ANLISIS

MICROBIOLGICO DEL
AGUA
LEONARDO PONCE ESPINOSA
INGENIERA QUMICA
FES ZARAGOZA

FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO

DE BACTERIAS
La acidez disminuye el contenido de microorganismos.
La materia orgnica lo aumenta.
Mucho oxgeno disuelto disminuye los microorganismos anaerobios.

Las sales, si son abundantes, producen que el agua sea casi estril.

Si existe poca cantidad de sales se estimula el desarrollo bacteriano.

La filtracin disminuye el nmero de microorganismos.

La temperatura puede aumentar o disminuir el contenido bacteriano.

La turbidez hace que el contenido bacteriano pueda aumentar, ya que los rayos U.V. no
manifiestan su accin.
Los protozoos fagocitan bacterias y as disminuyen el nmero de estas.

 COLIFORMES TOTALES: Los coliformes reagrupan

ciertas especies bacterianas pertenecientes a la
familia Enterobacteriaceae , de morfologa bacilar,
Gram negativas, aerobias o anaerobias facultativas,
oxidasa negativa, no esporuladas y que fermentan la
lactosa con produccin de cido a 37Cen 24-48
horas.
Del grupo coliformes forman parte varios gneros:
Escherichia , Enterobacter , Klebsiella , Citrobacter .
COLIFORMES FECALES (TERMOTOLERANTES):
Organismos coliformes con propiedades
fermentativas a 317 0.5k (44 0.5C).

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

REALIZAR ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA
DELIMITACION DEL PROBLEMA
REALIZAR ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA PARA LO
SIGUIENTE:
COLIFORMES TOTALES
COLIFORMES FECALES (TERMOTOLERANTES)
ESCHERICHIA COLI PRESUNTIVA
HIPOTESIS
SI LA MUESTRA PROBLEMA ES AGUA POTABLE ENTONCES AL
SER ANALIZADA DEBE ESTAR DENTRO DE LOS ESTANDARES
MICROBIOLOGICOS PARA AGUA POTABLE.

DISEO EXPERIMENTAL
MATERIAL
INCUBADORA
ESTUFA
AUTOCLAVE
POTENCIOMETRO
TUBOS DE ENSAYE
TUBOS DE FERMENTACIN
ASAS BACTERIOLOGICAS

REACTIVOS
Caldo lauril triptosa (CLT)
Caldo Mc Conkey
Caldo lactosa
caldo bilis lactosa verde brillante
Medio EC
Medio para la produccin de indol
Reactivo de oxidasa para la prueba de
oxidasa

PROCEDIMIENTO
COLIFORMES TOTALES
Inocular caldo de peptona con diluciones decimales de la muestra de
agua, expresados en 10-1, 10-2, 10-3. Inocular 3 tubos de lactosa
bilisverde brillante (a los que se les aade un tubo de Durham invertido)
con 1 ml de cada dilucin. Incubar a 37C(+/-1C) durante 24 48h.
Si se observa crecimiento bacteriano con produccin de gas las 24h o
antes, la presencia de bacterias coliformes fecales se
considerarconfirmada, prosiguiendo con el mtodo del filtro de
membrana para conteo.

 COLIFORMES FECALES (TERMOTOLERANTES)

El mtodo consiste en la determinacin del n de coliformes
mediante filtracin de volmenes determinados del agua a
analizar por filtros de membrana e incubacin sobre medio
de lactosa enriquecido(agar de lactosa TTC con heptadecil
sulfato de sodio) y una temperatura de 44,5C(+/-0,2C).
Colocar un filtro de membrana estril sobre el soporte de
filtracin. Adaptar el embudo y conectar el matraz a una
bomba elctrica de vaco. Filtrar 100 ml de muestra si se
trata de agua potable, y 0,1 y 1 ml si se trata de aguas no
potables, previamente homogeneizadas. Lavar con unos 30
ml de agua destilada. Retirar el embudo. Mediante las pinzas
esterilizadas, transferir la membrana filtrante sobre el medio
de cultivo contenido en una placa de Petri, de modo que la
superficie de filtracin quede hacia arriba. Cerrar e invertir la
placa e incubar a 44C(+/-1C) durante 24h ( +/-2h ).

 La lectura de los resultados requiere el examen de las colonias

aparecidas sobre la membrana y el examen de los halos en la
capa de agar subyacente a la membrana. La fermentacin de
la lactosa provoca la formacin de un halo amarillo. Por ello se
considera coliformes aquellas colonias que presentan halo
amarillo, halo amarillo con centro naranja( Escherichia y
Citrobacter) , o halo amarillo con centro rojo ladrillo( Klebsiella
y Enterobacter) . La densidad se estima como el total de
coliformes totales por 100ml, utilizando aquellos filtros de
membrana que tengan 20-80 colonias de coliformes y no ms
de 200.

 ESCHERICHIA COLI PRESUNTIVA

Incubar un tubo de agua de triptona para detectar la
formacin de indol a 44C durante 24 horas. Despus aadir
de 0.2 a0.3 cm3 de reactivo de Kovacs el tubo de agua de
triptona; El desarrollo de un anillo de color rojo despus de
agitar suavemente de note la presencia de indol.

Actividad/Da
Presentacin
anteproyecto
Preparacin
soluciones

Lunes Martes Mircoles

24/11/1
4

Jueves

Toma de muestra
Primer parte del
anlisis

25/11/1
4

Incubacin

26/11/14

Segunda parte del

anlisis

27/11/14

Entrega de resultados
Informe

Viernes

28/11/14

BIBLIOGRAFIA

NORMA MEXICANA
NMX-AA-42-1987
CALIDAD DEL AGUA DETERMINACION DEL NUMERO MAS
PROBABLE (NMP) DE COLIFORMES TOTALES, COLIFORMES
FECALES (TERMOTOLERANTES) Y Escherichia coli PRESUNTIVA.