Métodos e Técnicas em Biologia Molecular

Departamento de Zoologia, Universidade de Coimbra

Visualização de células HeLa em

mitose: marcação da Tubulina e do DNA

Células HeLa coradas

artificialmente em laboratório
 Tópicos abordados neste trabalho

 O que são células HeLa?

 Fases do ciclo celular: em mitose

 Corantes utilizados para a visualização da β-tubulina e

do DNA.
Células HeLa
 * Henrietta Lacks (1920-1951), foi a doadora involuntária de
uma cultura de células cancerígenas, mais conhecidas
como HeLa, muito utilizadas em pesquisas médicas.

As células HeLa foram aproveitadas quando a

senhora Lacks recebia tratamento para o
cancro no colo do útero. Este cancro produzia
metástases anormalmente rápidas.

* Após a morte de Henriette Lacks, as suas células continuaram a ser aproveitadas para
estudo devido há sua impressionante longevidade.

* São distribuidas por vários laboratórios em todo o mundo.

* As células HeLa são chamadas de imortais por se dividirem num número ilimitado de vezes,
desde que mantidas em condições ideais de laboratório.
Ciclo Celular
* MITOSE: é o processo que permite que um núcleo se divida originando dois
núcleos - filhos, cada um contendo uma cópia de todos os cromossomas do núcleo
original.
Assim, a partir de uma célula - mãe formam-se duas células - filhas, idênticas à
célula - mãe e idênticas entre si.

Fases do ciclo celular:

Profase:
* É a etapa mais longa da mitose.
* Os cromossomas enrolam-se, tornando-se progressivamente mais
condensados, curtos e grossos.
* No final da profase o nucleolo desaparece e o invólucro nuclear
desagrega-se.

Metafase:
* Os cromossomas apresentam a sua máxima condensação
* Os cromossomas, ligados ao fuso acromático e dispõem-se no
plano equatorial da célula, formando a chamada placa equatorial.
Anafase:
* Verifica-se o rompimento do centrómero, separando-se os
cromatídeos que constituíam cada um dos cromossomas.
* Os cromossomas iniciam a ascensão polar ao longo das fibrilas
das microtúbulos
* No final da anafase cada pólo da célula possui um conjunto de
cromossomas, constituídos por um só cromatídeo, exactamente
igual.

Telofase:
* Inicia-se a organização dos núcleos – filhos.
* Forma-se um invólucro nuclear em torno dos
cromossomas de cada núcleo filho.
* Os cromossomas iniciam um processo de descondensação.
* As fibrilas do fuso acromático desorganizam-se
* A mitose termina.
Proteínas de fluorescência:

* Através de marcações com proteínas

fluorescentes, podemos fazer com que a
célula passe a ter uma proteína semelhante a
uma das proteínas endógenas a emitir
fluorescência.