PROGRAM STUDI TEKNOLOGI PANGAN FAKULTAS TEKNIK UNIVERSITAS PASUNDAN BANDUNG 2015
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
Enzim I (Uji Konsentrasi
I PENDAHULUAN Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Latar Belakang Percobaan, (2) Tujuan Percobaan, (3) Prinsip Percobaan, dan (4) Reaksi Percobaan. 1.1. Latar Belakang Percobaan Pada biokimia, substrat (bahasa Inggris: substrate) adalah molekul organik yang telah berada dalam kondisi siap/segera bereaksi, karena telah mengandung promoter. Keberadaan katalis akan mempercepat reaksi substrat menuju molekul produk, melalui reaksi kimiawi dengan energi aktivasi rendah yang membentuk senyawa intermediat. Walaupun demikian, tanpa katalis, sebuah substrat akan bereaksi menuju sebuah produk, segera setelah energi aktivasi reaksi kimia yang diarahkan oleh suatu promoter tercapai. (Anonim, 2015). Enzim mempunyai gugus bukan protein, jadi termasuk golongan protein majemuk. Enzim semacam ini (holoenzim) terdiri atas protein (apoenzim) dan suatu gugus bukan protein. Sebagai contoh enzim katalase terdiri atas protein dan ferriprototorfirin. Ada juga enzim yang terdiri atas protein dan logam. Misalnya askorbat oksidase adalah protein yang mnegikat tembaga. Gugus bukan protein ini yang dinamakan kofaktor ada yang terikat kuat pada protein, adapula yang tidak begitu kuat ikatannya. Gugus yang terikat kuat pada bagian protein, artinya yang sukar terurai dalam larutan disebut gugus prostetik., sedangkan yang tidak begitu kuat ikatannya, jadi yang mudah dipisahkan secara dialisis disebut koenzim (Poedjiadi, 2005). 1.2. Tujuan Percobaan Tujuan Uji Konsentrasi Substrat adalah untuk mengetahui pengaruh konsentrasi substrat terhadap kecepatan reaksi. 1.3. Prinsip Percobaan Prinsip dari percobaan Uji Konsentrasi Substrat adalah berdasarkan konsentrasi substrat yang dapat mempengaruhi kecepatan reaksi.
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
Enzim I (Uji Konsentrasi
1.4. Reaksi Percobaan
E+SES
E+P
Gambar 46. Reaksi Percobaan Uji Konsentrasi Substrat
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
Enzim I (Uji Konsentrasi
II METODE PERCOBAAN Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Bahan yang digunakan, (2) Pereaksi yang digunakan, (3) Alat yang digunakan, dan (4) Metode Percobaan. 2.1. Bahan yang digunakan Bahan yang digunakan dalam Uji Konsentrasi Substrat adalah urea, phenolptalein, katekol, dan ekstrak (kedelai, kentang dan apel). 2.2. Pereaksi yang digunakan Pereaksi yang digunakan dalam Uji Konsentrasi Substrat adalah substrat (Urea + PP, Katekol). 2.3. Alat yang digunakan Alat yang digunakan dalam Uji Konsentrasi Substrat adalah tabung reaksi, rak tabung reaksi dan pipet tetes.
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
Enzim I (Uji Konsentrasi
2.4. Metode Percobaan
Gambar 47. Metode Percobaan Uji Konsentrasi Substrat
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
3.1.
Enzim I (Uji Konsentrasi
III HASIL PENGAMATAN
Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Hasil Pengamatan, dan (2) Pembahasan. Hasil Pengamatan
Gambar 48. Hasil Pengamatan Uji Konsentrasi Substrat
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
Enzim I (Uji Konsentrasi
Tabel 15. Hasil Pengamatan Uji Konsentrasi Substrat
Ekstrak
Konsentrasi Enzim Ekstrak
Aquadest
Substrat
Hasil
25 tetes + 15 tetes 10 tetes Urea + pp ++ 5 tetes 20 tetes +++ 25 tetes +++ Kentan 15 tetes 10 tetes Katekol ++ g (B) 5 tetes 20 tetes + 25 tetes +++ Apel (C) 15 tetes 10 tetes Katekol ++ 5 tetes 20 tetes + (Sumber: Nugraheni WP dan Tsani Nur AF, Kelompok D, Meja 9, 2015) Keterangan: (+++) Enzim aktif bekerja (++) Enzim kurang aktif bekerja (+) Enzim tidak aktif bekerja Kedelai (A)
3.2.
Pembahasan Berdasarkan hasil pengamatan pada percobaan uji konsentrasi substrat dapat diketahui bahwa pada ekstak kedelai(A) dengan substrat urea enzim aktif bekerja pada pemberian 5 tetes ekstrak, pada ekstrak kentang(B) dengan substrat katekol enzim aktif bekerja pada pemberian 25 tetes ekstrak dan pada ekstrakapel(C) dengan substrat katekol, enzim aktif bekerja pada pemberian 25 tetes ekstrak. (Anonim, 2015). Hasil eksperimen menunjukan bahwa dengan konsentrasi enzim yang tetap, maka pertambahan konsentrasi substrat akan menaikkan kecepatan reaksi. Akan tetapi pada batas konsentrasi tertentu, tidak terjadi kenaikan kecepatan reaksi walaupun konsentrasi substrat diperbesar. Untuk dapat terjadi kompleks enzim substrat diperlukan adanya kontak enzim dengan substrat. Kontak ini terjadi pada suatu tempat atau bagian enzim yang disebut bagian aktif. Pada konsentrasi substrat rendah, bagian aktif enzim ini hanya
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
Enzim I (Uji Konsentrasi
menampung substrat sedikit. Bila konsentrasi substrat
diperbesar, makin banyak substrat yang dapat berhubungan dengan enzim pada bagian aktif tersebut. Dengan demikian konsentrasi kompleks enzim substrat makin besar dan hal ini menyebabkan makin besarnya kecepatan reaksi. (Poedjiadi, 2005).
Grafik 2. Konsentrasi Substrat Terhadap Kecepatan
Reaksi Enzim bermacam-macam jenisnya dan semuanya berguna dalam proses untuk mempercepat reaksi dalam tubuh karena enzim itu dapat menurunkan energi aktivasi pada proses emzimatis. Tingkat cepat lambatnya suatu reaksi dalam tubuh dipengaruhi oleh banyak hal. Sifat-sifat yang disoroti misalnya banyaknya substrat, banyaknya enzim, serta suhu. Semakin banyak jumlah substrat, maka reaksi tersebut akan semakin cepat juga. Semakin banyak enzim, jelas akan semakin cepat pula reaksi kimia yang berlangsung (Anonim, 2013). Enzim biasanya sangat spesifik terhadap reaksi yang ia kataliskan maupun terhadap substrat yang terlibat dalam reaksi. Bentuk, muatan dan katakteristik hidrofilik/hidrofobik enzim dan substrat bertanggung jawab terhadap kespesifikan ini. Enzim juga dapat menunjukkan tingkat stereospesifisitas,
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
Enzim I (Uji Konsentrasi
regioselektivitas, dan kemoselektivitas yang sangat tinggi.
(Anonim, 2015). Faktor kesalahan yang dapat terjadi kurang atau lebihnya konsentrasi pada saat pengenceran, kurang teliti dalam melihat perbedaan warna, tercampurnya pipet sampel 1 dan sampel lainnya, dan kesalahan pada saat cara pencampuran.
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
Enzim I (Uji Konsentrasi
IV KESIMPULAN DAN SARAN
Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Kesimpulan, dan (2) Saran. 4.1. Kesimpulan Berdasarkan hasil pengamatan pada percobaan Uji Konsentrasi Substrat dapat diketahui bahwa pada ekstak kedelai(A) dengan substrat urea enzim aktif bekerja pada pemberian 5 tetes ekstrak, pada ekstrak kentang(B) dengan substrat katekol enzim aktif bekerja pada pemberian 25 tetes ekstrak dan pada ekstrakapel(C) dengan substrat katekol, enzim aktif bekerja pada pemberian 25 tetes ekstrak. 4.2. Saran Saran dalam percobaan Uji Konsentrasi Substrat ini adalah sebaiknya praktikan lebih terliti dan berhati-hati lagi dalam melakukan percobaan, agar didapat hasil yang maksimal.
Laboratorium Biokimia Pangan
Substrat)
Enzim I (Uji Konsentrasi
DAFTAR PUSTAKA Anonim. 2013. Konsentrasi Substrat. http://www.scribd.com/ (Diakses: 12 April 2015). Anonim. 2015. Enzim. (Diakses: 12 April 2015).
LAMPIRAN UJI KONSENTRASI SUBSTRAT Lampiran 19. Hasil Pengamatan Uji Konsentrasi Substrat Konsentrasi Hasil Enzim Ekstrak Substrat Hasil I II Ekstrak Aquadest 25 tetes + +++ Kedelai Urea + 15 tetes 10 tetes ++ ++ (A) pp 5 tetes 20 tetes +++ + 25 tetes +++ ++ Kentang Kateko 15 tetes 10 tetes ++ +++ (B) l 5 tetes 20 tetes + + 25 tetes +++ + Kateko Apel (C) 15 tetes 10 tetes ++ ++ l 5 tetes 20 tetes + +++ Sumber : Hasil I : Nugraheni WP dan Tsani Nur AF, Kelompok D, Meja 9, 2015. Hasil II : Asisten Laboratorium Biokimia Pangan, 2015 Keterangan: (+++) Enzim aktif bekerja (++) Enzim kurang aktif bekerja (+) Enzim tidak aktif bekerja
