I.

MATERI DAN METODE

Pada praktikum ini dilakukan pewarnaan terhadap bakteri yang telah diisolasi
pada praktikum sebelumnya dengan pewarnaan langsung, pewarnaan tak
langsung, dan pewarnaan Gram terhadap bakteri Klebsiella, E. Coli, Bacillus,
Staphylococcus, Pseudomonas dan Enterococcus. Kaca objek ditetesi dengan air
steril, kemudian diapuskan secara merata bakteri dengan menggunakan jarum ose
yang telah dipijarkan. Fiksasi dilakukan di atas nyala api bunsen. Pada pewarnaan
Gram digunakaan pewarna meteline blue dan didiamkan selama 2 menit,
kemudian dicuci dengan air suling. Ditambahkan lugol dan didiamkan selama 1
menit. Kaca objek dihapus dengan alkohol 96% lalu dicuci dengan air suling.
Ditambahkan larutan safranin, kemudian didiamkan 10 menit. Kaca objek dicuci
dengan air suling dan dikeringkan di atas nyala api bunsen. Pada pewarnaan
langsung digunakan meteline blue dan didiamkan 1 menit, dicuci dengan air
suling kemudian difiksasi. Pada pewarnaan tak langsung digunakan tinta cina.
Bakteri disuspensikan pada tinta cina dengan cara diratakan dengan kaca objek
lain dengan sudut 45o, kemudian difiksasi. Semua bakteri diamati di bawah
mikroskop dengan perbesaran 10 x hingga 100 x dan ditambahkan dengan minyak
emersi. Bentuk sel bakteri yang diamati dicatat dan digambar.