LAPORAN AKHIR

PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

JUDUL PROGRAM
LG-SIMON (Leaky Gut Syndrome Immunotherapy Intravenous) :
Pemanfaatan Immunoglobulin (IgG) pada Kolostrum Sapi untuk Terapi
Imun Sindrom Kebocoran Usus Secara Intravenous
BIDANG KEGIATAN
PKM PENELITIAN

Diusulkan oleh :

Wiwi Anggraeni
Yuli Fitria Sari
Triana Fakuwita
Miftahul Munir
Ashri Almiahsari

135050101111192
135050101111197
135100200111009
125050100111125
135070501111024

2013
2013
2013
2012
2013

UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2015

ii

LG-SIMON (Leaky Gut Syndrome Immunotherapy Intravenous) :

Pemanfaatan Immunoglobulin (IgG) pada Kolostrum Sapi untuk Terapi
Imun Sindrom Kebocoran Usus Secara Intravenous
Wiwi Anggraeni,Yuli Fitria S,Triana Fakuwita, Miftahul Munir,Ashri Almiahsari
Fakultas Peternakan Universitas Brawijaya
Fakultas Teknologi Pangan Universitas Brawijaya
Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya
Abstrak
Leaky Gut Syndrome merupakan suatu kondisi peningkatan permeabilitas usus
dimana jaringan dalam saluran pencernaan rusak yang memungkinkan protein
seperti gluten, bakteri jahat, dan partikel yang tidak tercerna masuk kedalam aliran
darah. Meningkatnya permeabilitas mukosa intestin merupakan salah satu kunci
dari berbagai teori penyebab Autism Spectrum Disorder (ASD). Immunoglobulin
yang terdapat dalam kolostrum sapi merupakan pilihan utama untuk mengurangi
gejala leaky gut. Banyak studi yang menjelaskan bahwa kolostrum sapi
mengandung immunoglobulin yang lebih tinggi dibanding ASI.Banyak studi
yang menjelaskan bahwa probiotik merupakan salah satu pilihan untuk
memperbaiki sistem pencernaan yang rusak. Dengan membuat kolostrum sebagai
kefir akan menambah kualitas dari kolostrum tersebut. Penelitian ini didesain
untuk mengetahui pengaruh pemberian probiotik kefir kolostrum sebagai terapi
Leaky Gut Syndrome pada penderita ASD sehingga mencegah peningkatan
permeabilitas small intestine dan stomach serta mengembalikan flora normal usus.
Penelitian ini merupakan penelitian experimental laboratorik. Penelitian ini
menggunakan 6 tikus betina Rattus norvegitus strain wistar yang dibuntingkan.
Tikus dibagi menjadi 2 kelompok dimana terdapat kontrol negatif dan kontrol
positif (pemberiian VPA). Setelah tikus melahirkan dan anaknya berusia 2 bulan,
anak tikus dibagi menjadi 3 kelompok dengan perlakuan kontrol negatif, kontrol
positif dan terapi kefir kolostrum.Setelah terapi kefir tikus ditest menggunakan
test fisik dan kemudian tikus dibedah lalu diambil organ stomach dan small
intestinnya untuk pengukuran permeabilitasnya dengan metode spesimen jaringan
stomach dan small intestine untuk pembuatan preparat histopatologi dengan
pengecatan eosis dan hematoxlyn untuk pengecekan ketebalan mukosa dan
muscle organ. Analisa statistik menunjukkan bahwa pemberian probiotik kefir
kolostrum pada kelompok perlakuan secara signifikan menunjukkan bahwa
terdapat pengaruh terhadap berat badan dan skor berenagnya (p,0,05). Analisa
statistik juga menunjukkan bahwa pemberian probiotik kefir kolostrum pada
kelompok perlakuan secara signifikan dapat meningkatkan ketebalan dari muscle
stomach(p<0,05), sedangkan tidak memberikan perbedann terhadap mukosa
stomach (p>0,05) dan secara signifikan dapat meningkatkan ketebalan mukosa
dan muscle ileum serta duodenum (p,0,05). Pemberian kefir kolostrum belum
dapat meningkatkan ketebalan jejenum namun secara significan memberikan
perbedaan terhadap ketebalan mukosaa dan muscle jejenum (p,0,05). Kesimpulan
penelitian ini adalah bahwa pemberian kefir kolostrum berpotensi dalam
mengurangi gejala Leaky Gut Syndrome pada ASD melalui peningkatan
ketebalan mukosa dan muscle stomah dan small intestine.
Kata Kunci : Leaky Gut, Kolostrum, Probiotik, Permeabilitas

iii

DAFTAR ISI

Halaman Sampul ................................................................................................................ i

Halaman Pengesahan .......................................................................................................... ii
Abstrak ............................................................................................................................... iii
Daftar Isi ............................................................................................................................ iv
Daftar Gambar ..................................................................................................................... v
Daftar Tabel ....................................................................................................................... v
Daftar Lampiran .................................................................................................................. v
BAB 1 PENDAHULUAN ................................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang Masalah ...................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................................................ 1
1.3 Tujuan ................................................................................................................ 1
1.4 Luaran ................................................................................................................ 1
1.5 Manfaat .............................................................................................................. 1
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................................... 2
2.1 Leaky Gut Syndrome dan ASD ........................................................................... 2
2.2 Antibiotik dan Probiotik ...................................................................................... 2
2.3 Kolostrum ......................................................................................................... 2
BAB 3 METODE PENELITIAN........................................................................................ 3
3.1 Rancangan Penelitian........................................................................................... 3
3.2 Waktu dan Tempat Pelaksanaan .......................................................................... 3
3.3 Variabel yang Diamati ......................................................................................... 4
3.4 Objek dan Sampel Penelitian ............................................................................... 4
3.5 Metode Penelitian ................................................................................................ 4
3.6 Analisis Data ....................................................................................................... 5
BAB 4 HASIL YANG DICAPAI dan POTENSI KHUSUS .............................................. 5
4.1 Hasil dan Pembahasan ......................................................................................... 5

iv

4.1.1 Kadar IgG pada Kefir Kolostrum ..................................................................... 6

4.1.2 Hasil Uji berat badan, olfactorius offspring dan berenang ............................... 7
4.1.3 Hasil Uji Ketebalan Mukosa dan Muscle ......................................................... 8
4.2 Potensi Khusus .................................................................................................... 10
BAB 5 PENUTUP .............................................................................................................. 10
5.1 Kesimpulan ......................................................................................................... 10
5.2 Saran ................................................................................................................... 10
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................................... 10
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Rancangan Penelitian ....................................................................................
Gambar 2. Diagram Hasil Uji IgG
...............................................................................
Gambar 3. Diagram Tes Berat Badan .................................................................................
Gambar 4. Diagram Skor Berenang
......................................................................
Gambar 5. Diagram Ketebalan Muscle Organ ....................................................................
Gambar 6. Diagram Ketebalan Mukosa Organ ...................................................................
Gambar 7. Diadram Prosentase ..........................................................................................

3
6
7
8
9
9
12

DAFTAR TABEL
Tabel 1. Data Tes Berat Badan, Olfactorius dan Berenang ................................................
Tabel 2. Data Tes Ketebalan Mukosa dan Muscle Organ ...................................................
Tabel 3. Indeks Keberhasilan Program ...............................................................................
Tabel 4. Rincian Biaya
..................................................................................................

5
6
11
12

DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Indeks Keberhasilan Program ......................................................................... 11
Lampiran 2. Rincian Biaya ................................................................................................. 12
Lampiran 3. Data Pendukung Kegiatan ........................................................................... 14

BAB 1. PENDAHULUAN
1.1
Latar Belakang Masalah
Sekitar 70% penduduk diperkirakan menderita Leaky Gut Syndrome /
Sindrom Kebocoran Usus data dari International Center for Nutritional Research
(http://www.icnr,org). Penelitian menunjukkan bahwa Leaky Gut Syndrome
mempengaruhi jutaan orang di seluruh dunia. LGS adalah suatu kondisi lemah
kronis yang sering tidak terdiagnosis oleh profesional medis. Banyak yang tidak
mengakui tentang kondisi ini. Akibatnya, banyak orang tidak mengetahui,
sehingga mereka saat ini berurusan dengan gejala yang disebabkan oleh usus
bocor yang telah berkembang dari waktu ke waktu.
LGS adalah suatu kondisi peningkatan permeabilitas usus dimana jaringan
dalam saluran pencernaan rusak yang memungkinkan protein seperti gluten,
bakteri jahat, dan partikel yang tidak tercerna masuk kedalam aliran darah.
Meningkatnya permeabilitas mukosa intestin merupakan salah satu kunci dari
berbagai teori penyebab Autism Spectrum Disorder (ASD). Sindrom kebocoran
usus tidak dapat diatasi secara medik konvensional dengan penggunaan antibiotik
atau obat-obatan kimia karena akan semakin membuat kebocoran usus bertambah
parah.
Kolostrum sapi mengandung IgG hingga 80% atau 40 kali dari jumlah IgG
kolostrum manusia. Kolostrum meminimalisir jumlah bakteri pathogen di dalam
usus karena kandungan immunoglobulin, lactoferrin dan proline rich polypeptides
(PRP)-nya mampu menghambat pertumbuhan koloni bakteri pathogen sebelum
mereka merusak fungsi epithel usus dan masuk ke dalam tubuh lewat lapisan
terluar usus tersebut . Nutrisi dan Epithelial Growth Factor yang terdapat di dalam
kolostrum akan memacu pertumbuhan sel epithel usus sehingga mempercepat
perbaikan lapisan usus yang telah rusak untuk berfungsi kembali secara normal.
Sehingga kolostrum sapi merupakan pilihan utama untuk mengurangi gejala
sindrom kebocoran usus.
1.2
Rumusan Masalah
1. Bagaimana cara mengatasi Leaky Gut Syndrome yang evektif?
2. Bagaimana pemanfaatan kolostrum sapi agar tepat guna?
1.3
Tujuan
Tujuan yang ingin dicapai dalam penulisan ini adalah untuk mengatasi
penyakit Leaky Gut Syndrome dengan memanfaatkan kolostrum sapi yang
memiliki banyak manfaat namun belum optimal pemanfaatannya di masyarakat.
1.4
Luaran
Membuat sebuah probiotik dalam bentuk kefir kolostrum untuk mengatasi
LGS, artikel ilmiah penelitian, hak paten dan dipublikasi dalam seminar.
1.5
Manfaat
Memberikan solusi alternative untuk mengatasi Leaky Gut Syndrome bagi
industri farmasi secara global dan memberikan sumbangan inovatif bagi
perkembangan ilmu Teknologi Hasil Ternak, terutama penggunaan kolostrum sapi

untuk kesehatan.
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA
2.1

Leaky Gut Syndrome dan ASD

Leaky gut adalah suatu kondisi peningkatan permeabilitas usus dimana
jaringan dalam saluran pencernaan rusak yang memungkinkan protein seperti
gluten, bakteri jahat, dan partikel yang tidak tercerna masuk kedalam aliran
darah (Fasano, 2012). Kelainan yang dapat ditemukan pada mukosa usus anak
dengan ASD yaitu timbulnya lubang-lubang kecil pada mukosa usus dan
meningkatnya permeabilitas usus yang dikenal sebagai leaky gut
(Ratnawati,2003). Umumnya, bahkan hampir semua anak dengan ASD
mengalami gangguan fungsi ( malfunction ) pada sistem imunnya. Gangguan
fungsi ini dapat berupa : salah mengidentifikasi sel pada dirinya sendiri sebagai
sel asing, sehingga akan menyerang terhadap sel dirinya sendiri. Hal ini
menyebabkan terjadinya reaksi radang pada saluran gastrointestinal, dan
selanjutnya akan menyebabkan berbagai gangguan gastrointestinal yang sering
didapatkan pada anak dengan ASD (Camilleri,2012)
2.2
Antibiotik dan Probiotik
Pemberian antibiotik yang terlalu sering menyebabkan terbunuhnya
lactobacillus di usus, akibatnya terjadilah yeast overgrowth di saluran pencernaan.
Bentuk mycelium dan chlamydospore dari jamur candida albicans bisa melakukan
invasi ke dalam jaringan, sedangkan bentuk yeast biasanya berkelompok dalam
crypta intestin sehingga sulit dideteksi. Jamur dan yeast ini menempel pada
dinding usus sambil mengeluarkan toxin yaitu gliotoxins dan immunotoxins
lainnya yaitu mannan yang dapat melemahkan sistem imunitas tubuh. Akhirnya
terjadi lagi reinfeksi dan diberi lagi antibiotik yang akan membunuh bakteri
komensal dalam usus, terjadilah vicious cycle. Yeast juga memproduksi suatu
enzim seperti phospholipase ( phospholipid breakdown ) dan protease ( protein
breakdown ). Enzim ini dapat merusak mukosa usus sehingga timbul
lubanglubang kecil di mukosa usus, ditambah dengan adanya hipermeabilitas
dinding usus maka terjadilah Leaky Gut Syndrome ( Ratnawati, 2003 ).
Bakteri probiotik mampu menstimulasi sistem imun antara lain
meningkatkan fungsi fagositosis makrofag, monosit dan neutrofil, serta mampu
merangsang sekresi IgM. Probiotik juga memiliki kemampuan memperbaiki
keseimbangan mikroflora usus, sehingga dapat mempertahankan kesehatan host
(Resnick, 2010)
2.3
Kolostrum
Dr.C.E.Bruce menunjukkan bahwa kolostrum manusia hanya mengandung
2% IgG (immunoglobulin yang terpenting untuk tubuh), sementara dalam
kolostrum sapi mengandung IgG 40x lebih banyak. Berita baiknya, kolostrum sapi
mudah untuk didapatkan dalam jumlah yang besar (Bruce, C.E. 1969).

Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi IgG total hasil

pemerahan pertama cukup tinggi, dengan konsentrasi sebesar 25.753,13mg.ml.
Imunoglobulin utama yang terkandung di dalam kolostrum sapi adalah
immunoglobulin gamma (IgG), oleh karena itu, kolostrum merupakan sumber lgG
yang sangat bermanfaat (Esfandiari, 2008).
Since colostrum can decrease Leaky Gut Syndrome i.e. intestinal
permeability and enhance the assimilation of nutrients, using colostrum as a
foundation supplement can enhance the bioavailability of nutrients and protect the
digestive tract from toxins and pathogenic invaders. This effect can also be
increased when combined with probiotics (Pamela, 1998)
BAB 3. METODE PENELITIAN
3.1
Rancangan Penelitian

Gambar 1. Rancangan Penelitian

3.2
Waktu dan Tempat Pelaksanaan
Penelitian dilakukan selama 4 bulan. Pengambilan kolostrum akan
dilakukan di daerah Pujon sebagai sentra sapi perah tertinggi di Malang.
Pembuatan kefir dilakukan di Laboratorium Teknologi Hasil Ternak. Pengecekan
IgG dilakukan di Laboratorium Kimia Fakultas MIPA, pemeliharaan tikus putih (
Rattus norvegicus) jenis Strain wistar dilakukan di Laboratorium Farmakologi,

test berat badan, test renang dan test perilaku dilakukan di Laboratorium
Farmakologi Universitas brawijaya dan uji Histologi dilakukan di Laboratorium
Anatomi Mikroskopis Universitas Brawijaya.
3.3
Variabel yang Diamati
Variabel bebas penelitian ini adalah pemberian kefir kolostrum dengan
lama fermentasi 48 jam. Variabel tergantung adalah berat badan, olfactorius
offspring, renag dan dan histologi organ stomach, duodenum, jejenum, ielun,
colon.
3.4
Objek dan Sampel Penelitian
Sampel penelitian adalah model tikus putih (Rattus novergicus) strain
Wistar betina siap reproduksi yang dibuntingkan sebanyak 6 ekor, dalam
penelitian ini menggunakan anak tikus dari induk yang dibuntingkan yang
berumur 4 minggu.
3.5
Metode Penelitian
3.5.1 Pembuatan Kefir Kolostrum
Kolostrum yang diambil dari pemerahan pertama setelah melahirkan
dikondisikan dengan suhu 30 C dan diaduk secara terus menerus agar tidak
menggumpal. Grain kefir sebanyak 5 gram/100 ml kolstrum ditaruh diwadah
tupperware. Kolostrum yang telah dikondisikan dimasukkan dalam wadah
kemudian difermentasi selama 18 jam. 24 jam, 36 jam dan 48 jam
3.5.2 Pengukuran kadar IgG
Untuk mengetahui konsentrasi IgG pada sampel kefir kolostrum
digunakan alat brix refraktrometer. Cara kerja refraktometers mengukur
pembiasan cahaya dalam larutan cair. Konsentrasi yang lebih tinggi dari protein
(termasuk IgG) akan menghasilkan pembiasan cahaya yang lebih besar melalui
sampel. Caranya sampel kolostrum dan kefir kolostrum yang sudah diberi
perlakuan tadi diteteskan sebanyak 2-3 tetes dalam prisma dan penutup sampel
diturunkan. Instrumen akan menampilkan pembacaan digital pada skala Brix.
Setiap menggunakan refraktometer, prisma dan sampel penutup harus dibersihkan
setelah menguji sampel untuk menghindari residu yang dapat mempengaruhi
pengukuran berikutnya. Pembacaan brix refraktrometer didasarkan pada nilai
ambang 22. Nilai di atas 22 baik sedangkan nilai di bawah 22 tidak begitu baik.
3.5.3 Pembuntingan tikus
Tikus betina yang siap kawin dikandangkan dengan tikus jantan dengan
perbandingan 1:1. Hari pertama setelah pencampuran dihitung sebagai hari
pertama tikus betina bunting.
3.5.4 Pemberian valproic acid dan Kefir kolostrum
Valproic acid diberikan dengan dosis 800 mg/kg bb dengan cara oral
menggunakan sonde lambung diberikan pada saat kehamilan ke-9. Kefir
kolostrum diberikan pada anak tikus, anak tikus yang berusia 4 miggu selama 1
bulan diberikan kefir kolostrum secara oral menggunakan sonde laambung dengan
dosis 1 cc/100 g BB.

3.5.5 Test leaky Gut Syndrome

3.5.5.1 Tes Berat Badan, Tes Ollfactorius, dan Tes Berenang
Semua tes dilakukan diatas jam 2. Sebelum tes anak tikus dari masingmasing perlakuan yang berumur 4 minggu dikondisikan, tes berat badan
dilakukan dengan cara menimbang anak tikus dengan timbangan digital, tes
olfactorius dilakukan dengan menggunakan kandang yang dipojok kanan dan
pojok kiri ditaruh cawan petri yang berisi sekam bersih dan sekam kotor,
kemudian waktu kaki pertama mencapai cawan petri dihitung sebagai waktu tikus
telah selesai melakukan tes, kandang dan cawan petri yang digunakan dibersihkan
dengan etanol 5 %, tes renang dilakukan dengan menggunakan tabung berenang,
tikus direnagkan selama 10 detik, kemudian dilihat bagaimana keadaan tikus
selama berenang dan dicocokan dengan skor sebagai berikut, 0: kepala dan hidung
dibawah permukaan air, 1:Hidung dibawah permukaan air, 2:Hidung dan kepala
diatas permukaan tapi telinga dibawah permukaan air, 3:Sama dengan no 2 tapi
sebagian telinga ada yang dibawah dan diatas permukaan air dan 4: Sama dengan
no 3 tapi telinga diatas permukaan air
3.5.5.2 Uji Histologi
Sebelum diambil organnya, anak tikus dianestesikan dengan ether dan.
Diambil organ stomach, duodenum, jejenum, ileum, dan colon kemudian
direndam pada formalin 10 % dan dibiarkan selama 18 jam pada suhu 4 C.
Sampel yang sudah siap dibagi menjadi 4 bagian yaitu, stomach, duodenum,
jejenum, ileum, keempat bagian diiris dengan ukuran 5 m dan diwarnai dengan
hemstoxylin dan eosin kemudian diamati dengan perbesaran mikroskop untuk
melihat profil morfologi organ tikus apakah terdapat pengaruh pemberian Vpa dan
kefir kolostrum pada kesehatan organ pencernaan .
.
3.6
Analisis Data
Data yang diperoleh dalam penelitian ini dianalisa secara
statistikamenggunakan SPSS.Data berat badan, dan data skor renang diuji dengan
Kruskal Wallis dan Mann Whitney. Data Histology untuk analisis statitik dengan
analysis of variance (ANOVA). Apabila berbeda nyata dilakukan uji lanjut
duncan.
BAB 4 HASIL YANG DICAPAI DAN POTENSI KHUSUS
4.1
Hasil dan Pembahasan
Pada penelitian ini diperoleh data hasil uji IgG pada kolostrum dan data
dari tes berat badan, tes olfactorius offspring, tes renang dan tes histology.
Tabel 1. Data Tes Berat Badan, Tes Olfactorius Offspring, Tes Renang
Sampel
Berat
Olfactorius Offspring
Berenang
Badan
(S)
Bersih (S)
Kotor (S)
Kn
54
7
4
Kn
50
8
4
Kn
50
3
4

P1
P1
P1
P2
P2
P2

30
31
31
39
49
44

5
8
6

3
0
2
4
4
3

5
7
8

Tabel 2. Data Ketebalan Mukosa dan Muscle Organ

Ketebalan Muscle (Pixel)
Sampel Ketebalan Mukosa (Pixel)
TmsL
TMsD TMsJ TMsI
TMuL TmuD TmuJ TMuI
Kn
725.50 529.06 799.81 657.89 184.47 54.23 73.76 68.38
Kn
763.47 523.35 774.40 640.73 178.79 60.41 75.56 67.15
Kn
783.41 510.88 783.10 659.10 175.96 61.01 71.24 62.17
P1
701.78 299.77 558.08 578.46 143.59 47.07 68.44 42.15
P1
751.68 251.56 526.16 563.94 146.14 35.35 65.91 44.89
P1
766.18 258.50 530.19 545.77 152.18 20.00 63.85 48.91
P2
786.17 679.03 490.72 613.49 181.89 84.15 61,47 60.81
P2
743.96 674.89 487.67 624.44 165.08 83.55 60.12 65.01
P2
769.98 670.17 476.83 635.91 194.76 81.01 59.46 61.96
Keterangan Kn= Kontrol negatif tanpa perlakuan ; P1= Perlakuan pemberian VPA
tanpa terapi kefir kolostrum ; P2=Perlakuan pemberian VPA dengan terapi kefir
kolostrum.TMu=Tebal Mukosa;TMs=Tebal Muscle;L=Lambung;D=Duodenum ;
J=Jejenum;I=Ileum.
4.1.1 Kadar IgG pada kefir kolostrum
Kegiatan ini dilakukan untuk menetukan kdar IgG yang paling banyak
terdapat dalam kefir. Kegiatan ini dapat digunakan sebagai acuan untuk membuat
kefir yang diberikan pada tikus. Pada kegiatan ini didapatkan hasil fermentasi
yang memiliki konsentrasi IgG paling tinggi.Pada pembuatan kefir berikutnya
akan digunakan perlakuan yang memiliki konsentrasi IgG paling tinggi yaitu
fermentasi 48 jam
15
14,9
14,8
14,7
14,6
14,5
14,4
14,3
14,2
14,1
14

IgG 1
IgG 2
IgG rata rata

48

36

24

18

Gambar 2. Diagram Hasil Uji IgG

Gambar 5 menunjukkan hasil dari test IgG.Biru merupakan uji IgG pada
ulangan pertama, merah merupakan uji IgG ulangan kedua dan hijau adalah ratarata nilai IgG pada uji pertama dan kedua.
4.1.2 Hasil Uji berat badan, olfactorius offspring dan berenang
Pada Tabel 1 terlihat bahwa berat badan tertinggi terdapat pada tikus
kontrol negatif(sehat) sedang terendah pada tikus P1(sakit). Hal ini sesuai dengan
(Vemale com) yang menyatakan bahwa bayi yang lahir dengan bobot di bawah
normal beresiko 63 persen lebih tinggi untuk mengalami autisme. Sedangkan pada
anak-anak yang lahir dengan bobot berlebih resikonya mencapai 60 persen. Pada
gambar juga terlihat skor berenag tertinggi terdapat pada tikus kontrol negatif dan
skor berenag terendah pada tikus P1. Pada tikus P2(terapi) mulai menunjukkan hal
yang positif yaitu kenaikan berat badan dan kenaikan skor berenag. Hal ini terjadi
mungkin karena pemberian kefir kolostrum pada tikus autis mengurangi keadaan
leaky gut syndrome yang diderita. Hal ini sesuai dengan Resnick, 2010 yang
menyatakan bahwa bakteri probiotik mampu menstimulasi sistem imun antara lain
meningkatkan fungsi fagositosis makrofag, monosit dan neutrofil, serta mampu
merangsang sekresi IgM. Probiotik juga memiliki kemampuan memperbaiki
keseimbangan mikroflora usus, sehingga dapat mempertahankan kesehatan host).
Pada Gambar 2 terlihat bahwa tikus kontrol negatif cenderung memilih sekam
yang kotor . Tikus P1 cenderung memilih sekam yang bersih kemudian pada tikus
P2 tikus mulai memilih sekam yang kotor meskipun waktunya tidak secepat
dengan tikus kontrol negatif. Pada tes offspring olfactory tikus yang sehat akan
cenderung memilih sekam yang kotor karena pada tikus terdapat syaraf
olfactorius, yaitu kemampuan syaraf hewan untuk membaui rumahnya, apabila
tikus autis pertumbuhan syaraf ini akan lambat
Dari hasil uji Kruskal Wallis dapat diketahui bahwa Nilai p-value
sebesar 0,027 < nilai kritik 0,05, karena itu Ho ditolak, bahwa terdapat cukup
bukti dimana terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap berat
badan dan dari hasil uji Kruskal Wallis dapat diketahui bahwa Nilai p-value
sebesar 0,046 < nilai kritik 0,05, karena itu H0 ditolak, bahwa terdapat cukup
bukti dimana terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap tingkat
kemampuan berenang. Pada gambar telihat bahwa
60
50
40
30
20
10
0

BB 1
BB 2
BB 3
Sehat

Sakit

Terapi

Gambar 3. Diagram Tes Berat Badan

4,5
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0

Skor 1
Skor 2
Skor 3

Sehat

Sakit

Terapi

Gambar 4. Diagram Skor Berenang

4.1.3

Hasil Uji Ketebalan Mukosa dan Muscle

Pada tabel 2 terlihat bahwa tikus kontrol negatif menunjukkan
ketebalan mukosa dan muscle pada ileum, lambung dan duodenum yang lebih
tebal dibandingkan dengan tikus P1, kemudian tikus yang diberikan kefir
kolostrum ketebalan mukosa dan muscle pada lambung, ileum dan duodenumnya
meningkat. Penurunan ketebalan mukosa dan muscle pada lambung, ileum dan
duodenum tikus yang diberikan VPA tanpa pemberian kefir disebabkan karena
tikus mengalami penyakit leaky gut syndrome. Hal ini sesuai dengan Kim (2013),
yang menyatakan bahwa di stomach dan ileum, ketebalam mukosa dan muscle
menurun secara dengan signifikat, penurunan ketebalan ini mungkin hasil dari
peningkatan permeabilitas dan vulnerability to external attacs. Tikus yang
diberikan kefir kolostrum memiliki ketebalan mukosa dan muscle pada lambung,
ileum dan duodenum mendekati tikus normal, hal ini menunjukkan bahwa kefir
kolostrum dapat munurunkan peningkatan permeabilitas yang artinya mengurangi
kondisi leaky gut syndrome.
Dari hasil uji ANOVA dapat diketahui bahwa Nilai p-value sebesar
0,027 < nilai kritik 0,05, karena itu Ho ditolak, bahwa terdapat cukup bukti
dimana terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap ketebalan
muscle lambung dan dari hasil uji ANOVA dapat diketahui bahwa Nilai pvalue sebesar 0,549 > nilai kritik 0,05, karena itu H0 diterima, bahwa terdapat
cukup bukti dimana tidak terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan
terhadap ketebalan mukosa lambung. Dari hasil uji ANOVA antar ketebalan
mukosa dan muscle pada ileum dan duodenumtikus dapat diketahui bahwa Nilai
p-value sebesar 0,000 < nilai kritis 0,05, karena itu Ho ditolak, bahwa terdapat
cukup bukti dimana terdapat perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap
ketebalan mukosa dan muscle pada ileum tikus
Pada tabel 2 terlihat bahwa tikus kontrol negatif menunjukkan
ketebalann mukosa dan muscle pada jejenuum yang lebih tebal dibandingkan

dengan tikus P1, kemudian tikus yang diberikan kefir kolostrum ketebalan
mukosa dan musclenya sangat rendah, pemberian kefir kolostrum belum dapat
meningkatkan ketebalan jejenum. Hal ini sesuai dengan Wresdiyati (2013) yang
menyatakan bahwa ukuran jejenum yang lebih panjang sehingga paparan bakteri
cenderung lebih lama didalam jejenum selain itu, jejenum memiliki regenerasi sel
epitel vili yang lebih lambat bila dibandingkanduodenum dan ileumsehingga
eliminasi bakteri cenderung lebih lambat dalam jejenum.
Dari hasil uji ANOVA antar ketebalan mukosa dan muscle pada
jejenum tikus dapat diketahui bahwa Nilai p-value sebesar 0,000 < nilai kritis
0,05, karena itu Ho ditolak, bahwa terdapat cukup bukti dimana terdapat
perbedaan dari ketiga kelompok perlakuan terhadap ketebalan mukosa jejenum
tikus
200
180
160
140
120
100
80
60
40
20
0

Sehat
Sakit
Terapi

TMsL

TMsD

TMsJ

TMsI

Gambar 5. Diagram Ketebalan Muscle Organ

Keterangan TMsL;Tebal Muscle Lambung TMsD;Tebal Muscle Duodenum
TMsJ;Tebal Muscle Jejenum TMsI ;Tebal Muscle Ileum. Biru merupakan
Perlakuan Kontrol Negatif (sehat);Merah merupakan perlakuan kontrol psitif
(sakit);hijau merupakan perlakuan terapi kefir kolostrum.
900
800
700
600
500

Sehat

400

Sakit

300

Terapi

200
100
0
TMuL

TMuD

TMuJ

TMuI

10

Gambar 6. Grafik Ketebalan Mukosa Organ

Keterangan TMuL;Tebal Mukosa Lambung TMuD;Tebal Mukosa Duodenum
TMuJ;Tebal Mukosa Jejenum TMuI ;Tebal Mukosa Ileum. Biru merupakan
Perlakuan Kontrol Negatif (sehat);Merah merupakan perlakuan kontrol psitif
(sakit);hijau merupakan perlakuan terapi kefir kolostrum.
4.2
Potensi Khusus
Dengan adanya kefir kolostrum maka masalah yang berkaitan dengan
Leaky Gut Syndrome dan ASD dapat diatasi, Jurnal Ilmiah, Seminar Nasional dan
Hak Paten.
BAB 5 PENUTUP
5.1
Kesimpulan
1. Pemberian valproic acid berpengaruh terhadap leaky gut syndrome
2. Pemberian kefir kolostrum berpengaruh terhadap leaky gut syndrome
3. Penyimpanan kolostrum yang terlalu lama berpengaruh terhadap kadar
IgG
5.2
Saran
Untuk penelitian selanjutnya digunakan variable yang lebih banyak untuk
diagnosa leaky gut syndrome.
DAFTAR PUSTAKA
Bruce, CE. 1969 Natural History, , Feb. Dr. C. E. Bruce demonstrates that
humancontains only 2% IgG (the bodys most important immunoglobulin)
whilecontained a phenomenal up to 20 times that amount.
Camilleri, M., et al. Intestinal barrier function in health and gastrointestinal
disease. Neurogastroenterology and Motility Vol. 24, No. 6 (2012): 503
512.
Esfandiari A, Wibawan IWT, Murtini S, Widhyari SD, Prasetyo BF.
2008.Produksi Kolostrum Antivirus Avian Influenza Dalam
RangkaPengendalian Inveksi Virus Fluburung. Jurnal Ilmu Pertanian
Indonesia.13(2): 69-79.
Fasano, A. Leaky gut and autoimmune diseases. Clinical Reviews in Allergy &
Immunology Vol. 42, No. 1 (2012): 7178
Ratnawati, H.2003.Leaky Gut sebagai Penyebab Gangguan Gastrointestinalpada
ASD JKM. 2(2): 42-55
Resnick, C. 2010. Nutritional Protocol for the Treatment of Intestinal
Permeability Defects and Related Conditions. Natural Medicine Journal
2(3) :14-23.
Research Center for Nutritional Research. www.centerfornutritionalresearch.org:
diakses pada 19 september 2014 pukul 11:02 am.

11

LAMPIRAN
Lampiran 1 Keberhasilan Program
Tabel 3. Indeks keberhasilan program
Kegiatan

Proporsi

Tercapai

Belum Tercapai

Persiapan

5%

5%

Membuat
kandang tikus

5%

5%

Membuntingk
an tikus

10 %

10 %

Memberikan
obat valproic acid

10 %

10 %

10 %

10 %

10 %

10 %

Membuat
kefir
Menganalisa
konsentrasi IgG
Membuat
laporan kemajuan

5%

5%

Memberikan
kefir kolostrum pada
anak tikus

10 %

10 %

Menganalisa
pengaruh VPA

10%

10 %

Menganalisa
pengaruh kefir
kolostrum

10 %

10 %

Tabulasi data

6%

6%

Hak paten

5%

5%

Publikasi
ARtikel

2%

2%

Membuat
laporan akhir

2%

2%

12

Jumlah

100 %

100 %

Belum terlaksana
Terlaksana

Gambar 7. Diagram Prosentase

100 % sudah terlaksana

0 % belum terlaksana

Lampiran 2 Penggunaan Dana

Tabel 4. Rincian Biaya
No Tanggal
1
24
Februari
2015
29
Februari
2015
2
26
Februari
2015
8 April 2015

10 April 2015

13 April 2015

14 April 2015

6
7

14 April 2015
14 April 2015

14 April 2015

15 April 2015

Uraian
Pemasukan
Dana
9.652.000.
Universitas
Pembelian
pulsa modem
Pembelian
logbook
Foto kopi +
print
dan
penjilidan
proposal
Pembelian
bahan kandang
Pembelian
tikus
Pembelian
tupperwaare
bensin
Pembelian
kolostrum
Pembuatan
kefir
Pembelian

Pengeluaran Saldo
9.652.000
35.000

9.617.000

100.000

9.517.000

18.000

9.499.000

300.000

9.199.000

300.000

8.899.000

128.000

8.771.000

31.000
50.000

8.740.000
8.690.000

50.000

8.640.000

67.000

8.573.000

13

10
11

16 April 2015
22 April 2015

12

23 April 2015

14

4 Mei 2015

15

8 Mei 2015

16

9 Mei 2015

17

10 Mei 2015

18

10 Mei 2015

19

20 Mei 2015

20

20 Mei 2015

21

23 Mei 2015

22

04 juni 2015

23

05 juni 2015

24

06 juni 2015

valproic acid
ke 1
Test IgG
Pembelian
valproic acid
ke 2
Print+fotocopy
proposal dan
jurnal
Pembuatan
etik
Membeli kue
untuk
rapat
monev univ
Membeli nasi
bungkus
sebelum
monev univ
Pembelian
handspon dan
masker
Konsumsi
anggota
Prin
dan
fotocopy
laporann
kemajuan
Membeli
kolostrum
Membeli
peralatan
kandang
penampung
urine
Membeli
mannitol
Konsumsi
anggota
Transportasi
survey
lab
untuk
test

50.000
200.000

8.523.000
8.323.000

33.600

8.289.400

250.000

8.039.400

30.000

8.009.400

40.000

7.969.400

87.000

7.882.400

31.500

7.850.900

48.000

7.802.900

100.000

7.702.900

45.000

7.657.900

16.000

7.641.900

22.000

7.619.900

23.000

7.596.900

14

25

06 juni 2015

26
27
28
29
30
31

07 juni
08 juni
09 Juni
10 juni
10 juni
10 juni
15 juni
16 juni
13 juli
10 juli
11 juli
13 juli

13 juli
12 juli
Jumlah

urine
Beli
lampu,handuk,
sabun
Beli etanol
Beli etanol
Beli etanol
Scan nota
Transportasi
Konsumsi
Print
Jurnal
dan Fotocopy
Beli kolostrum
Tes Histologi
Sewa Lab
Beli ojek glas
Pengamatan
preparat
Pengukuran
Transportasi

75.000

7.521.900

30.000
30.000
30.000
25.000
50.000
50.000
54.000

7.491.900
7.461.900
7.431.900
7.406.900
7.356.900
7.306.900
7.252.900

100.000
2.500.000
3.500.000
500.000
300.000

7.152.900
4.652.900
1.152.900
652.900
352.900

300.000
50.000
9.649.100

52.900
2.900
2.900

Lampiran 3 Data Pendukung Kegiatan

Diskusi Anggota

Membuat Kandang

15

Pembelian bahan-bahan kefir

Pembuatan Kefir

Menganalisa IgG

Pembuntingan

16

Memberi makan tikus

Menimbang tikus

Membeli valproic acid di RSSA

Pemberian valproic acid

Laboratorium kimia analisis

POLINEMA menanyakan isolasi IgG

Toko bahan kimia membeli botol fil

Pembuatan Etik

Ke apotik menanyakan obat valproic acid

17

Membuat kandang penampung urin

Memberikan kolostrum

18

Melakukan tes offspring

Melakukan tes renang

Melakukan bimbingan

19

Stomach
Sehat

Sakit

Terapi

Duodenum
Sehat

Sakit

Terapi

20

Jejenum
Sehat

Sakit

Terapi

Ileum
Sehat

Sakit

Terapi

21

Kruskal-Wallis Test Skor Renang

Ranks
PERL
AKU
AN

Mean Rank

SKOR 1

2.17

7.00

5.83

Total

Test Statisticsa,b
SKOR
Chi-Square

6.168

df

Asymp.
Sig.

.046

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable:
PERLAKUAN
Kruskal-Wallis Test Berat Badan
Ranks
PERLAKU
AN
BB

Mean Rank

PEMBERIA
N

2.00

TANPA

8.00

TERAPI

5.00

Total

Test Statisticsa,b
BB
Chi-Square

7.261

22

df

Asymp.
Sig.

.027

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable:
PERLAKUAN

One Way ANOVA Ketebalan Muscle

Oneway

Descriptives
95% Confidence Interval
for Mean
Std.
N
TMsL

TMsD

TMsJ

TMsI

Mean

Deviation

Upper
Std. Error Lower Bound

Bound

Minimum

Maximum

sehat

3 1.7974E2

4.33381

2.50213

168.9742

190.5058

175.96

184.47

sakit

3 1.4730E2

4.41158

2.54703

136.3444

158.2623

143.59

152.18

terapi

3 1.8058E2

14.88352

8.59301

143.6039

217.5494

165.08

194.76

Total

9 1.6921E2

18.30122

6.10041

155.1391

183.2742

143.59

194.76

sehat

58.5500

3.75324

2.16693

49.2264

67.8736

54.23

61.01

sakit

34.1400

13.57550

7.83782

.4166

67.8634

20.00

47.07

terapi

82.9033

1.66689

.96238

78.7625

87.0441

81.01

84.15

Total

58.5311

22.27419

7.42473

41.4097

75.6526

20.00

84.15

sehat

73.5200

2.16998

1.25284

68.1295

78.9105

71.24

75.56

sakit

66.0667

2.29901

1.32733

60.3556

71.7777

63.85

68.44

terapi

60.1933

.77261

.44607

58.2741

62.1126

59.46

61.00

Total

66.5933

6.00865

2.00288

61.9747

71.2120

59.46

75.56

sehat

65.9000

3.28830

1.89850

57.7314

74.0686

62.17

68.38

sakit

45.3167

3.40014

1.96307

36.8703

53.7631

42.15

48.91

terapi

62.5933

2.17045

1.25311

57.2016

67.9850

60.81

65.01

Total

57.9367

9.92006

3.30669

50.3114

65.5619

42.15

68.38

23

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic

df1

df2

Sig.

TMsL

2.213

.191

TMsD

3.172

.115

TMsJ

1.052

.406

TMsI

.393

.691

ANOVA
Sum of Squares
TMsL

Between Groups

1079.976

519.526

86.588

Total

2679.478

Between Groups

3566.796

1783.398

402.319

67.053

3969.115

267.648

133.824

21.182

3.530

Total

288.831

Between Groups

733.091

366.545

54.169

9.028

787.260

Within Groups
Total
TMsJ

Between Groups
Within Groups

TMsI

Mean Square

2159.952

Within Groups

TMsD

df

Within Groups
Total

Sig.

12.473

.007

26.597

.001

37.906

.000

40.600

.000

Oneway ANOVA Ketebalan Mukosa

Oneway
Descriptives
95% Confidence Interval
for Mean
Std.
N
TMuL

TMuD

Mean

Deviation

Upper
Std. Error Lower Bound

Bound

Minimum

Maximum

sehat

3 7.5746E2

29.41908 16.98511

684.3790

830.5410

725.50

783.41

sakit

3 7.3988E2

33.78269 19.50444

655.9592

823.8008

701.78

766.18

terapi

3 7.6670E2

21.29492 12.29463

713.8038

819.6028

743.96

786.17

Total

9 7.5468E2

27.46461

9.15487

733.5699

775.7923

701.78

786.17

sehat

3 5.2110E2

9.29711

5.36769

498.0014

544.1920

510.88

529.06

sakit

3 2.6994E2

26.06268 15.04730

205.2000

334.6866

251.56

299.77

24

TMuJ

TMuI

terapi

3 6.7470E2

4.43316

2.55949

663.6841

685.7093

670.17

679.03

Total

9 4.8858E2

177.50596 59.16865

352.1357

625.0220

251.56

679.03

sehat

3 7.8577E2

12.91370

7.45573

753.6906

817.8494

774.40

799.81

sakit

3 5.3814E2

17.38284 10.03599

494.9620

581.3247

526.16

558.08

terapi

3 4.8507E2

4.21466

466.9391

503.2075

476.83

490.72

Total

9 6.0300E2

139.46250 46.48750

495.7952

710.1959

476.83

799.81

sehat

3 6.5257E2

10.27446

5.93196

627.0502

678.0965

640.73

659.10

sakit

3 5.6272E2

16.37893

9.45638

522.0358

603.4108

545.77

578.46

terapi

3 6.2461E2

11.21101

6.47268

596.7637

652.4630

613.49

635.91

Total

9 6.1330E2

41.35849 13.78616

581.5124

645.0943

545.77

659.10

7.30000

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic

df1

df2

Sig.

TMuL

.512

.623

TMuD

6.464

.032

TMuJ

1.698

.260

TMuI

.301

.751

ANOVA
Sum of Squares
TMuL

TMuD

1113.987

556.993

Within Groups

4920.451

820.075

Total

6034.438

250496.218

125248.109

1570.705

261.784

Total

252066.923

Between Groups

154553.876

77276.938

1044.434

174.072

155598.310

12685.156

6342.578

999.041

166.507

13684.197

Between Groups

Within Groups
Total
TMuI

Mean Square

Between Groups

Within Groups

TMuJ

df

Between Groups
Within Groups
Total

Sig.
.679

.542

478.440

.000

443.936

.000

38.092

.000