Kelompok9: 9: Kelompok 1. Agustina Eka 1. Agustina Eka P. P. 2.Ayu AyuDiah DiahO. O. 2.
Perhitungan Jumlah Mikroba Terdapat 2 macam pengukuran dasar: 1. Penentuan Jumlah sel
mikroorganisme bersel tunggal
2. Penentuan massa sel
mikroorganisme bersel tunggal dan
mikroorganisme berfilamen
Metode hitungan mikroorganisme
secara mikroskopis: Metode Petroff-Hauser Metode Hitungan Cawan Metode MPN (Most Probable Number) Metode Hitungan Turbidimetri Metode Hitungan Berat Massa Sel
Metode petroff-Hauser: Bantuan Skala
(menggunakan hemasitometer)
1. Ukuran skala 1 mm 2.Terdapat 25 kotak besar (0.04 mm) 3. Kedalaman 0.1 mm 4. Terdapat 9 area
Hemasitometer
Contoh perhitungan: (metode petroff-hauser)
Area: I = 30 sel II = 30 sel III = 20 sel IV = 40 sel V = 30 sel Jumlah total sel 150 150 x 5= 750 sel / mm Luas 1 area adalah 1 mm dan kedalaman hemasitometer 0.1 mm volume 1 area = 1 mm x 0.1 mm =0.1 mm 1 ml = 1 cm 1 cm = 1000 mm Sehingga: =750 sel/0.1 mm =7500 sel/mm =7500 sel/mm = 7.500.000 sel/cm = 7.500.000 sel/ml
Kelemahan metode Petrof-Hauser:
Sel yang mati dan hidup tidak bisa dibedakan Perlu ketelitian yang tinggi Untuk mempertinggi ketelitian , jumlah sel di dalam suspensi harus cukup tinggi . (karena setiap bidang
pandang harus terdapat jumlah sel terhitung)
Tidak dapat digunakan pada bahan yg mengandung debris
atau ekstrak makanan
Metode hitungan cawan
(menggunakan colony counter): Metode ini merupakan cara yang paling sensitif untuk menentukan
jumlah jasad renik:
1. Hanya sel hidup yg dapat dihitung 2. Beberapa jasad renik dapat dihitung 3. Dapat digunakan untuk isolasi mikroba
Kelemahan metode ini :
1. Hasil tidak menunjukkan perhitungan sel sebenarnya 2. Jika medium dan kondisi inkubasi berbeda maka jumlah berbeda 3.Waktu persiapan dan inkubasi lama
Catatan: Jumlah koloni yang dapat dihitung 30-300 koloni
Colony Counter
Contoh perhitungan hitungan (SPC):
Biakan
10^ -2
10^ -3
10^ -4
SPC
175
15
=(17500+20800)/2 Data lain < 30
208
20
=1,9 x 10^4
135
45
163
45
=(13500+16500)/2 45000/13500 > 2
40000/28000 < 2, 1,5 x 10^4 maka dilaporkan pengenceran terendah
275
35
285
40
290
25
305
28
=(27500+35000)/2 =a =(28500+40000)/2 =b (a+b)/2=3,3 x 10^4
Keterangan
35000/27500 < 2 40000/28500 < 2, maka dilaporkan hasil rata-rata
=(29000+30500)/2 25 < 30, dirata rata
=3 x 10^4 meskipun 305 > 300
Metode perhitungan MPN ( Most
Probable Number) Metode hitungan cawan menggunakan medium padat tetapi metode
MPN menggunakan medium cair dalam tabung reaksi
Berdasarkan jumlah tabung reaksi positif (mengamati kekeruhan/
terbentuknya gas dalam tabung durham.
Pengenceran sampel harus tinggi hingga beberapa tabung terdapat
hanya 1 jasad renik,beberapa tabung lain >1 sel, dan tabung lain tidak ada sel Metode ini dapat digunakan untuk mengitung mikroba tertentu dalam
campuran mikroba lain
Rumus : Nilai MPN dari tabel x 1/pengenceran tabung tengah
Metode perhitungan Turbidimeteri:
Menggunakan alat nephelometri (alat
pengukur pemantulan cahaya [turbidimeteri]
yang dapat mengukur cahaya yang terserap pada suspensi bakteri) Keuntungan Lebih praktis Jumlah bakteri dinyatakan dalam OD (Optical
Density Load) Rumus : OD=Log 100-Log G G=pembacaan pada alat
Metode perhitungan berat sel
kering Mengukur berat kering sel/filamen miselium Cara kerja:
