Miftahul farid Dewi fitria Khairunnida Luthfia nurhidayah Riska ariyani
Pendahuluan Salah satu syarat untuk reaksi aglutinasi adalah antigen harus berupa sel atau partikel yang larut, sehingga apabila direaksikan dengan antibodi spesifik, akan terjadi gumpalan daripada partikel atau sel tersebut.
Aglutinasi ini berkaitan dengan keberadaan suatu antigen pada sel-sel darah merah dan suatu antibodi di dalam serum
U jiAglutinasi Antibody dengan salah satuantigen
binding site(Fab) bereaksi dengan
antigen Fab yang lainnya berikatan dengan Antigen lain yg sudah berikatan dengan Antibody gumpalan (lattice). Faktor yang mempengaruhi: Muatan listrik protein,molaritas medium,vaksositas media,dan fenomena prozone, jumlah antigen dan antibodi harus seimbang.
ReaksiAglutinasi Jika
suatu partikel dicampurkan
dengan antibodi di dalam elektrolit pada suhu dan pH yang cocok, partikel ini akan di gumpalkan atau di aglutinasikan. Cara ini lebih peka dari pada cara presipitasi dalam mendeteksi suatu antibodi.
U jiaglutinasilangsung Mikroaglutinasi: Dikerjakan pada sebuah gelas alas bersih dengan mencampurkan satu tetes serum anti dengan satu tetes suspensi antigen. Reaksi ini akan segera terjadi, dipergunakan untuk mendeteksi antigen kuman, penentuan golongan dan tipe darah dll.
U jiaglutinasilangsung Makroaglutinasi: Dikerjakan sebagai uji kuantitatif untuk menghitung titer antibody dan untuk memastikan hasil mikroaglutinasi.
M acam -m acam Aglutinasi
Aglutinasi Direk
Untuk menetapkan Antibodi terhadap
Antigen yang berupa partikel atau sel Prinsip: Antigen yang terdapat dalam sampel darah bereaksi dengan antibody (monoklonal) yang terikat pada partikel, reaksi ditunjukkan dengan adanya aglutinasi pada partikel latex.
M acam -m acam Aglutinasi
Aglutinasi Indirek
Untuk menetapkan antibodi terhadap Ag yang larut
dengan melekatkan dengan antigen ini terlebih dahulu pada suatu partikel yang di sebut carrier. Prinsip: Mula-mula serum dicampur dengan antibody kemudian ditambahkan Antigen yang dilekatkan pada partikel latex. Bila serum mengandung antibody maka pada waktu penambahan antigen yang dilekatkan pada latex tidak akan terjadi aglutinasi. Tetapi bila serum tidak mengandung antibody maka pada waktu penambahan antigen tidak terjadi netralisasi sehingga akan terbentuk aglutinasi
M acam -m acam Aglutinasi
Hambatan aglutinasi
(Aglutination Inhibition) Aglutinasi inhibisi adalah metode yang tepat dalam mendeteksi kehadiran antibodi spesifik dalam serum yang terinfeksi atau dari individu yang sembuh/ pulih dari sakit. Selanjutnya, dengan mendilusi (diencerkan) serum, jumlah komparatif dari antibodi dapat ditentukan
M acam -m acam Aglutinasi
Aglutinasi Pasif Terbalik
Untuk menyatakan Ag yang larut
dalam serum atau partikel lain. Ab spesifik terhadap Ag bersangkutan dilekatkan pada permukaan carrier,baik eritrosit maupun partikel lain.
faktor yang m em pengaruhi
aglutinasi,tahap satu: Ikatan kimia , antara lain:
Ikatan polar Ikatan hydrogen Ikatan hydrogen Ikatan hydrophobic Ikatan van der Waals Ikatan electrostatic/ion
faktor yang m em pengaruhiaglutinasi,tahap
satu:
Konstante : Konstante keseimbangan antibodi Reaksi antigen antibodi berlanjut sampai tercapai keadaan seimbang.tercapai keadaan seimbang. Hal ini dikontrol oleh kecepatan konstante Assosiasi(ka) dan disosiasi (kd)
faktor yang m em pengaruhiaglutinasi,tahap
satu: Keseimbangan antibodi : Reaksi antigen antibodi reversible. Banyaknya komplek antigen antibodi pada keseimbangan akan bervariasi tergantung dari kondisi reaksinya dan konstante kondisi reaksinya dan konstante keseimbangannya. Makin tinggi konstante keseimbangan makin banyak jumlah antibodi yang mengadakan ikatan dengan antigennya pada keseimbangan. Makin tinggi konstante keseimbangan makin baik ikatan antigen antibodi
faktor yang m em pengaruhiaglutinasi,tahap
satu:
Temperatur: Sebagian besar antibodi golongan
darah reaktivitasnya pada batasbatas
tertentu. Ada yg reaktivitasnya pada batas-batas tertentu. Ada yg bereaksi baik pada 4C/kurang dari 37C dan ada yg bereaksi baik pada 37C
faktor yang m em pengaruhiaglutinasi,tahap
satu:
pH: pH optimal untuk reaktivitas antibodi sistem golongan darah belum diketahui. diperkirakan mendekati pH fisiologis. Untuk pemeriksaan rutin sebaiknya pH ialah 7.0
faktor yang m em pengaruhiaglutinasi,tahap
satu:
Waktu inkubasi: Waktu inkubasi yg dibutuhkan untuk
mencapai keseimbangan berbeda
untuk antibodi yang berbeda.
Faktor yang mempengaruhitemperatur,kelas immunoglobulin.
faktor yang m em pengaruhiaglutinasi,tahap
satu:
Kekuatan ion: Kekuatan ion ialah intensitas muatan listrik Ion-ion suatu larutan Sel darah merah mempunyai muatan Sel darah merah mempunyai muatan negatif pada permukaannya,hal ini menyebabkan sel darah merah tidak menggumpal secara spontan. Muatan permukaan disebabkan oleh carboxyl group dari asam sialic.
faktor yang m em pengaruhiaglutinasi,tahap
satu: Proporsi antigen antibodi: Kecepatan antibodi mengadakan ikatan dengan antigen dan banyaknyaantibodi yg mengadakan ikatan tergantung pada konsentrasi sel dengan antibodi. Konsentrasi yg baik untuk menimbulkan aglutinasi 2-5%. Prozone phenomen ialah suatu keadaan dimana terdapat ekses antibodi dan antigen terlalu sedikit sehingga aglutinasi tidak terlihat.
faktor yang m em pengaruhiaglutinasi,tahap
kedua:
Yang mempengaruhi aglutinasi:
Molekul antibodi,Konsentrasi antigen pada sel,jarak antara sel-sel,jarak antara sel Untuk meningkatkan aglutinasi: Sentrifugasi,Indirek antiglobulin test,metode lain mengurangi lapisan hydration sekeliling sel,menggunakan makromolekul muatan positip yang menggumpalkan sel.
