PERCOBAAN 3

UJI SEL DIFUSI

SALEP KLORAMFENIKOL

Kelompok
Anggota

1
:

Ligia Oktapia Suandi

(G1F013002)

Taradifa Nur Insi

(G1F013004)

Syifa Zakiyyah

(G1F013006)

Tri Budi Hastuti

(G1F013008)

Suci Baitul Sodiqomah

(G1F013010)

LABORATORIUM FARMASETIKA
JURUSAN FARMASI
FAKULTAS ILMU-ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
PURWOKERTO
2015

UJI SEL DIFUSI SALEP KLORAMFENIKOL

I.

II.

Tujuan
Mempraktikkan cara pelaksanaan uji sel difusi (system oklusif)
Menganalisis dan mengintepretasikan hasil uji sel difusi
Alat dan Bahan
Alat:
4 buah labu ukur 50 ml
7 buah labu ukur 10 ml
4 buah labu ukur 25 ml
1 buah labu ukur 500 ml
Pipet volume 1;2;3;5 ml
1 buah Kaca arloji
1 buah Spatula
Timbangan analitik
Alumunium foil
Spektrofotometer uv
1 buah Filler
2 buah Kuvet
Magnetic stirrer
Alat difusi
Bahan:
Salep kloramfenikol
KH2PO4
NaOH 0,1 N
Aquades
NaCl
KCl
NaHPO4
Eter
NaCl 0,9%
Tikus

III.

Prosedur Percobaan
1. Pembuatan Larutan NaOH 0,1 N

8 gr NaCl

Dimasukkan ke dalam beaker glass ukuran 1 liter

Ditambahkan 0,20 g KCl
Di tambahkan 1,44 g NaHPO4
Ditambahkan 2,72 g KH2PO4

PBS

Dilarutkan dalam 800 ml aquades

Diaduk sampai homogen dengan menggunkan magnetik stirer
Diukur pH dengan menggunkan pH meter
Disesuaikan pH menjadi 7,4 dengan penambahan NaOH 0,1 M
Ditambahkan aquades sampai 1 liter
Ditutup dengan alumunium foil
P

B
2. Pembuatan Larutan Standar
Kloramfenikol
S
Kloramfenikol

Diambil
Ditimbang sebanyak 50 mg
-

PBS pH- 7,4

diambil ad 50 ml

Dilarutkan dalam labu ukur 50 ml

Larutan stok
ppm5 ml
- 1000
Diambil
ppm
- Di tambah PBS pH 7,4 hingga tanda batas
Larutan standar 200 ppm 25 ml

Diambil 1ml diencerkan dengan PBS pH 7,4 ad 25 ml

menjadi larutan standar 8 ppm
Diambil 3ml diencerkan dengan PBS pH 7,4 ad 10 ml
menjadi larutan standar 60 ppm diambil 2 ml di ad 10
ml PBS pH 7,4 menjadi 12 ppm
Diambil 2ml diencerkan dengan PBS pH 7,4 ad 25 ml
menjadi larutan standar 16 ppm
Diambil 1ml diencerkan dengan PBS pH 7,4 ad 10 ml
menjadi larutan standar 20 ppm
Diambil 3ml diencerkan dengan PBS pH 7,4 ad 25 ml
menjadi flarutan standar 24 ppm

Diuji spektro pada maksimum

3. penetapan panjang gelombang () maksimum

Larutan baku standar 16 ppm

Dibaca absorbansinya pada rentang panjang gelombang 200-400 nm

sampai didapatkan

maksimal

4. Penyiapan Membran Kulit Tikus

Tikus

Dianastesi dengan eter

Diambil kulitnya pada bagian belakang

Dipotong
Bagian kulit
Dibersihkan dari lemak-lemak yang masih menempel
Digunting bulu-bulunya
Dicukur dengan pisau pencukur sampai bersih dari bulu-bulu
Dicuci dengan air suling
Dibilas dengan larutan Nacl 0,9% untuk melepaskan sisa jaringan
yang masih lengket

Membran
kulitDifusi
tikus
5. Uji Sel
Salep
Dioleskan pada membran yang sudah disediakan
Kloramfenikol
Alat difusi diisi dengan larutan PBS PH7,4 sebanyak 50ml

Dimasukan magnetic stirrer

Membran diletakan di alat difusi
Sel difusi diletakan pada bejana yang berisi air pada 37C
Cuplikan diambil pada waktu 0,15,30,45,60 menit sebanyak 5ml dan

diganti sebanyak 5ml

Diukur absorbansinya dengan spektro dengan panjang gelombang 278
nm

Absorbe
IV. Perhitungan
n larutan induk
1. Pembuatan

E 1cm1% kloramfenikol = 298

1% = 10000 ppm
Diukur hingga mencapai rentang 0,2-0,8
x 10000 = 6.7 ppm

x 10000 = 26.85 ppm

2. Pengenceran kloramfenikol untuk kurva baku

50 mg kloramfenikol di ad dengan 50 ml aquades = 1000 ppm
-

Pembuatan larutan 200 ppm

M1V1
= M2V2
1000 ppm. V1 = 200 ppm . 25 ml
V1
= 5 ml
Pembuatan larutan 8 ppm
M1V1
= M2V2
200 ppm. V1 = 8 ppm . 25 ml
V1
= 1 ml
Pembuatan larutan 60 ppm
M1V1
= M2V2
200 ppm. V1 = 60 ppm . 10 ml
V1
= 3 ml
Pembuatan larutan 12 ppm
M1V1
= M2V2
60 ppm. V1 = 12 ppm . 10 ml
V1
= 2 ml
Pembuatan larutan 16 ppm
M1V1
= M2V2
200 ppm. V1 = 16 ppm . 25 ml
V1
= 2 ml
Pembuatan larutan 20 ppm
M1V1
= M2V2
200 ppm. V1 = 20 ppm . 10 ml
V1
= 1 ml
Pembuatan larutan 24 ppm
M1V1
= M2V2
200 ppm. V1 = 24 ppm . 25 ml
V1
=3 m