Acido teicoico. Adela Polisrido que contiene ya sea glicerol o ribitol unidos
por enlaces fosfato dister. Se encuentra en las paredes de las bacterias
Gram-negativas.
Acidfilos. Organismos

qU8

crecen mejor en condiciones de pH bajo.

Aclorofilo. Carente de clorofila.

237

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo ClI_er_o_ __

Adquisicin. Duracin mnima de la presencia de un insecto sobre una planta enferma para adquirir poder infeccioso.
Aecia. Estado ele las royas. formada por clulas hifales, binucleaclas, que
produce Cadt)IlaS de acciosporas.
Aeciospora. Espora billuclci1da producida por una aecia.
Aerobios. Aquellos organismos que para crocer requieren la presencia de O 2 ,
Pueden ser facultativos, estrictos o microaeroflicos.

Agalla. Sobrecf()cimicnto que se presenta en algn rgano de la planta, como


resultado clu In multiplicacin anormal de clulas debido al ataque de
ciortos patgE-Jl1os.
Agua de gulacin. Lquido ele composicin compleja que exudan las plantas, especialmente a traVl)S de los hidMados.
Alcaltilos. Orgnnismos que c:rucun a pH superior a 7.
Alga. Grupo de microorganismos cloroflicos eucariotes.
Aminocido. Componente el()Jlwntal de las protenas que contienen las funciones ele ic:iclo (COOH) y omina (-NHJ
Anabolismo. Conj\lnto de rUQcciones bioqumicas por las cuales una clula
cOIlstruye) SllS mol(~culils a jJrlrtir de otras ms simples. Generalmente
l'f~qu it~re enurga.
Anaerobios. ACllUllos organismos que se desarrollan en ausencia ele O 2 , Puedun ser anaurobios facultativos o estrictos.
Anaerobio facultativo. Organismo que se desarrolla en presencia o ausencia
ele oxgeno.
Anaerobios estrictos. Organismos incapaces de utilizar el O 2 como aceptor
de electrones. ol cual se torna txico para ellos.
Anamorfo. Formas del estado asexual de los hongos.
Anatoma. Estructura. nmero. localizacin y relaciones de las distintas partes de los organismos vivientes.
Anteridio_ Gameta correspondiunte al rgano sexual masculino.
Antibiticos. Productos metablicos naturales de un organismo, que en pequeas cantidades actan destruyendo o inhibiendo el crecimiento de
otros organismos.
Anticuerpo. Compuestos protenicos (inmunoblogulinal sintetizados por las
clulas plsmicas en respuesta a la presencia de antgenos especficos
y que tienen la capacidad de reaccionar contra ellos.
238

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Antgeno. Cualquier sustancia que estimule una respuesta inmune; por lo


goneral se trata de protenas de alto peso molecular o de un carbohidrato de gran tamaiio ajeno al cuerpo.
Aplanospora. Espora no mvil, sin flagelo.
Apolecio. Ascocnrpo abierto.
Archaea. Procariotas que son capaces de crecer en ambientes limit,mtes para
otros orgnnismos, grnrias a caractersticas especiales. Incluye los metangenos, la mayora ele los halfilos extremos e hipertermfilos.
Arqueobacterias. ArchaeH. Grupo de procariotes infrecuentes que incluye
las bacterias metanognicas, bacterias extremadamente haloflicas y
ciertas bacterias termoacidoflicas.
Artrospora. Espora resultante de la fragmentacin de una hifa.
Asea. Clula en forma ele saco, caracterstica de la clase ascomycetes, que
contiene por lo gencral un nmero definido de ascosporas (generalmente ocho).
Ascocarpo. Cuerpo fructfero que contif:ne aseas.
Ascogonio. Gal1letnngio sexual fnenino ele los ascomyectes.
Ascostroma. Asc:oearpo estrometico, portador de aseas en lculos dentro del
eslromn.
Auttrofos. Organismos COIl la capacidad ele utilizar el COz como fuente ele
carbono, capaces ele producir su propio alimento. Usan compuestos
qumicos inorgnicns () luz como fuente de energa. Constituyen la base
(procluctorns) de las cadenas alimenticias.
Bacilos. Clulas bactrinnas en forma de varilla o bastn, rectas o ligeramente curvadas.
Bacteria. Todo el grupo de microorganismos procariotes.
Basidio. Estructura carncterstica de los basicliomycetes, la cual lleva sobre
su superficie un nl1ll1mo definido ele basidiosporas.
Basidiospora. Espora formada sobre la parte oxterna de un basidio.
Bicatenaria. Estructura viral mIl dos cadenas de cido nucleico cuya secuencia es complemfmtaria.
Bromovirus. Grupo de virus monocatenario con tres partculas en su genoma, icosa6c1rico, originado del trmino Brome Mosaic Virus.
cAON. ADN complementario de una cadena de ARN.
Cpsida. Conjunto ele protenas que forman proteccin alrededor del cido
nucleico elel virus.

239

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Capsmero. Cada ulla ele las unidades proteicas que en conjunto forman la
cpsida de los virus.
Cpsula. Capa difusa do polisacridos exterior a la pared celular de algunas
bacterias.
Catabolismo. Conjullto de reacciones bioqumicas que conducen a la produccin ele 8nnrgia utilizable (ATP) por la clula. mediante la degradacin de compuestos org1nicos e inorgnicos.
Catalasa. Enzima altamente eficionte que cataliza la degradacin del perxido de hidrgm1O, molcllla altamente txica para las clulas. que da
origen a oxgeno molecular yagua.
Caulimovirus. Grupo cll~ virlls. bicatcmario con ADN en su genoma, de forma
icosadrica. que se origina del trmino Call1iflower Mosaie Virus.
Cenoctico. Se rdiere a micelius no septados, los ncleos estn rodeados por
nI citoplasma sin estar separados pur parceles transversales, o PI1 una
matriz comn.
Chancro o cancro. Ll)sill necrtica circular y ligeramentt~ hundida que se
presenta en tallos, ramas o frutos suculentos.
Cianouacterias. Dactcrius verde-azules (anliguilnwnlc algas vercle-azules);
procariotes fotosintl!ticos qU(~ efnctan fotosntesis.
Ciclo de Calvin. Va bioqumica mediante la cual muchos organismos auttrofos fijan CO".
Ciclo de Kreus. Conocido tambin como ciclo del {cino tricarboxilico o del
cido ctrico. Consiste un una serie de reacciones en ciclo en las cuales
el acetato se convierte en NADH y COL'
Cleistotecio. Ascocarpo com p lclamen te cerrado.
Cloroplasto. Organela que contiene la clorofila en los eucariotes; sitio de la
fotosntesis.
Closterovirus. Grupo oe virus, monocatenario, hellcoidal, que se origina de
la palabra Clster, que significa hilo o filamento.
Cocos. Clulas bacterianas esfricas o ligeramente elpticas.
Comovirus. Grupo de virus, monocatenario, con ARN. icosadrico; que se
origina del trmino Cowpea Mosaic Virus.
Componente Middle. Conjunto de partculas de virus de densidad media,
que se ubican en la mitad elel tubo al ser centrifugadas.
Componente Top. Designa al conjunto ele partculas de virus ele dbil densidad, en general desprovistas de cidos nuc:leicos, que se ubican en la
parte superior del tubo al ser ultracentrifugados.

240

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Componente Botlom. Conjunto de partculas de virus de densidad que


sedimentan en el fonclo del tubo al ser centrifugadas.
Conidia. Espora asexual no mvil.
Conidiforo. Hifa simple o l'ilmificacla

(pIe sale de una hifa somtica y lleva


en su pice () laternlmcnl(! una o ms clulns conic1igenas.

Cromosoma. Estructur1 que contiene nI DNA en los eucariotes, 8fmeralrnenle formando complejos con histonas.

Cucumovirus; Grupo de virus, mOllocatcnario. con i\RN. icosEldrico; so origina de los trminos Cucumbm- Mosaic Virus.

Dalton; Unidad ele masa atmica. igud

1,nG x lOle kg.

Decapsidacin. Mecllnismo t\W permite' al cido nuclnico salir de la partcula viral para iniciar el ciclo dH multiplicacin.
Desaminacin. Eliminacin ele un grupu omino ele Ulla molcul,. espccialmellt;

\l1l

aminocido.

Descarboxilacin. Liberacin d) Illol:ulas de dixido de carbono


el!) lc:idos org<.nicos.
Dioco. Hongos

011 los
los clistilltos.

Diplococo. Bacterias

clIl1ks

(m

los rgiIJl(ls sexuales

formil

d!~

apaWC(~1l

partir

separados en ta-

coco qUl! se agrupan por pares.

Donador de electrones. Sustancia que dona electrones en una waccin de


xioo-rcduccin. El donador ele electrones es un reductor.
C]lW permit! la crnigracill ele ekmr:ntos cargados el1
un campo elctrico que atraviesa un nwc!io lquido O gelificaclo.

Electroforesis. Tcnica

Elisa. Enzyme Linked [nmunisorbent i\ssay. Mtodo inmunolgico

oe diag-

nstico de los virus.

Empalizada. Forma do arreglo ele algunas bacterias del tipo bacilo colocndos~! unas al ludo de otras por el ~!je ms largo.
Encapsidacin. Mecanismo que permite al cido nucleico viral rodearse de
protena para formar la partcula de virus o vrin.

Endocilosis. Proceso por el cual entran sustancias al citoplasma mediante


vesculas membranosas.

Endospora. Cuerpos fucrtemtlllte rntractivos que forman ciertas bacterias


capaces ele resistir d calor. la desecacin y agentes desinfectantes. Se
presentan en los gneros {Jocillus. Clostridiu11l. DesulfotomoculuJ1l. SporobalolJocter. Spol'Oloctobacillus. Sporosarcilla. Sulfidobacillus y Synthospom.
241

Marina Sanchez de Prager . Fernando Marmolejo De la Torre Nelson Bravo Otero

----

Endoloxina. Toxina
o intracelular.

110

liberada de la clula, limitada a la superficie celular

Entidades acelulares. Trmino genrico empleado para referirse a los virus,


viroides,virusoides y prioncs.
Epiftico. Organismos o entidades que estn presentes en la superficie de la
planta o cualquiera de sus rganos sin causar prejuicio alguno.
Epifitotia. Explosin estacional generalizada y destructiva de una enfermedad en las plantas.
EscJerocio. Estructura compacta, resistente a condiciones desfavorables que
puuelen permanecer (~n reposo durante largos perodos y germinar al
tener de nuevo condicion(~s frn/orables.
Espacio pcriplsmico. Area (mtre la membrana plasmtica y la pared celular
que contiene ciertas enzimas que participan en el metabolismo.
Especie lipa. Tambin conocida como lipo y se refiere al primer organismo
descrito en forma lo m.1s completa posible dentro ele un gnero.
Espermacio. Estructura masculina no mvil. uninucleada, parecida a una
espora. r]lw se forma dentro de un espurmogonio y es considerada como
gameta masculina.
Espermagonio. Estructura parecida a un picnidio que contiene 8spermacios
e hif<1s receptivas.
Espiroplasma. Microorganismo pleomrfico que carc~ce de pared celular y
que so loudiza on el flocma ele las plantas enfermas. Suele ser de forma
helicoiclallll1 medio de cultivo y pertenece al grupo de los fitoplasmas.
Espora. Estructura dn reposo resistente a condiciones adversas. formadas
por hongos y bacterias.
Esporangio. Estructura en forma de saco, cuyo contenido protoplasmtico
completo se convierte en su totalidad por segmentacin en una o ms
esporas.
Esporangiforo. Hifa que da origen a un esporangio.
Esporangiosporas. Esporas formadas dentro de un esporangio.
Esporodoquio. Estroma en forma ele almohadilla, recubierto de conidiforos; caractorstico en la familia tuberculariaceae.
Estafilococo. Bacterias en forma de coco agrupadas en racimos.
Estreptococo. Bacterias en forma de coco agrupadas en cadenas.
Estroma. Estructura somtica compacta sobre o dentro de la cual se forman
las fructificaciones.
242

MICROBIOLOGiA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Eucariota. Clula con ncleo verdadHro.


Exocitosis. Salida de la clula de un elemento encerrado en una vescula.
Extremfilos. Aquellos organismos que viven en condiciones letales para
cualquier otro ser vi 1,10.
Exudado. Sustancia de composicin y consistencia variables excretada por
un tejido y se deposita sobl e o delltro de ellos.
Fase imperfecta. Fase asexual. conidial de un hongo. Estado anamorTo.
Fase perfecta. Fase sexual c!n un hongo. Estao teliomorfo.
Fiiodia. Sntoma casado por fitoplasmas en plantas. donde las fases repro
ductoras (flores y frutos) se transforman en hojas.
Fimbria. Filamento proteico corto. recto. como pelos que emergen de las
pln~des ele ciertas Jacterias.
Fisin. Divisin asnxual tralls\'prsal de una clula bacteriana para originar dos.
Filopalgeno. Organismo capaz de causar unfermedad

i1

plantas.

Fitoplasma. Nombre que se le da actualmulltn a los organismos con caracteristicas ele micoplasmas, agentes causales dt; enfermedades en plantas.
Flagele. Aplldic:t; largo ~' dclgfldo en formil ele ltigo que le sirve a llS cluIns para su movilidad.
Flagelos. Apndices delgados ell forma de espiral que se originan en un corpsculo de ll mumbrll1a plasmtica de algunas bacterias y que sirven
de rgano de Illotliellld.
Fosfolpido. Lpiclo quC! cOlltiene un grupo de fosfatos sustituido y dos cadenas ele icielos grasos sobre un esC[ueluto de glicerol.
Fosforilacin a nivel de sustrato. Sntesis de onlaces fosfato de alta energa
Ilwclillnto la reaccill dl~ fosfato i!1orginico (Pi) con un sustrato orgnico activado.
Fosforilacin Jlor transporte de electrones (fosforilacin oxidativa). Sntesis
de ATP a travs de una cadena de transporte de electrones.
Fotofosforilacin. Sntesis de enlaces fosfato de alta energa usando energn
de la luz.
Fotlisis. Ruptura del agua mediante la captacin de la energa lumnica en
los doroplastos o pigmentos fotosintticos para generar ATP.
Fotosntesis. Proceso qumico por el cual algunos organismos utilizan la energa lumnica para fijar CO" y producir malerial celular. Puede ser oxignica o anoxignicd.

243

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Fragmentacin. Forma de reproduccin asexual; por segmentacin de talo


en un cierto nmero de fragrnentos. cada llllO de los cuales es capaz de
transformarse en un lluevo individuo: fundamental en los hongos llamados estriles (agonomycetales),
Fungicida. Sustancia utilizada pnra matar hongos.
Gameta. Clula sexual diferenciada que se fusiona con otra en la reproduccin sexual.
Gemacin. Forma de propagacin vegetativa que consiste en la formacin de
yemas.
Geminivirus. Grupo de virus. ll1ol1ocatellario con l\DN elo forma circular,
nombre que se origilla al obserVArse en el microscopio clllctrnico pArtculas bilobulaclas quo dan la impresin de ver dos partculas gemelas.
GEN. Segmento de ADN que codifica lIna protena cleterminada,
Genoma. Totalidad de los gmws pruscntes en

UIJ

organismo.

Genoma dividido. Virus en donde ul {cido nuclcico se encuentra en varias


piezas encapsuladas scparadamentu y cuya unidad infecciosa contiene ms de una partcula.
Gluclisis. Proceso ancwrohio mediant() el cual se degrada la glucosa l cido
pirvico o piruvato. Su le cOlloce tambin como la va de EmbdeIlMuy()rhoff o de la hexosa clifosfato,
Gram - negativas. Bacterias que pierdell el colorante primiuio do la tincin
de Gram, toman el colorantn secundario v aparecen de color rojo o
rosado.
Gram - positivas. Bacterias cuya pared celular fija el colorante primario de la
tincin de Gram y aparecen de color prpura o morado,
Halfilos. Organismos que requieren sal (NaCl) para su crecimiento.
Haustorio. Organo de absorcin que se origina en una hifa de un hongo y que
penetra inter o intracelularmente en los tejidos del hospedero.
Hermafrodita. Especie en la cual un mismo individuo produce rganos sexuales masculinos y femeninos.
Heterogameta. Gametas masculina y femenina morfolgicamente distinguibles.
Heterotlico. Especie en la cual los sexos quedan separados en talos diferentes; siendo necesarios dos talos distintos para la reproduccin sexual.
por lo tanto son autoincompatibles.

244

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Hetertrofos. Organismos que requieren compuestos orgnicos como fuente


de carbono
Hibridacin. Tcnica lltilizaua para hibridar cidos nucleicos y que consiste
en aparear secuencias complementarias.
Hidrfilos. Organismos qUl) crecen en ambientes muy hmedos y adaptan su
crecimiento a potellciales ele agua muy altos.
Hifa. Unichel estructural ele la mayora ele los hongos, formada por tubos
llenos o interiormente tapizados por protoplasma. los cuales pueden
ser contilluos () no.
Hiperplsico. Ti po de sntoma caractt)rizado por el aumento exagerado del
tamliio () el crecimifmto de la planta o alguno ele sus rganos.
Hipertermfilos. Procariotas con tcmpuratura ptima de crecimiento igualo
mavor l flOC. Generalmente se Pllcuuntran en ftwntes hidrotcrmalns
terrestres o lbisaks.
Hipoplsir.o. Ti po de s n toma qu e h lc:e refe!"Cm:ia l la clism inucin o retardo
en el r:n,cimiHl1to de la plantl o t1guno ck sus rganos.
Holoftico. Orgmismo capaz de silltdizaJ' mol{)culas org;nicas complejas l
partir de molliculas illorgnicas Ilwclinlltc la :lccin ele la oncrgn luminosa. Equivale l fotoautotrfico.
Holomorfo. Se refiere a todas las
distingo ele su funcin.

fOflllIS

y estructurlS de

Ull

organislllo. sill

Homoacetgeno. Bacterias que produCl)!l acetato como nico producto de la


fermentacin de azcares, a partir de H! + CO 2
Homottico. Hongos en los que la wproduccin sexual tiene lugar en el mismo talo o talo nico, por lo tanto son autocompatibles.
IgG. Inmunoglobulinas G. Protenas de suero que contienen las funciones
de anticuerpos.
Intracelular. Que se localiza dentro de las cldulas.
Isogameta. Gametns que morfolgicamente son iguales, por lo tanto no se
pueden distinguir.
Isomtrico. Se refiere al tipo de arquitectura de los virus que son icosadricos, por lo tanto, tienen las mismas dimensiones aproximadamente en
toclas las direcciones drd espacio.
Lpido. Molcula insoluble en agua, importante para la estructura de la membrana y pared celular.
Lisis. Rompimiento de una clula produciendo prdida del contenido celular.

245

Marina Snchez de Prager . Fernando Marmolejo De la Torre Nelson Bravo Olero

----

Mancha angular. Lesin necrtica limitada por la nervaduras primarias y/o


secundarias.
Mancha c1ortica. Lesin de tamao variable y color amarillento por destruccin de la clorofila o incapacidad para sustituirla.
Mancha ne(;rtica. Lesin de tamao variablo y color oscuro. caracterizada
por la muerte del tejido afectado.
Marchitamiento vascular. Prdida de turgencia en la planta o parte de su
sistema foliar debioo a la falta de t1ujo normal de agua por obstruccin
o destruccin de sus haCf~s vascularos,
Membrana celular o plasmtica. Estruc:lura biomoleculnr delgada que rodea
al citoplasma. compllesta por fosfolpidos 'j protenas.
Mesfilos. Organismos cuya !mnpcraturn ptima ele crecimiento est entre
los 25C: y 40c'
Metabolismo. Unidad cOllformada por el cn!alJolismo y el nnnbolismo. Todos los procesos qumicos que tirmen lugar dentro de lIna clula.
Micelio. Conjunto de hiras qur! conforman el cuerpo vogetativo (talo) de los
hongo:,.
Micoplasma. Microorganismo procaritico (hacterin) pleomll'fico que carcn~ de pamd celulllf
Micorriza. AsocilCn simhittic<1 nntrc las hifas
oe las plantas

dE)

ciertos hongos y races

Microaer6filas. Jl<lcturias que crm:un en In capa que se encuentra


cuntmetros dl~ la suwrficie (h~ un llledio de CUltIVO.

Micrmetro. Unidad emplr)(lda para medir organismos. Equivale


llon(\sima ciu metro, o 10" m

unn mi-

i:l

pocos

Microsoma. Granos de cromatina que se encuentran en el ncleo.


Monocatenaria. Cadnna clr> {cido Ilucleco constituida por UIl! sola hlice.
Mureina. C:ompon.mle de la paree! celular de las bacterias. compuesta de
cido N-acetilglucosnminLl. N-acetilmurmico y unos cuantos aminocidos.
Nepovirus. Grupos de virus. monocatenarios con ARN. icosadricos. que se
originan elel trmino Nematode Polyedral Virus. transmitidos por nematodos.
NitrificaCn. Proceso medinnte rd cual 81 amonio es oxidado a nitrito y ste
a su vez a nitrato, Lo efectlall principalmente bacterias cuimiolitotrficas de la familia Nitrobacteriaceau.

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Ncleo. Estructura rodeada por una membrana que contiene el material gentico (DNA) organizado en cromosomas.
Nucleocapsida. Elemento central de los virus grandes con envoltura, que
comprende el cido llucleico asociado a subunidades proteicas.
Nucleoidc. Regin de la clula procaritica donde se localiza el DNA.
Nuclolo. Estructura que se observa dentro del ncleo que no est en divisin, teniendo gran cantidad de RNA, es el sitio de la sntesis del RNAribosomal.
Oogonio. Gametangio femenino que contiene uno o ms ncleos.
Ospora. Espora fungosa de pared gruesa que se desarrolla a partir de una
oosfera.
Osmfilos. Los organismos capaces de crecer en ambientes con altas concentraciones dn azlcar.
05tiolo. Apertura ms o nwnos prominente de un ascocarpo o
revestida ele parafisas y terminada en un poro.

llll

picnidio

Oxidacin. Proceso por medio del cual un compuesto cecle electrones actuando como c1onador y, en consecuencia, oxidndose.
Patovar (variedad patognicn). Subespecie o grupo de razas que slo pueden
infectar a plantas do un cierto gnero o especie.
Peptidoglucano. Conocido tambin como murena, corresponde a la capa
rgida de las paredes bacterianas, compuesta de cido N-acetilglucosamina, N-acetilmuflmico y unos cuantos aminocidos.
Peritecio. Ascocarpo cerrarlo de origen sexual con un poro en la parte superior u ostiolo verdadero y pared propia.
Pcritricos. Dcese de los flagelos distribuidos alrededor de la clula bacteriana.
Picnidio. Cuerpo fructfero, de origen asexual, hucco, revestido de conidiforos por dentro.
Pili o pelos. Apndices rgidos no flagelares que se encuentran sobre toclo en
las bacterias gram-negativas recin aisladas.

Plsmido. Porcin do ADN circular, extracromosmico hereditario, que se


autoduplica. presente en algunas bacterias y hongos. No es indispensable para la sobrevivencia del organismo.
Plasmodio. Masa desnuda y multinucleada de protoplasma que se mueve y
se alimenta de forma ameboide; estructura caracterstica de la clase de
hongos que no forman micelio (clase plasmodiophoromycetes).
Plasmlisis. Colapso del protoplasto como resultado de la deshidratacin de
la clula.
247

Marina Sanchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Plectnquima. Palabra para designar todos los tipos de tejidos fngicos.


Pleomrfico. No tiene forma definida. Variacin en la forma, puede ser temporal o permanente.x
Polares. Se refiere a flagelos localizados en uno o los dos extremos ele la
clula bacteriana.
Polipptidos. Conjunto de aminocidos unirlos por enlaces peptdicos.
Potexvirus. Grupo ele virus monocatenario. con ARN. helicoidal, que se origina de los trminos Patato Virus X.
Potyvirus. Gru po de virus monocatenario. con ARN, helicnidal. que se origina de los trminos Potato Vi rus Y.
Precursores o intermediarios. Molculas que se originan principalmente en
los procesos ele gluclisis y ciclo ele Krebs, pueden ser usadas por el
organismo con fines catablicus o de biosntesis.
Preinmunizacin. Cuando una planta est infectada por una raza dbil de
un virus y posteriorment(~ por una raza fuerte del mismo virus. los
sntomas do este ltimo no aparecen.
Prion. Agente causid de enfermedad ~m animales y humanos. que es slo
protena con capacidad ch) infectar clulas y de autogenerarsD en el
hospedero.
Procaritica. CluLl u organismo que carece
mente su ON1\ es una molcula nica.

cl(~

ncleo verdadero, general-

Promicelio. Tubo germinal que surge de una teliospora. en el cual tienn lugar
la meiosis y que produce generalmente cuatro basicliosporas.
Prosnquima. Tipo de plectnquima en el cll,llllS hifas componentes estn
situadas en paralelo unas con otras y se distinguen con facilidad unas
ele otras.
Protoplasma. Contenido celular completo, membrana plasmtica. citoplasma y ncleo.
Protoplasto. Clula a la cual se le ha eliminado su pared celular.
Pseudoparnquima. Tipo de plectnquima formada por clulas ovaladas o
isodiamtricas; las hifas que lo componen han perdido su individualidad.
Psicrfilos. Organismos capaces de crecer en ecosistemas caracterizados por
bajas temperaturas. Tienen temperaturas ptimas de crecimiento menores de 15 oc.
Pudricin suave. Tipo de sntoma caracterizado por el ablandamiento o maceracin de los tejidos de rganos carnosos o suculentos de las plantas.

248

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Quimio3uttrofos. Organismos que obtienon su enflrgn (ATP) mediante la


oxidacin de compuestos inorgnicos. usando el CO~ como fuente de
carbono. Se los conoce como quimitrofos o quimiolittrofos.
Quimiorgantrofos. Organismos que utilizan compuestos orgnicos como
fuente de energa y carbono. Se los denomina tambin quimiohetertrofos.
Quimiosntesis. Proceso mediante el cual algunos microorganismos obtienen su energa a travs de la oxidacin de r.ompuestos inorgnicos y la
utiliznn pnra la fijacin de ca!,
Replicasa. Enzima que efecta la copia de una h6lic() de cido rihonucleico
viral en otra hlice complementaria de i\RN.
Retculo endoplsmico. Extensa disposicin de las membranas internas en
los eucariontes.
Rhabdoviridae. Grupo de virus con RNi\ ll)onocatenario. hflUcoidal, que se
origina elel t(~rmino Rhabclos qlw significa bastn. porque tiene forma
de bastones cortos y gruesos.
Ribosoma. Partcula citoplsmicl compuesta ele RNi\ y protena que es parte
de la lllaquillarin sintetizadora d(~ protcilllS l)!l In clula.
Rizoide. Ramificacin corta y delgada d(d talo. parucida a una raz.
Rizoplano.

Suprficil~

de la raz.

Rizosfera. Capa de! suelo que se encuentra prxima a una raz viva.
Sedimentacin. Emigracin de las partculas en un medio lquido bajo el
efecto rlH la fuerza de la gravedad.
Serologa. Mtodo en que se utiliza la especificidad de una reaccin antgeno-anticuerpo para detectar e identificar las sustancias antgenas y a
los organismos que las portan.
Sinema o coremio. Conjunto de cOllidiforos ullidos y que forman una estructura alnrgada portadora de esporas en el pice.
Sustrato. Compuesto que sufre una reaccin mediante una enzima.
Svedberg. Unidad ele sedimentacin S. Rapidez a la cual los ribosomas
atraviesan un lquido cuando son sometidos a centrifugacin de alta
velocidad.
Talo. Cuerpo relativamente simple. desprovisto de tallo. raz y hojas, corresponde a la forma somtica en los hongos.
Telia. Cuerpo de clulas binucleadas que producen tcliosporas o tcleutosporas.
Teliomorfo. Formas de esti\do sexual de los hongos.

249

Marina Sanchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Ctero

----

Teliospora. Espora de resistencia. de pared gruesa, de las royas y carbones.


en la cllal tiene lugar la cariogamia; es parte del aparato basidial.
Termfilos. Microorganismos con temperatura ptima de crecimiento entre
45C y BOe.

Transaminacin. Reaccin de gnm importancia mediante la cual los aminocidos son metabolizados en un organismo_ Transferencia de uno o ms
grupos amino de un compuesto a otro. Formacin de un aminocido
nuevo mediante la transferencia del grupo amino de otro aminocido_
UDPG (Uridn difosfoglucosa). Forma activada de la glucosa sintetizada a
partir de UTP y Glucosa 1-fosfalo. Intermediario central del anabolismo de la glucosa.
Uredospora, urediniospora. Espora binucleada de la clase uredinales.
Vector. Agente, usualnwnte insecto u otro animal, capaz de transportar patgenos de un hospedero a otro. Elemento gentico capaz de incorporar
DNA y hacer que sea replicado a otras clulas_
Viroide. ARN circular de poC[uu'o tamai'o, capaz de multiplicarse en la clula del hosppduro.
Virulencia. Grado dl! patogullic:ichtl de un patgeno determinado.
XernIos. Organismos qUl! CrCCl!1l en ambinntes muy S()<.os y adaptan su erecimim1to l potlmciales de agua muy llajos.
Zigospora. En los Zygomycetes. espora ele resistencia que se forma por reproduccin sexual, previa fusin dc dos gametangios.
Zigoto.

C(~Iula

diploide resultante clp la unin de dos clulas haploides.

Zoospora. Espora mvil, provista de flagelos. producida asexualmente.

250

Bibliografa
i\grio$, C. N ] DHn. Fi/()jJ(J/%p,n. [n. eel. Ed. Lil1lusa. I'vlxico, D.F. 75CJ p.
1!HHi. Fi!()/lII/%go. Ed. Limusl1. Mxico, D.F. 8:3H p.
1f)88. P/(/n/ PII(h%g.l'. l'hird Ed. Academic Pruss, Ine. S,m
Di(~go, Cdil'llrJ1ia. Hrn p.
Ains\Vorth, G. C. lnd SlIsslll<Jn, A.S. 19(j5, 1'110 Fung . .A11 Adn1l1c/'.'d
Si'. Vol. 1. 'l'hc h1l1gal Cnll. Acadumic. Press. Ne\\' York. 748 p.
--o

'I/"('{/(i-

1 DGH. Tlle hll\gi. An .Ar!mllced 'Ji'r'o/ise. Vol. lll. The FlIngal 1'0-

PII I'llion. AC<Ir!(llllic Prclss. Nc\\' York. 7:3B p.

,\Iberls, D.: Dray, D.: L!l\\'is, J., Ral, M.; Roberls, K. (Ine! \Valson, J.D. 1989.
\/n/t:(;lI/u], Bi%p,.v o/ t /w CeJl. St)cond EeI i ti un. Garlancl Pu lJl isll i ng, Ine.
Np\\' Ymk. pp. 4H'1-4B:l

J.: Mims, c,\V. 19H5. In/J'O({lIcCll (] /u Mica/ago. Edil.


gil ]3;lI'Cl:IOlla. (i:3H p.

i\luxopoulos, C.

OIlHl-

Al'llllUrl, ,\., ClIir'lllcl. E. j. P. '1 !lH5. TJolJumicu ,\!icl'Obiol1o. En Bioter:llo/agu.


Sc:ri!Jill1, R. Co()!'din,Hlor Editorial ]\.'I;lI1uJe. pp. 47-102.
,\1 las, R, t\"1. J mHl, ,\ 1icm/i%giu. FlIllr!W))(?n tus .1' oplicuciones. Tl'ilclu ci do

po]' Id doctor j.T. Z'l\',da.Colllpiln Edil. Coutimmtal, Mllxico. pp. :JO5": Hi5-1H\l.

,\\'urs, CH. j. \\lm. J3i()/(J<~u ce/u/u)'. <l.


l'vlb:ico. 74H p.

(lel.

Grupo Editorial IIJeroillllericntl,

J. 1DH:l. Lillk<tgtl nwp of Escherichio coli K-12. Editioll 7 'h Mi


crouio/. Re\' . .. 7:1 HO-230.

Bachrnan, 8.

Bain,

Grilh11ll1, Valcl(~r

y \V]itrl. lfl71. Rialogro de los microorganisJ))os jn(/uJ)wnfu/es elc u[jricu//um lIloderno, 4. Editorial Aedos. Barcelona.
1U4 p.

251

Manna Sanchez de Prager - Fernando MarmoleJo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Barntltt, H. L.; Hunter, B. B.l D72. Jl1ustmte(f generol oI llllpp.Ilect Fung. 38.
Et!. Edil. Burgess Pul)lisbing Comp<:my. Minneapolis. 241 p.
Barrera, N. 1\J88. Los ('jmir/es y los priOllf.'s. Ascolfi 11\forl11a, Cali, Colombia.
'14(1): ,HJ.
Bhag'lVan. N. V. 1084. Bioqumic(]. Edil. InlfJl'lmericlllli.l, l\.MIXico. 2" ud.
1.141 ]l.
lJo\'().

J. I\L .) ~)84

\l'oll-less Prokurjotes oIplullls.

\Illl R(~v.

Phytopathol. 22:

:H- -:l%.

BraIlclao. E. 1\1. 1m12. s cOmpCJlWlltcs de c;omunicladll microbianl do solo.


Clrdll7.o E.; TSi1i, S. M. y NC\"(IS !'v!. C. P. .\licroiologfo do Solo. Sociedad IJrilsilpira de Ci(IIH:ii1 do Solo. Campinils. 3GO p.
Bravu O .. N. 1 U9H. Truquitus l\licrobiolgicos. Cuwlemo de l\licroio}op,!a
No . .'j. Ullivcrsidad N,lf:iOllill dB Colol1lhitl, Sedc f1(llmira. 41 p.
Drud. T.O.: Slllith, D. \\1. Y f\.:fclig,m, M.T. 1 DI:l-l l'vIi(:rohiologo. 4" (lel. Editorinl PrcIltic:e Hall HispallCJill1leriCillltl S. A. 1\ lxicu. U()n p.
--o .\/ic:mhioJogiu. 1.1)87. 4!. Edici(n P!'llllticc-H(lll Hispalloameric:a11il. S. '\. pp ..) 04-"] -lO.

8u'Luc:k, J. y Kristi'lllsen. 8. Jom. lmn. [3jolr.'l:Iw/op,n )fsico. Traducirlo por


Lil'lls P.. P. Editori,j \cribill, :<ll'llgoza. S57 p.
BurlJilllU O., H. 1qll. El su!'io: llllU \'isin sobre sus (:ompolll'nlcs hiOlgrnic()s. S~~ri(l ele lnv(lsligacjul1l~s No. 1. Uni\,(lrsir!ar! ]ll Nlrii1o. Pasto. Colomhin. -147 p.
--o "] 904. La vicia en f-d suelo. En .\/I'llIorius. SI~Irlinario ,<El

1l11111CjO

sostenido (Jd recurso suelo en la OrinoC]uia colombiana)). Gabrild Romero, Editor. Editorial Juan XXIlI. Villaviccllcio. pp. 53-G5.
Burclol1, K. y Williml1s, R. 1074. MicrobioJog'o. Centru
Tcnica. Tvlxico. pp. 19-55.

I~cgional de

Ayuda

Burro",s, W. "] 974. Tmtado rJ(, l'vlicroiJiologa. 20 ~)cl. Traducida por Rob!:-lrt
Espinoso. Editorial Interameric(lna, McGraw-Hill. 90"1 p.
Caldern,1\.; Roca, W. M. y Jaynes, J. 1991. Ingeniera gentico y CL/fli"o de
tejidos. En Roca, W. y Mroginski, L. (edit. tcnicos). Cultivo de tejidos
lm ll agricultura. FUJ1lhmentos y aplicaciones. CIAT, Cali. Colombia.
pp. 73~~-753.
Cnrclozo, E. J. B. N.; Tsai, S. M. y Neves, M. C. P. 1992. MicrobioJoglo do Solo.
Sociedad Bmsilcira de Ciencia do Solo. Campinas. 360 p.
Carpentur, P. L. 1969. Microbiofog(J. 2a. eel. Editorial Interamuricana S. A.
Mxico. 421 p.

252

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Carrero. , M. 1 CJal. \''osi:; ,\' enfermedudes atines de los ctricos. PubJicacioI1l!S el() Extensin Agraria. M,)clrid. 411 p.
Caslaiicrla. J\.: Ma~'pr, l. E.: Pastor C .. tvl. 1\ .. Y i\1tlrlnc7. E. HHH. Diagnstico
dl!! palgt:l1o del ll-lUlJo d(~ halo Pscuc!omollus sFringoe plf. plwsl'oJjca/u l!1l s!~lllilla de frjol [>01' medio d(~ la rcaccir'm Pon cad()n,l d! la polillwraSil. Afcll/()/,ills. XV Congn~so de !\sc:olfi. S,lIlllf() d(~ l3ugo!,l. ilgOSlo 31 a s!)ptielllbm 2/~H. p. 32.

eNrio

c:. c.: i\ndl'f)ux. F ~. Eduardo P.. R. 1~)\l2. O ciclo do Cuhono no solo.


Pp 7:l-QO. En Ctlrclozo. E.J. D.N.; TSAL S. M. y Neves. M. C. P. Alicrol)iolag/u 110 S'olo. Sociedad BJ\isilcira de CiCllCi,) do Solo. Campil1ils.
:lCiO p.

ChapillTo. \ .. Cm). 1\1.: Pel-ar'IJHI<J.I. y !\COS!il, O. ! \lD4. llantas Irullsg<'nliCIS


c1!~ jt1)(lCO J'(:sislml(()S a fosfillll!ricil1a. ,\lelJlo!'iu ...,. XV Congwso de /\scolfi. Sall!i!l/: lit-' Bogoli. ilgOS!O :11 <l septicmlm! 2/\)4. p. (>:'j.
C:llildruss,

J J.:

rl;ldl!~

('ldIH)ck, JI. \. SOlllnro, G. N ! r)87. Silllhiosis en las prufllllcli11ll'('Sti,~(}('11I ,\' (;ie!1ci(}. [J. 7!1.

marinas. En

Clilrk. 1\1. F J ~JH 1. IJlJllllJlOSOr!J(!llt \ssay in PI,1111 Pillholog\'. I\on. Re\'. Ph.\'!oI J(J! huI. 1~Ul:l-l O:'j.

C()}lSl!jO SlIJlmi!lr c!!! 111\'csligilr:iuJWS Ciplltlic:as (CSIC)- Ct!lllro dI) JIlV~!Stigil


ciOl)(!S Biolc'Jgic'ls. 20()(). /?i()(!('g,rw!w:hll de Ju li,~J)iJ1o. \Vw\\.cih.csic.(~s
C;mlldt. 1\1 K.: Sislm. H. D. I (Hi-l I'/un! i'iJ'<J/ogl' Unil. ofFloriclu. Pn!ss. CliIw~\ill(). ~:n p.

CmIlU!)l. (l. '.1 m)~. Ell!llll'lltoS de \'imlogiu


drid. W p.

\'ec~eI(J/.

[;c1. MlIIlcli-Prensa. Ma-

COrrall)s. l\1. P.. \. Jilr,l, C. l: ..) !J<H. La U\'o)llI:in dc P/u('ois(Jriopsis grjsl.'olo


COl! d frjol comn. Memorios. XV Congreso d(! i\scolfi, Santaf (h~
flogoll. ilgUSto :31 a scptil!Il1IJre 2/04. p. 31.

C!'f)I1]yn, R. 1 nB2. P/U8uicidus modcmos y su accin bioqumico. Ed. Limusa I'vl{:xico. :350 p.
Crollquist. A. 1\)77. Introduccin (/ lo Botcnico. 2 Ed. Edil. Conlincntnl.
M(!xico. B4B p.
Curtis. H. [3i%g(l. 10R5. Tr,ldllccic'm de Editorial Mdica Panamericana.
Buenos I\ircs. 1255 p.
D,lvis, R. E. Y J. F. \Vorley. 1D7:l. Spiroplasllll: Motile, helical microorgilnism
associatt!s with corn slul1t diseas(~. PiI.11opothology 6J: 403-408.

Du Bauur. M.

1~JB7. Fitopol%gu.

Editorial Limustl. S.A. Mxico. D.F. 384 p.

Dl-) Dipgo, F. 1D7D. Se/(Js (hongos) Guo ilustl'Cldo. Edil. MuncJi-Prcnsa. Ma-

drid. 315 p.

253

Marina Sanchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelsol1 Bravo Otero

De Kruif. P 1 DI:lG. Cozw/o/'('s l/e microbios. Traduccin lIl) la edicin original


,\/ic/'OLif' HUll!l'I'S. 13il)lio!t)ca Salval, 350 p.
De la Vuga. E. P. HIU:i. Los lillfocitos contralt'll.:un. El Pas. Gaceta dominical.
\bril 23 de 19D5. Cali. pp. 17-19.
D() Rolwrtis. E. D. P. Y Oc Robcrtis, E.M.V Biulogo ce/lIJol' _\' moleclIlol'. 10J .
Edicin. Edil. El !\tUIlCO. [humos Aires. pp. 301-30G.

J. \V. DtlO. Infrndur:tioll fo Mudcm AI.\'co 10/S-'" Edil. John \Vil~)~7 &
SIlIlS N(~\\' YllI'k.l D7 p.

Dni.lCOll,

DlZ. R. \' Espinosa, M. 1 D87. Organismos procariotns como hUl)Spedus de


DN/\ rccumhinlIltc. EIl ViccnlH, M. y Rl~nnrt, J. (coordinadorus). l11gl:'ni('lill ge17diclI. COIlseju Supl)rior eJe lnv,)stigaciones Cientficas. Mac!ric!. Espaia. pp. ':U-{O.
f)jcr-iIJllllrio Enciclor)(!dil:o ,'-;(ll\'ut Universul. 19H l. 5a.
B'lI'cnlOl,. Espil11a. 20 ((linos.

ed. Salvat EclitoH)s.

Dimwr. T. ().

Will~~'

UJliJ. \'i/'Od (Inri Fil'oirl dist)usus.

Ed. Jol1n

Inler SCinllU!

PlIbliultioIl. Nmv York. :52 p.


1 \lH l. \ 'i/'Oir/s. !m'('sti,'-'.(/{'ir5n l ' Ciencia 54: 1 R-2rJ.

1l)B4 . .ljul)\'iml Jut/lOp,en.<';: \/imirl . . {/nc! Prio 11 S. Planl Dis. Rplr.


(8:-L

1 \)(14. \'iroids. En (/(/\'(I))(,'()S in virlls /'cscol'ch. AUlClumic Prpss.


Ne\\' York. pp. 2.J1-2B5.

Dur<n C .. V. 1 \)!lG. El EIJo!;l.

Ull i1S(~SillO

implacable. El

'li'r'llljJo.

Illayo 21 de

l D\l5. pp. 10/\ ~' '11 1\.

El Pus.

~O{)().

Jugando (\

Sl:r

Dios. Cali. domingo 2 de julio de 2000. pg.JD.

El '/J'c'1l1JiO. 200(). fksc:il'riln<!o el glmollll hl1Illa!1o. Sanla!'l: dp. Bogot<. domingo 2 dI: julio/OO. pp. ~-L.
--o Ltl prcxima n~\'olucilJll en la comput'lC:in. sislemas qlln no ()st,n
hasiHlos lm scmico!1cluc:lorus. Bogot. No\'. H/D'-1, p. '] 4c:.
El)('(:]ope(!o de 1(1.,' Uenl.'os \Jofl/mles. 1 D84. Biologa. Ecliciollus Natura,
BilJ'(:()lullil. P [J. H-2li; llJ-Oq.
FHrni n] c'z c:.. c:. \' Novo. S. R. lDtlH. Lu virlo

JJl icmlJi{/ na Uil

el su do. Ecli lori al

Pll(:blo y Edllcacin. La Hauana. 525 p.


filer. T. H. J 07]. SllJn.'ssioll o/ r:llll jJhloClll ncc!'Uss symjJfoms ll'ilh letmcir:lin(' onli/)iolir:s. Plan!. Gs. Reptr. 57: 3'-1] - J43.
Freuman, 13. A. '[ ~l85. l\lierolJjoJog(J ele Bl/l'l'Oll'S. 22 ec!. Inluri1ll1ericana ,,'Ic
Grav\'-HlJ. 1.181 pp.
254

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

French, E.

R. \' H(~I)('rt. 1'. T

1Qi:l2. i\-j,todos de investigucin fitopo!olgicu.


1 n. (!d IIC\, San jos(!, Costa Rica. 2fEl p.

Jo'ulton, R. N. lCJf)O, [3ioIo,u,icul Sip,llific{JJlce o/ multicompollcnf


R(!v, Ph~,t()p,lth, 18: 1:l1-14G.

l'ifllS;S.

Ann.

Garr:il. JI'" O. 1 \E12. Enxol"rc e sus traw;!orI!wcons microhianas. En i\1icroviologin do Solo, Carr! m,(), E" TSHi, S ~! Nm'es M,C,r. Soc:iccJ(1cl Brasileira
c](! Cinneia (lo Solo. Cill11pinas. 1Q\). I)P, 319-327,
Garridlim. P. J. ~' RI~gl, !\. Ji 1n77. TrUllsporte n fr(/\'(;s (fe In /JI{!Ill/J!'(JJ)(J cc!ulur OE\. Programa rr)gional ele dcstlITollo cientfico y t!cnoJgico.
lO p
CihlJs. A, illltll-1ilrrisoll.
i\1'I11l1d. LIlJ1d ['()s.

n.

1n7Ej, P/ullf "im/ogv. 'J'lw principlcs. EL!, Eclwards

Gillgolcl. E. 13. "j ~lHH, Ulla introduccin l Jil ingeniera g()ntica. En Walker. J
M. ~. Ging()Jd. r:. B. (1)llitoJ'()s) [JioIu,r,;/o lllolecu!ur y biofpcllolog([. Editorial \r:riiJi,1 S. 1\., ilr"goza. pp. 22-:1\1.

Ccnwz Z" . \'

S;llc:lW7. D() p" M. 2UUO EJ pwryso (te r/L'SCOJllposici61l r/e


['('sir/uos lJlli\'t~rsid<lcl )\J;lcional. Ilcli111ira. 14 p,

CC)]17,;l()z. L. c:. 1 \1(-l5. !nt['()(!w;('i6n ([ J([ PiloputoJog[u. Edit 1.I.c.J\. San Jos.
Costa Ricd.14B p
Grana(la. C. \. \ \l7SJ. A1uc}ismo discos!' ()!SO_I'CO/L'.., 1. ,SylJlptOlJwtoJOf}Y und
tl'ulls/JIission. Plallt Dis. Repr. 63: 47-50.
Crillin. H. C. ,lnd Criffin, 1\. M. 1 m14. P. C:, R. 'fi'cn%gy Cllr/'l.'llt illllo\'{/tiolIS. BUr:;1 1~'ltUI1. FJurilla CRe. F'rcss. :l70 p.
Gros. E, C.: POllliJiu, A.R.: Scld()s, A. vI ~I llurtol1. G. \9B5. Introduccin u1
('sludio di' Jos pro(!uctos o(um!!!.',.. OEA. \,vashington. 145 p.

Hilrris. K. F. ,me! MlralllOT(lsch. K. 10B(). "('ctnrs of p10nt put}ogells. i\cad.


Pn'ss. Nc\\' York. 4G7 p.

Hartullg. J S. lSlD2, PlasmicllJllSed hiiJricliziltion proiJ(~s


th()Jll()Jl(Js C([Ill/)('stris p.\'. c:itri. PIClllt Diseasc 7():
Holt.

J. c.; Krieg,

rOl'

clctcctiOIl OfXUll-

HH9-8~1::l,

r. H. A: Stanlc\', J. T. ami Williltns, S. 1'.


uf Determillufil'e Bocterjology. Ninth Eclition.

N. R.: SIlI)l1th.

19Q4. [3C(l!,I'\"S ,\1(JJlU([J

Williams ,IIHI Wilkins. 7B7 p.


Hull. R

1~)71

Mycoplastllil -like organisl1ls in plants. P!unt PothoJ. 50: 121-

\ 3D.

Ir1l1cki I~ .. 1. 13, 1 ~)85. T}e Plo1l1 \firllSes. Polyheclric Virions with TripartitL)

Gnnomes. Cel. Plenut11

Pfl~SS.

Nuw York. 309 p.

255

Manna Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Jncobs. W. P. 1996. COL/Jerpa. Investigocin y Ciena. No. 233. pp. 75-79.


/nra.

c. E.; Costcllanos. G .. y Corrales. M.

P. 1994. Diversidad en la virul(mcia


du poblaciunus latinoamericanas dl' P/wcois(/]'iopsis p,riseolu. A1el1lorios. XV Congreso de Ascolri. Snntafl~ lIn DOgot. agosto 31-snptiembre
2/94. p. 2D.

KillllJoll.l. W. 19HZ. Biologa celulol'. Traduccin de Gunzc1lez. E. y Garcicluu!ws. M. FUlldo Educativo Inlerallwric:ano. tvJI]xico . .J l-l p.
LI)c. S. 13.: While. /. 81)(1 T8ylor. J. VV. 199:1. Detnct.iol1 uf Ph.l'fophtJo]'{/ Specips by Oligol1ucll)oticlc Hybridizntiol1 to i\lIlpliFity RibosumnJ f\DN
Sp'ICI)!'S. Phv/ojJoflwlop,v 13J: I77-un.

LcllJlingur. i\. L. '1979. Bioijulllir:U. Lus l){Jscs lllolnculu]'('s (1(' 1(1 esfruc/um."
jilIwin ce/ulu]'. :2". I!dic. Traducirlo por los pro['usows Clv()!. F. y Bozal. Edit:. Onwgn, Barcelona. l.07l p.
Llano E .. ,\. 2000. La hiotica frentn ni gt)!10Jnl Illllllilllll. Un altu en ul clmino. El ,[,i(,/IIpo. Domingo D du julio. pp.l-LH.

Llanos M .. C. 19H1. /\SPf!ctos fisiolgicos C]U los microorganismos. Lec/uru.,


(:oIllplell/{:nfurhls de Micf'obiolog(1. lJni"msidlcl N(lcional ele eolom1li(l. Fi:llluld do Ciuncias Agropm:ulI'ias. Pdmiril. pp. 25-2B.
1 ~mz. Aspectos gCI1CI't!cs sobw t-1C1l'fol()gn dl-! [os Hongos. En Experimontos sulJ/'(' \1ir:rnorgu n iSIllOS. Univmsiclad Nlcjollal c!l) Colul11-

--o

biil. l\/lllira. pp. (i(i-75.


Lr'lpCZ F .. Y. s.r. IlltmcJu(.'(.'i()ll

(1 la Biologo molc(;l/I([f'. I\ntc 1. Universie!lcl


Nacional. Pillmira. pp. 1-14; lG-2D.

MadiglI1. M. T Y Marrs, 13. L. E.,trcJ)uj'iI() ..... H)Q7. Investigacin y Cilllcia.


junio-D7. pp GO - liG.
rVlaral1lorosch. K. and Koprowski. H. 19G8. l'vfethods in Fiml()gl'. Vol. IV. Acac1nlllic Prcss. Ne\V York. 7G4 p.
--o

1 ~)G l. Miles/olles

Clifls, N.

J.

in

I\'icrobiology. Prcntice-Hall. loe. Englcwooe!

27:l p.

Martnnz. V. R. 198G. Ocio Biol,gico del Nitrgello en el Suelo. EeI. Ciel1tfico-Tr'!cnicn. La Ha!Jnl1n. pp. 12-2\J; 128-131.
Maltews. H.. E. F. lH!)J. Plont Virology Acae!. Pwss. NI'vV York. 897 p.

MaYJ, M. M.; Otoya, M. M., Y Corrales. M. P. 1 99.J. Marcadores moleculares


R\ PD'S con firman la el i ve rsic!nd y evo lucin ele Plweoisn]'opsjs grispolo en Amrica Latino. !\At1llloJ'os. XV Congreso (h~ Ascolfi. Santaf
ele Bogot. (lgosto 3'J o septiembre 2/94. p. 30.
Ma~:ea

S., S.; Novo. S. R. y Valii10 A. A. Hl82. Introcluccin (J lo !'vlicl'obiologo del Suelo. Editorial Pueblo y Educacin. La Habmw. p. Hl7.
256

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Ml:lglwjo, G.

J.

1994. Moclo de Accin ele los Fungiciclas. En Fungicidos J'

AJedjo AlJIhienfl'. Comunicaciones y Asociados, Ltda. 110

p.

f\!tmc!oz<l \1.. . '1 qH~). Elll1insclllo pril1, gente de infccciol1()s. El Espect(J(or, Slnt;f() de l3ogott, junio 2-1/H5. pp.li\ Y 11 A.
NlSO!l. ,\. HJlil:L Di%p,u. Editurial LilllllS,l-WiJcy, S.A. M()xic:u. 72(j p.
Ncidhmt. F. C.. Curtis ]]1, R.; lngrahll11, J. L.; Lin. E. C. c.: Lo\\', K. 13 .. M,lgasill1ik, 13.: Rm:niko[l \IV.; Rilf)Y, M.; SChil()cbter, M. y Ull1hargcr. H.
E. (cds). 1DDfi Esclll'richio coli (ln(/ SU/lIIoJ)('/Jo CCllll}Ul' (Jml lllOh'c'll-

1(/1' hio]op,l'. 2"

()cl. A!11cricill1 Socict\


O.e. dos \'ol)l1ul1cs,

1'01'

Mir'robiolog\'. Wilshingtoll.

N()\,ps, [VI C. P. H)92. COl1l0 os mir:ruorgilllislllUS elo Solo obtclll ()lwrgil C


llutricllt()S. En: \!icm/j%g/o do Solo. Carclozo. E .. TsaL S ..\' Nu\'os
)'dc.p, Socicdilcl Brlsiluril d() Cienciil do Solo. C,\]npillils. I\Hl2.
pp,17-:J1.

\\l. J, Moller '1 \)7:1 C;onfm] of peur (/f'dinl' JI'j// (/ tetmcI'('lillc


J!}ont. Dis. r<ept!'. 57: n:~4-{):l7.

Nyli1l1tl, C.

~.

Old. R W, \' PrilTlrosn, S. /3. ] ~lKJ. PriJ)cipi(),'-; (le J)/{/J)ifJlll{J('i6n gr'll(~ti('(1. !nIJ'0IIur:ci6n u lu !J)gl'J)i('/,irl CCJlNjcu. Traducido por la doctoril PillollliJ
Lirns y el Pmf()sor j,F. [\lilrtin, Edito!'i,!l Acrihiil, S./\ Zar,lgozil (EspaCw). :J75 p,

Orjuda N .. . 1D1)5. IlIdie() el!) ()llferl1wc!i1cll)S de p]mlas cultivldlS en Colomhin. [J()l('!ill 'f'(;cnico No. 11. Instituto Colomhiallo i\gropecuilrio. lCA.
Bogot, ()() p.
Ospilla G .. 11. L. ] n93. !llfrolluo;i)n o }(J Uiol!uImir:u Universidad Nncional.
Facultad ele Cicnc:ns Agrop()cunriils. pp. 87-137,

Palleroni, N. 1 CJHn, Principios f:!.ellero!t's de Microhi%gIo. O.E.A.. , Washington, D.c:. pp. ]-G.
--o !D70. Principios gencrolC's de Microf)i()/og/n. Scc!'ctaril
de la OEA. Wnshingtun. V edicin. 14:l p.

Parclo \1., lvl. 1 ~)95, Hongos fitopnf6wmos (Ir.' C%lllhio.


nal tic Colombin, Sude M()d(dln. 1GG p.

GCI1l)l'LII

Univt~rsidnd Nacio-

Parcia, j M.: jimnnz, A. y Ortiz, J. Organismos (~llC<1fi()tltcs como huspeclus


de DNA-rcc:omlJinantc. En Vicente, M. y I~cnart. J. (coordinadores). Inljl'nier(o Gentic(). Consnjo Superior ele lllvestigaciones Cientficas.
!'vfnclrid, Espaii1, pp. 53-8G.

Patiilo C:" H.; Snclwz du P. fv1. y Bravo O., N, '1995. Elfnllcntos de Ec%go
Micl'ObinJlIl. Dcsurl'OlIo histrico de ]0 Microbi%gCl. Primera Parte.
Universidad Nacional. S()]e Palmira, pp. 2-22.

257

Marina Sanchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson BraVL' Otero

Pau!. E. 1\. ancl Clmk, F. E. 198~1. ,')oil MicJ'O/)iu/o,u,,1' (lnd [Jiochel1listlY /\cacl(!1l1ic:. Press. Jne. San Ojngo, pp. 131-14:~, 2:3:3-24D.
P(~lc7.(lr. Ivl \' Rcir!, R. D. '] 9()f). AfTo/'io]o,'.!,io. 2. ec!.

Editorial McGra",-Hill.

Nc\\' York. G(i" p.

J.: Reir!, R. y Chan, E. C. 1 ~1Sn. Alicrohi%gu. 2". (!d. Traduciclo


por 1\. Capulla y Jorge Zavala. McCra\\'-Hill. Mxic:o, 826 p.

P(dc:zar. M.

Quiroz. C. Jo'. 19D]. ]sm-)l1zimns como marcadores genticos para identificar


hbriclos un d cultivo de t('jidos. En Roca, \Y. y Mroginski, L. (edito!'(!s
t'!cllic(ls). Cu/ti,'o de T{'jir/os ('lIlu A,'.!,riculturo. FundClJlWlltos y AplicuciO/H'.'.. C[,\T, C11i. pp. H57-87G.

s,r

Introcluccin a la Diologa Mol(!culm. s.r. Pnrte lI. Th:nicos


){Jm la e\!uluuc:in cid gl'/wJ)l(J I't.','.!,ctol. Universidad Nar:irll\] de! Cololllbin, P;jmirn. 32 p.

RilllllTZ, 1f.

llW/'Cll/Uf'('S

Rillllrr!z,

J.

\,

1 DDB. EX!r;1cc:ill r,piel(l ele ,\ON, detucci('Jl1

pUl'

PCR y DOT

Ill()t <i(! P/v/np}tho['(J sPP lm matcrial \'l~gctal de yucl, Monihof f'selll(,/l/u (;mJ7t7.. Pm/;/ullU] ESJw(:i()l. Universidad Naciollal de C:olom]li(l,
P,]lllif'il. l[j p.
Rdllln'z, J. M. '1 DDJ. F()tosntesis. Absorcit'll1 ~' utili7,aci(m ele 1,1 luz fm In
lllclllllr,mi-l f{)tosinttic. En Fisiolug(].l' f]ioquJlIico Vegr.'tul, cClordin,l-

do por
R'I\\'II.

J. O.

J.

i\ZC(ln-Dido \' M Talon. McGI'il\\'-Hill, r\l;lelrid, pp. 91-'l'l1.

HHl!l. Diolllllmic(I Inlr)!'n!l1criC<ll1d. l'vIcCrilw-Hill. Marlricl. Vol 1.

532 [J.

Rcstrq)(J, S.: O!oya, M. M. Y Corflllr!s. M. P. 1094. \mplificacin al azar del


/\DN p()lill1(rfico par,l (!valu,lr la clivmsidarl g(!nC~tica de Colle/ofrjchuj))
li17dc/}/uf!1iuJ1l1ll1 (!11 Colombin. ,\j(.'])/orios, XV Congwso Asc:olfi, SallIdf'c') eI() 13ogot, agosto :11 H Sf!]). 2/94. p. 27.
Ristaino. J 13.: Madritc:h, 1\1.; Trout, C. L.: Pauu, C. 1998. PCR Amplificaticl!l
(Ji' f:Ziilosolllal ADN for Sp(~ci(~s ldl!!ltificatioIl in thu Pl<tnt Pathoge!l Gunus I'hl'tojJhlhom. Applicd olld EIl l'iJ'O/lIcn tul AJicrolJi%gl'. 64(3): D4H.

S,llazilr, L. F. '[ ~)91. DdeLcin ele viroidus v virus con tcnicas de /\ON recOl1lhinlnt(~, En ROCd, W. y Mroginski, L. (celitoms tcnicos). Cultivo de
'JI'jic/os ('n

1(/

A,~rir:lIltll},(]. FlllldonWl1tos

y Ap]jc(Jciolles. CIAT, CDli.

pp. B77-HB5.
Sncb(!z ele! 1). M.; BravlJ O" N. Y Mnrmolejo Du la T" ],'. 1995. Lo Micl'Ohiologo en nuestro siglo. Des(]l'l'OlJo }istric'o dc lo lvlicmbjologo. 2c!. pArte.
Uni\,prsiclacl Naciol1ill. Seele Plllmita. pp. 15-C>2.
Snchcz rll! P., M. Y Pincela, M. E. 1998. Fisiologa Microbiana. ,'\cerca ele
c(mo los organismos obtienen su el1L~rgl. Cuadurnos de J'vlic]'obiologo
No. 3. Universidad Nacional cle Colombia, Sede Palrnira. 70 p.

258

MICROBIOLOGA: ASPECTOS FUNDAMENTALES

Snchpz, P. 1\. 1 ~)()B. Fitopatojoga y Control de Enfermedades. U. Nal. de


Colombia. Facultad de Agronoma, Palmira. Mimeografiado. 146 p.
Santana, c,; SegurR, D. y Snchez, S. 1 mJ4. Sntesis. funcin y origen evolutivo r!f; jus llIeta/)o/itos secundarios producidoS' por microorganismos.
Rev. tat. Ame!'. Microbio!. 3G:T:3Q-158.
Schlegtll. H. C. 1l17l). Microbiologa General. 2'). Edicin. Ed. Omega, S.A.,
Barcelona. pp. 176-276.
Schustcr, M. l.. and Coyne. D. P. 1974. Survival Mechanisms of Phytopathogenie: Bacteria. Ann. /levo Phytopathology. 12: 199 - 221.
Sharon, N. y Lis, H. 1993. CarbohidraLos en el reconocimiento celular. Investigacin y Cmr:ia. Marzo 19!B. pp 20-27.
Siqlleira, J. O. y Franco, A. 1\. 1988. Biotecnologo do Solo. MinisLerio de
Educacin. Escuela Superior de Agricultura de Lavras y otros. Brasilia. 2:i5 p.
Siqueira. J. O.; Mor()ira, F. M. de S.; Cris, B. M.; Hungri, M. y Arajo, R. C.
1 QD4. j\lfh:roorganislJ)os e processos biolgicos do Solo. Perspectiva ambirmta!. Elnbrapa, Brasilia. 142 p.
Stani~)r.

R.; DOllcloroff. M. y Aclelberg, E. 1977. Microbiologa. Aguilar. S.A ..


Madrid, 2a. erl. Q32 p.

Str~7er,

L. Bioqumica.
975 p.

19~)5.

4,1. ed. Edit. Revert S. A. Barcelona. Tomo 1.

Suzuki. D., Criffilhs, A" Miller. J. and Lewontin, R. 1992. Introduccin al


onlisis gOI)(~lico. 4a. eLl. Interamericana. McGraw-HilL Nueva York.
800 p.
Y.. C.: Leal. A. J. Y Bohrquez B., 1Q88. Biologa Aplicada. McGraw
Hit!. Bogot. pp. 30-4~).

T611(~z

Tizant. I. 1989. lnmllnologo veterinaria. 3a. ed. Traduccin doctor Carlos E.


Casacubierta. Interamericana. McGravv-Hil!. Mxico. pp. 118.
UlIoa. M.: Hunlin. R. T. H'l78. Atlas de Micologa Bsico. Edil. Concepto, S.A.
Mjico. 158 p.
Umaila, A. '! GIl1ez C .. A. 2000. Alfabeto para la vida. Horizontes del descubrimiento gnntico. Lecturas dominicales. El Tiempo, 30 de julio del
2000. p. 2a.
Victoria, R. L.; Piccolo, M. C, Y Vnrgas, A. A. 1992. O ciclo do nitrogeno. En
Microbiologa do Solo. Cll'dozo, K, Tsai, S. y Neves. M.C.P. Sociedad
Brasileira de Ciencia clo solo. Campinas. 1992, pp. 105-119.
259

Marina Snchez de Prager - Fernando Marmolejo De la Torre - Nelson Bravo Otero

Villp.p., C; Martin, r:h.; Miutin, D.; Berg, L.; y DilVis, 11.1992. Biologia. McCravvHill. Mjico. 500 p.
Walker,

J.

Ch. 1975. Pa/ologio Vago/al. Ec!. Omega. Barcelona. 818 p.

Williamson, D. L. )' R. F. Wl1itcomb 1975. Plant mycoplasmas: Jl. c:ullivoble


spiroploSlllu cCJuses c()['n stLInt dise(]se - Science. 188: 1018-1020.
Young.

J. M .. Takikawa.

Y.. Cardan, L. and Stead, D. E. 1992. Changing Con-

ccpts in the tQxonomy of Plant Pathoget1ic Bacteria. Ann. Rev. Phytopotho]. 30:117-1 05.

260

260

Las tribus amaznicas usaban la corteza del


..'quino (Cinchona sp) parael tr.atamiento de 1
malaria opludismo, logro que sirvi de bas
la moderna quimioterapia de esta enfermed,
. microbiana.

ISBN 958-8095-06-9