14 (3): 133-137
Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis potensi ekstrak dari rumput laut Dictyota sp., Gracilaria sp., Padina
sp., dan Sargassum sp. sebagai imunostimulan sistem pertahanan tubuh non spesifik udang L. vannamei. Rumput
laut diekstraksi dengan cara direbus dalam air mendidih selama 2 jam. Suplementasi ekstrak pada pakan
udang buatan diberikan dengan dosis 10 g/kg pakan. Hasil penelitian menunjukkan adanya peningkatan jumlah
hemosit dan aktivitas fagositosis udang L. vannamei akibat pemberian ekstrak rumput laut dibandingkan kontrol.
Peningkatan tersebut terlihat pada jumlah hemosit udang L. vannamei yang diberi ekstrak Gracilaria sp. pada
hari ke-8 , Dictyota sp. dan Sargassum sp pada hari ke 12, sedangkan peningkatan aktifitas fagositosis terjadi
pada perlakuan dengan ekstrak Dictyota sp., Gracilaria sp. dan Sargassum sp. pada hari ke-8. Pemberian ekstrak
Sargassum sp memberikan hasil terbaik yaitu untuk jumlah hemosit 1,1270,260 pada hari ke12 dan aktifitas
fagositosis 214,06115,955 pada hari ke 8.
Kata kunci : Imunostimulan, rumput laut, L. vannamei
Abstract
Study on application of seaweed Dictyota sp., Gracilaria sp., Padina sp. and Sargassum sp. extract as imunostimulant
agent for non-specific defense system of white shrimp (L. vannamei) was conducted. Air dried seaweed was
extracted by boiling in water for 2 hours then fortified into shrimp feed pellet with concentration of 10g/kg pellet.
Haematological parameters of Total Haemocyte Count (THC) and Phagocytosist Activity (PA) was then tested at 4,
8, 12 days period after initial treatment. The result showed that fortification of seaweed extract was increased the
number of haemocyte was clearly shown at day 8 of Gracilaria sp. extract treatment and day 12 of Dictyota sp. and
Sargassum sp. treatment. Meanwhile phagocytosist activity was clearly increased at day 8 of Dictyota sp., Gracilaria
sp. and Sargassum sp treatment. Extract of Sargassum sp. gave the most significant effect with total haemocyte
of 1,127 0,260 at day 12th and phagocytosist activity of 214,061 15,955 at day 8th.
Key words : Immunostimulant, seaweed, L. vannamei
Pendahuluan
Penyakit merupakan salah satu faktor pembatas
dalam budidaya udang vannamei (Litopennaeus
vannamei). Tingginya tingkat mortalitas udang
budidaya diduga disebabkan oleh infeksi virus maupun
bakteri patogen. Nitimulyo et al. (2005) menyatakan
bahwa bakteri patogen yang umum menyerang dalam
budidaya perikanan adalah Vibrio alginolyticus, V.
flufialis, V. vulfinicus, dan V. ordalii. Epidemik yang
banyak menyerang budidaya udang adalah White Spot
Syndrome Virus (WSSV), Taura Syndrome Virus (TSV)
dan Yellow Head Virus (YHV) (Smith et al., 2003),
*) Corresponding author
133
Ilmu Kelautan, UNDIP
www.ijms.undip.ac.id
134
Aplikasi Ekstrak Rumput Laut Sebagai Agent Imunostimulan (Ali Ridlo & Rini Pramesti )
ILMU
KELAUTAN.
September
2009.
Vol. Vol.
14 (3):
133-137
September
2009.
14 (3):
135-140
ILMU
KELAUTAN.
mLsistem
yang telah
larutan
antikoagulan
(EDTA
aerasidibasahi
dan sirkulasi
air selama
15 hari
serta
10%).
Hemolimfe
diambil
dengan
interval
waktu
pemberian pakan pelet komersial secara ad libitum
4 (sampai
hari selama
12 hari,
ditempatkan
kenyang),
tiapselanjutnya
akuarium berisi
15 ekor
dalam
microtube
steril
dan
disimpan
dalam
cool box.
udang (Rodryguez et al., 2003)
Penghitungan jumlah total hemosit (THC) dilakukan
Pemberian pakan selama perlakuan
menggunakan haemocytometer dengan prosedur
dilakukan 4 kali sehari, yaitu pagi (05.30), siang
Campa-Cordova et al. (2002).
(11.30), sore (17.30), dan malam hari (23.00)
sebanyak 5% dari berat badan udang (Esteban et
Jml sel dihitung
al., 2001; Rodryguez
et al., 2003; Haliman, 2005).
Jml hemosit =
-------------------------------------x pengenceran
x 106
Pengambilan
hemolimfe
udang dilakukan
pada bagianVol.pangkal
dihitung pleopod pada segmen
abdominal
dekat
genitalperlakuan
dengan
Perbandingan jumlahlubang
hemosit antara
menggunakan
syringe
1
mL
yang
telah
dibasahi
dan kontrol dianggap sebagai nilai efek perlakuan.
larutan antikoagulan (EDTA 10%). Hemolimfe
Aktivitas fagositosis ditentukan menurut
diambil dengan interval waktu 4 hari selama 12 hari,
prosedur Isnansetyo et al. (2007). Sel bakteri V.
selanjutnya ditempatkan dalam microtube steril dan
alginoliticus dicampur dengan larutan formalin sampai
disimpan dalam cool box. Penghitungan jumlah total
semua endapan suspensi terendam selama 24 jam,
hemosit
(THC)
dilakukan
menggunakan
kemudian disentrifugasi pada 1000 rpm selama 3
haemocytometer dengan prosedur Campa-Cordova
menit dan filtratnya dipisahkan. Sejumlah 250 L
et al. (2002).
hemosit dicampur dengan 500 L suspensi bakteri
yang telah dimatikan, kemudian diinkubasi pada suhu
kamar selama 60 menit.
Aktivitas fagositosis diamati
Jml sel dihitung
dengan
menggunakan
mikroskop perbesaran
1000
Jml hemosit
= -------------------------------------x pengenceran
x 106
kali.
Vol. dihitung
Jml sel fagosit aktif
Aktivitas
fagositosistubuh
ditentukan
menurut
Sistem
pertahanan
non spesifik
prosedur
Isnansetyo
et al.aplikasi
(2007).imunostimulan
Sel bakteri V.
udang
L. vannamei
terhadap
alginoliticus
dicampur
dengan
larutan
formalin
dari rumput laut ditunjukkan oleh gambaran
sampai
semua
endapan
suspensi
terendam
selama
hematositnya yaitu jumlah total hemosit dan aktivitas
24
jam,
kemudian
disentrifugasi
pada
1000
rpm
fagositosis. Hemosit merupakan salah satu bentuk
selama 3 tubuh
menit dan
filtratnya
dipisahkan.
Sejumlah
pertahanan
secara
selular.
Hemosit mampu
250
PL
hemosit
dicampur
dengan
500
PL
suspensi
mematikan agen penyebab infeksi melalui sintesis
danbakteri
eksositosis
bioaktif protein
mikrobisidal
yang molekul
telah dimatikan,
kemudian
diinkubasi
(Smith
et
al.,
2003).
Faktor-faktor
immunoreaktif
pada suhu kamar selama 60 menit. Aktivitas
seperti
peroxinextin,
peptida
dan mikroskop
clotting
fagositosis
diamati
denganantibakteri
menggunakan
components
disimpan
dalam
hemosit,
sehingga
perbesaran 1000 kali.
peningkatan jumlah hemosit merupakan ukuran
kemampuan suatu zat untuk menstimulasi sistem
pertahanan tubuh udang. Jml sel fagosit aktif
Aktivitas
(%) = ----------------------------------------Hasil Fagositosis
penelitian menunjukkan
bahwa jumlah x
100%dan aktivitas fagositosis bervariasi, tergantung
hemosit
pada jenis rumput laut yang
Pemberian
Jmldigunakan.
sel fagosit diamati
ekstrak rumput laut cenderung meningkatkan jumlah
total hemosit, terutama pada hari ke - 8 dan hari ke - 12.
Hasil dan Pembahasan
Jumlah total hemosit tertinggi dicapai oleh Sargassum
pertahanan
tubuh
non (Tabel
spesifik
sp. pada hariSistem
ke-12 (1,127
x 107 sel/L
0,260)
udang
L.
vannamei
terhadap
aplikasi
imunostimulan
1). Pada hari ke-8 pemberian ekstrak Gracilaria sp.
dari rumput
laut ditunjukkan
oleh
gambaran
menunjukkan
nilai tertinggi
dibandingkan
rumput
laut
yaitupada
jumlah
total hemosit
jenishematositnya
lain, sedangkan
hari ke-12,
pemberiandan
aktivitas
fagositosis.
Hemosit
merupakan
salahsp.
satu
ekstrak
Dictyota
sp., Padina
sp. dan
Sargassum
bentuk
pertahanan
tubuh
secara
selular.
Hemosit
memberikan hasil yang lebih tinggi dibanding kontrol.
mematikan
agen
penyebab
infeksi
melalui
Hal mampu
ini menunjukkan
bahwa
pemberian
ekstrak
rumput
eksositosis
molekul bioaktif
protein
lautsintesis
mampu dan
menstimulasi
peningkatkan
jumlah total
mikrobisidal
et al., Menurut
2003). Johansson
Faktor-faktor
hemosit
udang L.(Smith
vannamei.
immunoreaktif
seperti
peptida
et al.
(2000), hematosit
udang peroxinextin,
memegang peranan
antibakteri
dan
clotting
components
disimpan
penting dalam respon imun diantaranya melalui
dalam hemosit,
sehingga
peningkatan
jumlah
recognition,
phagocytosis,
melanization,
cytotoxicity
merupakan
danhemosit
komunikasi
antar sel.ukuran kemampuan suatu zat
untuk menstimulasi sistem pertahanan tubuh
Hasil penelitian diatas sesuai dengan penelitian
udang.
Selvin et al. (2004) yang menyatakan bahwa ekstrak
Hasil penelitian menunjukkan bahwa
Ulva sp. dan Dendrilla sp. dapat meningkatkan jumlah
jumlah hemosit dan aktivitas fagositosis bervariasi,
total hemosit udang masing-masing sampai 0,672 x
tergantung pada jenis rumput laut yang digunakan.
107 sel/L dan 0,620 x 107 sel/L. Penelitian sejenis
Pemberian ekstrak rumput laut cenderung
yang telah dilakukan menunjukkan bahwa respon
meningkatkan jumlah total hemosit, terutama pada
imun udang dapat ditingkatkan dengan aplikasi glukan
hari ke - 8 dan hari ke - 12. Jumlah total hemosit
(Chang et al., 2000) dan peptidoglikan (Takahashi et
tertinggi dicapai oleh Sargassum sp. pada hari ke-12
al., 2000). Hasil penelitian ini sesuai dengan Subagiyo
(1,127 x 107 sel/L 0,260) (Tabel 1). Pada hari ke(2009), yang menyatakan bahwa rumput laut Halimeda
8 pemberian ekstrak Gracilaria sp. menunjukkan
sp. mampu meningkatkan nilai THC sebesar 96,242%
nilai tertinggi dibandingkan rumput laut jenis lain,
pada hari ke -12.
Tabel 1. Pengaruh Pemberian Ekstrak Rumput Laut Terhadap Jumlah Total Hemosit (THC) Udang
L. vannamei
Rumput Laut
Kontrol
Dictyota sp.
Gracilaria sp.
Padina sp.
Sargassum sp.
Hari ke-4
0,756 0,203a
0,547 0,063a
0,675 0,102a
0,658 0,253a
0,621 0,241a
0,541 0,160a
1,091 0,533c
0,561 0,055a
0,818 0,168b
1,127 0,260c
Keterangan: Nilai yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata pada tingkat kepercayaan
95% (p> 5%)
Aplikasi Ekstrak Rumput Laut (Ali Ridlo & Rini Pramesti)
Aplikasi Ekstrak Rumput Laut Sebagai Agent Imunostimulan (Ali Ridlo & Rini Pramesti )
135
Tabel 2. Pengaruh Pemberian Ekstrak Rumput Laut Terhadap Aktivitas Fagositosis Udang L. vannamei
Rumput Laut
Hari ke-4
78,601 2,108a
Kontrol
63,474 20,147a
87,008 3,298b
Dictyota sp.
86,015 8,032b
101,447 46,666d
86,654 3,305b
Gracilaria sp.
85,057 5,508b 52,876
101,308 60,385d
81,911 9,336a
Padina sp.
14,785c
89,256 129b
47,603 0,381c
Sargassum sp.
53,258 1,890c
214,061 15,955e
85,862 3,649b
Keterangan: Nilai yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata pada tingkat kepercayaan
95% (p > 5%)
Beberapa
faktor
yang
mempengaruhi
sedangkan pada hari ke-12, pemberian ekstrak
kemampuan suatu bahan untuk dapat meningkatkan
Dictyota sp., Padina sp. dan Sargassum sp.
sistem pertahanan tubuh udang antara lain adalah
memberikan hasil yang lebih tinggi dibanding
senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak memang
kontrol. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian
tidak mempunyai aktifitas
ekstrak rumput laut mampu menstimulasi
menstimulasi
pertahanan
peningkatkan
jumlah sistem
total hemosit
udangtubuh,
L.
senyawa
aktif
berada
dalam
bentuk
tidak
dapat
vannamei.
Menurut Johansson et al. (2000),
diabsorposi
dari memegang
sistem pencernaan.
Senyawa
aktif
hematosit
udang
peranan penting
dalam
akan
menunjukkan
aktifitasnya
jika
dapat
mencapai
respon imun diantaranya melalui recognition,
di lokasi targetnya
yang berarti harus
dapat diserap
phagocytosis,
melanization,
cytotoxicity
dan
oleh
darah
dari
saluran
pencernaan
untuk
selanjutnya
komunikasi antar sel.
dibawa/ditransfer
ke tempat
dimana
zat itu
akan
Hasil penelitian
diatas
sesuai
dengan
memberikan
efek
aktifitasnya
atau
jumlah
senyawa
penelitian Selvin et al. (2004) yang menyatakan
aktif lebih
kecil dari
minimal
yang sp.
diperlukan
bahwa
ekstrak
Ulva jumlah
sp. dan
Dendrilla
dapat
untuk
memunculkan
efek
imunostimulan
atau
bahkan
meningkatkan jumlah total hemosit udang masingsebaliknya
dosisnya
tinggidan
sehingga
masing
sampai
0,672 terlalu
x 107 sel/L
0,620 x tidak
107
memberikan
efek
atau
berperilaku
sebagai
inhibitor.
sel/L. Penelitian sejenis yang telah dilakukan
Sakai (1999) bahwa
menyatakan
bahwa udang
kemampuan
menunjukkan
respon imun
dapat
imunostimulan
untuk
meningkatkan
respon
ditingkatkan dengan aplikasi glukan (Chang et imun
al.,
dan mengembangkan
terhadap
infeksi
2000)
dan peptidoglikan proteksi
(Takahashi
et al., 2000).
patogen
dipengaruhi
oleh dengan
dosis aplikasi.
Pemberian
Hasil
penelitian
ini sesuai
Subagiyo
(2009),
imunostimulan
pada
konsentrasi
dibawah
nilai
minimal
yang menyatakan bahwa rumput laut Halimeda
sp.
untuk
terjadinya
respon
imun
tidak
akan
memberikan
mampu meningkatkan nilai THC sebesar 96,242%
pengaruh
terhadap
pada
hari ke
-12. peningkatan jumlah hemosit.
Parameter
tubuh udang
Beberapa sistem
faktorpertahanan
yang mempengaruhi
juga
dapat
diketahui
dari
aktivitas
fagositosis
yaitu
kemampuan
suatu
bahan
untuk
dapat
kemampuan selsistem
responpertahanan
imun non tubuh
spesifikudang
untuk
meningkatkan
memfagositosis
agen
penyakitaktif
yangyang
masuk
ke dalam
antara
lain adalah
senyawa
terkandung
tubuh. ekstrak memang tidak mempunyai aktifitas
dalam
menstimulasi
sistem menunjukkan
pertahanan tubuh,
senyawa
Hasil penelitian
bahwa pemberian
aktif
berada
dalam
tidaksp.,
dapat
diabsorposi
ekstrak
rumput
laut bentuk
Sargassum
Dictyota
sp. dan
dari
sistem
pencernaan.
Senyawa
aktif
akan
Padina sp., mampu meningkatkan aktivitas fagositosis
menunjukkan
aktifitasnya
jika
dapat
mencapai
di
udang L. vannamei terutama pada hari ke-8 (Lihat Tabel
lokasi
yang dalam
berartiketiga
harusjenis
dapat
diserap
2). Haltargetnya
ini disebabkan
rumput
laut
oleh
darah
dari saluran
untuk
tersebut
mengandung
senyawapencernaan
polisakarida alginat.
selanjutnya
dibawa/ditransfer
tempatalginat
dimanadapat
zat
Menurut Cheng
et al. (2005),kesodium
itu
akan
memberikan
efek
aktifitasnya
atau
jumlah
meningkatkan aktifitas fagositosis udang. Disamping
senyawa
aktif lebih
kecilmenyatakan
dari jumlah bahwa
minimalekstrak
yang
itu, Subagiyo
(2009)
diperlukan untuk memunculkan efek imunostimulan
136
Aplikasi
AplikasiEkstrak
EkstrakRumput
RumputLaut
LautSebagai
SebagaiAgent
AgentImunostimulan
Imunostimulan(Ali
(AliRidlo
Ridlo&& Rini
Rini Pramesti)
Pramesti )
Aplikasi Ekstrak Rumput Laut Sebagai Agent Imunostimulan (Ali Ridlo & Rini Pramesti )
137