BIOETANOL DARI LIMBAH NANAS

Limbah nanas diproduksi dalam jumlah besar di seluruh dunia dengan

pengalengan industri. Limbah ini kaya akan gula intraseluler dan dinding sel
tanaman yang terutama terdiri dari selulosa, hemiselulosa dan zat pectic .Tujuan
dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki potensi untuk mengubah residu tersebut
menjadi etanol setelah sakarifikasi enzimatik dinding sel tanaman, dan fermentasi
gula sederhana yang dihasilkan dengan menggunakan Saccharomyces cerevisiae
NCYC 2826 regangan. Tiga mode fermentasi berbeda, fermentasi langsung, hidrolisis
dan fermentasi terpisah, dan sakarifikasi dan fermentasi simultan dari biomassa diuji
dan dibandingkan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa gula utama yang diperoleh
dari limbah nanas adalah: glukosa, asam uronic, xylose, galaktosa, arabinosa dan
manosa. Hasil etanol tertinggi dicapai setelah 30 jam sakarifikasi dan fermentasi
simultan, dan mencapai hingga 3,9% (v / v), sesuai dengan 96% dari hasil teoritis.
Dalam penelitian ini hanya kulit dan inti digunakan untuk tes fermentasi. Tes
fermentasi dilakukan dalam 2,5 L bets fermentor (LH fermentasi 2000 Series).
Fermentor dilengkapi dengan satu turbin rushton empat berbilah, dan sistem kontrol
yang umum: suhu, pH, CO2 detektor dan meter aliran massa gas. Limbah nanas,
yang terdiri dari kulit buah dan inti, yang homogen dalam blender buah. Homogenat
yang dihasilkan, dengan kandungan bahan kering 14% diencerkan dengan air untuk
bahan kering 9%, dalam volume kerja 1,5 L dan dimasukan di 100 C selama 10
menit di bawah pencampuran terus menerus untuk menonaktifkan enzim endogen
dan mengurangi pembusukan mikroba.
Tiga proses yang berbeda yang digunakan untuk mendapatkan bioetanol:
fermentasi langsung (DF) dari biomassa dicampur diikuti dengan penambahan
enzim; hidrolisis terpisah dan fermentasi (SHF); sakarifikasi simultan dan fermentasi
(SSF). Untuk DF dari biomassa dicampur, dengan kandungan bahan kering 9,2%, 20
ml S. inokulum cerevisiae (107 sel per ml) ditambahkan ke medium. Pengujian
dilakukan pada 30 C pada 200 rpm. pH sebelumnya disesuaikan dari 3,8 hingga 4,5
menggunakan 2 M NaOH. Setelah 12 jam media itu dilengkapi dengan 20 ml / g
bahan kering DepolTM 740 L dan 250 ml / g bahan kering dari Accellerase 1500
enzim, menjaga parameter fermentasi yang sama.
Untuk fermentasi SHF, sakarifikasi 8,5% biomassa bahan kering, dilakukan
dengan menggunakan sel-dinding yang sama merendahkan enzim, seperti di atas,
selama 2 jam pada 50 C dan pH 5, disesuaikan dengan menggunakan NaOH 2 M,
dengan pengadukan konstan pada 500 rpm. Setelah 6 jam dicerna substrat
didinginkan sampai 30 C dan pengadukan menurun menjadi 200 rpm. pH pada 4,5
tidak lanjut dikoreksi dengan penambahan alkali. Fermentasi dimulai dengan
penambahan 20 ml S.inokulum cerevisiae, sebagai sebelumnya.
Fermentasi SSF dilakukan bersama-sama menambahkan enzim dan kultur ragi
untuk substrat. Fermentasi parameter yang 30 C, pH 4,5, disesuaikan seperti di
atas, dan pengadukan konstan pada 200 rpm. Biomassa awal bahan kering adalah
9%. Evolusi CO2 diukur selama semua tes fermentasi menggunakan ADC Infra Red
CO2 Analyzer dan duplikat sampel kaldu ditarik dari bejana reaksi menggunakan
jarum suntik 20 ml: sampel untuk analisis etanol segera dibekukan pada -18 C
sampai analisis; sedangkan sampel untuk penentuan kelembaban, larut dan gula
larut dipanaskan pada 100 oC selama 6 menit untuk menonaktifkan enzim dan
kemudian dibekukan pada -18 C sampai dianalisis. Semua fermentasi dilakukan
sampai tidak ada fluktuasi CO2 lanjut diamati. pH tidak dikontrol dengan
penambahan alkali selama fermentasi, kedua limbah nanas dan fermentasi sampel
segar, dihitung sebagai beban stabil setelah 2 jam pada 110 C menggunakan
Mettler PM 200 dilengkapi dengan saldo Mettler LP16 IR.
Etanol diukur dengan HPLC. 500 sampel ml supernatan dari limbah nanas
fermentasi disentrifugasi selama 10 menit pada 500 rpm dan 20 C dalam 96 dalam
piring juga menggunakan Eppendorf Centrifuge 5810 R, kemudian disaring melalui

AcroPrepTM 0,2 m GHP Membran 96 Nah Filter Pelat menjadi 96 dalam piring koleksi
juga untuk lebih lanjut 10 menit pada saat yang sama kecepatan. Setelah piring
sentrifugasi ditutupi oleh tutup karet dan dimuat langsung ke Seri instrumen 200 LC
(Perkin Elmer, Seer Green, UK) dilengkapi dengan detektor indeks bias. Analisis
dilakukan dengan menggunakan Aminex HPX-87P kolom (Bio-Rad Laboratories Ltd,
Hemel Hempstead, Inggris) dengan pencocokan kolom guard beroperasi pada 65 C
dengan air ultra murni pada laju alir 0,6 mL / menit sebagai fase gerak. 2,9
Perhitungan Teoritis hasil (TY) dalam penelitian ini dihitung sebagai hasil etanol max
dalam kaitannya dengan bahan kering: 0,511 g alkohol per 1,0 g bahan kering.