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O documento descreve um relatório de uma aula prática sobre testes de tipagem sanguínea, incluindo ABO, RH e o teste de Coombs. Detalha os procedimentos e métodos para realizar os testes, observando aglutinação para determinar os tipos sanguíneos. O objetivo era apresentar a técnica de PCR e compreender seu significado clínico para tipagem sanguínea.
O documento descreve um relatório de uma aula prática sobre testes de tipagem sanguínea, incluindo ABO, RH e o teste de Coombs. Detalha os procedimentos e métodos para realizar os testes, observando aglutinação para determinar os tipos sanguíneos. O objetivo era apresentar a técnica de PCR e compreender seu significado clínico para tipagem sanguínea.
O documento descreve um relatório de uma aula prática sobre testes de tipagem sanguínea, incluindo ABO, RH e o teste de Coombs. Detalha os procedimentos e métodos para realizar os testes, observando aglutinação para determinar os tipos sanguíneos. O objetivo era apresentar a técnica de PCR e compreender seu significado clínico para tipagem sanguínea.
O fundamento bsico das tcnicas de aglutinao similar ao princpio das tcnicas
que se utilizam do conceito de precipitao. No entanto, a reao de aglutinao baseia-se na capacidade do anticorpo se ligar ao antgeno presente em uma superfcie de grande partcula de tal forma que leva a uma alterao do estado fisco do antgeno que denominada interao secundria. A interao secundria pode ser identificada de diferentes maneiras como, por exemplo, quando o antgeno est presente em uma superfcie de uma partcula grande como uma bactria, fungos, ltex ou um eritrcito; os anticorpos, uma vez ligados, levam estas partculas se agruparem de modo visvel num fenmeno conhecido como aglutinao. OBJETIVO Apresentar aos alunos a tcnica usada no pcr, o processo de diluies e as reaes de aglutinao e compreender seu significado clnico. MATERIAL E METDOS Amostra de soro Pipeta de 20 l Pipeta de 200 l Kit PCR Palito para homogeneizar os reagentes Soluo Fisiolgica Estante para tubos com amostras Tubos O procedimento teve incio com as explicaes da professora sobre as diluies que seriam necessrias para dar incio a tcnica, 40 l de soluo fisiolgica seria depositada em seis tubos, 40 l de soro seria depositado no primeiro tubo homogeneizado e 40 l desse tubo seria depositado no prximo tubo, repetindo esse at o ultimo tubo e descartando a mesma quantidade. 40 l do reagente pcr seria colocada em duas superfcies da placa de fundo preto, uma sendo pro controle positivo e a outra pro controle negativo, numa segunda placa de fundo preto 40 l seria colocado em cada superfcie e 40 l da soluo com soro em cada uma das superfcies tambm, aps homogeneizar e deixar tudo preparado para leitura e resultados.
RESULTADOS Na leitura das placas foi perceptvel a aglutinao em escalas diferentes devido as diluies do soro, um resultado comum na tcnica, foi ento dado o resultado do teste definido pela diluies que mostrou aglutinao mais aparente.
RESUMO: Testes de tipagem sangunea, ABO, RH e TESTE DE COOMBS
SISTEMA ABO/RH Com a determinao do tipo sanguneo e do fator Rh possvel avaliar casos de transfuso de sangue e tambm a eritroblastose fetal quando a me tem RH negativo e o filho, positivo. Na primeira gravidez, geralmente, no h problema. Na segunda, no entanto, o sistema imunolgico da me produz anticorpos com mais rapidez e em maior quantidade e o sangue da me (RH negativo) no contato com o do filho (RH positivo) pode resultar em aborto. MTODOS DE TIPAGEM ABO Na tipagem direta, se ocorrer aglutinao quando as hemcias do paciente forem misturadas com o anti-soro A, o antgeno A est presente e o sangue tipado como A. Se ocorrer aglutinao quando as hemcias do paciente forem misturadas com anti-soro B, o anti-soro B est presente e o sangue tipado como B. Se ocorrer aglutinao em ambas as misturas, tanto antgenos A e B esto presentes e o sangue tipado como AB. Se no ocorrer aglutinao em qualquer uma das misturas, no h antgenos presentes e o sangue tipado como O. Na tipagem reversa, se ocorrer aglutinao quando as clulas B forem misturadas com o soro do paciente, existe anti-B presente e o sangue tipado como A. Se a aglutinao ocorrer quando as clulas A forem misturadas, existe o anti-A e o sangue tipado como B. Se a aglutinao ocorrer tanto quando clulas A quanto B forem misturadas, existem anti-A e anti-B e o sangue tipado como O. Se no ocorrer aglutinao quando A e B forem misturados, nem anti-A nem anti-B est presente, o sangue tipado como AB. MTODO DE TIPAGEM RH O sistema Rh classifica o sangue pela presena ou ausncia de antgeno Rho(D) nas superfcies das hemcias. Neste teste, as hemcias de um paciente so misturadas com um soro contendo anticorpos anti-Rho(D) e so observadas com relao aglutinao. Se ocorrer a aglutinao, o antgeno Rho(D) est presente, e o sangue do paciente tipado como Rhpositivo; se no ocorrer a aglutinao, o antgeno est ausente e o sangue do paciente tipado como Rh-negativo. Os doadores de sangue em potencial so plenamente testados para excluir a variante Du do antgeno Rho(D), antes de serem classificados como tendo sangue Rh-negativo. As
pessoas que tm esse antgeno so consideradas doadores Rh-positivos, porm so geralmente
transfundidas como receptores de Rh-negativo. TESTE DE COOMBS O soro Anti-IgG (Soro de Coombs) destina-se pesquisa de anticorpos da frao gamaglobulina humana, quer estejam adsorvidos s hemcias humanas in vivo (Teste de Coombs Direto), quer estejam livres no plasma, o que se detecta aps adsoro in vitro (Teste de Coombs Indireto) COOMBS DIRETO Este teste empregado na pesquisa de anticorpos (gamaglobulinas) j fixados s hemcias, como ocorre na Doena Hemoltica do Recm Nascido, Anemia Hemoltica Adquirida e em pacientes que tenham recebido transfuses incompatveis. COOMBS INDIRETO Este teste utilizado na pesquisa de anticorpos bloqueadores (incompletos), os quais se fixam s hemcias in vitro mas no as aglutinam. Para que a reao seja observada necessria adio do Soro AntiIgG (Soro de Coombs) ao teste. O teste de Coombs Indireto realizado nas pesquisas de anticorpos bloqueadores, nas pesquisas de antgenos (usando o soro classificador apropriado) e nas provas de compatibilidade, desde que tais reaes no dependam de complemento para a sua deteco. Nos casos em que a reao pode ser mais bem detectada pela fixao de complemento, devese usar o Soro Anti-Humano (Anti-IgG e AntiC3d) Poliespecfico
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