Obinerea biofungicidelor;
Nr.
crt.
Tulpina
Notaia de
lab.
Poveniena
1.
Botrytis cinerea
F37
2.
Botrytis cinerea
F38
3.
Botrytis cinerea
F39
4.
Botrytis cinerea
F47
5.
Penicillium sp.
F40
6.
Penicillium sp.
F42
7.
Penicillium sp.
F43
8.
Penicillium sp.
F45
9.
Penicillium sp.
F46
Fig. 1
Atac de Botrytis cinerea
pe cpuni
Fig. 2
Caise infectate cu
Monilinia laxa, M. fructigena,
Penicillium sp., Rhizopus sp.
Fig. 3
Mandarin infectat
cu Penicillium italicum
Fig. 4
Portocal infectat cu
Penicillium digitatum
Fig. 5
Lmie infectat cu
Penicillium italicum
Fig. 6
Botrytis cinerea
(400 x)
Fig. 7
Penicillium digitatum
(400 x)
Fig. 8
Penicillium expansum
(400 x)
Fig. 9
Penicillium italicum
(400 x)
Nr.
Crt.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces cerevisiae var. ellipsiodeus
Saccharomyces chevalieri
Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces florentinus
Pichia membranaefaciens
Kloeckera apiculata
Saccharomyces sp.
Candida glabrata
Candida tropicalis
Candida guilliermondii
Candida sp.
Candida guilliermondii
Saccharomyces sp.
Metschnikowia pulcherrima
Metschnikowia pulcherrima
17.
Saccharomyces chevalieri
L30 (Sch)
18.
S. cerevisiae
17/17
19.
20.
21.
S. cerevisiae
S. cerevisiae
S. cerevisiae
9744C
10701C
SMR4
Microorganisme
Notaia de
laborator
L2
L8
L9
L12
L13
L16
L17
L18
L20 (182)
L21
L24
L25
L26
L27
L28 (SG2)
L29 (SG1)
Proveniena
U.S.A.M.V.-Bucureti, Conf.dr.Mirela Burcea
U.S.A.M.V.-Bucureti, Conf.dr.Mirela Burcea
U.S.A.M.V.-Bucureti, Conf.dr.Mirela Burcea
U.S.A.M.V.-Bucureti, Conf.dr.Mirela Burcea
U.S.A.M.V.-Bucureti, Conf.dr.Mirela Burcea
U.S.A.M.V.-Bucureti, Conf.dr.Mirela Burcea
U.S.A.M.V.-Bucureti, Conf.dr.Mirela Burcea
U.S.A.M.V.-Bucureti, Conf.dr.Mirela Burcea
I.C.C.F.-Bucureti
I.C.C.F.-Bucureti
I.C.C.F.-Bucureti
I.C.C.F.-Bucureti
I.C.C.F.-Bucureti
Izolate proprii (portocal)
Izolate proprii (bace de struguri)
Izolate proprii (bace de struguri)
I.C.D.P.P.-Bucureti,
Ing.dr. Liliana Aurora tefan
Lab. de Genetic al Fac. de Biologie
Prof. dr. Tatiana Vassu
Prof. dr. Tatiana Vassu
Prof. dr. Tatiana Vassu
Prof. dr. Tatiana Vassu
Fig. 10
Metschnikowia pulcherrima
L28 (400 x):
Celule vegetative i asc cu ascospor
Fig. 11
Metschnikowia pulcherrima
L29 (400 x)
Celule vegetative i asc cu ascospor
Fig. 12
Fermentarea glucidelor:
glucoz, sucroz, maltoz, trehaloz, lactoz
Fig. 13
Dezvoltarea la 4 grade Celsius
Fig. 14
YNB fr
surs de
carbon
Fig. 15
YNB cu
sucroz
Fig. 16
YNB cu
glicerol
Fig. 17
YNB cu
galactoz
Fig. 18
YNB cu
manitol
Fig. 19
YNB cu
celobioz
L29
Saccharomyces
cerevisiae 208
Pichia
anomala
L33
YNB cu
galactoz
YNB cu manitol
YNB cu
celobioz
YNB cu amidon
YNB cu
trehaloz
Acetat de
potasiu
Mediul
Saccharomyces
chevalieri L30
Saccharomyces
chevalieri L9
L28
YNB fr glucide
YNB cu sucroz
YNB cu glicerol
Fig. 20
Rezultatele testului Auxacolor 2:
Tulpina L28
Fig. 21
Rezultatele testului Auxacolor 2:
Tulpina L29
Tulpina
Martor
GLU
MAL
SAC
GAL
LAC
RAF
INO
L28
L29
Tulpina
CEL
TRE
ADO
MEL
XYL
ARA
HEX
POX/PR
O
L28
L29
Glu= glucoz, Mal= maltoz, Sac= zaharoz, Gal= galactoz, Lac= lactoz, Raf= rafinoz, Ino= inozitol,
Cel= celobioz, Tre= trehaloz, Ado= adonitol, Mel= melezitoz, Xyl= xiloz, Ara= arabinoz, Hex= Nacetil-galactozaminidaza (hexozaminidaza), Pox= fenoloxidaza, Pro= prolin-arilamidaza.
Fig. 22
1 zi (fa; verso)
Fig. 23
5 zi (fa; verso)
Fig. 24
10 zi (fa; verso)
Fig. 25
25 zi (fa; verso)
Fig. 26
30 zi (fa; verso)
Nr.
crt.
Tulpini de levuri
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
F40
F42
F43
F45
F46
++
++
++
++
++
+
+
++++
++++
++
++
++
++
++
++
+
+
++++
++++
++
++
++
++
++
++
+
+
++++
++++
++
++
++
++
++
++
+
+
++++
++++
++
++
++
++
++
++
+
+
++++
++++
++
-= nu inhib deloc; + = inhib foarte puin; ++ = inhib moderat; +++ = inhib bine; ++++ = inhib foarte bine
Nr.
crt.
Levuri
anta
goniste
F40
F42
F43
F45
F46
1.
L2
36
35
36
35
36
60
40,6
2.
L8
36
34
35
34
37
60
41,3
3.
L9
33
34
37
35
36
60
41,6
4.
L12
36
37
35
37
36
60
39,6
5.
L18
34
35
36
34
35
60
42
6.
L20
46
50
48
48
50
60
19,3
7.
L26
50
47
46
50
49
60
20,3
8.
L28
12
11
10
12
11
60
81,3
10
12
12
10
11
60
82
36
34
35
35
36
60
41,3
9.
10.
L29
L30
E
(%)
unde:
E(%)= eficacitatea (%)
martor = diametrul coloniilor martor (mm)
interaciune = diametrul coloniei patogenului
n urma interaciunii cu antagonistul (mm).
s produc substane eficace i stabile chiar dac se cultiv pe un substrat mai sarac
pe care
s aib valorile optime ale temperaturii, pH-ului i umiditii diferite de cele ale
patogenului;
Mediul de cultur
mediul cu decoct de porumb
mediul Weindling
mediul Czapek
mediul mal-agar
mediul YM Agar
mediul YM Lichid
mediul cu ape glicerinoase din uleiuri vegetale (25%; 50%;
100%)
mediul cu ape glicerinoase din grsime tehnic (25%; 50%;
100%)
48 ore
15,4
12,1
0,1
10,7
20,8
22,2
72 ore
15,8
12,3
0,2
10,8
22,6
30,4
28,1
33,8
28,0
33,8
Biomasa umed*
levuri (g/l)
Biomasa uscat*
levuri (g/l)
29,92 1,64
7,75 0,74
Bioreactor 3 litri (5 l)
30,15 2,21
7,84 0,93
29,64 2,26
7,56 0,87
Temperatura (oC)
25
21,17 0.84
4,620,57
28
28,72 1,66
6,67 0,61
30
24,47 1,04
5,74 0,69
Rata de aerare
(l aer/l mediu/min)
Biomasa
umed* (g/l)
Biomasa
uscat* (g/l)
0,50
10,23 1,37
3,42 0,42
0,75
11,35 1,08
3,94 0,37
1,00
12,41 1,67
4,42 0,54
1,25
12,67 1,22
4,58 0,48
1,50
11,88 1,16
3,87 0,35
Ingredient
Pri
Biomas
1,0
Alcool polivinilic
0,2
Carboximetilceluloz sodic
0,2
Lecitin
0,2
Dispersil
0,2
Acid citric
0,2
Dextroz
1,5
Celuloz
0,3
Nr.
crt.
Varianta
experimental
Numr levuri
viabile (ufc/g)
Suspendabilitate (%)
Umectabilitate (min)
Azot aminic
(%)
1.
1,22x108
93
<1
4,3
2.
1,20x108
94
<1
4,5
3.
1,17x108
93
<1
4,6
4.
biopreparat realizat la
nivel de laborator
1,7x108
92
<1
4,7
Suspendabilitate = 5-(m2-m1)/5*111
n care:
m1 - masa (tara) capsulei de cntrire;
m2 - masa capsulei i a suspensiei adugate;
5 - masa de produs luat iniial n lucru
Nr. crt.
Caracteristici
Metoda de analiz
Condiii de admisibilitate
1.1.
Tehnic original
1.2.
Impuriti
Tehnic original
1.3.
Umiditate
SR ISO 760:1994
1.4.
Suspendabilitate
CIPAC MT 15.1.
1.5.
Spum persistent
CIPAC MT 42.2.
1.6.
Umectabilitate
CIPAC
1.7.
Reziduu pe sit
CIPAC MT 59.1.
1.8.
Stabilitate la pstrare la
temperatura camerei
CIPAC MT 46.1.
1.9.
pH-ul suspensiei
CIPAC MT 59.1.
7,0 0,5 pH
1.10.
Caracteristici microbiologice
1.10.1
Metod original
1.10.2
Microorganisme
fitopatogene
Metod original
Lips
Prevenirea atacului produs de Botrytis cinerea prin mijloace biologice n planta.ia de cpun S.C.D.P. Bucureti
Soiul
Favette
Hood
Cardinal
Pandora
Concen
traia
spori/ml
%
GA%
E%
GA%
E%
GA%
E%
GA%
E%
Biofungicid
(suspensie levuri L28)
2 x 106
3,6
81,0
4,2
82,2
5,1
76,8
6,9
85,3
6 x 106
3,1
83,7
3,4
85,6
4,7
78,6
6,5
86,1
Biofungicid
(suspensie levuri L29)
2 x 106
4,1
78,4
4,9
79,2
8,3
62,3
13,7
69,5
6 x 106
3,9
79,5
4,5
80,9
4,6
79,1
7,1
84,9
Biofungicid
(suspensie levuri L30)
2 x 106
3,8
80,0
5,3
77,5
6,8
69,1
12,8
72,8
6 x 106
3,3
82,6
2,6
88,5
5,9
73,1
10,2
78,3
Biofungicid
(suspensie levuri L28
i L29)
2 x 106
2,9
84,7
3,1
86,9
3,1
85,9
8,2
82,5
6 x 106
2,5
86,8
2,3
90,2
2,4
89,1
6,5
86,2
Topsin M70
0,07
2,4
89,1
2,1
91,1
1,4
93,6
2,3
95,7
Plante netratate
19,0
23,6
22,0
47,0
Varianta
DL 5%
0,9
1,6
2,3
3,1
DL 1%
1,2
2,3
3,2
4,2
Fig. 29
Fructe tratate depozitate
Fig. 30
Fructe netratate depozitate
48 ore
Fig. 31
Fructe tratate depozitate
10 zile
Fig. 32
Caise netratate depozitate la 4 C dup 7 zile
Fig. 33
Caise tratate dup depozitare la 4 C 20 de zile
Rezultatele
experimentelor
realizate
enunarea mai multor concluzii generale.
ne-au
permis
evaluarea
antagonismului
levuri-fungi
filamentoi de depozit a evideniat faptul c
tulpinile de levuri izolate de pe bace de
struguri L28, L29 au manifestat un efect
antifungic puternic fa de fungii de depozit
din genul Penicillium sp. i Botrytis cinerea;
obinere
mediul cel mai favorabil selectat pentru obinerea de biomas este mediul cu ape
glicerinoase;
s-a constatat efectul de sinergism dintre tulpinile L28 i L29 ale speciei Metschnikowia
pulcherrima, eficacitile obinute n amestec depindu-le pe cele obinute atunci cnd
tulpinile au fost utilizate separat;
fructele de cpun ncadrate n grupa excesiv de perisabile netratate postrecoltare sau depreciat cantitativ i calitativ dup 48 ore de pstrare la temperatura de 4C;